Вирусный гепатит обследование серологическое

Со времени открытия серологических маркеров инфекций данный анализ является основным в лабораторных исследованиях. Цель его проведения – помощь в распознавании заболеваний инфекционного происхождения, а также выявление недугов, обусловленных нарушением защитных функций иммунной системы.

Диагностирование гепатитов, краснухи, сифилиса, ВИЧ и многих других болезней в наше время стало доступно благодаря анализам на серологические маркеры инфекций. Расшифровка результатов исследований помогает достаточно быстро определить наличие заболеваний, которые иногда бывает трудно выявить обычными способами.

Анализ свойств и эффектов сывороток

Происхождение наименования «серология» — от лат. названия сыворотки (serum). Сочетание с известным logos означает «учение о сыворотке». Под серологией подразумевается раздел иммунологии, изучающий специфику взаимодействия антител сыворотки с антигенами.

Основа серологической диагностики – выявление специфических антител, образующихся в ответ на инфицирование определенным антигеном. По наличию в крови определенных антител делается заключение о характере и степени активности инфекции.

Серологический метод используется в диагностике:

• герпеса
• кишечных инфекций
• цитомегаловируса
• эпидемического паротита
• атипичной пневмонии
• краснухи
• хламидиоза
• токсоплазмоза
• сифилиса
• ВИЧ
• кори
• вирусных гепатитов В и C

Исследование применяют и в случаях, когда требуется выявление причин миокардитов.

Серологические реакции могут быть применены:

1. В случае если нужно подтвердить диагноз. Практикуется добавление в сыворотку крови соответствующего антигена. Наличие антител доказывается либо опровергается характером ответной реакции.
2. В случае, когда о характере заболевания ничего не известно, видовая принадлежность антигенов, находящихся в крови, выявляется добавлением антител.

Для проведения анализа из крови предварительно удаляют компонент, ответственный за свертываемость (фиброген).

Таким образом, цель проведения серологического анализа крови:

• Постановка диагноза. Исследование показано в случае, когда требуется лабораторное подтверждение присутствия в сыворотке крови возбудителя.
• Назначение лечения. Анализ поможет выявить реакцию возбудителя на различные лекарства.

Использование серологического анализа практикуется и при диагностике аутоиммунных заболеваний. Проведение процедуры помогает выявить антитела к тканям организма.

Вирусные гепатиты относятся к тому виду серьёзных инфекционных заболеваний, которые могут достаточно долго протекать, ничем себя особенно не проявляя. В трудности своевременного обнаружения и заключается его главная опасность.

Проведение анализа на маркеры, появляющиеся в крови как следствие введения вакцины или перенесенного заболевания, позволяет выявить гепатит в ранней фазе, в которой он лучше поддается излечению.

Этот вид (так называемая желтуха) встречается достаточно часто. Передается при употреблении инфицированных продуктов и воды. При его диагностике анализ делается на наличие антител:

• Аnti-НАV IgМ. Существование в крови ранних антител свидетельствует о наличии вируса в организме не менее 25-30 дней.
• Аnti-НАV IgG. Его наличие – свидетельство того, что пациент переболел данной формой гепатита в прошлом.

Передается половым путем. Вирус может попасть в кровь и при использовании нестерильных инструментов. Распространен широко, при своевременном выявлении хорошо поддается лечению. По выздоровлении организм приобретает к вирусу пожизненный иммунитет. Нелеченый гепатит В, вероятнее всего, перейдет в хроническую форму, которая грозит осложнениями в виде цирроза и рака печени.

При выявлении гепатита В ищут следующие маркеры:

• HВsAg. Специфический антиген, показывающий наличие заболевания.
• Аnti-НВs. Его появление свидетельствует о завершении процесса.
• Аnti-НВс IgG. Его длительное нахождение в организме указывает на течение процесса.
• Аnti-НВс IgM. Его обнаружение является признаком начальной фазы заболевания.
• Аnti-НВе. Его присутствие – признак вялотекущей формы гепатита.

Наиболее тяжёлая форма заболевания. Поддается лечению лишь на ранних стадиях. Исход несвоевременно выявленной болезни – летальный.

По результатам исследований выявляются следующие маркеры:

• Аnti-НСV. Свидетельствует о наличии заболевания.
• Аnti-НСV IgM. Позволяет судить о достаточно недавнем заражении, что дает основания для благоприятного прогноза.

Симптоматика та же, что и у гепатита В. Диагностируется присутствием аnti-НDV Ig G, характерного для гепатита В, дополненного аnti-НDV Ig M.

В целом подобен гепатиту А, но более опасен для беременных. Выявляется присутствием anti-HEV lg.

По свойствам близок к гепатиту С, но менее опасен.

Необходимые анализы во время беременности

Беременность – период, когда подверженность инфекциям становится достаточно острой проблемой для организма. Существует группа инфекций, которые опасны для беременных, в то время как для остальных групп пациентов не представляет угрозы. Названа эта группа ТОRСН-инфекциями. Название образовано из первых букв входящий в группу названий инфекций:

• токсоплазмоз
• другие инфекции (сифилис, листериоз, хламидиоз и др.)
• краснуха
• цитомегаловирусная инфекция
• герпес

Выявленные антитела IgG означают наличие иммунитета к заболеванию. Препятствием для планирования беременности не являются.

Обнаружение IgM возможно лишь в острой стадии. Беременность можно планировать лишь после выздоровления.

Краснуха. Относится к инфекциям, передающимся внутриутробно. Перенесенное заболевание формирует пожизненный иммунитет. Тяжесть, с которой протекает заболевание, прямо пропорциональна возрасту больного. У плода инфицированной женщины велика вероятность развития тяжелых пороков. Сегодня есть возможность привиться от краснухи, тем самым избежав вероятности заболеть во время беременности. После прививки в течение некоторого времени в крови сохраняются титры IgM, поэтому от планирования беременности лучше воздержаться в течение 3 мес.

