Вирусный гепатит с пцр генотип

Молекулярно-генетическое исследование для определения генотипа вируса гепатита С.

Применяемый набор реагентов может быть использован для диагностики вируса гепатита С и наиболее распространенных на территории России генотипов HCV (1a, 1b, 2, 3a и 4) in vitro.

Hepatitis C Virus (HCV) Genotyping, HCV Subtype.

Полимеразная цепная реакция с обратной транскрипцией в режиме реального времени.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Вирус гепатита С (ВГС) способен поражать клетки печени, а также некоторые клетки крови (нейтрофилы, моноциты, В-лимфоциты). В основном инфекция передается через кровь (препараты для переливания элементов крови и плазмы, донорские органы, нестерильные шприцы, иглы, инструменты), реже вероятно заражение половым путем.

Острый вирусный гепатит, как правило, протекает бессимптомно и в большинстве случаев остается невыявленным. У 60-85 % инфицированных развивается хроническая инфекция, которая увеличивает риск развития цирроза, печеночной недостаточности и гепатоцеллюлярной карциномы. За свое скрытое, но разрушительное действие инфекция получила неофициальное название «ласковый убийца».

ВГС обладает наибольшей вариабельностью среди всех возбудителей вирусных гепатитов и благодаря высокой мутационной активности способен избегать воздействия защитных механизмов иммунной системы. Геномы вируса значительно отличаются в разных странах мира и имеют различную чувствительность к препаратам интерферонов.

Существует 6 основных генотипов вируса гепатита С и около 500 субтипов. Наиболее распространен в мире генотип 1 (40-80 %). 1а тип часто выявляется в США, 1b характерен для Западной Европы и Южной Азии. Генотип 2 встречается с частотой 10-40 %. Генотип 3 распространен в Шотландии, Австралии, Индии и Пакистане. ВГС 4 типа характерен для Средней Азии и Северной Африки, генотип 5 – для Южной Африки, 6 – для некоторых стран Азии. В России преобладает генотип 1b, далее с убывающей частотой — 3, 1a, 2, в США – 1a/1b, 2b, и 3a.

Противовирусная терапия, направленная на подавление прогрессирования заболевания, в редких случаях может ускорить развитие осложнений со стороны печени. Это происходит при неправильной оценке клинических и лабораторных показателей. Генотипирование РНК вируса гепатита С позволяет спрогнозировать эффект от планируемой терапии.

Генотип 1 хуже поддается лечению, чем генотипы 2 и 3. Кроме того, биопсию печени важнее провести именно при генотипе 1. Повышенные дозы препаратов интерферона рекомендованы для пациентов с 1-м и 4-м генотипами. Курс терапии у таких пациентов должен быть продлен до 48 недель даже при отсутствии вируса в крови более 24 недель. В случае успешности лечения, которая подтверждается снижением вирусной нагрузки крови ( Для чего используется исследование?

Чтобы определить необходимость лечения и спрогнозировать течение заболевания.
Для планирования длительности противовирусной терапии и дозировки лекарств.
Для прогнозирования эффективности лечения.
Для принятия решения о биопсии печени.

Когда назначается исследование?

При обнаружении РНК вируса гепатита С и планировании противовирусной терапии.

Референсные значения: РНК HCV не обнаружена.

При обнаружении указывается генотип:

Очень высокий риск хронизации инфекции и развития тяжелых осложнений. Необходимо лечение более высокими дозами интерферона в течение 48 недель.

В большинстве случаев в течение 24 недель достигается планируемый терапевтический эффект.

Труднее поддается лечению, требует доз препаратов, отличных от применяемых при терапии с генотипами 2 или 3.

Что может влиять на результат?

Генотип вируса гепатита С иногда не выявляется при вирусной нагрузке крови менее 1,25*10^3 МЕ/мл.

Решение о длительности терапии, необходимой дозе препаратов и прекращении лечения может принять только лечащий врач на основании биохимических анализов функции печени, биопсии (при необходимости) и вирусной нагрузки.
Существует вероятность повторного заражения вирусным гепатитом С другого генотипа из-за отсутствия перекрестного иммунного ответа и стойкого иммунитета.

источник

Это заболевание часто называют «ласковым убийцей», а озвученный врачом диагноз становится шоком для большинства пациентов. Дело в том, что в большинстве случаев это заболевание протекает незаметно для человека, бессимптомно, обнаруживается зачастую случайно, обычно тогда, когда уже успевает причинить непоправимый вред организму.

Передается инфекция через кровь, в том числе и половым путем, поэтому многие люди думают, что гепатит С – это удел наркоманов и проституток. Действительно, среди этих категорий много больных и скрытых носителей, но вирус не обладает избирательностью и поражает всех, кто оказывается в зоне риска. А заразиться можно множествами способов, в которых фигурирует кровь.

Гепатит С – тяжелая и опасная форма вирусного гепатита

Опасность вируса состоит в его нестабильности. Он постоянно находится в процессе мутации, поэтому организм сам не может выработать к нему иммунитет, а ученые – изготовить эффективную вакцину. Однако существуют данные, что примерно в 15% всех случаев инфицирования организму все-таки удается самостоятельно подавить вирус и справиться с болезнью.

Но остальные заболевшие рискуют заполучить цирроз печени или даже раковое поражение этого жизненно важного органа как результат длительного воздействия вируса.

Провоцируют развитие гепатита С флавивирусы. Они неустойчивы вне организма человека, в окружающей среде, склонны к постоянным изменениям, мутациям. В организме вирус может иметь крайне разнообразный инкубационный период, который измеряется разным количеством дней – от 20 до 140. Это зависит от множества показателей и факторов, в том числе и от состояния здоровья, крепости иммунитета, возраста. Самой главной опасностью этого заболевания является нестабильность вируса, что не позволяет получить универсальную вакцину, а также крайняя сложность полного от него избавления.

При благоприятном стечении обстоятельств процент выздоровления составляет 70-80%, но существует и высокий риск перерождения в цирроз и даже рак печени.

Хотя основная причина развития заболевания – это попадание вируса в кровь, произойти это может разными путями:

Переливание крови. Это наиболее распространенный способ.
Инъекции нестерильным или общим шприцем, в подавляющем количестве случаев происходит в наркоманской среде, когда колются сразу несколько зависимых.
Ненадлежащая стерилизация инструментария в медицинских учреждениях, особенно в стоматологии.
Отсутствие или некачественная стерилизация маникюрных и педикюрных инструментов в салонах.
Незащищенные половые контакты, включая гомосексуальные.
При беременности. Ребенок может быть инфицирован больной матерью или во время родов.
Бодимодификация разного вида, включая пирсинг и татуировки.

Чаще всего заболевание проявляется общими симптомами, которые невозможно отнести только к гепатиту. Больной жалуется на общую слабость, дискомфорт и боль в правом подреберье, отсутствие аппетита, которое иногда доходит до отвращения к пище, тошноту, диарею, снижение веса, иногда до критических показателей. Чаще других при диагностике обнаруживаются 1, 2 и 3 генотипы вируса гепатита С.

