Серологическое исследование на маркеры вирусных гепатитов

Гепатит В – это воспалительное заболевание печени, которое провоцирует вирус гепатита B (HBV). Этот опасный недуг имеет тяжёлое течение и грозит серьёзными осложнениями. Когда происходит инфицирование, вирус быстро размножается, провоцируя разрушение печеночных клеток (гепатоциты).

По медицинской статистике, у 10% пациентов с гепатитом процесс хронизируется. Тогда повышается вероятность цирроза и рака печени. Выявить патологию на ранних этапах проблематично, так как выраженные симптомы не наблюдаются. Нередко инфекция протекает без признаков желтухи (окрашивание кои и видимых слизистых оболочек в жёлтый цвет), из-за чего диагностика ещё больше затрудняется.

Вирус проникает в организм через кровь, например, при незащищённом сексе, приёме внутривенных наркотиков, посещении медицинских учреждений или салонов красоты, где используют не продезинфицированные инструменты и т. д.

Во время диагностики большое значение имеют маркеры гепатита B. С их помощью можно выявить заболевание на ранних этапах, определить степень его тяжести и составить грамотную схему лечения.

HBV устойчив к перепадам температуры, замораживанию, кислотной среде. Вирус содержит дезоксирибонуклеиновую кислоту в отличие от других возбудителей заболевания, геном которых представлен РНК (рибонуклеиновая кислота). Инфекционный агент встраивается в структуру гепатоцитов, блокирует синтез нормальных белков, вызывая воспаление печеночных клеток. Патогенные микроорганизмы могут поражать селезёнку, лимфоузлы, костный мозг. HBV тяжело отличить от клеток собственного организма, поэтому он может стать причиной аутоиммунного гепатита.

Анализы на маркеры вирусного гепатита B (ВГВ) и точная их интерпретация даёт возможность подтвердить инфекцию, спрогнозировать её течение, а также оценить силу иммунной реакции.

Цели диагностики для выявления маркеров ВГВ:

• Первичное выявление носителей вируса. Для этой цели определяют показатель HBsAg (показатель заболевания до появления первых симптомов), а также иммуноглобулины класса М (IgM), которые свидетельствуют об острой фазе инфекции.
• Подозрение на гепатит B с хроническим течением. Для выявления антител класса G (IgG), при которых болезнь имеет вялотекущее течение, назначают лабораторные исследования.
• Оценка напряжённости иммунитета. Анализ поможет определить пациентов из группы риска, которые нуждаются в вакцинации, и выявить силу реакции против HBV после иммунизации.
• Контроль над динамикой терапии. После исследования врач может вовремя скорректировать схему лечения.

Чтобы диагностировать болезнь, используют клинические анализы или экспресс-тесты. Они позволяют выявить разные стадии недуга: заражение, выздоровление, развитие.

Справка. Антигены – это чужеродные вещества для организма, при появлении которых образуются антитела. Это белковые молекулы или фрагменты HBV, которые появляются после инфицирования организма. Антитела – это белковые соединения, которые препятствуют размножению вируса и нейтрализуют его токсины.

ДНК вируса гепатита B свидетельствует о присутствии инфекционного агента. При длительном наличии этого маркер инфекция переходит в хроническую форму. Этот показатель указывает на то, что HBV стремительно размножается и разрушает печень. ДНК вируса гепатита B можно выявить на ранних этапах патологии.

HBs Ag – это ранний маркер гепатита В. Его ещё называют австралийским антигеном по той причине, что впервые его выявили у коренных жителей Австралии. Как упоминалось ранее, это внешняя белковая оболочка патогена. У этого генотипа выделяют несколько субтипов: ayw, aur, adw, adrq, adrq+, которые незначительно отличаются строением.

Этот маркер можно обнаружить во время инкубации гепатита или на протяжении 1 – 1,5 месяца после проявления первых симптомов. Если этот показатель обнаруживается в кровотоке более полугода, то повышается вероятность развития хронического ВГВ.

Донорскую кровь рекомендуется проверять на наличие HBs Ag. Однако многие иммуноферментные тесты не позволяют с точностью обнаружить данный маркер у пациентов. Тогда повышается вероятность ложноотрицательного или ложноположительного анализа на гепатит B. Ложноотрицательный результат получают, если исследование проводят через 3 – 4 недели после возможного инфицирования, если болезнь имеет пассивное течение, у пациента низкая концентрация HBs Ag либо редкие субтипы. Ложноположительный результат провоцируют различные факторы: неправильный забор биологического материала, онкологические заболевания и т. д.

Чтобы оценить течение патологии, а также спрогнозировать его исход, важно контролировать систему HBs Ag – анти-HBs. Антитела к поверхностному антигену вируса при гепатите B (острая форма) обнаруживают через длительный промежуток времени после исчезновения HBs Ag.

Если анти-HBs вновь обнаруживаются, то это свидетельствует о том, что постинфекционный иммунитет сформировался. То есть пациент выздоровел после ВГВ.

Если антитела обнаружили во время острого течения инфекции или сразу после того, как исчез HBsAg, то это плохой признак. Тогда повышается риск тяжёлого гепатита B, который сопровождается признаками печеночной энцефалопатии (нервно-психические нарушения вследствие дисфункции печени).

При хроническом ВГВ оба маркеры могут появляться одновременно.

Антитела к HBs могут присутствовать до конца жизни.

Анти-HBsAg – это единственные составляющие иммунной системы, которые обладают защитными свойствами. То есть эти иммуноглобулины защищают организм от повторного инфицирования гепатитом Б.

Сейчас для профилактики инфекции типа В применяют вакцины рекомбинантного HBsAg. Раствор вводят внутримышечно, после чего антитела начинают выделяться спустя 14 дней. Для формирования полноценного иммунитета прививку делают 3 раза.

Вакцинация считается успешной, если уровень антител превышает 100 мМЕ/мл. Через 9 – 12 лет их концентрация может немного снизиться. Если количество иммуноглобулинов не превышает 99 мМЕ/мл, то такая реакция иммунитета считается отрицательной или слабой.

Резистентность к вакцине наблюдается у пациентов с ВИЧ или весом выше 70 кг. По мнению медиков, чтобы достичь адекватных результатов иммунопрофилактики гепатита B, дозу препарата нужно увеличить.

Осторожно . Проводить вакцинацию лиц, которые перенесли ВГВ, не рекомендуется, так как это чрезмерная нагрузка на и без того, ослабленный иммунитет. Поэтому перед прививкой нужно провести исследования на наличие HBsAg, анти-HBs, а также HB core-антител. Если хотя бы один из маркеров присутствует в крови, то вакцинация противопоказана.

При снижении количества антител после иммунизации рекомендуется провести ревакцинацию (повторная прививка). Хотя в большинстве случаев поствакцинальный иммунитет сохраняется, даже если концентрация анти-HBsAg снижается. В дополнительной дозе препарата нуждаются только пациенты с ВИЧ, хронической недостаточностью почек, болезнями печени, а также лица, которым назначили гемодиализ (внепочечное очищение крови).

Этот антиген локализуется только в ядрах печеночных клеток заражённого человека. Обнаружить его можно при биопсии печени, в кровотоке HBcore-Ag не циркулирует. Из-за того что антиген занимает сердцевинное положение в вирусной частице, он обладает высокой иммуногенностью. Именно по этой причине антитела к нему начинают выделяться практически с первых дней болезни, когда внешние симптомы ещё отсутствуют.

Антитела к HBcore-Ag делят на 2 вида: иммуноглобулины класса М (IgM) и G (IgG). IgM выявляют ещё во время латентного периода, когда клинические проявления отсутствуют. Этот маркер свидетельствует о ВГВ с острым течением. Его можно наблюдать от 6 месяцев до 1 года, а после излечения он исчезает. IgM обнаруживают, когда хронический процесс обостряется.

