Производитель вакцины против оспы овец

В последние годы для активной иммунизации против оспы овец с положительными результатами применяют гидроокись-алюминиевую формолвакцину против оспы овец, предложенную научным сотрудником Государственного научно-контрольного института ветеринарных препаратов Н. В. Лихачевым.

Вакцину применяют для активной иммунизации как в местах, неблагополучных в отношении данной инфекции, так и с профилактической целью в благополучных по оспе овцеводческих хозяйствах.

Лечебными свойствами вакцина не обладает, а поэтому в неблагополучных хозяйствах прививаются только здоровые животные. Вакциной прививают (за исключением больных) всё поголовье: молодняк различных возрастов и маток, как холостых, так и суягных. Больным оспой овцам инъицируют сыворотку против оспы овец.

Перед прививкой флаконы с вакциной тщательно встряхивают до получения равномерной взвеси. Встряхивание повторяют каждый раз, перед тем как набрать вакцину в шприц. Вакцина инъицируется подкожно в области средней части шеи, при этом место прививки выстригают и дезинфицируют. Вакцину инъицируют в дозе 5 см 3 однократно. На месте инъекции у привитых животных образуется небольшое утолщение вследствие слабой рассасываемости гидроокиси алюминия.

У привитых животных не должно быть клиники общего переболевания оспой или оспенного процесса на месте инъекции вакцины. Эти животные безопасны в смысле рассеивания вируса оспы. Иммунитет у привитых овец наступает через 10—12 дней. В течение указанного срока привитые овцы не должны соприкасаться с больными оспой. Продолжительность иммунитета свыше 4 месяцев.

Для активной иммунизации овец против оспы применяют также овину или овину, заключённую в желатину (желатинизированиую овину). Овину прививают всем овцам в неблагополучных по оспе пунктах.

Овина и желатинизированная овина рассылается в ампулах ёмкостью в 1 см 3 . Одновременно с овиной рассылают физиологический раствор во флаконах ёмкостью в 50 см 3 .

Перед прививкой овину, после тщательного встряхивания ампулы, вливают во флаконы с физиологическим раствором с таким расчётом, чтобы получить разведение 1 :50, т.е. 1 см 3 овины на 50 см 3 физиологического раствора. Желатинизированную овину перед прививками предварительно расплавляют, для чего ампулы с овиной погружают в ванночку, наполненную тёплой водой (+25—+30°С). Расплавленную, как указано овину, разводят физиологическим раствором в отношении 1 :50. Овина должна быть защищена от прямых солнечных лучей и высокой температуры. Перед тем как набрать овину в шприц, флакон с разведённой овиной тщательно встряхивают. Шприц с имеющейся в нём овиной перед каждым впрыскиванием также встряхивают. Доза овины, разведённой указанным способом, равна 0,1 см 3 , а желатинизированной овины—0,2 см 3 , независимо от возраста прививаемых овец.

Овину вводят шприцем в области нижней бесшёрстной поверхности хвоста или на внутренней поверхности уха. Иглу вкалывают в толщу кожи с последующим незначительным оттягиванием её обратно. Место прививки сначала тщательно обтирают ватой, овлажняют водой, обсушивают сухой ватой, а затем обтирают ватой, смоченной спиртом, и обсушивают. Применение других дезинфицирующих средств не допускается.

Признаки привившейся оспы определяют тщательным поголовным осмотром привитых овец через 10—12 дней после прививки. У привитых овец на месте прививки должна быть папула или пузырь. У животных повышается температура, на бесшёрстных местах иногда появляется слабая папулёзная сыпь, исчезающая через несколько дней. У привитых овиной овец иммунитет наступает примерно через 20 дней и сохраняется до года и более.

Всех овец, не давших реакции, после просмотра вторично прививают овииой в той же дозе или методом овинной школки. Для этого берут опец, привитых овиной, на 10—11-й день после прививки с непрорвавшимся пузырём 1½ — 2½ в диаметре, содержащим чистую прозрачную лимфу. Поверхность пузыря и окружающую кожу осторожно очищают спиртовым тампоном и при высыхании пузырь прокалывают у основания. Вытекающую из него жидкость—лимфу—собирают и иглой прививают овцам. Овцы, привитые овиной и овнной-школкой, карантинируются в течение двух месяцев. Не следует прививать овиной и овиной-школкой маток во второй половине беременности и ягнят до трёх месяцев. Указанные группы животных прививают противооспенной сывороткой.

При осложнениях от прививки вводят оспенную сыворотку в лечебных дозах. Привитые овиной овцы рассматриваются как больные, за ними организуется особо тщательный уход до 20 дней, их обеспечивают лучшими кормами, а при необходимости применяют лечение. В холодное время года должно быть уделено особое внимание обеспечению этих овец кошарами и защите их от холода, ветра, дождя и снега. Указанные меры необходимо проводить особенно тщательно, если овцы острижены вскоре после прививки.

Противооспенную сыворотку применяют с профилактической и лечебной целью. Дозы сыворотки против оспы для разных возрастов овец, прививаемых с профилактической целью, следующие (в см 3 ):

ягнятам весом до 15 кг . . 10

овцам » от 15 до 25 кг . . 10—15

С лечебной целью сыворотку применяют в двойных дозах. Иммунитет при пассивных прививках сывороткой сохраняется до 12—15 дней.

Сыворотку вводят подкожно, на внутренней поверхности бедра.

Допускаются также симультанные прививки, т. е. Одновременное введение сыворотки и овины. При этом сыворотку вводя г подкожно на внутренней поверхности бедра, а овину в установленных дозах внутрикожно, на внутренней бесшёрстной поверхности хвоста.

Через 1½ месяца после прививки формолвакциной и через 20 дней после прививки овнной ветперсонал учитывает результаты прививки и акт отсылает в контрольную лабораторию биофабрики, изготовившей препарат.

источник

Оспа овец и коз — высоко контагиозное, быстро передающееся, сопровождающееся лихорадкой, папулёзно-пустулёзными высыпаниями на кожных покровах и слизистых, заболевание. Поражает животных любого возраста, в 50% случаев заканчивается летальным исходом. Для предупреждения распространения заболевания показана иммунизация мелкого скота с трёхмесячного возраста.

Выжившие животные приобретают устойчивый иммунитет к этому вирусу на 2 года. В качестве специфической профилактики используется культуральная вирус-вакцина атте-нуированного штамма НИСХИ (вирус оспы), обеспечивающая защиту привитым козам и овцам на 12 месяцев.

Сегодня для прививания мелкого и крупного рогатого скота против оспы и заразного узелкового дерматита используется вакцина «ШипПокс-ЛСД вак». Это единственный вид иммунизации.

Препарат сделан на основе культуральной жидкости перевиваемых клеток ДНК козы, инфицированной штаммом НИСХИ. В качестве дополнительных элементов в составе присутствует 10% сахарозы и 2% пищевого желатина.

Ответная иммунная реакция на однократное введение вакцины у мелкого скота появляется спустя 5 суток. Препарат безвредный, лечебными свойствами не обладает

Предназначение вакцины — профилактика оспы и нодулярного дерматита у здоровых овец, коз и крупного рогатого скота. Иммунизация проводится с возраста 3-х месяцев. Ревакцинация организовывается каждые 12 месяцев.

