Вирусный гепатит в пцр положительная

Поверхностный антиген гепатита В в сыворотке крови в норме отсутствует.
Обнаружение поверхностного антигена (HBsAg) гепатита В в сыворотке подтверждает острое или хроническое инфицирование вирусом гепатита В.

При остром заболевании HBsAg выявляется в сыворотке крови в последние 1-2 недели инкубационного периода и первые 2-3 недели клинического периода. Циркуляция HBsAg в крови может ограничиваться несколькими днями, поэтому следует стремиться к раннему первичному обследованию больных. Метод ИФА позволяет выявить HBsAg более чем у 90% больных. Почти у 5% больных самые чувствительные методы исследования не обнаруживают HBsAg, в таких случаях этиология вирусного гепатита В подтверждается наличием анти-HBсAg JgM или ПЦР.

Концентрация HBsAg в сыворотке крови при всех формах тяжести гепатита В в разгар заболевания имеет значительный диапазон колебаний, вместе с тем имеется определенная закономерность: в остром периоде существует обратная связь между концентрацией HBsAg в сыворотке и тяжестью болезни.

Высокая концентрация HBsAg чаще наблюдается при легких и среднетяжелых формах болезни. При тяжелых и злокачественных формах концентрация HBsAg в крови чаще низкая, причем у 20% больных с тяжелой формой и у 30% со злокачественной антиген в крови может вообще не обнаруживаться. Появление на этом фоне у больных антител к HBsAg расценивается как неблагоприятный диагностический признак; он определяется при злокачественных формах гепатита В.

При остром течении гепатита В концентрация HBsAg в крови постепенно снижается вплоть до полного исчезновения этого антигена. HBsAg исчезает у большинства больных в течение 3 месяцев от начала острой инфекции.

Снижение концентрации HBsAg более чем на 50% к концу 3-й недели острого периода, как правило, свидетельствует о близком завершении инфекционного процесса. Обычно у больных с высокой концентрацией HBsAg в разгар болезни он обнаруживается в крови в течение нескольких месяцев.
У больных с низкой концентрацией HBsAg исчезает значительно раньше (иногда через несколько дней после начала заболевания). В целом срок обнаружения HBsAg колеблется от нескольких дней до 4-5 мес. Максимальный срок обнаружения HBsAg при гладком течении острого гепатита В не превышает 6 месяцев от начала заболевания.

HBsAg может быть обнаружен у практически здоровых людей, как правило, при профилактических или случайных исследованиях. В таких случаях исследуют другие маркеры вирусного гепатита В – анти HBсAg JgM, анти- HBсAg JgG, анти HBеAg и изучают функцию печени.

При отрицательных результатах необходимы повторные исследования на HBsAg.
Если повторные исследования крови в течение более 3 месяцев выявляют HBsAg, такого пациента относят к хроническим больным вирусным гепатитом В.
Наличие HBsAg – довольно распространенное явление. В мире насчитывается более 300 млн. носителей, а у нас в стране – около 10 млн. носителей.
Прекращение циркуляции HBsAg с последующей сероконверсией (образование анти-HBs) всегда свидетельствует о выздоровлении — санации организма.

Исследование крови на наличие HBsAg применяется в следующих целях:

для диагностики острого гепатита В:

• инкубационный период;
• острый период заболевания;
• ранняя стадия реконвалесценции;

для диагностики хронического вирусного гепатита В;

при заболеваниях:

• персистирующем хроническом гепатите;
• циррозе печени;

для скрининга и выявления больных в группах риска:

• больные с частыми гемотрансфузиями;
• больные с хронической почечной недостаточностью;
• больные с множественным гемодиализом;
• больные с иммунодефицитными состояниями, в том числе СПИДом.

Результаты исследования выражаются качественно – положительный или отрицательный. Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие HBsAg в сыворотке крови. Положительный результат – выявление HBsAg свидетельствует об инкубационном или остром периоде острого вирусного гепатита В, а также при хроническом вирусном гепатите В.

В норме анти-HBcAg JgG в сыворотке отсутствует.
У больных анти-HBcAg JgG появляются в острый период вирусного гепатита В и сохраняются на протяжении всей жизни. Анти-HBcAg JgG – ведущий маркер перенесенного ВГВ.

Исследование крови на наличие анти-HBcAg JgG применяются для диагностики:

хронического вирусного гепатита В при наличии HBs антигена в сыворотке крови;

перенесенного вирусного гепатита В.

Результат исследования выражается качественно – положительный или отрицательный. Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие анти-HBcAg JgG в сыворотке крови. Положительный результат – выявление анти-HBcAg JgG свидетельствует об острой инфекции, реконвалесценции или ранее перенесенном вирусном гепатите В.

В норме HBeAg в сыворотке крови отсутствует.
HBeAg можно обнаружить в сыворотке крови большинства больных острым вирусным гепатитом В. Он обычно исчезает в крови раньше HBs-антигена. Высокий уровень HBeAg в первые недели заболевания или обнаружение его на протяжении более 8 недель дает основание заподозрить хроническую инфекцию.

Этот антиген часто обнаруживается при хроническом активном гепатите вирусной этиологии. Особый интерес к определению HBeAg связан с тем, что его обнаружение характеризует активную репликативную фазу инфекционного процесса . Установлено, что высокие концентрации HBeAg соответствуют высокой ДНК-полимеразной активности и характеризуют активную репликацию вируса.

Наличие HBeAg в крови свидетельствует о высокой ее инфекциозности, т.е. присутствии в организме обследуемого активной инфекции гепатита В, и обнаруживается только в случае присутствия в крови HBs-антигена. У больных хроническим активным гепатитом противовирусные препараты применяются только при обнаружении в крови HBeAg. HBeAg – антиген – маркер острой фазы и репликации вируса гепатита В.

Исследование крови на наличие HBe-антигена применяется для диагностики:

инкубационного периода вирусного гепатита В;

продромального периода вирусного гепатита В;

острого периода вирусного гепатита В;

хронического персистирующего вирусного гепатита В.

Результат исследования выражается качественно – положительный или отрицательный. Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие HBeAg в сыворотке крови. Положительный результат – выявление HBeAg свидетельствует об инкубационном или остром периоде острого вирусного гепатита В или продолжающейся репликации вируса и инфекциозности больного.

Анти-HBeAg в сыворотке в норме отсутствует. Появление анти-НВeAg антител указывает обычно на интенсивное выведение из организма вируса гепатита В и незначительное инфицирование больного.

Эти антитела появляются в острый период и сохраняются до 5 лет после перенесенной инфекции. При хроническом персистирующем гепатите анти-НВeAg обнаруживаются в крови больного вместе с НВsAg. Сероконверсия, т.е. переход HBeAg в анти-НВeAg, при хроническом активном гепатите, чаще прогностически благоприятна, но такая же сероконверсия при выраженной цирротической трансформации печени прогноза не улучшает.