ПЦР-анализ позволяет выявить болезнь на ранней стадии

Симптомы и внешние признаки заболевания не имеют характерных черт, по которым можно сразу сказать, чем болен пациент.

Для того, чтобы выявить истинную природу заболевания и определить существующие генотипы вируса гепатита С, больного направляют на следующие обследования и анализы:

Ультразвуковая диагностика. На экране монитора могут быть видны рубцовые изменения печени, возникающие при гепатите, а также характерный для него стеатоз – вкрапления жировых клеток в ткань органа.
Анализ крови. Его выполняют на антитела к вирусу и на выделение РНК вируса.

Основной методикой обнаружения вируса является твердофазный иммуноферментный анализ. Антитела к вирусу могут обнаруживаться к крови больного еще долгий период после выздоровления, но в этот период его РНК уже не находится, так как сам вирус погиб.

Так как вирус гепатита С чрезвычайно мутагенный, существует множество его разновидностей, которые называются генотипы вируса гепатита С. Всего на данный момент их зарегистрировано 11. Каждый из них имеет подтипы, которые обозначаются буквами латинского алфавита:

Выявление генотипа вируса важно для правильного подбора и назначения препаратов.

Генотип является важным в определении метода и курса терапии

Генотипы вируса гепатита С имеют отличия между собой. Чаще других встречающийся 1b обычно попадает в организм человека при переливании. Этот генотип распространен в России наряду с 4 типом вируса. Наркоманы чаще имеют 3a, а 10% больных имеют сразу два генотипа вируса — 1b и 3a.

Генотип 1b хуже других реагирует на лечение, но при правильном подборе средств реакция организма составляет 51%. Первый генотип также влияет на длительность лечения. Оно обычно составляет 48 недель, а в тяжелых случаях – до 72 и более недель.

Для сравнения: генотипы 2 и 3 требуют на лечение 24 недели, а уровень реакции на лечение достигает 80%. Также имеются различия в количество применяемых препаратов. При 2 и 3 генотипе используют 800 мг Рибавирина в сутки, а при генотипе 1 дозу нужно рассчитывать в зависимости от веса пациента. Стеатоз, то есть повышенное количество жира в печени, более характерен и выражен при 3 генотипе гепатита С.

По распространению характерных подтипов становится понятно, как вирус поражал определенные группы населения. Его эволюция заняла несколько тысячелетий, а по областям распространения можно проследить миграцию определенных человеческих масс:

1a – Австралия, Северная и Южная Америка.
1b – Европа, Азия.
2a – Китай, Япония.
2b – Северная Европа, Соединенные Штаты Америки.
2c – Южная и Западная Европа.
3a – Европа, Австралия, Южная Азия.
4a – Египет.
4c – Центральная Африка.
5a – Южная Африка.
6a – Гонконг, Макао, Вьетнам.
7a, 7b – Таиланд.
8a, 8b, 9a – Вьетнам.
10a, 11a – Индонезия.

Больше информации о гепатите С можно узнать из видео:

Для европейских стран обычным распределением вирусов является следующее: 1b, 3a, 2a, 2b. Выявление генотипа вируса чрезвычайно важно и необходимо для правильного подбора эффективного лечения заболевания.

Считается, что в организме одного человека могут существовать разные генотипы вируса гепатита С. Хотя у этого утверждения мало документальных доказательств, все же большинство ученых склоняется к тому, что один человек может быть инфицирован сразу несколькими генотипами, например, 1b и 3a. Выявление их имеет большое значение, так как оказывает влияние на выбор лечения и его результативность.

Лечение зависит от состояния печения и характера течения заболевания

Вакцины от вируса не существует, а лечение длительное (пожизненное) и довольно сложное. Хороший эффект дает только комплексный подход, который включает в себя индивидуальный подбор врачом нескольких препаратов, строгую диету и правильный образ жизни.

Больным гепатитом С необходимо отказаться от вредных привычек, особенно от приема спиртных напитков, а также курения. Лекарственные и наркотические препараты при бесконтрольном приеме приводят к быстрому прогрессированию заболевания, равно как и попытки самолечения, использования непроверенных «доморощенных» народных средств.

При лечении печень поддерживают специальными препаратами – гепатопротекторами. С появлением специфических противовирусных средств типа Телапревира или Боцепривира уровень выздоровлений при этом тяжелейшем и опаснейшем заболевании достиг 70 – 80%.

Для больных гепатитом С крайне важно соблюдать достаточно строгую диету.

Она включает употребление большого количества чистой воды для выведения токсинов – минимум 1,5-2 литра ежедневно, дробный прием пищи – по 5-6 раз в течение дня, полный отказ от жирного, жареного, копченого, острого, фаст-фуда. Необходимо исключить из своего меню блюда из жирной рыбы и мяса, плотные бульоны и насыщенные, наваристые супы, разнообразные специи и пряности, какао и щавель в любых видах.

Рекомендуется больше внимания уделять правильному питанию, постараться сбалансировать свое меню, не голодать и не переедать, как можно меньше есть сладостей, отдавая предпочтение свежим фруктам и овощам, а также употреблять растительный белок в виде бобовых овощей, регулярно добавлять к своему рациону орехи в разумных количествах.

Так как алкоголь разрушает печень, использование его в любых видах, даже слабого и в коктейлях, пива может нанести непоправимый вред здоровью больного и усугубить течение основного заболевания. У пьющих больных с гепатитом С намного чаще развивается цирроз в очень тяжелых формах, а также возможно образование злокачественных опухолей. При лечении гепатита С огромное значение имеет время обращения за медицинской помощью. Чем раньше будет начато лечение, тем лучших результатов удастся достигнуть, так как заболевание не успеет нанести печени серьезный ущерб.

Заметили ошибку? Выделите ее и нажмите Ctrl+Enter, чтобы сообщить нам.

Гепатит С — заболевание печени, вызванное флавивирусом HCV (hepatitis C virus). Заражение происходит через кровь и биологические жидкости инъекционным, половым и трансплацентарным (от матери к плоду) путем.

В группе риска заражения HCV находятся люди, ведущие беспорядочные половые отношения, потребляющие инъекционные наркотические вещества, медицинские работники и пациенты, которым проводится переливание крови и другие манипуляции. Какой анализ на гепатит С нужно сдавать в первую очередь?

Попадая в кровь, вирус гепатита HCV дает непосредственное цитопатическое действие — поражает клетки печени, там же происходит его размножение. Параллельно с поражением клеток вирус HCV вызывает аутоиммунные реакции организма (аутоиммунный тиреоидит, ревматоидный артрит и т.п.)

Особенностью HCV по сравнению с другими формами вирусной болезни печени является менее выраженная клиническая картина. В 95% случаев заболевание проходит в скрытой форме, что часто затрудняет постановку диагноза.

Анализы на гепатит С — это комплекс лабораторных тестов, позволяющих определить наличие активного вируса HCV в крови.