В неблагополучных пунктах и хозяйствах угрожаемой зоны проводят прививки для всех возрастных групп скота, вне зависимости от количества времени, которое прошло с момента прошлой иммунизации. Ягнят возрастом до 6 мес. вакцинируют двукратно, с интервалом в 2 недели. Ревакцинацию молодняка проводят спустя 6-7 мес., взрослых особей — 1 год.

Инструкция по применению:

Охладить физраствор (натрий хлорид) 0,9% концентрации до +4°С.
Во флакон с сухой порошковой вакциной, рассчитанный на 50 прививных доз, ввести при помощи шприца 2 см³ натрий хлорида, на 100 доз — 4 см³. Встряхивать ёмкость до полного суспензирования препарата.
Объединить полученную суспензию с 48 см³ физраствора (для 50 доз) иди 96 см³ (для 100 доз).
Ввести при помощи шприца 1 см³ готовой вакцины в бесшерстный участок дермы животного (подмышечная впадина или подхвостовая область).

Запрещено прививать:
больных, ослабленных животных;
самок на последней стадии беременности.

Побочных эффектов при введении препарата не выявлено. При превышении дозировок вспышек оспы не обнаружено.

При использовании нужно соблюдать следующие меры предосторожности:

Надеть чистую одежду.
Руки обработать этиловым спиртом.
Работать в стерильных перчатках.
Вводить суспензию в бесшерстный участок кожного покрова, предварительно обработав его спиртом.
При попадании вакцины на кожные покровы или слизистые человека, промыть участок водой.
Если вакцина случайно была введена подкожно работнику фермы, нужно сразу протереть участок этиловым спиртом, обратиться в больницу и сообщить врачу о происшествии.

Лекарственная форма препарата — порошковая масса, светло-жёлтого цвета. Полностью растворяется в физрастворе 0,9% концентрации за 1,5 минуты. Производитель: ФГБУ «ВНИИЗЖ».

Плановая профилактическая вакцинация позволяет уберечь поголовье от вспышек оспы. Для поддержания нормального состояния животных необходимо проводить манипуляцию ежегодно.

источник

Минимальный заказ — 100 шт.

Нодулярный дерматит крупного рогатого скота (кожная бугорчатка, кожно-узелковая сыпь, узелковая экзантема), болезнь «кожного отека» у буйволов (Dermatitis nodularis bovum) — инфекционная болезнь крупного рогатого скота, сопровождающаяся лихорадкой, отеком подкожной соединительной ткани и органов, образованием кожных узлов, поражением глаз, слизистой оболочки дыхательного и пищеварительного трактов.

Экономический ущерб. Летальность при нодулярном дерматите крупного рогатого скота не превышает 10%. В то же время по данным ряда авторов экономический ущерб значительный, ввиду того что снижается молочная и мясная продуктивность, качество кожевенного сырья, нарушается половая цикличность у коров, а у быков развивается временная половая стерильность.

Клинические признаки. Инкубационный период — от 3 до 30 дней, чаще 7-10 дней. Продромальный период короткий. При острой форме в начальной стадии болезни после повышения температуры тела до 40°С у животного происходит снижение аппетита, появляется слезотечение, серозно-слизистые выделения из носа. Через 48 часов на коже шеи, груди, живота, паха, конечностей, головы, вымени образуются плотные круглые или несколько вытянутые узелки с плотной поверхностью, диаметром 0,5-7см, высотой до 0,5см. Число узелков колеблется от десяти до нескольких сотен. Их легко прощупать, и они более заметны у животных с короткой шерстью, гладкой, на бесшерстных или слабо покрытых шерстью участках. Иногда узелки сливаются.

Через несколько часов после появления по краям узелков начинает отделяться эпидермис, а в центре образуется характерная впадина и начинается некроз ткани. Некротические участки окаймлены валиком шириной 1-3мм, состоящим из грануляционной ткани. Через 7-20 дней после появления узелка некротизированный участок секвестируется, и его можно извлечь или, подсыхая, он отпадает. Тогда он будет иметь вид пробки размером 1×2см.

Если процесс не осложняется, то образовавшаяся полость заполняется грануляционной тканью и зарастает непигментированной кожей с шерстью. Если же процесс осложнился, то образуются язвы. Несеквестированные узлы уплотняются и в таком состоянии могут оставаться до года и более. Отек, появившийся в начале болезни или позже, может увеличиваться и распространяться на соседние области. У лактирующих коров на вымени часто появляются узелки. Молоко становится розоватым, густым, сдаивается болезненно по каплям, а при нагревании застывает в гель. Лимфатические узлы увеличены и легко пальпируются, особенно предлопаточные.

При тяжелой форме отмечается длительная лихорадка, потеря аппетита, исхудание животного. Узелки прощупываются по всему туловищу, отмечаем сильное поражение органов дыхания и желудочно-кишечного тракта. На слизистой оболочке образуются плоские круглые эрозии и серовато-желтые некротические бляшки. В дальнейшем отмечают их нагноение изъязвления. На веках появляются эрозии и язвочки, роговица мутнеет, наступает частичная или полная слепота. Изо рта выделяется густая тягучая слюна, из носа — гнойная слизь со зловонным запахом. Если изъязвления в дыхательных путях сопровождаются выраженным отеком, то животное нередко погибает от удушья.

Атипичная форма нодулярного узелкового дерматита наблюдается у новорожденных телят и характеризуется перемежающей диареей, лихорадкой, при отсутствии заметных признаков кожных поражений.

Инанпарентная форма протекает бессимптомно, но сопровождается вирусоносительством и образованием вируснейтрализующихся антител.

У выздоровевших животных отеки и узелки исчезают, шерсть на пораженных участках тела выпадает, кожа трескается и отпадает лоскутками («лоскутная болезнь кожи») и постепенно заменяется новой. Наиболее часто «бугорчатка» осложняется трахеитом, пневмонией, сопровождающейся затрудненным дыханием, поражением половых органов, у самок-отсутствием эструса и пропуском 4-6 половых циклов, у самцов — временной половой стерильностью. Болезнь может осложняться разной микрофлорой; в этом случае у больных животных нередко поражаются суставы.

Профилактика и меры борьбы. Для иммунизации крупного рогатого скота против бугорчатки, вызываемой вирусами типа Nettling, применяют три штамма вируса оспы овец, выращенных в культурах тканей семенников ягнят и хориоаллантоисе куриных эмбрионов. Вакцинацию проводят подкожно. Примерно у 10% вакцинированных животных наблюдают местные реакции, выражающиеся в образовании узелка и припухлости, которые исчезают не позднее чем через 2 недели. Длительность иммунитета 1 год. Организуют и проводят мероприятия, препятствующие возникновению и распространению болезни. При появлении ее в ранее благополучных районах немедленно убивают всех заболевших и подозрительных по заболеванию животных и проводят тщательную дезинфекцию и дезинсекцию. Строго выполняют все правила ветеринарно-санитарных и карантинно-ограничительных мероприятий. В стационарно-неблагополучных районах больных и подозрительных по заболеванию животных тщательно изолируют, обеспечивают их полноценными витаминизированными кормами. Лечение симптоматическое.

