Определение днк вирусного гепатита в

Исследования ДНК и ПЦР вируса гепатита В являются самыми чувствительными анализами, которые позволяют обнаружить в тканях печени молекулярные следы ДНК, идентифицирующие наличие вируса. Суть метода заключается в многократном копировании фрагмента ДНК, принадлежащего возбудителю болезни.

ПЦР гепатита типа В — это полимеразная цепная реакция внешнего химического реагента с исследуемым биологическим материалом, направленная на выявление молекул вирусного ДНК в крови и их количественных показателей на единицу объёма. Анализ назначается в следующих случаях:

• при возникновении признаков гепатита В у пациента;
• во время диагностических мероприятий при микст-гепатитах;
• для уточнения эффективности терапии.

Для ПЦР анализа делается забор венозной крови. Перед исследованием необходимо воздержаться от приёма пищи примерно 8 часов.

Нормальным результатом при выявлении ДНК у вируса считается показатель «не обнаружен». Он означает, что вирус в крови отсутствует или его содержание незначительное. Окончательный диагноз может выставить только специалист на основании комплексного биохимического и иммунологического анализа кровяной плазмы на гепатит типа B. Врач назначает курс терапии. Самолечение влечёт за собой слишком большой риск.

Непривычная утомляемость

• нарастающая усталость при небольших нагрузках;
• непривычная утомляемость;
• тяжесть в области правого подреберья;
• пониженный аппетит, тошнота;
• желтушность кожных покровов, склер глаз;
• светлый кал;
• тёмная моча;
• болезненные ощущения в суставах.

Инкубационный период, после которого начинают проявляться эти признаки, составляет от месяца до полугода. Это срок накопления клеток вируса в печёночном кровотоке. Когда их концентрация доходит до критической массы, вирус прорывает мембраны гепатоцитов и продолжает размножаться уже внутри клеток. В результате клетки печени гибнут, развивается цирроз, который, при отсутствии должных терапевтических мер, приводит пациента к летальному исходу. Своевременный анализ крови на ПЦР и ДНК гепатита B позволяет избежать негативных.

Показаниями к ПЦР являются:

• положительный тест на ДНК, подтверждающий диагноз — гепатит B;
• острый и хронический гепатит;
• микст-гепатиты;
• количественное определение вируса в кровяной сыворотке;
• разработка тактики эффективной терапии.

Подготовка к диагностике с помощью ПЦР определяется видом биоматериала. Так кровь и мочу сдают только в первой половине дня, натощак. Также берутся мазки и соскобы из урогенитальной области. Ограничением для женщин является только менструация. Для обоих полов ограничиваются половые контакты накануне исследований.

Результаты ПЦР можно будет считать достоверными только при правильной подготовке пациента к процедуре. Это исследование подразумевает соблюдение следующих условий:

• полный душевный комфорт, отсутствие всяких волнений. Для обеспечения этого анализ можно сдать даже дома. Нужно только вызвать к себе врача с соответствующим оборудованием;
• воздержание от пищи, алкоголя, курения, физической активности минимум за 8-12 часов перед анализом, иначе данные исследования будут искажены;
• 15-20 минут полной релаксации перед забором крови;
• прекращение приёма лекарственных препаратов (если это не представляется возможным, лаборатория должна быть предупреждена);
• детям в возрасте до пяти лет в течение получаса перед анализом необходимо давать пить кипячёную воду маленькими порциями.

В основе анализа ПЦР лежат принципы, которыми пользуется молекулярная биология. Они заключаются в использовании специальных ферментов, расщепляющих и копирующих участки ДНК и РНК возбудителя инфекции, который обнаружен в крови. После проведения этой операции, полученные образцы идентифицируются по базе данных, имеющихся в лаборатории. Одновременно выявляется вид инфекции и концентрация в крови возбудителя.

Для проведения исследования используется амплификатор — термостат, способный нагревать и охлаждать пробирки с биоматериалом. Это необходимо для активации репликационных процессов. От точности температурных параметров зависит достоверность анализа.

Позитивным результатом для пациента является лабораторное заключение «не обнаружено». Оно означает отсутствие в крови ДНК гепатита B. В цифровом выражении это примерно 120 МЕ/мл, или 200 копий на такую же единицу объёма крови. Данное значение — норма. Требованием к биологическому материалу является то, что он не должен быть загрязнён.

Расшифровка других итогов анализа позволяет поставить следующие диагнозы:

• Концентрация в крови ДНК гепатита B более 200 копий, но ниже критического уровня. Выраженная патология отсутствует.
• Виремия в умеренной форме, доходящей до 500 копий на мл. Выбор лечения зависит от показателей биопсии печени и степени ухудшения её функций.
• Повышенная концентрация вируса (более 500 копий/мл). Воспалительный процесс в активной фазе и требует интенсивной противовирусной терапии.
• Предельная вирусная нагрузка (свыше 800 копий на мл.). Терапевтические мероприятия разрабатываются исходя из состояния больного и целиком направлены на его максимально возможное улучшение.

Для пациента хорошим результатом является заключение «не обнаружено»

Определение количественных показателей содержания ДНК гепатита B при проведении ПЦР является основой для выбора лечебного курса. Через три или шесть месяцев анализы проводятся снова, чтобы проверить эффективность противовирусной терапии.

В методике ПЦР используется два подхода к определению ДНК, принадлежащего вирусу: качественный и количественный.

Качественный подход подтверждает или отрицает наличие гепатита B. ПЦР назначается по просьбе пациента, подозревающего, что он заражён HBV-инфекцией или в том случае, когда ранняя диагностика иным способом не даёт однозначных результатов.

Если вирус гепатита B удаётся выявить не позже, чем через две недели после его проникновения в организм, положительный прогноз при лечении наиболее вероятен. В дальнейшем болезнь начнёт прогрессировать. Приблизительно через два месяца она перейдёт в хроническую фазу. Полное излечение в таком случае станет невозможным.

Количественный подход в ПЦР применяется только при обнаружении вируса. Он оценивает:

• конкретную вирусную нагрузку на печень;
• интенсивность прогрессирования заболевания;
• устойчивость к препаратам противовирусной группы;
• результативность лечения.

Эти показатели имеют прямое практическое значение. Особенно количественный показатель ДНК. От концентрации вируса в кровотоке печени зависит прогноз в острой фазе гепатита B. Так низкая концентрация вирусных клеток почти полностью исключает переход острого гепатита в хронический. Такие больные не представляют опасности для окружающих. Высокая вирусная нагрузка способствует хронизации патологического процесса и возможности заражения гепатитом людей, контактирующих с больным.

Существует также связь между концентрацией в крови генов вируса и цирротическим перерождением печени, и возникновением рака её паренхимы.

Анализы ПЦР помогают врачу обнаружить носители вируса

Результативность терапии противовирусными препаратами определяется по степени снижения концентрации ДНК гепатита B в печёночном кровотоке. Достаточным результатом считается уменьшение вирусной нагрузки в 1-2 раза при интенсивном лечении в течение от трёх месяцев до полугода. Более низкие показатели требуют изменения лечебного курса.

Прогноз развития патологии и назначения соответствующей терапии исходит из:

• количественного объёма ДНК печёночного вируса в кровяной сыворотке;
• сопутствующих биохимических показателей (например, уровня лейкоцитов в крови и содержания там билирубина);
• маркеров вирусной инфекции;
• результатов биопсии печени.