Исследование крови на наличие анти-НВeAg применяются в следующих случаях при диагностике вирусного гепатита В:

установление начальной стадии заболевания;

острый период инфекции;

ранняя стадия реконвалесценции;

реконвалесценция;

поздняя стадия реконвалесценции.

диагностика недавно перенесенного вирусного гепатита В;

диагностика хронического персистирующего вирусного гепатита В.

Результат исследования выражается качественно – положительный или отрицательный. Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие антител к HBeAg в сыворотке крови. Положительный результат – выявление антител к HBeAg, которые могут свидетельствовать о начальной стадии острого вирусного гепатита В, остром периоде инфекции, ранней стадии реконвалесценции, реконвалесценции, перенесенном недавно вирусном гепатите В или персистирующем вирусном гепатите В.

Критериями наличия хронического гепатита В являются:

бнаружение или периодическое выявления ДНК ВГВ в крови;

постоянное или периодическое повышение активности АЛТ/АСТ в крови;\

морфологические признаки хронического гепатита при гистологическом исследовании биоптата печени.

Вирус гепатита В в крови в норме отсутствует.
Качественное определение вируса гепатита В методом ПЦР в крови позволяет подтвердить наличие вируса в организме больного и тем самым устанавливает этиологию заболевания.

Данное исследование дает полезную информацию для диагностики острого вирусного гепатита В в инкубационном и раннем периоде развития заболевания, когда основные серологические маркеры в крови у пациента могут отсутствовать. Вирусную ДНК в сыворотке крови обнаруживают у 50% больных при отсутствии HBeAg. Аналитическая чувствительность метода ПЦР составляет не менее 80 вирусных частиц в 5 мкл, прошедшей выявление ДНК пробы, специфичность – 98%.

Этот метод имеет важное значение для диагностики и мониторинга течения хронического ВГВ. Примерно 5-10% случаев цирроза и других хронических заболеваний печени обусловлены хроническим носительством вируса гепатита В. Маркерами активности таких заболеваний является наличие HBeAg и ДНК вируса гепатита В в крови.

Метод ПЦР позволяет определять в крови ДНК вируса гепатита В как качественно, так и количественно. Определяемым фрагментом в обоих случаях служит уникальная последовательность ДНК гена структурного белка вируса гепатита В.

Обнаружение ДНК вируса гепатита В в биоматериале с помощью ПЦР необходимо для:

разрешения сомнительных результатов серологических исследований;

выявление острой стадии заболевания по сравнению с перенесенной инфекцией или контактом;

контроля эффективности противовирусного лечения.

Исчезновение ДНК вируса гепатита В из крови – признак эффективности терапии

Этот метод дает важную информацию об интенсивности развития заболевания, об эффективности лечения и о развитии резистентности к активным препаратам.
Для диагностики вирусного гепатита методом ПЦР в сыворотке крови применяются тест-системы, чувствительность которых составляет 50-100 копий в пробе, что позволяет детектировать вирус при его концентрации 5 Х 10^3 -10^4 копий/мл. ПЦР при вирусном гепатите В безусловно необходима для суждения о вирусной репликации.

Вирусную ДНК в сыворотке крови обнаруживают у 50% больных при отсутствии HBeAg. Материалом для выявления ДНК вируса гепатита В могут служить сыворотка крови, лимфоциты, гепатобиоптаты.

• Оценку уровня виремии осуществляют следующим образом:
• менее 2.10^5 копий/мл (менее 2.10^5 МЕ/мл) – низкая виремия ;
• от 2.10^5 копий/мл (2.10^5 МЕ/мл) до 2.10^6 копий/мл (8.10^5 МЕ/мл) – средняя виремия;
• более 2.10^6 копий/мл – высокая виремия.

Существует зависимость между исходом острого вирусного гепатита В и концентрацией ДНК ВГВ в крови больного. При низком уровне виремии процесс хронизации инфекции близок к нулю, при средней – хронизация процесса наблюдается у 25-30% больных, а при высоком уровне виремии острый вирусный гепатит В чаще всего переходит в хронический.

Показаниями для лечения хронического ВГВ интерфероном-альфа следует считать наличие маркеров активной репликации вируса (выявление HBsAg, HBeAg и ДНК ВГВ в сыворотке крови в течение предшествующих 6 месяцев.).

Критериями оценки эффективности лечения служат исчезновение HBeAg и ДНК ВГВ в крови, что обычно сопровождается нормализацией уровня трансаминаз и долговременной ремиссией заболевания, ДНК ВГВ исчезает из крови к 5-му месяцу лечения у 60%, к 9-му месяцу – у 80% больных. Снижение уровня виремии на 85% и более к третьему дню от начала лечения по сравнению с исходным служит быстрым и достаточно точным критерием для прогнозирования эффективности терапии.

источник

ДНК-содержащий вирус семейства Hepadnaviridae является прямым возбудителем гепатита В. Анализ ПЦР на гепатит B, позволяет определить в крови пациента наличие инфицированного ДНК-вируса. Результат положительного типа на ДНК HBV демонстрирует наличие в крови пациента инфекции. Стоит отметить, что диагностика посредством использования ПЦР-анализа позволяет не только определить наличие инфекции, но и его количественную нагрузку и активность. Этот метод является надежным, точным и воспроизводимым. Количественная оценка ДНК HBV с помощью qPCR может использоваться для контроля эффективности терапии HBV и быть полезной для понимания естественной истории HBV в эндемической области.

Процесс заражения гепатитом В происходит бытовым или половым путем – через непосредственный контакт с зараженной кровью. После инфицирования, вирус попадает в клетки печени, в которых и продолжает свое активное размножение. Через кровоток патогенные клетки распространяются по всему организму. Стоит отметить, что клетки гепатита В обладают высокой устойчивостью к воздействию кислоты и высокой температуры. Он способен в течение полугода сохранять свои поражающие свойства.

На сегодняшний день различают две разновидности диагностики, которые назначают при подозрении на наличие вируса гепатита В: качественный ПЦР (позволяет определить со стопроцентной точностью наличие вируса в крови) и количественный ПЦР (позволяет определить степень активности вируса).

Качественный ПЦР назначается в том случае, если есть подозрение на заражение ВГВ, или в случае, если иные методы диагностики не дали понятного результата. Данную разновидность ПЦР-анализа расшифровывать предельно просто: отрицательный (вирус в крови не обнаружен), положительный (вирус в крови обнаружен). Основная задача качественного анализа – определение наличия инфицированных клеток на ранних стадиях заболевания. Если вирус был диагностирован через две недели после предположительного инфицирования, эффективность лечения будет на порядок выше. В случае, если вирус в крови находится порядка двух месяцев, заболевание приобретает хроническую форму, следовательно, не подлежит полному излечению.