При нодулярном дерматите КРС, животных прививают с 3-х месячного возраста однократно подкожно. Животных возрастной группы 3-6 месяцев прививают в 5-кратной овечьей дозе, а животных возрастной группы старше 6 месяцев в 10-кратной овечьей дозе с последующей ревакцинацией через 12 месяцев в 10-кратной овечьей дозе.

Обязательно ознакомьтесь с полным текстом инструкции по применению вирус-вакцины!

источник

Вакцина предназначена для профилактической иммунизации овец против оспы и заразного узелкового дерматита (нодулярного дерматита) КРС в неблагополучных и угрожаемых пунктах и хозяйствах. Лекарственная форма – лиофилизированная масса. По внешнему виду вакцина представляет собой однородную сухую пористую массу светло-желтого цвета, полностью растворяющуюся в стерильном 0,9% растворе хлорида натрия (физиологическом растворе) в течение 1,5 минуты.

Способ вакцинации

Вирусвакцину вводят овцам подкожно в бесшерстстый участок кожи (подмышечная область, подхвостовая складка) с соблюдением правил асептики в дозе 1 см3. Перед применением сухую вирусвакцину, соблюдая правила асептики, растворяют охлажденным до 4 °C физиологическим раствором. Для чего во флакон, содержащий 50 прививных доз вирусвакцины, при помощи шприца вносят 2 см3, а во флакон, содержащий 100 прививных доз –4 см3 физиологического раствора и тщательно встряхивают до полного ресуспендирования. После ресуспендирования вирусвакцину объединяют с 48 см3 или 96 см3 (для получения 50 и 100 прививных доз) стерильного физиологического раствора и тщательно встряхивают. Для вакцинации используют шприцы и иглы, которые стерилизуют кипячением в течение 20 минут. Допускается использование одноразовых шприцов. Дезинфекция шприцов и игл химическими средствами не допускается. Поверхность кожи в месте введения вирусвакцины обрабатывают 70% этиловым спиртом или другими антисептиками. При плановой вакцинации прививают овец с 3-месячного возраста. Ревакцинацию животных проводят через каждые 12 месяцев. В неблагополучном пункте и хозяйствах угрожаемой зоны вакцинируют животных всех возрастных групп, не имеющих признаков заболевания оспой, не зависимо от срока предыдущей вакцинации. При этом молодняк в возрасте до 6 месяцев прививают двукратно с интервалом 14 суток. Ревакцинируют молодняк через 6–7 месяцев, а взрослых животных – через 12 месяцев. При плановой вакцинации для профилатики нодулярного дерматита КРС прививают животных с 3х месячного возраста. Ревакцинацию животных проводят через каждые 6 месяцев. В неблагополучном пункте и хозяйствах угрожаемой зоны вакцинируют животных всех возрастных групп, не имеющих признаков заболевания нодулярным дерматитом, не зависимо от срока предыдущей вакцинации. При этом молодняк в возрасте до 6 месяцев прививают двукратно с интервалом 14 суток. Через 6 месяцев молодняк и взрослых животных ревакцинируют. Вирусвакцину вводят КРС подкожно в область средней трети шеи, с соблюдением правил асептики, в дозе 1 см3. Перед применением сухую вирусвакцину, соблюдая правила асептики, растворяют охлажденным до 4 °C физиологическим раствором. Для чего во флакон, содержащий 5 прививных доз вирусвакцины, при помощи шприца вносят 2 см3, а во флакон, содержащий 10, 20 или 50 прививных доз –4 см3 физиологического раствора и тщательно встряхивают до полного ресуспендирования. После ресуспендирования вирусвакцину объединяют с 3 см3 (для получения 5 прививных доз), 6 см3 (для получения 10 прививных доз), 16 см3 (для получения 20 прививных доз), 46 см3 (для получения 50 прививных доз) стерильного физиологического раствора и тщательно встряхивают.

Вирусвакцина вызывает формирование иммунного ответа у привитых овец против оспы и заразного узелкового дерматита (нодулярного дерматита) КРС через 5 суток после однократного применения, продолжительностью не менее 12 месяцев. Вакцина безвредна, лечебными свойствами не обладает.

Условия хранения

Вакцину хранят и транспортируют в сухом темном месте при температуре от 2 °C до 8 °C. Срок годности вакцины 24 месяца с даты выпуска при соблюдении условий хранения и транспортирования. По истечении срока годности вирусвакцина к применению не пригодна.

источник

ягнятам весом до 15 кг . . 10

овцам » от 15 до 25 кг . . 10—15

Сыворотку вводят подкожно, на внутренней поверхности бедра.

источник

Вакцина содержит вируссодержащий материал аттенуированного штамма Sheep capripoxvirus ВНИИЗЖ с титром биологической активности 10 5,0 -10 6,0 ТЦД 50 /мл и стабилизатор в соотношение 80-90/10-20. Штамм ВНИИЗЖ адаптирован к перевиваемой культуре клеток гонад Capra hircus L. В качестве стабилизатора затора используют защитную среду, включающую 3% пептона, 5% сахарозы и 1% желатина. Полученная вакцина представляет гомогенную массу желтовато-белого цвета без посторонней примеси. Вакцину вводят животным однократно в дозе 1 см 3 подкожно. Продолжительность иммунитета 12 месяцев. Технический результат от использования изобретения заключается в обеспечении высокой иммуногенной активности, безвредности, ареактогенности для овец и низкой себестоимости. 4 табл.

Изобретение относится к ветеринарной вирусологии и биотехнологии, представляет собой лиофилизированную вирусвакцину из аттенуированного штамма вируса оспы овец, выращенного на перевиваемой культуре клеток гонад козы, и может быть использовано для профилактической иммунизации овец.

Оспа овец — контагиозная вирусная болезнь, характеризующаяся интоксикацией организма, лихорадкой, папулезно-пустулезными поражениями кожи и слизистых оболочек. Она наносит овцеводству огромный экономический ущерб, слагающийся из гибели и вынужденного убоя больных животных, снижения продуктивности, затрат на проведение ветеринарно-санитарных и охранно-карантинных мероприятий. К оспе овец восприимчивы домашние козы, а также дикие животные — сайгаки и козероги, служащие источником инфекции и переносчиками возбудителя. Оспа овец внесена в список наиболее опасных (конвенционных) болезней сельскохозяйственных животных. Она широко распространена во многих странах Азии, Африки и Ближнего Востока. В СССР ее эпизодически регистрировали в южных пограничных регионах.

В нашей стране для специфической профилактики в течение многих лет использовали инактивированную ГОА-формолвакцину, приготовленную из суспензии органов и тканей больных оспой овец (Лихачев Н.В. Ветеринария, 1945, N 2).

Наряду с положительными качествами она имеет ряд недостатков: трудоемка в приготовлении, для получения сырья требуются вирулентный вирус и овцы высокочувствительных пород; иммунитет у животных формируется медленно сроком на 5,5 месяцев, поэтому необходима двукратная иммунизация их в течение года.

В связи с этим предпринимались попытки создать более экономичные, безопасные и эффективные живые вакцины против оспы овец из аттенуированных штаммов. В последние десятилетия предпочтение отдавали культуральным вирусвакцинам.

