Методы и особенности диагностики вирусных гепатитов

Диагностика вирусных гепатитов: список лабораторных анализов, особенности проведения и расшифровка результатов

Эпидемиология, диагностика и профилактика вирусных гепатитов являются важными вопросами в практической медицине. Ежегодно этими инфекциями болеют десятки миллионов людей. Согласно данным ВОЗ, в настоящее время насчитывается не менее 2 млрд пациентов, инфицированных только вирусом гепатита В. В России сохраняется высокий уровень заболеваемости и увеличивающаяся частота неблагоприятных исходов (переход болезни в хроническую форму и летальный исход), что определяет высокую значимость изучения клиники, диагностики и лечения вирусных гепатитов практикующими врачами и студентами медицинских вузов.

От момента инфицирования до появления первых симптомов болезни проходит от двух — четырех недель при гепатите А до двух — четырех (или даже шести) месяцев при гепатите В. В течение этого периода вирус размножается и адаптируется в организме, а затем начинает проявлять себя. До того как кожа и слизистые приобретают характерный желтый оттенок, моча темнеет, а каловые массы, лишаясь желчи, становятся бесцветными, гепатит напоминает обычный грипп. У пациента повышается температура, возникает головная боль, ломота в теле, общее недомогание. При гепатитах В и С температура может не повышаться, но вирус проявляется болью в суставах, иногда появляются высыпания. Начальные симптомы гепатита С могут ограничиться снижением аппетита и слабостью. При бессимптомном течении диагностика вирусных гепатитов затруднительна.

Через несколько дней клиническая картина меняется. Появляются боли в подреберье справа, тошнота и рвота, пропадает аппетит, темнеет моча, обесцвечиваются каловые массы, медики фиксируют увеличение в размерах печени, иногда — селезенки. На этом этапе в крови обнаруживаются характерные изменения и становится возможной ранняя диагностика вирусных гепатитов: увеличивается билирубин, появляются специфические маркеры вирусов, печеночные пробы увеличиваются в восемь — десять раз. После появления желтухи общее состояние больного улучшается, но это не происходит у хронических наркоманов и алкоголиков, независимо от типа вируса, вызвавшего заболевание, а также при гепатите С. У остальных больных в течение нескольких недель происходит развитие симптомов в обратную сторону.

Клиническое течение может быть легкой, среднетяжелой и тяжелой степени. Фульминантная форма гепатита — самая тяжелая разновидность, при которой стремительно развивается некроз печени и обычно заканчивается летальным исходом. Но большую опасность представляет хроническое течение болезни, что характерно для гепатитов В, С и D. Характерными симптомами являются повышенная утомляемость, снижение работоспособности, невозможность выполнять физические нагрузки прежней интенсивности. Расстройство стула, боли в животе, мышцах и суставах, тошнота могут быть вызваны как основным заболеванием, так и сопутствующими. Потемнение мочи, сосудистые звездочки, кровоточивость, увеличение селезенки и печени, желтуха, похудение обнаруживается уже на серьезных стадиях, когда диагностика вирусных гепатитов не представляет сложности.

Основными методами диагностики хронического вирусного гепатита или острой формы болезни являются лабораторные исследования: определение маркеров гепатита, характера изменения биохимических показателей крови. Проявляются гепатиты А, В, D и Е относительно одинаковыми симптомами (боль в области правого подреберья и в желудке, нарастающая слабость, диарея, тошнота и рвота, пожелтение кожи и белков глаз, увеличение печени). Гепатиты G и С долгие годы могут проявляться только непреходящей усталостью. При диагностике обязателен ПЦР-анализ на выявление ферментов генетической информации вируса, биохимический анализ крови, иммунологическое исследование, определяющее наличие антител к вирусу, определение уровня ферментов и билирубина.

Вызвать заболевание могут не только вирусы, но токсины растительного или синтетического происхождения. Различные яды и отравляющие вещества, содержащиеся в растениях и грибах, способствуют гибели клеток печени. Диагностика проводится путем выявления уровня протромбина, ферментов, альбумина и билирубина. Лучевой гепатит является одним из проявлений лучевой болезни, возникает из-за радиационного воздействия. В клинической практике заболевание встречается редко, потому что пациент, чтобы попасть в зону риска, должен в течение 3-4 месяцев получать высокие дозы радиации (более 400 рад). Основной метод диагностики — биохимия крови и анализ на билирубин.

Редкой формой гепатита является аутоиммунный. Наука до сих пор не объясняет причины возникновения этого заболевания. При аутоиммунном гепатите организм дает сбой, собственные клетки начинают атаковать печень. Данная форма часто сопровождается другие аутоиммунные заболевания, но в редких случаях может проявляться и самостоятельно. Лабораторная диагностика базируется на исследовании уровня гамма-глобулинов и антител (lgG, АсТ и АлТ). Болезнь можно подозревать, если уровень IgG превышает нормальные показатели в два раза и более.

Вирусные гепатиты распространены гораздо шире, чем другие типы заболеваний, поэтому стоит остановиться на лабораторной диагностике более подробно. Анализ крови может дать максимум информации о течении заболевания. Инструментальные методы, например, МРТ, УЗИ или КТ, малоэффективны. Такие процедуры позволяют оценить состояние и структуру печени, но не дадут информации о том, каким именно гепатитом заражен организм, как давно это произошло. Анализ назначается при подозрении на инфицирование вирусным гепатитом, при наличии симптомов и бессимптомном течении, для контроля иммунитета после вакцинации. Регулярно сдавать кровь для скринингового исследования рекомендуется лицам с повышенным риском инфицирования: работникам здравоохранения, детям инфицированных родителей, людям, не прошедшим вакцинацию, беременным женщинам, лицам с иммунодефицитными состояниями.

Лабораторная диагностика вирусных гепатитов предполагает забор венозной крови с внутренней поверхности локтевого сгиба. Для получения достоверных результатов пациенту необходимо определенным образом подготовиться к исследованию. Правила для всех анализов крови стандартны. За сутки до забора биологического материала из рациона следует исключить жирную пищу, употребление алкоголя, наркотиков и лекарств (только после консультации врача). За 30 минут до исследования исключить курение, физические нагрузки и стрессы. Кровь сдается натощак (после крайнего приема пищи пройти должно минимум 8, желательно — 12 часов), пить можно только минеральную воду без газа. Все анализы проводят до рентгенографии, физиотерапевтических процедур, УЗИ.

Анализ крови является простой диагностической процедурой, которая позволяет заподозрить или подтвердить множество заболеваний. Но иногда можно получить ложноотрицательные или ложноположительные результаты. Повлиять на результат исследования может неправильный забор, хранение или транспортировка венозной крови, длительное хранение биологического материала до поступления в лабораторию, замораживание или термическая обработка крови пациента. Исказить результаты диагностики может прием определенных медикаментов. Ложноположительные результаты можно получить при наличии аутоиммунных заболеваний, в частности присутствия в крови ревматоиодного фактора. Самыми распространенными системными болезнями являются инсулинозависимый сахарный диабет, витилиго, псориаз, язвенный колит, непереносимость глютена, диффузный токсический зоб, СПИД\ВИЧ.

Диагноз устанавливается на основании эпидемиологических данных и расспроса больного. Подозревать гепатит А врач может, если у пациента был контакт с больным желтухой примерно за 7-50 суток до ухудшения самочувствия, факт употребления сырой воды, немытых фруктов и овощей. Обычно заражаются гепатитом А люди в возрасте от 15 до 29 лет. Оцениваются симптомы болезни: резкое ухудшение самочувствия с повышением температуры тела и расстройством ЖКТ, присоединение желтухи, улучшение состояния на фоне желтушности кожных покровов и склер глаз, увеличение селезенки и печени в размерах.