Перед прививкой нужно сделать серологический анализ, после которого можно принимать решение о проведении прививки.

• IgМ-, IgG-: обозначает отсутствие антител и необходимость вакцинации.
• IgМ-, IgG+: показывает наличие иммунитета. Вакцинация не требуется.
• IgМ+, IgG-: заболевание в ранней стадии, период обострения.
• IgМ+, IgG+: период обострения.

Динамика отслеживается по степени понижения IgM и увеличения IgG. Заболевание опасно в острой фазе при положительном значении IgM.

Появление в крови IgM либо IgG, если ранее их у данной пациентки не наблюдалось, означает развитие заболевания. Такой же вердикт можно вынести при 4-кратном повышении за две-три недели количества IgG. Срок давности предыдущего обследования также имеет значение: антитела могут присутствовать в крови в течение 2 лет от начала заболевания. Поэтому наличие IgM не может интерпретироваться как признак острой инфекции. Наличие IgG в снижающемся количестве – не считается заболеванием и не представляет опасности.

Если заражение произошло во II или III триместре, заболевание излечимо.

Диагностические анализы при аллергии проводят с помощью количественного определения иммуноглобулина Е. При этом способе аллергены связываются с антителами, образуя единый комплекс. В исследовании используется более 200 аллергенов.

Более тщательные исследования проводятся, когда нужно выявить тип и степень остроты реакции. Преимущество этого метода заключается в отсутствии прямого контакта пациента с аллергеном. При этом определяются общие и аллергенспецифические IgE.

В определении диагноза важны не только лабораторные исследования, но и другие данные. Сопоставить их и правильно диагностировать наличие заболевания может только врач, специализирующийся в данной области. Самолечением на основании расшифровки серологических анализов заниматься нельзя.

Заметили ошибку? Выделите ее и нажмите Ctrl+Enter, чтобы сообщить нам.

источник

Многие годы безуспешно боретесь с БОЛЯМИ в ПЕЧЕНИ?

Глава Института заболеваний печени: «Вы будете поражены, насколько просто можно вылечить печень просто принимая каждый день.

Диагностика вирусного гепатита B основывается на характерном анамнезе заболевания, клинических данных (желтуха, гепатомегалия) и лабораторных (серологических) данных (выявление в крови специфических антител к вирусу, антигенов вируса). Кроме того, для выявления генетического вирусного материала можно использовать метод ПЦР (молекулярно-генетический анализ на гепатит B).

При сборе анамнеза у пациентов с вирусным гепатитом B принимаются во внимание следующие данные: были ли за несколько месяцев до манифестации болезни переливания крови, любые другие медицинские манипуляции, введение наркотиков (особенно совместное, нестерильным инструментом), незащищенные половые акты (особенно с новыми партнерами), другие контакты с носителями вируса гепатита B.

Кроме анализов на гепатит B большое значение в его диагностике имеет специфическая клиническая картина: постепенное начало болезни, выраженность периода, предшествующего появлению желтухи, наличие периода выраженной диспепсии, наличие артралгий (боли в суставах) и характерная сыпь на коже.

Достоверно верифицируется вирусный гепатит B только путем выявления специфических антигенов вируса в крови методом ИФА или РИА. Это — HBsAg, HBeAg, HBcAg. Кроме того, достоверным маркером гепатита B является обнаружение иммуноглобулина анти-HBc, анти-HBs, анти-HBe (IgM, IgG). Так, HBsAg обнаруживается в крови в инкубационном периоде заболевания, буквально через 2–4 недели после инфицирования у приблизительно 80% пациентов. При адекватном лечении через 3–4 месяца антиген HBs в крови исчезает, и к этому моменту концентрация антител (иммуноглобулин M) к антигену HBs (анти-HBs) в крови становится максимальной.

Концентрация антигенов (HBsAg) тем ниже, чем тяжелее течение болезни. Так, при молниеносном течении вследствие массовой гибели вирусов HBsAg выявляется только самыми чувствительными методами, в то время как антитела (анти-HBs) к частицам вируса обнаруживаются раньше. Таким образом, факт выявления в крови пациента антигенов вируса и антител к ним необходимо увязывать с клинической симптоматикой, чтобы не прийти к ложным выводам относительно стадии болезни и тяжести ее течения.

Выявление специфического маркера гепатита B (анти-HBc, который относится к иммуноглобулинам группы M) считается наиболее достоверным признаком заболевания и практически с полной вероятностью подтверждает диагноз. IgM сохраняется в крови на протяжении всей болезни вплоть до полного выздоровления. Иммуноглобулин группы M является маркером острой фазы заболевания. Затем его концентрация в крови идет на спад, и через 2–3 месяца после выздоровления выявляются уже иммуноглобулины группы G (анти-HBc), обеспечивающие длительный иммунитет (практически пожизненный) у более чем 80% пациентов.

Кроме HBsAg в период инкубации в крови может обнаруживаться HBeAg, однако он не стоек и быстро разрушается при воздействии факторов иммунитета (уже в среднем через неделю после появления). К концу данного периода нарастает концентрация антител к HBe. Но если уровень антител нарастает медленно, а антигены HBe выявляются на протяжении месяца и более, это свидетельствует о переходе болезни в хроническую фазу.

Для диагностики гепатита B используется метод ПЦР. С его помощью можно достоверно обнаружить генетический материал (ДНК) вируса в клетках организма: в крови, в гепатоцитах, в лимфоцитах — во всех местах, где происходит процесс репликации вирусных частиц. Метод ПЦР очень точный. При диагностике вирусного гепатита, вызванного мутантными штаммами вируса, которые зачастую не определяются стандартными серологическими методами, ПЦР считается крайне эффективным способом диагностики.

В таблице представлены различные варианты и комбинации антигенов и антител (полученные методом ИФА, РИА) и ДНК вируса (ПЦР), характерные для определенных периодов болезни.