По сообщениям зарубежных авторов получено несколько аттенуированных культуральных вариантов вируса оспы, отличающихся реактогенностью и продолжительностью создаваемого у овец иммунитета, однако большинство из них изучено лишь в лабораторных опытах (Jassim F.A. et al. Indian Vet. J., 1981, 58, 10; Martin W.B. et al. Res. Vet. Sci., 1973, 14; Mateva-Penkova V. et al. Bull. Off. Int. Epiz., 1974, 81; Ramisse J. et al. Rev. Elev. Med. Vet. Pays trop. , 1978, 31, 1; Pamyar H. et al. Bull. Off. Int. Epiz., 1974, 81; Soman J.P. et al. Indian J. Anim. Sci., 1979, 49, 8).

Известно использование в ряде стран вирусвакцины из аттенуированного штамма RM/65, но она малоэффективна против некоторых местных полевых изолятов вируса оспы в Индии и Марокко (Fassi-Feliri M. et al. Ann. Rech. Vet., 1984, 15, 1; Sharma P.C. et al. Indian J. Anim. Sci., 1987, 57, 9; Singh F. P. et al. J. Anim. Sci., 1984, 54, 7). Поэтому были разработаны аттенуированные варианты вируса оспы овец из местных эпизоотических штаммов (Das S.K. et al. Indian J. Exp. Biol. 1986, 24, 6; Kalra S. K. et al. Indian J. Anim. Sci., 1984, 54, 5).

В нашей стране получили культуральную вирусвакцину против оспы овец из вируса, адаптированного к культуре клеток почки крольчат, и проверили ее в производственных условиях (Жидкова Л.А. и соавт. Тез. докл. IV Всес. вет. вирусол. конф., 1976, 2; Лихачев Н.В. и соавт. Докл. ВАСХНИЛ, 1972, II; Лихачев Н.В. и соавт. Науч.отчет ВГНКИ, 1977; Лихачев Н.В. и соавт. Мат. к заседанию НТС МСХ СССР, 1978).

Указанная вакцина широкого практического применения не нашла по причине ее низкой иммуногенности.

Известен также штамм культивируемых клеток гонад Capra hircus L. — продуцент вирусов животных. Указанный штамм монослойных клеток получен из первичнотрипсинизированной ткани гонад 3-дневной козы путем последовательного пассирования на полусинтетических питательных средах, обладает стабильными морфологическими характеристиками и чувствительностью к заражению вирусами ящура A 22 -663, O 1 -194, Азия-1-48, болезни Гамборо, болезни Ауески и африканской чумы лошадей, репродуцирует их при культивировании в монослое в титрах 5,0 — 8,25 lg ТЦД 50 /мл, хранится в музее клеток ВНИИЗЖ и депонирован на 234 пассаже в монослое в ВСКК (СХЖ) РАСХН под N 45 (пат. РФ N 2061753; МПК 6 C 12 N 5/06, 7/00; 02.08.94 г.).

Наиболее близкой предлагаемому изобретению по совокупности существенных признаков является вакцина против оспы овей, включающая вируссодержащий материал аттенуированного штамма Variola ovina ВГНКИ (НИСХИ) N 77, репродуцированного в культуре клеток почки ягнят с титром биологической активности 10 5,0 — 10 6,0 ТЦД 50 /мл, и стабилизатор при следующем соотношении компонентов, мас.%:
Вируссодержащий материал — 40 — 60
Стабилизатор — 40 — 60
В качестве стабилизатора используют защитную среду, включающую 3% пептона и 5% сахарозы (Иванющенков В.Н. и соавт. Реактогенные и иммуногенные свойства вирусвакцины против оспы овец. Ветеринария, 1990, 7, 28 — 30).

Недостатки известной вакцины состоят в ее низкой иммуногенной активности, реактогенности и трудностях, обусловленных получением сырья в виде почек ягнят. Почки телят можно получить только после окотной кампании.

В задачу создания изобретения входила разработка вакцины против оспы овец аттенуированного штамма вируса, адаптированного к перевиваемой культуре клеток гонад козленка (Capra hircus L.). Технический результат от использования изобретения заключается в обеспечении высокой иммуногенной активности, безвредности, ареактогенности для овец и низкой себестоимости.

Указанный технический результат достигнут созданием изобретения, охарактеризованного следующей совокупностью признаков:
1) вакцина против оспы овец;
2) вируссодержащий материал аттенуированного штамма Sheep capripoxvirus ВНИИЗЖ, репродуцированного в перевиваемой культуре клеток гонад Capra hircus L. , с титром биологической активности 10 5,0 — 10 6,0 ТЦД 50 /мл в концентрации 80 — 90%;
3) стабилизатор в концентрации 10 — 20%.

В качестве стабилизатора используют защитную среду, включающую 3% пептона, 5% сахарозы и 1% желатина.

Предлагаемое изобретение включает совокупность существенных признаков, обеспечивающих получение технического результата во всех случаях, на которые испрашивается правовая охрана:
1) вакцина против оспы овец;
2) вируссодержащий материал аттенуированного штамма Sheep capripoxvirus ВНИИЗЖ, репродуцированного в перевиваемой культуре клеток гонад Capra hircus L. , с титром биологической активности 10 5,0 — 10 6,0 ТДЦ 50 /мл в концентрации 80-90%;
3) стабилизатор в концентрации 10-20%.

Признаками изобретения, характеризующими предлагаемую вакцину и совпадающими с признаками прототипа, в том числе родовое понятие, отражающее назначение, являются:
1) вакцина против оспы овец;
2) вируссодержащий материал аттенуированного штамма вируса оспы овей, репродуцированного в культуре клеток, с титром биологической активности 10 5,0 — 10 6,0 ТДЦ 50 /мл;
3) стабилизатор.

По сравнению с прототипом существенными отличительными признаками изобретения являются использование в качестве вируссодержащего материала аттенуированного штамма Sheep capripoxvirus ВНИИЗЖ, репродуцированного в перевиваемой культуре клеток гонад Capra hircus L. По сравнению с вирусвакциной-прототипом вирусвакцина на основе штамма ВНИИЗЖ обладает более высокой иммуногенной активностью, является ареактогенной и безвредной для овец, более дешевой по себестоимости. Перевиваемая линия клеток исключает необходимость убоя животных для получения почек и позволяет в любое время года получить необходимое количество вирусного сырья. Экономия средств включает также стоимость убоя животных.

Аттенуированный штамм Sheep capripoxvirus ВНИИЗЖ, используемый для изготовления вакцины против оспы овец, депонирован 27.06.96 г. в коллекции вирусов Всероссийского государственного научно-исследовательского института контроля, стандартизации и сертификации ветеринарных препаратов (ВГНКИ), имеет регистрационный шифр «ВНИИЗЖ». Местом хранения штамма определена коллекция микроорганизмов Всероссийского научно-исследовательского института защиты животных (600900, Владимир, п/о Юрьевец).

Штамм вируса оспы ВНИИЗЖ получен путем адаптации исходного вируса оспы овец ВГНКИ (НИСХИ) N 77 к перевиваемой культуре клеток гонад Capra hircus L.

Проведенный заявителем анализ уровня техники, включающий поиск по патентам и научно-техническим источником информации, и выявление источников, содержащих сведения об аналогах заявленного изобретения, позволили установить, что заявитель не обнаружил источник, характеризующийся признаками, тождественными (идентичными) всем существенным признакам заявленного изобретения. Определение из перечня выявленных аналогов прототипа, как наиболее близкого по совокупности признаков аналога, позволило установить совокупность существенных по отношению к усматриваемому заявителем техническому результату отличительных признаков в заявляемой вакцине, изложенных в формуле изобретения. Следовательно, заявляемое изобретение соответствует условию патентоспособности «новизна».