Из-за особенностей и различной чувствительности диагностических систем невозможно верно диагностировать заболевание на основании какого-то одного из скрининговых тестов, поэтому для подтверждения наличия вируса проводится несколько исследований.

Какие анализы на гепатит С нужно сдавать?

Первичный анализ на гепатит С — это исследование сыворотки крови на присутствие антител методом иммуноферментного анализа (ИФА).

При выявлении anti-HCV требуется обязательная перепроверка результатов.

Какие еще анализы сдают на гепатит С?

Для диагностирования заболевания проводятся дополнительные анализы при гепатите С. После иммуноферментного исследования в случае позитивного ответа используется метод ПЦР. Положительный анализ на гепатит С при ПЦР показывает, что на момент проведения исследования в крови находится вирус.

Во время ПЦР проводится исследование количественных характеристик инфекции, позволяющее выявить концентрацию вируса HCV. Далее следует анализ РНК вируса гепатита С — генотипирование, на основании которого определяются индивидуальные генетические особенности возбудителя. Всего в природе насчитывается 11 генетических типов вируса HCV. Исследование РНК гепатита С позволяет выбрать тактику лечения, а также сделать предварительное заключение о результатах противовирусной терапии.

В таком случае пациент считается потенциально инфицированным, и для подтверждения наличия anti HCV гепатита С назначается развернутое исследование сыворотки методом рекомбинантного иммуноблота (recomBlot HCV).

Этот тест позволяет точно идентифицировать анти HCV гепатита С — антитела, вырабатываемые иммунной системой человека в ответ на белковые компоненты вируса. Специфические белки к нему появляются в крови на 3-4 неделе после инфицирования, поэтому информативность ИФА тестов и recomBlot HCV на этой стадии достаточно высока.

Иммуноферментный тест проводится на сыворотке крови, не содержащей фибрина и форменных элементов.

ИФА основывается на взаимодействии антигена с антителами, при котором содержимое пробирки меняет цвет. На основании сравнения полученного цвета сыворотки с существующей цветовой шкалой устанавливается антиген, например, возбудитель инфекционного заболевания.

Какие анализы при гепатите С относятся к ИФА?

Иммуноферментный тест на Anti HCV позволяет установить факт инфицирования на основании наличия в крови иммуноглобулинов — антител к возбудителю. Белки крови anti HCV гепатита С бывают двух типов— M и G, которые обозначаются в ходе лабораторных анализов как IgG и IgM. Белки типа М вырабатываются в крови через 4-6 недель после внедрения вируса, в это время их содержание максимально. К 5-6 месяцу уровень IgM снижается, но может возрастать при реактивации заболевания. Антитела типа G обнаруживаются через 11-12 недель после заражения, их уровень достигает пика на 5-6 месяц.

Для определения маркеров HCV проводится тест на Anti-HCV total, который показывает суммарное значение наличия антител IgG и IgM. Пропорция между иммуноглобулинами этих классов также позволяет судить о характере заболевания. Преобладание IgM над IgG говорит об активности вируса, и в ходе лечения заболевания показатели соотношения антител выравниваются.

Этот тест делается на основании чувствительности реагента к белкам HCV, в ответ на которые появляются антитела. Это — структурный белок С1 и С2, а также неструктурные протеины — NS2, NS3, NS4A, NS4B, NS5B. Иммуноглобулины к этим протеинам могут выявляться в крови в различном соотношении и количестве.

Рекомбинантный иммуноблот — это высокоспецифичное лабораторное исследование сыворотки крови, дающее возможность верифицировать позитивные результаты тестов на anti HCV гепатита С. Этот тест назначается для подтверждения неясных показателей ИФА.

Recomblot HCV проводится для выявления антител к С1, С2, NS3, NS4. Различные комбинации антител могут давать отрицательные, положительные, сомнительные и возможно-положительные (пограничные) результаты. Наличие антител к двум из четырех белков HCV дает основание для позитивного результата Recomblot HCV.

Полимеразная цепная реакция — это анализ, позволяющий изучить генетический код вируса, а также установить уровень концентрации вирионов в крови. На основании результатов RNA можно выбрать способ и узнать продолжительность терапии, а также определить фактор риска передачи инфекции от одного носителя к другому.

Качественный ПЦР — это общий показатель, который свидетельствует о наличии/отсутствии вируса в крови. Анализ проводится методом исследования сыворотки крови Real-Time PCR с разной степенью чувствительности скрининговой системы. Результат качественного анализа может быть либо позитивный («выявлено») или негативный («не выявлено»).

Количественный ПЦР — это показатель концентрации вирионов в 1 мл биологического материала. На основании этого теста можно определить, есть ли вероятность распространения инфекции от зараженного пациента на новых носителей, а также установить методы и длительность лечения (чем выше концентрация вируса, тем интенсивнее требуются терапия с применением комбинированных противовирусных препаратов).

Анализ на генотип гепатита С — это еще один важный лабораторный тест, показывающий генетические особенности вируса. Кроме 11 основных генотипов HCV известно множество субтипов вируса. Разница между генотипами обуславливает особенности протекания болезни, выбор терапии и исход лечения.

Разные генотипы имеют различную резистентность к лекарственным препаратам, а также разную продолжительность лечения. Например, гепатит С, вызванный 1-м генотипом вируса HCV, может заметно регрессировать за 48 недель, а при наличии вируса 2 и 3 генотипов болезнь при надлежащем лечении может регрессировать за 24 недели.

В зависимости от типа лабораторных тестов норма анализов на гепатит С может быть в качественных и количественных показателях.

Для иммуноферментного анализа у здорового человека, никогда не болевшего гепатитом С, суммарные анти HCV гепатита С в норме должны отсутствовать (референсное значение — «не найдено»), или быть меньше 0,9 (после перенесенного заболевания в прошлом). При превышении показателя 1,0 можно сделать вывод, что вирус есть в крови пациента в настоящий момент.

Показатели гепатита С в анализах ПЦР типа выражаются в числовых значениях:

нижний показатель нормы находится на уровне 600.000 МЕ/мл;
среднее значение колеблется в пределах 600.000-700.000 МЕ/мл (международных единиц на 1 мл биологического материала);
при показателях вирусной нагрузки от 800.000 МЕ/мл и выше можно говорить о повышенной концентрации HCV в крови.

Несмотря на высокую чувствительность скрининговой системы при исследовании сыворотки крови на антитела, вероятность ошибочных результатов тестов всегда есть.

Объясняется такой результат тем, что существует т.н. серологическое окно — временной промежуток между инфицированием HCV и появлением реакции со стороны иммунной системы (выработки антител к HCV). Если анализ крови был проведен в этот отрезок времени, то диагностическая система может дать отрицательный результат. Поэтому в медицинской практике при подозрении на гепатит С анализы рекомендуется делать несколько раз с небольшим интервалом.

Чтобы сдать анализ на гепатит С и получить правдивый результат, нужно соблюдать несколько несложных правил лабораторных тестов.