Используя метод ПЦР в совокупности с методами серологической диагностики гепатита B, можно не только достоверно констатировать наличие генетического вирусного материала в организме, но и отличить острый период заболевания от хронического, определить момент выздоровления, судить о сформировавшемся иммунитете, об эффективности лечения, давать прогнозы.

Многие люди, у которых диагностируют этот вирус, находятся в полной растерянности от этого известия. Ведь очень часто многие виды гепатитов проходят без малейших симптомов. К таким видам относится и вирусный гепатит В. На сегодняшний день численность заболевания им возрастает. Это связано с распространенной наркоманией, проституцией, алкоголизмом. Поэтому для излечения данного вируса необходимо вовремя его диагностировать и понять основные причины его возникновения и степень сложности ее течения.

Поставить точный диагноз можно только при клинических исследованиях или с помощью экспресс-тестов. С помощью диагностики можно увидеть разные стадии заболевания: инфицирование вирусом, выздоровление или прогрессирование заболевания.

Раньше обнаружение инфекции было большой проблемой, но сегодня, благодаря качественной диагностике, его возможно обнаружить в самых начальных стадиях.

Можно выделить следующие антигены вирусного гепатита:

• HBsAg представлена в виде вирусной белковой молекулы. Ее белок необходим для того, чтобы определять клетки печени, к которым он будет прикрепляться. В основном он выявляется по прошествии нескольких недель. Его можно выявить с помощью лабораторных исследований посредством проведения серологических анализов на маркеры гепатита. Если выявляется этот антиген, в таком случае он может свидетельствовать о:

1. Острой форме заболевания, которая будет сочетаться с HBsAg,HBeAg, Anti-HBc суммарных.
2. Хронической форме, если идет сочетание с положительным HBeAg, Anti-HBc суммарных.
3. Неопасное инфицирование, при взаимодействии Anti-HBc суммарных.

• HBeAg под ней понимается вирусный белок. Если выявят этот маркер, значит вирус достаточно активный. Этот антиген инфицируется в основном кровью. При положительном диагнозе этого вируса, можно говорить, о том, что началась активная фаза обострения гепатита или большая возможность заражения.
• HbcoreАg, — это ядерный белок, его можно диагностировать во время обследования печени, по маркерам крови его выявить невозможно. Однако если проводить анализ крови, можно выявить антитела к этому белку. После заражения организма, он начинает активную выработку антигенов, в то время как иммунитет выделяет антитела, для борьбы с ними. Антигены и антитела, полностью соответствуют друг другу, а наличие их в крови определяется положительным результатом.

Также, кроме антигенов, существуют антитела при гепатите В, они бывают следующие:

• Анти-HBs – это антитела к белку поверхностному гепатита В. Во время контакта иммунитета и белка, начинаются всевозможные помехи в виде образования антител, которые затрудняют ему внедриться в клетки организма. Благодаря антителам, клетки иммунитета смогут быстро обнаружить проникший в организм вирус и быстро его уничтожить.
• анти-НВс представлен антителами к белку ядерному вируса. Если в анализах находят маркер этих антител, это расшифровывается так, что у организма есть иммунитет к этому вирусу либо после вакцинации, либо самостоятельного излечения. Если его находят при исследованиях, это не означает, что человек инфицирован, просто организм сталкивался с ним и выработал к нему иммунитет. А об инфицировании можно судить, только после результатов других маркеров.
• IgM анти-НВс, в основном они проявляются на начальных этапах заболевания. Обнаружение положительного диагноза может означать присутствие острой и активной формы болезни при неправильном его лечении и высокой вероятности его заражения.
• анти-НВe, помогает препятствовать распространению ядерного белка вируса. Благодаря им иммунитет может активно бороться с вирусом, останавливая его распространение на начальных этапах.

При выявлении определенного антигена, обозначается форма болезни, его активность и дальнейшее его лечение.

Проведение расшифровки заболевания проводится по обнаруженным антигенам:

• так называемый австралийский антиген (HBsAg) можно обнаружить в период обострения. Положительный результат может обозначиться через месяц после попадания вируса в организм. А проявление активности антител свидетельствуют о том, что больной выздоровел и сформировал иммунитет к этой болезни. Его диагностика проводится с помощью иммуноферментного анализа, по-другому ИФА
• антиген HBcAg нельзя определить по крови, а только после обследования печени. А антитела появляются во время начала обострения и находятся все время в крови;
• антиген НВеAg свидетельствует о высокой активности вируса, а антитела появляются сразу после снижения активности антигена.

Сейчас существует множество клинических исследований, которые позволяют на ранней стадии определить антиген вируса и состояние активности вируса в крови. Это позволяет назначить правильную схему лечения, которая поможет справиться с вирусом.

Можно выделить основные причины заражения:

• Употребляя наркотики в виде инъекций.
• Во время половых актов.
• В стоматологии и тату-салонах, если приборы плохо дезинфицируются.
• После переливания крови и хирургических операциях.

В основном им болеют родственники инфицированного человека, наркоманы, люди, которые занимаются секс услугами, медработники, заключенные, дети, которые родились от больной матери. Существует специальная таблица, которая в полной мере раскрывает суть всех вирусов гепатита, определяет пути передачи и их симптоматику.

источник

Федеральное агентство по образованию

Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования

Ульяновский государственный университет

Институт медицины, экологии и физической культуры

Кафедра инфекционных и кожно-венерических болезней

По дисциплине « Инфекционные болезни»

МАРКЕРНАЯ ДИАГНОСТИКА ОСТРЫХ И ХРОНИЧЕСКИХ ГЕПАТИТОВ В И С.