Для проверки соответствия предлагаемого способа условию патентоспособности «изобретательский уровень» проведен дополнительный поиск известных решений для выявления признаков, включенных в отличительную часть формулы предлагаемого изобретения. Результаты поиска показали, что предлагаемая вакцина не вытекает для специалиста явным образом из известного уровня техники, изложенного в соответствующем разделе описания (не выявлены решения, имеющие признаки, совпадающие с отличительными признаками заявляемого изобретения), а также не выявлено влияние предусматриваемых существенными признаками предлагаемого изобретения преобразований для достижения технического результата, изложенных в п. 19.5.3. Правил составления, подачи и рассмотрения заявки на выдачу патента на изобретение. Следовательно, предлагаемая вакцина соответствует условию патентоспособности «изобретательский уровень».

Пример 1. Вирус адаптирован в 5 последовательных пассажах к перевиваемой линии культуры клеток гонад козленка. В первом пассаже цитопатогенное действие на площади 70-80% монослоя клеток отмечали через 5-6 дней. С увеличением количества пассажей выявлялось сокращение сроков патогенного действия вируса до 2-3 дней. Титр вируса достигал 10 5,0 — 10 6,0 лог. Специфическое действие вируса характеризовалось образованием клеток со светопреломляющим эффектом по всей поверхности монослоя клеток.

Пример 2. Штамм вируса оспы овец ВНИИЗЖ характеризуется следующими признаками и свойствами.

Морфологические свойства
Вирус штамма обладает морфологическими признаками, характерными для возбудителя оспы овец.

Культуральные свойства
Штамм ВНИИЗЖ выращивается и поддерживается в перевиваемой культуре клеток гонад козленка. Вирус адаптируют к указанной культуре клеток путем проведения 3-5 пассажей. Цитопатогенное действие наступает через 48-96 часов на 18-100% поверхности монослоя заражения культуры клеток вирусом. При стационарном способе культивирования в культуре клеток гонад козленка вирус накапливается в титрах 10 5,0 — 10 6,0 ТЦД 50 /мл.

Антигенные свойства
При подкожном введении овцам вызывает образование вируснейтрализующих и комплементсвязывающих антител.

Безвредность
Штамм безвреден для овец при подкожном введении. Не передается контактным путем чувствительным животным. Для лабораторных животных (кроликов, морских свинок, мышей) не является патогенным. При введении вакцины в прививной дозе в разведении 1:25 кожной и температурной реакции не отмечается.

Реактогенность
Штамм ареактогенен для овец при подкожном введении. У овец может вызывать исчезающую через 5-7 дней местную реакцию в виде воспалительного отека размером 2х3 см при введении штамма в нативном виде по 5 мл подкожно в бесшерстный участок подмышечной области.

Иммуногенные свойства
При подкожном введении штамм в дозе 1000 ТЦД 50 создает стойкий иммунитет у привитых овец на 4-5 день после вакцинации продолжительностью 12 месяцев.

Реверсибельность и контагиозность
Штамм ВНИИЗЖ не восстанавливает вирулентных свойств после пяти последовательных пассажей на овцах (не реверсибелен) и не передается при совместном содержании привитых и интактных овец (не контагиозен).

Стабильность свойств при пассировании
Основные биологические свойства штамма стабильно сохраняются на протяжении 10 пассажей в перевиваемой культуре клеток гонад козленка (период наблюдения).

Сохраняемость
В нативном состоянии штамм вируса оспы овец ВНИИЗЖ не снижает своей активности в течение 3 месяцев при +4 o C, в лиофилизированном виде в присутствии 3% пептона, 5% сахарозы и 1% желатина его активность остается на исходном уровне при +4 o C и -20 o C в течение 2 лет (срок наблюдения). После восстановления из лиофилизированного состояния физиологическим раствором вирус не инактивируется при комнатной температуре в течение 24 часов, при -4 o C — 7 суток.

Пример 3. Изготовление вакцины для профилактики оспы овец на основе штамма ВНИИЗЖ.

Вирус выращивают в перевиваемой монослойной культуре клеток гонад козленка (ГК). Для этого штамм клеток ГК, хранящийся в жидком азоте, размораживают путем оттаивания в водяной бане при 37-38 o C и проводят 1-2 пассажа для восстановления исходной скорости роста в монослое. Из культурального сосуда с монослоем клеток удаляют среду культивирования. Монослой клеток дважды обрабатывают диспергирующим раствором, содержащим 0,25% раствор трипсина и 0,02% раствор версена, взятых в соотношении 1:3, с добавлением 0,5% декстрозы, до начала отслаивания клеток. Диспергирующий раствор сливают, вносят среду Игла с 10% сыворотки КРС и 0,03% глутамина и суспензию разливают в культуральные сосуды. Культуру клеток инкубируют при 37 o C в течение 48-72 часов до момента формирования плотного монослоя. Для пересева выбирают сосуды с культурой клеток ГК в виде сформировавшегося равномерного монослоя. Для выращивания вируса используют сосуды емкостью 200 см 3 с выросшим плотным монослоем клеток ГК. В сосуды вносят 5 см 3 расплодки вируса ВНИИЗЖ производственной серии. После этого сосуда ставят на 1 час в термостат при 37 o C, вносят в них поддерживающую питательную среду Игла по 100 или 200 см 3 в зависимости от объема сосудов и инкубируют при 37 o C. Для контроля оставляют 2-3 сосуда с неинфицированной культурой клеток, в которые вносят поддерживающую среду и инкубируют в тех же условиях, что и инфицированную культуру клеток. Смену среды осуществляют через каждые 2 суток после инфицирования клеток. На 3-5 сутки после заражения клеток при наличии цитопатогенных изменений на 80-90% и более площади монослоя содержимое сосудов подвергают замораживанию при -20 o C и оттаиванию при 25 o C, энергично встряхивая для отделения монослоя. Из каждого сосуда берут пробу по 3 мл для определения загрязнения и цитопатической активности.

Полученный материал хранят при 40 o C + 2 o C не более 30 суток до получения результатов контроля. Содержимое сосудов без бактериального заражения оттаивают, сливают в одну емкость, тщательно перемешивают и из общей массы берут 3 пробы для определения биологической активности. Вируссодержащую суспензию хранят в замороженном состоянии при -20 o C не более 6 мес. При активности вируса не ниже 10 4,5 ТЦД 50 /мл стерильный вируссодержащий материал используют для изготовления производственной серии вирусвакцины. Для этого его оттаивают при 25 o C, добавляют стабилизатор, содержащий 3% пептона, 5% сахарозы и 1% желатина, тщательно перемешивают, разливают в стерильные флаконы по 4,0 см 3 и помещают в холодильники при +4 o C. Лиофилизацию вирусного материала производят при 50 o C. Величину вакуума в камере сублимационного аппарата устанавливают в пределах 4-7 Па. Конечная температура полок аппарата в процессе высушивания 30-40 o C. Высушивание при подогреве полок до указанной температуры осуществляют до того момента, когда температура материала достигнет 8-10 o C, после чего обогрев переводят на температуру 28-30 o C. Высушивание при температуре материала 24-26 o C проводят в течение 5-6 часов. Конечная температура материала не должна превышать 28-30 o C. Ампулы с высушенной вакциной запаивают на карусельно-коллекторном аппарате при остаточном давлении 25-30 Па. Полученная вакцина представляет гомогенную массу желтовато-белого цвета без посторонней примеси. Остаточная влажность препарата составляет 3-6%. Полученная вакцина против оспы овец имеет компонентный состав ,%, представленный в табл. 1.