Кровь берется из вены натощак.
Перед тем как сдавать тест на гепатит С, следует исключить из употребления алкоголь, жирную, жареную и копченую пищу.
Между приемом пищи и моментом забора крови должно пройти 8-10 часов.

О гепатите С, его возбудителе, симптомах, диагностике и лечении можно узнать из следующего видео:

Генотипирование гепатита С — необходимая процедура, которая иногда способна спасти жизнь человеку. Существует ряд заболеваний, которые на первоначальном этапе протекают бессимптомно, но способны значительно ухудшить качество жизни и даже привести к преждевременной смерти.

Заразиться вирусом гепатита С может каждый. Если раньше эта болезнь передавалась преимущественно в среде наркоманов, то теперь наблюдается всплеск инфицирования практически во всех слоях населения. Гепатит С передается с кровью, поэтому заразиться им можно даже в медицинском учреждении или в салоне красоты.

Инкубационный период недуга составляет до полугода. Но бессимптомное развитие заболевания в хронической форме может длиться десятилетиями. В этот период поражается печень, вызывая цирроз и рак. Остро выраженный гепатит С проявляется:

повышением температуры тела;
апатией и усталостью;
тошнотой, рвотой;
неприятными ощущениями в области живота и суставах;
желтухой кожи и склер.

При первых же подобных симптомах необходим скрининг, диагностика и лечение.

Всемирная организация здравоохранения неоднократно высказывала беспокойство темпами заражения гепатитом С во многих странах. В целях профилактики рекомендуют ежегодно сдавать анализ крови на это заболевание — серологический скрининг на антитела ВГС.

При выявлении гепатита С в организме человека проводят тест на рибонуклеиновую кислоту (РНК), чтобы определить форму заболевания — острую или хроническую. При первом типе недуга около 1/3 всех пациентов не нуждаются в лечении, поскольку иммунная система этих людей самостоятельно справляется с инфекцией. Но одним из отличий вируса является его способность к мутации — изменчивости в строении гена. Благодаря этому он может ускользать от иммунной системы и практически беспрепятственно разрушать здоровые клетки. В таком случае тест на РНК укажет на хроническую форму заболевания. Врачу при этом нужно будет:

определить степень поражения печени (фиброз, цирроз) с помощью биопсии;
провести установление генотипа вируса гепатита С.

Без специалистов не удастся распознать заболевание.

Гепатит С — упрощенное название целого спектра вирусов, которые сгруппированы по генотипам и субтипам по различиям в структуре РНК. Соответственно, реакции на воздействие препаратов будут индивидуальными. Из 11 известных генотипов наибольшее распространение в мире получили 6. Субтипов насчитывается около 500, и они отличаются своеобразной чувствительностью к препаратам.

Для постсоветского пространства характерными являются типы 1, 2 и 3. Из субтипов на территории Центральной и Восточной Европы, а также в Азии наиболее часто встречается вирус гепатита С 1b. Его специфика:

Форма недуга в основном хроническая.
Бессимптомное протекание болезни (пациент может узнать о своей проблеме через десятилетия после заражения).
Вирус с высокой долей вероятности спровоцирует цирроз печени, гепатоцеллюлярную карциному, внепеченочные осложнения (криоглобулинемический васкулит, злокачественные опухоли лимфатической системы), которые могут привести к летальному исходу.
Интерфероновые схемы лечения практически не дают никакой реакции. Терапия разновидности Даклатасвир + Асунапревир/Софосбувир позволяет достичь стойкого вирусологического ответа.

Следующим по распространенности на территории Украины, Белоруссии и России является вирус гепатита С 3а. Он:

значительно реже протекает в хронической форме;
характеризуется поражением желчевыводящих путей и стеатозом (накоплением жира в печеночных клетках);
реже приводит к циррозу;
при подборе дозировки Рибавирина следует отталкиваться от веса пациента, а для недуга генотипа 3a количество препарата назначается врачом.

Но не только эти генотипы может обнаружить подобная процедура. Метод разработан для выявления присутствия РНК вируса гепатита С (субтипы 1a, 1b, 2a, 2b, 2c, 2i, 3, 4, 5a, 6) и идентифицирования генотипов 1a, 1b, 2, 3а/3b (без разделения на субтипы генотипа 3).

Анализ на генотип нужен, чтобы подобрать адекватное лечение для каждого конкретного случая заболевания. От схемы терапии зависит ее продолжительность и результативность. Итоги исследования позволяют спрогнозировать развитие заболевания, подобрать приемлемые терапевтические мероприятия, дозировки препаратов. В некоторых случаях и биопсия печени проводится только после выполнения генотипирования.

С чего нужно начинать диагностику и как определить генотип вирусного заболевания? Назначение на выполнение теста на генотип гепатита С дает инфекционист либо гепатолог. Для проведения манипуляций необходима кровь из вены пациента. Перед процедурой сдачи анализов запрещается курить (хотя бы в течение получаса), употреблять алкогольные напитки или наркотические вещества.

Анализ на генотип гепатита С может не только подтвердить или опровергнуть поражение организма человека вирусом определенного типа, но в редких случаях даже не дать определенного результата. Если генотип не определяется, то это еще не означает, что человек здоров. В этом случае возможны 2 варианта:

Нетипичный для данного региона вирус (нужны иные реагенты для проведения анализа на все возможные типы гепатита С).
Низкая концентрация вирусной РНК в крови пациента (лаборатория, в которой проводили анализ, оснащена не столь мощной и чувствительной аппаратурой).

У некоторых пациентов в организме присутствуют сразу несколько генотипов вируса. Гепатит С, генотипирование и соответствующее лечение которого были проведены успешно, у больного не исчезает. После избавления от одного вируса, следует приступить к лечению оставшегося в организме.

Влияют на результат и последующую терапию при генотипировании гепатита С условия сдачи анализа, хранения материала. Поэтому следует выбирать медицинское учреждение, имеющее опыт проведения данной процедуры. Персонал клиники должен быть обученным, а оборудование — новым и рабочим.

Возможно, разрабатываемые пан-генотипические схемы лечения со временем избавят от необходимости в генотипировании, однако на данный момент это один из основных анализов при выявлении гепапита С. Альтернативы такой процедуре пока не существует.

Ежегодно вирус гепатита С, открытый в 1989 году, забирает жизни миллионов людей на нашей планете. Сегодня этот чрезвычайно коварный и опасный вирус ставят в один ряд с такими заболеваниями, как СПИД, сифилис и рак. И хотя современная медицина достигла значительных успехов в исследовании вируса, его этимологии и путей передачи, вакцина от гепатита С на сегодняшний день так и не была разработана, а лечение заболевания является очень трудным и дорогостоящим.

Возбудителем одной из самых страшных болезней в мире является вирус HCV, который отличается высокой изменчивостью и способностью к мутациям. Мало кто знает, что возбудитель HCV представляет собой целый комплекс вирусов, которые классифицируются по разным признакам.