Федеральное агентство по образованию

Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования

Ульяновский государственный университет

Институт медицины, экологии и физической культуры

Кафедра инфекционных и кожно-венерических болезней

Выявление серологических маркеров вирусных гепатитов …. 3 стр

Серодиагностика вирусного гепатита В…………………………. 4 стр

Серодиагностика вирусного гепатита С………………………….10 стр

Список использованной литературы. ………………………….. 19 стр

Федеральное агентство по образованию

Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования

Ульяновский государственный университет

Институт медицины, экологии и физической культуры

Кафедра инфекционных и кожно-венерических болезней

Выявление серологических маркеров вирусных гепатитов

Установить вирусную природу гепатита и получить информацию об его этиологии возможно только путем выявления серологических маркеров вирусов гепатита. К таким маркерам относят вирусные белки (антигены), специфичные антитела, вырабатываемые организмом в ответ на инфекцию, и нуклеиновые кислоты вируса (ДНК или РНК), представляющие его геном. Совокупность методов, позволяющих выявлять в биологических тканях и жидкостях специфические вирусные или бактериальные белки (антигены) или антитела, вырабатываемые в организме хозяина в присутствии того или иного возбудителя, относят к иммунологическим методам лабораторного анализа. За последние несколько десятилетий иммунологические методы исследования получили повсеместное распространение. Причиной этого явилось тесное слияние иммунологии и биотехнологии, которое позволило разработать и внедрить в практику широкий спектр тест-систем, основанных на взаимодействии антиген — антитело. Применительно к вирусным гепатитам, иммуноферментный анализ относится к непрямым методам обнаружения возбудителя, позволяющим установить этиологию болезни. Сравнительно недавно в практику клинико-диагностических лабораторий вошли методы генодиагностики, позволяющие обнаруживать и характеризовать гены или несмысловые последовательности ДНК и/или РНК. Своим развитием эти методы обязаны разработкой в 1983 г принципа полимеразной цепной реакции (ПЦР). Первые сообщения по практическому применению ПЦР появились в 1985 г и с тех пор количество публикаций, где ПЦР используется в качестве одного из методов исследования, занимает одно из первых мест в мировой научной литературе. Эти подходы приложимы для обнаружения и исследования геномов инфекционных

Федеральное агентство по образованию

Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования

Ульяновский государственный университет

Институт медицины, экологии и физической культуры

Кафедра инфекционных и кожно-венерических болезней

агентов, обнаружения маркеров онкологических заболеваний, выявления генетических изменений в геноме человека, связанных с теми или иными функциональными нарушениями. В отличие от ИФА, ПЦР-анализ относится к прямым методам обнаружения возбудителя в клиническом материале, что позволяет оценить активность вирусного процесса и проследить процессы распространения возбудителя в различных органах и тканях.

Серодиагностика вирусного гепатита В.

Вирус гепатита В (hepatitis B virus, HBV) относится к семейству Hepadnoviridae. Геном вируса представлен частично сдвоенной кольцевой молекулой ДНК размером 3200 п.н. При световой микроскопии HBV выглядит сферической частицей диаметром 42 нм (частица Дейна), состоящей из ядра — нуклеоида, имеющего форму икосаэдра диаметром 28 нм, внутри которого находится двуцепочечная ДНК, концевой белок и фермент ДНК-полимераза. В состав нуклеоидного белка входят HBcAg и HBeAg. Внешняя оболочка (толщиной 7 нм) образована поверхностным антигеном HBV — HBsAg . Вирус гепатита В является псевдоретровирусом, т. е. его ДНК может частично встраиваться в геном гепатоцитов.

При ОВГ и обострении ХГ вирусные частицы можно обнаружить в гепатоцитах и сыворотке крови больного. При интегративной форме ХГ В и в стадии ремиссии HBV в сыворотке крови не выявляется. Основой лабораторной диагностики инфекции HBV является определение серологических маркеров инфицирования вирусом: HBsAg, HВeAg, анти-НВс класса IgM и IgG, анти-НВе и анти-HBs, HBV ДНК и активности вирусной ДНК — полимеразы. В зависимости от течения вирусного гепатита В спектр изменения серологических маркеров выглядит по-разному.

Федеральное агентство по образованию

Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования

Ульяновский государственный университет

Институт медицины, экологии и физической культуры

Кафедра инфекционных и кожно-венерических болезней

HBsAg — основной маркер инфицирования HBV. При остром вирусном В в большинстве случаев (90-80 %) HBsAg удается выявить в инкубационном периоде, начиная с 3-5-й недели заражения. Средняя продолжительность циркуляции антигена — 70-80 дней. Быстрое исчезновение HBsAg (в первые дни желтухи) с появлением антиНВs — плохой прогностический признак. При хроническом гепатите В HBsAg может циркулировать в крови больного на протяжении многих лет. Следует отметить, что применяющиеся в настоящее время методы определения HBsAg, в том числе ИФА, имеют порог чувствительности. Поэтому при наличии клинических признаков гепатита и отсутствиии HBsAg в сыворотке крови необходимо исследовать другие маркеры инфекции HBV. Наличие HBsAg в крови свидетельствует о присутствии вируса в печени и с большой долей вероятности в крови. Не всякая сыворотка, содержащая HВsAg, содержит вирус гепатита В. В ряде случаев ДНК вируса встраивается в ДНК гепатоцита не полностью, а частично, только тем участком, который кодирует синтез HBsAg. В этих случаях синтезируются HBsAg без других компонентов вириона, (то есть без других антигенов). Считают, что такая ситуация возникает при «здоровом» носительстве HBsAg. HBeAg вируса гепатита В характеризует высокую инфекционность крови, являясь показателем активной репликации HBV. HBeAg циркулирует в крови больного только в присутствии HBsAg. В первую неделю желтушного периода он выявляется у 85-95 % больных. Выявление HBeAg в течение двух и более месяцев служит прогностическим признаком развития хронического гепатита. У большинства больных хроническим гепатитом с высокой активностью процесса HBeAg сохраняется на длительный срок (до нескольких лет). Антитела к ядерному антигену вируса гепатита В класса M (анти-НВc IgM) — маркер активной репликации НВV и острой инфекции. Выявляются через 1-2 недели после обнаружения HBsAg и сохраняются на протяжении 2-18 месяцев. У 4-20 % больных острым гепатитом В анти-HBc IgM являются единственным маркером инфекции. При