Если качественная диагностика подтвердила присутствие в крови ВГВ, доктор назначает количественный анализ.

Количественный анализ позволяет определить активность развития вируса в организме пациента. Данная разновидность ПЦР-анализа назначается:

• для определения стадии заболевания;
• для наблюдения за эффективностью применяемой терапии;
• для определения уровня устойчивости вируса к тому или иному препарату;
• для подбора лекарственных препаратов.

Количественные показатели вируса в крови измеряются в МЕ на миллилитр или ДНК на миллилитр.

В случае, если доктор назначает сразу количественную диагностику, не проверив качественную, то за норму считаются показатели 75 МЕ на миллилитр. Если обнаружено меньшее количество международных единиц, результат – ВГВ не обнаружен, когда показатели превышают норму, диагностируется наличие вирусного гепатита В.

Нормой ПРЦ при гепатите В считаются следующие показатели (в копий/миллилитр): меньше 10 3 – вирус неактивный; от 10 4 до 10 5 – вирус обычно неактивен; 10 6 – вирус активный; 10 7 – вирус в высокой стадии активности.

Отталкиваясь от количественных показателей можно определить со стопроцентной точностью форму заболевания (носительство, острая или хроническая), реакцию вируса на лечение, необходимость проведения дополнительных диагностик.

Хроническая форма гепатита В устанавливается в том случае, если активность вируса составляет 10 5 копий на миллилитр. Носительство диагностируется, если количественные показатели ниже 10 5 копий на миллилитр.

В период лечения необходимо регулярно (раз в три месяца) проходить повторную количественную диагностику, для того, чтобы вовремя рассмотреть период, когда вирус выработает иммунитет к используемым препаратам и сменить методику. В случае, если все исследования проведены правильно и подобрано эффективное лечение, на повторном анализе (через трое суток лечения) будет наблюдаться снижение активности патогенных клеток как минимум на восемьдесят пять процентов.

Биопсия печени проводится только в том случае, когда за шесть месяцев лечения показатели АЛТ превышают норму в два раза, ва ПЦР-диагностика демонстрирует показатели ниже 10 5 копий на миллилитр крови.

Для анализа необходима венозная кровь. Для того, чтобы получить максимально точные результаты, необходимо подготовиться к процедуре: отказаться от приема еды как минимум за восемь часов до забора крови; за двое суток отказаться от медикаментозного лечения (в обязательном порядке предупредить доктора о приеме препаратов); перед сдачей крови нужно провести двадцать минут в режиме отдыха; за двенадцать часов до процедуры отказаться от спортивных упражнений, спиртных напитков, курения и употребления жирной пищи.

Важно: если диагностика необходима ребенку до пятимесячного возраста, то ему нужно за шестьдесят минут до процедуры забора крови давать по стакану кипяченой воды каждые десять минут.

Анализ ПЦР на гепатит В сегодня является максимально точной методикой диагностирования вируса. Метод позволяет определить мутировавшие и скрытые формы заболевания, диагностировать заболевание в первые дни инфицирования, следовательно, подобрать максимально эффективное лечение. Лаборант сравнивает полученные результаты анализа с нормой, а затем вносит их в заключение. Данные обрабатываются в течение двух недель. Для того, чтобы получить направление на прохождение ПЦР-анализа, необходимо обратиться к гепатологу, инфекционисту или вирусологу. Важно помнить, чем быстрее вы попадете к врачу, тем быстрее будут получены результаты, следовательно, тем эффективнее будет лечение.

источник

Вирусный гепатит В успешно лечится, если его вовремя обнаружить и правильно определить количество антител и антигенов в крови больного. С помощью иммуноферментного анализа на гепатит можно обнаружить присутствие маркеров вируса, но не могут установить точно стадию процесса.

Для количественной оценки применяют ПЦР диагностику. С помощью теста возможно посчитать количество маркеров, спрогнозировать течение болезни и вероятность излечения при помощи противовирусных препаратов.

Главное преимущество исследования — возможность обнаружить даже минимальные концентрации вируса, идентифицировать возбудителя на видовой стадии.

Вирус гепатита В отличается большой контагиозностью и устойчивостью к внешним воздействиям. Он сохраняет активность в следах крови больного до нескольких недель. Поэтому каждый человек подвержен риску заражения даже при условии соблюдения профилактики.

Для диагностики заболевания назначают следующие исследования:

Американский химик К.Муллис получил Нобелевскую премию, и до сих пор применяется его метод диагностики

Родоначальником метода ПЦР (полимеразной цепной реакции) считается ученый из Норвегии Х. Клеппе. Он первый стал проводить амплификацию (восстановление) ДНК при помощи короткой цепочки ДНК, то есть синтетического праймера (своеобразной копии).

Однако, ученому не удалось реализовать свою идею. Похожие исследования сделал американский химик К.Муллис, который в 1993 был удостоен Нобелевской премии за свое изобретение. С тех пор ПЦР используют для установления отцовства, диагностики генетических болезней, обнаружения вирусов.

Суть реакции в том, что при помощи ферментов копируется определенный участок ДНК. Скопировать можно только участок, который соответствует заданным параметрам и если он есть в представленном образце. Для запуска реакции применяют следующие компоненты:

1. Матричная ДНК с участком, подлежащим копированию.
2. Праймеры, схожие по строению участку ДНК.
3. Полимераза, то есть фермент, запускающий реакцию. Она должна быть термостабильной, то есть выдерживать перепады температур.
4. Раствор с определенными параметрами, обеспечивающий прохождение реакции.

Реакция проводится в несколько этапов:

Для обнаружения гепатита в применяют два типа реакции: количественную и качественную.

Количественный метод определяет количество генома ВГВ

Количественный ПЦР предполагает одновременное создание копий фрагментов ДНК и определение количества молекул. Измерение проводится после каждого этапа, то есть в режиме реального времени. Это достигается при помощи флюоресцентных зондов, которые включаются в цепочку молекул и светятся в определенный период исследования.

Данный способ применяют для обнаружения фрагментов ДНК, которые являются маркерами вируса гепатита. С помощью количественного метода удается точно выделить генотип вируса. Другими словами, подсчитывают количество копий генома ВГВ на количество клеток больного.

Количественный анализ дает ответы на следующие вопросы:

1. С какой интенсивностью прогрессирует болезнь.
2. Насколько эффективно проводимое лечение.
3. Развилась ли резистентность к назначенным препаратам.

Также количественное измерение необходимо для диагностики хронической стадии инфекции. Если количество ДНК ниже 100 шт/мл при нормальном уровне трансаминаза, то человек является носителем вируса.

При острой фазе количество антител значительно выше.При антивирусной терапии повышение количества антител свидетельствует о развившейся устойчивости к лекарствам, это является сигналом для корректировки лечения.