Несмотря на то что в современной медицине уже открыто 11 генотипов гепатита С, Всемирная организация здравоохранения признает только 6 основных штаммов.

Генотипы – это типы вирусов, которые отличаются друг от друга набором генов. Они могут иметь свои подтипы (квази-типы), которые из-за своего неустойчивого генетического материала постоянно мутируют и видоизменяются.

Генотипы гепатита С условно обозначаются цифрами от 1 до 6, неравномерно распределяются по всему миру и имеют большое количество подтипов.

Согласно статистическим данным, полученным ВОЗ из разных стран мира, генотипы 1-3 были зафиксированы во всех уголках нашей планеты, тогда как генотип 4 наибольшее распространение получил в Северной Америке, а генотип 6 – в Южной Африке.

Интересно, но в последние годы наблюдается тенденция к увеличению уровня распространения генотипа 2 и снижению уровня квази-типа 1в.

Пройдите этот тест и узнайте есть ли у вас проблемы с печенью.

Приблизительно в 9% случаев в крови у больных диагностируется более одного вида вируса HCV. В таком случае говорят о смешанном генотипе гепатита С.

Генотип 1 имеет подтипы a, b, c. Он встречается во всем мире, однако особенное распространение получил в странах бывшего СССР.

В России, Украине и Белоруссии наибольшее распространение получили подтипы 1а и 1b.

Среди всех подвидов 1б является самым страшным, поскольку в 90% случаев он переходит в хроническую форму, которая грозит многочисленными осложнениями.

Как доказывает медицинская практика, едва ли не единственным действенным средством лечения является использование Интерферона с Рибавирином. Согласно статистическим данным, эффективность данной схемы лечения позволяет достичь положительного результата в 50% случаев. При этом длительность лечения квази-типов 1а и 1б составляет не менее 48 недель.

Успешность терапии зависит от таких факторов:

Давность заболевания. Для пациентов, у которых давность заболевания составляет более пяти лет, прогноз неутешительный. В данном случае медикаментозное лечение проходит очень трудно, а его продолжительность значительно увеличивается.
Количество вируса в крови. Чем меньше вирусная нагрузка на организм человека, тем успешнее проходит терапия.
Соблюдение правильного образа жизни. Отказ от алкоголя и других вредных привычек, а также соблюдение правильного питания и диеты существенно повышают шансы на выздоровление.

Имеет подтипы a, b, c. Он распространен во всем мире, однако в отличие от других генотипов встречается значительно реже, характеризуется низкой вирусной нагрузкой и медленным течением воспалительного процесса. В случае диагностирования генотипа 2 гепатита С осложнения наступают крайне редко, а выздоровление происходит в 90% случаев. Именно поэтому его нередко называют «щадящим».

Лечение осуществляется при помощи комбинированного приема Интерферона и Рибавирина. Также эффективность терапии наблюдается в случае использования препаратов прямого противовирусного действия – Софосбувира, Даклатасвира, Ледипасвира.

Имеет подтипы a и b. Он встречается во всем мире, однако наибольшее распространение имеет на территории стран бывшего СССР. Также зафиксировано немало случаев инфицирования на территории Австралии и Южной Азии.

Лечить гепатит С генотипа 3 можно с помощью противовирусных препаратов нового поколения. Исследования показывают, что наиболее эффективным является использование Рибофлавина в комплексе с Интерфероном. Также ученые отмечают, что квази-тип 3а хорошо поддается лечению такими препаратами, как Веро-Рибавирин и Интераль.

Если же генотип 3 гепатита С не лечить, возможно появление опасных осложнений. Прежде всего речь идет о таких осложнениях:

Фиброз печени. Согласно данным исследований швейцарских ученых, фиброз печени чаще всего наблюдается у больных гепатитом с квази-типом 3а. И хотя на сегодняшний день не существует препаратов, с помощью которых можно полностью победить заболевание, при своевременном лечении патологические процессы в печени можно приостановить на долгие годы.
Стеатоз. Замечено, что у пациентов с вирусным гепатитом С с генотипом 3 стеатоз развивается в 70% случаев.

Генотип 4 имеет наибольшее количество квази-типов (a, b, c, d, e, f, h, i, j) и чаще всего встречается в Северной Африке, преимущественно в Египте. Пятый и шестой генотипы имеют всего лишь по одному квази-типу – 5а и 6а. При этом если 5а преимущественно преобладает в ЮАР, то 6а – распространен в Азии.

Генотипы 4, 5, 6 являются малоизученными, однако известно, что инфицирование происходит через кровь или во время незащищенного полового акта.

Определение генотипа (генотипирование) – это один из самых важных анализов, которые используются для диагностики гепатита С.

Главными задачами генотипирования являются:

определение схемы лечения, выбор препаратов, их дозировки;
прогнозирование течения болезни и эффективности выбранной терапии;
прогнозирование длительности лечения.

Современные медицинские технологии позволяют с максимальной точностью определить генотип гепатита С. Для этого используются полученные результаты исследований крови и плазмы.

Наиболее эффективными методами генотипирования гепатита С при исследованиях крови и плазмы больного являются:

прямое секвенирование;
полимеразная цепная реакция;
обратная гибридизация с зондами на мембране.

Многие пациенты задают вопрос, где сдать анализ на генотип гепатита С. Если речь идет о распространенных генотипах 1-3, то сегодня подобные исследования проводят практически все местные лаборатории (Инвитро и т.д.). Если же генотип HCV не удалось узнать и необходимо дополнительно сдать кровь на специфические штаммы 4-6, исследования проводятся в специализированных центрах, которые расположены в крупных городах.

В начале ХХІ в. медицина сделала огромный прорыв в лечении гепатита С. Были открыты новые аналоги противовирусных препаратов – индийские дженерики, которые оказывают прямое действие на вирус HCV и способствуют полному излечению от вирусного гепатита С практически всех генотипов. Среди таких препаратов – МайХеп, СовиХеп, Вирсо, Ледифос, Хепсинат-ЛП, Надтак.

Преимущественно отзывы об индийских препаратов позитивные. Вот что пишут на форумах в интернете.

Таким образом, определение генотипа гепатита С является необходимой мерой в лечении гепатита С, ведь именно от результатов генотипирования зависит выбор методов терапии, ее продолжительность и результат.

источник

Гепатит С относится к вирусному поражению печени. Часто это заболевание переходит в хроническую форму. Человек заражается через кровь, половым путем, возможно инфицирование от матери к плоду.

Для диагностики этой болезни выполняют анализ крови на ПЦР (полимеразную цепную реакцию). Исследование на определение вируса бывает количественное и качественное.

Качественный анализ ПЦР на гепатит С помогает обнаружить возбудителя в крови. Количественный – показывает количество этого вируса.

Он используется для установки диагноза хронического вирусного гепатита С и определения генотипа его возбудителя. Метод ПЦР относится к высокоточному способу молекулярной диагностики. Он способен определять даже малую концентрацию имеющегося вируса (10 – 500 МЕ/мл).

При острой фазе болезни качественный анализ определяет наличие патологии уже через 1 – 2 недели после заражения. В этот период специфические антитела к вирусу могут еще не выработаться, и проведение иммуноферментного анализа (ИФА) может быть бесполезно. Этот возбудитель имеет высокую мутационную активность. При помощи качественного метода ПЦР определяют, какой генотип болезни развивается у данного пациента.

Качественный ПЦР проводится:

При обнаружении антител при ИФА.
Для диагностики сопутствующих поражений печени. Иногда выявляются смешанные инфекции: одновременно заражение гепатитом B, C и D.
Для выявления генотипа возбудителя с последующим определением тактики лекарственной терапии.
Чтобы верифицировать диагноз.
Для оценки качества лечения и изменений на фоне медикаментозной терапии.

К преимуществами качественного метода исследования относится высокая чувствительность методики, большая скорость диагностики (анализ выполняется от 8 до 24 часов) и выявление скрытого течения заболевания.

Качественный анализ выполняют сразу после обнаружения антител, затем на 4, 12, 24 неделе противовирусной терапии. Потом повторяют через 6 месяцев после завершения лечения и ежегодно.

Анализ ПЦР на гепатит С обязательно выполняют беременным женщинам, донорам, при подготовке к любому оперативному вмешательству.

К людям, находящимся в группе риска инфицирования вирусным гепатитом C, относятся:

Наркоманы, которые вводят наркотики парентерально (внутривенно или внутримышечно).
Лица нетрадиционной сексуальной ориентации.
Дети, рожденные от матерей наркоманок или болеющих гепатитом С.
Больные хронической почечной недостаточностью и постоянно находящиеся на гемодиализе.
Лица после трансплантации внутренних органов: печени, почек, сердца.
Пациенты, нуждающиеся в частых оперативных вмешательствах, заборах крови и инъекциях.
Люди, которые ведут беспорядочную половую жизнь.
Врачи, медработники, постоянно контактирующие с кровью.
Люди, делающие татуировки.

По данным ВОЗ хроническим вирусным гепатитом C в мире страдают 70 миллионов человек, ежегодно умирают от этого заболевания 399.000 людей. 25 млн являются носителями вируса.

Хронические гепатиты могут протекать абсолютно бессимптомно. При начальной стадии заболевания отсутствуют признаки поражения печени либо общие проявления интоксикации.

Необходимо как минимум один раз в год проверять кровь на вирусные гепатиты B и C. Врачи, медицинские сестры, военнослужащие, полицейские, работники силовых структур проходят такое исследование два раза в год.

Для выполнения качественной полимеразной цепной реакции у пациента берется кровь из вены. Затем проводится лабораторное исследование следующим образом: в исследуемый материал добавляют праймеры (короткие химически синтезированные олигодезоксирибонуклеотиды) или специальные ферменты.

С помощью специального прибора охлаждают и нагревают пробирки с кровью. Создается специальная искусственная среда, в которой размножается генетически материал возбудителя до такой степени, что его можно визуально исследовать. При качественном анализе происходит копирование цепей, которые соответствуют вирусной RNA. Затем делается заключение о наличии вируса гепатита в организме пациента.

Перед проведением качественной ПЦР на гепатит С перед исследованием необходимо:

Избегать физических нагрузок за день до сдачи анализа.
Прийти натощак, не употреблять пищу за 8 – 10 часов до сдачи анализа.
Производить забор крови в первой половине дня.
За два дня до проведения диагностики исключают жирную, жареную пищу, алкоголь.

Суть качественной полимеразной цепной реакции заключается в многократном увеличении фрагментов вирусных частиц.

После проведения качественной ПЦР, в бланке анализа пишется «обнаружено» или «не обнаружено».

Отрицательный результат наблюдается, когда вирус присутствует в крови в малом количестве и чувствительная тест-система не смогла определить концентрацию. Такое наблюдается при недавнем заражении либо при длительно проводимой противовирусной терапии.

Обнаружено

В исследуемом материале определяется РНК HCV (возбудитель). Диагноз гепатита C подтвержден.

Не обнаружено

Возбудитель отсутствует или количество недостаточно для определения.

Расшифровка качественного анализа ПЦР не представляет затруднений. Однако при получении положительного результата необходимо обратиться к гепатологу или инфекционисту для уточнения диагноза и назначения противовирусной терапии.

Иногда выявляются ложные показатели качественной ПЦР.

Это бывает при некоторых ситуациях:

Воздействие на исследуемые жидкости высокой температуры.
Погрешности работы лаборанта или медицинской сестры.
Постоянное употребление пациентом антикоагулянтов.
Присутствие в крови веществ – ингибиторов ПЦР, которые затрудняют проведение полимеразной реакции.

Если нет никаких сомнений в результате, либо повторные проведенные исследования показали такой же результат, то пациенту ставится диагноз хронического вирусного гепатита C.

Для определения степени поражения и нарушения работы печени, выполняют дополнительные методы обследования: клинические анализы, определение уровня билирубина, трансаминаз, общего белка, щелочной фосфатазы, гамма – глутамилтрансферазы, УЗИ и биопсию печени. Проводится количественная ПЦР диагностика и генотипирование вируса.

Положительный эффект при лечении вызывает применение рибавирина, интерферона – альфа. Обязательно назначаются гепатопротекторные препараты: эссенциале, гептрал, урсосан, иммуномодуляторы.

Пациентам ни в коем случае нельзя отказываться от противовирусного лечения. Это чревато развитием серьезных осложнений, которые приведут к летальному исходу.

Качественная полимеразная цепная реакция относится к высокоточным анализам. Диагностика с помощью ПЦР выявляет даже небольшое количество возбудителя. Это приводит к раннему диагностированию гепатита С и своевременному назначению лечения. При адекватной терапии полное выздоровление наступает у 20% больных.

источник

Вирусный гепатит С — тяжелое заболевание, которое протекает с поражением печени. У восьмидесяти процентов больных оно переходит в хроническую форму. Вирус размножается в клетках печени — гепатоцитах — и вызывает их гибель. Отмершая ткань замещается очагами соединительной ткани, развивается фиброз.

По мере развития фиброза печень оказывается неспособна выполнять свои функции, начинается цирроз печени, который опасен своими осложнениями: повышением давления в системе портальной вены, желудочно-кишечными кровотечениями, нарушением свертывания крови, изменениями психики из-за повреждения ядер головного мозга токсическими продуктами.

Причина заболевания — заражение вирусом из семейства Flaviviridae, который относится к типу РНК-вирусов. Это значит, что генетический материал, по которому синтезируются белки возбудителя, закодирован в молекуле рибонуклеиновой кислоты. Заражение происходит через кровь, половым путем, и от беременной женщины к плоду. К сожалению, между инфицированием и началом выработки антител может пройти достаточно большое количество времени — от двух недель до шести месяцев. Это не дает определить заражение методом иммуноферментного анализа и начать лечение на ранних стадиях.

ПЦР — метод молекулярного анализа, который позволяет обнаружить генетический материал возбудителя уже на первой неделе после инфицирования с помощью полимеразной цепной реакции. Исследование обладает высокой специфичностью, точностью, и позволяет не только определить наличие или отсутствие вируса, но и его концентрацию и генотип.

Для исследования берут кровь пациента, в которой потенциально может находиться РНК вируса. В кровь добавляют праймеры — искусственно синтезированные участки искомого гена малой длины, и РНК-полимеразу — специальный фермент, который многократно увеличивает количество генетического материала возбудителя. С помощью специального аппарата проводят несколько циклов нагревания и охлаждения. Затем материал анализируют и сопоставляют с известными генами вируса, на основе чего делают заключение о наличии или отсутствии заражения.

Различают три вида ПЦР-анализа:

Качественный анализ ПЦР

Количественный анализ ПЦР . Позволяет определить вирусную нагрузку — концентрацию генетического материала возбудителя в одном миллилитре крови. Это исследование проводят перед началом терапии, а затем на первой, четвертой, двенадцатой и (если курс длительный) двадцать четвертой неделе лечения, чтобы оценить его эффективность.

Генотипирование . Возбудитель гепатита С часто и быстро мутирует. На планете было обнаружено семь вариантов генотипа этого вируса. В России распространены первой, второй и третий тип. Каждый из генотипов обладает различной устойчивостью к терапии, например эффективность лечения первого типа составляет шестьдесят процентов, а для второго и третьего этот показатель достигает восьмидесяти пяти. Поэтому, для того чтобы подобрать подходящие препараты и назначить курс лечения достаточной длительности необходимо точно определить, каким типом вируса заражен пациент.

ПЦР-исследование назначают в следующих случаях:

контакт с больным человеком, при котором могло произойти заражение;
положительный результат иммуноферментного анализа;
признаки цирроза печени: изменение размеров печени, увеличение селезенки, появление на животе подкожного венозного сплетения;
появление симптомов поражения печени: боли в правой части живота, пожелтение кожных покровов;
повышение активности АЛТ и АСТ в биохимическом анализе крови;
перед началом лечения для определения вирусной нагрузки;
с целью контроля за эффективностью антивирусной терапии;
после окончания лечения для контроля за рецидивами;
при наличии диагностированного гепатита B, для исключения смешанного поражения печени.

Расшифровкой ПЦР-анализа и иммуноферментного анализа на гепатит С должен заниматься гепатолог или инфекционист. Анализировать результаты ПЦР необходимо в комплексе с данными биохимического анализа крови, биопсии и УЗИ. Только квалифицированный врач сможет проанализировать результаты исследований и, основываясь на них, назначить правильное лечение.

В анализируемом биологическом материале обнаружен генетический материал возбудителя. Инфицирование подтверждено.

Инфицирование отсутствует, либо количество РНК возбудителя ниже границы чувствительности.

Нормальный показатель для здоровых людей. Означает, что в исследуемом материале отсутствует РНК гепатита С, либо его концентрация ниже порога чувствительности исследования.

Концентрация РНК ниже диапазона количественного определения. Такие результаты интерпретируют очень осторожно, соотносят их с данными других исследований, часто проводят повторное исследование.

Уровень вирусной нагрузки при данной концентрации считается низким. Обычно снижение количества вируса означает, что терапия идет успешно.

Уровень вирусной нагрузки при данной концентрации считается высоким.

Количество РНК выше верхнего предела диапазона количественного определения. Делать выводы о степени вирусной нагрузки при таком результате нельзя. Обычно в таких случаях тест повторяют с разведением образца крови.

Обнаружена РНК определенного генотипа

В биоматериале обнаружен вирус гепатита С определенного генотипа и субтипа. Результат кодируется римскими цифрами и латинскими буквами, например — 1а, 2b. Всего существует семь генотипов и шестьдесят семь субтипов, однако в России встречаются только три первых типа.

Обнаружена РНК вируса гепатита С

В крови обнаружена РНК редкого для России генотипа, который нельзя отнести к первому, второму или третьему типу. Необходимы дополнительные исследования.

Данный результат говорит о том, что пациент здоров, или о том, что колчество РНК возбудителя слишком мала.

Возможна ситуация, когда ПЦР-анализ на гепатит С отрицательный, а иммуноферментный анализ распознает антитела против вируса. Это значит, что пациент переболел гепатитом С в острой форме и излечился самостоятельно. Примерно двадцать случаев инфицирования заканчиваются самопроизвольным излечением, если организм пациента оказывает достаточное сопротивление инфекции.

Несмотря на то, что ПЦР — высокоточный анализ, его результаты могут быть искажены в следующих ситуациях:

кровь транспортировалась в лабораторию в ненадлежащих условиях, был нарушен температурный режим;
образец биоматериала был загрязнен;
в крови находились остаточные следы гепарина и других антикоагулянтов;
в исследуемом веществе оказались ингибиторы — вещества, которые замедляют или останавливают полимеразную цепную реакцию.

Диагностика на ранних стадиях

Низкая вероятность ошибки . В исследуемом материале определяют участок генетического материала, который характерен только для одного вида возбудителей. Это позволяет исключить ложные результаты. При ИФА возможны ошибки, так как один и тот же вид антител может выделяться против разных вирусов — такие антитела называют перекрестными.

Высокая чувствительность . ПЦР позволяет обнаружить РНК возбудителя даже в минимальных количествах. Это дает возможность выявить скрытые инфекции.

Для ПЦР-анализа на гепатит С собирают венозную кровь. Обычно из вены пациента за один раз берут две порции крови: первую отправляют на ПЦР, а вторую на ИФА. Это делают для того чтобы более точно оценить, насколько сильно пациент заражен вирусом, и как иммунитет борется с ним.

Обычно от пациента требуют соблюдения следующих правил:

анализ крови сдают с утра;
перерыв между последним приемом пищи и сдачей крови должен составлять восемь-десять часов;
за два-три дня до анализа нужно отказаться от жареной и жирной пищи, и алкоголя;
в течение двадцати четырех часов перед анализом пациент должен избегать физических нагрузок: не переносить тяжестей, не посещать спортзал или бассейн.

источник

Для постановки диагноза «хронический вирусный гепатит С (ХВГС)» требуется комплексное обследование человека, которое включает клинические, лабораторные и инструментальные исследования. Важным с точки зрения диагностики для постановки правильного диагноза является метод ПЦР – полимеразная цепная реакция.

Этим лабораторным методом обнаруживают РНК вируса гепатита С в крови человека. Вместе с иммуноферментным анализом (ИФА) на антитела к вирусу, ПЦР используют для постановки диагноза ХВГС и генотипа его возбудителя. Это исследование является одним из новейших методов лабораторной диагностики. Его достоверность при ХВГС превышает 97%, что считается очень хорошим показателем для исследований.

Существует три ПЦР анализа крови при ХВГС: качественный, количественный и генотипирование вируса. Первое исследование (качественный анализ) на вирус обнаруживает его в крови, поэтому используется только для постановки диагноза.

Второе (количественное) исследование определяет степень вирусной нагрузки на организм, поэтому применяется для контроля эффективности терапии.

Третий ПЦР (генотипирование) уточняет диагноз, устанавливая генотип вируса, что очень важно для назначения правильного противовирусного лечения.

Суть методики полимеразной цепной реакции заключается в использовании ферментов, которые многократно размножают генетический материал возбудителя в биоматериале. В процессе такой репликации пробирку с кровью несколько раз подогревают и охлаждают до температуры, необходимой для ускорения ферментативной реакции. В результате этих манипуляций количество вирусного генома многократно увеличивается, что позволяет его выявить даже при минимальном количестве.

ПЦР диагностика имеет много преимуществ перед другими лабораторными исследованиями:

высокая чувствительность – 97-98%;
гарантированная аналитическая специфичность (выявляет именно тот возбудитель, который требуется найти, а не его родственный штамм);
быстрота проведения (требуется не более 2 суток для получения заключения).

Качественный ПЦР анализ назначается всем пациентам, у кого ИФА-анализом были выявлены антитела к вирусу ХВГС. После проведения качественного ПЦР может быть получено два варианта ответа: «РНК обнаружено» или «РНК не обнаружено». Чтобы обнаружить в крови минимальное количество вируса, необходимы тест-системы с чувствительностью не менее 50 МЕ/мл. Если концентрация вируса в крови больного будет меньше, чем может определить диагностикум, то результат исследования может быть и ложноотрицательным. Чтобы избежать такой диагностической ошибки, лаборатории, осуществляющие ПЦР-диагностику, должны быть обеспечены высокочувствительными тест-системами. В лаборатории «Инвитро», к примеру, используются тесты с чувствительностью от 15 МЕ/мл. Информацию о чувствительности тестов работники лаборатории обязаны предоставлять пациентам и врачам по их первому требованию.

Количественный анализ ПЦР определяет степень виремии, то есть концентрацию возбудителя в крови, вирусную нагрузку. Результат этого исследования, в отличие от качественного ПЦР, выражается цифрами, например, 2×10*6 МЕ/мл, что означает 2 миллиона международных единиц в 1 мл крови. Часть лабораторий применяет другой показатель – число копий/мл. Эти два показателя легко конвертировать: 1 международная единица равна 4 копиям РНК. Таким образом, 2×10*6 МЕ/мл будет означать, что в крови больного обнаружено 8×10*6 копий вирусной РНК в 1 мл, т.е. 8 млн. копий в 1мл крови.

Генотипирование – это определение одного из шести генотипов вируса. От генотипа возбудителя зависит клиническая картина, скорость развития осложнений со стороны печени и прогноз для дальнейшей жизни пациента. Генотип вируса очень важен уже на стадии постановки диагноза, поскольку от его правильного определения зависит комбинация препаратов и длительность терапевтического курса, который будет назначен больному.

Однако даже такое казалось бы «идеальное» лабораторное исследование имеет свои минусы:

в ходе исследования происходит репликация генетического материала всех возбудителей, даже неживых, что может исказить результат. Поэтому для осуществления контроля эффективности с помощью ПЦР повторный анализ проводят не ранее, чем через 2 месяца после предыдущего, чтобы погибшие вирусы успели «покинуть» организм больного;
часть вирусного генома, который определяют с помощью тест-систем, теоретически может присутствовать и в других вирусах или микроорганизмах, поэтому есть вероятность ложноположительного ответа;
вирусы быстро мутируют. Иногда скорость и степень мутирования вируса настолько высока, что тест-система перестает улавливать их геном. Как следствие, возможен ложноотрицательный результат.

Для нивелирования этих недостатков, производители лабораторных тест-систем для ПЦР диагностики постоянно проводят их испытания, в том числе на перекрестные реакции и на чувствительность к тому или иному генотипу вируса.

Чтобы заключение обследования методом ПЦР были достоверными, необходимо строго соблюдать правила подготовки к его проведению:

исследование проводится на голодный желудок (глюкоза, жиры, минералы, попадающие в кровь из пищи, могут повлиять на скорость и качество ферментной реакции);
разрыв между последним приемом пищи и отбором крови для анализа должен составлять не менее 8 часов;
накануне исследования запрещено принимать алкоголь и употреблять жирную пищу, период выведения которых затяжной;
за сутки до похода в лабораторию следует избегать сильных физических и эмоциональных нагрузок;
до момента забора крови не рекомендуется курить.

Чтобы избежать появления ложных заключений, предполагаемому больному необходимо прийти в лабораторию немного раньше, чем будет проведен забор крови. Нужно 15-20 минут для того, чтобы человек отдышался, успокоился. Адреналин, присутствующий в крови после быстрой ходьбы, может повлиять на результат обследования.

Если направляемый на анализ пациент принимает какие-либо лекарственные препараты, об этом он должен уведомить врача. Вполне возможно, что от приема некоторых из них придется на некоторое время отказаться (если это возможно).

Расшифровкой результатов занимается врач-лаборант той лаборатории, которая проводила анализ. Расшифровка – это определение отклонения полученного результата от нормы. Норма показателей устанавливается непосредственно производителем тест-системы, которая используется лабораторией для диагностики. Поэтому не стоит удивляться, что в одних лабораториях вирусную нагрузку определяют в МЕ/мл, а в других – в копиях/мл.

Получив заключение, его нужно уметь правильно трактовать. Трактовкой результатов исследования должен заниматься лечащий врач больного гепатитом С. Только после объективного, инструментального и лабораторного обследования пациента, врач может получить достаточное количество данных для грамотной трактовки полученных результатов ПЦР.

Оценка качественного анализа, как правило, не вызывает затруднений, даже у пациентов. Результат там может быть только один: «обнаружен» или «не обнаружен». При этом второй из них является нормой.

Показатели количественного анализа трактовать сложнее. Он показывает степень вирусной нагрузки на пациента. Даже среди гепатологов нет единого мнения по поводу того, как трактовать обнаруженную виремию. Большинство врачей склоняются к тому, что высокой нужно считать нагрузку более 8×10*5 МЕ/мл. Очень высокой считается нагрузка более 1×10*7 МЕ/мл, а низкой – менее 4×10*5 МЕ/мл.

Степень вирусной нагрузки говорит о вирулентности (агрессивности) вируса: чем больше его количество в крови, тем быстрее могут развиваться осложнения со стороны печени. Высокая концентрация вируса в крови беременной женщины повышает вероятность его проникновения через гематоплацентарный барьер к плоду. Виремия также влияет на эффективность лечения: при низких цифрах результативность терапии выше, чем при высоких.

Для того, чтобы быть уверенным в достоверности проведенного анализа ПЦР на гепатит С, нужно отдавать предпочтение только тем лабораториям, которые хорошо себя зарекомендовали. Ценовая политика при этом не должна играть первостепенную роль.

источник