Федеральное агентство по образованию

Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования

Ульяновский государственный университет

Институт медицины, экологии и физической культуры

Кафедра инфекционных и кожно-венерических болезней

ХГ В анти-НВс IgM могут быть выявлены у некоторых больных в меньших титрах, чем при острой инфекции, причем титр антител отражает тяжесть гепатита. Антитела к HBcAg класса G (анти-НВс IgG) появляются практически одновременно с анти-НВс IgM. Как првило, они остаются у всех лиц, переболевших гепатитом В, пожизненно. У 95 % носителей HBsAg наряду с HBsAg циркулируют и анти-НВс IgG. Антитела к HBsAg (анти-НВs) свидетельствуют о ранее перенесенной инфекции или о наличии поствакцинального иммунитета (защитный уровень — 10 МЕ/мл). Они появляются в период выздоровления, через 4 недели после исчезновения HBsAg, достигая максимальной концентрации через 1-2 года, с последующим постепенным снижением уровня, недоступного выявлению современными методами диагностики. В некоторых случаях анти-HВs могут циркулировать пожизненно. Появление анти-HBs на фоне клинического улучшения у больного гепатитом В является хорошим прогностическим признаком. Важно отметить, что в динамике острой инфекции HBV имеется «окно», когда HBsAg уже не определяется, а анти-HBs еще не появились. При этом выявляются анти-HBc IgM и IgG. Из этого следует вывод о необходимости обследования больных ОВГ на анти-HBc IgM даже при отрицательных результатах исследования HBsAg и анти-НВs. Антитела к HBeAg (анти-НВе) появляются в крови после элиминации HBeAg и завершения репликации вируса. К концу 9-й недели острого периода гепатита В более 90 % больных имеют анти-НВе. В период выздоровления анти-НВе могут исчезать. Однако, наличие анти-НВе не является показателем отсутствия инфекционности конкретной сыворотки крови. Показано, что у ряда больных в ходе развития гепатита В (около 10%) под влиянием «иммунного давления» на вирус возникают мутантные формы, которые «избегают» иммунного надзора и не элиминируются. У носителей анти-HBe был выделен мутант, неспособный продуцировать HBeAg из-за дефектов в области precore и получивший обозначение HBeAg-отрицательного. Появление HBeAg-отрицательного мутанта приводит к прогрессированию поражения печени при

Федеральное агентство по образованию

Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования

Ульяновский государственный университет

Институт медицины, экологии и физической культуры

Кафедра инфекционных и кожно-венерических болезней

продолжающейся репликации вируса (наличие ДНК HBV в сыворотке крови). При первичном инфицировании HBeAg-отрицательным мутантом существенно возрастает риск развития фульминантного гепатита. Описанные маркеры гепатита В исследуются методом ИФА. Спектр антител (анти-НВе, анти-НВs, анти-НВc IgM, анти-НВc IgG) и антигенов (HBsAg, HBeAg) позволяет установить диагноз гепатита В и определить стадию заболевания (таблица 3). Недостатком данного метода является невозможность его использования при заражении мутантными формами вируса, при иммуносупрессии (больные онкологическими заболеваниями, наркоманы и т.д.) и для количественной оценки присутствующего в организме возбудителя. Решение этих задач стало возможным в результате внедрения молекулярно-биологических методов в практику клинико-диагностических лабораторий.

Таблица 3. Различные сочетания серологических маркеров инфицирования вирусом гепатита В и их интерпретация

источник

В основе всех серологических реакций лежит взаимодействие антигена и антитела.

Метод обнаружения с диагностической целью антител в сыворотке крови обследуемого .

В этом случае из двух компонентов реакции (антитело, антиген) неизвестным является сыворотка крови, так как постановка реакции проводится с заведомо известными антигенами. Положительный результат реакции свидетельствует о наличии в крови антител, соответствующих применяемому антигену; отрицательный результат указывает на отсутствие таковых.

Достоверные результаты получают при исследовании «парных» сывороток крови больного, взятой вначале заболевания (3-7 день) и через 10-12 дней. В этом случае удается наблюдать динамику нарастания антител. При вирусных инфекциях лишь четырехкратное и более повышение титра антител во второй сыворотке имеет диагностическое значение.

С внедрением в практику лабораторий метода иммуноферментного анализа (ИФА) стало возможным определять в крови больных антитела, относящиеся к различным классам иммуноглобулинов (JgM и JgG), что существенным образом повысило информативность серологических методов диагностики.

При первичном иммунном ответе, когда иммунная система человека взаимодействует с инфекционным агентом в первый раз, синтезируются преимущественно антитела, относящиеся к иммуноглобулинам класса М ( JgM ) . Лишь позднее, на 8-12-й день после попадания антигена в организм, в крови начинают накапливаться антитела иммуноглобулинов класса G ( JgG ) . При иммунном ответе на инфекционные агенты вырабатываются также и антитела класса А ( JgA ), которые играют важную роль в защите от инфекционных агентов кожи и слизистых оболочек.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР), являющаяся одним из методов ДНК-диагностики, позволяет увеличить число копий детектируемого участка генома (ДНК) бактерий или вирусов в миллионы раз с использованием фермента ДНК-полимеразы. Тестируемый специфический для данного генома отрезок нуклеиновой кислоты многократно умножается (амплифицируется), что позволяет его идентифицировать. Сначала молекула ДНК бактерий или вирусов нагреванием разделяется на 2 цепи, затем в присутствии синтезированных ДНК-праймеров (последовательность нуклеинов специфична для определяемого генома) происходит связывание их с комплементарными участками ДНК, синтезируется вторая цепь нуклеиновой кислоты вслед за каждым праймером в присутствии термостабильной ДНК-полимеразы. Получается две молекулы ДНК. Процесс многократно повторяется.

