Меню Рубрики

Вирусный гепатит в анализы на ифа

Специфическая лабораторная диагностика вирусных гепатитов основывается на применении иммунохимических и молекулярно-биологических методов исследований. Основными иммунохимическими методами являются радиоизотопный или радиоиммунный (РИА) и иммуноферментный (ИФА). В основе иммунохимических методов диагностики лежит специфическое взаимодействие антиген — антитело с последующим выявлением комплекса при помощи специальных меток. Наиболее распространенным является иммуноферментный анализ.

Первые сообщения о применении иммуноферментного анализа. как метода для определения каких-либо веществ были опубликованы в 1971 году одновременно двумя исследовательскими группами — В. Van Weemen, A. Schuurs и Е. Engvall, P. Perlmann. В основе иммуноферментного анализа лежит следующий принцип: на твердой фазе, в качестве которой используется, главным образом, поверхность лунок полистиролового планшета, фиксируется антиген возбудителя инфекции или антитела (часто смесь антител) к антигенам, которые необходимо обнаружить. Этот антиген или антитела, которые зафиксированы на твердой фазе, называются иммуносорбентом.

В результате инкубации иммуносорбента и испытуемой сыворотки при наличии определяемого агента происходит их связывание в комплекс антиген — антитело. После процедуры промывки, в ходе которой удаляются несвязанные антигены и антитела, проводится инкубация с конъюгатом. В качестве конъюгата при детекции HBsAg используют анти-HBs, при детекции антител к вирусу гепатита С —антитела к иммуноглобулинам человека (антивидовой конъюгат), меченные пероксидазой хрена. В итоге этой инкубации происходит присоединение к уже имеющимся комплексам антиген — антитело дополнительно внесенного конъюгата. После удаления несвязавшегося конъюгата (отмывки) в лунки вносится субстрат. При использовании пероксидазного конъюгата в качестве субстрата используют перекись водорода в сочетании с индикатором, в качестве которого наиболее часто применяют ортофенилендиамин (ОФД) или тетраметилбензидин (ТМБ). Результат оценивается фотометрически.

Качество и надежность аналитических возможностей иммуноферментного метода характеризуются рядом критериев, к числу которых относятся чувствительность, специфичность, правильность и воспроизводимость.

Чувствительность — то минимальное количество вещества, которое может быть обнаружено при помощи иммуноферментного анализа. При этом нижним пределом чувствительности данного метода является концентрация исследуемого вещества в образце, которая соответствует наименьшему положительному результату определения, статистически достоверно отличающемуся от показателей заведомо отрицательных образцов. Чувствительность ИФТС зависит от ряда обстоятельств, связанных как с конструкцией тест-системы (аффинность иммуносорбента, качества экстракционных и буферных систем), так и разрешающей способностью и точностью метода регистрации.

Специфичность — способность выявлять именно те компоненты, для определения которых предназначена данная иммуноферментная тест-система. Специфичность ИФА определяется во многом перекрестной реакцией антител или антигенов (то есть композиции, используемой в качестве иммуносорбента), с близкородственными соединениями, а также составом инкубационной среды (матрикс-эффект).

Правильность — соответствие среднего значения результатов повторных определений одного и того же контрольного образца с истинной величиной измеряемого параметра. Правильность определения в ИФА зависит от качества самой тест-системы и контрольного образца. Для хороших иммуноферментных тест-систем показатели правильности лежат в пределах 90-110 %. Особенностью медико-биологических исследований в ИФА является невозможность установления точной величины, и поэтому за истинную величину принимается средняя от нескольких экспертных лабораторий. Статистическим критерием правильности служит средняя арифметическая и степень ее отклонения от истинного значения, выраженная в процентах.

Воспроизводимость — способность тест-системы показывать одни и те же значения при повторных исследованиях одного и того же образца. Воспроизводимость зависит как от случайных погрешностей (ошибок) при проведении процедуры постановки реакции, так и от качества тест-систем и точности метода регистрации результатов. Считается, что воспроизводимость одних и тех же контрольных образцов одной фирмы в разных лабораториях не должна превышать величину коэффициента вариации в 15%.

Существует несколько специфических схем ИФА для определения маркеров вирусных гепатитов: а) прямой иммуноферментный анализ; б) непрямой иммуноферментный анализ; в) конкурентное ингибирование; в) «ловушеч-ный», или «capture» метод.

Из молекулярно-биологических методов диагностики вирусных гепатитов чаще используются полимеразная цепная реакция и гибридизация. Эти методы, особенно ПЦР, позволяют выявлять очень малые количества специфической вирусной ДНК или РНК и, таким образом, судить о репликации, а в ряде случаев и об активности репликации.

Главная — Анализ ИФА на вирус гепатита – тесты в лаборатории НИАРМЕДИК

Иммуноферментный анализ играет одну из ключевых ролей в диагностике вируса гепатита в человеческом организме. Как известно, иммунная система реагирует на внедрение микроорганизма выработкой антител – специальных кровяных белков. Таким образом, анализ ИФА всецело построен на реакции антитело-антиген. В результате проведения данного исследования в сыворотке крови выявляются либо антигены микроба, либо антитела.

Пройти анализ ИФА на гепатит можно в лаборатории НИАРМЕДИК.

Для чего нужен анализ ИФА

Проведение иммуноферментного анализа на гепатит используется для определения антител в крови. Анализ ИФА показывает:

  • есть ли у пациента антител к вирусу гепатита;
  • тип вируса, который присутствует в организме у человека.

Пациенту назначается анализ ИФА на вирус гепатита, в случае положительного результата проводится исследование методом ПЦР. Иммуноферментный анализ ищет специфические маркеры вируса гепатита, оценивает их количество. Также тесты ИФА могут проводиться для определения эффективности назначенного лечения или вакцинации.

Как подготовиться к ИФА на гепатит

Материалом для исследования, целью которого является определение маркеров гепатита, служит сыворотка крови, взятая у пациента. Если задачей исследования является проверка эффективности противовирусной терапии, сдача крови рекомендуется еще до первого приема лекарственных препаратов. Если пациент на протяжении длительного времени применяет другие медикаменты, ему обязательно следует уведомить об этом лечащего врача еще до теста. Также перед анализом ИФА на гепатит A, B, C рекомендуется отказаться:

  • от приема острой, жирной, соленой пищи;
  • от курения (это можно сделать за пару часов до анализа);
  • от физических нагрузок.

Срок готовности результатов анализа ИФА на гепатит в среднем занимает одни сутки.

Антитела класса IgM по отношению к вирусу гепатита A диагностируются в начале возникновения клинических симптомов данной болезни, в течение месяца их концентрация набирает обороты, затем в течение года снижается до значения нормы.

Показания для ИФА на гепатит A:

  • холестаз (задержка выхода желчи);
  • клинические симптомы вирусного гепатита;
  • увеличение показателей АСТ, АЛТ;
  • взаимодействие с человеком, у которого вирусный гепатит данной группы;
  • нахождение в очаге инфекции (к примеру, детский сад, школа).

Оценка результатов анализов на гепатит A

  • Отрицательный результат говорит об отсутствии данного гепатита;
  • Положительный результат свидетельствует об активной форме вируса гепатита A или о том, что он был перенесен недавно.

Анализ ИФА на гепатит B

Анализ на гепатит B проводится в целях диагностики у пациента антител к данному заболеванию (Anti-HBs). Антитела считаются показателем наличия иммунитета, их обнаружение в крови позволяет определить хроническое или острое инфицирование данным вирусом, дать оценку результативности терапии острого гепатита B, вакцинации против него.

Показания для ИФА на анти-HBsAg:

  • подтверждение эффективности вакцинации, терапии;
  • подготовка к вакцинации;
  • симптомы вирусного гепатита, при этом маркеры прочих вирусных гепатитов должны отсутствовать.

Оценка результатов анализов на анти-HBsAg

  • Отрицательный результат говорит об отсутствии у пациента иммунитета к данному вирусу.
  • Положительный результат свидетельствует о наличии хронической или острой формы данного заболевания, о перенесенном гепатите В, после вакцинации.

Анализ ИФА на гепатит C

Проведение анализа ИФА на гепатит C необходимо для диагностики недавнего (срок с 4-5 недели после инфицирования) или острого инфицирования данным вирусом.

Показания к ИФА на гепатит C:

  • уровень АЛТ, АСТ превышает норму;
  • пациент готовится к хирургической операции;
  • планирование беременности;
  • клинические симптомы вирусного гепатита;
  • внутривенная наркомания;
  • незащищенный сексуальный контакт;
  • холестаз.

Оценка результатов ИФА на гепатит C

  • Отрицательный результат говорит об отсутствии данного вируса или его нахождении на стадии инкубации;
  • Положительный результат свидетельствует о периоде выздоровления или наличии заболевания, о наличии антител в организме, требуется дальнейшие исследования для определения активности процесса.

Ложноположительный результат ИФА

Ложноположительный результат ИФА на гепатит наиболее часто встречается при следующих условиях:

  • хронические болезни кровеносной системы;
  • грипп, ОРВИ в острой форме;
  • другие инфекции;
  • нарушение метаболизма;
  • аутоиммунные или гормональные патологии;
  • беременность;
  • наличие злокачественных опухолей.

В подобных случаях проводится повторное исследование.

Где сдать анализ ИФА на гепатит

Сдать анализ ИФА на гепатит взрослым, детям, беременным женщинам в удобное время без очереди вы можете в ближайшей к вам клинике НИАРМЕДИК. Стоимость перечисленных исследований можно узнать на нашем сайте в прейскуранте услуг. Дополнительную информацию по подготовке к забору материала на исследования вы можете узнать на нашем сайте в разделе Подготовка к анализам , а также у операторов контакт-центра по телефону +7 (495) 6-171-171.

2008- Все права защищены Ниармедик
Телефон для справок: +7 (495) 6-171-171

О возможных противопоказаниях необходимо проконсультироваться с врачами Клиники Ниармедик по телефону +7 (495) 6-171-171. Вся информация, размещенная на сайте компании, носит справочно-ознакомительный характер и не является публичной офертой в соответствии со ст. 437 ГК РФ

источник

Для диагностики вирусного гепатита в рамках медицинского протокола используется несколько лабораторных и инструментальных методик. Одной из самых достоверных является иммуноферментный анализ (ИФА). Метод помогает определить наличие антигена к тому или иному виду вируса. Для этого выполняется стандартная процедура забора крови из вены пациента. Результаты становятся известны уже через неделю после взятия анализа.

Термин расшифровывается как «иммуноферментный анализ». Он подразумевает определение в крови комплексов антиген-антитело для уточнения этиологии возбудителя. Если это вирус, определяются его виды и подвиды. Антигены — это частички на поверхности клеток возбудителей, связывающиеся с определенными участками антител. Последние являются иммунными молекулами, вырабатываемыми организмом для собственной защиты. Антигены и антитела неповторимы, поэтому определение их структуры с помощью иммуноферментного анализа свидетельствует о наличии конкретной патологии в организме больного. В качестве меток используются ферменты, которые и дали название методике.

ИФА — это высокоточная методика, ее чувствительность достигает 90%. Она помогает проводить скрининг парентеральных гепатитов. Эти заболевания передаются путем инъекции, или через переливание крови. ИФА помогает выявить пациентов, у которых отсутствуют симптомы. Таковыми является большинство хронических больных. Они имеют риск развития цирроза. Его обнаружение на поздних стадиях — это плохой прогноз. Поэтому иммуноферментная методика позволяет своевременно определить заболевание и сэкономить деньги на лечение. ИФА верифицирует этиологию возбудителя и определяет прогноз недуга. Диагностические наборы для нее стоят недорого и длительно хранятся. За быстроту, удобство и точность данных ИФА называют экспресс-методом.

ИФА необходим, когда требуется уточнить этиологию вирусного возбудителя для определения схемы лечения. У пациента идентифицируют наличие хронического гепатита B и C, или перенесенного заболевания вирусом подтипа A. Методику нужно применять у членов семьи больного, которые могут заразиться. В инфекционном стационаре анализ выполняется всем пациентам, у которых присутствуют такие симптомы:

  • Желтуха. Желтушность кожных покровов не сопровождается болями в правом подреберье и изменением цвета стула и мочи.
  • Повышение температуры тела. Она вырастает до субфебрильных цифр, иногда наступает лихорадка.
  • Диспепсия. Присутствуют тошнота и рвота, которая не приносит облегчение.
  • Немотивированная слабость.
  • Мелкоточечные высыпания на теле. Это мелкие кровоизлияния вследствие печеночной недостаточности.
  • Тяжесть в правом подреберье. Симптом возникает вследствие растяжения увеличенной печенью собственной капсулы, содержащей множество нервных окончаний.

Основным показанием к выполнению анализа является наличие определенных анамнестических данных. Если пациент ранее страдал инъекционной наркоманией, ему переливали кровь или пересаживали органы — это повод выполнить ИФА.

Чтобы результаты ИФА были достоверными, требуется предварительно подготовиться. За день до сдачи крови пациенту рекомендуется перестать употреблять жирную и жареную пищу, продукты с высокой концентрацией красителей, стабилизаторов, консервантов, усилителей вкуса и аромата. Нежелательно непосредственно перед выполнением метода заниматься тяжелым физическим трудом и спортивными упражнениями. В день сдачи крови необходимо воздержаться от завтрака. Забор материала натощак позволит получить точный результат. Необходимо исключить из употребления некоторые лекарственные средства. Но самостоятельно это делать не рекомендуется, поскольку есть вероятность вреда для здоровья. Нужна предварительная консультация лечащего доктора.

Метод ИФА состоит из двух этапов. На первом выполняется забор материала, на втором последний исследуется в лаборатории. Начальный этап проходит стандартно. Ему предшествует подготовка пациента к сдаче крови. В стерильном помещении проводится забор биоматериала, отправляемый в герметических контейнерах на лабораторное исследование. Дальнейшее определение комплексов антиген-антитело происходит с помощью ферментов и тест-систем на специализированном оборудовании. Результат становится известен в течение недели и отправляется пациенту на электронную почту.

Интерпретация данных подразделяется на качественную и количественную. При качественном определении результаты анализа считаются позитивными, если обнаружены суммарные антитела к определенному подтипу вируса. Выявление anti-НАV IgМ свидетельствует про острый, а anti-НАV IgG — хронический гепатит А. Позитивный маркер НВsAg — признак инфицирования вирусом подтипа В. Он наблюдается в острой и хронической фазах заболевания. Если же выявлен HBCAg, у человека присутствует хронический гепатит С. А anti-НDV сигнализирует про инфицирование подвидом D. Пациенты, у которых определен положительный маркер к вирусу, нуждаются в дальнейшем обследовании для более точной верификации диагноза.

источник

Возбудителями вирусных гепатитов А и B являются разные вирусы. Определить вирус, который стал причиной болезни, помогают специальные анализы крови с определением специфических маркеров вируса гепатитов. Заболевание характеризуются поражением клеток печени. Дифференциальная диагностика методом ИФА и ПЦР помогает уточнить диагноз, стадию болезни и назначить лечение.

Несмотря на схожий патогенез, течение болезни, клинику, проявления, симптомы, гепатиты А и B отличаются. Но самое главное различие заключается в прогнозе заболевания:

  • Гепатит А крайне редко переходит в хроническое течение.
  • Гепатит B намного чаще приобретает хроническую форму, что крайне неблагоприятно с прогностической точки зрения.
  • Большое значение имеет дифференциальная диагностика этих двух заболеваний, и провести ее позволяют специальные анализы крови с определением специфических маркеров гепатитов – эти признаки являются определяющими в установлении диагноза.
  • Оценка общего и биохимического анализа крови дает возможность установить тяжесть заболевания.

Гепатит А еще называют болезнью Боткина. В основном отмечается легкое перенесение симптомов болезни. В осложненной форме болеют старики и малыши первого года жизни.