Анализы с помощью полимеразной цепной реакции помогают врачу:

• обнаружить носители вируса;
• прогнозировать процесс развития гепатита типа B;
• убедиться в переходе болезни в хроническую форму;
• мониторить активность вируса на всех фазах развития;
• выявить мутантные и скрытые штаммы гепатита B;
• оценить эффективность лечения вируса при выборе определённой тактики и изменить её в случае недостаточной успешности.

В отличие от других анализов, которые применяются для диагностики гепатита B, ПЦР обладает:

Анализ ПЦР обладает исключительной чувствительностью

1. Исключительной чувствительностью. Методика даёт возможность исследователю обнаружить возбудителя заболевания, даже если концентрация молекул его ДНК в крови минимальна. Это позволяет принять профилактические и лечебные меры на ранней стадии болезни, когда внешне она ещё не выражена никакими симптомами.
2. Широким охватом возможностей. ПЦР способен выявить не только возбудителя вирусного гепатита B, но и ряд других патологий.
3. Универсальностью подходов. Биоматериалом для исследований может быть кровь, слюна, клетки слизистых и кожных покровов.
4. Оперативностью. Заключение будет готово ровно через день после забора крови (сам результат анализа получают не позже чем через 7 часов).
5. Достоверностью. При соблюдении всех условий проведения ПЦР-методика никогда не показывает ложных данных.
6. Ценовой доступностью исследования. По стоимости ПЦР лишь слегка превышает обычные анализы, использующие кровь как биоматериал.

Единственной издержкой исследования является его технологическая сложность. Для качественного выполнения ПЦР требуется исключительно чистый биоматериал, современное оборудование и хорошо подготовленный персонал. Обращаться за диагностикой по этому методу предпочтительней в специализированные лаборатории.

Вирусный гепатит B относится к заболеваниям, полное излечение от которых представляется возможным только на самых ранних стадиях развития. Выявить болезнь именно в этой фазе помогает сверхчувствительная диагностика по методу ПЦР. Первые симптомы, вызывающие подозрение на поражение печени вирусом, должны быть поводом для обращения к специалисту. Если диагноз подтвердится, лечение следует начинать немедленно. Это улучшит прогноз и повысит вероятность поддержки печени в здоровом состоянии на долгие годы.

источник

Определение ДНК вируса гепатита В необходимо преимущественно в диагностике хронической формы болезни. Проводится качественный и количественный анализ ДНК гепатита для установления активности репликации возбудителя (вирусная нагрузка) и принятия решения о необходимости начала специфической противовирусной терапии.

В процессе лечения хронического гепатита В и после завершения полного курса эти анализы проводятся повторно для оценки эффективности проведенной терапии.

HBV DNA – это главная составляющая возбудителя гепатита В, в которой хранится генетическая информация о вирусе. В клинической практике определение ДНК HBV вместе с HBsAg и другими маркерами вирусного гепатита используется в диагностике хронической формы болезни, реже – острой.

Если в крови пациента не обнаружено следов ДНК HBV (качественный анализ отрицательный), то это позволяет полностью исключить диагноз острого и хронического гепатита В. Именно этот анализ помогает в сложных диагностических случаях, когда серологические маркеры вирусного гепатита В вызывают сомнения у лечащего врача.

Если позволяют технические возможности, то в крови пациента выявляют только ДНК HBV методом ПЦР без определения серологических маркеров вирусного гепатита В. Этот метод может быть использован в качестве скринингового как самый надежный, но не всегда доступный из-за своей высокой стоимости.

В отечественной клинической практике традиционно принято не начинать обследование пациента с ДНК HBV, а стартовать с более доступных с финансовой и технической точек зрения серологических маркеров вирусного гепатита Б.

Необходимость выявить наличие ДНК HBV (или подтвердить ее отсутствие) целесообразно в таких ситуациях:

• длительное течение острой формы гепатита В (затяжной вариант с высокой вероятностью хронизации);
• при получении сомнительных результатов серологических маркеров (например, отрицательный HBsAg и положительный HBeAg);
• перед началом противовирусной терапии пациенту с хроническим гепатитом В для оценки концентрации вирусных частиц в крови (вирусная нагрузка);
• через месяц от момента старта противовирусной терапии для оценки эффективности назначенных противовирусных средств (вирусная нагрузка должна снижаться);
• после завершения курса специфического лечения для оценки его эффективности (качественный и количественный анализ ДНК HBV должны стать отрицательными).

Семейный доктор также может назначить анализ на ДНК HBV в процессе проведения дифференциальной диагностики, если у пациента заподозрено заболевание печени или диагностирован синдром желтухи неустановленной этиологии.

Кратность проведения анализов на ДНК HBV, какой именно вариант необходим (качественный или количественный) – решает лечащий доктор. Пациенту лучше не заниматься самодиагностикой, так как ПЦР-диагностика на ДНК HBV достаточно дорогая.

Полимеразная цепная реакция не требует специальной подготовки. Правила подготовки такие же, как и к другим традиционным лабораторным исследованиям. Если у пациента возникают вопросы, то их необходимо задать лечащему доктору или сотруднику лабораторного комплекса. Перед определением ДНК HBV пациенту необходимо:

• на протяжении 3 дней отказаться от приема лекарственных препаратов;
• исключить жирную пищу;
• выдержать период голодания в течение 8-10 часов до момента взятия крови;
• запланировать визит в лабораторный комплекс на первую половину дня;
• приходить натощак, но обязательно выпить 1-2 стакана обычной питьевой воды или некрепкого чая.

Допускается взятие крови пациента в одном подразделении и последующая доставка контейнера с биологическим материалом в лабораторный комплекс. Венозная кровь наливается в емкость с веществом, препятствующим свертыванию крови.

Биологический материал в обязательном порядке транспортируется в лабораторный комплекс в условиях переносного холодильника (температура от 2 до 8 градусов). Информативный результат может быть получен только при условии доставки крови в течение 24 часов.

ДНК HBV обнаруживают методом полимеразной цепной реакции. Это значит, что с помощью амплификации в биологической жидкости обследуемого пациента участки ДНК вируса гепатита В синтезируются – их концентрация увеличивается в несколько раз. Каждый макро- и микроорганизм обладает уникальной неповторимой последовательностью нуклеотидов.

Разработаны праймеры – так называемые эталоны, в сравнении с которыми устанавливается порядок нуклеотидов и идентифицируется микробный агент. Это значит, что практически исключена диагностическая ошибка.

Ложноположительный и ложноотрицательный результаты встречаются крайне редко. Компания-производитель на упаковке с диагностической тест-системой всегда указывает значение (концентрацию вируса), которое расценивается как положительный результат.

ПЦР-диагностика – быстрый метод диагностики. Результат известен через 2-3 часа от момента начала работы с биологической жидкостью пациента. Лаборатория выдает ответ на бланке, где указан не только сам результат (положительный или отрицательный, или же концентрация вирусных частиц), но и название тест-системы, а также ее чувствительность.

Качественное исследование ДНК вируса гепатита В предполагает только выявление этого микробного агента. Этот анализ назначается чаще, чем количественный, так как его диагностическая ценность несколько выше.

Это исследование позволяет отличить норму от патологии, то есть получить однозначный ответ на вопрос, есть ли в крови обследуемого пациента возбудитель вирусного гепатита В или его нет. Чаще всего качественный анализ на ДНК вируса гепатита В необходим для диагностики хронической формы гепатита, когда клинические признаки этого варианта поражения печени минимальны.

В диагностике острого вирусного гепатита В качественный анализ на ДНК необходим только в сложных диагностических случаях. Например, если в крови пациента уже не обнаруживается ни поверхностный антиген HBsAg, ни антитела anti-HBs. В такой ситуации вероятно затяжное течение болезни или трансформация острой формы в хроническую.

Возникает необходимость назначения специфической мощной противовирусной терапии, поэтому необходимо оценить уровень репликации возбудителя гепатита В. Если это так называемое «серонегативное окно», то есть краткий период, когда отсутствует и антиген, и антитела, то противовирусная терапия не нужна. Если репликация вируса установлена, то это означает необходимость контроля за состоянием пациента и назначением противовирусной терапии.

Анализ концентрации ДНК вируса гепатита В необходим преимущественно в диагностике хронической формы болезни. В клинической практике количественный анализ называется чаще вирусной нагрузкой, так как исследуется количество вирионов вируса гепатита В в 1 мкл крови пациента.

Обнаруженный уровень вирусной нагрузки до начала лечения является своеобразным эталоном. С изначальной цифрой сравнивается последующий результат, который назначается через месяц от начала специфической терапии и после завершения полного курса противовирусного лечения.

Нужно не просто найти вирус гепатита В в биологическом материале пациента, но и знать, как трактовать полученные результаты. Пациенту следует понимать, что анализировать сделанные самостоятельно выводы – далеко не всегда правильно. Оценивать весь комплекс анализов на основании клинического осмотра больного может только лечащий доктор.

Предварительно расшифровать полученный ответ можно с помощью таблицы:

Бланки ПЦР-анализа на ДНК вируса гепатита В не являются диагнозом и основанием для назначения терапии противовирусными лекарственными средствами. Все выводы и необходимые дальнейшие рекомендации делает лечащий доктор.

источник

Анализ будет готов в течение 5 дней, исключая субботу и воскресенье (кроме дня взятия биоматериала). Вы получите результаты на эл. почту сразу по готовности.

Срок исполнения: 5 дней, исключая субботу и воскресенье (кроме дня взятия биоматериала)

24 часа ограничьте жирную и жареную пищу, исключите алкоголь и тяжёлые физические нагрузки, а также рентгенографию, флюорографию, УЗИ и физиопроцедуры.

От 8 до 14 часов до сдачи крови не принимайте пищу, пейте только чистую воду.

Обсудите с врачом принимаемые препараты и необходимость их отмены.

Вирусный гепатит В (HBV — hepatit b virus) – инфекционное заболевание печени, вызванное вирусом гепатита В.

Гепатит В может долго протекать бессимптомно, переходя в хроническую форму. Хронический вирусный гепатит В может приводить к циррозу и раку печени. Пока человек не знает о том, что болен, это опасно для него и окружающих.

Ранее всего, после заражения можно выявить гепатит В по анализу крови на ДНК вируса гепатита В. Он покажет инфицирование уже спустя 10-12 дней. Этот анализ поможет проверить возможное инфицирование человека, попавшего в группу риска.

Кроме того, в случае хронического течения заболевания, анализ на ДНК используется для выявления обострений.

Качественный анализ имеет высокую чувствительность, поэтому положительный результата анализа требует подтверждения с помощью других анализов, которые назначит врач.

В целях профилактики анализ на гепатит В можно сдать в комплексе Группа риска.

Чувствительность метода — 1000 копий ДНК/мл.

Качественный метод определения содержания ДНК вируса гепатита B в крови дает возможность определить инфицирование гепатитом В, в том числе при отрицательном результате анализа на HBsAg. Также рекомендуется сдать этот анализ лицам, имевшим контакт с инфицированным человеком.

Назначается терапевтом, эндокринологом, инфекционистом, гепатологом.

Самая распространенная разновидность гепатита на планете. В России им болеет около 5 млн человек и немалое количество людей не подозревают о том, что больны. Гепатит В может протекать бессимптомно длительное время, переходя в хроническую форму. Поэтому пока человек не знает о том, что болен, это опасно и для его здоровья, и для здоровья окружающих. По этой причине сдавать анализ для выявления гепатита B рекомендуется регулярно, раз в полгода. Защитить себя от заражения гепатитом В можно с помощью вакцинации. Вакцинация обеспечивает защиту от гепатита В на 5 — 7 лет. До вакцинации, по итогам вакцинации и по прошествии 5 лет после вакцинации необходимо исследовать уровень антител с помощью анализа — anti-HBs-антител.

Гепатит В передается с биологическими жидкостями: спермой, кровью, плазмой. Если был вероятный случай заражения (незащищенный половой акт, многоразовой использование шприца, контакт с зараженной кровью и т.д.), сдать анализ на гепатит B нужно через месяц для более достоверного результата.

Инкубационный период от 4 недель до 6 месяцев.

Инкубационный период — отрезок времени от момента попадания вируса в организм до проявления симптомов болезни.

В конце инкубационного периода повышаются уровни печёночных показателей (АЛТ, АСТ), увеличиваются печень и селезёнка, повышается концентрации билирубина до 2 — 2,5 раз от нормы, хотя это не приводит к потемнению мочи. Он может протекать как в виде легких форм, длящихся несколько недель, так и в виде хронической инфекции с многолетним течением.

Симптомы острого гепатита: желтушность кожи, повышенная температура, тошнота, быстрая утомляемость. В лабораторных анализах – признаки нарушения функции печени и специфические антигены вируса гепатита В. Острый гепатит это период первых 3 месяцев от момента заражения. Острый гепатит может протекать как с яркими симптомами гепатита (желтушность, белесый стул), так и без них.

Острое заболевание может протекать быстро, с летальным исходом, перейти в хроническую инфекцию или окончиться полным выздоровлением. Считается, что после перенесенного гепатита формируется стойкий иммунитет. Хронический вирусный гепатит В может приводить к циррозу и раку печени. В процессе борьбы организма с гепатитом могут формироваться аутоимунные заболевания: тиреоидит, хронический гастрит, синдром Шегрена, идеопатическая тромбоцитопеническая пурпура, узелковый периартериит, гломерулонефрит, синдром Гийена Барре, ревматоидный артрит и др.

Диагностика острого гепатита B

Ранее всего, после заражения можно выявить гепатит В по анализу крови на ДНК вируса гепатита В.

В этот период инфицированный является заразным, хотя симптомы гепатита могут не наблюдаться. Однако и этот анализ может быть отрицательным в некоторый период (диагностическое или серологическое окно) течения болезни.

Спустя некоторое время (3-5 недель) с момента заражения организм начинает вырабатывать антитела класса M (IgM) к антигену HBcor к вирусу гепатита В (IgM HBcorAg).

Диагноз гепатита В ставится на основании определения нескольких анализов, характерных для различных стадий болезни – инкубационного периода, острой фазы и реконвалесценции.

Качественный метод определения ДНК вируса гепатита B в крови дает возможность оценить интенсивность развития заболевания, эффективность лечения.

Определение ДНК вируса безусловно необходимо для установления фазы развития вируса. Очень важно определение ДНК вируса для прогноза течения острого гепатита B.

Установлено, что неизменный ДНК вируса в крови более 8 недель после начала заболевания говорит о хронизации процесса, тогда как выявление и начало лечения ДНК вируса в течение первых 2 недель болезни коррелирует с полным выздоровлением.

Следовательно, определение ДНК вируса гепатита B в крови является важнейшим анализом, который в совокупности с другими лабораторными анализами позволяет диагностировать инфекцию, определить характер инфекционного процесса, оценить необходимость проведения терапии и её эффективность.

Чувствительность метода — 1000 копий ДНК/мл.

ДНК вируса гепатита B в крови – самый ранний показатель гепатита B,;показатель фазы активного размножения вируса при остром и хроническом гепатите B.

Качественное определение ДНК вируса гепатита В в крови подтверждает диагноз гепатита B.

По результатам положительного качественного анализа на ДНК вируса гепатита В обычно назначается анализ количественным методом. Это позволяет следить за динамикой развития вируса и контролировать результаты терапии.

В конце курса терапии так же сдают анализ качественным методом, поскольку он имеет более высокую чувствительность.

Внимание! Интерпретация результатов анализов носит информационный характер, не является диагнозом и не заменяет консультации врача. Референсные значения могут отличаться от указанных в зависимости от используемого оборудования, актуальные значения будут указаны на бланке результатов.

ДНК вируса гепатита В (HBV):

• обнаружена: инфицирование вирусом гепатита B (острый гепатит); фаза активной репликации вируса при хроническом гепатите B;
• не обнаружена: нет инфицирования вирусом гепатита B или хронический гепатит в стадии ремиссии.

Единица измерения: качественный тест

Референсные значения: ДНК не обнаружена

Lab4U — медицинская онлайн-лаборатория, цель которой сделать анализы удобными и доступными, чтобы Вы могли заботиться о своем здоровье. Для этого мы исключили все затраты на кассиров, администраторов, аренду и прочее, направив деньги на использование современного оборудования и реактивов от лучших мировых производителей. В лаборатории внедрена система TrakCare LAB, которая автоматизирует лабораторные исследования и сводит к минимуму влияние человеческого фактора

• Вам удобно выбрать назначенные анализы из каталога, либо в строке сквозного поиска, у Вас всегда под рукой точное и понятное описание подготовки к анализу и интерпретация результатов
• Lab4U моментально формирует для Вас список подходящих медцентров, остается выбрать день и время, рядом с домом, офисом, детским садом или по пути
• Вы можете заказать анализы для любого члена семьи в несколько кликов, один раз внеся их в свой личный кабинет, быстро и удобно получив результат на почту
• Анализы выгоднее средней рыночной цены до 50%, так Вы можете направить сэкономленный бюджет на дополнительные регулярные исследования или другие важные траты
• Lab4U всегда онлайн работает с каждым клиентом 7 дней в неделю, это значит что каждый Ваш вопрос и обращение видят руководители, именно за счет этого Lab4U постоянно улучшает сервис
• В личном кабинете удобно хранится архив ранее полученных результатов, вы легко сравните динамику
• Для продвинутых пользователей мы сделали и постоянно совершенствуем мобильное приложение

Мы работаем с 2012 года в 24 городах России и выполнили уже более 400 000 анализов (данные на август 2017 года).

Команда Lab4U делает все, чтобы малоприятная процедура стала простой, удобной, доступной и понятной Сделайте Lab4U своей постоянной лабораторией

Получить результаты анализов в указанные на сайте сроки по электронной почте и, если необходимо, в медицинском центре.

*В заказ включается стоимость взятия материала для анализов и может входить годовой абонемент 99 руб (оплачивается раз в год и не взимается при регистрации через мобильное приложение для iOS и Android).

источник

ВГВ является сложноорганизованным ДНК-содержащим вирусом и относится к семейству Hepadnaviridae роду Orthohepadnavirus.

Гепатит В — антропонозная инфекция, преимущественно с парентеральным механизмом заражения, которая может протекать в форме вирусного носительства, острой и хронической форм и характеризуется поражением печени с возможным развитием острой печеночной недостаточности, хронического гепатита, цирроза печени и первичного рака печени (гепатоцеллюлярной карциномы).

Инфицирование организма человека происходит при непосредственном проникновении HBV в кровь (при каких либо инвазивных вмешательствах и при переливании крови и ее препаратов), или через слизистые и кожные покровы во время родов, при половых и тесных бытовых контактах. Попав в печень, HBV проникает в гепатоцит, где начинает интенсивно размножаться.

Развитие инфекционного процесса может происходить двумя путями: репликативным и интегративным. Репликативная форма инфекции ведет к развитию острого или хронического гепатита и циррозу печени, тогда как интегративная — к развитию «здорового» вирусоносительства, неактивного хронического гепатита, циррозу печени и первичной гепатокарциномы.

Серологическая диагностика и прогноз HBV-инфекции основан на выявлении антигенов вируса и антител к нему. Но, как оказалось, в популяции вируса гепатита В встречается достаточно мутантных штаммов (HBеAg-негативных), которые не улавливаются обычными серологическими тестами. Поэтому метод ПЦР для диагностики HBV-инфекции является крайне важным.

ПЦР позволяет определять в исследуемом материале ДНК вируса гепатита В как качественно, так и количественно. Качественное определение вируса гепатита В в материале (цельная кровь, сыворотка, плазма, биоптаты печени) подтверждает наличие вируса в организме больного и тем самым устанавливает патогенез заболевания. Количественный метод определения содержания ДНК вируса в плазме дает важную информацию об интенсивности развития заболевания, об эффективности лечения и о развитии резистентности к антивирусным препаратам. ПЦР при ВГВ безусловно необходим для суждения о вирусной репликации. Вирусную ДНК в сыворотке крови обнаруживают у 50% больных при отсутствии HBеAg. Выявление ДНК HBV в крови имеет большое значение для прогноза острого ВГВ. Установлено, что персистирование ДНК HBV более 8 недель после дебюта заболевания указывает на хронизацию процесса, тогда как элиминация ДНК вируса в течение первых 2 недель болезни коррелирует с полным выздоровлением.

Качественное определение ДНК вируса гепатита В методом ПЦР.

Аналитические показатели: выявление ДНК вируса гепатита В (hepatitis В virus) методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) в плазме крови.

Определяемый фрагмент-уникальная последовательность ДНК гена структурного белка вируса гепатита В. Специфичность определения — 98%. Чувствительность определения — не менее 80 вирусных частиц в 5 мкл прошедшей обработку (выделение ДНК) пробы.

Таким образом, определение ДНК HBV в материале является важнейшим анализом, который в совокупности с другими лабораторными исследованиями позволяет диагностировать инфекцию, определять характер инфекционного процесса, выступать в качестве критерия в проведении терапии и оценки ее эффективности.

Показания к назначению анализа:

Профилактические скрининговые исследования (ДНК вируса гепатита В — самый ранний маркер при острой инфекции).

Исследования при HBsAg-негативной инфекции.

Обследования контактных лиц.

Диагностика гепатитов смешанной этиологии — выявление ведущего вируса.

Выявление стадии активной репликации вируса при хроническом состоянии.

Контроль проводимой терапии.

Слабость, недомогание, быстрая утомляемость, снижение аппетита, тошнота, тяжесть в правом подреберье, увеличение печени, а также боли в мышцах, суставах.

Желтуха, кожный зуд, увеличение селезенки, сосудистые «паучки», в некоторых случаях покраснение ладоней и стоп.

ПЦР диагностика позволяет не только определить наличие вируса гепатита В в крови и его этиологию, но также оценить его активность. Выявление вирусной нагрузки особенно важно для подбора эффективного лечения, если она слишком высока, то вероятность выздоровления уменьшается. В чем суть метода полимеразной цепной реакции?

При гепатите проводят ПЦР, чтобы наверняка удостовериться в поставленном диагнозе. При помощи этого метода можно выявить ДНК вируса, а также определить его количество в крови.

ДНК вирус в крови методом ПЦР при гепатите можно выявить по окончании инкубационного периода, в это время на фоне повышенного уровня трансаминаз можно определить и HBsAg, после чего появляется HBeAg.

При качественном определении можно точно установить диагноз, есть гепатит или его нет. В норме в крови ДНК вируса должен отсутствовать. Количественный метод позволяет определить интенсивность развития болезни и размножение вируса.

Анализ имеет очень высокую чувствительность и достоверность. В качестве биологического материала берут венозную кровь. Благодаря современным технологиям, при ПЦР можно обнаружить вирус при концентрации 5×103-104 копий/мл в крови. По результатам анализа, зная норму, можно судить о вирусной нагрузке и поставить прогноз на лечение.

Важно! Именно ДНК вируса способствует развитию цирроза и других хронических заболеваний печени.

Обнаружение ДНК при помощи ПЦР необходимо в следующих случаях:

Сомнения при постановке окончательного анализа после сдачи анализов. Определение острой стадии болезни. Выявление скрытых форм гепатита. Оценка эффективности после прохождения противовирусной терапии.

Как расшифровать полученные после ПЦР диагностики результаты?

По количественной оценке можно не только определить наличие вируса, но и узнать вирусную нагрузку, в случае если ПЦР покажет положительный результат.

Количественный метод необходим, чтобы узнать такую информацию:

Интенсивность развития заболевания. Эффективность лечения. Развитие резистентности к противовирусным препаратам.

Количественная оценка очень важна при постановке диагноза хронического гепатита. В этом случае все показатели будут находиться не в пределах нормы. Уровень трансаминаза будет повышен, индекс активности вируса более 4, а концентрация ДНК вируса более 105 копий ДНК/мл. Если концентрация вируса более низкая, а уровень трансаминаза находится в норме, то можно говорить о пассивном носительстве.

Перед назначением противовирусного лечения прохождение ПЦР диагностики, а именно количественного обследования, является обязательным условием, чтобы определить вирусную нагрузку.

Делают анализ каждые 3 месяца, и если вирусная нагрузка возросла в 10 раз, то можно говорить об устойчивости вируса к лечению.

Количественный анализ дает очень важную информацию, ведь можно определить, сколько в крови содержится ДНК возбудителя. Чем больше его количество, тем больше вирусная нагрузка и тем тяжелее состояние больного. При снижении вирусной нагрузке после прохождения лечения, можно судить о его эффективности. В некоторых случаях ПЦР при гепатите является показанием к проведению дополнительного обследования, такого как биопсия печени. При повышенном уровне АЛТ проводится ПЦР. Расшифровка анализов такая: если вирусная нагрузка более 105копий ДНК/мл, а уровень АЛТ превышает норму, но не более чем в 2 раза на протяжении полугода, то такой больной нуждается в биопсии. При сильном воспалении или фиброзе показано противовирусное лечение. Если же уровень АЛТ превышает норму более чем в 2 раза при высокой вирусной нагрузке, то сразу назначают лечение без дополнительной диагностики.

Только хорошие специалисты смогут правильно расшифровать результаты количественного ПЦР.

Качественный анализ позволяет определить наличие вируса гепатита в крови. В норме он должен отсутствовать. Благодаря этому методу можно точно установить диагноз.

Качественный ПЦР анализ дает 100% точный результат.

Ни один другой метод не дает настолько достоверных данных. В более чем половине случаев после прохождения диагностики выявляют ДНК вируса, при отсутствии антигена. Очень важно на начальном этапе заболевания установить диагноз.

Доказано, что если ДНК вируса гепатита В активно размножается в организме человека в течение двух месяцев, то болезнь приобретает хроническую форму. Если же начать бороться с вирусом уже в течение первых недель после инфицирования, то шансы на полное выздоровление очень велики.

Как происходит расшифровка полученных результатов обследования при помощи качественного метода?

Расшифровка анализа очень проста:

В норме результат должен быть отрицательным, то есть ДНК вируса не обнаружено. Положительный результат свидетельствует о наличии гепатита.

Анализ помогает выявить вирус, определить его генотип и начать своевременное лечение. Очень часто при наличии ДНК наряду с качественной оценкой проводят и количественную.

При анализе на гепатит при помощи ПЦР диагностики берут кровь из вены. Проходить обследование лучше всего с утра, так как кровь всегда нужно сдавать натощак (после последнего приема пищи должно пройти не менее 8 часов).

Чтобы анализ был максимально достоверным, больной должен знать о некоторых факторах, которые могут повлиять на конечный результат:

Перед тем как сдавать кровь из вены, нужно 20 минут отдохнуть. Кроме того, что анализ сдается натощак, так, еще за 12 часов нельзя употреблять спиртное, курить, заниматься спортом и употреблять жирную еду. Некоторые лекарственные средства, которые вынужден принимать больной, могут повлиять на конечный результат. Лаборант должен знать о случае медикаментозного лечения. Если кровь нужно сдать ребенку в возрасте до 5 лет, то в таком случае его за полчаса до диагностики нужно поить каждые 10 мин. по стакану кипяченой воды.

Очень важно проходить ПЦР в клинике, которая хорошо себя зарекомендовала. Ведь несмотря на то что ПЦР определяет наличие вируса с точностью до 100%, этот показатель может снизиться до 95%, если учесть человеческий фактор.

Неквалифицированные лаборанты или плохая репутация клиники может стать причиной получения ложных результатов.

Гепатит B – вирусная инфекция, поражающая печень. Сегодня около 300 млн человек по всему миру являются носителями гепатита B.

У некоторых вирус переходит в цирроз печени или гепатоцеллюлярную карциному (первая стадия рака). Новые противовирусные стратегии исследования болезни имеют две задачи:

Для лечения и чистки ПЕЧЕНИ наши читатели успешно используют

. Внимательно изучив этот метод мы решили предложить его и вашему вниманию.

определить, насколько организм чувствителен к вирусной нагрузке; определить, насколько вирус устойчив к приему лекарств и других медицинских вмешательств.

Серологические исследования направлены на выявление в сыворотке крови антигенов и антител, но этот метод ненадежен. Поэтому ученые разработали метод полимеразной цепной реакции (ПЦР). Он позволяет не только качественно определить наличие вируса (есть или нет), но и количественно (в каком количестве присутствуют антитела в сыворотке крови).

Перед сбором крови врач должен выяснить:

принимал ли пациент наркотические вещества внутривенно; являлся ли человек донором либо реципиентом (кому вливали кровь); проводились ли больному хирургические вмешательства; повреждался ли у пациента кожный покров; уверен ли человек в здоровье своего сексуального партнера; были ли контакты с зараженными вирусом гепатита B.

При остром гепатите положительный результат можно выявить через 1-2 недели после инкубации путем ПЦР.

Анализы крови для выявления вирусного гепатита В (ВГВ) берутся при:

Диагностике острого гепатита в: период инкубации (1-2 недели); интенсивный период недуга (3-4 недели); период ранней стадии выздоровления. Диагностике ХВГ (хронического вирусного гепатита). При микс-гепатитах.

Также регулярно анализы берутся у людей, находящихся в группе риска, к ним относят:

людей, нуждающихся в частых переливаниях крови; пациентов, проходящих постоянные процедуры очищения крови при почечной недостаточности; людей, больных СПИДом или ВИЧ-инфекцией; беременных женщин; медицинских работников, контактирующих с кровью; больных с симптомами заболевания печени. лечащихся от цирроза, рака и других заболеваний печени.

Подготовка к количественному анализу предполагает соблюдение таких правил:

не курить за 1 час до сдачи анализа; не есть за 4 часа до процедуры; лучше всего количественный анализ сдавать после сдачи качественного; не пить алкоголь за сутки до исследования.

Эффективная терапия при заболевании влияет на уменьшение количества ДНК вируса в сыворотке. Через полгода после старта лечения количество вируса должно уменьшиться на 2-3 порядка. Если результаты анализов через время не изменились, или, наоборот, стали хуже, то в обязательном порядке меняется вся терапия, и автоматически острый гепатит переименовывается в хронический.

При попадании ДНК вируса гепатита в организм инфекция может пойти 2путями:

репликативным (происходит развитие острого либо хронического гепатита, что в дальнейшем, без медицинского вмешательства, ведет к циррозу печени); интегративным (развитие бессимптомного, неактивного вирусоносительства, которое все-таки приведет к циррозу либо гепатоцеллюлярной карциноме).

Как происходит процедура забора крови? Врач стягивает предплечье больного жгутом и вводит иглу в вену на локтевом сгибе, после забирает кровь в шприц и переливает в специальную пробирку. Результаты будут готовы через несколько дней, срок зависит от места, где пациент сдает анализ.

Материалом служит сыворотка крови, лимфоциты, гепатобиоптаты, которые помещают в пробирку с хорошо завинчивающейся крышкой. Но на результат может повлиять загрязненный материал для забора анализа, передержка материала (он хранится до 24 часов при температуре не более +4 °С).

Существует несколько способов количественного анализа, среди которых ПЦР, ИФА, биохимия.

Это анализ на поверхностный антиген-белок, который составляет часть внешней оболочки вируса. После того, как вирусные частицы попали внутрь организма, они начинают интенсивное размножение на поверхности печени, уничтожая здоровые клетки органа. Новые молекулы выбрасываются в кровь.

Исходя из этого, исследуют уровень концентрации в сыворотке антител и определяют, есть заражение гепатитом B или нет.

Материал для исследования берется натощак. ПЦР проводится в аппарате под названием амплификатор.

Сначала расщепляют ДНК на 2 самостоятельные цепочки с помощью повышения температуры материала для исследования в амплификаторе. Материал немного охлаждают с помощью азота. Праймеры находят нужные последовательности в молекуле ДНК и присоединяются к ним. Элонгация – третий шаг, когда два праймера присоединяются к двум цепочкам ДНК. При помощи фермента ДНК-полимеразы происходит достраивание участка ДНК от присоединившегося к нему ранее праймера. Таким образом, на участке в области праймеров в каждой из цепочек ДНК образуется вторая комплементарная цепочка ДНК.

В дальнейшем эти шаги повторяются множество раз, и за несколько часов выполняется 35-45 циклов, образуются миллиарды копий искомого образца. Если такие копии есть, то высчитывается их количество на 1 мл материала для анализа.

Многие наши читатели для лечения и чистки печени активно применяют широко известную методику на основе натуральных ингредиентов, открытую Еленой Малышевой. Советуем обязательно ознакомиться.

Помимо ПЦР, существует метод ИФА (иммуноферментного анализа). Он определяет не только поверхностные антитела, но и расположенные внутри и взаимосвязанные с предыдущими антигенами, а также их количество.

Еще один метод количественного анализа. При попадании вируса из поврежденных клеток печени в организм выбрасываются ферменты, если их количество больше нормы, то можно говорить о заражении. Кроме того, нужно определить вирусную нагрузку (ДНК-HBV), сдать печеночные пробы (на билирубин с фракциями, АЛТ, АСТ, щелочную фосфатазу, гамму-ГТ). Обязательным является посещение инфекциониста, который при необходимости направляет больного на фиброэластометрию, подбирает курс лечения.

Биохимия — количественного анализ

В этом методе поиск копий происходит после каждого цикла, а не после 35-45, Метод работает так же, как и ПЦР, позволяет определять количество копий в образце для исследований. Тем самым время проведения анализа заметно сокращается, при этом гарантирован 100 % результат.

Установление количества ДНК гепатита B очень важно, так как при малом показателе прогноз болезни более благоприятный, чем при большем. Концентрацию ДНК ВГВ измеряют в копий/мл либо me/мл

Результаты данного анализа могут быть следующими:

ДНК вируса не обнаружена, если его нет в организме либо концентрация очень мала, 90 me/мл = 200 копий/мл; ДНК вируса обнаружена в количестве ниже нормы концентрации, 2×106 копий/мл; ДНК вируса находится в среднем количестве, при 2×106-2×109 копий/мл; ДНК вируса больше 2×109 копий/мл, концентрация антител высокая, что говорит о прогрессе заболевания.

Если результат анализа положительный, то диагностируется:

носительство вируса гепатита B; заболевание хроническим гепатитом; заболевание острым гепатитом B.

Если результат отрицательный, то:

вируса в организме нет; возможно наличие гепатита B в период выздоровления (если предыдущие анализы являлись положительными).

В редких случаях отрицательный результат анализа на ДНК вируса гепатита B говорит о быстром и злокачественном течении болезни.

Решение о сдаче анализа на вирус принимает:

Отзыв нашей читательницы Светланы Литвиновой

Недавно я прочитала статью, в которой рассказывается о «Leviron Duo» для лечения заболеваний печени. При помощи данного сиропа можно НАВСЕГДА вылечить печень в домашних условиях.

Я не привыкла доверять всякой информации, но решила проверить и заказала упаковку. Изменения я заметила уже через неделю: постоянные боли, тяжесть и покалывания в печени мучившие меня до этого — отступили, а через 2 недели пропали совсем. Улучшился настроение, снова появилось желание жить и радоваться жизни! Попробуйте и вы, а если кому интересно, то ниже ссылка на статью.

Читать статью —> терапевт; вирусолог; гематолог; инфекционист.

Количественный анализ является обязательным при диагностике заболевания и должен состояться еще до начала терапии. Но необходимо помнить о том, что гепатит B иногда тесно переплетается с гепатитом D, что может создавать дополнительные сложности при проведении такого анализа. Поэтому следует учитывать и такие варианты осложнений:

вируса в организме нет; возможно наличие гепатита B в период выздоровления (если предыдущие анализы являлись положительными).

В редких случаях отрицательный результат анализа на ДНК вируса гепатита B говорит о быстром и злокачественном течении болезни.

Решение о сдаче анализа на вирус принимает:

Отзыв нашей читательницы Светланы Литвиновой

Недавно я прочитала статью, в которой рассказывается о «Leviron Duo» для лечения заболеваний печени. При помощи данного сиропа можно НАВСЕГДА вылечить печень в домашних условиях.

Я не привыкла доверять всякой информации, но решила проверить и заказала упаковку. Изменения я заметила уже через неделю: постоянные боли, тяжесть и покалывания в печени мучившие меня до этого — отступили, а через 2 недели пропали совсем. Улучшился настроение, снова появилось желание жить и радоваться жизни! Попробуйте и вы, а если кому интересно, то ниже ссылка на статью.

Читать статью —> терапевт; вирусолог; гематолог; инфекционист.

Количественный анализ является обязательным при диагностике заболевания и должен состояться еще до начала терапии. Но необходимо помнить о том, что гепатит B иногда тесно переплетается с гепатитом D, что может создавать дополнительные сложности при проведении такого анализа. Поэтому следует учитывать и такие варианты осложнений:

коинфекция – происходит заражение сразу двумя видами гепатита B и D. Такое заболевание протекает намного сложнее и болезненнее. Хронической формы у такого недуга нет, потому что в большинстве своем болезнь заканчивается летальным исходом; суперинфекция – к ранее спавшему гепатиту D присоединяется острый ВГB, в этом случае болезнь перетекает в хроническую с неблагоприятным прогнозом.

Вам все еще кажется, что ВОССТАНОВИТЬ ПЕЧЕНЬ невозможно?

Судя по тому, что вы сейчас читаете эти строки — победа в борьбе с заболеваниями печени пока не на вашей стороне…

И вы уже думали о хирургическом вмешательстве и применении токсичных препаратов, которые рекламируют? Оно и понятно, ведь игнорирования болей и тяжести в печени, может привести к тяжелым последствиям. Тошнота и рвота, желтоватый или сероватый оттенок кожи, горечь во рту, потемнение цвета мочи и диарея… Все эти симптомы знакомы вам не понаслышке.

Но возможно правильнее лечить не следствие, а причину? Прочитайте историю Алевтины Третьяковой, о том как она не только справилась с болезнью печени, но и восстановила ее…. Читать статью >>

ВГВ является сложноорганизованным ДНК-содержащим вирусом и относится к семейству Hepadnaviridae роду Orthohepadnavirus.

Гепатит В — антропонозная инфекция, преимущественно с парентеральным механизмом заражения, которая может протекать в форме вирусного носительства, острой и хронической форм и характеризуется поражением печени с возможным развитием острой печеночной недостаточности, хронического гепатита, цирроза печени и первичного рака печени (гепатоцеллюлярной карциномы).

Инфицирование организма человека происходит при непосредственном проникновении HBV в кровь (при каких либо инвазивных вмешательствах и при переливании крови и ее препаратов), или через слизистые и кожные покровы во время родов, при половых и тесных бытовых контактах. Попав в печень, HBV проникает в гепатоцит, где начинает интенсивно размножаться.

Развитие инфекционного процесса может происходить двумя путями: репликативным и интегративным. Репликативная форма инфекции ведет к развитию острого или хронического гепатита и циррозу печени, тогда как интегративная — к развитию «здорового» вирусоносительства, неактивного хронического гепатита, циррозу печени и первичной гепатокарциномы.

Серологическая диагностика и прогноз HBV-инфекции основан на выявлении антигенов вируса и антител к нему. Но, как оказалось, в популяции вируса гепатита В встречается достаточно мутантных штаммов (HBеAg-негативных), которые не улавливаются обычными серологическими тестами. Поэтому метод ПЦР для диагностики HBV-инфекции является крайне важным.

ПЦР позволяет определять в исследуемом материале ДНК вируса гепатита В как качественно, так и количественно. Качественное определение вируса гепатита В в материале (цельная кровь, сыворотка, плазма, биоптаты печени) подтверждает наличие вируса в организме больного и тем самым устанавливает патогенез заболевания. Количественный метод определения содержания ДНК вируса в плазме дает важную информацию об интенсивности развития заболевания, об эффективности лечения и о развитии резистентности к антивирусным препаратам. ПЦР при ВГВ безусловно необходим для суждения о вирусной репликации. Вирусную ДНК в сыворотке крови обнаруживают у 50% больных при отсутствии HBеAg. Выявление ДНК HBV в крови имеет большое значение для прогноза острого ВГВ. Установлено, что персистирование ДНК HBV более 8 недель после дебюта заболевания указывает на хронизацию процесса, тогда как элиминация ДНК вируса в течение первых 2 недель болезни коррелирует с полным выздоровлением.

Качественное определение ДНК вируса гепатита В методом ПЦР.

Аналитические показатели: выявление ДНК вируса гепатита В (hepatitis В virus) методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) в плазме крови.

Определяемый фрагмент-уникальная последовательность ДНК гена структурного белка вируса гепатита В. Специфичность определения — 98%. Чувствительность определения — не менее 80 вирусных частиц в 5 мкл прошедшей обработку (выделение ДНК) пробы.

Таким образом, определение ДНК HBV в материале является важнейшим анализом, который в совокупности с другими лабораторными исследованиями позволяет диагностировать инфекцию, определять характер инфекционного процесса, выступать в качестве критерия в проведении терапии и оценки ее эффективности.

Показания к назначению анализа:

Профилактические скрининговые исследования (ДНК вируса гепатита В — самый ранний маркер при острой инфекции).

Исследования при HBsAg-негативной инфекции.

Обследования контактных лиц.

Диагностика гепатитов смешанной этиологии — выявление ведущего вируса.

Выявление стадии активной репликации вируса при хроническом состоянии.

Контроль проводимой терапии.

Слабость, недомогание, быстрая утомляемость, снижение аппетита, тошнота, тяжесть в правом подреберье, увеличение печени, а также боли в мышцах, суставах.

Желтуха, кожный зуд, увеличение селезенки, сосудистые «паучки», в некоторых случаях покраснение ладоней и стоп.

источник

Комплексное исследование при подтвержденном вирусном гепатите В (HBV). Анализ маркеров инфекции позволяет установить клиническую стадию заболевания, иммунологический статус обследуемого, а также оценить эффективность лечения. Включает в себя определение белков вируса (антигенов), основных классов специфических антител, а также обнаружение ДНК вируса в крови.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

• Исключить из рациона жирную пищу в течение 24 часов до исследования.
• Не курить за 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Вирусный гепатит B (HBV) – инфекционное заболевание, которое является причиной серьёзных поражений печени. Зачастую гепатит B переходит в хроническую форму, его течение становится затяжным и провоцирует возникновение цирроза и рака печени.

Вирус гепатита B (Hepadnaviridae) содержит двухцепочечную ДНК, окруженную нуклеокапсидом размером 27 нм, в состав которого входит антиген HBcAg, и внешней оболочкой, содержащей антиген HBsAg. Этот антиген обнаруживается в крови за 6 недель до появления симптомов заболевания и может выявляться длительное время как при их наличии, так и в при их отсутствии (при хроническом гепатите и носительстве). На ранних стадиях заболевания присутствует у 90-95 % больных.

Особенностью вируса гепатита B является то, что он поступает непосредственно в кровь и циркулирует в ней на протяжении всего периода заболевания. У некоторых пациентов вирус в крови сохраняется всю жизнь. По этой причине источником заражения могут стать не только те, кто болен гепатитом в его острой форме, но также те, кто уже перенес данное заболевание, а также люди, у которых заболевание не проявляется, однако они являются носителями вируса.

Полное выздоровление регистрируется у 92-95 % больных острым гепатитом В, и лишь у 5-8 % из них отмечается переход заболевания в хроническую форму.

Гепатит B лечится исключительно в условиях стационара. Это заболевание в случае длительного течения является фактором риска развития первичной гепатоцеллюлярной карциномы (рак печени).

В жизнедеятельности вируса гепатита В различают две фазы: фазу репликации и фазу интеграции. В фазе репликации происходит воспроизведение (размножение) вируса. ДНК вируса проникает в ядро гепатоцита, где с помощью ДНК-полимеразы синтезируется нуклеокапсид, содержащий ДНК вируса, антигены HBcAg, HBeAg, которые являются основной мишенью иммунной системы. Затем нуклеокапсид мигрирует из ядра в цитоплазму, где реплицируются белки внешней оболочки (HBsAg), и, таким образом, происходит сборка полного вириона. При этом избыток HBsAg, не использованный для сборки вируса, через межклеточное пространство попадает в кровь. Полная сборка (репликация) вируса заканчивается презентацией его растворимого нуклеокапсидного антигена – HBeAg на мембране гепатоцита, где происходит его «узнавание» иммуноцитами. Антиген HBcAg серологическими методами не определяется, потому что отсутствует в крови в свободном виде. Определяется наличие в крови антител (anti-HBc) к этому антигену, вырабатывающихся вследствие его высокой иммуногенности.

Маркерами фазы репликации вируса гепатита В являются:

• выявление в крови антигенов HBeAg и anti-HBc (Ig M).

У 7-12 % больных хроническим вирусным гепатитом В возможен спонтанный переход фазы репликации в нерепликативную фазу (при этом из крови исчезает HBeAg и появляются anti-HBe). Именно фаза репликации обусловливает тяжесть поражения печени и контагиозность больного.

В фазе интеграции происходит интегрирование (встраивание) фрагмента вируса гепатита В, несущего ген HBsAg, в геном (ДНК) гепатоцита с последующим образованием преимущественно HBsAg. При этом репликация вируса прекращается, однако генетический аппарат гепатоцита продолжает синтезировать HBsAg в большом количестве.

Вирусная ДНК может быть интегрирована не только в гепатоциты, но и в клетки поджелудочной железы, слюнных желез, лейкоциты, сперматозоиды, клетки почек.

Фаза интеграции сопровождается становлением клинико-морфологической ремиссии. В этой фазе в большинстве случаев формируется состояние иммунологической толерантности к вирусу, что приводит к купированию активности процесса и носительству HBsAg. Интеграция делает вирус недосягаемым для иммунного контроля.

Серологические маркеры фазы интеграции:

• наличие в крови только HBsAg или в сочетании с anti-HBc (IgG);
• отсутствие в крови ДНК-вируса;
• сероконверсия HBeAg в anti-HBe (т.е. исчезновение из крови HBeAg и появление anti-HBe).

Пациенты, перенесшие инфекцию и имеющие антитела к вирусу, не могут повторно заразиться гепатитом B. В некоторых случаях полное выздоровление не наступает и человек становится хроническим вирусоносителем. Вирусоносительство может протекать бессимптомно, но в некоторых случаях развивается хронический активный гепатит B. Ключевым фактором риска активного вирусоносительства является возраст, когда человек был заражен: для грудных детей уровень риска превышает 50 %, в то время как для взрослых остается на уровне 5-10 %. Исследования показывают, что мужчины чаще становятся носителями, чем женщины.

HBsAg – поверхностный антиген вируса гепатита В

Поверхностный антиген вируса гепатита В (HВsAg) является белком, который присутствует на поверхности вируса. Обнаруживается в крови при остром и хроническом гепатите В. Самый ранний маркер. Достигает максимума к 4-6-й неделе заболевания. Сохраняется до 6 месяцев при остром гепатите, свыше 6 месяцев – при переходе заболевания в хроническую форму.

HBeAg – ядерный ‘е’-антиген вируса гепатита В

Антиген, находящийся в ядре вируса. Появляется в крови одновременно с HBsAg и сохраняется в течение 3-6 недель. HBeAg появляется в крови больного острым гепатитом В одновременно с HBsAg или вслед за ним и сохраняется в крови 3-6 недель. Указывает на активное размножение и высокий риск передачи вируса при половом контакте, а также перинатально. Инфекционность HBeAg-положительной сыворотки в 3-5 раз выше, чем HBsAg-положительной. Выявление HBeAg в крови более 8-10 недель свидетельствует о переходе заболевания в хроническую форму. При отсутствии репликативной активности вируса во время хронической инфекции HBeAg не выявляется. Его появление же свидетельствует о реактивации вируса, что чаще происходит на фоне иммуносупрессии.

При лечении вирусного гепатита В исчезновение HBeAg и появление антител к HBe-антигену свидетельствует об эффективности терапии.

anti-HBc (Ig M) – специфические антитела класса IgМ к ядерному ‘core‘ антигену вируса

Начинают вырабатываться еще до клинических проявлений, указывают на активную репликацию вируса.

Появляются в крови через 3-5 недель, сохраняются в течение 2-5 месяцев и исчезают в период выздоровления.

anti-HBc – суммарные антитела (IgM+IgG) к ядерному ‘core’ антигену вируса гепатита В

Важный диагностический маркер, особенно при отрицательном значении HBsAg. Антитела класса IgM вырабатываются через 3-5 недель. Антитела класса IgG начинают вырабатываться с 4-6-го месяца и могут сохраняться пожизненно. Подтверждают контакт организма с вирусом.

anti-HBs – суммарные антитела к поверхностному антигену вируса гепатита В

Появляются медленно, достигая максимума через 6-12 месяцев. Указывают на перенесенную инфекцию или наличие поствакцинальных антител. Выявление этих антител свидетельствует о выздоровлении и развитии иммунитета. Обнаружение антител в высоком титре в первые недели заболевания может быть связано с развитием гипериммунного варианта фульминантного гепатита В.

anti-HBe – антитела к ‘е’-антигену вируса гепатита В

Появляются на 8-16-й неделе после инфицирования у 90 % больных. Свидетельствуют о завершении острого периода болезни и начале периода реконвалесценции. Могут сохраняться до 5 лет после перенесенного заболевания.

HBV (ДНК) – ДНК вируса гепатита В

Маркер наличия и репликации вируса. Методом ПЦР можно определить ДНК вируса качественно или количественно. Благодаря качественному методу подтверждается присутствие вируса гепатита В в организме и его активное размножение. Это особенно важно в сложных диагностических случаях. При инфицировании мутантными штаммами вируса результаты теста на специфические антигены HBsAg и HBeAg могут быть отрицательными, но при этом риск распространения вируса и развития заболевания у зараженного человека сохраняется.

Качественное определение ДНК вируса играет важную роль в раннем выявлении гепатита В у людей с высоким риском инфицирования. Генетический материал вируса обнаруживается в крови на несколько недель раньше, чем HBsAg. Положительный результат ПЦР за период более 6 месяцев указывает на хроническую инфекцию. Определение вирусной нагрузки (количество ДНК вируса в крови) позволяет оценить вероятность перехода заболевания в хроническую форму.

Повышенные уровни печеночных трансаминаз при положительном результате ПЦР являются показателями необходимости проведения терапии. Во время лечения вирусного гепатита В исчезновение ДНК вируса свидетельствует об эффективности лечения.

Для чего используется исследование?

• Для оценки серологического профиля;
• для выяснения стадии заболевания и степени контагиозности;
• для подтверждения заболевания и уточнения его формы (острая, хроническая, носительство);
• для наблюдения за течением хронического гепатита В;
• для оценки эффективности противовирусной терапии.

Когда назначается исследование?

• При выявлении у пациента поверхностного антигена вируса гепатита В (HBsAg);
• при подозрении на инфицирование вирусом гепатита В и сомнительных результатах серологических тестов;
• при микст-гепатитах (сочетанные вирусные гепатиты В и С);
• при динамическом наблюдении за больным гепатитом В (определение стадии процесса при совместном исследовании на другие специфические маркеры инфекции).

Для каждого показателя, входящего в состав комплекса:

Острый гепатит В. Выделяют «дикий» штамм (естественный) и «мутантный» штамм (вид) вируса. Определение штамма вируса имеет определенное значение при выборе противовирусного лечения. Мутантные штаммы вируса несколько хуже поддаются лечению в сравнении с «диким».

Хронический гепатит В (ХВГВ). Выделяют три серологических варианта:

1. ХВГВ с минимальной активностью (ранее использовали термин «носительство HBsAg»);
2. НВе-негативный ХВГВ;
3. НВе-позитивный ХВГВ.

Интерпретация сочетаний серологических маркеров гепатита В

источник