Полученная вакцина против оспы овец при титровании в культуре клеток ГК имеет титр 4,5-5,5 lgТЦД 50 /мл.

Пример 4. Проведены испытания вакцины, содержащей, мас.%:
Вируссодержащий материал аттенуированного штамма оспы овец ВНИИЗЖ, репродуцированного в перевиваемой культуре клеток ГК, с титром биологической активности 10 5,0 -10 6,0 ТЦД 50 /мл — 80
Стабилизатор — 20
Определение иммуногенной активности вакцины проводят на 4 овцах. В качестве контроля используют 2 неиммуногенные овцы. Вакцину вводят животным однократно в дозе до 1 см 3 подкожно в область бесшерстного участка подмышечной области. Через 12 дней всех вакцинированных и контрольных животных заражают эпизоотическим вирусом оспы овец штамм «Афганский» при 500 ИД 50 /0,5 см 3 внутрикожно в область внутренней поверхности хвоста. Вакцинированные овцы остались устойчивыми к заражению. Контрольные животные заболели оспой в генерализованной форме.

Пример 5. Проведены испытания вакцины против оспы овец, имеющей следующий компонентный состав, мас.%:
Вируссодержащий материал аттенуированного штамма оспы овец ВНИИЗЖ, репродуцированного в перевиваемой культуре клеток ГК, с титром биологической активности 10 5,0 — 10 6,0 ТЦД 50 /мл — 85
Стабилизатор — 15
Определение иммуногенной активности вакцины проводят на 4 овцах. В качестве контроля используют 2 неиммуногенные овцы. Вакцину вводят животным однократно в дозе по 1 см 3 подкожно в область бесшерстного участка подмышечной области. Через 12 дней всех вакцинированных и контрольных животных заряжают эпизоотическим вирусом оспы овец штамм «Афганский» по 500 ИД 50 /0,5 см 3 внутрикожно в область внутренней поверхности хвоста. Вакцинированные овцы остались устойчивыми к заряжению. Контрольные животные заболели оспой в генерализованной форме.

Пример 6. Проведены испытания вакцины против оспы овец, имеющей следующий компонентный состав, мас.%:
Вируссодержащий материал аттенуированного штамма оспы овец ВНИИЗЖ, репродуцированного в перевиваемой культуре клеток ГК, с титром биологической активности 10 5,0 — 10 6,0 ТЦД 50 /мл — 90
Стабилизатор — 10
Определение иммуногенной активности вакцины проводят на 4 овцах. В качестве контроля используют 2 неиммуногенные овцы. Вакцину вводят животным однократно в дозе по 1 см 3 подкожно в область бесшерстного участка подмышечной области. Через 12 дней всех вакцинированных и контрольных животных заражают эпизоотическим вирусом оспы овец штамм «Афганский» по 500 ИД 50 /0,5 см 3 внутрикожно в область внутренней поверхности хвоста. Вакцинированные овцы остались устойчивыми к заражению. Контрольные животные заболели оспой в генерализованной форме.

Пример 7. Изучение безвредности вакцины против оспы овец из штамма ВНИИЗЖ.

Для определения безвредности используют 2 овец 1-2-летнего возраста массой не менее 30 кг. Лиофилизированную вакцину разводят физиологическим раствором до исходного объема и вводят каждому животному подкожно в область бесшерстного участка подмышечной области по 5,0 см 3 . Через 3-4 суток на месте введения вакцины образуется отечность, исчезающая через 5-7 дней. Температура тела остается в пределах нормы.

Пример 8. Изучение иммуногенной активности вакцины против оспы овец из штамма ВНИИЗЖ.

Определение иммуногенной активности вакцины проводят на 4 овцах. В качестве контроля используют 2 неиммуногенные овцы. Для этого лиофилизированную вакцину разводят физиологическим раствором в соотношении 1:25 и вводят по 1 см 3 подкожно в область бесшерстного участка подмышечной области каждому животному. Через 12 дней всех вакцинированных и контрольных животных заражают эпизоотическим вирусом оспы овец штамм «Афганский» по 500 ИД 50 /0,5 см 3 внутрикожно в область внутренней поверхности хвоста. Вакцинированные овцы остались устойчивыми к заражению. Контрольные животные заболели оспой в генерализованной форме. Результаты исследований приведены в табл. 2.

Пример 9. Изучение эффективности вакцины против оспы овей из штамма ВНИИЗЖ при иммунизации различными дозами.

Определение иммуногенной активности вакцины проводят на 8 овцах. Вакцину разводят физиологическим раствором до исходного объема, а затем из него готовят разведения таким образом, чтобы в 1 см 3 содержалось вируса 1200 и 300 ТЦД 50 /1 см 3 . Каждую указанную дозу вводят 4 животным подкожно в область бесшерстного участка подмышечной области. Через 12 дней всех вакцинированных и 2 контрольных неиммунных овец заражают вирулентным вирусом оспы овец штамм «Афганский» внутрикожно в область внутренней поверхности хвоста по 500-1000 ИД 50 /см 3 . Вакцинированные овцы остались устойчивыми к заражению. Контрольные овцы заболели оспой в генерализованной форме. Результаты исследований приведены в табл. 3.

Пример 10. Изучение эффективности вакцины с титром вируса 10 5,5 ТЦД 50 /1,0 см 3 .

Эффективность вакцины оценивают по устойчивости овец, иммунизированных различными дозами вакцины. Для этого вакцину разводят физиологическим раствором до исходного объема, из которого готовят разведения таким образом, чтобы в прививной дозе 1,0 см 3 содержалось 40000, 10000, 1000 и 100 ТЦД 50 /см 3 . С этой целью 12 овец размещают в 4 группы и каждую группу прививают вышеуказанными дозами подкожно в бесшерстный участок подмышечной области. Через 12 дней всех вакцинированных и 2 контрольных овец заражают вирулентным вирусом оспы овец штамм «Афганский» внутрикожно в область внутренней поверхности хвоста по 500-1000 ИД 50 /см 3 . Все вакцинированные овцы оказались устойчивыми к заражению. Контрольные животные заболели оспой в генерализованной форме (см. табл. 4).

Таким образом, изложенные сведения свидетельствуют о выполнении при использовании предлагаемой вакцины следующей совокупности условий:
вакцина против оспы овец, воплощающая предлагаемое изобретение, предназначена для использования в сельском хозяйстве, а именно в ветеринарии;
для предлагаемой вакцины в том виде, как она охарактеризована в независимом пункте формулы изобретения, подтверждена возможность ее осуществления с помощью описанных в заявке или известных до даты приоритета средств и методов;
вакцина, полученная в соответствии с предлагаемым изобретением, обладает высокой иммуногенной активностью, безвредностью, аректогенностью и низкой себестоимостью.