  1. С момента попадания вируса в организм человека и до его проникновения в печень отмечается лихорадка.
  2. Обычно температура доходит только до субфебрильных значений, 37,0-37,4 С.
  3. Появляются выраженные проявления диспепсического синдрома, жидкий стул.
  4. Астеновегетативные нарушения, в виде головной боли, вялости, слабости, нарушения аппетита.
  5. Отмечается боль в мышцах.
  6. Первый симптом поражения печени – потемнение мочи.
  7. Через несколько дней кал приобретет белый окрас.
  8. Белок глаз и кожа наоборот, пожелтеют.
  9. Не исключен бессимптомный вариант течения гепатита А.
  10. В таком случае, человек о том, что он перенес этот недуг, может узнать только из анализа крови .
  11. У переболевших гепатитом А на всю жизнь останутся специфические антитела и иммунитет.
Читайте также:  История болезни больного вирусным гепатитом

Причиной возникновения гепатита А является РНК-содержащий вирус из семейства Picornaviridae, поражающий клетки печени.

  • Заражение происходит фекально – оральным путем, то есть через немытые руки, грязную воду, овощи, продукты питания и от больного гепатитом А.
  • Инкубационный период, то есть время, в течение которого болезнь не проявляется, но вирус уже проник в организм человека и может инфицировать других, составляет от 2 до 6 недель.

Два анализа крови ИФА и ПЦР помогают точно определить маркеры вирусных гепатитов. Ни один другой анализ не позволит произвести точную дифференциальную диагностику.

  1. ИФА анализ — определение маркеров вируса – это самый главный анализ, определяющий вид вируса, вызвавшего заболевание. Называется он иммуноферментный анализ с определением антител к вирусу гепатита (сокращенно – ИФА).
  2. ПЦР анализ — метод ДНК-диагностики, уточняющий диагноз. Это специальный анализ крови, называется полимеразная цепная реакция (сокращенно — ПЦР), он укажет конкретного возбудителя болезни, его количество в организме и стадию заболевания.

Анализ крови ИФА (иммунно ферментный анализ). Суть анализа заключается в выявлении специфических иммунных белков, которые вырабатываются организмом человека в ответ на проникновение вируса.

  • Для определения гепатита B – HbsAg, анти-Hbc IgM, анти-Hbc общий, HbeAg, анти-Hbe, HBV-ДНК
  • Для определения гепатита А – HBA Ig M и IgG
  • Для того, чтобы дифференцировать, различить, две эти болезни, необходимо определить маркеры – лабораторные показатели в анализе крови, указывающие на наличие определенного вида антител к этиотропному вирусу.
  • Кроме того, этот анализ позволяет отличить хроническую форму от острой.
  • Для этого проводится иммуноферментный анализ крови – ИФА, с определением антител класса М и G к вирусу гепатита А.
  • Если повышены антитела класса G – значит, человек уже перенес гепатит А ранее, а если имеются антитела класса М – значит у пациента вирусный гепатит А.

Другой, уточняющий диагноз, специальный анализ крови полимеразная цепная реакция (ПЦР анализ), укажет конкретного возбудителя болезни, количество вирусов и стадию заболевания.

  • Сдавать эти анализы лучше в любой частной лаборатории – в бюджетных учреждениях эти исследование не всегда проводятся.

Дополнительно проводится общий и биохимический анализы крови.

  • результаты покажут уровень тромбоцитов, лейкоцитов, ферментов печени, микроэлементы и т.д.,
  • по ним можно выявить степень поражения печеночной ткани.

Выполняется забор крови из вены на голодный желудок.

  • Анализ сдается при подозрении на возникновение заболевания
  • и через 3-4 месяца после окончания выраженной симптоматики.
  • Это делается для исключения вероятности перехода заболевания в хроническую форму.

Заболевание вызывается ДНК — содержащим вирусом из семейства гепаднавирусов. Иногда его называют Австралийский антиген.

  • После того как этот вирус попал в кровь еще здорового человека, он с кровотоком достигает гепатоцитов — клеток печени.
  • В них происходит размножение вируса, который поражает все большее количество новых клеток.
  • При этом некоторые участки ДНК вируса встраиваются в ДНК гепатоцитов.
  • Иммунная система человека не может узнать измененные клетки печени и воспринимает их как чужеродные.
  • Начинает вырабатывать антитела для уничтожения измененных клеток печени.
  • В результате такого аутоиммунного процесса происходит разрушение печени, гепатит.

Инкубационный, скрытый, период составляет от 2 до 6 месяцев.

Вирус гепатита B находится во всех биологических жидкостях человека. Его заразность и устойчивость превышает даже ВИЧ в 100 раз.

  • Очень важно знать, как передаётся гепатит B, чтобы предпринять защитные меры, если будете находиться рядом с носителем вируса.
  • И знать, как защититься от заражения вирусом гепатита B.

Инактивация вируса осуществляется при обработке в автоклавах при нагревании до 200°С с течение 45 минут, либо в сухожаровом шкафу при 180 °С в течение 60 минут.

Заражение вирусом гепатита B может произойти в следующих случаях:

  • при переливании здоровому человеку инфицированной крови;
  • при использование несколько раз одного и того же не обработанного в автоклаве шприца,
  • через медицинское оборудование, инструменты, если не проведена их обработка в автоклаве,
  • при незащищенном половом контакте и при поцелуях;
  • заражение новорожденного от больной матери.
  • При посещении салонов красоты:
  • если процедура маникюра или педикюра выполнена необработанными инструментами,
  • если татуаж, нанесение татуировки или пирсинга, сделаны непродизинфицированными инструментами.
  • Вероятность инфицирование в быту при обычных контактах очень мала.
  • Если у беременной женщины выявлен гепатит B, то, чтобы снизить риск заболевания, новорожденному младенцу проводят вакцинацию от гепатита B.

Существует несколько форм течения гепатита B:

  • Болезнь может развиваться стремительно, сопровождаться выраженным отёком мозга и коматозным состоянием.
  • Лечение не эффективное.
  • Течение болезни занимает всего несколько часов и завершается смертью пациента.
  1. Общие симптомы, когда до момента поражения печени развивается свойственная ОРВИ симптоматика – лихорадка, выраженная общая слабость, головная боль, недомогание, артралгия.
  2. Желтуха, после поражения гепатоцитов вирусом гепатита B, значительно снижается аппетит, отмечается желтушность кожных покровов и глаз, боли в правом подреберье, темнеет моча, обесцвечивается кал.
  3. Третья стадия заболевания может завершиться ремиссией, полным выздоровлением, или дальнейшим прогрессированием заболевания и переходом острой формы в хроническую.

Если человек выздоровеет после этой болезни, у него формируется стойкий пожизненный иммунитет.

  • Хроническая форма может возникать после острого гепатита.
  • Но гепатит B может развиваться изначально и без острой фазы болезни.
  • Проявления его могут быть очень различными, от бессимптомного, носительство вируса, до активного гепатита с переходом в цирроз.

Гепатит B — это вирусная инфекция, преимущественно поражающая печень и приводящая к хронической прогрессирующей форме заболевания, носительству вируса, развитию цирроза и рака печени.

  • При подозрении на возникновение гепатита B, необходимо сдать следующие анализы крови и пройти обследование:
  1. Определение маркера вирусного гепатита В – это самый главный анализ крови для подтверждения диагноза, определяющий вид вируса, вызвавшего заболевание, а также тактику ведения больного. Называется он иммуноферментный анализ с определением антител к вирусу гепатита B (сокращенно – ИФА).
  2. Анализ крови на ПЦР — ДНК-диагностика. Анализ, который уточняет вид вируса гепатита, его количество в крови и стадию заболевания.
  3. Биохимический анализ крови – почечно-печеночный комплекс. Дает представление о степени поражения печеночных клеток и о работе органов и систем больного человека.
  4. УЗИ органов брюшной полости.
  5. Общий анализ крови и мочи. Анализ дает картину крови больного, реакцию организма человека на внедрение вируса.

Все формы гепатита А и B лечатся в условиях стационара инфекционного отделения.

  • На сегодняшний день не разработано лечения гепатита А или B, при котором происходило бы уничтожение самого вируса.
  • То есть, организм человека самостоятельно борется с недугом. Задача врача и больного помочь организму.
  • Проводят симптоматическое лечение и общее укрепляющее.
  • В тяжелых случаях, по назначению врача, используются специальные лекарственные препараты: Энтекавир, Адефовир, Ламивудин, Интерферон альфа (ИФН-α), Пегилированный, ИФН-α(пегинтерферон-α,), Телбивудин, Теновир.
  • Для восстановления печени, по назначению врача, применяются гепатопротекторы – Гепабене, Карсил или Гептрал.

Это обследование показано:

  • перед проведением любой операции,
  • при подозрении на вирусный гепатит,
  • при необходимости проведения дифференцированной диагностики.
  • Работникам сферы здравоохранения, детских учреждений, общепита.
  • Лицам, практикующим гомосексуальные и беспорядочные половые связи.
  • Наркоманам.
  • Лицам, отбывающим срок в заключении.
  • Пациентам на гемодиализе.
  • Реципиентам и донорам крови.
  • Младенцам, родившимся от зараженной вирусом матери.
  • Членам семьи зараженного вирусным гепатитом.
  • Туристам, выбравшие местом отдыха эндемичные районы.

  • По оценкам ВОЗ, в мире свыше 2 млрд. человек инфицированы вирусом гепатита B.
  • 75% населения земного шара проживают в регионах с высоким уровнем заболеваемости.
  • Ежегодно острая форма гепатита B диагностируется у 4 млн. человек.

Кроме всех перечисленных методов защиты от вирусных гепатитов, нужно знать:

  1. Существует вакцина от гепатита А. После первой вакцинации иммунитет длится 1,5 — 2 года, если сделать повторную вакцинацию, иммунитет сохраняется в течение 20 лет.
  2. Переболевший гепатитом А приобретает стойкий пожизненный иммунитет.
  3. Есть вакцина и от вирусного гепатита B. Вакцинация дает стойкий иммунитет.
  4. Переболевший гепатитом В и выздоровевший человек приобретает стойкий пожизненный иммунитет.
  5. Но вакцины от гепатита А и В не входит в обязательный прививочный календарь по причине высокой стоимости.
  6. Поэтому нужно проявить личную инициативу и сделать прививки против этих опасных вирусных инфекций.

источник

Поверхностный антиген гепатита В в сыворотке крови в норме отсутствует.
Обнаружение поверхностного антигена (HBsAg) гепатита В в сыворотке подтверждает острое или хроническое инфицирование вирусом гепатита В.

При остром заболевании HBsAg выявляется в сыворотке крови в последние 1-2 недели инкубационного периода и первые 2-3 недели клинического периода. Циркуляция HBsAg в крови может ограничиваться несколькими днями, поэтому следует стремиться к раннему первичному обследованию больных. Метод ИФА позволяет выявить HBsAg более чем у 90% больных. Почти у 5% больных самые чувствительные методы исследования не обнаруживают HBsAg, в таких случаях этиология вирусного гепатита В подтверждается наличием анти-HBсAg JgM или ПЦР.

Концентрация HBsAg в сыворотке крови при всех формах тяжести гепатита В в разгар заболевания имеет значительный диапазон колебаний, вместе с тем имеется определенная закономерность: в остром периоде существует обратная связь между концентрацией HBsAg в сыворотке и тяжестью болезни.

Высокая концентрация HBsAg чаще наблюдается при легких и среднетяжелых формах болезни. При тяжелых и злокачественных формах концентрация HBsAg в крови чаще низкая, причем у 20% больных с тяжелой формой и у 30% со злокачественной антиген в крови может вообще не обнаруживаться. Появление на этом фоне у больных антител к HBsAg расценивается как неблагоприятный диагностический признак; он определяется при злокачественных формах гепатита В.

При остром течении гепатита В концентрация HBsAg в крови постепенно снижается вплоть до полного исчезновения этого антигена. HBsAg исчезает у большинства больных в течение 3 месяцев от начала острой инфекции.

Снижение концентрации HBsAg более чем на 50% к концу 3-й недели острого периода, как правило, свидетельствует о близком завершении инфекционного процесса. Обычно у больных с высокой концентрацией HBsAg в разгар болезни он обнаруживается в крови в течение нескольких месяцев.
У больных с низкой концентрацией HBsAg исчезает значительно раньше (иногда через несколько дней после начала заболевания). В целом срок обнаружения HBsAg колеблется от нескольких дней до 4-5 мес. Максимальный срок обнаружения HBsAg при гладком течении острого гепатита В не превышает 6 месяцев от начала заболевания.

HBsAg может быть обнаружен у практически здоровых людей, как правило, при профилактических или случайных исследованиях. В таких случаях исследуют другие маркеры вирусного гепатита В – анти HBсAg JgM, анти- HBсAg JgG, анти HBеAg и изучают функцию печени.

При отрицательных результатах необходимы повторные исследования на HBsAg.
Если повторные исследования крови в течение более 3 месяцев выявляют HBsAg, такого пациента относят к хроническим больным вирусным гепатитом В.
Наличие HBsAg – довольно распространенное явление. В мире насчитывается более 300 млн. носителей, а у нас в стране – около 10 млн. носителей.
Прекращение циркуляции HBsAg с последующей сероконверсией (образование анти-HBs) всегда свидетельствует о выздоровлении — санации организма.

Исследование крови на наличие HBsAg применяется в следующих целях:

для диагностики острого гепатита В:

  • инкубационный период;
  • острый период заболевания;
  • ранняя стадия реконвалесценции;

для диагностики хронического вирусного гепатита В;

при заболеваниях:

  • персистирующем хроническом гепатите;
  • циррозе печени;

для скрининга и выявления больных в группах риска:

  • больные с частыми гемотрансфузиями;
  • больные с хронической почечной недостаточностью;
  • больные с множественным гемодиализом;
  • больные с иммунодефицитными состояниями, в том числе СПИДом.

Результаты исследования выражаются качественно – положительный или отрицательный. Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие HBsAg в сыворотке крови. Положительный результат – выявление HBsAg свидетельствует об инкубационном или остром периоде острого вирусного гепатита В, а также при хроническом вирусном гепатите В.

В норме анти-HBcAg JgG в сыворотке отсутствует.
У больных анти-HBcAg JgG появляются в острый период вирусного гепатита В и сохраняются на протяжении всей жизни. Анти-HBcAg JgG – ведущий маркер перенесенного ВГВ.

Исследование крови на наличие анти-HBcAg JgG применяются для диагностики:

  • хронического вирусного гепатита В при наличии HBs антигена в сыворотке крови;
  • перенесенного вирусного гепатита В.
  • Результат исследования выражается качественно – положительный или отрицательный. Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие анти-HBcAg JgG в сыворотке крови. Положительный результат – выявление анти-HBcAg JgG свидетельствует об острой инфекции, реконвалесценции или ранее перенесенном вирусном гепатите В.

    В норме HBeAg в сыворотке крови отсутствует.
    HBeAg можно обнаружить в сыворотке крови большинства больных острым вирусным гепатитом В. Он обычно исчезает в крови раньше HBs-антигена. Высокий уровень HBeAg в первые недели заболевания или обнаружение его на протяжении более 8 недель дает основание заподозрить хроническую инфекцию.

    Этот антиген часто обнаруживается при хроническом активном гепатите вирусной этиологии. Особый интерес к определению HBeAg связан с тем, что его обнаружение характеризует активную репликативную фазу инфекционного процесса . Установлено, что высокие концентрации HBeAg соответствуют высокой ДНК-полимеразной активности и характеризуют активную репликацию вируса.

    Наличие HBeAg в крови свидетельствует о высокой ее инфекциозности, т.е. присутствии в организме обследуемого активной инфекции гепатита В, и обнаруживается только в случае присутствия в крови HBs-антигена. У больных хроническим активным гепатитом противовирусные препараты применяются только при обнаружении в крови HBeAg. HBeAg – антиген – маркер острой фазы и репликации вируса гепатита В.

    Исследование крови на наличие HBe-антигена применяется для диагностики:

  • инкубационного периода вирусного гепатита В;
  • продромального периода вирусного гепатита В;
  • острого периода вирусного гепатита В;
  • хронического персистирующего вирусного гепатита В.
  • Результат исследования выражается качественно – положительный или отрицательный. Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие HBeAg в сыворотке крови. Положительный результат – выявление HBeAg свидетельствует об инкубационном или остром периоде острого вирусного гепатита В или продолжающейся репликации вируса и инфекциозности больного.

    Анти-HBeAg в сыворотке в норме отсутствует. Появление анти-НВeAg антител указывает обычно на интенсивное выведение из организма вируса гепатита В и незначительное инфицирование больного.

    Читайте также:  Острый вирусный гепатит коэффициент де ритиса

    Эти антитела появляются в острый период и сохраняются до 5 лет после перенесенной инфекции. При хроническом персистирующем гепатите анти-НВeAg обнаруживаются в крови больного вместе с НВsAg. Сероконверсия, т.е. переход HBeAg в анти-НВeAg, при хроническом активном гепатите, чаще прогностически благоприятна, но такая же сероконверсия при выраженной цирротической трансформации печени прогноза не улучшает.

    Исследование крови на наличие анти-НВeAg применяются в следующих случаях при диагностике вирусного гепатита В:

  • установление начальной стадии заболевания;
  • острый период инфекции;
  • ранняя стадия реконвалесценции;
  • реконвалесценция;
  • поздняя стадия реконвалесценции.
  • диагностика недавно перенесенного вирусного гепатита В;
  • диагностика хронического персистирующего вирусного гепатита В.
  • Результат исследования выражается качественно – положительный или отрицательный. Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие антител к HBeAg в сыворотке крови. Положительный результат – выявление антител к HBeAg, которые могут свидетельствовать о начальной стадии острого вирусного гепатита В, остром периоде инфекции, ранней стадии реконвалесценции, реконвалесценции, перенесенном недавно вирусном гепатите В или персистирующем вирусном гепатите В.

    Критериями наличия хронического гепатита В являются:

  • бнаружение или периодическое выявления ДНК ВГВ в крови;
  • постоянное или периодическое повышение активности АЛТ/АСТ в крови;\
  • морфологические признаки хронического гепатита при гистологическом исследовании биоптата печени.
  • Вирус гепатита В в крови в норме отсутствует.
    Качественное определение вируса гепатита В методом ПЦР в крови позволяет подтвердить наличие вируса в организме больного и тем самым устанавливает этиологию заболевания.

    Данное исследование дает полезную информацию для диагностики острого вирусного гепатита В в инкубационном и раннем периоде развития заболевания, когда основные серологические маркеры в крови у пациента могут отсутствовать. Вирусную ДНК в сыворотке крови обнаруживают у 50% больных при отсутствии HBeAg. Аналитическая чувствительность метода ПЦР составляет не менее 80 вирусных частиц в 5 мкл, прошедшей выявление ДНК пробы, специфичность – 98%.

    Этот метод имеет важное значение для диагностики и мониторинга течения хронического ВГВ. Примерно 5-10% случаев цирроза и других хронических заболеваний печени обусловлены хроническим носительством вируса гепатита В. Маркерами активности таких заболеваний является наличие HBeAg и ДНК вируса гепатита В в крови.

    Метод ПЦР позволяет определять в крови ДНК вируса гепатита В как качественно, так и количественно. Определяемым фрагментом в обоих случаях служит уникальная последовательность ДНК гена структурного белка вируса гепатита В.

    Обнаружение ДНК вируса гепатита В в биоматериале с помощью ПЦР необходимо для:

  • разрешения сомнительных результатов серологических исследований;
  • выявление острой стадии заболевания по сравнению с перенесенной инфекцией или контактом;
  • контроля эффективности противовирусного лечения.
  • Исчезновение ДНК вируса гепатита В из крови – признак эффективности терапии

    Этот метод дает важную информацию об интенсивности развития заболевания, об эффективности лечения и о развитии резистентности к активным препаратам.
    Для диагностики вирусного гепатита методом ПЦР в сыворотке крови применяются тест-системы, чувствительность которых составляет 50-100 копий в пробе, что позволяет детектировать вирус при его концентрации 5 Х 10^3 -10^4 копий/мл. ПЦР при вирусном гепатите В безусловно необходима для суждения о вирусной репликации.

    Вирусную ДНК в сыворотке крови обнаруживают у 50% больных при отсутствии HBeAg. Материалом для выявления ДНК вируса гепатита В могут служить сыворотка крови, лимфоциты, гепатобиоптаты.

    • Оценку уровня виремии осуществляют следующим образом:
    • менее 2.10^5 копий/мл (менее 2.10^5 МЕ/мл) – низкая виремия ;
    • от 2.10^5 копий/мл (2.10^5 МЕ/мл) до 2.10^6 копий/мл (8.10^5 МЕ/мл) – средняя виремия;
    • более 2.10^6 копий/мл – высокая виремия.

    Существует зависимость между исходом острого вирусного гепатита В и концентрацией ДНК ВГВ в крови больного. При низком уровне виремии процесс хронизации инфекции близок к нулю, при средней – хронизация процесса наблюдается у 25-30% больных, а при высоком уровне виремии острый вирусный гепатит В чаще всего переходит в хронический.

    Показаниями для лечения хронического ВГВ интерфероном-альфа следует считать наличие маркеров активной репликации вируса (выявление HBsAg, HBeAg и ДНК ВГВ в сыворотке крови в течение предшествующих 6 месяцев.).

    Критериями оценки эффективности лечения служат исчезновение HBeAg и ДНК ВГВ в крови, что обычно сопровождается нормализацией уровня трансаминаз и долговременной ремиссией заболевания, ДНК ВГВ исчезает из крови к 5-му месяцу лечения у 60%, к 9-му месяцу – у 80% больных. Снижение уровня виремии на 85% и более к третьему дню от начала лечения по сравнению с исходным служит быстрым и достаточно точным критерием для прогнозирования эффективности терапии.

    источник

    Оставьте комментарий 3,052

    Для выявления вирусных гепатитов в организме медицина широко применяет метод иммуноферментного анализа, основанного на выявлении концентрации и вида антигенов с помощью антител и ферментов. Проводится поэтапно, путем лабораторных исследований, с высокой точностью показаний. В зависимости от количества и класса антител изменяется цвет и концентрация фермента, который использует ИФА и, согласно этому, врач диагностирует заболевание.

    Наличие вирусного гепатита в организме больного определяют с помощью серологического метода анализа крови на присутствие вируса HCV и маркеров (тел и антител), на него указывающих. Иммуноферментный анализ (ИФА) исследует разные вирусы, низкомолекулярные соединения, макромолекулы, их качественный и количественный показатели, используя проявление реакции на их антигены. Для этого применяют фермент, как метку для сигнальной регистрации. Его все шире используют в медицине, поскольку ИФА четко находит строго определенные антигены, не путая их с другими, имеет высокую чувствительность к наличию инвазии при вирусном гепатите.

    Минус такой диагностики — невозможность выявить причину болезни, так как метод указывает только на реакцию иммунной системы организма. На результаты анализа влияет вакцинация, проведенная ранее. За 8 часов перед проведением анализа рекомендуется воздержаться от приема пищи, никотина, алкоголя. Основа ИФА теста — ферментативная и иммунная реакция организма на вирус. Биологические молекулы связываются с клеткой и ее элементами, микроорганизмами, обнаруживают вирус, далее работают ферменты, которые позволяют выразить иммунную реакцию в видимый и измеримый параметр.

    Вирусные гепатиты в организме могут стать причиной возникновения онкологических заболеваний и цирроза печени. Важность своевременной диагностики неоспорима. Первичным способом диагностики является тест ИФА, который с высокой точностью определяет наличие HCV вируса (IgM и IgG) и активность его микроэлементов. В обязательном порядке анализы на вирусный гепатит сдают:

    1. Люди с групп риска (наркозависимые, болеющие СПИДом, работники медицинских и правоохранительных учреждений).
    2. Люди с острой или хронической формой гепатита.
    3. Беременные и планирующие беременность женщины.

    ИФА распознает болезнь на любой стадии. Результаты анализа, в среднем, готовы за 2 дня.

    ИФА тест определяет наличие антител класса IgG, IgM, IgA. При диагностике вирусного гепатита врач не обращает внимания на их тип, так как присутствие любого такого проявления вируса HCV уже указывает на острую или хроническую стадию протекания болезни. На ранних стадиях заболевания повышается уровень IgM (через 5 дней после заражения); на 15—20 день появляются IgG антитела и могут долгое время находиться в крови человека даже после излечения; IgA — появляется через 10—14 дней, снижается после лечения.

    В случае, если IgG и IgA обнаруживаются после применения препаратов и их уровень остается в том же показателе — у носителя хроническая форма гепатита. Важным критерием теста будет четкое определение класса имеющихся антител и их количества. На основании этого можно знать не просто о наличие заболевания, но и стадию его развития. Обнаружение таких элементов в крови больного дает возможность назначить правильное и своевременное лечение для предотвращения более тяжелых последствий.

    Выделяют прямой и не прямой тест ИФА. Этапы прямого:

    1. Сбор биологического материала и размещение его в специальных лунках.
    2. В течение 15—30 мин. антигены прикрепляются к поверхности лунок.
    3. Добавление антител в лунки к найденному антигену. Оставляется все на 1—5 часов.
    4. Удаления неприкрепленных антигенов (выливание содержимого лунок).
    5. Ополаскивание лунок специальным раствором.
    6. Добавления ферментного раствора в лунки. Оставляют на 30 мин.—1 час.
    7. Использование колориметрии (выявление цвета и концентрации окраса содержимого лунки, сопоставление с показателями, которые прямо пропорциональны с концентрацией вируса).

    Использование для диагностики непрямого метода ИФА даст более точный результат.

    Непрямой метод ИФА проходит при применении немеченных антител к найденным антигенам и впоследствии добавлении к ним меченных. Сначала берется кровь у пациента и разносится по лункам на 15—30 мин. (антитела фиксируются с лунками). Потом в них вносятся немеченные антитела на 1—5 часов (образуется связь антител с антигенами — иммунный комплекс). Далее не прикрепленные микроэлементы выливаются с лунок и промываются специальным раствором. На следующем этапе лаборант добавляет в лунки меченные микроэлементы на 15—30 мин. (при этом связываются немеченные с меченными с образованием комплекса «антитело-антитело-антиген»). Повторно удаляются лишние (незакрепленные) при сливании и промывке раствором. Далее вносится фермент, который меняет цвет за 5—30 мин. пребывания в лунках и данные окраса сверяются с данными показателей таблиц. Непрямой метод ИФА более точный.

    Иммуноферментный анализ позволяет выявить наличие инфекции (вирусы гепатита всех видов, ВИЧ, герпес, сифилис, цитомегаловирус, корь, краснуху, вирус паротита, вирус Эпштейн-Барра), является маркером аутоиммунных заболеваний, раковых клеток. Указывает на нарушения репродуктивных функций (изменения уровня тестостерона, пролактина, эстрадиола и прогестерона), сбой работы щитовидной железы, инвазию гельминтами, хламидиями. Эффективен для выявления уреаплазмоза, коклюша, вируса Данге, вируса Западного Нила, Боррелии. Список определений высок, включает много наименований.

    Определение антигена вируса HCV методом ИФА дает 98% точность. Его также используют для повторного тестирования биологического материала при нечетких предыдущих показателях. Наличие IgM антигенов не является показателем на гепатит острой формы и требует дополнительных исследований. При повторном проведении ИФА теста результаты совпадают на 90—100%. В случаях минимального расхождения как показатель принимается среднее значение. Для получения максимальной точности в показателях врачи советуют параллельно проводить биохимический анализ крови. Для проверки результатов после иммуноферментного анализа можно использовать другие способы диагностики.

    ИФА гепатит С определяет эффективно, это один из методов диагностики заболевания, основанный на взаимодействии антигенов и антител. Иммунохимическая реакция путем ИФА (иммуноферментного анализа) позволяет выявить в организме анти-HCV антитела. Метод дает возможность дифференциальным путем диагностировать у человека гепатит С, определить стадию развития заболевания, спрогнозировать его течение. Выявление специфических серологических маркеров позволяет также подобрать эффективное противовирусное лечение патологии.

    Анализ на выявление в крови человека антител к вирусу гепатита типа C проводится путем присоединения к молекуле иммуноглобулина чужеродного микроорганизма (антигена). Присоединенный энзимный фермент играет роль своеобразной метки. Она позволяет проследить за иммунохимической реакцией, а также одним из ее компонентов.

    В качестве компонентов иммуноферментного анализа могут выступать:

    • антитела;
    • антитела, помеченные специальным ферментом;
    • антигены;
    • субстраты ферментов;
    • индикаторные красители.

    При попадании в организм человека вредоносных чужеродных микроорганизмов защитные силы начинают вырабатывать иммуноглобулины (антитела). Впоследствии они воздействуют на антигены и нейтрализуют их. Такое взаимодействие приводит к образованию антитела-антигена, имеющего свои показатели количества и качества. Именно они свидетельствуют о наличии либо отсутствии в организме HCV-инфекции. В случае если результат иммуноферментного анализа положительный, имеет место вирус гепатита типа С.

    Современные технологии в медицине позволяют значительно сократить сроки выявления вируса гепатита, протекающего в острой форме. Благодаря диагностическим системам третьего поколения также представляется возможным повысить специфичность и чувствительность иммунохимической реакции.

    Основным исследуемым материалом при проведении ИФА выступает венозная кровь (в том числе донорская). По показаниям могут производить забор спинномозговой жидкости или околоплодных вод.

    Положительный результат метода ИФА на гепатит типа С не всегда свидетельствует о наличии вирусной инфекции в организме. В более чем 35 % случаев в крови вирусных антигенов не обнаруживается, что приводит к ложноположительному результату.

    Метод позволяет следить за количественными и качественными изменениями, разграничением острой и хронической формы гепатита С. Однако для определения активности патологического процесса он малоэффективен. Для более точного подтверждения наличия HCV-инфекции следует применять также другие методы диагностики патологии.

    Метод выявления видовой и количественной концентрации чужеродных микроорганизмов (антигенов) при помощи иммуноглобулинов и ферментов проводится в несколько этапов. На основании изменения цвета и количественного показателя фермента врач может диагностировать у человека гепатит типа C.

    В большей степени заболеванию подвержены следующие категории людей:

    1. Пациенты, перенесшие хирургические вмешательства, а также заболевания внутренних органов и систем.
    2. ВИЧ-инфицированные (инфицированные вирусом иммунодефицита человека). Большой процент людей, входящих в эту группу, составляют наркозависимые люди.
    3. Медицинские работники.
    4. Сотрудники правоохранительных органов.
    5. Беременные женщины.

    Гепатиты вирусного происхождения нередко приводят к развитию онкологического заболевания (например, рака печени). Именно поэтому сдавать кровь на иммуноферментный анализ следует в первую очередь людям, входящим в основную группу риска, а также больным с острой либо хронической формой гепатита.

    По показаниям врач может назначить проведение метода ИФА пациентам, у которых диагностируется:

    • ИППП (инфекции, передающиесяполовым путём);
    • заболевания вирусной природы происхождения (папилломавирус, герпетическая инфекция, гепатит и т. д.);
    • аллергический характер патологии;
    • иммунодефицитное состояние;
    • онкология.

    ИФА гепатит С позволяет выявлять на ранней стадии, а также в бессимптомной и безжелтушной формах. Как и у любого метода диагностики, он имеет ряд преимуществ и недостатков.

    Среди положительных особенностей ИФА специалисты выделяют:

    1. Точность качественных и количественных показателей. Чувствительность метода превышает другие исследования на выявление гепатита в десятки раз.
    2. Значительное сокращение сроков выявления вирусной инфекции благодаря современным диагностическим системам.
    3. Невысокая цена по сравнению с другими исследованиями на выявление гепатита у человека.
    4. Возможность диагностирования заболевания печени на ранней стадии при отсутствии выраженных симптомов.
    5. Поэтапное проведение исследования с использованием автоматизированных процессов.

    Несмотря на высокую точность ИФА, более чем в 35 % случаев при положительном результате вирус гепатита у пациента не выявляется. Нередко тест не подтверждает патологию, что свидетельствует о сомнительном или отрицательном результате.

    На достоверность исследования в той или иной степени влияет:

    1. Прием лекарственных препаратов.
    2. Нарушения обменных процессов в организме.
    3. Наличие некоторых патологий хронического характера, способствующих активной выработке иммуноглобулинов.

    Учитывая недостатки результатов опыта инвитро методом ИФА, пациенту назначаются дополнительные исследования. Для достоверного обнаружения антител к вирусной инфекции гепатита С применяется метод ПЦР (полимеразной цепной реакции) либо RIBA (рекомбинантный иммуноблоттинг).

    Читайте также:  Госпрограмма по вирусному гепатиту в

    Анализ методом ИФА способен выявить широкий ряд заболеваний у человека.

    Помимо обнаружения антител гепатита всех видов, положительный результат теста может свидетельствовать о наличии в организме следующих патологий:

    • вируса иммунодефицита человека;
    • герпетической инфекции;
    • сифилиса;
    • ИППП (уреаплазмоза, хламидиоза и др.);
    • папилломавируса;
    • цитомегаловируса.

    Исследование также является своеобразным маркером по обнаружению злокачественных новообразований, генетических патологий, гормональных нарушений, а также сбоев в функционировании эндокринной системы.

    Подготовка к сдаче биологического материала на выявление вируса гепатита С подразумевает отказ от приема пищи и медикаментов за 12 часов до проведения исследования. Также необходимым условием является воздержание от употребления алкоголя, жирных, жареных и соленых блюд.

    Основные этапы при проведении прямого теста заключаются в следующем:

    1. Вначале лаборант производит забор крови из вены (либо другого биологического материала), а затем помещает ее в специальные емкости.
    2. Чужеродные микроорганизмы (антигены) в течение 20 минут начинают прикрепляться к ним.
    3. Специалист добавляет иммуноглобулины (антитела) к найденным антигенам для образования иммунной реакции. При этом компоненты оставляются на несколько часов.
    4. Неприкрепленные антигены удаляются путем выливания содержимого из емкостей.
    5. Материал ополаскивается раствором, а затем обрабатывается ферментами и оставляется на один час.
    6. Цвет и концентрация содержимого анализируются благодаря использованию колориметрии.

    Если количественный показатель содержимого превышает допустимые нормы, то это свидетельствует о наличии вируса гепатита С в организме человека.

    Подразумевает взаимодействие непомеченных иммуноглобулинов с антигенами, к которым впоследствии присоединяют помеченные антитела.

    В начале у пациента берется кровь из вены. Затем биологический материал помещается в специальные емкости примерно на полчаса. При этом непомеченные антитела присоединяются к стенкам емкостей. Затем к ним добавляются помеченные антитела. В результате их взаимодействия образуется иммунный комплекс «антитело-антиген».

    По истечении 4 часов содержимое емкостей выливается, а неприкрепленные микроэлементы удаляются. Лаборант присоединяет помеченные антитела к уже образовавшемуся комплексу, при этом происходит иммунная реакция «антитело-антитело-антиген».

    После повторного удаления незакрепленных микроэлементов в емкость добавляется специальный фермент, меняющий цвет и количественные показатели содержимого. На основании полученного результата специалист сверяет данные и делает заключение.

    При проведении ИФА внимание уделяется наличию либо отсутствию антител классов IgA, IgG и IgM. Количественные показатели этих антител сверяются с данными специальной таблицы.

    Согласно ей, расшифровка результатов сводится к следующему:

    1. Если все три типа показателей не определяются, у человека наблюдается полное выздоровление.
    2. При одновременном положительном результате по всем трем показателям, наблюдается острая форма вирусной инфекции.
    3. Если определяются антитела класса IgG, при этом остальные классы не выявлены, то у человека развился постинфекционный иммунитет.
    4. На хронический характер заболевания указывают положительные показатели антител классов IgG и IgA. При этом они остаются неизменными даже после медикаментозного лечения.
    5. При положительном выявлении всех трех типов антител может наблюдаться рецидив хронического характера гепатита.

    Согласно статистическим данным, уровень IgM начинает повышаться через несколько дней после попадания инфекции в организм, что свидетельствует о ранней стадии патологии. IgG антитела обычно проявляются через 2 недели после начала заболевания и находятся в крови на протяжении длительного периода времени (даже после выздоровления). Антитела IgA обнаруживаются через 2 недели, при этом после медикаментозной терапии их концентрация в организме снижается.

    Помните, что гепатит С ИФА положительный не всегда свидетельствует о наличии инфекции. Нередко тест считается ложноположительным, что требует повторной сдачи крови. В некоторых случаях пациенту назначают дополнительные исследования для более точного определения показателей крови.

    Основным критерием при проведении теста является точное выявление количественных и типовых показателей. Они позволяют определить не только наличие вируса, но и форму заболевания. Диагностика гепатита С при помощи современных методов позволит начать своевременную медикаментозную терапию и минимизировать негативные последствия.

    Поверхностный антиген гепатита В в сыворотке крови в норме отсутствует.
    Обнаружение поверхностного антигена (HBsAg) гепатита В в сыворотке подтверждает острое или хроническое инфицирование вирусом гепатита В.

    При остром заболевании HBsAg выявляется в сыворотке крови в последние 1-2 недели инкубационного периода и первые 2-3 недели клинического периода. Циркуляция HBsAg в крови может ограничиваться несколькими днями, поэтому следует стремиться к раннему первичному обследованию больных. Метод ИФА позволяет выявить HBsAg более чем у 90% больных. Почти у 5% больных самые чувствительные методы исследования не обнаруживают HBsAg, в таких случаях этиология вирусного гепатита В подтверждается наличием анти-HBсAg JgM или ПЦР.

    Концентрация HBsAg в сыворотке крови при всех формах тяжести гепатита В в разгар заболевания имеет значительный диапазон колебаний, вместе с тем имеется определенная закономерность: в остром периоде существует обратная связь между концентрацией HBsAg в сыворотке и тяжестью болезни.

    Высокая концентрация HBsAg чаще наблюдается при легких и среднетяжелых формах болезни. При тяжелых и злокачественных формах концентрация HBsAg в крови чаще низкая, причем у 20% больных с тяжелой формой и у 30% со злокачественной антиген в крови может вообще не обнаруживаться. Появление на этом фоне у больных антител к HBsAg расценивается как неблагоприятный диагностический признак; он определяется при злокачественных формах гепатита В.

    При остром течении гепатита В концентрация HBsAg в крови постепенно снижается вплоть до полного исчезновения этого антигена. HBsAg исчезает у большинства больных в течение 3 месяцев от начала острой инфекции.

    Снижение концентрации HBsAg более чем на 50% к концу 3-й недели острого периода, как правило, свидетельствует о близком завершении инфекционного процесса. Обычно у больных с высокой концентрацией HBsAg в разгар болезни он обнаруживается в крови в течение нескольких месяцев.
    У больных с низкой концентрацией HBsAg исчезает значительно раньше (иногда через несколько дней после начала заболевания). В целом срок обнаружения HBsAg колеблется от нескольких дней до 4-5 мес. Максимальный срок обнаружения HBsAg при гладком течении острого гепатита В не превышает 6 месяцев от начала заболевания.

    HBsAg может быть обнаружен у практически здоровых людей, как правило, при профилактических или случайных исследованиях. В таких случаях исследуют другие маркеры вирусного гепатита В – анти HBсAg JgM, анти- HBсAg JgG, анти HBеAg и изучают функцию печени.

    При отрицательных результатах необходимы повторные исследования на HBsAg.
    Если повторные исследования крови в течение более 3 месяцев выявляют HBsAg, такого пациента относят к хроническим больным вирусным гепатитом В.
    Наличие HBsAg – довольно распространенное явление. В мире насчитывается более 300 млн. носителей, а у нас в стране – около 10 млн. носителей.
    Прекращение циркуляции HBsAg с последующей сероконверсией (образование анти-HBs) всегда свидетельствует о выздоровлении — санации организма.

    Исследование крови на наличие HBsAg применяется в следующих целях:

  • для диагностики острого гепатита В:
    • инкубационный период;
    • острый период заболевания;
    • ранняя стадия реконвалесценции;
  • для диагностики хронического вирусного гепатита В;
  • при заболеваниях:
    • персистирующем хроническом гепатите;
    • циррозе печени;
  • для скрининга и выявления больных в группах риска:

  • больные с частыми гемотрансфузиями;
  • больные с хронической почечной недостаточностью;
  • больные с множественным гемодиализом;
  • больные с иммунодефицитными состояниями, в том числе СПИДом.
  • Результаты исследования выражаются качественно – положительный или отрицательный. Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие HBsAg в сыворотке крови. Положительный результат – выявление HBsAg свидетельствует об инкубационном или остром периоде острого вирусного гепатита В, а также при хроническом вирусном гепатите В.

