Слежка за вирусом гепатита, которым обычно болеют свиньи, показала: свиному вирусу наплевать на выбор хозяина. Он может жить и в человеке, и в других животных.
Гепатит – острое или хроническое воспалительное заболевание печени. Гепатиты могут развиваться из-за инфекционного (вирусного), алкогольного, лекарственного, химического или лучевого поражения печени. Обычно вирусы гепатита проникают в организм человека через кровь, плаценту (от матери к ребенку) и биологические жидкости (при травмирующих половых контактах). Два серотипа (вирусы гепатита А и Е) передаются по фекально-оральному механизму: через грязные руки и сточные воды.
Фекально-оральные вирусы не фатальные: болезнь не переходит в хроническую стадию, так что за полтора-два месяца человеческий организм самостоятельно исцеляет печень и избавляется от вируса. Для лечения и таблетки-то не всегда нужны: стоит лишь отказаться от алкоголя, а также перетерпеть головокружение, расстройство пищеварения и желтуху.
Правда, вирус гепатита Е может сильно навредить беременным: до 40% женщин на шестом-девятом месяце беременности погибают; гибель плода происходит почти всегда.
Считается, что гепатитом Е (ВГЕ) болеют жители развивающихся стран — регионов, где царит антисанитария, а обильные сезонные дожди смывают вирус в водоемы. Инфекционисты уверены, что это заболевание нередко появляется и в более или менее чистых странах. Но в силу своей относительной безобидности (потошнило, поболело и прошло), эта вирусная инфекция либо не регистрируется, либо не распознается.
Так, Гарри Дальтон (Harry Dalton) из Королевского госпиталя в графстве Корнуолл (Royal Cornwall Hospital Trust) выяснил, что в Европе гепатит Е зачастую диагностируется как медикаментозное отравление. Другие исследователи сообщали о «животных» случаях заражения гепатитом Е, которые были интерпретированы как пищевое отравление.
На ежегодной встрече Европейской ассоциации гепатологов (46 th Annual meeting of the European association for the study of the liver) японские исследователи сообщили, что гепатитом Е можно заразиться и от свиньи. Предположения о «животных» истоках гепатита Е появились у ученых давно. Японцы же проследили за поведением свиной инфекции в человеческих клетках.
В эксперименте in vitro ученые заражали человеческие клетки печени (гепатоциты) свиным ВГЕ (генотипы 3 и 4, вирус эндемичные для свиней). Оказалось, что свиному вирусу почти все равно, кого поражать и где размножаться: «Четвертая разновидность ВГЕ размножается в клетках человека несколько активнее по сравнению с третьей. Тем не менее, эти вирусы поражали человеческие гепатоциты, — пишут исследователи. — Результаты эксперимента подтверждают, что вирус может передаваться человеку от свиньи или других животных».
Источниками вируса также могут стать олени, крупный рогатый скот, кролики и мангусты. Ученые предполагают, что есть и другие разносчики гепатита Е, не вошедшие в «шорт-лист» инфекционистов.
Исследователи из Англии и США, совместная статья которых появилась в журнале PNAS пару месяцев назад, объясняют, что свиная инфекция может попадать в организм человека не только с загрязненной водой, но и с плохо прожаренным (проваренным) мясом. Причем, гепатит Е распространяется между разными видами животных, а не только между свиньями и человеком.
Экспериментальное заражение животных гепатоцитов вирусами гепатита Е, полученными от хронически больного ВИЧ-позитивного пациента, описаны в статье Cross-species infections of cultured cells by hepatitis E virus and discovery of an infectious virus–host recombinant. В этом исследовании Прянка Шукла (Priyanka Shukla) из американского Национального института по изучению аллергии и инфекционных заболеваний (National Institute of Allergy and Infectious Disease) и ее коллеги из американских и европейских научных центров выделили ВГЕ -3 из фекалий человека. В эксперименте с культурами различных клеток ученые выяснили, что вирус неплохо размножается и в легких, и в почках. Правда, предпочтительным местом обитания все же остаются клетки печени. Исследователи поняли, что несколько трансформировавшийся вирус заражает культуру клеток и птиц, и млекопитающих. То есть вирусу на самом деле все равно кого атаковать.
Независимые группы исследователей обращают внимание, что заболеть гепатитом Е могут даже жители благоприятных, почти стерильных, регионов. Чтобы предотвратить инфицирование и пожалеть свою печень, необходимо соблюдать правила гигиены и хорошо проваривать животную пищу.
источник
Целью этого исследования является установление доказательств существования нового члена семейства гепаднавирусов, эндемичного у свиней. Временно этот вирус был обозначен как вирус свиного гепатита B (SHBV). Этот SHBV может быть обнаружен с помощью диагностических наборов вирусов гепатита B человека, включая ELISA, иммуногистохимическое окрашивание и просвечивающую электронную микроскопию (TEM). Также была определена серопревалентность свиноферм в Пекине, Китае и патологические особенности инфекции SHBV.
Скринированный результат показывает, что общая распространенность HBsAg была 24,8%, закрыта по сравнению с анти-HBsAg, тогда как HBeAg и анти-HBe были едва различимы. Распределение HBsAg и HBcAg исследовали с помощью иммуногистохимии образцов печени. При гистопатологическом анализе наблюдались типичные патологические изменения гепатита, такие как дегенерация пятнистых паренхиматозных клеток, некроз гепатоцитов и пролиферация волокнистой соединительной ткани. Анализ HBsAg-положительной сыворотки с TEM показал две морфологические формы, частицы размером 20 нм и 40 нм, похожие на маленькие сферические и датские частицы HBV. Наблюдение ультраструктуры печени также обнаружило HBV-подобные частицы в ядре гепатоцитов.
Наш результат исследования означает, что SHBV может быть возбудителем свиней. Открытие SHBV представит новые эволюционные аспекты гепатита и предоставит новую информацию для дальнейших исследований hepadnavirus.
Вирусный гепатит В остается серьезной медицинской проблемой во всем мире [1]. Установлена сильная эпидемиологическая взаимосвязь между стойкой инфекцией вируса гепатита B (HBV) и гепатоцеллюлярной карциномой (HCC) [2]. HBV — один из самых маленьких окутанных животных вирусов с диаметром вириона 42 нм. Но существуют плеоморфные формы, в том числе нитевидные и сферические тела, лишенные ядра. Как и большинство гепаднавирусов, HBV будет реплицироваться только на определенных хозяевах, и это затрудняет эксперименты с использованием методов in vitro.
Раньше гепатит В назывался сывороточным гепатитом. Обнаружение инфекции HBV включает сывороточные или анализы крови, которые обнаруживают либо вирусные антигены (поверхностный антиген HBsAg, и антиген HBeAg), и антитела (анти-HBs, анти-HBc, анти-HBe), известные как серологический маркер HBV. HBsAg чаще всего используется для скрининга на наличие этой инфекции, наличие HBeAg в сыворотке хозяина связано с гораздо более высокими скоростями репликации вируса и повышенной инфекционностью. Тем не менее интерпретация этих анализов сложна.
HBV является прототипным членом постоянно растущего семейства гепаднавирусов, который можно встретить как у млекопитающих (ортохедпанавирусов), так и у птиц (avihepadnaviruses). Orthohepadnaviruses были идентифицированы до сих пор в woodchucks (WHV), наземных и арктических белках (GSHV, ASHV) и приматах, включая шерстяных обезьян (WMHBV), орангутанов, горилл и гиббонов [3-8]. Сообщалось о Avihepadnavirus у различных видов уток (DHBV), серых цапель (HHBV), гусей (GHBV), гуся Росса (RGHBV), аистов (STHBV) и кранов (CHBV) [9-11]. Открытие вирусов, связанных с HBV, открывает широкие возможности для изучения in vivo различных животных с естественными гепаднавирусами. Это было ценным при определении механизмов репликации гепаднавируса, патогенеза гепатоцеллюлярной карциномы (HCC) и исследований антивирусных препаратов.
HBV-связанные гепаднавирусы у видов млекопитающих и птиц были ценными в исследованиях HBV. Подобно определению механизмов репликации гепаднавируса, патогенеза ГЦК и антивирусных препаратов [12]. Однако большинство соответствующих животных трудно обрабатывать в неволе или не легкодоступны. Поскольку ни одна из доступных в настоящее время моделей на животных не идеальна, разработка дополнительных экспериментальных моделей на животных обещает дать ответы на многие вопросы исследования HBV [13].
Исследователи сосредоточились на группе вирусов, подобных HBV, у домашних животных с 1985 года [14]. Используя человеческие диагностические наборы HBV, ряд домашних животных был положительным для серологического маркера HBV [15,16], электронный микроскоп наблюдал HVV-подобный вирион в HBsAg положительной сыворотке свиней, голштинцев, крупного рогатого скота, собак и овец; даже генная последовательность, высоко гомологичная HBV, была амплифицирована [17-20]. Тем не менее, до настоящего времени ни один из этих вирусов, подобных HBV, не был систематически идентифицирован, а соответствующие отчеты были найдены только в Китае. Здесь мы характеризуем распространенность HBV-подобного вируса у свиней, что может стать интересной моделью для сравнительных исследований патологии печени и рака, связанных с хроническими гепаднавирусными инфекциями.
Чтобы исследовать текущую распространенность SHBV у свиней, 416 образцов свиной сыворотки, собранных из 5 случайно выбранных ферм в Пекине, Китай, были протестированы на серологические маркеры HBV с использованием коммерческого набора ELISA. Вкратце, общая распространенность HBsAg составляла 24,8% и была глубоко близка к анти-HB (25,0%), тогда как HBe и анти-HBe были почти не обнаружены (0,5% и 0,7%), что указывает на отсутствие общего антигена в HBe. Общая распространенность анти-HBc составляла 63,9% (фиг.1, таблица 1).
Распространенность серологических маркеров SHBV среди 416 образцов сыворотки свиней, собранных из пяти ферм в Пекине, Китай. Графики рассеяния показали, что почти четверть свиней были заражены SHBV. Частота распространенности HB была близка к анти-HB, тогда как HBeAg и анти-HBe были почти не обнаружены.
Распространенность серологических маркеров SHBV среди 416 образцов сыворотки свиней, собранных из пяти хозяйств
Для свиней CP74 и DX385, хотя при аутопсии не наблюдались явные патологические изменения, патологические изменения наблюдались под легким микроскопом. Обширные гистопатологические данные показали, что десмоплазия в печеночных дольках, инфильтрация лимфоцитов, гиперплазия желчного канала и волокнистая ткань в области портала (рис. 2А и 2В). Тяжелая фиброзная пролиферация соединительной ткани наблюдалась при окрашивании Мэллори (рис. 2C и 2D). Напротив, никаких явных изменений не было обнаружено в тканях печени, собранных у свиней CP59.
Результаты гистопатологического анализа (A, B) и трихромного окрашивания Мэллори (C, D). (A) десмоплазия между печеночной долькой (стрелка), (B) инфильтрация лимфоцитов (стрелка вниз), гиперплазия желчного канала и фиброзной ткани в области портала (стрелка вверх), а также некроз коагуляции и кариопикноз гепатоцитов. Исходное увеличение × 400. (C, D) Показание пролиферации соединительной ткани между долькой печени (стрелка). Метод окраски Мэллори, Оригинальные увеличения × 200. (A, C: образец печени из CP74, B, D: образец печени из DX385).
Иммуногистохимическое сканирование экспрессии вирусных антигенов обнаружило, что ткани печени у обеих свиней содержали HBsAg и HBcAg. Сильный иммуногистохимический сигнал наблюдался в очагах гепатита. HBsAg был обнаружен в ядре и цитоплазме гепатоцитов, тогда как HBcAg был главным образом распределен в ядре гепатоцитов. В иммуногистохимически положительных гепатоцитах наблюдался некроз как кариорексис, пикноз и кариолиз. Это указывает на то, что SHBV был патогенным для свиней, а репликация SHBV вызывала некроз гепатоцитов напрямую (рис.3A, B, C и 3D).
Иммуногистохимический анализ HBsAg и HBcAg в тканях печени. (A) Сильная иммунная положительность HBsAg была показана в гепатоцитах (стрелка). (B) Иммуноположительность для HBsAg была в основном распределена в цитоплазме гепатоцитов. (C, D) HBcAg распределяли в основном распределенное ядро гепатоцитов. Наблюдалась дегенерация паренхиматозных клеток Spotty с некрозом и кариопикнозом (стрелкой) гепатоцитов. Оригинальное увеличение × 400. (A, C: образец печени из CP74, B, D: образец печени из DX385).
Для получения ультраструктурных данных о наличии вирусных частиц, связанных с вирусом гепатита В в сыворотке свиней, содержащей S-антиген, была собрана HBsAg-положительная сыворотка, вирусные частицы в сыворотке зараженных свиней морфологически анализировались с помощью электронной микроскопии, а сывороточный отрицательный результат для HBsAg служил контролем , По существу, наблюдались два типа частиц, очень похожих на размер (20 нм и 40 нм) и морфология, такие как полные и пустые вирусные частицы HBV. Однако загадочно, что трубчатых частиц не видно. Частицы наблюдались только в сыворотке, положительной для HBsAg, а число частиц 40 нм было намного больше, чем ожидалось (рис.4А). Ультраструктурно, HBV-подобные частицы наблюдались в ядре гепатоцитов (рис.4B).
Вирусные частицы в сыворотке свиней и гепатоцитах, выявленные с помощью электронной микроскопии. A: Электронные микрофотографии отрицательно окрашенных SHBV-частиц из HBsAg-положительной сыворотки. Наблюдались два типа частиц, сходных по размеру (20 нм и 40 нм) и морфологии, таких как полные и пустые вирусные частицы SHBV. B: Вирусные частицы в ядре гепатоцитов (образец печени от DX385).
Серологическая диагностика заражения вирусом гепатита В основана на сочетании результатов качественного анализа, и различные типы являются характерными для острого или хронического заболевания в носителе [21]. Изучая систему антиген-антитело, диагностируется инфекция гепатита В, наблюдается течение заболевания и контролируется лечение [22]. Просеивание серологических маркеров HBV у стада свиней показало, что почти четверть свиней были инфицированы. Однако профили серологии SHBV сильно отличались от HBV человека (данные не показаны). Anti-HBc встречается у всех людей, инфицированных HBV, которые могут сохраняться в течение многих лет и действовать как пожизненный маркер гепатита B [23]. Высокая распространенность анти-HBc у свиней (63,9%) может указывать на то, что у этих свиней есть история заражения. Тем не менее, существование анти-HBc как единственного серологического маркера также может быть результатом неспецифической перекрестной реакции с другими агентами [24].
Хотя hepadnaviruses специфичны для хозяина, инфекции HBV также часто встречаются в популяциях шимпанзе, гиббонов и других обезьян в Африке к югу от Сахары и в Юго-Восточной Азии, где уровень инфицирования HBV у обезьян был значительно сопоставим с уровнем популяции людей в этих районах [25, 26]. Ученые обеспокоены способностью HBV преодолевать барьеры видов. Большие резервуары инфекции у обезьян могут препятствовать постоянным попыткам окончательно искоренить инфекцию HBV у людей путем иммунизации [27].
Распространенность HBV среди людей и нечеловеческих приматов может ускорить процесс эволюции. Из-за высокой частоты ошибок вирусной обратной транскриптазы и рекомбинации между различными генотипами или штаммами гепаднавируса у человеческих и нечеловеческих приматов восемь генотипов HBV также расходились по меньшей мере на 24 подгенотипа, причем, безусловно, еще много еще предстоит идентифицировать [28] , Межвидовые события рекомбинации HBV также встречаются среди человеческих и нечеловеческих приматов [29], таких как гиббоны разных родов, шимпанзе и птиц разных подсемейств [25,30]. Межвидовая рекомбинация гепаднавирусов у хозяев с перекрестными видами обеспечивала бы большую вариацию в геномах вирусов, которая изменила бы патогенность и трансмиссивность и расширила диапазон хозяев. Доказательства для рекомбинации вариантов HBV человека и обезьяны демонстрируют, что человеческие и не связанные с человеком варианты HBV действительно могут совместно использовать хозяев в природе [30]. По сравнению с нечеловеческими приматами домашние животные находятся в более тесном контакте с людьми, и вероятность межвидовой рекомбинации выше. Таким образом, открытие SHBV будет полезно для исследования эволюции HBV.
Отсутствие подходящих систем инфекций in vitro и соответствующих моделей на животных препятствует прогрессу исследований HBV, но прогресс был достигнут путем идентификации вирусов, связанных с вирусом птичьего гриппа и млекопитающих. Однако ни один из этих естественных хозяев обычно не используется лабораторными животными, а расходы и трудности при обращении с этими животными ограничивают их использование [4,31,32]. Фактически, шимпанзе являются единственными животными, полностью разрешительными и хорошо протестированными для инфицирования HBV. Тем не менее, ограниченная доступность и высокая стоимость содержания приматов серьезно ограничивают их использование в исследованиях [13]. Сравнительно, свиньи широко используются в медицинских исследованиях и имеются многочисленные запасы, поскольку имеющиеся модели животных не идеальны, разработка дополнительных экспериментальных систем животных оправдана, обнаружение HBV у свиней улучшит наше понимание вирусологии и иммунологии инфекции HBV и патогенеза болезни, включая основные осложнения, такие как хронический гепатит и гепатоцеллюлярная карцинома.
Из 350 миллионов до 400 миллионов человек по всему миру, инфицированных вирусом гепатита B (HBV), одна треть проживает в Китае с 130 миллионами носителей и 30 миллионами хронически инфицированных [33]. Несмотря на то, что с 1990-х годов действует программа вакцинации новорожденных детей, заболеваемость гепатитом B все еще увеличивается, с 21,9 в 100 000 человек в 1990 году до 53,3 в 100 000 в 2003 году. Причина этой повышенной инфекции HBV неизвестна, поскольку у гепатита В нет четких путей передачи у многих людей в Китае [34]. Идентификация штамма SHBV подтверждает, что в популяциях свиней существует новый класс hepadnaviridae. И, таким образом, возникает много вопросов. Эти свиньи инфицированы HBV? Существует ли свиной гепанавирус? Связан ли этот вирус с ростом гепатита В у людей? Но прежде чем на эти вопросы можно было ответить, необходимы дальнейшие исследования для выяснения структуры, сборки, организации генома и регуляции экспрессии генов этого нового гепаднавируса.
Чтобы определить серопревалентность инфекции SHBV у свиней, 416 образцов сыворотки свиней были собраны из пяти случайно выбранных ферм в Пекине, Китай. Для сбора сыворотки 5 мл крови собирали из свиней в сухие пробирки. После свертывания и центрифугирования сыворотки отделяли и хранили при -20 ° С до использования. Две положительные свиньи для HBsAg (CP74: кабан, 7 месяцев, DX385: Sow, 8,5 месяца) были принесены в жертву, чтобы определить возможную связь SHBV-инфекции и гистопатологических изменений в печени. Еще одна отрицательная свинья для всех серологических маркеров (CP59: Sow, 5 месяцев) была принесена в жертву и служила отрицательным контролем.
Все образцы сыворотки были подвергнуты скринингу на серологические маркеры гепатита B (анти-HBc, HBsAg, анти-HBs, HBeAg и анти-HBe) с помощью коммерческого набора иммуноферментного анализа (ELISA) (SIIC Kinghaw Biotech Co. Ltd., Beijing , Китай) в соответствии с рекомендациями производителя. Поглощение определяли при 450 нм (Multiscan Titertek MCC). Пустые, отрицательные и положительные элементы управления были включены на каждую пластину. Данные были проанализированы с помощью программного обеспечения SPSS для Windows (SPSS Inc., Чикаго, США), а график рассеяния был получен с использованием OriginPro 7.5 (OriginLab Corporation, Нортгемптон, Массачусетс, США).
Гистопатологический анализ был использован для изучения патологических характеристик инфекции SHBV. Принимая во внимание фиброз, является патологическим признаком хронического гепатита, окрашивание трихрома Мэллори использовалось для исследования пролиферации фиброзной ткани в печени. Образцы печени собирали и фиксировали в 2,5% (об. / Об.) Раствор глутаральдегида-полиоксиметилена сразу после того, как свиньи были умерщвлены. Образцы тканей дегидратировали и вставляли в парафин. Затем были изготовлены секции толщиной 5 мкм для гематоксилинов и эозинов (H & E) и триохромных пятен Мэллори. Для трихромного окрашивания Мэллори парафиновые секции промывали дистиллированной водой и погружали в 3% дихромикум калий в течение 5 мин, затем в раствор, состоящий из 0,1% кислоты фуксина в течение 2 мин и 0,5% анилинового синего в течение 20 мин. После этого слайды последовательно промывали дистиллированной водой, 95% этанолом и тремя изменениями 100% ксилола. После выпаривания ксилола наносили среду для установки Cytoseal 60, а слайды закрывали для осмотра под микроскопом. Все порошкообразные пятна, используемые для окраски Мэллори, были получены от Sigma (Sigma Co., Beijing, China).
Серийные парафиновые секции (5 мкм) готовили и выдерживали при 37 ° С в течение более 12 часов. Секции погружали в три последовательных промывки в ксилоле в течение 5 мин для удаления парафина, а затем гидратировали через градуированный спирт. Секции инкубировали в течение 30 мин и блокировали 3% -ным пероксидом при комнатной температуре для эндогенной абсорбции пероксидазы. Следующие шаги проводили во влажной камере. Разделы инкубировали с блокирующим буфером (Zymed Laboratories Inc., Сан-Диего, США), содержащим 20% нормальной козьей сыворотки (Gibco) и 80% PBS (0,01 М, pH 7,4) при 37 ° C в течение 30 мин. После отбрасывания сыворотки козы секции инкубировали в первичных моноклональных антителах против HBsAg и HBcAg (Zhongshan Golden Bridge Biotech Co. Ltd., Пекин, Китай), разведенных в PBS, в течение 2 часов при 37 ° C. После полоскания 3 раза в PBS-T срезы инкубировали с козьим антимышиным IgG, конъюгированным с HRP (Sigma), при 37 ° С в течение 1 часа и промывали 3 раза в PBS-T. Образцы инкубировали с 3,3-диаминобензидином (DAB, Zymed Laboratories Inc) при комнатной температуре в течение 10 мин в темноте. Наконец, участки окрашивали гематоксилином в течение 8 мин после промывки 3 раза в PBS-T, обезвоживали и монтировали с нейтральными камедями. Секции для отрицательной контрольной группы были получены теми же стадиями, что описаны выше, но с антителами HBsAg и HBcAg, замененными PBS.
Для получения ультраструктурных доказательств наличия вирусных частиц, связанных с вирусом гепатита В, в сыворотке свиней, содержащей S-антиген, были собраны HBsAg-положительные сыворотки, а вирусные частицы в сыворотках зараженных свиней морфологически анализировались с помощью электронной микроскопии. Серый негатив для HBsAg служил контролем. Сыворотку, собранную у трех свиней, центрифугировали при 4000 об / мин в течение 10 мин, затем в последующую верхнюю водную фазу добавляли 0,01 М полиэтиленгликоля 6000 (PEG6000). После инкубации в течение ночи при 4 ° C сыворотку центрифугировали при 20000 об / мин в течение 1 часа, ресуспендировали в PBS и окрашивали в течение 1 мин 1% арахинатом уранила. Для исследования тонкого сечения использовали фиксирующий 2,5% параформальдегид-глутаровый альдегид в 0,1 М какодилатном буфере (рН 7,4). Секции постфиксации в 1% OsO4 в течение 1 часа и обрабатывали 1% уранилацетатом, дегидратировали в этаноле и внедряли в Epon 812. Ультратонкие срезы получали обычным способом и окрашивали уранилацетатом и цитратом свинца. Все электронные микрофотографии были получены с помощью просвечивающего электронного микроскопа JEV1230 (JEOL Ltd., Токио, Япония) при 80 кВ.
Авторы заявляют, что у них нет конкурирующих интересов.
WGL провела серологический анализ маркеров вируса гепатита B и подготовила рукопись. LQL провел анализ гистопатологии и трихромное пятно Мэллори. HY и JY провели исследования иммуногистохимического окрашивания и просвечивающего электронного микроскопа. RPS выполнил проект исследования и пересмотра рукописи. Все авторы прочитали и утвердили окончательную рукопись.
Эта работа была поддержана Национальным фондом естественных наук Китая (грант № 30871853) и Юньнаньской провинциальной программой для внедрения ученых высокого уровня (грант № 2009CI125).
Авторы хотели бы поблагодарить профессора Бин Ван (Государственную ключевую лабораторию по агробиотехнологии, Китайский сельскохозяйственный университет) за разрешение и помощь в использовании лабораторных помещений.
источник
Вирусный гастроэнтерит (лат. — Gastroenteritis infectiosa suum; англ. — Transmissible gastroenteritis; инфекционный гастроэнтерит, трансмиссивный гастроэнтерит, болезнь Дойла и Хатчингса, ВГС) — высококонтаги-озная болезнь свиней, характеризующаяся катарально-геморрагическим гастроэнтеритом и проявляющаяся рвотой, диареей, дегидратацией организма и высокой летальностью поросят в первые 2 нед жизни (см. цв. вклейку).
Историческая справка, распространение, степень опасности и ущерб.Впервые болезнь описали в США Дойл и Хатчингс (1946). Затем она была отмечена в Японии (1956), Великобритании (1957) и во многих странах Европы, а также в нашей стране.
Болезнь регистрируется во всех странах мира с интенсивным ведением свиноводства, и в настоящее время практически не имеется крупных свиноводческих хозяйств, в которых не встречался вирусный гастроэнтерит. Болезнь причиняет большой экономический ущерб
376за счет высокой заболеваемости новорожденных поросят и 100%-ной их гибели, потерь прироста живой массы (до 3. 4 кг) у откормочных свиней и затрат на проведение ветери-нарно-санитарных мероприятий.
Возбудитель болезни. Впервые возбудитель выделил японский исследователь Тайима (1970). Это оболочечный, плеоморфный ДНК-содержащий гемадсорбирующий вирус семейства Coronaviridae, рода Coronavirus, ви-рион диаметром 60. 160нм, покрытый гликопротеидным слоем булавовидных отростков, напоминающих солнечную корону.
Гликопротеид «короны» индуцирует в организме синтез вируснейтра-лизующих антител. Вирус эпителиотропен, репродуцируется и накапливается в эпителиальных клетках тонкого отдела кишечника, альвеолярных макрофагах легких и в миндалинах. Легко адаптируется и репродуцируется в цитоплазме первичных и перевиваемых клеток органов свиней, не вызывая в первых пассажах ЦПД. Штаммы вируса, выделенные в разных странах, серологически идентичны, но существует иммунологическое различие между кишечными полевыми и культуральными штаммами. Вирус имеет антигенное родство с гемагглютинирующим коронавирусом, вызывающим энцефаломиелит у поросят, а также с коронавирусом собак и коронавирусом — возбудителем инфекционного перитонита кошек.
Вирус устойчив к трипсину, желчным кислотам и изменениям рН от 3,0 до 11,0. В замороженном виде вируссодержащий материал сохраняется до 18 мес, при нагревании до 56 °С инактивируется за 30 мин, при 37 °С — за 4 дня, при комнатной температуре — за 45 дней. В жидких фекалиях больных свиней на солнце инактивируется за 6 ч, в тени — за 3 дня. Растворы фенола (0,5%-ный), формальдегида (0,5%-ный), гидроксида натрия (2%-ный) убивают вирус в течение 30 мин.
Эпизоотология.Восприимчивы только свиньи всех возрастов и пород независимо от сезона года, причем новорожденные поросята, особенно первых недель жизни (2. 3 нед), более чувствительны. В естественных условиях восприимчивы и собаки. Лабораторные животные не заражаются.
Источниками возбудителя служат больные и переболевшие свиньи, но в эпизоотическую цепь могут включаться собаки, кошки, лисицы, перелетные птицы и синантропные грызуны. У больных животных начиная с инкубационного периода и в течение 3. 4 мес после переболевания вирус выделяется с фекалиями, мочой и носовыми истечениями. У собак и лисиц вирус размножается в кишечнике, и они могут загрязнять им внешнюю среду.
Факторами передачи могут быть все объекты внешней среды, загрязненные вирусом, а также мясо и продукты из мяса свиней. Новорожденные поросята заражаются через желудочно-кишечный тракт и органы дыхания от свиноматок-вирусоносителей. В ранее благополучные хозяйства вирус чаще заносится транспортными средствами, с вновь ввозимыми свиньями-вирусоносителями, боенскими отходами. Следует учитывать возможность заноса вируса собаками, птицами и грызунами. В свежем эпизоотическом очаге болезнь проявляется в виде вспышки с охватом в течение 3. 4 дней всего свинопоголовья. Заболеваемость достигает 80. 100%. Поросята-сосуны до 2-недельного возраста и весь молодняк, народившийся в течение 2. 3 нед, погибают, а у свиней остальных возрастных групп болезнь протекает с различной тяжестью. Через 4. 6 нед после первичного появления интенсивность энзоотии снижается. У свиноматок формируется иммунитет, и они передают антитела поросятам с молозивом, предохраняя их от заражения.
377В откормочных хозяйствах вирусный гастроэнтерит чаще возникает среди свиней из вновь поступивших партий с последующим распространением на все поголовье. Летальность составляет до 3 %. Отмечена 2. 3-летняя периодичность энзоотии болезни, что можно связать со сроком передачи свиноматками колострального иммунитета новорожденным поросятам.
Патогенез.В организм свиней всех возрастов вирус попадает главным образом через рот и, проходя через желудок, попадает в кишечник. В эпителии тонкого отдела кишечника он интенсивно репродуцируется, вызывая разрушение ворсинок. Через несколько часов в просвете кишечника накапливается большое количество вируса, откуда он приникает в кровь и во все внутренние органы. В эпителии легких происходит вторичный цикл репродукции, приводящий к существенным повреждениям альвеолярных макрофагов и эпителия легких. В результате интенсивного разрушения цилиндрический эпителий кишечника замещается кубическим и плоским, ворсинки атрофируются.
У 90. 95 % новорожденных поросят атрофия ворсинок происходит в течение первых 12. 24 ч после заражения. Дегенерация, атрофия и десквамация эпителия кишечника и ворсинок приводят к нарушению электролитно-водного баланса в организме, ацидозу, нарушению пищеварения и обмена веществ, что обусловливает профузную диарею и развитие выраженного дисбактериоза. В кишечнике начинает преобладать гнилостная микрофлора. Часто болезнь осложняется развитием эшерихиоза.
Течение и клиническое проявление.Инкубационный период длится 1. Здня, причем у новорожденных поросят он может укорачиваться до 12. 18 ч, а у взрослых свиней удлиняться до 7 дней.
Для первичной вспышки заболевания в хозяйстве характерно, как правило, тяжелое течение с типичными клиническими признаками. У лакти-рующих неиммунных свиноматок отмечают повышение температуры тела до 40,5. 41 °С, отказ от корма, рвоту, жажду, угнетение и полную агалак-тию (прекращение секреции молока), слизистые истечения из носовых отверстий, иногда сопящее дыхание и профузную диарею. В течение 10. 12 дней переболевают практически все свиноматки, у них формируются иммунитет и вирусоносительство.
У поросят старше 30-дневного возраста и откормочных свиней болезнь проявляется такими же клиническими признаками — гипертермией, рвотой, жаждой, отказом от корма, диареей, катаральным ринитом. Переболевает почти все поголовье, больные выздоравливают, остаются вирусоносителями и вторично не заболевают. Смертность достигает 4. 5 %. Нередко у свиней этого возраста болезнь осложняется эшерихио-зом, сальмонеллезом и респираторными заболеваниями, и падеж значительно увеличивается.
У поросят 6. 15-дневного возраста заболевание протекает тяжелее, чем у 30-дневных, с преобладанием профузной диареи и осложнением эшери-хиозом. Падеж среди поросят этой возрастной группы увеличивается до 30. 70%.
Особенно тяжело болезнь протекает у новорожденных поросят (1. 5 дней после рождения). В течение 1. 2 сут заболевают все поросята помета. У них появляются рвота и профузная диарея, они отказываются сосать молозиво. Вначале фекальные массы полужидкие, желтоватого цвета, в дальнейшем их выделение становится непроизвольным, они приобретают серо-зеленоватый цвет и неприятный гнилостный запах. У больных отмечают быструю потерю массы тела, цианотичность и липкость кожных покровов, нарушение координации движения, судороги, затем наступает коматозное состояние. Погибают почти все заболевшие поросята. Отдельные выживают, но резко отстают в росте и часто погибают в более старшем возрасте.
378В стационарно неблагополучных хозяйствах вирус циркулирует среди свиноматок, и в зависимости от складывающего баланса вируса и напряженности иммунитета в их организме возможны вспышки болезни среди новорожденных поросят через определенные промежутки времени, а также среди введенного в стадо нового поголовья. Колостральный иммунитет у поросят сохраняется в течение 50. 60 дней, и после рождения вместе с антителами они получают от свиноматок вирус. Таким образом осуществляется естественная симультанная иммунизация нарождающихся поросят, что обеспечивает их защиту от заболевания в более старшем возрасте.
Патологоанатомические признаки.Кожные покровы поросят синюшные, испачканы фекальными массами, суховатые. Желудок у одних животных переполнен свернувшимся молоком, у других содержит лишь слизистую жидкость сероватого цвета. Слизистая оболочка желудка гипере-мирована, под слизистой оболочкой точечные или полостчатые кровоизлияния. Тонкий кишечник вздут и, как правило, содержит небольшое количество мутноватой, пенистой слизи. Стенки кишечника тонкие, просвечивающиеся, дряблые, легко разрываются. Слизистая оболочка гипе-ремирована, под ней видны точечные кровоизлияния. Толстый кишечник наполнен жидкими кормовыми массами, слизистая оболочка гипереми-рована.
Мезентериальные, портальные, почечные лимфатически узлы увеличены, на разрезе суховаты. Селезенка полнокровная, под капсулой нередко обнаруживаются пятнистые кровоизлияния, напоминающие инфаркты. Печень дряблая, иногда желтоватого цвета, легко разрывается. Почки желтоватого цвета, дряблые, под капсулой кровоизлияния.
У взрослых свиней кроме геморрагического гастроэнтерита находят размягчение почек и резко выраженную атрофию ворсинок в тощей и подвздошной кишке.
Диагностика и дифференциальная диагностика.Предположительный диагноз устанавливают на основании эпизоотологических, клинических и патологоанатомических данных.
В лабораторию для исследования направляют тощую и подвздошную кишку с содержимым и мезентериальные лимфатические узлы от 8. 9 поросят 2. 3 пораженных пометов. Материал отбирают не позднее чем через 2 ч после смерти и в сосудах Дьюара или в термосе с сухим льдом отправляют с нарочным. В связи с фоточувствительностью вируса вируссодержа-щие материалы следует защищать от действия света.
Для изоляции и идентификации вируса применяют первичные культуры клеток свиней, а также перевиваемую линию клеток. Как экспресс-метод может быть использован метод иммунофлуоресценции (исследование мазков-отпечатков, гистосрезов из кишечника больных, зараженных культур клеток).
Окончательный диагноз подтверждают биологической пробой на 2. 7-дневных поросятах от неиммунных свиноматок — им перорально вводят культуральный вирус или суспензию из стенок кишечника и мезенте-риальных лимфатических узлов, свободную от микрофлоры. Материал для заражения берут от двух-трех только что заболевших поросят и сразу используют.
Ретроспективную диагностику осуществляют серологическими методами (обнаружение вируснейтрализующих антител в сыворотках крови свиней в РН, РИГА и др.).
379Иммунитет, специфическая профилактика.Переболевшие свиньи приобретают иммунитет длительностью до 2 лет. В сыворотках крови через несколько дней после переболевания вируснейтрализующие антитела обнаруживаются в высоких титрах, но в дальнейшем титр антител быстро снижается. Свиноматки с Молозивом передают поросятам иммуноглобулины, однако колостральный иммунитет у поросят непродолжительный и недостаточно напряженный. Поэтому в неблагополучных хозяйствах молодняк необходимо защищать от заражения вирусом с первых дней пост-натального периода, так как они получают от свиноматки слишком большую дозу вирулентного вируса.
Для специфической профилактики болезни разработаны и применяются различные вакцины. Во многих странах для специфической профилактики используют живые вирус-вакцины из аттенуированных штаммов вируса. Эти вакцины вводят свиноматкам внутримышечно, перо-рально, интраназально или комбинированным способом. Низкую эффективность живых вирус-вакцин связывают с утратой вакцинными вирусами белков короны и способности к репродукции в клетках тонкого отдела кишечника.
Профилактика.Для предупреждения возникновения болезни необходимо принимать строгие меры по защите хозяйств от заноса возбудителя извне с животными-вирусоносителями и проводить ветеринарно-сани-тарные мероприятия. Охранно-ограничительные меры сочетают с систематически проводимой профилактической дезинфекцией и дератизацией ферм, дезинфекцией транспортных средств, отпугиванием диких птиц и др.
Лечение.Малоэффективно. Для подавления вторичной микрофлоры назначают антибиотики, нитрофурановые и сульфаниламидные препараты.
Меры борьбы.При подтверждении диагноза хозяйство объявляют неблагополучным и принимают меры, обеспечивающие максимальное разобщение заболевших и здоровых животных. Запрещают ввоз и вывоз свиней, вывоз кормов, перегруппировки животных без согласования с ветеринарным специалистом. Свиноматок вакцинируют.
Помещения для свиней, станки, предметы ухода, оборудование дезинфицируют 1 раз в неделю, а также после отделения новых заболевших пометов. Для дезинфекции используют растворы гидроксида натрия и формальдегида, препараты хлорной извести, известковое молоко (гидро-ксид кальция). Навоз обеззараживают биотермически, трупы свиней утилизируют.
Ограничения в хозяйстве отменяют через 21 день после последнего случая падежа, выздоровления больных или сдачи их на убой и проведения всего комплекса ветеринарно-санитарных мероприятий, предусмотренных инструкцией.
Контрольные вопросы и задания.1. Каковы факторы передачи и основные пути распространения возбудителя ВГС? 2. В чем заключаются различия клинического и эпизоотологи-ческого проявления ВГС у поросят-сосунов, отъемышей и взрослых свиней при острой вспышке болезни и стационарном неблагополучии? 3. На основании каких данных окончательный диагноз болезни считают установленным? 4. Охарактеризуйте основные принципы профилактики и ликвидации ВГС в хозяйстве.
Дата добавления: 2014-11-20 ; Просмотров: 301 ; Нарушение авторских прав? ;
Нам важно ваше мнение! Был ли полезен опубликованный материал? Да | Нет
источник
Гепатит – воспаление печени диффузного характера, сопровождающееся гиперемией, клеточной инфильтрацией, дистрофией, некрозом и лизисом гепатоцитов и других структурных элементов, резко выраженной печеночной недостаточностью. Болезнь возникает на почве поедания испорченных кормов, люпина, вики, ростков картофеля, отравления ядами минерального происхождения, вирусных и инвазионных болезней и др.
Животное угнетено, аппетит понижен, жажда, рвота, повышение температуры тела, учащение дыхания, истечения из носовых ходов с примесью крови, слизистые с желтушным оттенком, зуд кожи и расчесы. Моча приобретает темный цвет. Острая форма протекает 3-4 нед, заканчиваясь выздоровлением или смертью, хроническая переходит в цирроз печени (уплотнение органа, ведущее к нарушению его функционирования). В крови повышается уровень содержания билирубина.
Животному назначается диетическое кормление углеводными и грубыми кормами, внутривенно вводят 20%-ный раствор глюкозы, внутрь – уротропин, карловарскую соль, сульфат магния, преднизолон. При показаниях используют антибиотики, сульфаниламидные, желчегонные препараты (аллохол, циквион, цветки бессмертника и др.).
Профилактика гепатита заключается в предупреждении отравления или перекармливания жирными и недоброкачественными кормами.
Инфекционный гепатит собак Гепатит — вирусное заболевание собак и других плотоядных (песцов, лисиц, шакалов), характеризующееся лихорадкой, воспалением слизистых оболочек и поражением печени.Заболевание вызывается специфическим вирусом из группы аденовирусов. При
Инфекционный гепатит Вирус инфекционного гепатита поражает печень, почки и кровеносные сосуды собак. Этот вирус поражает только собак, причем длительное время после выздоровления животное продолжает оставаться его носителем. Заражение происходит при непосредственном
Инфекционный гепатит Впервые подтверждение вирусной природы этого заболевания было получено Рубартом в 30-х гг. XX в. Сейчас известно, что острая контагиозная инфекция, вирус которой поражает не только собак всех возрастов, но и песцов, волков и лисиц, имеет эпизоотический
Гепатит Гепатит – вирусное заболевание, поражающее печень животного. Вакцинация схожа с вакцинацией чумы, длится 3 нед и закрепляется
Инфекционный гепатит Впервые подтверждение вирусной природы этого заболевания было получено Рубартом в 30-х гг. XX в. Сейчас известно, что острая контагиозная инфекция, вирус которой поражает не только собак всех возрастов, но и песцов, волков и лисиц, имеет эпизоотический
Инфекционный гепатит Впервые подтверждение вирусной природы этого заболевания было получено Рубартом в 30-х г. XX в. Сейчас известно, что острая контагиозная инфекция, вирус которой поражает не только собак всех возрастов, но и песцов, волков и лисиц, имеет эпизоотический
Инфекционный гепатит Данное заболевание вызывается вирусом, поражающим печень собаки. Гепатит передается при прямом контакте с больными особями и через загрязненные предметы.Основными симптомами этого заболевания являются угнетенное состояние животного, снижение
ИНФЕКЦИОННЫЙ ГЕПАТИТ Данное заболевание вызывается вирусом, поражающим печень собаки. Гепатит передается при прямом контакте с больными особями и через загрязненные предметы.Основными симптомами этого заболевания являются угнетенное состояние животного, снижение
Инфекционный гепатит Впервые подтверждение вирусной природы этого заболевания было получено Рубартом в 30-х гг. XX в. Сейчас известно, что острая контагиозная инфекция, вирус которой поражает не только собак всех возрастов, но и песцов, волков и лисиц, имеет эпизоотический
ИНФЕКЦИОННЫЙ ГЕПАТИТ Инфекционный гепатит (воспаление печени) является широко распространенными заболеванием. Болезнь по своим симптомам напоминает чуму, протекает с поражением верхних дыхательных путей, печени, почек и центральной нервной системы.Возбудитель
Гепатит Гепатит – воспаление печени диффузного характера, сопровождающееся гиперемией, клеточной инфильтрацией, дистрофией, некрозом и лизисом гепатоцитов и других структурных элементов, резко выраженной печеночной недостаточностью. Болезнь возникает на почве
Гепатит Это воспаление печени диффузного характера, сопровождающееся гиперемией, клеточной инфильтрацией, дистрофией, некрозом и лизисом гепатоцитов и других структурных элементов, резко выраженной печеночной недостаточностью. Болезнь возникает на почве поедания
Гепатит Гепатит – воспаление печени диффузного характера, сопровождающееся гиперемией, клеточной инфильтрацией, дистрофией, некрозом и лизисом гепатоцитов и других структурных элементов, резко выраженной печеночной недостаточностью. Болезнь возникает на почве
источник
ТОКСИЧЕСКИЙ ГЕПАТИТ (ТОКСИЧЕСКАЯ ДИСТРОФИЯ ПЕЧЕНИ)
Гепатит — воспаление печени, характеризующееся альтеративными (дистрофическими, некротическими и атрофическими) изменениями в паренхиме, экссудативными и пролиферативными изменениями в строме органа, сопровождающееся нарушением его функций. Воспаление печени носит диффузный характер. Одновременно с этим, деление заболеваний печени на воспалительные и дистрофические во многом условное. Известно, что дистрофические процессы в органе протекают на фоне воспалительной реакции, а течение воспаления сопряжено с развитием различного вида дистрофий в гепатоцитах.
Из гепатита у свиней выделена его аутоиммунная нозологическая форма. Такие поражения печени по данным Л.М. Пивовара (1987) возникают в результате сенсибилизации организма антигенами печени и характеризуется иммунным воспалительным процессом, рецидивирующим течением наличием иммунокомпетентных лимфоцитов и противопеченочных аутоиммуноглобулинов.
В ряде работ, опубликованных в последние годы в странах СНГ и за рубежом, описывается экспериментальный вирусный гепатит Е у поросят. Хотя восприимчивость к данному вирусу свиней в естественных условиях в полной мере не доказана, изучение данного вопроса в дальнейшем может внести некоторые коррективы в нозологию болезней печени у свиней.
Патология печени среди заболеваний органов пищеварения у молодняка занимает одно из ведущих мест. Это связано с тем, что болезни желудка и кишечника напрямую коррелируют с поражениями печени, которые регистрируются в среднем у 8,3 — 32,5% молодняка, чаще у поросят 2—4-месячного возраста. При этом погибает до 50 — 60 % заболевших животных.
Этиология и патогенез. Заболевание имеет полиэтиологическое происхождение. Все факторы, которые могут вызвать воспалительные и дистрофические поражения в печени можно разделить на две группы: экзогенного и эндогенного происхождения. В первую группу входят яды растительного, животного и химического происхождения, а также действующие начала в недоброкачественных кормах. Во вторую группу входят, в основном, интермедиарные продукты метаболизма, накопившиеся в крови и организме. Однако необходимо отметить, что данное разделение условное. На практике имеет место комплекс причин экзогенного и эндогенного происхождения. По данным Б.В. Уша (1990) часто первые причины усугубляются вторыми, и образуется «порочный» круг.
Наибольшую опасность представляет скармливание молодняку зерновых отходов, побывавших под дождем, снегом или увлажненных в период уборочных работ. Такие корма часто поражаются токсическими грибами и у животных отмечаются токсические поражения печени. Такие же изменения в органе вызывают минеральные удобрения, накапливаемые в растениях в неиспользованном виде при их нерациональном применении. Кроме того, возможно наличие в кормах и других токсических веществ химического (пестициды, гербициды и др.) и растительного происхождения (алкалоиды, сапонины).
По данным многих авторов поражения печени могут возникать при длительном и бессистемном применении антибиотиков тетрациклинового ряда и других антибактериальных препаратов. Так в ФРГ отмечали случай отравления салиномицином откормочных свиней. Данный антибиотик использовался в ФРГ с декабря 1987 г. как средство повышения эффективности откорма свиней. У части животных под его воздействием наблюдали повреждение печени, а также изъязвление слизистой желудка.
Следует отметить, что антибиотики не являются единственной группой лекарственных средств, широко применяющихся в ветеринарной медицине и способных вызвать токсическую дистрофию печени. К ним относятся препараты групп сульфаниламидов и нитрофуранов. Все фундаментальные руководства по медицинской гепатологии, изданные за последние 15 лет, включают главы или разделы, посвященные острым токсическим и лекарственным поражениям печени.
Наши наблюдения в течение последних лет на промышленных комплексах и экспериментальные исследования позволяют предполагать, что развитие токсической дистрофии печени у поросят-отъемышей может быть вызвано или спровоцировано бесконтрольным применением эритромицина, левомицетина, норфлоксацина, тилозина и сульфадимезина.
Многие авторы отмечают, что токсическая дистрофия возникает чаще всего в тех хозяйствах, где свиней длительное время кормят биологически неполноценными кормами и держат в условиях неудовлетворительного микроклимата. В работах Н.И. Кузнецова (1995) доказано значение недостаточности в кормах серосодержащих аминокислот (метионина, цистина, холина), фолиевой кислоты и витаминов А, Е, С в развитии токсической дистрофии печени поросят. Повреждающее действие на печень в данном случае связывают с недоокисленными продуктами, образующимися в организме в большом количестве при недостатке выше указанных алиментарных факторов. Заболевание часто регистрируется также в районах, характеризующихся дефицитом в почвах усвояемых форм селена.
В исследованиях, проведенных И.М Карпутем, Л.М. Пивоваром и А.Г. Ульяновым, указывается, что хроническое нарушение обмена веществ, а также неоднократные кормовые интоксикации у животных могут приводить к аутоиммунным поражения печени. При этом выявляются аутоантитела к антигенам печени, как в сыворотке крови, так и молозиве.
В последние годы стало известно, что в детоксикации различных соединений, попадающих в организм извне или образующихся в пищеварительном тракте, принимает участие нормальная микрофлора желудочно-кишечного тракта. При гастроэнтеритах этот процесс нарушается, что приводит к усиленному всасыванию ядовитых продуктов в кровь и развитию токсической дистрофии печени.
Существует мнение, что значительная нагрузка на печень в период после отела коров и опороса свиноматок является одной из причин воспалительных и дистрофических поражений печени у приплода.
Патогенез гепатита можно представить в виде процесса, пусковым механизмом которого являются токсические вещества, поступающие с кормом и образующиеся в организме при нарушении пищеварения и межуточного обмена. После всасывания в кровь они попадают в печень, где воздействуют на гепатоцит. В зависимости от дозы и длительности их поступления в паренхиме органа возникают различные процессы: снижается активность окислительных ферментов, резко падает содержание гликогена, развивается жировая инфильтрация, наблюдается распад печеночных клеток, а в дальнейшем некроз печени. Основные отличия в патогенезе сводятся к разной трактовке причинно-следственных связей, приводящих к гибели гепатоцита.
По мнению В.Н. Байматова [1990] в первую очередь в печени расходуется гликоген, так как он используется в процессе детоксикации. Соответственно, в организме мобилизируются резервные и компенсаторно-приспособительные механизмы для восстановления гомеостаза. Это, прежде всего, активация процесса глюконеогенеза и кетогенеза. В крови увеличивается концентрация промежуточных продуктов основного обмена: пировиноградной и молочной кислот, кетоновых тел, аминокислот. Накопление этих продуктов вызывает «порочный» круг. Перевозбуждение симпатической нервной системы, приводит к ускорению глюконеогенеза. Образовавшийся ацетон в повышенном количестве является гепатотропным ядом, действует на гепатоцит.
В то же время в цитоплазме клеток печени, как правило, накапливается жир. Жировая дистрофия является компенсаторно-приспособительной реакцией организма на недостаток энергетических и пластических запасов. Однако увеличение кетоновых тел в результате глюконеогенеза может приводить к морфофункциональным повреждениям печени. Развитие жировой дистрофии печени усугубляется тем, что в крови развивается ацидоз вследствие повышенного образования пировиноградной и молочной кислот. Более того, стимулируется в соединительной ткани печени активность фибробластов и начинается ее интенсивное разрастание. Как следствие ухудшается питание гепатоцитов. Развивается выраженная жировая дистрофия печени. С ее появлением нарушается физико-химическая связь структурного цитоплазматического белка и клеточного жира, а это ведет к некробиозу, а затем и некрозу клеток печени.
Немаловажным является и то, что яды различного происхождения попадают в печень через портальную вену и большой круг кровообращения, первоначально поражают эндотелии капилляров, купферовские клетки и клетки соединительной ткани. Дистрофические изменения в печеночных клетках являются следствием воспалительного процесса вышеперечисленных клеток. Печеночные клетки вначале диффузно набухают, сдавливают и закупоривают желчные пути. Функция печеночных, эндотелиальных и соединительнотканных клеток ослабевает, а затем они погибают. При этом нарушаются пигментный, белковый и углеводный обмены.
Описанные процессы особенно прогрессируют при дефиците в рационе метионина, цистина, холина и токоферола. Отсутствие или недостаток этих липотропных факторов приводит к тому, что вновь образованные жирные кислоты не участвуют в синтезе фосфолипидов, а откладываются в печени в составе триглицеридов. Депонированию жира в печени способствует снижение уровня окисления его в результате падения липолитической активности. Происходит количественное и качественное изменение ферментных систем. В самой же печеночной клетке происходит увеличение ферментов за счет распада и освобождения ферментов из лизосом цитоплазмы. Если гепатоциты были в состоянии некробиоза, то протеолитические ферменты переводят ее в состояние некроза.
В развитии токсической дистрофии (гепатита) основополагающую роль играет и недостаток селена. Здесь существенное значение приобретают глубокие и разносторонние расстройства окислительно-восстановительных процессов и клеточного дыхания. Нарушение окислительно-востановительных процессов при воспалении печени проявляется при нарушении всех видов обмена веществ.
В последние годы все чаще ведущая роль в патогенезе острых токсических поражений печени, отводится перекисному окислению липидов (ПОЛ). Так, в работах Л.Л. Ахунджаковой [1999] указывается на интенсификацию ПОЛ при токсических поражения печени. Одновременно в гепатоцитах происходит снижение энергообразующей способности, подавление белоксинтетической функции и, как следствие, повышение уровня эндотоксемии за счет образования среднемолекулярных пептидов, оказывающих угнетающие действие на процессы дыхания и окислительного фосфорилирования в митохондриях гепатоцитов, что, в конечном счете, может приводить к их гибели.
Пути патогенеза могут быть вариабельны и не укладываться в обозначенные рамки. Следует учитывать, состояние других органов и систем. В первую очередь желудочно-кишечного тракта, который непосредственно соприкасается с токсическими веществами нарушающими его структуру и функцию. Изменение моторно-эвакуаторной, секреторной и синтетической функции желудка и кишечника влияет, в свою очередь, на патогенез гепатита. С учетом состояния организма, эндогенных и экзогенных причин действующих на организм возможно различное течение заболеваний печени.
Органы брюшной полости имеют топографические взаимоотношения друг с другом через кровеносную, лимфатическую и нервную системы, а также через биологически активные вещества, вырабатываемыми и выделяемыми этими органами при координирующем действии центральной нервной системы. Ряд органов имеют общее кровообращение за счет имеющихся анастомозов. В результате кровь из одного органа может попадать в другой. Тесная взаимосвязь органов брюшной полости в онтогенезе по ряду признаков нередко вызывает и их сочетанную патологию.
Имеются данные о том, что при патологии печени возникают также функциональные, а затем и морфологические изменения в эндокринной системе. Установлено, что при гепатите в надпочечниках нарушается выведение кетостероидов, а секреция оксикортикостероидов увеличивается. Нарушается также инактивация в печени инсулина, тироксина, эстрогенов, что приводит к морфофункциональным изменениям в эндокринных органах, вырабатывающих эти гормоны. В дальнейшем может нарушаться функция гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковой системы.
Симптомы. Диагностика гепатита затруднена в связи с отсутствием типичных симптомов и однотипной клинической картины заболевания. Проявления болезни во многом зависят от степени интоксикации организма. При остром течении гепатита болезнь продолжается 1 -2 дня. В этот период отмечают вялость, снижение аппетита. Температура тела иногда повышается до 40,5°С, затем снижается и становится субнормальной. У некоторых животных появляется мышечная дрожь, шаткость зада, анарексия. В отдельных случаях отмечают нервное возбуждение, движение по кругу и судороги. Пальпация и перкуссия области печени болезненная. Наблюдается рвота, расстройство пищеварения, увеличивается объем живота. У больных учащается пульс и дыхание, отмечается цианоз кожи и слизистых оболочек, затем наступает коматозное состояние и смерть.
Подострое течение болезни чаще встречается у поросят-отъемышей и у телят на доращивании. При этом клинически отмечают угнетение животных различной степени, температура тела редко когда повышается, аппетит отсутствует, наблюдается рвота, запоры, сменяющиеся поносами. Появляется метеоризм кишечника, кал светло-глинистого цвета. Иногда слизистые оболочки и кожа окрашиваются в желтый цвет. Возникают нарушения сердечной деятельности. У отдельных животных отмечается тремор.
При хроническом течении болезни постепенно развивается слабость, снижается аппетит, появляется шаткая походка, судорожные сокращения мышц тела. У отдельных животных отмечаются трофические растройства кожи — токсикодермия, которая характеризуется омертвением верхнего слоя кожи ушей. Иногда заметна желтушность кожи и слизистых оболочек, отечность подкожной клетчатки и нижней части живота.
Все выше указанные клинические признаки во многом схожи с симптомами, отмечаемыми при ряде других болезнях органов пищеварения, поэтому постановка окончательного диагноза должна вестись на основании лабораторных исследований. У больных животных снижается концентрация гемоглобина в среднем на 15-20%. Число лейкоцитов увеличивается с высокой степенью достоверности в среднем на 3540%, в лейкограмме отмечают гиперрегенеративный сдвиг ядра влево в нейтрофильной группе.
Более специфичными в диагностике гепатита являются биохимические тесты крови. Их можно разделить их на следующие группы:
^ пробы, направленные на изучение обмена пигментов, белков, углеводов, липидов, витаминов и минералов;
^ пробы контроля активности гепатоспецифических ферментов;
^ пробы, изучающие детоксикационную функцию;
> пробы анализа экскреторной функции.
Исследование пигментного обмена включает определение билирубина в сыворотке крови, уробилина в моче и стеркобилина в кале. По мнению большинства исследователей динамика билирубинемии у животных довольно четко отражает фазу и тяжесть болезненного процесса. Содержание билирубина в крови в 2-3 раза выше нормы является признаком билирубинемии (желтухи). Одновременно с увеличением билирубина в сыворотке происходит повышение концентрации уробилина в моче и стрекобилина в кале.
Нарушение обмена белков при гепатодистрофии сопровождается гипер- или гипопротеинемией и диспротеинемией. Последнее происходит за счет увеличения концентрации у-глобулинов и значительного снижения альбуминов. С целью контроля нарушений углеводного обмена определяют содержание в сыворотке глюкозы и применяют углеводные нагрузки с использованием глюкозы, галактозы, сахарозы.
Из нарушений липидного обмена отмечают липидемию, гиперхолестеринемию, увеличение кетоновых тел и неэстерифицированных жирных кислот. Из изменений в минерально-витаминном обмене наиболее типичным является снижение концентрации жирорастворимых витаминов и нарушение обмена кальция и фосфора, с развитием гипокальцемии и гипофосфатемии. По данным А.П. Кудрявцева [1984] токсическая дистрофия печени у поросят сопровождается повышение концентрации железа в крови. По его мнению, данный признак может использоваться для дифференциальной диагностики.
Скрыто протекающие заболевания печени сопровождаются маловыраженными сдвигами в биохимическом состоянии крови. Важное значение в этом случае приобретает определение активности ферментов, которая изменяется раньше, чем другие биохимические пробы. При патологии печени претерпевает существенные изменяется активность аспартат- и аланинаминотрасфераз, холиноэстеразы, лактатдегидрогеназы, щелочной фосфатазы, гамма-глутамилтранспептидазы, альдолазы, фруктозо-1-фосфоалдодазы, сорбитолдегидрогеназы, лейциаминопептидазы, орнитинкарбамоилтрансферазы, глютамилдегидрогеназы.
Для дифференциальной диагностики заболеваний печени наиболее надежным является гистологическое исследование, которое в 100% случаев дает верную морфологическую характеристику органа. Эти методы просты, легко выполнимы и мало отражается на здоровье и продуктивности животных.
Патолого-анатомические изменения. Они во многом зависят от этиологического фактора. На ранних стадиях развития болезни печень слегка увеличена, дряблой консистенции, иногда охряно-желтого цвета. При некрозе паренхимы дряблость и морщинистость печени выражены более отчетливо, цвет серо-глинистый или темно-красный. Отмечаются дегенеративные изменения в сердечной мышце и почках. Набухшая, разрыхленная, гиперемирована, иногда с кровоизлияниями, слизистая оболочка желудочно-кишечного тракта покрыта тягучей слизью. Наблюдаются эрозии и изъязвления. Кроме выше указанных изменений часто наблюдается увеличение размеров желчного пузыря и его стенки за счет разрастания соединительной ткани.
Лечение. Эффективность лечебно-профилактических мероприятий во многом зависит от степени интоксикации организма и периода болезни. В случае развития необратимых изменений в печени прогноз неблагоприятный, лечение длительное, дорогостоящее и малоэффективное. Таких больных животных экономически более целесообразно отправлять на вынужденный убой.
Поэтому проведение лечебных мероприятий необходимо начинать как можно раньше с использованием методов этиотропной, патогенетической и заместительной терапии. В первую очередь необходимо устранить действие этиологического фактора, вызвавшего поражение печени. Обязательным также является улучшение условий содержания и ухода за животными. В рацион желательно ввести углеводистые корма и ограничить использование белков и жиров до оптимальных значений.
Молодняк выдерживают на 8 -12-часовой голодной диете без ограничения водопоя. При остром течении болезни для удаления токсических веществ их желудочно-кишечного тракта внутрь применяют маслянистые слабительные вещества, такие как касторовое, подсолнечное, льняное масла в дозе 40-80 мл/гол. Также с этой целью можно использовать натрия сульфат (25-50 г) или карловарскую искусственную соль (2-5 г). С целью подавления токсигенной микрофлоры внутрь назначают антибиотики и сульфаниламиды в терапевтических дозах. В дальнейшем больным животным скармливают диетические корма (молоко, обрат, овсяный кисель, жидкие каши из ячменной и овсяной крупы, простоквашу). Кроме того, назначают ацидофильную бульонную культуру, пропионово-ацидофильную бульонную культуру и др. 2 раза в сутки в течение 4-5 дней.
Медикаментозное патогенетическое лечение должно быть направлено на восстановление обмена веществ в гепатоцитах, для чего используют глюкозу, липотропные препараты, витамины, а также средства, стимулирующие желчеотделение. При необходимости назначают сердечные препараты: камфорное масло, раствор натрия кофеин-бензоата. Из липотропных средств применяют холина хлорид, метионин, метилметионинсульфония хлорид, липоевую кислоту, липомид и др. Из средств, усиливающих желчеобразование и желчевыделение, применяют хологон, аллохол, кукурузные рыльца и др.
При наличии судорог приступы снимают введением внутрь анальгина. Для увеличения выхода желчи в двенадцатиперстную кишку в период снижения воспалительной реакции в печени, при хроническом течении гепатодистрофии показано применение внутрь свиньям аллохола (таблетки, содержащие сухую желчь) или хологона.
С целью стимуляции дезинтоксикационной функции печени, связывания токсинов и их быстрого выведения из организма имеются рекомендации по использованию поросятам внутрибрюшинно 0,037%-ного раствора натрия гипохлорита, а также внутрь с кормом сорбента СВ-1 [С.С.Абрамов и др., 2000; Е.А.Панковец и др., 2000]. В литературе имеются сведения о хорошей лечебно-профилактической эффективности натрия селенита и витамина Е [Ш. М. Абдуллаев, 1985; Л. Ф. Виноградова, Т. С. Илларионова и др., 1998]. Недостатком препаратов селена является его высокая токсичность, а витамина Е — использование его в виде масляных растворов.
Таким образом, для лечения молодняка при заболеваниях печени и других органов пищеварения в условиях промышленной технологии ведения животноводства наиболее рациональным и эффективным является использование комплексных препаратов, содержащих в своем составе липотропные вещества, антиоксиданты и витамины. Применение этих средств показано также при массовых обработках поросят и телят антибактериальными препаратами с целью снижения негативного влияния последних на печень.
Профилактика. При проведении профилактических мероприятий принимают меры по недопущению попадания в организм животных ядовитых веществ. С этой целью необходимо проводить постоянный контроль питательности рациона, санитарного качества кормов, условий содержания как приплода, так и матерей. В состав рациона должны входить, согласно существующим нормам для каждой возрастной группы животных, незаменимые аминокислоты (лизин, метионин, цистин), а также соответствующий набор витаминов и минеральных веществ. Все корма необходимо регулярно исследовать на токсичность.
Обоснованием к проведению профилактических мероприятий по предупреждению поражений печени у животных могут служить результаты биохимического исследования крови. При этом о повреждении печени свидетельствуют уменьшение количества общего белка за счет снижения уровня альбуминов, увеличение концентрации общих липидов, холестерина и билирубина, возрастание активности АСТ, АЛТ, ГГТП и ЩФ. Такие исследования целесообразно проводить регулярно в рамках диспансеризации, которая в условиях комплекса является неотъемлемой частью технологического цикла.
При вскрытии трупов павших животных или анатомировании внутренних органов вынужденно убиваемого молодняка необходимо проводить патоморфологическую оценку состояния печени. Ее поражения в 20-ти и более процентов случаев при отсутствии инфекционных заболеваний служит показателем неблагополучия хозяйства по токсическим повреждениям печени и требует проведения соответствующих ветеринарных мероприятий.
С этой целью рекомендуется применять молодняку 0,1%-ный раствор натрия селенита, витаминные препараты, липотропные средства. Для недопущения медикаментозных поражений печени необходимо строго соблюдать рекомендации по дозировке препаратов и контролировать функциональное состояние печени в период проведения обработок животных. Эффективной мерой профилактики может служить дача антибактериальных препаратов совместно с гепатопротекторами, что в значительной степени снижает токсичность первых.
источник