Анализ на IgM и IgG помогает диагностировать гепатит B в «серонегативный» период, когда отсутствую другие HBS-маркеры.

Справка. Иногда HBcore-IgM и IgG могут указывать на заболевания костно-мышечной системы.

Такой антиген гепатита B, как HBeAg обнаруживается в кровотоке во время инкубации или при первых симптомах болезни. Если у больного определяют высокую концентрацию этого маркера, то он требует особого внимания. Если его активность сохраняется на протяжении 3–4 недель, то повышается вероятность перехода инфекции в хроническую форму. Снижение его уровня или полное отсутствие свидетельствует о выздоровлении.

При появлении этого антигена повышается заразность крови и других биологических жидкостей больного. Если острый гепатит протекает легко, то уровень HBeAg уменьшается спустя 20–40 дней после заражения. При этом одновременно повышается концентрация анти-HBe, пока они полностью не замещают антигены.

Быстрое увеличение количества антител свидетельствует о скором выздоровлении, которое исключает возможность перехода инфекции в хроническую форму. Если концентрация данных маркеров низкая или они отсутствуют, то повышается риск хронизации патологического процесса.

Если при гепатите B с хроническим течением количество HBeAg и ДНК вируса повышается, то это говорит о том, что его активная репликативность (способность к воспроизведению подобного себе потомства) сохраняется. Когда уровень антигена и ДНК снижается, речь идёт об интегративном гепатите, когда генный аппарат вируса и гепатоцита объединяются.

Иногда при инфицировании штаммом «е» или мутации инфекционного агента HBeAg может не проявляться, при этом его антитела присутствуют, а способность к размножению сохраняется. Тогда уровень ДНК HBV превышает 10˄5 копий/мл.

После того как человек выздоравливает, антитела к HbeAg сохраняются от полугода до 5 лет.

Лабораторная диагностика гепатита B помогает обнаружить серологические маркеры, ДНК, определить стадию инфекции и спрогнозировать её исход. Наиболее информативным считается анализ крови. Перед исследованием запрещено принимать пищу на протяжении 8 часов до назначенного времени.

Чтобы выявить HBV, применяют следующие анализы:

• ПЦР (полимеразная цепная реакция) для выявления ДНК вируса.
• Качественное выявление антител класса Ig G к Hbc и HBsAg.
• Исследование крови, которое позволяет определить HBeAg и иммуноглобулины класса М к HBcor.

С помощью иммунологических тестов по нескольким маркерам можно дополнить картину:

• Обнаружение вирусных частиц HBsAg может указывать на наличие вируса, хотя нередко их обнаруживают у здоровых людей. Отрицательный результат – до 0,05 МЕ/мл, положительный – более 0,05 МЕ/мл.
• HBe-антиген обнаруживают почти у каждого больного. Этот маркер свидетельствует об остром гепатите и высокой заразности больного. Отсутствие белка – это норма.
• Антитела класса М указывают на острый BГВ, кровь и другие биологические жидкости больного заразны, существует вероятность хронизации процесса. У здорового человека этот маркер отсутствует. Иммуноглобулины класса G свидетельствуют о том, что иммунитет против болезни сформировался.
• Антитела к HBe – это признак благоприятного течения инфекции и формирования иммунной защиты. Такое же значение имеет маркер анти-Hbs.

Метод ПЦР – это современный и высокоинформативный анализ на гепатит Б, который позволяет выявить ДНК HBV в гепатоцитах. Медики выделяют следующие виды исследования:

• Качественное ПЦР назначается при подозрении на ВГВ. Если результаты колеблются от 10 до 500 МЕ/мл, а уровень ДНК низкий, то HBV не обнаружен.
• Количественное ПЦР дает представление о том, насколько показатели крови больного далеки от норм. Это исследование позволяет определить фазу заболевания и составить тактику лечения. Количественный анализ более чувствительный, чем качественный. Врач подсчитывает обнаруженные ДНК, которые выражают в копиях на мл или МЕ/мл.

Чтобы правильно расшифровать анализы, нужно сравнить результаты с нормальными показателями и сопоставить их с присутствующими симптомами гепатита B. При правильной расшифровке качественных и количественных характеристик маркеров гепатита врач выявит инфекцию, определит её стадию, форму и составит прогноз.

Гепатит B – это опасная патология, которая не имеет яркой выраженности и часто приобретает хроническое течение. Серологические маркеры помогут выявить недуг даже на ранней стадии, когда вероятность осложнений ещё минимальная. Предупредить ВГВ поможет вакцинация. Чтобы подстраховать себя, рекомендуется время от времени сдавать анализ на маркеры гепатита B.

источник

Со времени открытия серологических маркеров инфекций данный анализ является основным в лабораторных исследованиях. Цель его проведения – помощь в распознавании заболеваний инфекционного происхождения, а также выявление недугов, обусловленных нарушением защитных функций иммунной системы.

Диагностирование гепатитов, краснухи, сифилиса, ВИЧ и многих других болезней в наше время стало доступно благодаря анализам на серологические маркеры инфекций. Расшифровка результатов исследований помогает достаточно быстро определить наличие заболеваний, которые иногда бывает трудно выявить обычными способами.

Анализ свойств и эффектов сывороток

Происхождение наименования «серология» — от лат. названия сыворотки (serum). Сочетание с известным logos означает «учение о сыворотке». Под серологией подразумевается раздел иммунологии, изучающий специфику взаимодействия антител сыворотки с антигенами.

Основа серологической диагностики – выявление специфических антител, образующихся в ответ на инфицирование определенным антигеном. По наличию в крови определенных антител делается заключение о характере и степени активности инфекции.

Серологический метод используется в диагностике:

• герпеса
• кишечных инфекций
• цитомегаловируса
• эпидемического паротита
• атипичной пневмонии
• краснухи
• хламидиоза
• токсоплазмоза
• сифилиса
• ВИЧ
• кори
• вирусных гепатитов В и C

Исследование применяют и в случаях, когда требуется выявление причин миокардитов.

Серологические реакции могут быть применены:

1. В случае если нужно подтвердить диагноз. Практикуется добавление в сыворотку крови соответствующего антигена. Наличие антител доказывается либо опровергается характером ответной реакции.
2. В случае, когда о характере заболевания ничего не известно, видовая принадлежность антигенов, находящихся в крови, выявляется добавлением антител.

Для проведения анализа из крови предварительно удаляют компонент, ответственный за свертываемость (фиброген).

Таким образом, цель проведения серологического анализа крови:

• Постановка диагноза. Исследование показано в случае, когда требуется лабораторное подтверждение присутствия в сыворотке крови возбудителя.
• Назначение лечения. Анализ поможет выявить реакцию возбудителя на различные лекарства.

Использование серологического анализа практикуется и при диагностике аутоиммунных заболеваний. Проведение процедуры помогает выявить антитела к тканям организма.

Вирусные гепатиты относятся к тому виду серьёзных инфекционных заболеваний, которые могут достаточно долго протекать, ничем себя особенно не проявляя. В трудности своевременного обнаружения и заключается его главная опасность.

Проведение анализа на маркеры, появляющиеся в крови как следствие введения вакцины или перенесенного заболевания, позволяет выявить гепатит в ранней фазе, в которой он лучше поддается излечению.

Этот вид (так называемая желтуха) встречается достаточно часто. Передается при употреблении инфицированных продуктов и воды. При его диагностике анализ делается на наличие антител:

• Аnti-НАV IgМ. Существование в крови ранних антител свидетельствует о наличии вируса в организме не менее 25-30 дней.
• Аnti-НАV IgG. Его наличие – свидетельство того, что пациент переболел данной формой гепатита в прошлом.

Передается половым путем. Вирус может попасть в кровь и при использовании нестерильных инструментов. Распространен широко, при своевременном выявлении хорошо поддается лечению. По выздоровлении организм приобретает к вирусу пожизненный иммунитет. Нелеченый гепатит В, вероятнее всего, перейдет в хроническую форму, которая грозит осложнениями в виде цирроза и рака печени.

При выявлении гепатита В ищут следующие маркеры:

• HВsAg. Специфический антиген, показывающий наличие заболевания.
• Аnti-НВs. Его появление свидетельствует о завершении процесса.
• Аnti-НВс IgG. Его длительное нахождение в организме указывает на течение процесса.
• Аnti-НВс IgM. Его обнаружение является признаком начальной фазы заболевания.
• Аnti-НВе. Его присутствие – признак вялотекущей формы гепатита.

Наиболее тяжёлая форма заболевания. Поддается лечению лишь на ранних стадиях. Исход несвоевременно выявленной болезни – летальный.

По результатам исследований выявляются следующие маркеры:

• Аnti-НСV. Свидетельствует о наличии заболевания.
• Аnti-НСV IgM. Позволяет судить о достаточно недавнем заражении, что дает основания для благоприятного прогноза.

Симптоматика та же, что и у гепатита В. Диагностируется присутствием аnti-НDV Ig G, характерного для гепатита В, дополненного аnti-НDV Ig M.

В целом подобен гепатиту А, но более опасен для беременных. Выявляется присутствием anti-HEV lg.

По свойствам близок к гепатиту С, но менее опасен.

Необходимые анализы во время беременности

Беременность – период, когда подверженность инфекциям становится достаточно острой проблемой для организма. Существует группа инфекций, которые опасны для беременных, в то время как для остальных групп пациентов не представляет угрозы. Названа эта группа ТОRСН-инфекциями. Название образовано из первых букв входящий в группу названий инфекций:

• токсоплазмоз
• другие инфекции (сифилис, листериоз, хламидиоз и др.)
• краснуха
• цитомегаловирусная инфекция
• герпес

Выявленные антитела IgG означают наличие иммунитета к заболеванию. Препятствием для планирования беременности не являются.

Обнаружение IgM возможно лишь в острой стадии. Беременность можно планировать лишь после выздоровления.

Краснуха. Относится к инфекциям, передающимся внутриутробно. Перенесенное заболевание формирует пожизненный иммунитет. Тяжесть, с которой протекает заболевание, прямо пропорциональна возрасту больного. У плода инфицированной женщины велика вероятность развития тяжелых пороков. Сегодня есть возможность привиться от краснухи, тем самым избежав вероятности заболеть во время беременности. После прививки в течение некоторого времени в крови сохраняются титры IgM, поэтому от планирования беременности лучше воздержаться в течение 3 мес.

Перед прививкой нужно сделать серологический анализ, после которого можно принимать решение о проведении прививки.

• IgМ-, IgG-: обозначает отсутствие антител и необходимость вакцинации.
• IgМ-, IgG+: показывает наличие иммунитета. Вакцинация не требуется.
• IgМ+, IgG-: заболевание в ранней стадии, период обострения.
• IgМ+, IgG+: период обострения.

Динамика отслеживается по степени понижения IgM и увеличения IgG. Заболевание опасно в острой фазе при положительном значении IgM.

Появление в крови IgM либо IgG, если ранее их у данной пациентки не наблюдалось, означает развитие заболевания. Такой же вердикт можно вынести при 4-кратном повышении за две-три недели количества IgG. Срок давности предыдущего обследования также имеет значение: антитела могут присутствовать в крови в течение 2 лет от начала заболевания. Поэтому наличие IgM не может интерпретироваться как признак острой инфекции. Наличие IgG в снижающемся количестве – не считается заболеванием и не представляет опасности.

Если заражение произошло во II или III триместре, заболевание излечимо.

Диагностические анализы при аллергии проводят с помощью количественного определения иммуноглобулина Е. При этом способе аллергены связываются с антителами, образуя единый комплекс. В исследовании используется более 200 аллергенов.

Более тщательные исследования проводятся, когда нужно выявить тип и степень остроты реакции. Преимущество этого метода заключается в отсутствии прямого контакта пациента с аллергеном. При этом определяются общие и аллергенспецифические IgE.

В определении диагноза важны не только лабораторные исследования, но и другие данные. Сопоставить их и правильно диагностировать наличие заболевания может только врач, специализирующийся в данной области. Самолечением на основании расшифровки серологических анализов заниматься нельзя.

Заметили ошибку? Выделите ее и нажмите Ctrl+Enter, чтобы сообщить нам.

источник

Маркеры гепатитов В и С — это специфические антигены и антитела, обнаружение которых в сыворотке крови является подтверждением диагноза. Антигены — это частицы цитоплазматической мембраны возбудителя (поверхностный антиген) или частицы оболочки нуклеокапсида (внутренний антиген). Вирусный гепатит, независимо от типа, инфицирует гепатоциты. Иммунная система здорового человека воспринимает пораженные клетки как генетически чужеродные, поэтому уничтожает их посредством выработки антител. Гибель клеток становится причиной развития воспалительного процесса.

Для подтверждения диагноза необходим целый ряд анализов, цель которых — выявление антигенов — частиц вирионов или антител, иммуноглобулинов плазмы крови. Позволяют обнаружить маркеры вирусных гепатитов В и С анализы методами ПЦР и ИФА.

Посредством иммуноферментного анализа обнаруживают антигены или антитела, а методом ПЦР определяют количество вируса, его активность, генотип.

Анализ крови на маркеры вирусных гепатитов можно сдавать не ранее чем через 8 часов после последнего приема пищи. Часто пациентов беспокоит вопрос, сколько ждать результаты анализов. На проведение ИФА необходимо от 1 до 10 дней. ПЦР может быть выполнена за несколько часов.

Поводом для проведения анализа на гепатит В и С является:

1. Подготовка к вакцинации или оценка эффективности вакцины.
2. Повышение уровня АлАт (аланинаминотрансферазы), АсАт (аспартат-аминотрансферазы). Эти ферменты — также маркеры вирусного гепатита, но с функциональной точки зрения. Они синтезируются клетками печени, но в плазме крови их количество увеличивается только после массовой гибели профильных клеток.
3. Наличие клинических симптомов заболевания.
4. Наличие у пациента хронического воспаления печени или заболеваний желчевыводящих путей.
5. Сексуальный контакт с носителем инфекции.
6. Парентеральные манипуляции в сомнительных условиях.
7. Планирование или скрининг во время беременности.
8. Подготовка к госпитализации.
9. Обследование доноров.
10. Обследование лиц из группы риска.

Клетки вируса состоят из внешней мембраны, цитоплазмы и нуклеокапсида — ядра, заключенного в собственную оболочку. Ядро содержит ДНК возбудителя — носителя его генетической информации и фермент ДНК-полимеразу, необходимый для репликации вирионов.

Клетка возбудителя содержит следующие маркеры вирусного гепатита этого типа:

1. HBsAg (hepatitis B surface antigen). Этот комплекс протеинов клеточной оболочки возбудителя — определяющий фактор для постановки диагноза. Обнаружение в сыворотке крови антигена HBs является абсолютным подтверждением наличия вируса у пациента. Обнаружение этого вещества спустя 6 месяцев после заражения свидетельствует о хронической форме заболевания.
2. HBcorAg (HBV core antigen). Это протеины ядерной оболочки вириона, которые можно обнаружить только в гепатоцитах. А вот плазма крови пациента может содержать только антитела к этому антигену — anti-HBcorAg.
3. HBeAg (hepatitis early/envelope antigen). Это ранний вирусный антиген, который обнаруживается на этапе активной репликации возбудителя.
4. HBxAg — антиген, значение которого для жизнедеятельности вируса не определено, а потому для постановки диагноза он пока не учитывается.

Сдача анализа на гепатит B имеет целью подтверждение наличия возбудителя на основании обнаружения маркеров, определение стадии заболевания, кроме того, активности инфекционного агента.

HBsAg необходим вирусу для формирования собственной оболочки. На начальном этапе заболевания он синтезируется с избытком, его количество даже превышает потребности возбудителя. Этот вирусный антиген был открыт первым, он является ведущим для постановки диагноза. Это вещество можно обнаружить с 1–10 недели после заражения, за 2–6 недель до появления первых клинических признаков воспаления печени. Этот вирусный маркер позволяет определить форму заболевания: если HBs-антиген остается в крови спустя 6 месяцев после инфицирования, это свидетельствует о хронической форме. В случае элиминации возбудителя и клинического выздоровления пациента антитела к этому антигену (anti-HBs или HBsAb) обнаруживают уже после исчезновения его самого.

Иногда при обследовании на маркеры гепатита HBs-антиген не обнаруживается. Это может свидетельствовать о том, что иммунная система уничтожает пораженные клетки быстрее, чем HBsAg успевает поступать в кровяное русло. В этом случае диагноз основывается на обнаружении HBcorAb IgM. Отсутствие HBs-антигена на фоне тяжелого острого течения болезни при подтверждении диагноза посредством присутствия в крови IgM обычно наблюдается у 20% пациентов и нередко заканчивается летальным исходом.

Поскольку вирусный антиген HBcor нельзя обнаружить в крови, маркерами его присутствия являются HBcor-антитела — иммуноглобулины класса М и G.

IgM является признаком острой стадии заболевания, которая продолжается не более 6 месяцев. Этот иммуноглобулин можно обнаружить уже с первых недель после заражения, затем он постепенно исчезает. У 20% инфицированных IgM обнаруживается на протяжении 2 лет. При хронической форме воспаления печени концентрация этого антитела незначительна.

IgG является признаком контакта с инфекционным агентом, он присутствует в сыворотке крови всю последующую жизнь человека, независимо от формы заболевания.

HBeAg является признаком репликации вирионов и высокой степени контагиозности носителя. Если в очередном результате анализа на гепатит В обнаружено исчезновение этого антигена, при этом регистрируется появление антител к нему, это является признаком ремиссии.

Наличие в анализе на гепатит В вирусного ДНК свидетельствует об острой форме болезни. На ранней стадии наличие этого маркера является основным признаком репликации HBV. Его обнаруживают с помощью ПЦР (полимеразной цепной реакции), суть которой состоит в многократном удвоении участка ДНК возбудителя при помощи специальных ферментов до получения количества материала, достаточного для детекции.

Копирование происходит только определенного участка генома. Такая точность позволяет обнаружить даже единичную молекулу ДНК в материале и установить присутствие вируса в доклинический период. Точность реакции составляет 98%. Метод применим для выявления генетического материала РНК-содержащих вирусов.

Расшифровка анализов заключается в интерпретации результатов. Результат считается негативным, если маркеры в крови не обнаружены. Обнаружение HBsAg свидетельствует о наличии вируса у пациента, а наличие HBs-антител и IgG является признаком перенесенного заболевания или прививки.

Маркеры вирусного гепатита HBeAg, ДНК-полимеразы, собственно ДНК вируса и IgM — показатель активного размножения клеток возбудителя. Кроме того, HBe-антитела свидетельствуют о высокой концентрации возбудителя, контагиозности носителя инфекции, а также возможности перинатального заражения. Наличие HBe-антител является признаком законченной репликации вирионов.

Обычно рекомендуют сдавать кровь одновременно на три показателя: HBsAg, Anti-HBs, Anti-Hbcor. Эти вещества выявляют посредством ИФА. Методом ПЦР подтверждают наличие ДНК вируса, количество возбудителя, его генотип.

Маркеры вирусного гепатита С — это антитела к вирусу и его РНК. В первую очередь для подтверждения присутствия возбудителя в организме необходимо сдать анализ на anti-HCV — суммарные антитела к вирусу гепатита С. Иммунологические исследования позволяют выявить маркеры возбудителя, которыми являются антитела классов М и G. Они вырабатываются в ответ на присутствие в крови у пациента структурных и неструктурных белковых частиц вирионов. IgM и G можно выявить на протяжении первых 14 дней болезни и после клинического выздоровления.

Обнаружение суммарных иммуноглобулинов может являться признаком как острого, так и хронического течения болезни. Для определения более точных сроков инфицирования, кроме того, формы заболевания необходимо сдать кровь на каждое из антител по отдельности. Случается, что иммунологические тесты выявляют иммуноглобулины только через несколько месяцев после проявления клинической картины воспаления печени.

Расшифровка результата иммунологического анализа:

1. Отсутствие антител может свидетельствовать о том, что гепатит С у пациента не обнаружен, инкубационный период заболевания еще не закончен или речь идет о серонегативном варианте возбудителя.
2. Обнаружение IgM является признаком активной репликации вируса и того, что гепатит С прогрессирует и находится в острой фазе.
3. Наличие IgG — показатель присутствия возбудителя или контакта с ним в прошлом.

Иммуноглобулины присутствуют в крови реконвалесцентов до 10 лет, концентрация их при этом постепенно снижается.

Поскольку иммунологические тесты могут дать ложноотрицательный или ложноположительный результат, дополнительно выявляют такие маркеры вирусного гепатита С, как специфические IgG к антигенам вируса сore, NS1 NS2, NS3, NS4, NS5. Результат анализа считается позитивным, если обнаружены антитела к 2 или более антигенам этой группы.

Для определения генотипа возбудителя и его количества применяют полимеразную цепную реакцию. Это исследование позволяет выявить РНК на ранних этапах заболевания и даже в инкубационный период, когда серологические маркеры еще невозможно обнаружить. Для репликации используют стабильный участок генома вируса. Кроме того метод ПЦР позволяет определить количество копий вирусной РНК в единице объема крови (копии/мл или копии/ см3). Этот показатель используют для оценки эффективности противовирусной терапии. Кроме того, ПЦР позволяет определить серовариант возбудителя. ВОЗ рекомендует трижды проводить реакцию ПЦР для выявления РНК HVC для окончательного подтверждения диагноза.

Сверхчувствительность реакции ПЦР может стать причиной ложноположительного результата, поэтому для постановки заключительного диагноза необходим комплексный анализ показателей крови как серологических, так и биохимических, наблюдение за изменением этих показателей в динамике, кроме того, морфологическая оценка состояния пораженного органа.

источник

Таблица 2. Диагностические маркеры ВГ

антитела класса М к вирусу гепатита А

указывают на острую инфекцию

антитела класса G к вирусу гепатита А

свидетельствуют о перенесенной инфекции или HAV-пастинфекции, сохраняются в крови пожизненно

антитела класса М к вирусу гепатита E

указывают на острую инфекцию

антитела класса G к вирусу гепатита E

свидетельствуют о перенесенной инфекции или HEV-пастинфекции

поверхностный антиген HBV

маркирует инфицированность HBV

указывает на репликацию HBV в гепатоцитах, высокую инфекционность крови и высокий риск перинатальной передачи вируса

маркирует репликацию HBV в гепатоцитах, обнаруживается только при морфологическом исследовании биоптатов печени и на аутопсии, в крови в свободном виде не выявляется

суммарные антитела к HBcAg

важный диагностический маркер, особенно при отрицательных результатах индикации HBsAg, используется для ретроспективной диагностики ГВ и при неверифицированных гепатитах, определяют HBcAb без разделения на классы

антитела класса M к ядерному антигену

один из наиболее ранних сывороточных маркеров ГВ, наличие его в крови указывает на острую инфекцию (фазу болезни), при хроническом ГВ маркирует репликацию HBV и активность процесса в печени

может указывать на начало стадии реконвалесценции (исключение — мутантная форма HBV)

протективные антитела к поверхностному антигену HBV

указывают на перенесенную инфекцию или наличие поствакцинальных антител (их защитный титр от HBV-инфекции 10МЕ/л); обнаружение же антител в первые недели ГВ прогнозирует развитие гипериммунного варианта фульминантного ГВ

маркер наличия и репликации HBV

антитела класса М к вирусу гепатита D

маркируют репликацию HDV в организме

антитела класса G к вирусу гепатита D

свидетельствуют о возможной инфицированности HDV или перенесенной инфекции

маркер наличия HDV в организме

маркер наличия и репликации HDV

антитела класса G к вирусу гепатита C

свидетельствуют о возможной инфицированности HCV или перенесенной инфекции (определяются в скрининговых иследованиях)

антитела класса М к ядерным белкам HCV

указывают на текущую инфекцию (острая или хроническая в фазе реактивации

антитела класса G к ядерным белкам HCV

свидетельствуют об инфицированности HCV или перенесенной инфекции

антитела к неструктурным белкам HCV

обычно обнаруживаются в хронической стадии ГС

маркер наличия и репликации HCV

маркер наличия и репликации HGV

Расшифровка маркеров вирусного гепатита

антитела класса М к вирусу гепатита А

указывают на острую инфекцию

антитела класса G к вирусу гепатита А

свидетельствуют о перенесенной инфекции или HAV-пастинфекции, сохраняются в крови пожизненно

антитела класса М к вирусу гепатита E

указывают на острую инфекцию

«антитела класса G к вирусу гепатита Е

свидетельствуют о перенесенной инфекции или HEV-пастинфекции

поверхностный антиген HBV

маркирует инфицированность HBV

указывает на репликацию HBV в гепатоцитах, высокую инфекционность крови и высокий риск перинатальной передачи вируса

маркирует репликацию HBV в гепатоцитах, обнаруживается только при морфологическом исследовании биоптатов печени и на аутопсии, в крови в свободном виде не выявляется

суммарные антитела к HBcAg

важный диагностический маркер, особенно при отрицательных результатах индикации HBsAg, используется для ретроспективной диагностики ГВ и при неверифицированных гепатитах, определяют НВсАg без разделения на классы

антитела класса М к ядерному антигену

один из наиболее ранних сывороточных маркеров ГВ, наличие его в крови указывает на острую инфекцию (фазу болезни), при хроническом ГВ маркирует репликацию HBV и активность процесса в печени

может указывать на начало стадии реконвалесценции (исключение — мутантная форма HBV)

протективные антитела к поверхностному антигену HBV

указывают на перенесенную инфекцию или наличие поствакцинальных антител (их защитный титр от HBV-инфекции «10 МЕ/л); обнаружение же антител в первые недели ГВ прогнозирует развитие гипериммунного варианта фульминантного ГВ

маркер наличия и репликации HBV

антитела класса М к вирусу гепатита D

маркируют репликацию HDV в организме

антитела класса G к вирусу гепатита

свидетельствуют о возможной инфицированности HDV или перенесенной инфекции

маркер наличия HDV в организме

маркер наличия и репликации HDV

антитела класса G к вирусу гепатита С

свидетельствуют о возможной инфицированности HCV или перенесенной инфекции (определяются в скрининговых исследованиях)

антитела класса М к ядерным белкам HCV

указывают на текущую инфекцию (острая или хроническая в фазе реактивации)

антитела класса G к ядерным белкам HCV

свидетельствуют об инфицированности HCV или перенесенной инфекции

антитела к неструктурным белкам HCV

обычно обнаруживаются в хронической стадии ГС

маркер наличия и репликации HCV

маркер наличия и репликации HGV

Ориентировочная интерпретация диагностических данных при выявлении маркеров вирусных гепатитов

Вирусный гепатит А. Сопутств.: «носительство HBsAg».

При типичных признаках острого ГА. Необходимо тщательное клинико-лабораторное исследование для исключения ОГВ и ХГВ.

IgM анти-HAV, HBsAg, анти-НВс (total), IgG анти-НВс

Вирусный гепатит А. Сопутств.: хронический гепатит В (нерепликативная фаза).

При выявлении признаков хронического гепатита у больных острым ГА и отсутствии маркеров репликации (HBV-DNA, HBeAg, IgM анти-НВс).

IgM анти-HAV, HBsAg, анти-НВс (total), IgG анти-НВс, IgM анти-НВс, HBeAg, HBV-DNA

Вирусный гепатит А. Сопутств.: хронический гепатит В (репликативная фаза).

При выявлении признаков хронического гепатита у больных острым ГА.

HBsAg, HBeAg, IgM анти-НВс, IgM анти-HDV

Острая коинфекция ВГВ и ВГD.

При отсутствии IgG анти-НВс и клинико-анамнестических признаков обострения ХГВ

При отрицательных результатах обследования на IgM анти-HBV (или низких титрах этих антител).

Реконвалесцент ВГС (или ВГС-пастинфекция) — при отрицательных результатах исследования на: IgM анти-HCV и HCV-RNA.

Только у практически здоровых при отсутствии эпидемиологических данных и клинико-лабораторных признаков поражения печени.

При невозможности подобного исследования

Диспансерное наблюдение такое же, как при диагнозе «носительство HBsAg»

Анти-HCV (total), анти — HCV core IgM, HCV-RNA

Острый вирусный гепатит С.

При наличии эпидемиологических и клинико-лабораторных признаков острого гепатита и отсутствии маркеров других ВГ. Диспансерное наблюдение такое же, как и при ОГВ.

Анти-HCV IgG, анти — HCV core IgM, анти — HCV core IgG, анти — HCV NS, HCV-RNA

Хронический вирусный гепатит С (фаза реактивации).

При наличии клинико-биохимических признаков хронического поражения печени. Диспансерное наблюдение такое же, как при ХГВ.

Анти-HCV IgG анти-HCV core IgG, анти — HCV NS

Хронический вирусный гепатит С (латентная фаза).

При отсутствии в крови HCV-RNA, анти — HCV core IgM и клинико-биохимических признаков обострения ХГС.

HBsAg, IgM анти-НВс, HBeAg, анти — HCV IgG, анти-HCV core IgM, анти — HCV core IgG, анти — HCV NS, HCV-RNA

Острый вирусный гепатит В Сопутств.: хронический вирусный гепатит С (фаза деактивации)

При наличии клинико-лабораторных признаков ОГВ. Сопутствующий диагноз является следствием детального клинико-лабораторного обследования на ГС.

HBsAg, IgM анти-НВс, HBeAg, анти — HCV IgG, анти-HCV core IgG, анти — HCV NS

Острый вирусный гепатит В Сопутств.: хронический вирусный гепатит С (латентная фаза)

При наличии клинико-лабораторных признаков ОГВ. Сопутствующий диагноз является следствием детального клинико-лабораторного обследования на ГС.

HBsAg, IgM анти-НВс, HBeAg, анти — HCV (total), анти-HCV core IgM, HCV-RNA

При наличии лишь клинико-лабораторных и эпидемиологических признаков, характерных для острых вирусных гепатитов.

Анти-HCV (total), анти — HCV core IgM, HCV-RNA, HBsAg, анти-НВс (total), IgG анти-НВс

Острый вирусный гепатит С. Сопутств.: хронический гепатит В (нерепликативная фаза).

При наличии эпидемиологических и клинико-лабораторных признаков острого ГС.

Анти-HCV (total), анти — HCV core IgM, HCV-RNA, HBsAg, анти-НВс (total), IgG анти-НВс, IgM анти-НВс, HBeAg, HBV-DNA

Острый вирусный гепатит С. Сопутств.: хронический гепатит В (репликативная фаза).

При наличии эпидемиологических и клинико-лабораторных признаков острого ГС и хронического ГВ.

источник

Гепатит С – инфекционное заболевание печени, вызванное РНК-содержащим вирусом. Медики называют его «ласковым убийцей» за бессимптомное течение в преобладающем большинстве случаев, склонностью к хронизации и способностью провоцировать развитие цирроза и рака печени. Зачастую о том, что эти тяжелые заболевания вызвал именно он, узнают на 3-4 стадии, обнаружив в крови больного маркеры гепатита С.

Источник заражения – человек, точнее – инфицирование возможно при попадании вируса с зараженной кровью в кровоток здорового человека. Возможность заражения гепатитом С создается при:

• парентеральном введении лекарственных препаратов (подкожных, внутримышечных инъекциях, внутривенных инъекциях и капельницах) многоразовыми недостаточно обработанными иглами;

• переливании крови и компонентов;

• косметических манипуляциях с нарушением целостности кожи при использовании инструментов многоразового использования или плохо обработанных – маникюр, педикюр, татуаж;

• стоматологических манипуляциях и операциях с теми же предпосылками;

• половом контакте при условии нарушения целостности слизистых влагалища, прямой кишки, рта и попадании мельчайших капелек зараженной крови;

• инфицировании матери, младенец может заразиться в родах.

Таким образом создаются предпосылки для широкого распространения инфекции. К группам риска относят сотрудников медицинских учреждений, наркозависимых, новорожденных от инфицированных матерей, а также потребителей услуг стоматологических клиник и косметических салонов.

Маркеры гепатита С – это «визитная карточка» вируса, которую он обязательно оставляет при посещении организма-хозяина. Таких «визиток» бывает два вида:

• присутствие в крови антигенов – маркеров самого вируса (частицы собственной оболочки или оболочки ядра)

• наличие в крови антител-маркеров, выработанных организмом-хозяином при перенесенном заболевании – иммуноглобулинов.

Обнаружить в сыворотке крови маркер – антиген вириона (полноценной частицы) можно с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР), его присутствие определяется даже в инкубационном периоде – когда признаков заболевания еще нет, вирус только начинает размножаться, захватывая все новые клетки печени. Определение маркера становится возможным с 5-го дня после заражения.

Для определения маркеров-антител, то есть клеточного ответа организма на присутствие вируса, должно пройти какое-то время. Обычно для такого реакции иммунной системы необходимо от нескольких дней до нескольких недель. Выявляют такие маркеры-антитела с помощью иммуноферментного анализа (ИФА).

Совершенно очевидно, что диагностика наличия маркеров к гепатиту С необходима больным с поражениями печени. А также это исследование назначают в следующих случаях:

• при стандартном обследовании перед хирургическими операциями;

• при донорстве крови;

• при постановке на учет при беременности и повторно перед родами;

• при прохождении гемодиализа;

• при профосмотрах сотрудников медучреждений, имеющих дело с биологическими жидкостями;

• при сомнительном половом контакте.

Кроме того, анализ на маркеры к гепатиту С желательно сдать родственникам больного с установленным диагнозом.

В первую очередь назначается ИФА для выявления специфических антител к вирусу гепатита С – иммуноглобулинов. Определяют их суммарное количество (анти-HCV) и по отдельности – для класса М и G.

Варианты результатов обследования:

• Маркеры-антитела не обнаружены.
  Это может означать, что: a) пациент не болен гепатитом С (исключение составляет возможность инфицирования за последние 6 месяцев); b) антитела-маркеры не успели выработаться, так как с начала заражения прошло недостаточное количество времени; c) погрешности в проведении исследования.

• Обнаружены маркеры-иммуноглобулины класса М (IgM).
  У пациента острая фаза заболевания, вирус активно размножается.

• Обнаружены маркеры-иммуноглобулины класса G (IgG).
  Свидетельствует о столкновении иммунной системы с вирусом в прошлом или о том, что у пациента хронический вирусный гепатит С.

При положительном ИФА определяют генотип вируса и определяют вирусную нагрузку с помощью ПЦР.

Если в сыворотке крови низкая концентрация вирионов, выдается заключение об отрицательном результате исследования – качественная оценка.

При количественной оценке – если вирионы в биологических жидкостях присутствуют – определяется их количество в 1 миллилитре исследуемого материала. Свидетельствует о быстроте развития болезни.

При достоверном обнаружении вируса гепатита С с помощью ПЦР проводится его генотипирование.

Важно помнить, что по однократному положительному результату диагноз гепатита С не выставляется. При случайном обнаружении любого из маркеров анализы пересдаются. Положительным может считаться 3-кратно проведенное обследование с сопоставимыми результатами.

Недостоверными результаты могут быть в случаях:

• ошибки исследования или погрешностью самого метода (например, ПЦР является сверхчувствительным анализом и чаще других исследований «грешит» ложноположительными результатами);

• проведенной накануне вакцинации;

• при аутоиммунных заболеваниях или туберкулезе, рассеянном склерозе, склеродермии;

• новообразованиях;

• гипертермии вследствие гриппа или другой инфекции.

Врачей не удивляют недостоверные результаты определения маркеров у беременных и у пациентов со II группой крови.

Безусловно, даже случайно выявленное определение маркеров гепатита С требует обращения к специалисту. На сегодняшний день гепатит С излечим полностью! Появились новые современные лекарства, позволяющие навсегда избавиться от вируса. Подробнее читайте в нашей статье: “Эффективные противовирусные препараты от Гепатита С.”

Расшифровка анализов, постановка и верификация диагноза, назначение лечения – прерогатива врача и только врача. Специалист назначит дополнительное обследование, проведет и оценит УЗИ, биопсию печени, назначит адекватное лечение, отследит его эффективность.

источник

Современная лабораторная диагностика HCV-инфекции основана на нескольких основных методиках исследования, которые делят на две группы в зависимости от технологии проведения – серологические и молекулярные. Эти анализы направлены на то, чтобы выявить основные маркеры гепатита С максимально точно и в кратчайшие сроки. В большинстве лабораторий сейчас применяют современные реагенты и оборудование, что позволяет поставить диагноз через 14–20 дней после заражения.

Эксперты не могут озвучить точное количество инфицированных HCV, так как в подавляющем большинстве случаев через несколько недель после заражения происходит хронизация вирусного процесса. В дальнейшем болезнь часто протекает в скрытой, латентной форме годами. Более чем у половины пациентов патологию диагностируют случайно при обращении к врачу по другому поводу, прохождении диспансеризации, оформлении медицинской книжки, постановке на учет по причине беременности и т.д.

По данным Всемирной организации здравоохранения, более полумиллиона человек ежегодно умирают от осложнений, вызванных HCV. Данная патология лидирует в перечне показаний для трансплантации печени.

Несмотря на меры по профилактике распространения заболевания, появление высокоэффективных лекарственных препаратов и методов диагностики, позволяющих своевременно выявить и полностью излечить болезнь, остановить рост количества инфицированных не удается ни в одной стране мира.

Возбудитель гепатита С, Hepatitis C Virus, относится к семейству Flaviviridae. Основу генома вируса составляет одноцепочечная РНК, включающая более 10 000 нуклеотидных остатков. Из-за неоднородности структуры специалисты выделили несколько генотипов HCV. Их распространенность не одинакова в различных уголках планеты. Но в большей степени диагностируют первый генотип (более 46% инфицированных), на втором месте – третий (треть случаев).

Еще одной характерной особенностью возбудителя гепатита Ц является мутационная активность. Так, у пациента в рамках одного генотипа идентифицируют до 40 подвидов HCV. По этой причине специалисты не могут создать вакцину для пожизненной защиты от инфицирования.

Заражение часто происходит при использовании одного шприца несколькими людьми для введения внутривенных наркотиков. Путь передачи болезни может быть также связан с применением уже использованных или недостаточно стерилизованных медицинских и/или косметологических инструментов. Возможно заражение при половом контакте, не исключен и вертикальный путь инфицирования.

В 80% случаев болезнь протекает без выраженных клинических проявлений.

Только у незначительного количества пациентов возникает один или несколько из таких симптомов:

• повышение температуры без катаральных признаков;
• усталость;
• снижение аппетита;
• тошноту с приступами рвоты;
• боли в животе;
• потемнение мочи;
• появление у фекальных масс сероватого оттенка;
• боли в суставах;
• желтизна склер и кожных покровов (встречается относительно редко, только при желтушной форме заболевания).

Что касается хронического течения патологии, период отсутствия симптомов может продолжаться вплоть до развития цирроза печени, печеночной недостаточности либо злокачественного онкологического образования.

Острую форму HCV диагностируют крайне редко, что связывают с бессимптомным прогрессированием заболевания. Для выявления патологии используют серологические методы, направленные на определение ряда специфических иммуноглобулинов, которые являются обязательной частью иммунного ответа на попадание вирусного патогена внутрь гепатоцитов. Другим методом диагностики является определение структурных частиц вируса при помощи молекулярно-химических реакций.

Что значит маркеры гепатита С? В медицинской литературе этот термин означает ряд высокоспецифичных лабораторных параметров, свидетельствующих о наличии острого либо хронического ВГС. Это, в частности, иммуноглобулины G и M (и их суммарный титр без дифференцирования на классы) и РНК (определенная часть генома) вириона. Соответственно, результаты, полученные в ходе выполнения ИФА и ПЦР (данные оценивают только в комплексе), и являются маркерами HCV.

В настоящее время существуют законодательно определенные критерии (на основе рекомендаций ВОЗ и Министерства здравоохранения), кому нужно обязательно сдавать анализ крови для выявления возможной HCV-инфекции:

• в период вынашивания ребенка (в I и III триместре);
• реципиентам донорского биологического материала (вне зависимости от его вида и количества), особенно если процедура и/или операция была проведена до 1992 года (именно тогда появились достоверные методы исследования, позволяющие выявить основные маркеры гепатита C);
• работникам медицинской, косметологической, торговой сферы (в соответствии со сроками оформления медкнижки);
• пациентам, регулярно проходящим процедуру гемодиализа, регулярно подвергающихся разнообразным инвазивным вмешательствам;
• перед назначением операционных вмешательств;
• перед началом курса химиотерапии;
• при отклонениях в показателях печеночных проб (для исключения или подтверждения гепатита);
• пациенты, состоящие на учете в специализированных клиниках и диспансерах на предмет пристрастия к наркотическим веществам;
• персонал детских образовательных учреждений, интернатов (при регулярном прохождении диспансеризации);
• члены семей и находящиеся в близком контакте с человеком с диагностированным ВГС;
• лица с повышенным риском инфицирования (инъекционные наркоманы, люди, отдающие предпочтение гомосексуальным, случайным или коммерческим половым связям);
• осужденные и пребывающие в местах лишения свободы;
• доноры биологического материала, органов;
• дети до достижения годовалого возраста (если выявлены положительные серологические маркеры вирусных гепатитов, то дольше) при наличии у матери диагностированного ВГС во время беременности;
• у людей с ВИЧ.

HCV-инфекция – серьезный диагноз, требующий немедленного начала терапии. Поэтому положительные маркеры, выявленные в одном из исследований, не являются показанием к приему лекарственных препаратов. Подтверждают наличие инфекции по нескольким специфическим анализам.

Где сдать кровь на выявление HCV, решает пациент. Можно обратиться в поликлинику по месту жительства, записавшись на консультацию к терапевту или инфекционисту. Врач выдаст направление на проведение анализа, но перед этим придется сделать клиническое исследование крови, печеночные пробы. Стоимость тестов компенсируется по полису ОМС.

Можно выполнить анализы в платной лаборатории. Там не требуется направление от врача. Стоимость в клиниках Москвы колеблется в пределах 3000–7000 тысяч рублей и выше в зависимости от разновидности диагностического теста и того, сколько маркеров необходимо определить.

Все исследования, применяемые для диагностики HCV-инфекции, можно разделить на несколько групп. Проведение каждого анализа является обязательным до начала терапии, а некоторые исследования выполняются и на определенных этапах лечебного цикла для оценки правильности и эффективности подобранной противовирусной схемы.

Для постановки диагноза врачу нужны следующие данные:

1. Серологические маркеры вирусных гепатитов. Обнаруживаются вне зависимости от генотипа HCV. Это специфические антитела (anti-HCV) разновидностей G и/или M. Выявляются иммуноферментными методами (ИФА), технологиями иммунохемилюминисценции, иммуноблотинга и т.д. Изначально определяют суммарное количество антител (IgG + IgM) А подтверждающее исследование направлено на выявление антител к специфическим протеинам HCV, входящим в структуру капсида и оболочки, при помощи ИФА или иммуноблотинга.
2. Молекулярные маркеры. Назначаются в качестве подтверждающих тестов для определения наличия РНК возбудителя патологии, оценки его количественного содержания. К этой же группе исследований относят генотипирующие анализы, предназначенные для установления разновидности вируса. Для проведения тестов используются различные методики постановки полимеразной цепной реакции (ПЦР).

Следующий этап диагностики проводят только при положительном результате предыдущих тестов. По мнению специалистов у пациентов с первым генотипом HCV целесообразно определение уровня IL28B. Подобное исследование помогает прогнозировать эффективность противовирусного лечения. Но такая схема диагностики подходит при использовании интерфероновых схем терапии. Связь между показателем IL28B и действием современных лекарственных средств (Софосбувира, Асунапревира и т.д.) не установлена, потому необходимость в проведении такого исследования остается под вопросом.

Первичная лабораторная диагностика HCV начинается с определения в сыворотке крови параметра anti-HCV. Положительный результат свидетельствует об активном течении патологического процесса (то есть заражении гепатитом С) либо о встрече иммунной системы организма с инфекцией в прошлом.

В большинстве лабораторий Москвы и других крупных городов серологический маркер определяется при помощи иммуноферментных систем (ИФА) II и III поколения. Суть анализа состоит в захвате рекомбинантными белками антител к HCV из исследуемой сыворотки. Впоследствии они определяются вторичными антителами против Ig класса G и V, мечеными ферментами, которые катализируют течение цветной реакции.

Тест-системы I поколения имели низкую специфичность, так как были способны обнаружить антитела, вырабатываемые к белку NS4. Чувствительность ИФА не превышала 70%, а сроки обнаружения иммуноглобулинов – минимум 16 недель с момента инфицирования.

ИФА II поколения способны выявить антитела к участку генома core, NS3 и NS4, что повышает специфичность теста до 95%, снижает риск получения ложноположительных результатов и сокращают срок обнаружения иммуноглобулинов до 10 недель от дня попадания РНК вируса в кровь человека.

Тест-системы ИФА III поколения разработаны на основе антигена NS5 и высокоиммуногенного эпитопа (части молекулы антигена) NS3. Подобная техника выполнения анализа обеспечивает срок сокращения серологического окна: положительные маркеры (либо отрицательный результат) можно получить уже на 4–6 неделе после заражения. Чувствительность ИФА последнего поколения достигает 99%.

Несмотря на то, что серологическое исследование является одним из золотых стандартов диагностики HCV, возможно получение ложноположительных или ложноотрицательных результатов, связанных не с качеством тест-систем, а особенностями состояния пациента.

Так, на проведение ИФА могут повлиять:

• аутоиммунные поражения суставов, особенно при положительном ревматоидном факторе, и другие заболевания подобного генеза;
• беременность;
• регулярное проведение гемодиализа;
• тяжелые иммуносупрессивные состояния (например, на фоне ВИЧ);
• гематологические злокачественные новообразования.

Современные тест-системы, дополненные рекомбинантными NS5, специфичны и чувствительны на 99,95% не реагируют на наличие в крови ревматоидного фактора и/или С-реактивного белка.

Серологический скриннинг является обязательным, но недостаточным компонентом диагностики HCV. Для подтверждения результатов анализа обязательно назначают исследование методом полимеразной цепной реакции.

Сейчас доступны качественные и количественные способы выявления РНК возбудителя вирусного гепатита С. Первая методика предназначена для подтверждения диагноза HCV-инфекции у лиц с положительным anti-HCV и для обследования донорского материала.

Количественный анализ служит основным маркером определения вирусной нагрузки. Является ключевым для оценки активности патологического процесса и эффективности противовирусной терапии. Применяемые тест-системы позволяют провести полимеразную цепную реакцию в режиме «real time». Диапазон вирусной нагрузки колеблется в пределах от 10–15 до 10 млн. МЕ/мл.

Техника количественной полимеразной цепной реакции – маркер репликации хронического вирусного гепатита С. Согласно современным рекомендациям, анализ проводят на 4–12–24 неделе лечения (и дополнительно на 48 при проведении интерфероновой терапии). Повторно исследование делают через 24 и 48 недель после окончания приема и/или инъекций медикаментов.

Отрицательный результат количественной ПЦР на 4 неделе лечения – один из основных факторов быстро вирусологического ответа и благоприятного исхода заболевания. Отсутствие РНК вируса на 24 неделе после завершения терапии является признаком выздоровления.

После базовых диагностических тестов и подтверждения положительных маркеров гепатита С обязательно проведение генотипирования. От результатов этого исследования зависит тактика дальнейшей терапии и прогноз развития риска осложнений. Определение генотипа HCV выполняется путем анализа нуклеотидной последовательности участка NS5 протеина вируса.

Но применяемые для генотипирования тест-системы недостаточно совершенны и не могут точно идентифицировать недавно выявленные, редко встречающиеся генотипы (в частности, 7,8 и 9).

В последних клинических исследованиях доказана роль определения полиморфизма гена IL28B у пациентов с генотипом 1а и 1b HCV. Проведение анализа важно для выбора между интерфероновыми схемами терапии и приемом комбинации противовирусных лекарственных препаратов.

Пункционная биопсия печени также входит в перечень необходимых для пациента с вирусом гепатита С анализов. Процедура позволяет оценить тяжесть структурных изменений в печеночной ткани, установить локализацию и распространенность фибротического процесса, некроза гепатоцитов, наличие злокачественной малигнизации клеток (при длительном течении хронического гепатита С), роль сопутствующих осложнений в повреждениях печени.

Но перед выполнением процедуры необходимо принять во внимание несколько факторов:

1. Оценивают соотношение целесообразности проведения биопсии и потенциального вреда здоровью пациента.
2. Перед манипуляцией делают УЗИ для оценки риска возможных осложнений. В идеале пункцию также нужно проводить под ультразвуковым контролем.
3. За несколько дней до процедуры выполняют коагулограмму, определяют протромбиновое время и протромбиновый индекс. Если количество тромбоцитов менее 90 тыс. клеток/мм3, биопсию откладывают или выполняют при наличии строгих жизненных показаний.
4. Перед манипуляцией необходимо взять письменное согласие пациента на процедуру.
5. При необходимости (например, перевозбуждении) больному дают седативные средства (при отсутствии противопоказаний).
6. После проведения забора ткани оценивают количество и качество биоптата. При необходимости процедуру сразу же повторяют.
7. На протяжении 8 часов после манипуляции пациент должен оставаться под медицинским наблюдением.

Еще одним сравнительно новым методом оценки состояния печени является эластометрия, проводимая с использованием приборов ФиброСкан, ФиброТест, ФиброМетр и др. Преимуществом данного способа диагностики служит неинвазивность, быстрое получение результатов и безболезненность, что важно в педиатрической практике. Но проведение исследования затруднительно при избыточном весе пациента, наличии стеатоза, превышении уровня печеночных ферментов в 3 раза и более.

Для получения точных результатов важно соблюдать правила, предписывающие, как сдавать кровь и готовиться к проведению исследования.

Все аспекты необходимо уточнить у врача, но перечень стандартных рекомендаций включает:

• соблюдение диеты (№5 или №5а) с ограничением жирного, жареного, копченого за 7–10 дней до процедуры;
• строгое ограничение алкоголя за 2–2,5 недели до выполнения анализа;
• отказ от курения за 12–14 часов до забора крови;
• сдачу крови строго натощак (последний прием пищи за 12 часов до посещения лаборатории).

Результаты может быть искажены при приеме некоторых лекарственных препаратов. Поэтому при расшифровке данных необходимо сообщить врачу о каких-либо принимаемых медикаментах.

Сколько ждать результатов исследования зависит от загруженности лаборатории, технологической оснащенности (иногда требуется транспортировка биологического материала). В среднем постановка полимеразной цепной реакции или выполнение ИФА занимает от 2 до 5 дней. Некоторые клиники предлагают услугу платного срочного исследования.

Диагностика гепатита С проводится в несколько этапов.

Показанием для определения серологических маркеров методом ИФА (anti-HCV Total) служат:

• беременность (первый и третий семестр);
• отношение к группам риска по ВГС;
• ежегодное оформление медицинской книжки;
• повышение уровня печеночных трансаминаз и/или билирубина;
• самостоятельное желание пациента.

Для подтверждения диагноза HCV при положительных результатах серологического исследования назначают качественный анализ ПЦР. Обнаружение РНК вируса свидетельствует об остром или хроническом течении вирусной инфекции, что требует дальнейшего обследования пациента для подготовки к проведению терапии.

Назначают следующие диагностические тесты:

• определение иммуноглобулинов G и М для установления стадии заболевания (острая, хроническая, рецидив латентного течения инфекции);
• оценка вирусной нагрузки;
• генотипирование;
• • определение степени поражения печени.

Обязательны и другие исследования: клинические анализы крови, мочи и кала, выявление возможных сопутствующих коинфекций (ВИЧ, аутоиммунные заболевания), исключение или подтверждение беременности.

Биологическим материалом для проведения ИФА и ПЦР является сыворотка крови. Реже исследование проводят на биоптате печени, но такой тест трудоемкий, дорогостоящий и требует выполнение инвазивных медицинских процедур.

В 2017 году на фармацевтическом рынке появились экспресс-тесты, позволяющие проводить предварительную диагностику гепатита С по образцу слюны. Преимуществом набора является возможность выполнения самостоятельно в домашних условиях. Но результат экспресс-теста также требует подтверждения, несмотря на то, что его специфичность достигает 96%.

Расшифровка серологических маркеров на гепатит С обязательно проводится в тандеме с данными полимеразной цепной реакции. Значение полученных результатов приведено в таблице ниже.

Иногда пациенты и врачи сталкиваются с ситуацией, когда качественный анализ методом ПЦР на РНК отрицательный, а маркеры положительные (при проведении серологического обследования).

В таком случае доктора придерживаются следующей тактики:

1. Повторная постановка полимеразной цепной реакции для исключения ошибочного результата вследствие лабораторной ошибки.
2. Исключение/подтверждение заболеваний, синдромов и состояний, которые могут быть вероятной причиной ложноположительного результата ИФА.
3. Сбор анамнеза. Такая картина характерна после перенесенного острого гепатита С. При этом человек может сам не знать о прошедшем заболевании. Сопоставление симптоматики (в том числе неспецифической), предположение пути заражения и данных клинических исследований позволяют доктору предположить такой исход патологического процесса.
4. Повтор анализа через 3–4 недели, когда можно исключить вероятность диагностического окна.

Но вне зависимости от результатов исследований трактовать полученные данные должен только врач. Специалисты предостерегают от самостоятельной терапии. Комбинация противовирусных препаратов и длительность их применения подбирается с учетом генотипа HCV наличия или отсутствия коинфекций и ряда других факторов.

источник