Качественный ПЦР дает меньше информации, однако может исключить заражение

Качественный ПЦР позволяет только установить присутствие возбудителя в крови. Если они отсутствуют, то пациент не заражен, при попадании возбудителя в кровь результат будет положительным.

Однако, с помощью качественной реакции невозможно уточнить геном вируса, этап заболевания. Поэтому для диагностики ВГВ проводят как количественное, так и качественное измерение.

Для проведения анализа методом полимеразной реакции необходима венозная кровь. Это необходимо сделать утром на голодный желудок.

Пациенту следует правильно подготовиться к исследованию:

1. За 10 часов отказаться от пищи, можно пить только чистую воду.
2. Накануне прекратить прием алкоголя, за 4 часа не курить.
3. Перед обследованием стоит избегать физических и эмоциональных стрессов.
4. За 2 суток перестать употреблять лекарства, если это невозможно, то необходимо предупредить лаборанта. Некоторые препараты оказывают влияние на конечный результат.

При количественной реакции оценивают полученные показатели в зависимости от числа копий ДНК

Интерпретировать данные качественного измерения несложно. Он дает либо положительный, либо отрицательный ответ.

При количественной реакции оценить полученные показатели можно в зависимости от числа копий ДНК. Единицей измерения является копий/мл.

Расшифровываются данные следующим образом:

1. Если количество ДНК ВГВ менее 90, то инфекция отсутствует. У пациента развился поствакцинальный иммунитет, либо он излечился от болезни.
2. При числе копий 2х100 говорят о носительстве вируса.
3. Количество 2х106 свидетельствует о хронической стадии болезни.
4. При ДНК более 2х109 пациент болен острой стадией гепатита.

Преимущества метода диагностики с помощью полимеразных реакцийи заключаются в следующем:

1. Прямое обнаружение возбудителей. В отличие от него, метод ИФА дает информацию о присутствии антител к вирусу.
2. Специфичность. То есть копируется именно участок ДНК, который имеется в образце биоматериала.
3. Повышенная чувствительность. Метод может обнаружить даже единичные фрагменты клеток.
4. Диагностика болезней в острой и в скрытой стадии. То есть, можно диагностировать болезнь на этапе доклинических проявлений.

У метода есть недостатки, которые приводят к ложным результатам. Самый существенный недостаток — вероятность загрязнения материала. Основным источником загрязнения являются плохо обработанные пробирки, руки лаборанта, реактивы.

В кровь может попасть часть ДНК от предыдущей реакции. Поэтому к лабораториям предъявляются повышенные санитарные требования: раздельные помещения, пластиковые пробирки, обработка лабораторий ультрафиолетом и т. д.

Ложноотрицательные результаты могут быть следствием сниженной чувствительности реакции. Это происходит в следующих ситуациях:

• пациент принимает лекарственные препараты, например, антикоагулянты;
• человек перед анализом перенес физическое напряжение (занятия спортом, тяжелая работа);
• заражение произошло недавно.

Если у пациента есть высокая вероятность инфицирования, а результат исследования отрицательный, ему необходимо повторное обследование.

Метод полимеразной цепной реакции является основным и самым информативным для диагностики ВГВ. Он позволяет не просто установить носительство инфекции, но и уточнить этап заболевания, оценить результаты лечения.

Для более точного диагноза применяют качественное и количественное измерение. К недостаткам способа можно отнести вероятность загрязнения, снижение чувствительности и довольно высокую цену.

Для того, чтобы результаты были наиболее достоверными, следует правильно подготовиться к исследованию и проводить его в клинике с соответствующей лицензией и хорошей репутацией.

Смотрите видео о ПЦР:

источник

Полимеразная цепная реакция — это вид анализа крови, который позволяет безошибочно выявлять вирус гепатита В. Особенностью метода является то, что он способен показать ВГВ на ранних стадиях — уже через месяц после инфицирования, в то время как специфический антиген у больного обнаруживается только через 2 месяца. ПЦР может выявить не только обычный ДНК-вирус, но и мутантные штаммы, которые ни один другой анализ увидеть не позволяет.

При расшифровке ПЦР на гепатит В результаты сравниваются со стандартными значениями. На основе этого делаются выводы о наличии заболевания (положительный результат), концентрации вируса (активности) или отсутствии недуга (отрицательный результат). Обработка данных идет 2 недели.

Существует 2 вида диагностики, которые назначают при гепатите В. Качественный ПЦР дает возможность с точностью в 100% сказать, есть ли ВГВ в крови или нет. Количественный ПЦР показывает активность вируса, то есть сколько ДНК фрагментов ВГВ содержится в 1 мл крови.

Проведение анализа крови на гепатит В методом ПЦР может выявить лишь наличие ДНК-фрагментов. Назначается в том случае, когда пациент подозревает о заражении ВГВ (HBV) или когда другие способы диагностики, например, серологические пробы не дают четкого ответа. Расшифровка результатов при проведении качественного анализа очень проста:

• отрицательный результат — вируса нет;
• положительный результат — вирус обнаружен.

Целью качественного ПЦР является подтверждение или опровержение наличия вируса гепатита В, а также проведение ранней диагностики. Если ВГВ выявлен в течение 1-2 недели после заражения, то лечение станет максимально эффективным. При активном развитии HBV в течение 2-х месяцев и выше, заболевание переходит в хроническую форму и полному излечению не подлежит.

В случае когда качественный ПЦР на гепатит показывает наличие вируса, следующим этапом становится проведение количественной диагностики.

Для назначение эффективного лечения или оценки результатов проводимой терапии просто знать, что у больного имеется ВГВ, недостаточно. Необходимо определить количественно значение ДНК вируса гепатита В в 1 мл крови, то есть вирусную нагрузку на организм. Этот вид ПЦР на гепатит В проводится в следующих случаях:

1. Перед назначением лечения.
2. Для оценки эффективности терапии.
3. Для определения развития устойчивости вируса к принимаемым препаратам.
4. Для определения стадии, на которой находится заболевание.

Единицей измерения вируса являются международные единицы (МЕ/мл) или количество копий ДНК/мл, то есть количество ДНК-фрагментов на 1 мл крови. Соотношение между двумя единицами зависит от выбранной тест системы и колеблется от 2 до 7 копий/мл в 1 МЕ/мл. Если система неизвестна, то для пересчета используется усредненное значение:

Если сразу делается количественный анализ, то граничная норма для диагностирования заболевания составляет 75 МЕ/мл. При результате выше этого показателя, ставится диагноз ВГВ, ниже — ВГВ не выявлен.

При гепатите В нормами ПЦР выступают следующие значения вирусной нагрузки (виремии), копий/мл:

• 10^5 копий/мл. Когда же при большой вирусной активности наблюдается повышение уровня АЛТ чаще 2-х раза за полгода, то сразу же назначается антивирусная терапия.