    В норме анти-HBcAg JgG в сыворотке отсутствует.
    У больных анти-HBcAg JgG появляются в острый период вирусного гепатита В и сохраняются на протяжении всей жизни. Анти-HBcAg JgG – ведущий маркер перенесенного ВГВ.

    Исследование крови на наличие анти-HBcAg JgG применяются для диагностики:

  • хронического вирусного гепатита В при наличии HBs антигена в сыворотке крови;
  • перенесенного вирусного гепатита В.
  • Результат исследования выражается качественно – положительный или отрицательный. Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие анти-HBcAg JgG в сыворотке крови. Положительный результат – выявление анти-HBcAg JgG свидетельствует об острой инфекции, реконвалесценции или ранее перенесенном вирусном гепатите В.

    В норме HBeAg в сыворотке крови отсутствует.
    HBeAg можно обнаружить в сыворотке крови большинства больных острым вирусным гепатитом В. Он обычно исчезает в крови раньше HBs-антигена. Высокий уровень HBeAg в первые недели заболевания или обнаружение его на протяжении более 8 недель дает основание заподозрить хроническую инфекцию.

    Этот антиген часто обнаруживается при хроническом активном гепатите вирусной этиологии. Особый интерес к определению HBeAg связан с тем, что его обнаружение характеризует активную репликативную фазу инфекционного процесса . Установлено, что высокие концентрации HBeAg соответствуют высокой ДНК-полимеразной активности и характеризуют активную репликацию вируса.

    Наличие HBeAg в крови свидетельствует о высокой ее инфекциозности, т.е. присутствии в организме обследуемого активной инфекции гепатита В, и обнаруживается только в случае присутствия в крови HBs-антигена. У больных хроническим активным гепатитом противовирусные препараты применяются только при обнаружении в крови HBeAg. HBeAg – антиген – маркер острой фазы и репликации вируса гепатита В.

    Исследование крови на наличие HBe-антигена применяется для диагностики:

  • инкубационного периода вирусного гепатита В;
  • продромального периода вирусного гепатита В;
  • острого периода вирусного гепатита В;
  • хронического персистирующего вирусного гепатита В.
  • Результат исследования выражается качественно – положительный или отрицательный. Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие HBeAg в сыворотке крови. Положительный результат – выявление HBeAg свидетельствует об инкубационном или остром периоде острого вирусного гепатита В или продолжающейся репликации вируса и инфекциозности больного.

    Анти-HBeAg в сыворотке в норме отсутствует. Появление анти-НВeAg антител указывает обычно на интенсивное выведение из организма вируса гепатита В и незначительное инфицирование больного.

    Эти антитела появляются в острый период и сохраняются до 5 лет после перенесенной инфекции. При хроническом персистирующем гепатите анти-НВeAg обнаруживаются в крови больного вместе с НВsAg. Сероконверсия, т.е. переход HBeAg в анти-НВeAg, при хроническом активном гепатите, чаще прогностически благоприятна, но такая же сероконверсия при выраженной цирротической трансформации печени прогноза не улучшает.

    Исследование крови на наличие анти-НВeAg применяются в следующих случаях при диагностике вирусного гепатита В:

  • установление начальной стадии заболевания;
  • острый период инфекции;
  • ранняя стадия реконвалесценции;
  • реконвалесценция;
  • поздняя стадия реконвалесценции.
  • диагностика недавно перенесенного вирусного гепатита В;
  • диагностика хронического персистирующего вирусного гепатита В.
  • Результат исследования выражается качественно – положительный или отрицательный. Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие антител к HBeAg в сыворотке крови. Положительный результат – выявление антител к HBeAg, которые могут свидетельствовать о начальной стадии острого вирусного гепатита В, остром периоде инфекции, ранней стадии реконвалесценции, реконвалесценции, перенесенном недавно вирусном гепатите В или персистирующем вирусном гепатите В.

    Критериями наличия хронического гепатита В являются:

  • бнаружение или периодическое выявления ДНК ВГВ в крови;
  • постоянное или периодическое повышение активности АЛТ/АСТ в крови;\
  • морфологические признаки хронического гепатита при гистологическом исследовании биоптата печени.
  • Вирус гепатита В в крови в норме отсутствует.
    Качественное определение вируса гепатита В методом ПЦР в крови позволяет подтвердить наличие вируса в организме больного и тем самым устанавливает этиологию заболевания.

    Данное исследование дает полезную информацию для диагностики острого вирусного гепатита В в инкубационном и раннем периоде развития заболевания, когда основные серологические маркеры в крови у пациента могут отсутствовать. Вирусную ДНК в сыворотке крови обнаруживают у 50% больных при отсутствии HBeAg. Аналитическая чувствительность метода ПЦР составляет не менее 80 вирусных частиц в 5 мкл, прошедшей выявление ДНК пробы, специфичность – 98%.

    Этот метод имеет важное значение для диагностики и мониторинга течения хронического ВГВ. Примерно 5-10% случаев цирроза и других хронических заболеваний печени обусловлены хроническим носительством вируса гепатита В. Маркерами активности таких заболеваний является наличие HBeAg и ДНК вируса гепатита В в крови.

    Метод ПЦР позволяет определять в крови ДНК вируса гепатита В как качественно, так и количественно. Определяемым фрагментом в обоих случаях служит уникальная последовательность ДНК гена структурного белка вируса гепатита В.

    Обнаружение ДНК вируса гепатита В в биоматериале с помощью ПЦР необходимо для:

  • разрешения сомнительных результатов серологических исследований;
  • выявление острой стадии заболевания по сравнению с перенесенной инфекцией или контактом;
  • контроля эффективности противовирусного лечения.
  • Исчезновение ДНК вируса гепатита В из крови – признак эффективности терапии

    Этот метод дает важную информацию об интенсивности развития заболевания, об эффективности лечения и о развитии резистентности к активным препаратам.
    Для диагностики вирусного гепатита методом ПЦР в сыворотке крови применяются тест-системы, чувствительность которых составляет 50-100 копий в пробе, что позволяет детектировать вирус при его концентрации 5 Х 10^3 -10^4 копий/мл. ПЦР при вирусном гепатите В безусловно необходима для суждения о вирусной репликации.

    Вирусную ДНК в сыворотке крови обнаруживают у 50% больных при отсутствии HBeAg. Материалом для выявления ДНК вируса гепатита В могут служить сыворотка крови, лимфоциты, гепатобиоптаты.

    • Оценку уровня виремии осуществляют следующим образом:
    • менее 2.10^5 копий/мл (менее 2.10^5 МЕ/мл) – низкая виремия ;
    • от 2.10^5 копий/мл (2.10^5 МЕ/мл) до 2.10^6 копий/мл (8.10^5 МЕ/мл) – средняя виремия;
    • более 2.10^6 копий/мл – высокая виремия.

    Существует зависимость между исходом острого вирусного гепатита В и концентрацией ДНК ВГВ в крови больного. При низком уровне виремии процесс хронизации инфекции близок к нулю, при средней – хронизация процесса наблюдается у 25-30% больных, а при высоком уровне виремии острый вирусный гепатит В чаще всего переходит в хронический.

    Показаниями для лечения хронического ВГВ интерфероном-альфа следует считать наличие маркеров активной репликации вируса (выявление HBsAg, HBeAg и ДНК ВГВ в сыворотке крови в течение предшествующих 6 месяцев.).

    Критериями оценки эффективности лечения служат исчезновение HBeAg и ДНК ВГВ в крови, что обычно сопровождается нормализацией уровня трансаминаз и долговременной ремиссией заболевания, ДНК ВГВ исчезает из крови к 5-му месяцу лечения у 60%, к 9-му месяцу – у 80% больных. Снижение уровня виремии на 85% и более к третьему дню от начала лечения по сравнению с исходным служит быстрым и достаточно точным критерием для прогнозирования эффективности терапии.

    источник