Следовательно, предлагаемое изобретение соответствует условию патентоспособности «промышленная применимость».

Источники информации
1. Лихачев Н.В. Ветеринария, 1945, 2.

2. Jassim F.A. et al. Indian. Vet.J., 1981, 58, 10.

3. Martin W.B. et al. Res. Vet. Sci., 1973. 14.

4. Matewa-Penkova V. et al. Bull. Off. Int. Epiz., 1974, 81.

5. Ramisse J. et al. Rev. Elev. Med. Vet. Pays trop., 1978, 31, 1.

6. Ramyar H. et.al. Bull. Off. Int. Epiz., 1974, 81.

7. Soman J.P. et. al. Indian J. Anim. Sci., 1979, 49, 8.

8. Fassi-Fehri M., et. al. Ann. Rech. Vet., 1984, 15, 1.

9. Sharma P.C. et. al. Indian J. Anim. Sci., 1987, 57, 9.

10. Singh J.P. et. al. Anim Sci., 1984. 54, 7.

11. Das S.K. et. al. Indian J. Exp. Biol., 1986, 24, 6.

12. Kabra S.K. Anim. Sci., 1984, 54, 7.

13. Жидкова Л.А. и соавт. Тез. докл. IV Всес.вет.вирусол. конф., 1976, 2.

14. Лихачев Н.В. и соавт. Докл. ВАСХНИЛ, 1972, 11.

15. Лихачев Н.В. и соавт. Научн.отчеты ВГНКИ, 1977.

16. Лихачев Н.В. и соват. Материалы к заданию НТС МСХ СССР, 1978.

17. Патент РФ N 2061753, МПК 6 C 12 N 5/06, 7/00; 02.08.94 г.

18. Иванющенков В.Н. и соавт. Реактогенные с иммуногенные свойства вирусвакцины против оспы овец. /Ветеринария, 1990, 7, 28 — 30 (прототип).

19. Авт. свид. СССР N 1356460, МПК 4 C 12 N 7/00, 05.06.85.

20. Авт. свид. СССР N 1614201, МПК 5 A 61 K 39/275,24.03.89.

21. Иванющенков В.Н. и соавт. Биологические свойства вакцинного штамма НИСХИ вируса оспы овец. /Ветеринария, 1990, 8.22 — 26.

22. Черняк Е.П. и соавт. Биологические свойства производственных штаммов вируса оспы овец. /Ветеринария, 1991, 3, 24 — 26.

23. Курченко Ф.П. и соавт. Эффективность сухой культуральной вирусвакцины из штамма НИСХИ против оспы овец. /Ветеринария, 1991, 10, 21 — 24.

24. Иванющенков В.Н. и соавт. Реактогенные и иммуногенные свойства вирусвакцины против оспы овец из штамма НИСХИ. Вирусные и микробные болезни животных. Сб. науч. трудов. Владимир, 1995, 186 — 191.

25. Иванющенков В.Н. и соавт. Биологические свойства вакцинного штамма НИСХИ вируса оспы овец. Вирусные и микробные болезни животных. Сб. науч. трудов. Владимир, 1995, 254 — 259.

Вакцина против оспы овец, включающая вируссодержащий материал аттенуированного штамма оспы овец и стабилизатор, отличающаяся тем, что в качестве вируссодержащего материала вакцина содержит штамм Sheep capripoxvirus ВНИИЗЖ, репродуцированный в перевиваемой культуре клеток гонад Capra hircus L., с титром биологической активности 10 5,0 — 10 6,0 ТЦД 50 /мл при следующем соотношении компонентов, мас.%:
Вируссодержащий материал штамма Sheep capripoxvirus ВНИИЗЖ, репродуцированного в перевиваемой культуре клеток гонад Capra hircus L., с титром биологической активности 10 5,0 — 10 6,0 ТЦД 50 /мл — 80 — 90
Стабилизатор — 10 — 20п