Для диагностики достаточно одной молекулы ДНК, т. е. одной бактерии или вирусной частицы. Введение в реакцию дополнительного этапа — синтеза ДНК на молекуле РНК при помощи фермента обратной транскриптазы — позволило тестировать РНК-вирусы, например вирус гепатита С.

ПЦР — это трехступенчатый процесс , повторяющийся циклично: денатурация, отжиг праймеров, синтез ДНК (полимеризация). Синтезированное количество ДНК идентифицируют методом иммуноферментного анализа или электрофореза.

Преимущество ПЦР в диагностике инфекционных заболеваний перед другими методами исследований заключается в следующем:
• возбудитель инфекции может быть обнаружен в любой биологической среде организма, в том числе и в материале, получаемом при биопсии;
• возможна диагностика инфекционных болезней на самых разных стадиях заболевания;
• возможность количественной оценки результатов исследований ( сколько вирусов или бактерий содержится в исследуемом материале);
• высокая чувствительность метода.

В настоящее время выделяют следующие формы вирусных гепатитов: гепатит А, гепатит В, гепатит С, гепатит D, гепатит Е, гепатит G и гепатит ТТ. Для диагностики каждой из перечисленных форм вирусных гепатитов используется определенный перечень маркеров.

Гепатит А — острая энтеровирусная инфекция. Возбудитель — вирус гепатита А (ВГА,HAV) — энтеровирус типа 72. Геном вируса представлен однонитчатой РНК. Вирус гепатита А содержит единственный антиген (HA-Ag). Удельный вес гепатита А в суммарной заболеваемости вирусными гепатитами составляет 70-80%. В структуре заболеваемости гепатитом А дети составляют до 80%, причем основная масса — дошкольники и школьники начальных классов.

Гепатит В – вирусная антропонозная инфекция. Возбудитель вирус гепатита В (ВГВ, HBV) – относится к семейству гепаднавирусов, ДНК-содержащих вирусов, поражающих клетки печени. Вирионы ВГВ имеют наружную липопротеидную оболочку и нуклеокапсид, содержащий двунитчатую ДНК и ДНК-зависимую ДНК-полимеразу.

В структуре ВГВ (HBV) выделяют следующие антигенные системы:
• поверхностный («австралийский») антиген, HBsAg, находящийся в составе липопротеидной оболочки ВГВ, является маркером ВГВ, указывая на инфицированность вирусом;
• ядерный (core), HBcAg – обнаруживается в составе нуклеокапсида вирионов, свидетельствует об активной репродукции вируса;
• HBeAg – входит в состав ядра ВГВ, указывая на активность вируса и, кроме того, на его высокую вирулентность и инфицированность;
• HBxAg – расположен вблизи оболочки вириона, его роль в генезе инфекции изучается.

В диагностике вирусного гепатита В ведущее значение имеет определение комплекса маркеров гепатита. Свыше 5% населения планеты охвачено этой инфекцией, а частота безжелтушных форм ВГВ составляет, по данным разных авторов, от 60 до 82%.

Гепатит С (ВГС) – вирусное заболевание, наиболее часто протекающее в виде посттрансфузионного гепатита с преобладанием безжелтушных и легких форм и склонное к хронизации процесса.

Возбудитель — вирус гепатита С – имеет сходство с флавовирусами, содержит РНК. На основе филогенетического анализа выделено 6 генотипов ВГС и более 80 субтипов.

Генотип 1 — наиболее распространенный генотип во всем мире (от 40 до 80%). Генотип 1а является доминирующим для США, а 1b преобладает в Западной Европе и Южной Азии.

Генотип 2 распространен во всем мире, однако встречается с меньшей частотой, чем генотип 1 (от 10 до 40%).

ВГС тип 3 характерен для Индии, Пакистана, Австралии и Шотландии. Генотип 4 распространен преимущественно в Средней Азии и Египте, генотип 5 – в Южной Африке, а генотип 6 – в Гонконге и Мокао.

Примерно 90% всех случаев посттрансфузионных гепатитов связано с ВГС. Среди доноров антитела к вирусу гепатита С (анти-ВГС) обнаруживают в 0,2-5% случаев.

У 40-75% пациентов регистрируется бессимптомная форма болезни, у 50-75% больных острым ВГС формируется хронический гепатит, у 20% из них развивается цирроз печени. Важная роль ВГС отводится и в этиологии гепатоклеточной карциномы.

Геном вируса гепатита С представлен одноцепочечной положительно заряженной РНК, которая кодирует 3 структурных и 5 неструктурных белков. К каждому из этих белков вырабатываются антитела, обнаруживаемые в крови больных гепатитом С.

Отличительной чертой ВГС является волнообразное течение заболевания, в котором разграничивают 3 фазы: острую, латентную и фазу реактивации.
Для острой фазы характерно повышение активности печеночных ферментов в сыворотке крови, уровня антител класса IgM и IgG к ВГС с нарастанием титров, а также РНК ВГС.

Латентная фаза характеризуется отсутствием клинических проявлений, наличием в крови антител класса IgG к ВГС в высоких титрах, отсутствием антител класса IgM и РНК ВГС либо их присутствием в низких концентрациях на фоне незначительного повышения активности печеночных ферментов в периоды обострения.
Для фазы реактивации характерно появление клинических признаков, повышение активности печеночных ферментов, наличие антител класса IgG (к нуклеокапсидному белку core и неструктурным белкам NS) в высоких титрах, присутствие РНК ВГС и нарастание титров антител класса IgM к ВГС в динамике.

Гепатит D – вирусная инфекция, вследствие биологических особенностей вируса протекающая исключительно в виде ко- или суперифекции при гепатите В, характеризующаяся тяжелым течением,
часто неблагоприятным исходом.

Самостоятельно, без вируса В, вирус гепатита D не может попасть в организм человека

Возбудитель – вирус гепатита D (ВГD), по своим биологическим свойствам приближается к вироидам – обнаруженным молекулам нуклеиновых кислот. Печень человека – единственное место размножения (репликации) ВГD.

Известно существование двух вариантов инфекции: коинфекция (одновременное заражение ВГВ и ВГD) и суперинфекция (заражение HBsAg-позитивных пациентов). Сочетание ВГВ и ВГD сопровождается развитием более тяжелых форм патологического процесса, что определяется главным образом действием ВГD.

Летальность при суперинфекции достигает 15-20%. Инфицирование дельта-вирусом может вызывать острое заболевание, заканчивающееся выздоровлением, или формировать хроническое носительство ВГD.

При гепатите D могут отсутствовать в крови маркеры гепатита В – анти НВс и НВs-антиген – и наблюдается угнетение ДНК-полимеразной активности, так как ВГD ингибирует репликацию вируса гепатита В.

источник

Для определения вируса гепатита, получения информации о происхождении болезни, условиях и причинах возникновения проводится серодиагностика гепатита с, b, a. Выявление серологических маркеров позволяет поставить диагноз и предпринять правильное лечение. К маркерам относятся вирусные белки, специфичные антитела, которые вырабатывает организм как ответ на инфекцию и нуклеиновые кислоты вируса.

ВАЖНО ЗНАТЬ! Даже «запущенная» печень или желчный пузырь лечатся дома, без операций и уколов. Просто прочитайте что сделала Ольга Кричевская читать далее.

Серодиагностика — распознавание этиологии заболеваний способом выявления антител в крови. Серологические маркеры относятся к поздней диагностике, так как реакции возможны на 10−12 дней от начала болезни. Серодиагностические исследования проводят, чтобы:

• диагностировать заболевание — определить наличие антител в крови, используя стандартные антигены;
• определить возбудитель — выявить неизвестные антигены.

Для проведения серодиагностики используют: бактериальные клетки; плазмоциты и лимфоциты, опухолевые и пораженные клетки; растворимые компоненты. Выделяют 6 групп серологических реакций:

1. Реакции, которые происходят с укрупнением частиц Ag.
2. Реакции связывания комплемента и иммунный гемолиз.
3. Реакция иммунофлюоресценции.
4. Реакции нейтрализации Anti.
5. Реакция с фагоцитозом.
6. Реакции иммуносорбентного анализа с применением антигенов и антител.

Вернуться к оглавлению

Проведение серодиагностики назначают больным, если по каким-то причинам нет возможности провести диагностику, исключающую заболевание. Анализ выявляет тип возбудителя инфекции и помогает поставить диагноз. Также серодиагностика позволяет подобрать наилучший вариант лечения. Симптомы для сдачи анализа: необоснованные приступы слабости, плохой аппетит, тошнота, изменение цвета каловых масс и урины, желтизна кожи. Своевременная серодиагностика подтверждает или опровергает инфицирование и определяет стадию заболевания.

Оболочка каждого вируса имеет собственный набор белков. А аминокислоты, которые составляют белок, считаются своеобразным кодовым набором. Этот код и является маркером при серодиагностике. Маркерами гепатита А являются anti-НАV IgM и IgG. Маркерами гепатит В — HBcAg, HBsAg, HBeAg. Маркерами вируса С — HBCAg. Для проведения серодиагностики на вирус А применяют: ИЭМ (иммуноэлектронную микроскопию), РСК (связывания комплемента), РИА (применение меченых Anti и Ag), РЭМА (реакцию энзим антител). Серодиагностика на вирус В использует РИА, РЭМА, РПГ (преципитация в геле) и РИГА (непрямая гемагглютинация). При реакции РИГА используют эритроциты, которые нагружены HBsAg. Для серодиагностики гепатита С применяют иммуноферментный анализ.

Исследование при гепатите А нацелено на определение IgM и IgG. Данные показатели появляются в крови как только уровень сывороточных ферментов в организме увеличивается. Anti-НАV IgМ — является показателем уровня антител М к вирусу гепатита. После инфицирования показатель вырастает и пока не появятся первые симптомы, анализ крови будет показывать положительный результат. Аnti-НАV IgG — данный класс определяется через 10 недель после попадания инфекции в организм. Показатель чаще всего остается высоким и после выздоровления, он свидетельствует о том, что начинается процесс формирования иммунитета к вирусу типа А.

С помощью маркера HBsAg можно выявить гепатит B на самом раннем этапе, антиген проявляется на 27−41 день после попадания инфекции в организм.

Исследование нацелено на выявление антигенов и антител. Серодиагностика позволяет поставить диагноз и спрогнозировать исход болезни. Для каждой стадии, обнаруживается разный маркер HBV. На протяжении инкубационного периода антиген сохраняется в крови от 2 до 5 месяцев. Показателем инфицирования является одновременное определение HBs и НВс. В начале восстановления из крови исчезают HBc и HBe, образуется anti-НВс, позже в крови определяются антитела ко всем типам антигена. Наличие HbsAg говорит о заражении, если антиген есть в крови больше полугода, значит, заболевание находится в хронической стадии. Anti-HbsAg — показывает, что в организме образовались антитела и иммунная система активно борется с вирусом. HbsAg выявляется еще некоторое время после выздоровления. Anti-HbcAg выявляется с проявления симптомов и продолжается на протяжении всего периода.

При лабораторных исследованиях выявляются два класса антитела: IgM — синтезируется на ранних сроках и является признаком недавнего заражения или большой активности вируса. IgG — формируются через 2−3 месяца после инфицирования, обеспечивает иммунитет. Показатель HbeAg говорит об активности инфекции. Пациенты, у которых в крови обнаружен антиген — опасны для передачи вируса, поэтому должны соблюдать осторожность. При выявлении Anti-HbeAg, начинает формироваться иммунитет.

Вирус гепатита С размножается неактивно, поэтому возникают трудности в диагностике инфицирования. Единственный способ выявления вируса С — определение РНК. Его определение проводят способом иммуноферментного анализа, выявляя количество Anti-HCV. Антитела определяются через 4−6 недель после попадания вируса в кровь. В этот период начинается формирование и циркуляция IgM. Через 3 месяца начинается синтез IgG. Длительное обнаружение IgM говорит об активности вируса и хронической стадии болезни. При хронической форме выявление IgM свидетельствует о поражении печени. Результат иммуноферментного анализа не является основанием для постановки диагноза, метод используется как скрининговый тест для выявления хронической формы. Обнаружив антитела к HCV и при подозрении на гепатит С необходимо пройти комплексное лабораторное обследование.

Иммуноферментный анализ серодиагностики позволяет обнаружить антитела к гепатиту С в 95% случаев хронической формы, при острой форме — точность метода 50−70%.

Серодиагностика не имеет 100% специфичности и чувствительности при диагностике вирусных гепатитов. Поэтому при оценке результатов необходимо учитывать симптоматику и использовать для диагностики несколько тестов, подтверждающих полученный результат. При оценке результатов серологических исследований следует учитывать анамнез заболевания, сведения о перенесенных заболеваниях и вакцинации, а также возможный контакт с источником инфекции.

Судя по тому, что вы сейчас читаете эти строки — победа в борьбе с заболеваниями печени пока не на вашей стороне.

И вы уже думали о хирургическом вмешательстве? Оно и понятно, ведь печень — очень важный орган, а его правильное функционирование — залог здоровья и хорошего самочувствия. Тошнота и рвота, желтоватый или сероватый оттенок кожи, горечь во рту, потемнение цвета мочи и диарея. Все эти симптомы знакомы вам не понаслышке.

Но возможно правильнее лечить не следствие, а причину? Рекомендуем прочитать историю Ольги Кричевской, как она вылечила печень и очистила желчный пузырь. Читать статью >>

источник

Лабораторные методики являются важным диагностическим способом в клинике инфекционных болезней. Серодиагностика гепатита C, B и A происходит по идентичным принципам. Метод определяет наличие у пациента конкретного вида возбудителя путем поиска специфических антигенов или комплексов антиген-антитело. Результаты этой диагностики помогают подобрать схему лечения.

Метод заключается путем поиска в крови характерных для вирусных гепатитов антигенов. Последние являются микрочастицами, имеющими индивидуальную конфигурацию и присущими каждому возбудителю. Реже выполняют определение в плазме крови антител к определенным антигенам. Реакция называется связыванием комплемента. Антитела выступают в качестве факторов иммунитета. Их продуцируют клетки лимфоциты. Для определения антител к тому или иному вирусу гепатита используются стандартные антигены.

Методика показана пациентам с такой клинической симптоматикой:

• Пожелтение кожных покровов. Появляется при накоплении в дерме пигмента билирубина. Его высокая концентрация наблюдается при воспалении печеночной ткани.
• Болезненные ощущения и тяжесть в правом подреберье. Увеличенная печень растягивает капсулу, провоцируя возникновение характерных признаков.
• Повышение температуры до субфебрильных цифр, в сочетании с симптомами.
• Мелкоточечная сыпь на кожных покровах. Она наблюдается при дефиците факторов свертывания крови вследствие печеночной недостаточности.
• Слабость, недомогание, вялость и расстройство мышления.

Вернуться к оглавлению

Серологический способ диагностики выявляет антигены того или иного вида вируса гепатита. Происходит это с помощью стандартных антител. Банки этих молекул хранятся в лабораториях. Антитела получают из иммунных клеток — B-лимфоцитов, а точнее, их фракции — плазмоцитов. Другой способ — выявление в крови комплексов антиген-антитело путем реакции связывания комплемента. Результат бывает ложноположительным по причине наличия у пациента ревматоидного фактора. Этот патологический белок повышается при системной красной волчанке, ювенильном артрите, анкилозирующем спондилоартрите и подагре. Больным с перечисленными сопутствующими недугами следует делать повторную сверку для достоверного результата анализа.

Серология на вирус гепатита A проводятся с помощью ИЭМ — иммуноэлектронной микроскопии. Реже применяют РСК — реакцию связывания комплемента. Как альтернативный метод, используется РИА с мечеными Anti и Ag. Новинкой лабораторной диагностики является РЭМА — реакция энзим-антител. Серологическая диагностика на гепатит В включает реакции РИА, РЭМА и РПГ, при которой происходит преципитация в геле. Реже используется РИГА с непрямой гемагглютинацией. При ней с диагностической целью применяют эритроциты, нагруженные HBsAg.

Только для серологической диагностики гепатита C выполняют иммуноферментный анализ (ИФА).

Итогом серологических исследований при различных подтипах вируса является поиск маркеров. Присутствие иммуноглобулина M (IgM) всегда дает сведения о наличии острой фазы заболевания у пациента, а IgG — о хроническом течении патологии, или о перенесении ее в стертой форме. Ниже представлены показатели при различных видах гепатитной инфекции:

Рекомендуемый объем предвакцинального обследования:
Перед проведением вакцинации к вирусу гепатиту В необходимо провести исследование:

Выявление высокого титра защитных антител: HВsAb свидетельствуют об уже перенесенной инфекции, наличии устойчивого иммунитета и об отсутствии необходимости в вакцинации. Положительные реакции на HВsAg, и НВсAb свидетельствующие о наличии инфекции требуют индивидуального решения о целесообразности введения вакцины.

Источник: USAID, Ministerul Sanatatii al Republicii Moldova. Diagnosticul de laborator al Hepatitelor virale B, C si D. Instructiuni metodice, 2007

В случае отрицательных реакций при выявлении маркеров вирусных гепатитов А, В, С и D следует исключить гепатиты, вызванные вирусами Эпштейна-Барр и цитомегалии:

• CMV, IgG
• CMV, IgM
• EBV Early Antigen, IgG
• EBV Nuclear Antigen, IgG
• EBV VCA (капсидный антиген), IgG
• Epstein Barr Virus VCA (капсидный антиген), IgM

источник