Диагностика острого вирусного гепатита А требует проведения общего и биохимического анализов, анализа на определение РНК вируса, выявления антител к вирусу. Для этого типа заболевания характерны низкий уровень лейкоцитов, высокая СОЭ, пониженный билирубин и альбумин. Специфические антитела удается определить только в начале заболевания, то есть практически сразу после завершения инкубационного периода. Самым надежным методом лабораторной диагностики вирусного гепатита А является ПЦР-анализ, позволяющий обнаружит антитела даже при их незначительной концентрации. ПЦР дает информацию о том, когда произошло заражение. Этот диагностический метод также дает возможность идентифицировать фрагменты РНК вируса. Лабораторные исследования нужно проводить два раза, чтобы исключить возможность получения ложноположительного или ложноотрицательного результата.

В дифференциальной диагностике вирусных гепатитов помогают указания на внутривенное ведение наркотических средств, хирургические вмешательства, переливания крови и другие процедуры, связанные с нарушением целостности слизистых или кожных покровов, контакт с людьми, страдающими хроническими заболеваниями печени или больными гепатитом в сроки от шести недель до шести месяцев до ухудшения состояния, случайные половые связи. Для гепатита В характерно постепенное начало, длительный период с выраженной слабостью, болью в суставах, нарушениями пищеварения, кожными высыпаниями. С появлением желтушности кожных покровов улучшение самочувствия не наблюдается. Состояние некоторых больных даже ухудшается. Врач может зафиксировать увеличение печени. Желтуха при гепатите В проявляется не сразу, а постепенно.

При сочетании вирусного гепатита типа В и дельта-инфекции (гепатита D) заболевание протекает тяжелее, симптомы и лабораторные изменения обычно более выражены. Особое значение для диагностики имеют специфические реакции. Вирус В содержит три антигена, к каждому из которых в ходе инфекционного процесса вырабатываются антитела. Поэтому большое практическое значение среди других методов лабораторной диагностики вирусных гепатитов имеет иммуноферментный анализ. В крови больного определяется ДНК вируса, в результатах ПЦР оцениваются маркеры инфекции. Наличие антител к HB-core Ag может означать, что когда-то пациент переболел гепатитом В, потому что антитела сохраняются продолжительный период после выздоровления. Иногда антитела сохраняются в течение всей жизни.

Для диагностирования гепатита С назначают следующие инструментальные и лабораторные обследования: УЗИ, кровь на антитела к вирусу гепатита, биохимия крови, ПЦР-анализ с целью определения ДНР вируса, биопсия печени. Положительные результаты могут указывать на наличие хронической инфекции или перенесенное в прошлом заболевание. Вызвать изменения в крови может другой инфекционный вирусный процесс. Есть вероятность получения ложноположительного результата. При первом анализе может быть положительный результат, который в дальнейшем (при углубленном исследовании) не подтверждается. Такая реакция может быть связана с различными причинами, но не с вирусом гепатита.

Диагностика вирусного гепатита Е основывается на сочетании симптомом острой формы болезни с особенностями заражения (посещение специфических для типа Е регионов за 2-8 недель до появления признаков болезни, употребление неочищенной воды, наличие схожих болезней у окружающих). Подозревать гепатит Е можно при отсутствии в крови маркеров гепатитов А и С. Подтверждается диагноз при наличии специфических антител к вирусу типа Е, которые можно выявить при помощи анализа ИФА в остром периоде заболевания. Дополнительным методом диагностики является УЗИ печени. Лечение предполагает борьбу с интоксикацией, обусловленной симптоматической терапией и поражением печени. Назначается щадящая диета, гепатопротекторы, дезинтоксикационные инфузии.

Если при симптомах гепатита в лабораторных анализах не обнаружены антитела, то нужно провести серологические тесты и определение антител к вирусу простого герпеса, токсоплазме, цитомегаловирусу. Лабораторные показатели могут изменяться при любой системной вирусной инфекции, сопровождающей поражение печени. При болях в правом подреберье, повышении температуры, желтухе, тошноте и рвоте иногда ставят ошибочных диагноз: острый холецистит, восходящий холангит, холедохолитаз. У пожилых людей требуется дифференцировать гепатит с механической желтухой, вызванной раком поджелудочной или холедохолитиазом. С гепатитом у беременных нередко путают заболевания печени (эклампсия, холестаз беременных, острая жировая дистрофия печени). В некоторых случаях приходится исключать наследственные нарушения обмена веществ.

При назначении противовирусной терапии обязательно проводятся дополнительные исследования. Таким образом, лечение и диагностика вирусного гепатита оказываются связаны. Необходимо полное обследование вируса (вирусная нагрузка, генотип), полная диагностика печени (УЗИ с допплерографией, биохимия, отражающая функциональное и структурное состояние печеночных клеток, оценка степени фиброза), анализы для исключения противопоказаний для назначения терапии (аутоиммунные антитела, анализ крови, гормоны, УЗИ щитовидной железы). Пациентам старше 40 лет назначается обследование дыхательной системы, сердца и сосудов. Если диагностируется гепатит В, то дополнительно при назначении терапии проводится анализ на устойчивость к препаратам, мутацию вируса, вирус-дельта.

источник

Диагностика вирусных гепатитов важный этап в жизни в любого человека, ведь зачастую течение заболевания может долго не проявляться. А в это время наносить сильный вред организму человека. Помимо этого инфицированный человек, не зная о наличии болезни может долгое время инфицировать окружающих.

Раннее исследование вируса С необходимо для того, чтобы предотвратить серьезные осложнения работы печени. Так как первые симптомы этого заболевания практически отсутствуют, а некоторые штампы и вовсе долгое время никак себя не проявляют.

Своевременное обнаружение и лечение помогают справиться с недугом на начальной стадии без инфицирования окружающих людей. Особенно раннее обследование необходимо женщинам во время вынашивания ребенка, так как есть вероятность инфицировать малыша.

Заболевание делится на такие формы, как: инфекционный, лучевой, токсический и аутоиммунный.

Токсический тип развивается вследствие воздействия алкогольных напитков, лекарств, наркотических и химических веществ. Это своего рода реакция организма на сильную и частую интоксикацию организма.

Лучевая форма болезни весьма редкая и является следствием продолжительного или частого ионизирующего облучения пациента. А вот аутоиммунный развивается на фоне атаки иммунитета организма собственного органа в силу различных сбоев.

Самым распространенным же считается именно инфекционный тип.

У каждого из маркеров есть стадии инкубационного периода и период обострения при которых симптомы проявления разные. Но в каждой форме при инкубационном периоде признаки отсутствуют. Далее они у всех характерны:

• расстройство ЖКТ,
• повышение температуры тела,
• усталость и боль суставов,
• увеличение печени и боль при ее пальпации,

При хронической инфекции наблюдается:

• изменение цвета мочи и кала,
• появляется желтушность глаз и кожи,
• может наблюдаться сыпь кожных покровов (при форме В),
• боль в области правого подреберья становится постоянной,
• желтушность ярко выраженная,
• появляется отвращение к пище,
• нарушается сон,
• появляются носовые кровотечения (при форме С).

Также стоит отметить, что симптомы у всех могут быть различны, это зависит от иммунитета больного и сопротивляемости организма.

При маркере А первые симптомы проявляются только по окончанию инкубационного периода болезни. Результаты пцр анализа помогают получить представление о составе крови пациента и выявление типа антигенов.

На основе этих данных удается понять, когда примерно было инфицирование и сопровождается ли инфекцией. После окончания инкубационного периода могут проявляться такие клинические признаки болезни:

• расстройство ЖКТ,
• слабость, вялость,
• повышение температуры тела, озноб, повышенная потливость,
• желтушность глаз, тела или языка.

Очень часто желтушность может и не наблюдаться, а остальные симптомы подходят и под другие заболевания. Так что больной может и не обратиться к врачу.