источник

Изобретение относится к ветеринарной биотехнологии и представляет лиофилизированную вирусвакцину из аттенуированного штамма вируса оспы овец. Целью изобретения является повышение иммуногенной активности и упрощение изготовления. Для этого вакцина против оспы овец содержит вирусный материал аттенуированного штамма Sheep capripoxvirus ВГНКИ 6, репродукцированный в подкожной N клетчатке овец, с титром биологической активности 4,0-6,5 lg ИД _50/0,2мл и стабилизатор при следующем соотношении компонентов, %: Вирусный материал штамма вируса оспы овец с титром 4,0-6,51 lg ИД_50/0,2мл 40-60 Стабилизатор 40-60 В качестве стабилизатора используют обрат молока или смесь сахарозы 7,5%, желатина 1,5% и агара 0,2% в дистиллированной воде. Аттенуированный штамм Sheep capripoxvirus, используемый для изготовления вакцины против оспы овец, депонирован в коллекции вирусов Всесоюзного государственного научно-контрольного института ветеринарных препаратов, имеет регистрационный N 6 и обозначен С 113/86. Штамм вируса оспы овец ВГНКИ N 6 получен путем многократного пассирования в подкожной клетчатке овец исходного вирулентного штамма вируса, выделенного от больной оспой овцы. П р и м е р 1. Штамм вируса оспы овец ВГНКИ N 6 характеризуется следующими признаками и свойствами: хорошо размножается в коже и подкожной клетчатке овец; в культуре клеток не размножается. Безвреден для овец при подкожном, внутрикожном, внутримышечном и интраназальном введении, при контакте не передается от вакцинированных к чувствительным животным, обладает иммуногенными свойствами при указанных способах введения. Штамм не обладает патогенными свойствами для лабораторных животных (кроликов, морских свинок, белых мышей). Штамм ВГНКИ N 6 при внутрикожном и подкожном введении овцам вызывает образование небольшой пустулы в месте введения, при внутримышечном, интраназальном и внутривенном заражении клинических проявлений оспы у животных не вызывает. Штамм стерилен в отношении грибковой и микробной микрофлоры, имеет высокую инфекционную активность 10 6,5 ИД_50/0,2мл. Штамм ВГНКИ N 6 способен вызывать местную реакцию у овец в виде папул и пустул размером до 2 см при введении проколом ушной раковины у четырех из шести привитых, восприимчивых к оспе овец. При появлении кожной реакции на внутрикожное введение вируса иммунитет формируется у всех привитых овец. При внутримышечном введении иммунитет формируется у всех овец, привитых в дозах 1,5; 15 и 150 ИД₅₀. П р и м е р 2. Изготовление вакцины для профилактики оспы овец на основе штамма вируса оспы овец ВГНКИ N 6. Вирус выращивают в подкожной клетчатке высокочувствительных к оспе овец мериносовых пород 18-месячного возраста по методу Борреля. Для заражения овец используют матриксный штамм ВГНКИ N 6 вируса оспы овец, полученный в результате двукратного подкожного пассирования вируса предыдущего внутрикожного пассажа на овце, вирусный материал вводят подкожно в объеме 1 л. В подкожной клетчатке зараженных таким образом овец происходит размножение вируса, при этом температура животных постепенно повышается. На 7-10 сутки после заражения, в первый день начала снижения температуры, животных обескровливают и проводят съем отечной ткани вместе с экссудатом. От одной овцы получают в среднем 1 кг вируссодержащей ткани. Полученную вируссодержащую ткань гомогенизируют, разводят стерильным физиологическим раствором в соотношении 1:1, фильтруют и используют для изготовления вакцины против оспы овец. Для этого фильтрат, содержащий вирус оспы овец, штамм ВГНКИ N 6 с титром вируса 4,0-6,5 lg ИД_50/0,2мл, смешивают со стабилизатором, в качестве которого применяют обрат молока или желатиносахарозный стабилизатор. Полученная вакцина против оспы имеет следующий компонентный состав, %: П р и м е р 3. Изучение эффективности вакцины против оспы овец из штамма ВГНКИ N 6. 24 овцы в возрасте 6 мес иммунизируют вакциной против оспы овец из штамма ВГНКИ N 6, содержащей 60% вирусного фильтрата штамма с титром 4,0 lg ИД _50/0,2мл и 40% обрата молока. Препарат вводят однократно в дозе 100 ИД_50/0,015мл внутрикожно в объеме 0,015 мл. Через 7 дней у всех животных в месте введения вакцины образовывается папула, переходящая к 10 дню в пустулу и к 15 дню — в корку. Через 24 дня в месте прививки наблюдают небольшой рубец. Эффективность вакцины оценивают по устойчивости вакцинированных животных к контрольному заражению. Для этого через 15 дней, 6, 8, 12 и 18 мес овец заражают вирулентным штаммом «Монгольский» вируса оспы овец. Через 15 дней и 6 мес вирус вводят в подхвостовую складку в дозе 10000 ИД_50/0,02мл, а через 8, 12 и 18 мес иммунизированных животных заражают дозами вируса 10 -1 — 10 -6 ИД_50/0,2мл. Наблюдения показывают, что во всех случаях вакцинированные овцы устойчивы к контрольному заражению вирусом в дозах, равных 200, 10000 и от 10 4,5 до 10 6,5 ИД₅₀. Контрольные овцы заболевают с проявлением характерной оспенной реакции. П р и м е р 4. Проведены испытания вакцины, содержащей, %: Вируссодержащий материал штамма вируса оспы овец ВГНКИ N 6 с
титром вируса 5,0 lg ИД_50/0,2мл 50
Желатиносахарозный стабилизатор 50
Вакцину вводят внутрикожно, однократно в дозе 100 ИД_50/0,15_мл десяти овцам. У всех вакцинированных животных в месте прививки формируется папула, переходящая в пустулу и корку. Все привитые овцы устойчивы к последующему контрольному заражению 10000 ИД_50/0,2мл вирулентного вируса оспы овец. П р и м е р 5. Проведены испытания вакцины против оспы овец, имеющей следующий компонентный состав, %:
Вируссодержащий
материал штамма
ВГНКИ N 6 с титром
инфекционной
активности 6,0 lg ИД_50/0,2мл 40
Сахарозо-желатиновый стабилизатор 60
Препарат вводят, однократно, внутрикожно в дозе 100 ИД _50/0,015_мл 10 овцам. У 100% вакцинированных животных в месте прививки формируется папула, переходящая в пустулу и корку. Все овцы устойчивы к контрольному заражению 10000 ИД_50/0,2мл внутривирулентного вируса. П р и м е р 6. Проведены испытания вакцины против оспы овец, имеющей следующий компонентный состав, %:
Вируссодержащий
материал штамма
ВГНКИ N 6 с титром
инфекционной
активности 6,5 lg ИД_50/0,2мл 40
Стабилизатор — обрат молока 60
Препарат вводят однократно внутрикожно в дозе 100 ИД_50/0,015_мл 10 овцам. У всех вакцинированных животных в месте прививки формируется папула, переходящая в пустулу и корку. Все овцы устойчивы к контрольному заражению 10000 ИД_50/0,2_мл вирулентного вируса. П р и м е р 7. Для проверки иммуногенности вакцины против оспы овец из штамма ВГНКИ N 6 изготовленный по примеру 3 препарат вводят животным внутримышечно в разных дозах. Через 15 дней после вакцинации подопытных овец заражают введением 1000 ИД_50/0,2_мл вирулентного штамма вируса оспы овец и еще раз через 10 дней определяют устойчивость животных к заражению. Данные приведены в табл. 1. Результаты проверки показывают, что овцы, вакцинированные внутримышечным введением вакцины в дозе 1,5-1500 ИД_50/мл, устойчивы к контрольному заражению вирулентным штаммом, что свидетельствует о высокой иммуногенной активности предложенной вакцины. Рассчитанная по методу Рида и Менча минимальная иммунизирующая доза вакцины составляет 3,1 ИД_50/0,015_мл при внутрикожной иммунизации овец и 1,5 ИД_50/мл при внутримышечной. П р и м е р 8. Для испытания вакцины против оспы овец из штамма ВГНКИ N 6 на безвредность опытным животным вводят препарат, изготовленный по примеру 3 внутрикожно, внутримышечно, интраназально, подкожно и внутривенно, после чего за ними проводят наблюдение в течение 27 дней. О результатах испытания судят по местной реакции на 10 день (пик оспенной реакции) введения вакцины и по способности ее вызывать генерализованную форму оспы в течение всего периода наблюдения. Данные приведены в табл. 2. При всех испытанных способах введения вакцина в тысячекратной прививной дозе не вызывает генерализованной формы оспенного процесса, а при внутривенном, интраназальном и внутримышечном введении не вызывает видимой оспенной реакции, но создает иммунитет, т.е. вакцина безвредна для овец.

ВАКЦИНА ПРОТИВ ОСПЫ ОВЕЦ, включающая вируссодержащий материал аттенуированного штамма вируса оспы и стабилизатор, отличающаяся тем, что, с целью повышения иммуногенной активности и упрощения изготовления, в качестве вируссодержащего материала вакцина содержит вирусный тканевой фильтрат штамма Sheep capripoxvirus ВГНКИ N 6 с биологической активностью lg 4,0 — 6,5 ИД_50/0,2_мл при следующем соотношении компонентов, об.%:
Вирусный тканевой фильтрат штамма Sheep capripoxvirus ВГНКИ N 6 с биологической активностью lg 4,0 — 6,5 ИД_50/0,2_мл — 40 — 60
Стабилизатор — 60 — 40

MM4A Досрочное прекращение действия патента Российской Федерации на изобретение из-за неуплаты в установленный срок пошлины за поддержание патента в силе

Дата прекращения действия патента: 25.03.2004

Извещение опубликовано: 10.12.2004 БИ: 34/2004

источник

Классы МПК:	A61K39/275 Poxviridae, например вирус оспы птиц C12N7/00 Вирусы, например бактериофаги; их композиции; приготовление или очистка их C12N5/00 Недифференцированные клетки человека, животных или растений, например, клеточные линии; ткани; культивирование или сохранение их; питательные среды для них C12N5/02 размножение одиночных клеток или клеток в суспензии; сохранение их; питательные среды для них
Автор(ы):	Гусев А.А. , Диев В.И. , Курченко Ф.П. , Иванющенков В.Н. , Соколов Л.Н. , Куляшбекова Ш.К. , Захаров В.М.
Патентообладатель(и):	Всероссийский научно-исследовательский институт защиты животных
Приоритеты: