Меню Рубрики

Вирусный гепатит с единиц

Современная диагностика гепатитов требует не только выявления причины, но и определения стадии болезни, интенсивности поражения печени. Это необходимо для выбора оптимального варианта лечения, прогноза жизни пациента.

Вирусная нагрузка при гепатите С — один из наиболее информативных способов решения проблемы и ответа на вопросы врача. Он основан на качественном и количественном анализе состава рибонуклеиновых кислот (РНК) вируса в крови больного человека. По полученным показателям можно с достоверностью судить о скорости прогрессирования патологии печени.

Диагностика вирусного гепатита С проводится по специальным чувствительным тестам. Качественный анализ подтверждает или отрицает наличие вируса в клетках крови больного. Результат дается в форме (+) или (-), «да» или «нет». Указывает на заболевание даже в ранней стадии, но не дает возможности установить интенсивность развития поражения печени, «силу» вируса.

Для проведения достаточно специального экспресс-теста и капли крови. Он позволяет обнаружить антитела к вирусу. Можно приобрести в аптеке. Состоит из комплекта пластиковой полоски, пипетки и игольчатого приспособления для прокола пальца. Кровь забирается пипеткой и помещается в указанный отсек.

Результат получают спустя 10–15 минут. Появление двух полосок говорит «да», одной — «нет». Бывает видно еще одно слабо окрашенное пятно. Его можно расценить, как низкую концентрацию антител.
После получения положительного ответа пациент должен обязательно проходить обследование для точного установления диагноза.

Качественные нарушения в организме при гепатите С подтверждаются клинико-биохимическими исследованиями. О высокой степени поражения печеночных клеток и нарушенных функциях органа говорят следующие результаты:

  • рост СОЭ, гемоглобина;
  • обнаружение уробилина и билирубина в моче;
  • увеличенные в разы трансферазы (аланиновая и аспарагиновая);
  • снижение протромбинового индекса и альбуминов;
  • рост фруктозо-1-фосфатальдолазы Ф-1-ФА, тимоловой пробы; значительное повышение в сыворотке холестерина, триглицеридов, билирубина.

Подтверждением нарушенных функций печени являются ферменты:

  • щелочная фосфатаза;
  • сорбитдегидрогеназа;
  • лактатдегидрогиназа;
  • гаммаглутаминтранспептидаза;
  • гаммаглутамилтрансфераза.

Их изучают в биохимических лабораториях поликлиники. Резкое отклонение состава требуют дополнительных количественных анализов на вирусную нагрузку.

Вирус гепатита С в отличие от других имеет множество штаммов (генотипов). Выделено более 9 разновидностей, кроме того, каждый еще подразделяется на 3–4 подтипа. Это предоставляет вирусу возможность мутировать.

Весь генетический материал заключен в РНК и находится в ядерных структурах клетки микроорганизма. Количественный метод используется при выявленном бесспорном диагнозе, когда необходимо установить форму болезни и стадию воспалительного процесса.

Подсчет производится по числу клеток вируса в 1 мл крови пациента. Чем больше РНК вируса гепатита С, тем выше активность поражения. Это указывает на угрозу прогрессирования болезни, распространения на здоровые клетки печени. Если численность клеток ненамного выше нормы, то результат все равно считается вирусной нагрузкой.

Для определения количества РНК в «больных» клетках применяют иммунологические методы. Они заключаются в выявлении специфических антител или, наоборот, антигенов при воздействии известным реактивом.

В методике иммуноферментного анализа (ИФА) в сыворотку пациента вводят стандартные антитела, меченные ферментами. Если в крови имеются антигенные структуры вируса гепатита С, то комплексы антиген+антитело изменяют цвет красящего вещества. Количественный подсчет основан на пропорциональном соответствии молекул антигена.

Способ иммуноблоттинга — более чувствителен, сочетает ИФА и предварительное разделение плазмы электрофорезом. Позволяет выявить маркеры гепатита С (антитела и иммуноглобулины). Для исследования используют РНК-блоттинг, белок-блоттинг. Время проведения анализа от трех часов до двух суток.

Радиоиммунологический анализ (РИА) — отличается использованием меченых изотопов для количественной оценки компонентов реакции. Последующая радиометрия выдает окончательную цифру. Метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) — не является иммунологическим. Его значимость трудно переоценить.

Дело в том, что даже при крайне малом содержании специфической генной информации из РНК проводится репликация (копирование) цепи аминокислот, что увеличивает общую массу субстрата. Поэтому исследование генома считается наиболее достоверным. Показывает положительный результат при заражении уже на пятый день, задолго до проявления клинической симптоматики. У здорового человека результат будет отрицательным.

Одна из рекомендаций ВОЗ — троекратное исследование методом ПЦР для выявления РНК вируса гепатита С. Анализ называется «тест 321».

Эксперты сделали вывод, что только троекратное подтверждение вирусной нагрузки не менее 60 МЕ/мл считается достоверным диагностическим признаком даже на фоне отсутствия других маркеров.

Обычно кровь на ПЦР во время гепатита С сдают в первый раз до лечения, затем после первой, четвертой, двенадцатой и двадцать четвертой недели. Исследование после трех месяцев лечения (12 недель) считается показателем эффективности применяемых препаратов.

Метод раздвоенной ДНК(R-DNK). Считается более дешевым, но менее результативным. Подходит для государственных медицинских учреждений. Позволяет проводить исследование сразу больших коллективов людей. Способен выдать негативный результат при наличии вируса. Более рационально этот метод рекомендуется использовать в качестве дополнительного обследования.

Способ транскрипционной амплификации (ТМА). Наиболее простой и дешевый при достаточной эффективности. Подходит для диагностики гепатита С. Критерием патологии и степень заразности больного при R-DNK считается уровень выше 500 ME, при TMA — от 5 до 10 ME.

Чем больше содержание вируса в крови человека, тем он опаснее для окружающих своей заразностью. Эффективность лечения зависит от того, как удается снизить количество вируса. Этот критерий учитывается для прогноза выздоровления.

Содержание возбудителя проверяют в динамике. Если удается уменьшить вирусную нагрузку, то медикаменты считаются эффективными, можно переводить больного на поддерживающие дозировки. При отрицательной динамике анализа необходима корректировка дозы или замена препаратов. Общую оценку состояния пациента дает одновременное сопоставление с результатами клинических и биохимических тестов.

Для первого исследования необходим недельный срок. Динамика повторных анализов проводится спустя месяц. При положительном анализе на антитела у людей без симптомов болезни необходимо повторять исследование вирусной нагрузки ежегодно.

По итогам выдаются общие качественные результаты (отрицательный или положительный). При выявлении вируса подробно указывается количественное значение с характеристикой степени зараженности.

Расшифровка вирусной нагрузки при гепатите С проводится в международных единицах (МЕ/мл):

  • высоким считается показатель — свыше 800 000 МЕ/мл;
  • низкой вирусной нагрузкой — меньше 800 000.

Одновременно учитывается в первом случае более 2 млн копий/мл, во втором — менее. При высокой нагрузке говорят об активном воспалительном процессе. В таблице указана более подробная трактовка степени нагрузки.

Степень Вирусная нагрузка в МЕ/мл крови
низкая от 600 до 30000
средняя от 30000 до 800000
высокая свыше 800000

Наиболее частое значение при первичном исследовании на фоне признаков гепатита — примерно 1 100 000 МЕ/мл. Результат считается положительным. Назначается весь комплекс терапии. Если обнаруживают от 400 000 ME и более, считается что вирус не просто присутствует, но и активно размножается, заражая окружающих. Небольшое снижение — показатель благоприятного прогноза на выздоровление.

Отрицательный результат и эффективное лечение подтверждаются полным отсутствием генного материала РНК вируса гепатита С в крови. Его считают достоверным при повторах с большими перерывами. Увеличение вирусной нагрузки после окончания курса лечения и хороших показателей указывает на вероятность рецидива гепатита.

Если в заключении написано: «РНК ниже диапазона измерений», это значит, что генетический материал вируса имеется, но слишком мал для определения конкретного количества данным методом. Подтвердить анализ или опровергнуть можно только с помощью способа полимеразной цепной реакции.

При выявлении положительного анализа на гепатит С у беременной женщины с повышенной вирусной нагрузкой значительно повышается риск заражения плода от больной матери. Приходится решать вопрос о целесообразности сохранения беременности, поскольку применение лекарственных препаратов для лечения может вызвать тяжелые генные мутации у ребенка.

источник

Любой человек, инфицированный вирусом гепатита C (ВГС), рано или поздно сталкивается с таким понятием как вирусная нагрузка (ВН) и с вопросом о его расшифровке. ВГС относится к сравнительно недавно открытым вирусам — до 80-х годов XX века он не идентифицировался как самостоятельная вирусная частица.

Хотя ученые и замечали, что обнаруживаемый в крови больных гепатитом биоматериал не принадлежит ни к типу A, ни к типу B. С 90-х годов прошлого века стало возможным выявлять возбудитель гепатита C в анализе крови.

Многозначные числа в показателях анализа нередко приводят пациентов в замешательство, ведь иногда в результатах можно увидеть цифры с шестью нолями. Что это такое, для чего определяется и что означает вирусная нагрузка при гепатите C, расшифровка которой вызывает столько вопросов?

Показатель, называющийся вирусная нагрузка при гепатите С, измеряется для определения количества вирусных частиц, находящихся в крови пациента, инфицированного ВГС. Сами по себе вирусы в отличие от бактерий не являются полноценными микроорганизмами, которые могли бы размножаться вне клеток инфицированного организма. Они представляют собой участок, или отрезок, генетического материала, который при попадании в чужие клетки начинает эти клетки разрушать.

Вирус гепатита C является ничем иным как цепочкой РНК (расшифровка — «рибонуклеиновая кислота»), покрытой белками и «запрограммированной» на поражение клеток печени.

Наблюдение за параметром ВН позволяет эффективно контролировать хронические формы патологии, а при острых формах болезни — организовывать оптимальную тактику лечения.

При положительном качественном тесте на наличие ВГС в крови (проще говоря, при обнаружении в крови РНК вируса) возникает необходимость в уточнении количественного показателя этого параметра, то есть, должна быть определена вирусная нагрузка.

Гепатит C «отмечается» в крови высокой или низкой концентрацией генома вируса, в зависимости от чего и ВН имеет соответствующее название. Сегодня для определения ВН пользуются тремя видами лабораторных анализов.

  1. Метод ПЦР (расшифровка — «полимеразная цепная реакция») является наиболее чувствительным именно к ВГС, поэтому применяется чаще других методик для определения ВН.
  2. Еще один достаточно простой и недорогой метод — исследование разветвленной ДНК (расшифровка — «дезоксирибонуклеиновая кислота»), но его недостатком считается слабая чувствительность к низким концентрациям ВГС.
  3. Для тестирования ВН часто используют транскрипционную амплификацию, способную обнаружить в пробах крови следы нуклеиновых кислот.

Для исследования забирается венозная кровь, поэтому для подготовки к анализу достаточно ничего не есть с утра и не курить хотя бы за полчаса до сдачи анализа.

При обнаружении ВГС проводится несколько тестов количественного анализа, требующих расшифровки:

  • первоначальный, для назначения лечебных мероприятий;
  • повторный — через месяц после начала терапии;
  • через 3 месяца от начала терапии;
  • через 6 месяцев.

Такие наблюдения дают возможность прогнозировать активность ВГС, предполагаемую скорость размножения вируса и вероятность ремиссий.

Единицами измерения виремии (концентрации вируса в крови) при гепатите C в нашей стране до недавнего времени были т.н. вирусные копии на 1 мл крови.

Однако во всем мире принято измерение вирусной нагрузки в МЕ/мл (расшифровка — «международные единицы» на миллилитр).

Это имеет значение при сдаче анализов в разных медицинских учреждениях, ведь в некоторых лабораториях продолжают проводить исследования по старинке и указывать результаты в копиях.

О чем же говорит расшифровка вирусной нагрузки при гепатите C?

Под референсными, или нормальными, показателями ВН подразумевается безвирусная норма (или отрицательный качественный анализ). То есть в норме вирусы в крови не обнаруживаются, никакой дополнительной расшифровки не требуется.

При уровне виремии, не превышающем 800 000 МЕ/мл, приблизительно равном 2 млн копий на мл, расшифровка показателя — низкая ВН. Низкая вирусная нагрузка при гепатите C имеет более благоприятные прогнозы для лечения и меньшую вирусологическую опасность в плане заражения ВГС окружающих людей.

При уровне вирусемии, превышающем 8×10^5, расшифровка показателя — высокая ВН. Высокая вирусная нагрузка при гепатите C является поводом для увеличения планируемых сроков терапии, особенно если контрольные (повторные) тесты показывают медленное снижение количества вирусов в крови.

Снижение ВН при гепатите C может носить как спонтанный, так и следственный характер (то есть являться результатом правильно подобранной терапевтической схемы).

Но прежде чем приступить к терапии, необходимо не только установить концентрацию вирусов в крови, но и провести расшифровку генотипа вируса, проверить наличие противопоказаний к противовирусной терапии у пациента и другие факторы, которые могут стать препятствием для назначения определенных препаратов.

Сегодня для лечения гепатита С применяются различные схемы. Наряду с современными ингибиторами вирусной протеазы и полимеразы (симепревир, софосбувир, ледипасвир, даклатасвир и другие) используются и традиционные подходы с применением интерферона и рибавирина. Хотя, нужно отметить, что последние и уходят в прошлое, как малоэффективные и имеющие большое количество побочных эффектов.

Эффективность терапевтических схем зависит от различных факторов:

  • генотипа вируса;
  • возраста и пола пациента;
  • генотипа самого пациента;
  • давности инфицирования;
  • применения пациентом конкретных препаратов.

О диагностике гепатита С и вирусной нагрузке расскажет врач-гастроэнтеролог в следующем видео:

источник

Вирусная нагрузка, или виремия – это количество генетического материала возбудителя в биологическом материале обследуемого человека. В случае с вирусным гепатитом С ген возбудителя представлен РНК (рибонуклеиновой кислотой) вируса, а ищут его в венозной крови. Установить уровень вирусной нагрузки позволяет такой современный лабораторный диагностический метод диагностики как анализ ПЦР (полимеразной цепной реакции). Виремия определяется МЕ (международными единицами) в 1 мл крови или количеством копий РНК в 1 мл крови. Эти показатели можно конвертировать друг в друга: 1 МЕ приблизительно соответствует 4 копиям РНК. Те это показатель количества копий в 1 миллилитре крови пациента, например нагрузка 4,6*10’5 МЕ означает 460000 МЕ или 1,840 млн копий РНК в миллилитре крови.