По сравнению с маркером А, тип В более опасен, так как может спровоцировать печеночный рак или цирроз. Данный штамп куда более агрессивен, но не передается через быт или при контакте с носителем. Клинические признаки:

• боли в правой части тела на уровне ребер,
• нарушение пищеварения (тошнота, рвота),
• вялость, апатия,
• боль в области суставов,
• желтуха ,
• моча темнеет, а кал светлеет.

Маркер С отличается тем, что чаще мутирует и не дает возможности для создания вакцины. Также от последствий этого типа чаще всего настает смерть.

Штамп имеет все те же симптомы, что и другие виды, но к ним добавляется увеличение размеров селезенки и печени. Заразиться можно через медицинские не стерилизованные инструменты, кровь, плазму.

Методы диагностики вирусных гепатитов делятся на инструментальные, лабораторные исследования и дифференциально.

К инструментальным относится:

Лабораторный метод включает:

• Биохимия состава крови. Дает данные о воспалении органа и активности гепатита.
• Куагулограмма. С помощью этого метода оценивается показатель свертываемости крови.
• Экспресс тест. Определяет наличие в крови появление антител.
• Биопсия печени. С помощью биопсии можно получить данные о степени пораженности печени.
• ПЦР. Метод помогает определить код инфекции.
• ИФА. С помощью этого исследования определяется возможное инфицирование и наличие антител для борьбы с ним в крови.
• исследование на билирубин. При сильном повреждении количество билирубина возрастает, поэтому результат дает краткую клиническую картину без забора образца органа.
• Проба на белки.

Алгоритм на подтверждение гепатитов состоит в следующем:

• сдача общего анализа крови и биохимии,
• ПЦР,
• исследование на антитела и антигены.

По результатам данных исследований назначается дальнейшее исследование и лечение.

Лабораторная диагностика гепатитов дает возможность получить более полную картину о заболевании: его виду, степени прогресирования, реакции организма и тем самым помогает в назначении правильного лечения. В то время как инструментальное обследование эффективно только, когда ранняя стадия болезни.

При подозрении на тип А назначаются:

• анализ на антиген,
• проба на белки и антитела,
• на определение кода вируса с помощью анализа ПЦР.

• на наличие патогена,
• на антитела,
• ПЦР,
• на интерлейкин-28 Бета.

Практически в любой форме заболевания для сдачи требуются одни и те же анализы.

Лабораторная диагностика и обследование также включает инструментальное исследование. Оно проводится для определения точных размеров печени, а также для динамикой результативности лечения.

Путем фиброэластографии можно следить за прогрессированием патогена, а также за изменениями в структуре и тканях печени без хирургического вмешательства. Фиброэластография проводится с помощью специального аппарата фиброскана.

Диагностика вирусных гепатитов с помощью дифференциального метода необходима для определения точного кода вируса и особенностей антигенов. Также данный метод помогает исключить других возбудителей (токсоплазма например), желтуху, пищевую интоксикацию, кишечные вирусы, желчекаменную болезнь и др. Она осуществляется с помощью различных лабораторных анализов.

При сдаче ПЦР результаты расшифровываются таким образом:

• при содержании рибонуклеиновой кислоты менее 60 МЕ/мл — результат отрицательный,
• при содержании рибонуклеиновой кислоты от 102 до 108 МЕ/мл — положительный,
• при содержании рибонуклеиновой кислоты более 108 МЕ/мл — положительный с подозрением на тип вируса С.

Для подтверждения диагноза на наличие гепатита С проводится ВГС диагностика. На основании чего ставится диагноз. После получения ПЦР результатов и подтверждения наличия вируса специалист назначает дополнительные анализы для составления полной клинической картины.

Амбалов Юрий Михайлович — диагностика и принципы лечения острых вирусных гепатитов.

источник

Диагностические критерии начального периода вирусного гепатита А.

В начальный период вирусного гепатита можно обнаружить катаральный, диспепсический, астеновегетативный и артралгический синдромы.

Вирусный гепатит А имеет относительно легкое течение, тяжёлые формы встречаются редко. Начало острое, с признаками общей интоксикации. Начальный период длится 3-5 дней. Температура тела чаще повышается внезапно до 38°С. Появляется головная боль, разбитость, ломота в теле, изредка катаральные изменения в верхних дыхательных путях.

Диспепсический синдром бывает реже: снижается и даже исчезает аппетит, появляются тошнота, рвота, горечь во рту, отрыжка, дисфункция кишечника (послабление или склонность к запорам, ощущение тяжести и тупая боль в эпигастрии и правом подреберье. Болевой синдром изредка может быть значительно выраженным, симулируя приступ острого холецистита. Астеновегетативные проявления характеризуются выраженной общей слабостью, снижением работоспособности, слабостью, головокружением.

Вирусный гепатит В в отличие от гепатита А протекает тяжело и длительно. Начало постепенное. Начальный период может затягиваться до 1 мес и более. Диспепсический и астеновегетативный синдромы выражены и встречаются чаще. Больные жалуются на снижение аппетита вплоть до анорексии и отвращения к пище, на тошноту, рвоту, запоры, которые могут сменяться поносами, на ощущение тяжести и тупые боли в эпигастрии и правом подреберье, нарастающую общая слабость.

У 20-30% больных наблюдаются артралгии без деформаций и гиперемии в области суставов и ограничение их движений. У многих больных доминируют жалобы на снижение работоспособности, головную боль, раздражительность, общую слабость, нарушение сна. Изредка гепатит может начаться с появления психотических и менингеальных явлений. У некоторых больных наблюдается зуд кожи. Возможны высыпания в виде крапивницы. При тяжелом течении болезни конце продромального периода повышается температура тела.

При вирусном гепатите Е инкубационный период длится от 7 до 45 суток, в продромальном периоде преобладают диспепсические явления. Болезнь протекает тяжело, нередко с геморрагическим синдромом, а у беременных женщин (в последнем триместре) в фульминантной форме с высокой летальностью. Хронизации процесса почти нет.

Возбудитель изучен мало, путь передачи парентеральный, похожий на вирусный гепатит В. Инкубационный период — 6-8 недель. Продромальный период с астеновегетативным и диспепсическим синдромами. Течение легкое, могут быть субклинические и безжелтушные формы, часто хронизация протекания, переход в хронические формы, цирроз печени.

Основанием для диагноза может быть:

• 1. Общение с больными или парентеральные манипуляции, которые по времени укладываются в максимальный инкубационный период, свойственный данному типу гепатита;
• 2. Типичные клинические проявления начального периода заболевания;
• 3. Наличие гепатолиенального (печёночно-селезёночного) синдрома;
• 4. Кирпичный цвет мочи
• 5. Высокая активность АЛТ, АСТ в сыворотке крови;
• 6. Гипербилирубинемия до 30-35 мкмоль\л с преобладанием прямого;
• 7. Диспротеинемия положительные осадочные пробы;
• 8. Подтверждение методами ИФА и ПЦР лабораторной диагностики.

Развёртывается на фоне воспалительных заболеваний желчевыводящих путей.

Клинически: желто-зеленый цвет кожи, желтушность слизистых, сильный зуд, наличие множественных расчесов; моча темная, кал ахоличный; печень увеличена, болезненна; в моче большое количество желчных пигментов: в биохимическом анализе крови значительно повышен уровень АлАТ, АсАТ, билирубин за счет обеих фракций; в общем анализе крови возможны изменения воспалительного характера; на УЗИ — изменения, характерные для вирусных гепатитов и воспалительных заболеваний желчевыводящих путей.

Методы диагностики вирусных гепатитов должны быть комплекснными с учетом клинических, эпидемиологических и лабораторных данных. Изменения гемограммы при ВГ проявляются умеренной лейкопенией с лимфо- и моноцитозом; СОЭ нормальная или снижена. В сыворотке крови увеличивается содержание билирубина за счёт прямой фракции. Важным диагностическим тестом является повышение активности АЛТ, которое отмечают уже в конце инкубационного периода.