Чтобы узнать, как будет вести себя ДНК гепатит в плане хронизации, то есть перехода к хронической форме из острой, также используются результаты ПЦР-диагностики:

• ДНК ВГВ 2 х 10^6 копий/мл означает, что приобретение хронической формы недуга неизбежно.

Для определения наличия ВГВ методом ПЦР делается анализ крови из вены. Процедура всегда проводится строго натощак и лучше всего попасть в лабораторию утром, когда естественное время отдыха от пищи составит 8 часов. Чтобы результаты обследования получились верными, необходимо узнать заранее, как подготовиться к походу в клинику правильно. Дополнительные этапы таковы:

1. Отказ от жирной пищи, курения, спиртного и занятий спортом за 12 часов до процедуры.
2. Отдых в течение 20 минут непосредственно перед сдачей крови.
3. Перед началом процедуры необходимо предупредить медсестру о принимаемых медикаментах.

Внимание! Если диагностика проводится ребенку младше 5-ти лет, то за полчаса до процедуры его нужно поить кипяченой водой по 1 стакану через каждые 10 минут.

На сегодняшний день ПЦР-диагностика для выявления гепатита В является самым точным методом. Способ позволяет увидеть скрытые и мутировавшие формы заболевания, выявить недуг на первых неделях после инфицирования и, соответственно, провести эффективное лечение. В зависимости от ситуации проводится качественный или количественный ПЦР, которые направлены на выявление ВГВ и установлении его активности. Чтобы пройти обследование, нужно обратиться к вирусологу, инфекционисту или гепатологу.

источник

Исследования ДНК и ПЦР вируса гепатита В являются самыми чувствительными анализами, которые позволяют обнаружить в тканях печени молекулярные следы ДНК, идентифицирующие наличие вируса. Суть метода заключается в многократном копировании фрагмента ДНК, принадлежащего возбудителю болезни.

ПЦР гепатита типа В — это полимеразная цепная реакция внешнего химического реагента с исследуемым биологическим материалом, направленная на выявление молекул вирусного ДНК в крови и их количественных показателей на единицу объёма. Анализ назначается в следующих случаях:

• при возникновении признаков гепатита В у пациента;
• во время диагностических мероприятий при микст-гепатитах;
• для уточнения эффективности терапии.

Для ПЦР анализа делается забор венозной крови. Перед исследованием необходимо воздержаться от приёма пищи примерно 8 часов.

Нормальным результатом при выявлении ДНК у вируса считается показатель «не обнаружен». Он означает, что вирус в крови отсутствует или его содержание незначительное. Окончательный диагноз может выставить только специалист на основании комплексного биохимического и иммунологического анализа кровяной плазмы на гепатит типа B. Врач назначает курс терапии. Самолечение влечёт за собой слишком большой риск.

Непривычная утомляемость

• нарастающая усталость при небольших нагрузках;
• непривычная утомляемость;
• тяжесть в области правого подреберья;
• пониженный аппетит, тошнота;
• желтушность кожных покровов, склер глаз;
• светлый кал;
• тёмная моча;
• болезненные ощущения в суставах.

Инкубационный период, после которого начинают проявляться эти признаки, составляет от месяца до полугода. Это срок накопления клеток вируса в печёночном кровотоке. Когда их концентрация доходит до критической массы, вирус прорывает мембраны гепатоцитов и продолжает размножаться уже внутри клеток. В результате клетки печени гибнут, развивается цирроз, который, при отсутствии должных терапевтических мер, приводит пациента к летальному исходу. Своевременный анализ крови на ПЦР и ДНК гепатита B позволяет избежать негативных.

Показаниями к ПЦР являются:

• положительный тест на ДНК, подтверждающий диагноз — гепатит B;
• острый и хронический гепатит;
• микст-гепатиты;
• количественное определение вируса в кровяной сыворотке;
• разработка тактики эффективной терапии.

Подготовка к диагностике с помощью ПЦР определяется видом биоматериала. Так кровь и мочу сдают только в первой половине дня, натощак. Также берутся мазки и соскобы из урогенитальной области. Ограничением для женщин является только менструация. Для обоих полов ограничиваются половые контакты накануне исследований.

Результаты ПЦР можно будет считать достоверными только при правильной подготовке пациента к процедуре. Это исследование подразумевает соблюдение следующих условий:

• полный душевный комфорт, отсутствие всяких волнений. Для обеспечения этого анализ можно сдать даже дома. Нужно только вызвать к себе врача с соответствующим оборудованием;
• воздержание от пищи, алкоголя, курения, физической активности минимум за 8-12 часов перед анализом, иначе данные исследования будут искажены;
• 15-20 минут полной релаксации перед забором крови;
• прекращение приёма лекарственных препаратов (если это не представляется возможным, лаборатория должна быть предупреждена);
• детям в возрасте до пяти лет в течение получаса перед анализом необходимо давать пить кипячёную воду маленькими порциями.

В основе анализа ПЦР лежат принципы, которыми пользуется молекулярная биология. Они заключаются в использовании специальных ферментов, расщепляющих и копирующих участки ДНК и РНК возбудителя инфекции, который обнаружен в крови. После проведения этой операции, полученные образцы идентифицируются по базе данных, имеющихся в лаборатории. Одновременно выявляется вид инфекции и концентрация в крови возбудителя.

Для проведения исследования используется амплификатор — термостат, способный нагревать и охлаждать пробирки с биоматериалом. Это необходимо для активации репликационных процессов. От точности температурных параметров зависит достоверность анализа.

Позитивным результатом для пациента является лабораторное заключение «не обнаружено». Оно означает отсутствие в крови ДНК гепатита B. В цифровом выражении это примерно 120 МЕ/мл, или 200 копий на такую же единицу объёма крови. Данное значение — норма. Требованием к биологическому материалу является то, что он не должен быть загрязнён.

Расшифровка других итогов анализа позволяет поставить следующие диагнозы:

• Концентрация в крови ДНК гепатита B более 200 копий, но ниже критического уровня. Выраженная патология отсутствует.
• Виремия в умеренной форме, доходящей до 500 копий на мл. Выбор лечения зависит от показателей биопсии печени и степени ухудшения её функций.
• Повышенная концентрация вируса (более 500 копий/мл). Воспалительный процесс в активной фазе и требует интенсивной противовирусной терапии.
• Предельная вирусная нагрузка (свыше 800 копий на мл.). Терапевтические мероприятия разрабатываются исходя из состояния больного и целиком направлены на его максимально возможное улучшение.

Для пациента хорошим результатом является заключение «не обнаружено»

Определение количественных показателей содержания ДНК гепатита B при проведении ПЦР является основой для выбора лечебного курса. Через три или шесть месяцев анализы проводятся снова, чтобы проверить эффективность противовирусной терапии.

В методике ПЦР используется два подхода к определению ДНК, принадлежащего вирусу: качественный и количественный.

Качественный подход подтверждает или отрицает наличие гепатита B. ПЦР назначается по просьбе пациента, подозревающего, что он заражён HBV-инфекцией или в том случае, когда ранняя диагностика иным способом не даёт однозначных результатов.

Если вирус гепатита B удаётся выявить не позже, чем через две недели после его проникновения в организм, положительный прогноз при лечении наиболее вероятен. В дальнейшем болезнь начнёт прогрессировать. Приблизительно через два месяца она перейдёт в хроническую фазу. Полное излечение в таком случае станет невозможным.

Количественный подход в ПЦР применяется только при обнаружении вируса. Он оценивает:

• конкретную вирусную нагрузку на печень;
• интенсивность прогрессирования заболевания;
• устойчивость к препаратам противовирусной группы;
• результативность лечения.

Эти показатели имеют прямое практическое значение. Особенно количественный показатель ДНК. От концентрации вируса в кровотоке печени зависит прогноз в острой фазе гепатита B. Так низкая концентрация вирусных клеток почти полностью исключает переход острого гепатита в хронический. Такие больные не представляют опасности для окружающих. Высокая вирусная нагрузка способствует хронизации патологического процесса и возможности заражения гепатитом людей, контактирующих с больным.

Существует также связь между концентрацией в крови генов вируса и цирротическим перерождением печени, и возникновением рака её паренхимы.

Анализы ПЦР помогают врачу обнаружить носители вируса

Результативность терапии противовирусными препаратами определяется по степени снижения концентрации ДНК гепатита B в печёночном кровотоке. Достаточным результатом считается уменьшение вирусной нагрузки в 1-2 раза при интенсивном лечении в течение от трёх месяцев до полугода. Более низкие показатели требуют изменения лечебного курса.

Прогноз развития патологии и назначения соответствующей терапии исходит из:

• количественного объёма ДНК печёночного вируса в кровяной сыворотке;
• сопутствующих биохимических показателей (например, уровня лейкоцитов в крови и содержания там билирубина);
• маркеров вирусной инфекции;
• результатов биопсии печени.

Анализы с помощью полимеразной цепной реакции помогают врачу:

• обнаружить носители вируса;
• прогнозировать процесс развития гепатита типа B;
• убедиться в переходе болезни в хроническую форму;
• мониторить активность вируса на всех фазах развития;
• выявить мутантные и скрытые штаммы гепатита B;
• оценить эффективность лечения вируса при выборе определённой тактики и изменить её в случае недостаточной успешности.

В отличие от других анализов, которые применяются для диагностики гепатита B, ПЦР обладает:

Анализ ПЦР обладает исключительной чувствительностью

1. Исключительной чувствительностью. Методика даёт возможность исследователю обнаружить возбудителя заболевания, даже если концентрация молекул его ДНК в крови минимальна. Это позволяет принять профилактические и лечебные меры на ранней стадии болезни, когда внешне она ещё не выражена никакими симптомами.
2. Широким охватом возможностей. ПЦР способен выявить не только возбудителя вирусного гепатита B, но и ряд других патологий.
3. Универсальностью подходов. Биоматериалом для исследований может быть кровь, слюна, клетки слизистых и кожных покровов.
4. Оперативностью. Заключение будет готово ровно через день после забора крови (сам результат анализа получают не позже чем через 7 часов).
5. Достоверностью. При соблюдении всех условий проведения ПЦР-методика никогда не показывает ложных данных.
6. Ценовой доступностью исследования. По стоимости ПЦР лишь слегка превышает обычные анализы, использующие кровь как биоматериал.

Единственной издержкой исследования является его технологическая сложность. Для качественного выполнения ПЦР требуется исключительно чистый биоматериал, современное оборудование и хорошо подготовленный персонал. Обращаться за диагностикой по этому методу предпочтительней в специализированные лаборатории.

Вирусный гепатит B относится к заболеваниям, полное излечение от которых представляется возможным только на самых ранних стадиях развития. Выявить болезнь именно в этой фазе помогает сверхчувствительная диагностика по методу ПЦР. Первые симптомы, вызывающие подозрение на поражение печени вирусом, должны быть поводом для обращения к специалисту. Если диагноз подтвердится, лечение следует начинать немедленно. Это улучшит прогноз и повысит вероятность поддержки печени в здоровом состоянии на долгие годы.

источник

Гепатит — патология печени воспалительного характера, появляющаяся из-за проникновения в орган вирусов или действия ядов, токсинов, приводящих к разрушению гепатоцитов (функциональных клеток органа). В нетяжёлой форме болезнь излечивается сама. В сложных случаях приводит к серьёзным осложнениям: фиброзу, циррозу или онкологии. Выявляются пять разновидностей вирусного гепатита: A, B, C, D и E. Разобраться, присутствует ли заболевание у данного человека, и в каком виде, можно по результатам специальных исследований.

Возбудители гепатита – гепатотропные вирусы. Они проникают в клетки печени, встраиваются в их геном, нарушают структуру, приводят к некрозу ткани. В других органах приживаются редко. Вирусы не уничтожают печёночную клетку, а пользуются ею для размножения.

Иммунитет человека усиленно борется с вирусами, стараясь привести к их ослаблению и прекращению воспроизведения. Но чем сильнее борьба, тем больше погибает гепатоцитов. Это приводит к развитию воспаления (гепатит) и нарушениям функций печени.

При хорошем иммунитете печень самостоятельно может избавиться от вируса и победить недуг. Это случается при болезни типов А, Е и В. Если иммунная система проигрывает в борьбе, гепатит переходит в хронический (особенно при типах вируса С, D и реже В).

Выделяют пять видов заболевания:

1. Гепатит А (возбудитель НАV). Путь передачи фекально-оральный. Нечистоплотность, немытые продукты и грязная вода – причины инфицирования. Иногда передаётся во время интимной близости. Часто имеет нетяжёлую форму и приводит к полнейшему выздоровлению с последующим формированием иммунитета. Редкие тяжёлые виды приводят к летальному исходу. Прививка проводится.
2. Гепатит В (НВV). Попадает в организм через жидкий биологический материал (кровь, семенную жидкость) и ребёнку в момент появления на свет. При использовании бывшего в употреблении шприца при введении инъекционных препаратов (в зоне риска наркоманы). Через нестерильные и многоразовые инструменты в больничных учреждениях (по халатности персонала). Через вливание донорской крови без предварительной проверки. Есть вакцина.
3. Гепатит С (НСV). Заражаются, как и при гепатите В. Вакцины пока не существует.
4. Гепатит D (НDV) поражает только заражённых НВV. Из-за двойного натиска на печень увеличивается серьёзность недуга. Прививка от В защищает и от НDV.

Если вирусный гепатит длится долго и скрытно, это приводит к опасным и необратимым последствиям. Знание этого факта – стимул не упустить болезнь и своевременно принять меры.

Гепатит В – патология печени воспалительного характера, появляющаяся из-за проникновения в орган вируса В. Болезнь опасна риском получить цирроз печени или онкологию органа.

Пути проникновения болезни:

• использование бывшего в употреблении шприца при уколах;
• через нестерильные и многоразовые инструменты в медицинских учреждениях (по халатности персонала);
• использование без предварительной проверки донорской крови;
• практика незащищённых половых контактов;
• вертикальная передача от страдающей недугом мамы ребёнку.

Вовремя распознать болезнь и начать лечение поможет знание признаков заболевания:

1. Приступы тошноты и позывы к рвоте.
2. Потеря аппетита.
3. Ощущение дискомфорта под рёбрами справа.
4. Ноющие боли в суставах.
5. Нарушения частоты и консистенции испражнений (фекалии бесцветные, моча тёмная).
6. Появление желтушной окраски кожи.
7. Вялость и быстро наступающая утомляемость.

Сегодня не существует медикаментов, до конца изгоняющих вирус из организма и полностью исцеляющих. Но если в овремя принять лечебные меры, обеспечить сохранность печ ен и можно.

Обнаружить ДНК вируса гепатита В можно методом ПЦР (полимеразной цепной реакции). Заподозрить болезнь – по клинике, с помощью лабораторных и инструментальных методов. Вначале патология имеет скрытый характер (период инкубации), затем переходит в стадию обострения.

Со временем становится хроническим заболеванием, но это влияет численность вирусов и качество терапии. Очень важно не допустить последней стадии.

Существует качественный иммуноферментный анализ исследования на присутствие ДНК вируса. Но он не до конца объективен. При его проведении не обнаруживают присутствие болезнетворного патогена внутри органов.

• как реагирует иммунитет на инфекцию;
• есть ли в крови антигены и антитела.

Поэтому контроль терапии усложнён. Доказать, что человек выздоровел, на основании этого метода нельзя. Обнаруживают и выявляют не подтверждённую качественным анализом ДНК вируса гепатита В с помощью количественного анализа.

Такой анализ достоверен и назначается в следующих случаях:

1. Иммуноферментный анализ (ИФА) на антитела положителен.
2. Установлен факт наличия вирусной патологии печени.
3. Есть вероятность нескольких видов гепатита.
4. Если надо узнать, какова нагрузка вирусов на организм.

Если болезнь протекает легко и без осложнений, нет необходимости определения нагрузки вирусов. Пациента лечат на основании показаний ИФА.

Медицинской наукой разработан метод полимеразной цепной реакции (ПЦР).При помощи данного анализа определяют и присутствие ДНК вируса, и его количество в крови.

Для выявления ДНК вируса гепатита B проводят ПЦР для подсчёта числа частичек НВV в единице объёма кровяной сыворотки. Показатель вируса гепатита считается нормальным при отсутствии двойника ДНК инфекта.

Т акая диагностика имеет цель:

1. Подсчитать число частиц вируса в единице объёма сыворотки.
2. Подтвердить острый гепатит.
3. Своевременно предотвратить переход недуга в хроническое состояние.
4. Выявить носителей вируса с положительными результатами ИФА.
5. Проследить возвращение вирусов после излечения.
6. Принять верное решение о назначении терапии, её комбинировании или прекращении.

Пройдя инкубационный период, острый гепатит даёт положительный результат при ПЦР через семь-четырнадцать дней.

Перед назначением крови на анализ, доктор выясняет у пациента анамнез:

• вводились ли в вену наркотики;
• вливалась ли чужая кровь или сдавалась, как донорская;
• не было ли операций;
• были ли кожные повреждения;
• не было ли сомнительных половых связей;
• были ли контакты с инфицированными гепатитом В людьми.

Кровь берётся на анализ из вены на голодный желудок утром в период с 7 до 9 часов, чтобы результаты были достоверны.

К забору крови готовятся, соблюдая правила:

• не есть в течение 12 часовжирной пищи,не принимать алкогольные напитки, не курить;
• избегать физических и спортивных нагрузок;
• предупредить в лаборатории, если принимались лекарства (по возможности избежать приёма);
• детям до пяти лет за полчаса до забора крови выпивать по двести грамм кипячёной воды через десятиминутные промежутки.

Концентрацию ДНК ВГВ измеряют в копий/мл или me/мл.

В оценке результатов исследования ориентируются на следующие показатели:

• 2х10^6 –в девяноста пяти процентах случаев станет хроническим.

Количественный ПЦР – главный метод диагностирования обострений гепатита В, выявления скрытого носителя инфекции с высокой виремией НВV.

ПЦР анализ на гепатит производится для обнаружения инфекции (ДНК НВV). Этот вид диагностического выявления вредоносных микроорганизмов приходит на помощь не только при гепатите В. Чтобы найти скрытных и трудно обнаруживаемых в органах возбудителей, ПЦР часто применяют для подтверждения или опровержения инфекции в гинекологической и урологической практике.

Исследуя кровь, обнаруживают:

• гепатиты А, В, С, D и ТТ;
• ВИЧ-инфекцию;
• патологии печени;
• герпес всех видов;
• цитомегаловирусы;
• энтеровирусную инфекцию;
• токсоплазмоз;
• краснуху;
• другие недуги, вызываемые вирусами.

Для диагностирования болезней этим методом подходит не только кровяная сыворотка. Другие биоматериалы тоже берутсядля анализа. Это слюна, мазки из половых органов, эякулят.

Следовательно, список болезней, при которых показана ПЦР-диагностика, расширяется:

1. Туберкулёз.
2. Сальмонеллёз.
3. Дифтерия.
4. Венерические недуги.
5. Вирусные папилломы

ПЦР входит в ряд обязательных анализов для женщины, вынашивающей ребёнка. Чтобы не допустить патологического протекания беременности и отклонений в развитии малыша, надо исключить вероятность инфицирования матери опасными заболеваниями.

ПЦР без ошибок с высокой точностью выявляет наличие вируса уже на ранней стадии. При исследовании методом ИФА антиген проявляется лишь спустя два месяца после заражения. При ПЦР – через тридцать дней. Выявляется не только обычный вирус, но и мутировавшие штаммы,что не может обнаружить никакой другой анализ.

Существуют стандартные цифры количественного показателя вируса. С ними сравнивают полученные при исследовании значения и делают выводы о степени развития болезни или её отсутствии. Данные анализа ПЦР выдаются через две недели.

Часто люди не знают, что переболели гепатитом B. Они путают его с простудой или гриппом. Из-за перенесённой болезни повышается риск в течение жизни приобрести серьёзные осложнения со стороны печени. Поэтому лучше перестраховаться и обратиться к инфекционисту.

Пациент, получив на руки результаты анализов, старается сам сделать выводы о наличии у него гепатита и определить стадию развития болезни. При этом часто допускается ошибка в оценивании реального положения вещей. Чтобы этого не было, приходят за консультацией к докторам.

Медицинские специалисты в этой области:

Лечащим врачом анализ количественного ПЦР-теста расшифровывается, по результатуоцениваетсяхарактер течения гепатита В и показания к дальнейшей диагностике.

Помогает выбрать необходимое лечение или отменить его в случае отсутствия болезни у пациента.

Врач-инфекционист объективно оценит после расшифровки состояние здоровья пациента, назначит правильное лечение и даст консультацию.

Чтобы не получить проблем, связанных с этим недугом, гепатологи настоятельно рекомендуют ставить прививки от гепатита В. Введение вакцины – даёт стопроцентную гарантию, что человек будет ограждён от болезни.

• всем младенцам сразу после появления на свет;
• служащим медицинских учреждений;
• тем, кому делается вливание чужой крови.

Сколько будет действовать введённая вакцина, зависит от иммунитета каждого человека в отдельности (от 10 до 20 лет). Если надо, прививку делают повторно.

источник

Гепатит В – инфекционное заболевание печени, протекающее по аутоиммунному механизму. Вирус, попадая в кровь, размножается в гепатоцитах, вызывает их гибель. В затяжной хронической форме гепатит В вызывает рак и цирроз. По симптоматике заболевание схоже с простудой, выявить его на ранней стадии сложно. После контакта с больным или посещении стран с высокой заболеваемостью, угрозе потенциального заражения проводятся исследования крови.

Анализ ПЦР на гепатит B с высокой точностью определяет присутствие вируса, степень активности возбудителя. Качественная оценка выявляет возбудителя, количественная помогает установить степень вирусной нагрузки. Повторное исследование помогает увидеть клиническую картину течения заболевания в динамике.

Метод полимеразной реакции (ПЦР) разработан лауреатом нобелевской премии Мюллисом. Он основан на принципе копирования структуры возбудителя. Определяет в крови ДНК вирус HBV и его концентрацию. В период заболеваемости в сыворотке присутствует белковый антиген – часть оболочки возбудителя. Именно его распознает и атакует иммунная система организма. По концентрации антигенов и антител в сыворотке крови можно судить о степени активности возбудителя.

ПЦР дает оценку HBV на момент взятия проб. В процессе молекулярного исследования сначала расщепляется цепочка ДНК, для этого в амплификаторе сначала повышается температура, затем резко снижается. Маркеры в нужной последовательности присоединяются к ДНК – создаются копии исследуемого материала, по ним определяют концентрацию возбудителя в расчете на 1 мл.

Качественный анализ ПЦР выявляет возбудителя. По результатам судят о стадии гепатита.

• реципиенты донорской крови;
• больные с почечной недостаточностью, находящиеся на гемодиализе;
• инфицированные ВИЧ;
• беременные женщины;
• медицинские работники инфекционных отделений;
• лаборанты, исследующие кровь;
• больные с печеночными патологиями;
• все потенциально зараженные;
• люди, побывавшие в странах с высоким уровнем заболеваемости.

Количественный ПЦР проводится:

• если ранее был выявлен возбудитель HBV, проводится лечение;
• после положительных проб ИФА (иммуноферментного анализа);
• при печеночных заболеваниях, причиной которых бывает вирус гепатита В.

Для исследования берется венозная кровь, делается это на голодный желудок. Точность оценки зависит от правильности подготовки пациента перед исследованиями.

Количественный и качественный методы диагностики гепатита В по сути не различаются. Они основаны на свойствах ДНК-вируса, его способности синтезировать особые белки, которых нет в организме человека. Метод полимеразной реакции с высокой долей вероятности выявляет возбудитель, имеющий сложную структуру. В зависимости от концентрации HBsAg, HBeAg судят о стадии развития заболевания, правильности лечения. При остром гепатите они присутствуют в крови одновременно, при наличии HBeAg больной является вирусоносителем, способен заражать других. Методику ПЦР определяет врач на основании анамнеза пациента.

Показатель ПЦР количественный при гепатите B характеризует:

• интенсивность деления вируса в клетках печени;
• способность организма противостоять инфекции;
• правильность выбора противовирусных средств.

В ходе болезни неоднократно проводится анализ полимеразной цепной реакции, количество вирусов в крови постоянно меняется. После инкубационного периода возрастает уровень HBsAg. Затем появляется HBeAg – антиген, находящийся в ядре возбудителя. Когда этот антиген исчезает, вместо него появляются антитела. Это говорит о борьбе организма с возбудителем. Метод определяет вирусную нагрузку на иммунную систему.

По количественному показателю ПЦР выявляется опасность хронической формы заболевания. Установлена норма трансаминазы, при которой вирус неактивен для окружающих. Больным, состоящим на учете, исследования проводятся каждые три месяца. По вирусной нагрузке определяют степень тяжести болезни. Если она превышает допустимую в два раза, больному назначают дополнительное обследование, меняют тактику лечения.

Метод полимеразной реакции самый надежный для выявления возбудителя. Качественный ПЦР анализ на гепатит В с высокой точностью устанавливает факт заражения вирусом HBV. Он подтверждает или опровергает предварительный диагноз. В 50% ДНК вирус выявляется на стадии, пока организмом не вырабатываются антитела. Иммунная система не сразу распознает чужеродные белки, они выявляются, когда размножившийся вирус покидает гепатоциты. Уничтожая HBsAg и HBeAg, организм попутно разрушает гепатоциты. Это приводит к серьезным осложнениям. Когда HBV присутствует в крови более двух месяцев, гепатит В переходит в хроническую форму. В течение первых двух недель с вирусом бороться легче.

Человек здоров, если возбудитель не присутствует в крови, или концентрация HBsAg ничтожна, а HBеAg отсутствует полностью. Результат в этом случае отрицательный. Только в единичных случаях при отрицательном результате выявляется заболевание, это говорит о быстром течении болезни или злокачественным ее характере. Антитела, вырабатываемые иммунной системой, нейтрализуют ДНК-вирус. Но в этом случае возможно обширное поражение печени.

Если результат HBsAg выше нормативных показателей и есть HBеAg, то дополнительно проводится количественный анализ на гепатит В, чтобы узнать, насколько активизировался возбудитель.

Важно обезопасить близких:

• отдельно держать предметы личной гигиены, способные повреждать кожу и слизистые (зубную щетку, бритву, маникюрные принадлежности);
• пользоваться индивидуальным полотенцем;
• изолировать раны.

Полезно придерживаться диеты, отказаться от вредных привычек. При соблюдении всех назначений врача от вируса избавляются навсегда.

источник