Читайте также:  Охвата прививкой против вирусного гепатита в

Вирусный антиген в крови пациента ищут тогда, когда получают положительный результат анализа на антитела к вирусу гепатита С методом иммуноферментного анализа (ИФА). Что значит выявление антител к гепатиту С? Антитела(иммуноглобулины) к вирусу гепатита С могут быть в крови человека либо если он перенес заболевание ранее, либо, если он и сейчас заражен. Выявление вирусного генетического материала позволяет установить причину наличия антител в крови человека.

Виремия влияет на течение и агрессивность заболевания, а также на дальнейший прогноз для здоровья и жизни пациента. Высокие ее цифры указывают на высокую вирусную активность с риском высоких фиброзов в печени, а у беременных – на реальную угрозу внутриутробного заражения плода гепатитом С. Чем выше уровень виремии, тем опаснее болезнь и тем хуже ее прогноз. Низкая вирусная нагрузка и снижение ее в процессе противовирусного лечения является для пациента хорошим прогностическим признаком, высокий же уровень виремии и отсутствие ее снижения в ответ на проводимое лечение – неблагоприятным сигналом. Уровень виремии следует регулярно контролировать во время прохождения курса лечения. Ответная реакция вируса гепатита С является показательной и определяет длительность противовирусной терапии, которая может составлять от 12 до 24 недель.

Для установления РНК возбудителя в крови и определения уровня вирусной нагрузки может использоваться несколько лабораторных методов: ПЦР (самый распространенный), разветвленной ДНК и ТМА.

ПЦР-анализ может обнаружить вирусную РНК гепатита С даже тогда, когда его количество в крови обследуемого человека минимально. Это дорогостоящий вид исследования, поскольку для него необходимы дорогие тест-диагностикумы. Суть метода состоит в том, что с помощью определенного температурного воздействия на пробирку с биоматериалом достигают множественного копирования РНК. Таким способом искусственно увеличивают количество генетического материала вируса в пробе.

В подготовленную таким образом пробу добавляют красящий фермент, который взаимодействует с РНК возбудителя, если таковой в пробе имеется. По плотности окрашивания проводят оценку вирусной нагрузки, сравнивая полученный цвет с цветной шкалой.

С целью обнаружения РНК вируса может проводиться один из трех видов ПЦР:

Качественный. Дает ответ на вопрос, есть ли вирус гепатита С в крови обследуемого. В норме получают ответ: «РНК не обнаружена». Этот тест на обнаружение антигена возбудителя необходим для установления факта заражения гепатитом С.

Количественный. Используют для контроля эффективности противовирусного лечения.

Генотипирование. Применяют для уточнения диагноза – установления генотипа возбудителя.

Чувствительность этого теста позволяет обнаружить антиген при его содержании в крови от 50 МЕ/мл, а ультра тест имеет чувствительность от 15 МЕ/мл. В течение всего курса лечения с помощью количественного ПЦР уровень виремии устанавливают несколько раз: до начала лечения (первичный уровень), через 2 недели и при необходимости через 4 недели (в зависимости от длительности курса и вирусологического ответа ), также спустя полгода с начала лечения. Установление вирусной нагрузки после его окончания считается показательным, поскольку подтверждает или отрицает выздоровление пациента.

В отличие от качественного, количественный анализ ПЦР может иметь много вариантов ответа:

«РНК не обнаружено» – такой вариант ответа возможен тогда, когда вируса в крови пациента нет;

«ниже диапазона измерений» – такой ответ лаборатория может выдать, если качественным методом ПЦР следы возбудителя были обнаружены, а чувствительность количественного метода не позволила определить уровень виремии;

при обнаружении вирусной РНК лаборатория выдает результат в МЕ/мл или копиях/мл.

Зачастую цифровые результаты количественного анализа ПЦР выдаются на бланке с таблицей, в первой колонке которой указан искомый генотип возбудителя, во второй – полученный результат, в третьей – норма. Под нормой в каждой лаборатории принимаются диапазоны показателей, установленные производителями тест-систем для проведения анализа.

Это устаревший метод, основным преимуществом которого является быстрота проведения и возможность одновременного проведения обследования нескольких пациентов. Минимальное количество РНК вируса в крови с его помощью обнаружить не удастся, поскольку он имеет низкую чувствительность – не менее 500 МЕ/мл. Используют метод разветвленной ДНК только для документального подтверждения наличия возбудителя в крови, когда этот факт уже установлен.

Суть метода заключается в использовании двух нуклеотидных зондов. Первый из них одним концом связывается с вирусной РНК, а другим фиксируется искусственно созданной молекулой-усилителем. Эту молекулу называют разветвленной ДНК. После процесса гибридизации с РНК вируса в среду вносят второй зонд, который подходит по структуре к молекуле-усилителю. Он помечен специальным красящим веществом. Таким способом усиливают сигнал, издаваемый нуклеотидом вируса, и улавливают его с помощью химический люминесценции.

Это самый высокочувствительный лабораторный метод определения и подсчета количества вирусного генома в крови. С помощью этого анализа можно обнаружить даже незначительное количество возбудителя в крови – 5-10 МЕ/мл. В настоящее время в российских лабораториях метод недостаточно распространен.

Расшифровкой результатов количественных анализов ПЦР занимается лечащий врач. В научной медицинской литературе встречается расшифровка анализа в виде такой таблицы:

Референсные показатели, МЕ/мл

Уровень вирусной нагрузки

Вирус не определяется (отсутствует) или его количество ниже порога чувствительности теста

до 400 тысяч низкая нагрузка

400-800 тысяч средняя нагрузка

Требуется назначение стандартной схемы лечения или продолжение курса

свыше 800 тысяч высокая нагрузка

Очень большая вероятность развития осложнений гепатита (фиброза, цирроза)

Кроме непосредственного установления уровня виремии, для расшифровки результатов анализа очень важна ее динамика во времени: если в течение курса наблюдается положительная динамика уровня вирусной нагрузки, то есть она имеет тенденцию к уменьшению, это расценивается, как хороший вирусологический ответ на терапию; например, если БВО ( быстрый ответ не получен через 2 недели) после начала приёма препаратов и вирус ещё обнаруживается в крови при сдачи качественного анализа ПЦР, но наблюдается снижение вирусной нагрузки в 100 крат и более , через 1-2 недели терапии это можно считать благоприятным сигналом к продолжению лечения если проводимая терапия не оказывает влияния на уровень виремии или на фоне лечения наблюдается отрицательная ее динамика, то есть количество возбудителя в крови увеличивается, стоит задуматься о резистентности (устойчивости) возбудителя к используемой схеме лечения; если на фоне лечения резко увеличился уровень вирусной нагрузки, говорят о «вирусном прорыве». Такой результат анализа является крайне неблагоприятным и указывает на значительное ухудшение состояния больного.