В начальный период гепатита возрастает активность общей лактатдегидрогеназы ЛДГ (появляются 4-я и 5-я фракции изоферментов), сорбитдегидрогеназы, фруктоза-I-фосфатальдолазы, которые содержатся в гепатоцитах и поступают в кровь в норме в очень малых количествах. Ранним и чувствительным показателем нарушения пигментного обмена является уробилинурия. Билирубин в моче появляется в конце преджелтушного периода. Повышается показатель тимоловой пробы и уменьшается — сулемовой. Чувствительными методами ранней диагностики ВГ можно считать иммуноферментный и метод ПЦР.

источник

А. Для обнаружения вируса — заражение животных (обезьяны шимпанзе, мармозеты; электронная и иммуноэлектронная микроскопия.

Б. Для обнаружения антител к вирусу (или к его антигенам) иммунологические реакции: РСК, гемагглютинация иммунного прилипания, иммунофлуоресценция, иммуноферментный и радиоиммунный методы, реак­ция пассивной гемагглютинации и др.способы.

Наиболее специфичным методом диагностики гепатита А является использование иммуноферментного метода «захвата» антител класса IgМ. Суть метода. На стенках полистироловых луночек вначале адсорбируют антитела против IgM(анти-IgM, затем добавляют исследуемую сыворот­ку, в которой определяют наличие антител класса IgМ к вирусу гепатита А. Если они имеются, то образуется комплекс IgM- анти IgM. Далее добавляют специфический антиген (вирус гепатита А)-который связывается с противовирусными антителами. Для обнаружения образовавшегося комплекса добавляют противовирусные антитела; меченные ферментом (пероксидазой). После отмывания луночек в них добавляют субстрат для фермента (ортофенилендиамин) и определяют интенсивность образу­ющейся окраски. Схема.

Методика постановки реакции обратной пассивной гемагглютинации для определения поверхностного антигена вируса гепатита В

Определение поверхностного антигена вируса гепатита В (HB_SAg) в сыворотке больного или носителя осуществляется с помощью анти-тельного эритроцитарного диагностикума, который представляет собой лиофилизированные формалинизированные куриные эритроциты с адсорбированными: на них антителами к НВ_sАg.

К содержимому ампулы с сенсибилизированными эритроцитами до­бавляют 5 мл 0,9%-ного раствора натрия хлорида (ФР). Исследуемую сыворотку разводят 1:8. Для этого в лунку планшета вносят при по­мощи пипеточного дозатора 200 мкл ФР, добавляют 25 мкл исследуемой сыворотки крови, перемешивают и 25 мкл приготовленного разведения переносят в пустую луночку планшета. В качестве контрольных образ­цов используют сыворотку заведомо положительную в разведении 1:8 и ФР. В лунки, содержащие по 25 мкл исследуемых проб, добавляют 25-33 мкл 1%-ной взвеси сенсибилизированных эритроцитов. Реагенты переме­шивают постукиванием о край планшета в течение 30 ,сек и выдерживают 20-30 мин при комнатной температуре. Результаты РОПГА считают отри­цательными при отсутствии гемагглютинации с исследуемой сывороткой и ФР, но при наличии ее в заведомо положительной пробе. Все сыворот­ки, агглютинирующие сенсибилизированные эритроциты, исследуют в под­тверждающем тесте. Суть его состоит в том, что в лунках планшета готовят два ряда двукратных разведений исследуемой сыворотки крови от 1:2 до 1:256 в объемах по 25 мкл. В контрольный ряд добавляют несенсибилизированные эритроциты. Планшеты с разведениями выдер­живают не менее 30 минут при комнатной температуре, а затем добавляют в оба ряда по 25-33 мкл сенсибилизированных эритроцитов. Ре­зультаты реакции считают положительными, если в опытном ряду наблюдается по крайней мере 4-х кратное снижение титра исследуемой сыворотки.

Известны следующие формы вирусных гепатитов:

1.Гепатит А (инфекционный гепатит).

2.Гепатит В (сывороточный гепатит).

3.Гепатит-дельта — эпидемиологически сходен с гепатитом В, но вызывается дельта-вирусом.

4.Гепатит С (гепатит ни А ни В) — заражение происходит главным образом парентеральным путем, но возбудитель отличается от вирусов А и В.

5.Гепатит Е (гепатит ни А ни В) — заражение происходит, как при гепатите А, главным образом фекально-оралъным путем, но возбу­дитель отличается от вирусов А и В.

Вирус гепатита А — изометрический РНК-содержащий вирус. Геном представлен однонитчатой позитивной РНК с м.м. 2,6 млн. Диаметр вириона 27 нм, суперкапсида нет, тип симметрии кубический, икосаэдр. Капсид имеет 32 капсомера Оболочка образована 4 полипептидами.

Возбудитель гепатита В — ДНК-содержащий сферический вирус. Диаметр вириона 42 ны. Геном представлен двунитчатой кольцевидной ДНК с м.м. 1,6 млн; одна нить имеет брешь. Вирион содержит обратную транскриптазу, принимающую участие в репликации. С ее участием происходит синтез на прегеномной РНК вначале минус, а затем плюс-цепей ДНК, в составе генома только четыре гена: S,С,Р и X. Оболочка вириона состоит из трех белков (главного, большого и среднего). Схему строения вириона см. на стр.124.

В составе вириона имеется три основных антигена: НВSАg-поверхностный антиген; 2)НВсАg — сердцевинный и 3) антиген НВeАg.

Возбудитель дельта-гепатита имеет сферическую форму с диаметром З5-37 нм.

Геном представлен РНК с м.м. 500000. Внешняя оболочка вириона состоит из поверхностного антигена вируса гепатита В (НВ_SАg), а при ее разрушении выделяется компонент со специфической антигенностью (дельта-антиген).

Б. Культивирование вирусов гепатитов удается с большим трудом и требует соблюдения ряда условий. В нашей стране разработан метод культивирования вируса гепатита А в культуре клеток 4647 (перевиваемая линия клеток почек зеленых мартышек).

В. Для профилактики гепатита А создаются различные вакцины:

1.Цельновирионные из ослабленных или инактивированных (формоловые) вирусов вакцины.

3.Вакцины химические (из химических аналогов антигенных детерминант вируса).

4.Генно-инженерные вакцины (гены вируса гепатита А рекомбинированы в геном вируса осповакцины).

Одним из важных условий борьбы с гепатитом В в глобальном пла­не, по мнению ВОЗ, является массовая иммунизация новорожденных и детей раннего возраста. Полный курс иммунизации против гепатита В состоит из трех прививок: первая доза вводится сразу после рождения, вторая через 1-2 месяца и третья — до конца первого года жизни ребенка.

Для вакцинации против гепатита В применяется два типа высоко эффективных вакцин: плазменная вакцина (плазма хронических носителей вируса содержит огромное количество поверхностного антигена ви­руса гепатита В, он извлекается и надежно обезвреживается) и реком-бинантная генно-инженерная вакцина, которая готовится на основе рекомбинантного клона дрожжей, несущего гены НВsАg.

Тема: МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА СИНДРОМА ПРИОБРЕТЕННОГО ИММУНОДЕФИЦИТА ЧЕЛОВЕКА (СПИДа)

1.Особенности структурной организации вируса и его генома.

2.Механизм взаимодействия вируса СПИДа с клеткой, особенности патогенеза инфекции.

3.Вирусологическая диагностика ВИЧ-инфекции.

4.Серологическая диагностика ВИЧ-инфекции:

а)определение противовирусных антител у больных и носителей с помощью коммерческих тест- систем; демонстрация;

б)метод иммуноблотинга и его значение.

5.Знакомство с иммунопрепаратами, применяемыми для диагностики, профилактики и лечения вирусных заболеваний. Обязательные прививки против кори, полиомиелита и гепатита В.

§ I. Вирус СПИДа (ВИЧ) имеет шаровидную форму, его диаметр 100 нм. Оболочка вируса имеет форму многогранника, составленного из 12 пятиугольников и 20 шестиугольников. В центре и углах каждого шестиугольника расположены молекулы gp120 (всего 80 молекул на вирион), оболочка содержит двойной слой липидов, над которыми выступают молекулы gp120, а через мембрану проходит трансмембранный белок gр41.

Сердцевина вириона имеет форму снаряда, составляющие его моле­кулы из трех-четырех белков образуют поверхность в виде дельта-ико­саэдра.

Белок gp120 является рецептором вируса, взаимодействующим с рецептором СД4 чувствительных к нему клеток (Т- лимфоциты, макрофаги, моноциты).

В сердцевине вириона содержится его геном. Он представлен двумя идентичными молекулами РНК (у ВИЧ-1 из 9213 нуклеотидов), двумя молекулами затравочной РНК, двумя молекулами полимеразы, обладающей пятью активностями (протеазной, обратной транскриптазы, РНК-азы, ДНК-зависимой ДНК-полимеразы и эндонуклеазы, или интегразы). РНК связана с нуклеокапсидным белком.

Особенности организации генома

ДНК провируса (ВИЧ-1) состоит из 9283 нуклеотидных пар (н.п.) и фланкирована LTR из 638 н.п.

В составе генома (ДНК-провируса) девять генов, которые контро­лируют синтез 8 структурных и 6 регуляторных белков:

gag — p17, р30, р15 — эти белки образуют сердцевину вириона;

роl — р12 (протеаза). р51 — p66 (обратная транскриптаза , РНКаза Н, ДНК-зависимая ДНК-полимераза), р32 (интеграза, или эндонуклеаза);

env- белки оболочки (gp120, gp41).

Указанные восемь белков входят в состав вириона.

Регуляторные гены и белки

tat — pI4 (TAT); vif — р23 (VIF);

rev — pI2 (REV); vpu — pI6 (VPU);

Таким образом, девять генов вируса кодируют синтез 14 белков. Это связано с тем, что некоторые гены имеют экзонно-интронную структуру и имеют несколько рамок считывания.

Схематическое расположение генов вируса можно изобразить следующим образом:

Сложность работы генома вируса связана с наличием в LTR спе­циальных регуляторных элементов:

г)элемент позитивной регуляции (TAR)

д)элемент негативной регуляции (NRE)

Кроме того, обнаружены элементы, участвующие в регуляции сплайсинга РНК (CRS — стимулирует сплайсинг) и CAR (ингибирует сплайсинг при наличии белка REV ), и элемент Psi , который контро­лирует упаковку геномной РНК в капсид. В LTR имеются элементы, ко­торые определяют участок прикрепления затравочной РНК (тРНК л из ) для синтеза минус-цепи ДНК и участок, служащий затравкой для синтеза плюс-цепи ДНК.

В регуляции вируса особенно важную роль играют белки ТАТ (позитивный контроль размножения вируса через участок TAR), и NEF и VPU-негативный контроль репродукции вируса (через участок NRE) и белок REV (позитивно-негативный контроль через участок CAR). Белок REV контролирует экспрессию генов gag pol env и осуществляет негатив­ную регуляцию сплайсинга.

Таким образом, размножение вируса СПИДа находится под сложным тройным контролем — позитивным, негативным и позитивно-негативным .

§ 2. Взаимодействие вируса с клеткой протекает по следующей схеме: — адсорбция вируса — окаймленная ямка — окаймленный пузырек-лизосома — слияние мембран — выход нуклеокапсида в цитоплазму -син­тез обратной транскриптазой минус-цепи ДНК — разрушение РНК-азой Н вирионной РНК — синтез ДНК-полимеразой плюс-цепи ДНК-образование LTR-проникновение ДНК-провируса в ядро (в хромосому с помощью интегразы). Активация вируса-синтез полноразмерных и субгеномных РНК клеточной РНК-полимеразой — протеолиз и процессинг env- белков -синтез других белков — ассоциация двух молекул геномной РНК с кап-сидными белками — включение двух молекул РНК (а также двух молекул затравочной тРНК и pol- белков) в капсид — мембрана клетки — липидная оболочка — белки gp4I и gpI20 — отпочкование вирионов — образо­вание симпластов из Т-лимфоцитов — их гибель — иммунодефицит — нарушение других систем — присоединение оппортунистических инфекций.

Заражение вирусом — начало вирусоносительства. Активация Т-лимфоцита (и, соответственно, вируса) — начало болезни.

§ 3. Вирусологический диагноз ВИЧ-инфекции трудно осуществим, так как животные к вирусу не чувствительны, а вирус размножается только в одном клоне лимфоцитов (Н9), которых лаборатории не имеют. Наличие вируса или его антигенов можно обнаружить с помощью некоторых иммунологических реакций, но для этого требуются специфические антитела, получение которых связано с большими трудностями. В принципе, возможно использование также метода РНК-зонда.

4. Основным способом диагностики ВИЧ-инфекции и особенно выявления вирусоносительства является использование метода иммуноферментного анализа. Имеющиеся коммерческие тест-системы просты в употреблении, содержат сенсибилизированные антигеном лунки в планшетах, все необходимые ингредиенты и контроли. В силу своей универсальности этот метод получил повсеместное применение. Демонстрация отечественных тест-систем для иммуноферментного определения антител к вирусу СПИДа. Постановка опыта (методика опыта описана в занятии 11).

§ 5. Недостатком иммуноферментного метода является то, что нередко он дает ложнопозитивные результаты. Поэтому в случае сомнения такая сыворотка подвергается контрольному испытанию более чувствительными специфичными методами, например с помощью метода иммуноблотинга или иммунопреципитации.

Метод иммуноблотинга представляет собой тестирование твердо-фазным иммунологическим анализом электрофоретически разделенных белков. Реакция ставится в следующей последовательности: электрофоретическое разделение анализируемого материала на индивидуальные белки или полипептиды в геле; получение реплики путем переноса исследуемых белков с геля на твердофазный матрикс; блокирование незанятых центров связывания белков матрикса; инкубирование со специфической тест-сывороткой; отмывка от избытка сыворотки; инкубирование с меченым иммунореагентом на антитела специфической сыворотки; отмывка от избытка меченого иммунореагента; выявление тестируемых белков или полипептидов с помощью метки иммунореагента.

Для разделения анализируемого материала используют чаще всего различные варианты электрофореза в полиакриламидном геле (ПААГ).

После электрофоретического разделения белков их иммобилизуют на твердой фазе (матриксе), в качестве которой в основном применяют нитроцеллюлозные мембраны (НЦМ). На ПААГ помещают НЦМ и проводят электрофоретический перенос в перпендикулярном к гелю направлении.

На полученной нитроцеллюлозной реплике блокируют активные центры связывания во избежание неспецифической адсорбции реагентов. С этой целью НЦМ инкубируют с раствором бычьего сывороточного альбумина в концентрации 2-5% в течение 1-2 часов.

После блокирования активных мест связывания НЦМ инкубируют с эмпирически подобранным разведением специфической сыворотки (т.е. заведомо положительной сывороткой), причем время инкубирования изменяется в широком диапазоне в зависимости от авидности компонентов. Обычно инкубирование в течение двух часов при 37° или в течение ночи при 4° дает хорошие результаты. НЦМ несколько раз отмывают блокирующим раствором от неспецифически адсорбированной сыворотки и тестируют специфические антитела одним из методов твердофазного иммунного анализа, чаще всего используют ИФМ или РИМ. В том и другом случае НЦМ после обработки специфической сывороткой инкубируют с меченными ферментом антивидовыми антителами, в качестве метки используют пероксидазу хрена (ИФМ) либо радиоактивный йод (РИМ).

После отмывки физиологическим буфером избытка меченых антител на заключительном этапе проведения иммуноблотинга выявляют тестируемые антитела по ферментативной реакции с соответствующим субстратом или авторадиографическим методом.

Контрольные вопросы по вирусологии

Что собой представляют вирусы, являются ли они живыми существами или неживыми структурами?

Каким образом происходит проникновение вируса в клетку?

Какие вакцины применяют для профилактики гриппа? Чем отличаются вирусы от всех прочих живых существ?

Рис.1 СХЕМА СТРОЕНИЯ ВИРИОНА ВИРУСА СПИДа

Каким способом происходит заражение вирусом гепатита В? Какие формы вирусных гепатитов Вы знаете?

С какой целью производится фаготипирование бактерий, например, стафилококков?

Какие методы культивирования вирусов Вы знаете и какие методы их типирования применяются?

Что собой, представляют аденовирусы и какие наиболее характерные признаки проявления аденовирусной инфекции?

Какие вирусы являются возбудителями острых респираторных заболе­ваний (ОРЗ)?

Каким образом происходит заражение человека вирусом иммунодефицита?

По каким признакам можно судить о размножении вирусов в культуре клеток?

Какие клетки организма поражает вирус иммунодефицита и какой рецептор имеют эти клетки?

В чем заключается сущность иммуноферментного метода (ИФМ) диагностики инфекционных заболевании?

Сколько типов вирусов гепатита Вы знаете?

Какие серологические реакции применяются для диагностики гриппа?

Какие серологические реакции можно использовать для диагностики вирусных инфекций?

Какие вирусы вызывают острые кишечные заболевания (ОКЗ)?

Из каких основных этапов складывается процесс взаимодействия вируса с клеткой?

Какие типы вирусных геномов Вы знаете?

Чем характеризуются арбовирусы? Какие типы флавивирусов вызывает клещевой весенне-летний энцефалит и омскую геморрагическую лихорадку?

Каковы методы микробиологической диагностики клещевого энцефалита?

Из каких структурных компонентов состоят вирусы? Что такое капсид? Нуклеокапсид? Какие типы их симметрии Вы знаете?

Изменение каких наружных белков вируса гриппа приводит к появлению пандемических вариантов его и почему?

Как устроен вирус гриппа? Каковы особенности его генома?

Какая вакцина применяется в нашей стране для создания активного коллективного иммунитета против полиомиелита?

В каком возрасте делают прививки против полиомиелита?

Каким образом можно выделить от больного гриппом возбудителя и установить его серотип?

Как устроен вирус полиомиелита и каковы способы заражения этим возбудителем?

Как устроен вирус иммунодефицита человека?

Сколько генов имеет вирус иммунодефицита и какие белки они контролируют?

Какие регуляторные элементы содержатся в длинных концевых повторах (LTR) генома вируса иммунодефицита?

Каков механизм развития иммунодефицита человека в результате заражения его возбудителем?

Какие методы применяются для диагностики вирусного гепатита А?

Какая иммунологическая реакция применяется для обнаружения поверхностного антигена (HBsAg) вируса гепатита В у больных и вирусоносителей?

Какие вакцины используются для создания активного коллективного иммунитета против гепатита В?

Что собой представляет возбудитель дельта-гепатита?

Чем характеризуется возбудитель гепатит А?

Как устроен вирус — возбудитель гепатита В? Какую роль играет содержащаяся в вирионе обратная транскриптаза?

Каковы особенности размножения ретровирусов, почему они получили такое название?

Какие механизмы лежат в основе противовирусного иммунитета?

Как распознают Т-киллеры клетки, инфицированные вирусом?

Какую роль играют в патологии человека вирусы Коксаки и ЕСНО?

Каковы методы диагностики заболеваний, вызываемых энтеровирусами?

Почему для диагностики вирусного гепатита А наиболее приемлемой является методика «захвата» антител, относящихся к иммуноглобулинам класса IgM?

Какие Т-лимфоциты обеспечивают защиту организма от вирусов?

С помощью какой серологической реакции можно определить наличие вируса иммунодефицита в организме человека и в чем сущность этой реакции?

Что такое иммуноблотинг и для какой цели он применяется?

Почему лица, пораженные вирусом иммунодефицита, становятся легко восприимчивыми к различным, даже слабо патогенным, микроорганизмам, иначе говоря,почему у них часто развиваются оппортунистические инфекции?

Какие типы симметрии известны у вирусов?

Как проникает в организм вирус гриппа и из каких основных этапов складывается процесс его внутриклеточного размножения?

Каково значение гемагглютининов вируса гриппа?

Каков механизм противовирусного действия интерферона? Как происходит заражение гепатитом В?

Какие клетки поражает вирус иммунодефицита человека и как он распознает их, т.е. какие рецепторы содержат эти клетки для вируса?

Что такое лизогения и лизогенная конверсия и какими фагами она вызывается — вирулентными или умеренными?

Каковы механизмы персистирования вирусов в организме человека?

Каким образом бактериофаг может изменить генетические свойства бактерий?

Что такое первично-трипсинизированные культуры клеток и перевиваемые культуры клеток?

Каким образом РНК-содержащие вирусы могут интегрировать в хромосому клетки?

Каким образом онкогенные вирусы вызывают трансформацию нормальных клеток в злокачественные? Что такое протоонкоген и онкоген?

Почему вирусы являются облигатными паразитами?

Как устроен вирус дельта-гепатита? Какой нуклеиновой кислотой представлен его геном?

Каков механизм реакции торможения гемагглютинации?

Из каких основных этапов складывается процесс взаимодействия вируса СПИДа с клеткой?

Какие типы антигенной изменчивости вируса, гриппа Вы знаете и каково их значение в эпидемиологии этой болезни?

Каков механизм формирования вириона гриппа в клетке?

Как осуществляется специфическая профилактика бешенства и какие препараты применяются для этой цели и в каких случаях?

Как осуществляется микробиологическая диагностика бешенства?

Как устроены аденовирусы, чем представлен их геном, какой тип симметрии имеет вирион и сколько у него капсомеров?

Каковы особенности репликации вирусов, у которых геном представлен однонитчатой ДНК?

о Каковы особенности репликации вирусов, у которых геном представлен однонитчатой РНК?

Какая разница между позитивными и негативными вариантами однонитчатых РНК-геномов?

В чем заключается сущность радиоимиунного метода (РИМ) диагностики инфекционных заболеваний?

источник

Диагностика острых и хронических гепатитов обязательно должна носить комплексный характер.

Прежде всего она направлена на определение возбудителя данного заболевания. Также врач обязательно должен оценить степень нарушения работы печени и выявить сопутствующие осложнения. Начальной стадией диагностики является изучения анамнеза и осмотр пациента. После этого специалист назначает другие методы диагностики вирусных гепатитов – лабораторные и инструментальные.

В процессе ПЦР-диагностики заболевания определяют маркеры острых и хронических гепатитов. К ним относят следующее:

1. Маркеры гепатита А. Анти-НАV IgM появляются в крови к окончанию инкубационного периода. В этот момент у человека возникают первые симптомы гепатита. Антитела присутствуют в сыворотке около полугода. Благодаря выявлению данных веществ методом ПЦР можно говорить о текущей или недавно возникшей инфекции.
   Анти-НАV-total возникают в сыворотке позже. Они говорят о присутствии HAV-инфекции и последующем формировании иммунитета. Данный показатель, полученный в процессе исследований методом ПЦР, может использоваться для определения эффективности профилактики с помощью вакцин.
2. Маркеры гепатита В. В эту категорию входит НВsAg, который является поверхностным антигеном гепатита В и появляется в завершающей стадии инкубационного периода. Его не удается выявить в 10 % острых случаев заболевания и большинстве хронических.
   Антитела анти-НВs возникают спустя 3-12 месяцев после начала развития патологии. Они присутствуют в организме примерно 5 лет. Ангиген НbcorA не удается определить в сыворотке крови. Его удается выявить лишь в гепатоцитах.
   Анти-Нвcor IgM представляет собой антитела к ядерному антигену, которые характерны для завершения инкубационного периода и начала развития болезни. Определение данных веществ является значимым критерием при проведении ПЦР-диагностики.
   Анти-Нвcor IgG характерны для парентеральных гепатитов во время развернутой клинической картины. Они сохраняются на всю жизнь и свидетельствуют о том, что человек перенес инфекцию. В завершение инкубационного периода можно обнаружить НвeAg. Он сохраняется в течение 10-12 недель и говорит о репликации парентеральных вирусов.
   Анти-Нве представляют собой антитела к HbeAg и возникают во время развернутых проявлений. Данные вещества сохраняются на 5 лет после заболевания. При хронических парентеральных гепатитах их выявляют и по истечении указанного времени.

Помимо ПЦР-диагностики, очень важно оценить количество ферментов печени. Поражение тканей органа сопровождается попаданием в кровь ферментов, что влечет их увеличение в составе плазмы. В нормальном состоянии количество АСАТ составляет 5-35 Ед./л, а АЛАТ – 5-40 Ед./л.
Лабораторная диагностика вирусных гепатитов должна включать определение плазматической активности щелочной фосфатазы. В случае развития гепатита она увеличивается. В норме данный показатель составляет 30-115 Ед./л.
Немаловажное значение имеет оценка фракций билирубина – свободного и связанного. Его повышение обусловлено неспособностью клеток печени выводить из организма данный пигмент. В норме концентрация связанного билирубина составляет 0,1-0,3 мг/дл, а свободного – 0,2-0,7 мг/дл.

Наши постоянная читательница

Наша постоянная читательница справилась с ГЕПАТИТОМ С действенными медикаментами — Софосбувир и Даклатасвир. По отзывам пациентов — результат 97% — полное избавление от вируса. Мы решили посоветовать ДЕЙСТВЕННУЮ терапию Вам. Результат почти 100%. ДЕЙСТВЕННЫЙ МЕТОД.

Чтобы обследовать органы брюшной полости, обычно применяют ультразвуковое исследование. Это достаточно простой метод, который помогает визуализировать увеличение печени и других органов, а также оценить происходящие в них изменения. Также с помощью УЗИ оценивается состояние сосудов. Если же врач планирует сделать пункционную биопсию, данный метод поможет выбрать оптимальное место для прокола.
С помощью данного аппарата удается увидеть на мониторе определенные сечения внутренних органов. В результате можно визуализировать локальные изменения в них – камни, опухолевые образования и т.д.
Неправильные результаты можно получить исключительно в том случае, если работа органа нарушается на клеточном уровне. Вследствие этого весь орган поражен. К примеру, при изменении клеток печени удастся обнаружить нарушение оттенка тканей. Однако информацию относительно характера и тяжести болезни получить не удастся.
В такой ситуации проводится пункционная биопсия. Это наиболее точная методика, которая позволяет получить максимальное количество информации. С помощью данного способа оценивается структура тканей печени, что позволяет наиболее точно диагностировать гепатит.

Гепатит у беременных – очень опасная патология, поскольку она практически всегда провоцирует нарушения в развитии плода. При поражении вирусом типа В практически всегда заражается и ребенок. Наличие гепатита С у беременных провоцирует несколько иную картину. Тем не менее, нельзя сказать, развитие данного заболевания у беременных спровоцирует инфицирование малыша.
Чтобы провести правильную диагностику, прежде всего нужно сдать анализ крови и провести ПЦР-диагностику. При гепатите В у беременных имеет значение наличие HBsAg и НВеАg. Если они присутствуют, риск заражения ребенка повышается. В такой ситуации также уменьшается эффективность вакцины для беременных.
Если же будущая мама заболевает гепатитом С, инфицирование ребенка происходишь лишь в 5 % случаев. При этом данный вид заболевания передается от беременных к плоду лишь при условии активного протекания недуга. В большинстве случае ребенок заражается от матери при родах.
При выявлении вирусного гепатита у беременных обязательно требуется стационарная терапия. Если у женщин развивается цирроз печени, нужно принимать все меры, чтобы беременность и вовсе не наступила. Дополнительные нагрузки на организм, которые возникают у беременных, спровоцируют сильное обострение болезни.
При хронизации процесса беременность не оказывает влияния на клиническую картину патологии. Иногда у беременных женщин воспаления в печени и вовсе прекращаются. Однако нужно быть готовой к тому, что после родов гепатит резко обострится. Потому так важно держать данный процесс под контролем.

Дифференциальная диагностика проводится для того, чтобы отличить вирусный гепатит от острых поражений печени, связанных с воздействием химических веществ. Особенно важно провести диф диагностику алкогольной формы заболевания. На начальном этапе развития этого недуга часто ставят ошибочный диагноз, принимая его за вирусный гепатит. Это происходит в 50 % случаев.
Чтобы провести диф диагностику этих процессов, нужно учитывать, что алкогольный гепатит развивается исключительно на фоне постоянного употребления большого количества спиртного. Важными критериями диф диагностики в данном случае является следующее:

источник

Воспалительное заболевание паренхимы печени зачастую имеет вирусную природу возникновения. С учетом разновидностей возбудителей были выделены гепатиты А, В, С, Д и Е, которые различаются тяжестью клинической картины и воздействием на печень. Если их не дифференцировать, неправильно подобранное лечение может привести к смерти пациента.

Науке известно 11 генотипов этой патологии, но более 70% случаев заболеваемости приходятся на гепатит А, доля детей дошкольного и младшекольного возраста составляет 80%. С ним бороться легче, чем с остальными разновидностями, но и их опасность существенно выше. Сравнительная таблица самых распространенных вирусных гепатитов:

Тяжесть течения

начало болезни острое, течение преимущественно легкое, клиническая картина как у гриппа

легкие (безжелтушные), средние и тяжелые формы течения

преобладают безжелтушные и легкие формы (40–75% пациентов не имеют симптомов болезни), склонные к хронизации процесса

тяжелое течение, зачастую с неблагоприятным исходом

• острая форма начинается медленно, но по симптоматике похожа на гепатит А;
• болезнь тяжело протекает у беременных

Вероятность развития осложнений

низкая, фундаментальных повреждений печени не происходит

• при хронизации болезни происходит нарушение обменных процессов печени;
• при коинфекции с гепатитом Д наблюдаются тяжелые осложнения

высокая, у 25% пациентов формируются опасные для жизни патологии: цирроз, рак печени

при коинфекции (смешанное заражение) высокая вероятность цирроза, печеночной комы или летального исхода

высокая для почек и печени

Фульминантное течение (злокачественная форма гепатита, связанная с массивным некрозом печени)

почти не встречается, но существует риск для пожилых пациентов

наблюдается у больных с хронической формой, при коинфекции вирусами В и Д (зарегистрирована у 52% больных), при чистом вирусе В риск злокачественного течения – 1%

наблюдается при коинфекции вирусами В и Д (зарегистрирована у 42% больных)

почти не встречается, но возможно возникновение у беременных в отдельных регионах (эндемичные области по вирусному гепатиту Е) – регистрируется с частотой 20–40%

от инфицированного к здоровому вирус переходит при несоблюдении гигиены, контакты с предметами, которые потом попадают в рот

• высокая, от инфицированного человека к здоровому вирусные агенты передаются через кровь (включая заражение ребенка от матери при родах) и половым путем со спермой;
• при целостности кожных и слизистых покровов (через посуду, грудное молоко, поцелуи, рукопожатия) болезнь не передается;
• гепатитом С часто заражаются при переливании крови

вирусная инфекция передается преимущественно через воду

Прогноз излечения

• зачастую наблюдается полное выздоровление;
• летальный исход – единичные случаи

• острая форма – выздоровление в 80% случаев;
• субклинический гепатит оканчивается хронической формой, выздоровление происходит редко

из-за стертой симптоматики патология с вероятностью 80–90% становится хронической

высокая вероятность летального исхода (до 20%) при коинфекции, формирование хронического носительства вируса

при своевременном лечении прогноз благоприятный, выздоровление наступает через 2 месяца но не исключены осложнения

Лабораторные и инструментальные исследования назначаются для своевременного выявления болезни и определения типа возбудителя, особенно при скрытых формах гепатита. Чем раньше будет проведена диагностика, тем выше шансы подобрать необходимую терапию и предотвратить возникновение тяжелых осложнений и переход заболевания в хроническую стадию.

Для выявления патологии пациенту необходимо посетить инфекциониста и гастроэнтеролога, по необходимости он будет перенаправлен к гепатологу. Обратиться к врачу требуется после полового акта с потенциальным носителем болезни, при планировании беременности, появлении первых симптомов недомогания: слабость, повышение температуры, потеря аппетита, боли справа под ребрами. Диагностика антигенов нужна при подготовке к вакцинации. Если при общем осмотре врач обнаружит увеличение печени или иные клинические признаки гепатита, будут назначены:

• анализы кала, мочи;
• серологическая диагностика (исследование состава крови);
• инструментальные обследования.

Выбор конкретного метода диагностики осуществляет врач, который проведет оценку изменения состояния печени, выявит степень ее поражения, конкретные нарушения функционирования. После сопоставления этой информации с данными анамнеза и жалобами пациента подбирается оптимальный набор методов. Лабораторная диагностика гепатитов для получения максимально достоверных результатов проводится дважды и имеет более высокую информативность, чем инструментальная.

Для вирусных гепатитов типов А, В, Д и Е общие проявления схожи, поэтому дифференцировать их между собой в процессе первичной диагностики сложно. У гепатита С на начальном этапе (который длится месяцами или годами) внешние признаки могут полностью отсутствовать. При осмотре врач обращает внимание на:

• цвет кожи, склер, слизистой ротовой полости – становится желтушным;
• зуд кожных покровов (на фоне повышенного билирубина);
• сыпь (возможна при гепатите В);
• размеры печени – она увеличивается (гепатомегалия) или сокращается при злокачественной форме;
• массу тела – сильно снижается;
• сосудистые звездочки;
• потемнение мочи вместе с обесцвечиванием каловых масс.

Сами внешние признаки болезни на конкретный тип вирусного гепатита указывают редко. К результатам клинической диагностики врач должен добавить жалобы пациента – тошнота, боли в правом подреберье, диарея, рвота, повышение температуры, слабость, недомогание. Дополнительно учитываются данные анамнеза, которые помогают найти возможный путь заражения, соотнести его с конкретным вирусом.

Один из самых специфичных тестов для диагностики гепатита используется для точного выявления возбудителя и оценки активности вирусного процесса. Поиск антигенов (частиц патогенного микроорганизма) осуществляется для раннего обнаружения болезни, особенно бессимптомных форм, во время проведения иммуноферментного анализа крови. Дополнительно проводят проверку на антитела или иммуноглобулины, которые иммунитет вырабатывает в ответ на вирусную инфекцию. У каждого вида вирусного гепатита свои маркеры:

• А – Anti-HAV IgM наблюдается ближе к концу инкубационного периода, одновременно с появлением первых признаков болезни, и сохраняется до полугода. Наличие HAV-инфекции и формирование иммунитета к ней определяется по Anti-HAV-total.
• В – на последней стадии инкубационного периода появляется антиген HBsAg, при хронической форме не выявляется. Антитела к нему вырабатываются через 3–12 месяцев. На начальной стадии развития болезни наблюдаются антитела Anti-HBcor IgM, а при развернутой клинической картине – Anti-HBcor IgG, которые не исчезают впоследствии и свидетельствуют о перенесенной вирусной инфекции. Определение Anti-HBsAg необходимо для оценки иммунного ответа, течения болезни и предположения ее исхода. Маркер Anti-HBs на фоне отсутствия HBsAg говорит о выздоровлении, а если его нет и течение болезни тяжелое, врачи допускают вероятность гибели пациента. О заразности больного говорит маркер HBeAg.
• С – маркеры Anti-HCV возникают спустя 4–6 месяцев, свидетельствуют об острой/хронической форме. Если они не обнаружены, это говорит об отсутствии вируса С, инкубационном периоде. Маркер острой фазы – иммуноглобулин IgM, а перенесенной инфекции – IgG.
• Д – при коинфекции Anti-HEV выше, чем при суперинфекции (заражение HBsAg-позитивных пациентов), что помогает провести дифференциальную диагностику болезни. В острой стадии обнаруживается большое количество IgM.
• Е – антигены обнаруживаются в инкубационном периоде, антитела Anti-HEV выявляются в продромальном (начальном) и сохраняются на всю жизнь (IgG) или на полгода (IgM).

Значимость имеют уровень лейкоцитов (снижается), скорость оседания эритроцитов (растет), альбумин (падает), особенно при выявлении гепатита А. После общего и биохимического анализов определение состава крови проводят через:

• Иммунологический анализ, ИФА – необходим для обнаружения антигенов и антител, их качественных и количественных показателей. При хроническом гепатите наблюдаются только IgG и/или IgA, при остром добавляется IgM. Все 3 иммуноглобулина присутствуют при обострении хронической формы, а IgG одиночно говорит о поствакциональном или постинфекционном иммунитете.
• Полимеразную цепную реакцию, ПЦР – обязательный и самый информативный метод диагностики, при котором выявляются частицы ДНК или РНК вирусных агентов, даже если их концентрация минимальна. С помощью ПЦР можно установить момент заражения (если диагностирован вирусный гепатит А), стадию болезни, эффективность проводимого лечения, вирусную активность.

Метод ПЦР может назначаться для проверки данных ИФА, поскольку его достоверность абсолютна, а у ИФА возможны ложноположительные или ложноотрицательные результаты при наличии хронических воспалительных заболеваний. Исключение составляет гепатит А, для которого преимущественно используют только иммуноферментный (иммунологический) анализ.

При повреждении тканей больного органа в результате вирусной активности в кровь выбрасывается большое количество ферментов из гепатоцитов (печеночные клетки). На фоне этого у пациента снижается уровень альбумина и общего белка, повышаются показатели:

• АЛТ (АлАТ), АСТ (АсАТ) – выше нормы в 20–50 раз, имеют коэффициент АЛТ/АСТ ниже 0,5 единиц;
• щелочной фосфатазы – говорит о застое желчи;
• тимоловой пробы (повышение нормы наблюдается уже на ранней стадии вирусного гепатита);
• ГГТ – повышается при всех печеночных заболеваниях, одиночно на гепатит не указывает.

Посредством биохимического анализа крови врач выявляет повышение фракций свободного и связанного билирубина: пигмента, который перестает выводиться поврежденными клетками печени с желчью, поэтому попадает в мочу. На фоне этого у пациента наблюдается и желтушность кожи. В норме уровень связанного билирубина составляет 0,1-0,3 мг/дл, а свободного – 0,2-0,7 мл/дг. У пациентов с вирусной злокачественной формой билирубин возрастает резко за 3–5 суток, соотношение свободного к связанному превышает 1 единицу.

В дополнение к серологическим обследованиям пациентам с гепатитом назначается ультразвуковая диагностика – она нужна для оценки происходящих в печени и соседних органах изменения (появление опухолей, камней), определения степени ее увеличения, состояния сосудов. Реже назначают магнитно-резонансную или компьютерную томографию. Дополнительно с помощью УЗИ выявляется оптимальная точка прокола для пункционной биопсии, которая помогает изучить структуру тканей печени при гепатите вирусного происхождения, является высокоинформативным методом диагностики.

источник