При обнаружении в анализе ПЦР «вирусного прорыва» или отрицательной динамики виремии врачу необходимо быстро принимать решение, как снизить вирусную нагрузку у пациента. В зависимости от генотипа возбудителя к стандартной безинтерфероновой схеме лечения добавляют дополнительные препараты («Рибавирин», «Пегинтерферон»). Отзывы людей о вирусной нагрузке при гепатите С Большое количество пациентов, болеющих хроническим вирусным гепатитом С, сами умеют толковать цифры, полученные после анализа ПЦР. Существует много интернет-сообществ и специализированных форумов, на которых пациенты обмениваются результатами анализов, отзывами об эффективности лечения. Однако каждому больному гепатитом С необходимо помнить, что одинаковых случаев не бывает и использовать отзывы других пациентов как руководство к действию нельзя. Одних результатов теста на вирусную нагрузку недостаточно для оценки состояния больного: здесь нужна полная клиническая картина, результаты других лабораторных и инструментальных методов исследования, данные о проводимой противовирусной терапии и т.д.

источник

Вирусный гепатит С – это антропонозная инфекция, передающаяся парентеральным путем. Инкубационный период от 2 до 26 недель. Во время скрытого периода вирус адаптируется в организме и активно размножается.

Инфекция поражает гепатоциты, часто протекает бессимптомно или с малыми проявлениями и приводит к циррозу или раку печени. На начальных стадиях гепатит С имеет неспецифические симптомы, которые свойственны ряду других заболеваний (снижение аппетита, астенический синдром).

Нередко болезнь выявляется случайно, или когда развиваются необратимые процессы в печени. Чтобы подтвердить или исключить факт инфицирования проводят ИФА. Исследованию подвергается кровь пациента на антитела(иммуноглобулины) к вирусу гепатита С.

При положительном ответе, перед врачом стоит задача выявить причину наличия иммуноглобулинов в крови и назначить адекватную терапию, с учетом стадии и активности процесса. Поэтому, следующим этапом проводится количественный анализ на вирусную нагрузку при гепатите С. Это исследование крови, с целью качественного и количественного определения генетического материала возбудителя в единице объема.

Вирус гепатита С примитивное существо, генетический материал которого это рибонуклеиновая кислота (РНК), представляющая собой длинную цепочку из нуклеотидов. При гепатите С вирусная нагрузка определяется в качественном варианте (по присутствию иммуноглобулинов (антител) к вирусу гепатита С) и количественном (по количеству вирусного генетического материала в 1 мл исследуемой крови).

Качественная оценка выдается в виде положительного или отрицательного ответа. Присутствие иммуноглобулинов в крови может говорить, как о заболевании, так и о перенесенной инфекции, поэтому при положительном результате надо приступить к количественному анализу.

В количественном анализе измеряется сколько копий РНК в 1 мл, либо оценка дается в международных единицах (МЕ). Обе единицы измерения легко конвертируются друг в друга. 1МЕ = 4 копии РНК.

Вирус гепатита С непрерывно мутирует. Статистически выявлено 9 разновидностей, и у каждой 3-4 подтипа. Благодаря генетическому разнообразию вируса, организму крайне сложно выработать иммунитет. Каждый генетический вариант имеет особенности в лечении.

Уровень виремии важный показатель. Регулярный контроль вирусной нагрузки дает возможность врачу оценить активность и агрессивность процесса, длительность предстоящей терапии, результативность проводимого лечения, прогноз для здоровья и жизни пациента.

Популярный метод исследования, позволяющий выявить вирусную РНК даже в малых количествах. Минусом является только дороговизна анализа. На исследуемый биоматериал воздействуют теплом, добиваясь активного размножения вирусной РНК и увеличения массы исследуемого субстрата.

Затем добавляется специальный краситель, который вступает в реакцию с РНК, и по специальной шкале оценивается интенсивность окрашивания, после чего делается вывод о вирусной нагрузке. В зависимости от цели исследования, ПЦР бывает трех видов: качественная, количественная и генотипирование. Чувствительность метода от 50 МЕ в 1 мл.

Недостаток этого метода в малой чувствительности (от 500 МЕ в 1мл), невозможности генотипирования, высокой частоте ложноотрицательных результатов. Преимущества в небольшой стоимости и возможности исследования сразу нескольких образцов. Врачи применяют метод разветвленной ДНК у пациентов с уже подтвержденным диагнозом, для оценки качества лечения.

Основан на использовании двух нуклеотидных зондов. Первый одним концом связывается с молекулой РНК вируса, а другим с молекулой-усилителем. Затем вносят второй зонд, помеченный красящим веществом, и по структуре подходящий к молекуле-усилителю. Образующийся сигнал фиксируется с помощью хемилюминесценции.

Обладает высокой чувствительностью (от 5-10 МЕ/мл). Анализ проводится при относительно низких температурах. Процедуре амплификации подвергаются РНК вируса, результат фиксируется с помощью люминометра.

В норме РНК вируса в крови не определяется. В таблице показаны общепринятые оценочные значения.

Низкая нагрузка Высокая нагрузка
Менее 800 000 МЕ/мл Более 800 000 МЕ/мл

Результаты тестов вирусной нагрузки при гепатите С расшифровывает врач. Кроме цифровых значений, учитывается еще динамика изменений показателей вирусной нагрузки. Низкая нагрузка говорит о положительной динамике лечения, низкой заразности.

Высокая вирусная нагрузка означает, что болезнь находится активной фазе. Вирус реплицируется, поражая новые клетки, и пациент активно инфицирует контактные лица. Прогноз заболевания неблагоприятный, необходимо срочно начинать противовирусную терапию, либо менять текущую схему лечения.

Маловероятно вылечить гепатит С без проведения тестов на вирусную нагрузку. Анализы сдаются перед началом терапии, затем на 4, 12 и 24 неделях терапии. Исходя из динамики показателей на этих сроках, врач делает выводы о результативности терапии и возможной ее коррекции.

В случае, если на 12 неделе отсутствует снижение виремии в 2 раза, терапия неэффективна. Если на фоне проводимого лечения вирусная нагрузка увеличилась, то речь идет о вирусном прорыве. Это говорит об ухудшении состояния пациента и необходимости срочно менять терапию. Когда на 24 неделе РНК вируса не обнаруживается в крови – это устойчивый вирусологический ответ, схема лечения подобрана правильно и прогноз благоприятный.

Существуют категории граждан, которые подвержены высокому риску заражения гепатитом С. Этим людям предложено ежегодно в плановом порядке обследоваться на предмет заражения.

  • Работники системы здравоохранения.
  • Близкие родственники и лица, контактирующие с больными.
  • Инъекционные наркоманы.
  • Лица, ведущие беспорядочную половую жизнь без использования барьерных методов контрацепции.
  • Имеющие в анамнезе гепатит С, проходившие лечение.
  • Любители татуажа и пирсинга.
  • Пациенты, перенесшие множественные хирургические вмешательства и переливания крови и ее компонентов.
  • Дети, рожденные от инфицированных матерей.

Важно знать, что возможные результаты и их расшифровка могут иметь погрешности. Вероятные причины неточных результатов:

  • Попадание в биоматериал посторонних примесей.
  • Неправильное хранение образцов.
  • Погрешности работы медицинского персонала при проведении исследования.
  • Несоблюдение пациентом режима перед сдачей анализа.
  • Голодный период не менее 8 часов. Перед сдачей анализа разрешается пить воду.
  • За двое суток отказаться от употребления алкоголя, жирной, жаренной пищи, крепкого кофе, чая.
  • За сутки отказаться от приема лекарственных препаратов.
  • За час до исследования не курить.
  • Рекомендовано избегать силовых нагрузок накануне исследования.
  • Перед анализом нельзя проходить физиотерапевтические процедуры, массаж.

Для наиболее точных результатов гепатологи рекомендуют сдавать анализы в одной и той же лаборатории. Результаты разных лабораторий часто отличаются друг от друга. Это мешает лечащему врачу объективно оценить состояние пациента, динамику процесса и выбрать верную тактику лечения.

Читайте также:  Современные схемы лечения вирусного гепатита с

источник

Основной источник заражения гепатитом С – больной человек. Иногда тот, кто является носителем вируса, не проявляет клинические симптомы гепатита ц. Путь заражения гепатовирусом – через кровь. Это может произойти при любом контакте крови зараженного человека с кровью здорового человека. Чаще всего заражаются следующим образом:

  • дети от матери при родах;
  • медицинские работники во время проведения манипуляций;
  • у взрослых чаще всего гепатит проникает в кровь из-за посещения маникюрных салонов, салонов татуажа и пирсинга, где могут работать с инструментами без должной дезинфекции;
  • заболевание часто обнаруживается у наркоманов, вводящих себе в вену наркотические препараты;
  • половой путь хотя и редко, но тоже может спровоцировать заражение гепатовирусом.

Более подробно об основном источнике инфицирования Гепатитом Ц читайте тут.

Поскольку заболевание является наиболее распространенной разновидностью, а также от него нет вакцины, то оно признано одним из наиболее приоритетных в диагностике. Именно поэтому во всех государственных клиниках анализ крови на гепатит С бесплатный. При себе достаточно иметь лишь направление от лечащего врача на сдачу анализа.

В поисках, где сдать анализ на гепатит, пациенты часто пользуются услугами частных клиник и лабораторий. Не стоит не доверять частным лабораториям, поскольку зачастую именно такие диагностические центры имеют более мощное оборудование, нежели государственные учреждения. Поэтому результаты современных лабораторий могут не просто не отличаться, а даже быть более точными, нежели результаты в государственных лабораториях. Некоторые категории пациентов специально сдают кровь на гепатит несколько раз в различных центрах, чтобы сравнить результаты анализа крови на гепатит и избежать ложного диагноза.

Сразу вас успокоим, гепатит С излечим. На сегодняшний день, в мире уже появились препараты от гепатита С с эффективностью приближенной к 100% Современная фарм промышленность создала лекарства, которые практически не имеют побочных эффектов. Многие пациенты получают первые результаты в виде облегчения симптомов и снижения вирусной нагрузки уже через неделю приёма. Подробнее о индийских дженериках от гепатита с читайте в нашей отдельной статье.

На рынке компаний по перевозке индийского лекарства от гепатита С «GalaxyRus (Galaxy Super Speciality)» отлично зарекомендовала себя. Данная компания успешно помогает людям излечиться от недуга больше 2-х лет. Отзывы и видео довольных пациентов вы можете посмотреть здесь. На их счету более 4000 людей, которые выздоровели благодаря купленным препаратам. Не откладывайте свое здоровье в долгий ящик, перейдите на сайт www.galaxyrus.com или позвоните по номеру 8-800-3500-695 , + 7 (495) 369 00 95.

На результаты анализов могут повлиять следующие факторы: прием лекарственных средств, прием пищи, перегрузки организма, как моральные, так и физические, употребление алкоголя, табакокурение, физиотерапевтические процедуры, время забора крови. Все выше перечисленные показатели могут сделать так, что норма уже не будет соблюдаться и появятся отклонения, которые по сути таковыми не являются. Поэтому перед обследованием пациента врач расскажет, какие анализы надо сдать и как к ним подготовиться. Можно привести для примера общие правила подготовки к анализу на гепатит С:

  1. нужно сдать кровь утром, с 8 до 11 часов;
  2. в день забора крови не курить и не нервничать;
  3. за восемь часов – не пить, за четырнадцать часов – не есть;
  4. сказать врачу о приеме каких-либо лекарственных средства и при необходимости прекратить их прием на время;
  5. исключить алкоголь любой крепости за пару дней до того, как сдают кровь.

Для того, чтобы определить наличие заболевания, необходимо сделать ряд диагностических процедур:

  1. общий анализ крови при гепатите С;
  2. биохимический анализ крови при гепатите на активность трансаминаз;
  3. полимеразно-цепную реакцию на наличие рнк вируса гепатита С;
  4. при обнаружении возбудителя делается анализ на генотип гепатита;
  5. ультразвуковое исследование печени может дополнительно подтвердить наличие поражений паренхимы.

Анти-HCV – это анализ на наличие иммуноглобулинов к вирусным белкам. Если анализ на антитела показывает положительный результат, то это свидетельствует о заражении человека гепатовирусом или ранее перенесенном заболевании. Специфические иммуноглобулины начинают появляться как реакция организма на белок ядра гепатовируса и фрагменты его генома. Первые антитела в большинстве случаев появляются в первые три-шесть месяцев заражения вирусом, но в редких случаях они не попадают в кровь более года.

Иммуноферментный анализ длительное время был и остается одним из основных диагностических способов определения возбудителя в организме человека. Анализ достаточно высокочувствителен и дает возможность в 95 процентах случаев обнаружить хроническую форму течения заболевания. Выполняется несколько дней. Но, тем не менее, несмотря на высокую информативность анализа, существует риск получить ложный результат – как положительный, так и отрицательный. Например, пациенты, у которых заболевание находится в острой стадии, получают правильный ответ лишь в среднем в 60 процентах случаев. Это происходит из-за того, что антитела в среднем появляются в течение четырех-пяти месяцев от заражения, поэтому до этого времени ИФА будет показывать отрицательный результат. Ложноотрицательные реакции будут наблюдаться у тех пациентов, которые лечатся от сифилиса, онкологического заболевания или страдают аутоиммунными патологиями. В этом случае чувствительность колеблется в диапазоне 50-95 процентов. В восьми процентах ИФА у ВИЧ инфицированных также получается ложноположительный результат. Поэтому можно утверждать, что погрешности ИФА не позволяют точно поставить диагноз гепатит.

Показатель Значение
IgM+, core IgG+, (NS и IgG)-, RNA (=РНК) HCV+ Острая форма заболевания
IgM+, core IgG+, (NS и IgG)+, RNA (=РНК) HCV+ Хроническая форма
IgM-, core IgG+, (NS и IgG)+, RNA (=РНК) HCV- Латентная фаза
IgM-, core IgG+, (NS и IgG)+/-, RNA (=РНК) HCV- Выздоровление пациента после недуга

Этот анализ позволяет непосредственно увидеть присутствие генетического материала вируса в крови. Анализ основывается на оценке качественных и количественных показателей и выполняется до семи дней. Качественный тест показывает лишь наличие вируса в крови, поэтому результат может быть либо однозначно положительный, либо однозначно отрицательный. Норма для здорового человека, когда в выписке стоит пометка «не обнаружено», т.е. тест отрицательный. Количественный тест позволяет определить концентрацию вируса гепатита С в крови, так называемую вирусную нагрузку. Обычно такой тест делают через три месяца, если предыдущий тест показал наличие гепатовируса в организме.

Показатель Значение
200 копий/мл = 400 МЕ/мл Вирус не обнаруживается либо его количество настолько мало, что не дает возможности его диагностировать
4*10^6 МЕ/мл Высокая концентрация вируса
>2*10^8 МЕ/мл Концентрация является наивысшей из определяемой

Биохимия крови – важная часть общего исследования. По наличию разнообразных микроэлементов в человеческой крови, уже через несколько дней анализ позволяет определить состояние здоровья. Для оценки гепатита С важно получить данные по содержанию аланинаминотрансферазы, астаспартатаминовой трансферазы, билирубина, гамма-глутамилтранспептидазы, глюкозы, ферритина, альбумина, общего белка и белковых фракций, креатинина.

Расшифровку этих основных маркеров представляет следующая таблица

Показатель Норма Характеристика
АЛТ 0,1-0,68 мкмоль/л Показатели повышены при гепатите в острой стадии и при разрушении печени, а снижение показателей указывает на развитие цирроза
АСТ 0,1-0,45 мкмоль/л
Билирубин До 20 мкмоль/л Повышение билирубина указывает на желтуху – основной признак гепатита С в хронической стадии
ГГТ У женщин – 6-42 Ед/л,

У мужчин – 10-71 Ед/л

Показатель повышается при развитии цирроза печени

При острой форме заболевания, когда вирус гепатита только попал в организм человека, и проходит период инкубации, симптоматика не проявляется не только со стороны здоровья пациента, но не видно изменений и в картине лабораторных исследований. Это связано с тем, что вирус достаточно долго появляется в крови. Например, в среднем можно обнаружить генотип вируса только лишь через несколько месяцев. Показатели крови – маркеры гепатита, которые указывают на вирус.

Хроническая форма течения заболевания характерна тем, что в ней появляются признаки наличия возбудителя и если сдавать анализ на вирус, то это подтверждается и результатами анализа. Например, повышение аминотрансферазы будет вызвано гибелью гепатоцитов, а уровень ГГТ будет существенно выше при циррозе. Зная это, врачи делают несколько анализов и при подозрении на возможное заражение анализы на гепатит С повторяют через несколько месяцев.

Обычно врач может назначить ультразвуковое исследование. Узи помогает выявить увеличение размеров печени и места, пораженные вирусом. Но наиболее точные результаты даст единственный анализ – он называется биопсия. Это забор специальной иглой образцов гепатоцитов. Пациентов пугает это исследование, и они хотят знать сколько делается биопсия, больно ли проводится процедура. Биопсия проводится довольно быстро, под спинальной анестезией, ее результаты укажут на изменения в самой печени, что подтвердит или опровергнет подозрения.

Ложноположительный анализ появляется даже у здорового человека. Что это значит? Это означает, что у человека определяется в крови присутствие антител к гепатиту С. При этом такой анализ чаще всего получается методом ИФА – наиболее распространенным методов, но и наиболее «грешным». Ложноположительный анализ можно получить в следующих случаях:

  • при аутоиммунных заболеваниях:
  • при опухолях;
  • при заражении другими тяжелыми инфекциями;
  • если есть беременность.

Ложноположительный анализ может возникнуть и в результате человеческого фактора, профессиональной недобросовестности, нарушении техники проведения анализа. В данном случае приходится переделывать анализ.

К сожалению, выпуск препарата о котором говорится в видео в России так и не начат. но уже сейчас его можно заказать из Индии, подробнее читайте об этом в нашей статье «Дженерики от гепатита с»

Для того, чтобы точно узнать, качественная ли диагностика гепатита С, можно поступить двумя способами:

  1. сдать анализы в нескольких лабораториях и сравнить результаты анализов крови при гепатит С с расшифровкой. Наиболее информативным будет сравнение государственной лаборатории и частной. Если результаты не внушают доверия, можно провести еще несколько анализов в разных клиниках. Всегда нужно помнить о человеческом факторе, а в случае, если получен положительный анализ на гепатит С, лучше перестраховаться. Также стоит принять во внимание, что лабораторная диагностика гепатита С может быть не точной, если есть беременность;
  2. если пациент доверяет клинике полностью, он может сделать анализ повторно позже. Как правило, это назначают и врачи, если результаты анализа на гепатит С положительны. Если они отрицательны через три месяца, также можно подозревать человеческий фактор или другие патологии, благодаря которым сдвинулась норма показателей. После этого нужно сделать анализ крови еще раз.

Определение генотипа вируса чрезвычайно важно для пациента. Анализ проводится на основе взятой венозной крови методом полимеразно-цепной реакции. От того, какой вирус обнаружен, зависит план лечения заболевания. Известно, что генотип 1б в девяноста процентах случаев приведет к развитию хронической формы заболевания, а вот генотип 2а и генотип 3a – лишь в половине случаев. Также стоит отметить, что генотип 1b протекает наиболее тяжело – после такого поражения высок риск развития карциномы. Поэтому определение генотипа необходимо для дальнейшей терапии и прогноза заболевания.

Чтобы диагностировать заболевание, необходимо сдать анализы крови на гепатит С с расшифровкой, после чего врач сравнит полученные показатели с референсными значениями.

источник

Гепатит С – вирусное инфекционное заболевание печени, передающееся трансфузионно, отличающееся легким, зачастую субклиническим, реже среднетяжелым течением в фазе первичного инфицирования и склонностью к хронизации, циррозу и озлокачествлению. В большинстве случаев гепатит С имеет безжелтушное малосимптомное начало. В связи с этим он может оставаться не диагностированным в течение нескольких лет и выявляется, когда в тканях печени уже развивается цирроз или происходит злокачественная трансформация в гепатоцеллюлярный рак. Диагноз гепатита С считается достаточно обоснованным при выявлении в крови вирусной РНК и антител к ней в результате повторных исследований методом ПЦР и различными видами серологических реакций.

Гепатит С – вирусное инфекционное заболевание печени, передающееся трансфузионно, отличающееся легким, зачастую субклиническим, реже среднетяжелым течением в фазе первичного инфицирования и склонностью к хронизации, циррозу и озлокачествлению. Вирусный гепатит С вызывается РНК-содержащим вирусом семейства Flaviviridae. Склонность этой инфекции к хронизации обуславливается способностью возбудителя пребывать в организме продолжительное время, не вызывая интенсивных проявлений инфекции. Как и остальные флавивирусы, вирус гепатита С способен, размножаясь, формировать квазиштаммы, имеющие разнообразные серологические варианты, что мешает организму формировать адекватный иммунный ответ и не позволяет разработать эффективную вакцину.

Вирус гепатита С не размножается в клеточных культурах, что не дает возможности детально изучить его устойчивость во внешней среде, однако известно, что он немного более устойчив, нежели ВИЧ, погибает при воздействии ультрафиолетовых лучей и выдерживает нагревание до 50 °С. Резервуаром и источником инфекции являются больные люди. Вирус содержится в плазме крови больных. Заразны как страдающие острым или хроническим гепатитом С, так и лица с бессимптомно протекающей инфекцией.

Механизм передачи вируса гепатита С – парентеральный, преимущественно передается через кровь, но иногда может происходить заражение и при контакте с другими биологическими жидкостями: слюной, мочой, спермой. Обязательным условием для заражения является непосредственное попадание достаточного количества вируса в кровь здорового человека.

В подавляющем большинстве случаев в настоящее время заражение происходит при совместном употреблении наркотиков внутривенно. Распространение инфекции среди наркоманов достигает 70-90%. Лица, употребляющие наркотики, являются наиболее опасным в эпидемическом плане источником вирусного гепатита С. Кроме того, риск заражения инфекцией возрастает у больных, получавших медицинскую помощь в виде многократных переливаний крови, хирургических мероприятий, парентеральных инъекций и пункций с применением нестерильного инструментария многократного пользования. Передача может осуществляться при нанесении татуировок, пирсинге, порезах во время маникюра и педикюра, манипуляций в стоматологии.

Читайте также:  Вирусный гепатит профилактика и первая помощь

В 40-50% случаев не удается отследить способ заражения. В медицинских профессиональных коллективах заболеваемость гепатитом С не превышает таковую среди населения. Передача от матери к ребенку осуществляется тогда, когда в крови матери накапливается высокая концентрация вируса, либо при сочетании вируса гепатита С с вирусом иммунодефицита человека.

Возможность развития гепатита С при единичном попадании малого количества возбудителя в кровоток здорового человека невелик. Половой путь передачи инфекции реализуется редко, в первую очередь — у лиц с сопутствующей ВИЧ-инфекцией, склонных к частой смене половых партнеров. Естественная восприимчивость человека к вирусу гепатита С в значительной степени зависит от полученной дозы возбудителя. Постинфекционный иммунитет недостаточно изучен.

Инкубационный период вирусного гепатита С колеблется в пределах от 2 до 23 недель, иногда затягиваясь до 26 недель (что обусловлено тем или иным путем передачи). Острая фаза инфекции в подавляющем большинстве случаев (95%) не проявляется выраженной симптоматикой, протекая в безжелтушном субклиническом варианте. Позднее серологическое диагностирование гепатита С может быть связано с вероятностью «иммунологического окна» — периода, когда, несмотря на имеющуюся инфекцию, антитела к возбудителю отсутствуют, либо титр их неизмеримо мал. В 61% случаев вирусный гепатит диагностируется лабораторно спустя 6 и более месяцев после первых клинических симптомов.

Клинически манифестация вирусного гепатита С может проявляться в виде общей симптоматики: слабость, апатия, пониженный аппетит, быстрое насыщение. Могут отмечаться местные признаки: тяжести и дискомфорт в правом подреберье, диспепсия. Лихорадка и интоксикация при вирусном гепатите С являются довольно редкими симптомами. Температура тела если и поднимается, то до субфебрильных значений. Интенсивность проявления тех или иных симптомов часто зависит от концентрации вируса в крови, общего состояния иммунитета. Обычно симптоматика незначительна и больные не склонны придавать ей значение.

В анализе крови в острый период гепатита С нередко отмечают пониженное содержание лейкоцитов и тромбоцитов. В четверти случаев отмечается кратковременная умеренная желтуха (часто ограничивается иктеричностью склер и биохимическими проявлениями). В дальнейшем при хронизации инфекции эпизоды желтухи и увеличения активности печеночных трансфераз сопровождают обострения заболевания.

Тяжелое течение вирусного гепатита С отмечается не более чем в 1% случаев. При этом могут развиваться аутоиммунные нарушения: агранулоцитоз, апластическая анемия, невриты периферических нервов. При таком течении вероятен летальный исход в доантительном периоде. В обычных случаях вирусный гепатит С протекает медленно, без выраженной симптоматики, годами оставаясь недиагностируемым и проявляясь уже при значительной деструкции ткани печени. Часто впервые больным ставят диагноз гепатита С, когда уже имеют место признаки цирроза или гепатоцеллюлярного рака печени.

Осложнения вирусного гепатита С – это цирроз и первичный рак печени (гепатоцеллюлярная карцинома).

В отличие от вирусного гепатита В, где возможно выделение вирусного антигена, клиническая диагностика вирусного гепатита C производится с помощью серологических методик (антитела IgM к вирусу определяются с помощью ИФА и РИБА), а также определением в крови вирусной РНК с помощью ПЦР. При этом ПЦР осуществляется дважды, поскольку есть вероятность ложноположительной реакции.

При выявлении антител и РНК можно говорит о достаточной достоверности диагноза. Определение в крови IgG может означать как наличие вируса в организме, так и ранее перенесенную инфекцию. Пациентам с гепатитом С назначается проведение биохимических проб печени, коагулограммы, УЗИ печени, а в некоторых сложных диагностических случаях — биопсия печени.

Терапевтическая тактика при гепатите такая же, как и при вирусном гепатите В: прописана диета №5 (ограничение жиров, в особенности тугоплавких, при нормальном соотношении белков и углеводов), исключение продуктов, стимулирующих секрецию желчи и печеночных ферментов (соленая, жареная, консервированная пища), насыщение рациона липолитически активными веществами (клетчатка, пектины), большое количество жидкости. Полностью исключается алкоголь.

Специфическая терапия вирусного гепатита – это назначение интерферона в сочетании с рибавирином. Продолжительность терапевтического курса – 25 дней (при стойком к противовирусной терапии варианте вируса возможно удлинение курса до 48 дней). В качестве профилактики холестаза в комплекс терапевтических мер включают препараты урсодеоксихолиевой кислоты, а в качестве антидепрессанта (поскольку психологическое состояние больных нередко сказывается на эффективности лечения) – адеметионин. Действие противовирусной терапии напрямую зависит от качества интерферонов (степени очистки), интенсивности терапии и общего состояния больного.

По показаниям базисную терапию могут дополнять оральной дезинтоксикацией, спазмолитическими средствами, ферментами (мезим), антигистаминными препаратами и витаминами. При тяжелом течении гепатита С показана внутривенная дезинтоксикация растворами электролитов, глюкозы, декстрана, при необходимости терапию дополняют преднизолоном. В случае развития осложнений курс лечения дополняется соответствующими мерами (лечение цирроза и рака печени). При необходимости производят плазмаферез.

При должном лечении выздоровлением заканчивается 15-25% случаев заболевания. Чаще всего гепатит С переходит в хроническую форму, способствуя развитию осложнений. Смерть при гепатите С, как правило, наступает вследствие цирроза или рака печени, летальность составляет 1-5% случае. Менее благоприятен прогноз сочетанной инфекции вирусами гепатита В и С.

Общие меры профилактики гепатита С включают тщательное соблюдение санитарного режима в медицинских учреждениях, контроль над качеством и стерильностью переливаемой крови, а также санитарный надзор над учреждениями, оказывающими услуги населению с использованием травматических методик (татуаж, пирсинг).

Помимо прочего, ведется разъяснительная, просветительская деятельность среди молодежи, рекламируется индивидуальная профилактика: безопасный секс и отказ от наркотиков, осуществление медицинский и иных травматических процедур в сертифицированных учреждениях. Среди наркоманов распространяются одноразовые шприцы.

источник

Вирус гепатита С — это вирус, который содержит молекулу РНК. Он способен избегать иммунного ответа организма благодаря высоким способностям к мутации. Различают шесть основных генотипов вируса и множество субтипов. В нашем регионе в основном распространены 1, 2 и 3 генотипы.

У 75–80 % болезнь переходит в хроническую форму, что вызывает фиброз печени — состояние, при котором ткани печени заменяются соединительной тканью. Фиброз, в свою очередь, приводит к раку или циррозу. Основной путь передачи заболевания — через кровь. Если у человека имеются показания к проведению теста на гепатит С, ему проводят два основных теста. Определяют антитела к вирусу, и при их отсутствии считается, что гепатита у него нет. Если же в крови обнаруживается наличие антител к вирусу гепатита, проводится анализ методом ПЦР.

РНК таким методом определяется в крови уже через 10–12 дней после инфицирования и свидетельствует о том, что вирус активно размножается в организме. В этот период обнаружить вирус другим способом просто невозможно, так как специфических антител он еще не вырабатывает и поражения печени еще незаметны при биохимических анализах и биопсии.

Анализ методом полимеразной цепной реакции имеет определенные преимущества:

  1. При таком исследовании проводится определение самого вируса, а не продуктов его жизнедеятельности. При этом существует возможность определить вид возбудителя.
  2. Методика обладает высокой специфичностью благодаря тому, что исследуется только определенный участок ДНК, уменьшается вероятность получения ошибочных результатов.
  3. Имеет очень высокую чувствительность, определяется даже минимальное количество вируса в крови.

Существует два основных метода исследования крови на гепатит С при помощи ПЦР: качественный и количественный анализ ПЦР. Качественный метод используется для определения факта наличия вируса. Всем у кого в крови были обнаружены антитела к гепатиту, проводится такой анализ. Результат может быть только двух типов: «обнаружено» и «не обнаружено», последнее значение считается нормой.

Положительный результат теста означает, что в образце были найдены фрагменты РНК вируса, что, в свою очередь, говорит о том, что человек был инфицирован гепатитом. В случае негативного результата возможны два варианта: инфицирования не было или его концентрация настолько мала, что не обнаруживается данной методикой.

Количественный метод отличается по сути исследования, по его задачам и по показаниям. Не все больные гепатитом проходят такой анализ. У него, как и у любого другого, существуют определенные цели. Определение вирусной нагрузки или количественный анализ ПЦР на РНК вируса используется:

  • для определения РНК вируса в крови и постановки диагноза «вирусный гепатит»;
  • для прогнозирования хронизации гепатита и течения болезни;
  • для мониторинга противовирусного лечения и принятия решения о его продлении, сокращении или об изменении тактики лечения.

Исследование проводится при наличии таких показаний:

  • гепатит С обнаружен при качественном исследовании и в крови обнаружены антитела;
  • при микст-гепатитах;
  • если планируется проведение противовирусной терапии;
  • во время и после лечения от гепатита С;
  • при наличии хронического и острого гепатита С.

Тест проводится для оценки количества единиц вируса в заданном объеме образца крови 1 см³ или 1 мл. Результаты приводятся в цифрах. Показатели используются: МЕ/мл, что означает международная единица на миллилитр и копии на мл, количество копий РНК в 1 мл образца. Чем выше количественный показатель анализа, тем большая вероятность передачи вируса другому человеку.

Р-ДНК — метод разветвленной ДНК. Более простой и недорогой метод. Используется для большего количества образцов, имеет невысокую чувствительность, от 500 МЕ/мл. При такой чувствительности есть вероятность не определить вирус, даже если он присутствует в крови.

ТМА — метод транскрипционной амплификации. Такая методика обнаруживает в крови нуклеиновые кислоты. Имеет невысокую стоимость и при этом высокую чувствительность, от 5–10 МЕ/мл. Относительно новая методика, позволяющая ускорить и удешевить процесс тестирования.

Результаты количественного анализа определение РНК вируса, представленные лабораторией, расшифровываются следующим образом:

Числовое значение количества вируса, МЕ/мл Расшифровка результатов
Не обнаружено Норма для здоровых людей. Значение вируса ниже предела чувствительности метода или он отсутствует вовсе.
До 1.8*10^2 Концентрация ниже линейного диапазона.
До 8*10^5 Вирус в крови обнаружен. Вирусная нагрузка низкая.
Больше 8*10^5 Вирус обнаружен. Вирусная нагрузка высокая.
Больше 2,4*10^7 Вирус обнаружен. Виремия высокая, выше линейного диапазона.

Результаты количественного анализа могут подаваться как в единицах МЕ/мл, так и в копиях на мл. При этом коэффициент перевода обычно отличается для разных лабораторий и методик. Его значения колеблются в пределах от одного до пяти, принято считать, что в среднем 1 МЕ — это 4 копии на мл.

Метод Коэффициент пересчета, копий на мл в 1 МЕ
Amplicor HCV Monitor v.2.0 (руч.) 0.9
HCV Monitor v2.0 (полуавт.) 2.7
Versant HCV RNA 3.0 5.2
LCx HCV RNA 3.8
SuperQuant 3.4

Анализ применяется для обнаружения активной инфекции в организме. По его результату можно судить о том, какова вероятность передачи вируса. Это важно, например, при беременности, когда речь идет о возможности заражения ребенка от матери больной гепатитом.

Анализ проводится только после обнаружения наличия в крови антител к вирусу. Он необходим, поскольку до 25 % людей, перенесших острую форму гепатита, выздоравливают сами по себе, и у них не обнаруживается вирус при лабораторных исследованиях. Результаты используются для оценки эффективности проведения лечения и до него.

ПЦР диагностика проводится до лечения, чтобы в последующем определить его эффективность. Вероятность благоприятного исхода лечения обратно пропорциональна этому параметру. Чем он выше — тем хуже прогноз.

Во время лечения анализ проводится на 1, 4, 12, 24 неделях. Лечение дает полный вирологический ответ при условии, что вирусная нагрузка таким анализом не определяется.

Если через 12 недель после начала терапии показатель не снижается на две логарифмические единицы,то вероятнее всего эта терапия не поможет в этом конкретном случае.

В анализах падение вирусной нагрузки на логарифмическую единицу выражается в уменьшении количества нулей результата на один. Например, с 1 000 000 МЕ она должна уменьшится до 100 000 МЕ.

После лечения определяется для обнаружения рецидивов. Так, отклонение этого параметра от нормы говорит о том, что количество вируса в организме растет и, таким образом, болезнь возвращается.

Некоторые показатели, могут оказывать влияние на результат. Прежде всего, это возможная ошибка лаборатории, нарушения норм проведения исследования, норм содержания и подготовки образцов, а также:

  • загрязнение образца биоматериала;
  • наличие в крови остаточных следов гепарина;
  • присутствие в крови ингибиторов — субстанций, которые представляют собой химические соединения или белки, которые оказывают влияние на компоненты ПЦР.

Отличаться результаты исследования могут также для разных лабораторий, что обусловливается применением разных реактивов и других причин. Такое явление абсолютно нормально. Поэтому для правильной оценки эффективности лечения стоит проводить анализ в одной и той же лаборатории.

Важные замечания по поводу методики исследования:

  • По уровню вирусной нагрузки нельзя судить о степени поражения печени или тяжести протекания самого гепатита. Для оценки этих показателей, необходимо проводить дополнительные исследования, такие как биохимический анализ крови, биопсия, эластометрия и другие.
  • При планировании и противовирусной терапии, кроме показателя виремии, важно определить генотип вируса.

источник