Непрямые маркеры вирусного гепатита

Вирусный гепатит: 1) этиология и патогенез 2) прямые и непрямые в маркеры 3) клинико-анатомические формы 4) патоморфология острых форм вирусного гепатита 5) исходы, осложнения и причины смерти

1) Этиология: вирусы гепатита А (энтерально, всегда острое течение), В (наиболее значим, парентерально, острое и хроническое течение), С, D (всегда в комплексе с гепатитом В, осложняет его течение), Е, G.

Вирус гепатита В — ДНК-содержащий, клинически значимы 3 АГ: HBs-АГ (поверхностный), HBc-АГ (сердцевидный), HBe-АГ (маркер ДНК-полимеразы)

Патогенез: репродукция вируса в гепатоцитах ® образование специфического печеночного липопротеина (аутоантигена) ® индукция ИС ® иммунный цитолиз, некроз гепатоцитов, потенцирование повреждения выбросом новых АГ
2) Прямые маркеры — этиологические агенты или их компоненты, выявляемые в тканях: частицы вируса (ЭМ), АГ вируса (ЭМ, иммуногистохимия).

Непрямые маркеры — клеточные изменения, характерные для заболевания определенной этиологии:

1. изменения гепатоцитов: а) матово-стекловидные гепатоциты (HBs-АГ) б) песочные ядра (HBc-АГ) в) тельца Каунсильмана (гепатоциты в состоянии коагуляционного некроза)

2. киллерный эффект Т-л в отношении гепатоцитов

3. белковая дистрофия гепатоцитов

4. очаги колликвационного некроза

5. воспалительный инфильтрат из макрофагов и лимфоцитов

6. перестройка структуры печени с образованием ложных преимущественно мультилобулярных долек

3) Клинико-анатомические формы вирусного гепатита:

1. острые: а) острая циклическая б) безжелтушная в) некротическая (молниеносная) г) холестатическая

2. хронический вирусный гепатит

4) Патоморфология острых формы ВГ:

а) острая циклическая (желтушная):

1. стадия разгара: большая красная печень (увеличена, красная, плотная):

ü диффузная лимфо-макрофагальная инфильтрация портальной и внутридольковой стромы, перипортальные ступенчатые некрозы

ü полиморфизм гепатоцитов, гидропическая и балонная дистрофия

ü очаговые и сливные некрозы гепатоцитов

ü разрушение пограничной пластинки

2. стадия выздоровления:

ü печень нормальных размеров и цвета с утолщенной тусклой капсулой

ü регенерация гепатоцитов (двухядерные клетки), разрастание соединительной ткани на месте некрозов

б) безжелтушная форма: большая красная печень.

Отличия от желтушной формы: 1. нет разрушения пограничной пластинки 2. выраженная пролиферация Купферовских клеток

в) некротическая форма: печень уменьшена, серо-коричневая, капсула морщинистая; преобладают массивные некрозы и гидропическая дистрофия гепатоцитов (соответствует токсической дистрофии печени)

г) холестатическая: большая красная печень с очагами желто-зеленой окраски; холестаз, холангит, холангиолит

5) Осложнения и причины смерти: 1. острая (некротическая форма) или 2. хроническая (хронический гепатит и острые с исходом в цирроз) 3. гепаторенальный синдром

Хронические гепатиты: 1) определение и классификация 2) патоморфологические признаки активности ХГ 3) морфологическая характеристика стадий ХГ 4) патоморфология хронических вирусных гепатитов 5) осложнения, исходы, причины смерти

1) ХГ — гепатит продолжительностью 6 месяцев и более с некрозами гепатоцитов различной величины и локализации и воспалительным инфильтратом различной степени зрелости с преобладанием лимфоцитов.

Классификация: 1994 г., Лос-Анджелес: три категории оценки 1. этиология 2. степень активности ХГ 3. стадия ХГ

а) хронический аутоиммунный гепатит

б) хронический вирусный гепатит В

в) хронический вирусный гепатит С

г) хронический вирусный гепатит В и D

д) хронический лекарственный гепатит

е) хронический криптогенный (не вирусный, не аутоимунный) гепатит

ж) хронический наследственный гепатит (а) болезнь Вильсона-Коновалова б) недостаточность альфа-1-антитрипсина)

2. По степени активности: а) минимальной б) слабой в) умеренной г) тяжелой

3. По стадии ХГ: I-IV стадии

2) Патоморфологические признаки активности ХГ:

3) Морфологическая характеристика стадии ХГ определяется степенью фиброза — единственный дифференциальный признак между острым и хроническим процессами:

4) Патоморфология хронических вирусных гепатитов: 2 формы — 1. хронический активный ВГ и 2. хронический персистирующий ВГ

Для двух форм характерны прямые и непрямые маркеры ВГ +:

а) хронический активный ВГ: дистрофия и различной степени некрозы + перестройка печени с прогрессией в цирроз

б) хронический персистирующий ВГ: практически в цирроз не происходит

5) Исходы и осложнения: часто является предцирротическим состоянием.

Гепатозы: 1) определение, этиология и классификация 2) патоморфология изменений печени при токсической дистрофии 3) общие изменения и причины смерти при токсической дистрофии печени 4) патоморфология жирового гепатоза 5) осложнения и исходы жирового гепатоза.

1) Гепатоз — заболевание печени с дистрофией и некрозом гепатоцитов.

а) токсической дистрофии печени: 1. воздействие токсинов (отравления пищевыми продуктами, грибами, фосфором, мышьяком, аутоинтоксикации — токсикоз беременных, тиреотоксикоз) 2. тяжелые формы вирусного гепатита

б) жирового гепатоза: 1. нарушения обмена веществ (сахарный диабет) 2. нарушение питания (избыточное употребление жиров и углеводов) 3. гипоксия (при хронических заболевания сердца, легких, анемиях)

Классификация гепатозов: 1. врожденные 2. приобретенные: а) острые (токсическая дистрофия печени) б) хронические (жировой гепатоз).

2) Патоморфология печени при токсической дистрофии:

1. стадия желтой дистрофии (до конца 2-ой недели): в первые дни — жировая дистрофия гепатоцитов (печень увеличена в объеме, ярко-желтая), затем — прогрессирующий некроз и аутолиз клеток печени, захватывающий все отделы долек (печень уменьшается, дряблая, серая); формирование на месте погибших клеток печени жиро-белкового детрита, придающего специфическую желтую окраску печени

2. стадия красной дистрофии (3-я неделя): печень уменьшается в размерах, красная за счет рассасывания некротических масс на месте погибших клеток и обнажения стромы с резко полнокровными сосудами.

3) Общие изменения при токсической дистрофии печени: 1. желтуха (из-за повышенного содержания билирубина в крови) 2. геморрагический синдром (из-за нарушений в системе свертывания крови) 3. некроз эпителия почечных канальцев 4. дистрофические изменения во внутренних органах.

Причины смерти: 1. смерть от печеночной недостаточности при быстром прогрессировании процесса 2. постнекротический цирроз печени и смерть от вторичной печеночной недостаточности 3. присоединение недостаточности других жизненно важных органов (ОПН, ОСН)

4) Патоморфология жирового гепатоза: печень увеличена, желтого или красно-коричневого цвета, поверхность гладкая; в гепатоцитах жировые включения различных размеров (пылевидные, мелкокапельные, крупнокапельные) как в единичных гепатоцитах (диссеминированное ожирение), так и в группах гепатоцитов (зональное ожирение) и в во всей паренхиме печени (диффузное ожирение); гибель клеток и образование жировых капель, лежащих внеклеточно, с воспалительной реакцией вокруг них.

Три стадии жирового гепатоза:

1. простое ожирение (в гепатоцитах накапливаются жировые включения, но сами клетки жизнеспособны);

2. ожирение в сочетании с некробиозом гепатоцитов и мезенхимально-клеточной реакцией;

3. ожирение с начинающейся перестройкой дольковой структуры печени (на этой стадии болезнь уже не обратима и со временем перейдет в цирроз).

5) Осложнения и исходы жирового гепатоза: 1. восстановление структуры гепатоцитов на ранних стадиях 2. некроз гепатоцитов и развитие первичной печеночной недостаточности 3. переход процесса в цирроз и развитие вторичной печеночной недостаточности

Организация стока поверхностных вод: Наибольшее количество влаги на земном шаре испаряется с поверхности морей и океанов (88‰).

Общие условия выбора системы дренажа: Система дренажа выбирается в зависимости от характера защищаемого.

Опора деревянной одностоечной и способы укрепление угловых опор: Опоры ВЛ — конструкции, предназначен­ные для поддерживания проводов на необходимой высоте над землей, водой.

источник

Среди вирусных гепатитов непрямые маркеры выделены при ХГ В и С, патоморфологическая диагностика остальных форм возможна только при выявлении прямых маркеров.

Для ХГ В морфологическими маркерами являются:

1) “матово-стекловидные” гепатоциты — крупные клетки с бледноэозинофильной мелкозернистой цитоплазмой со смещенным к периферии ядром; при иммуногистохимическом и иммунофлюоресцентном исследовании в их цитоплазме обнаруживается HbsAg;

2) “песочные ядра” — хроматин располагается по периферии, центральная просветленная часть ядра представлена мелкогранулярными эозинофильными включениями; при иммуногистохимическом и иммунофлюоресцентном исследовании в ней обнаруживается HbcAg;

3) тельца Каунсильмена — четко отграниченные гомогенные, эозинофильные образования без ядер или с их остатками, возникающие в результате коагуляционного некроза печеночных клеток;

4) белковая гидропическая дистрофия гепатоцитов до баллонной;

5) очаги колликвационного некроза (фокальные интралобулярные; ступенчатые — очаговые некрозы перипортальных зон печеночных долек, чередующиеся с сохранными участками, как правило, инфильтрированными воспалительными клеточными элементами, периферия печеночной долька и разрушенная пограничная пластинка портального тракта прибретают извитой, ступенчатый вид; мостовидные — протяженные некротические “дорожки”, соединяющие соседние структуры: порто-портальные, порто-центральные, центро-центральные и транслобулярные; субмассивные — некрозы, захватывающие большую часть одной или нескольких долек; массивные — обширные некрозы ткани печени до целой доли);

6) лимфогистиоцитарная инфильтрация с примесью плазматических клеток и полиморфноядерных лейкоцитов.

Для ХГ С косвенными морфологическими маркерами являются:

1) сочетание жировой дистрофии гепатоцитов с гидропической (преобладает жировая);

3) гетерогенность гепатоцитов;

4) лимфоцитарная инфильтрация портальных трактов и долек с образованием лимфоидных фолликулов, иногда с реактивными центрами;

5) активация синусоидальных клеток с образованием цепочек лимфоцитов внутри синусоидов;

6) поражение желчных протоков (деструкция, пролиферация, склероз).

II. Аутоиммунный (“люпоидный”) гепатит

Аутоиммунный гепатит (АГ) впервые был описан H.Kunkel с соавт. в 1951 г. у молодых женщин. В связи с частым обнаружением LE-клеточного феномена в сочетании с системными поражениями заболевание было названо “люпоидным” гепатитом.

В сыворотке крови больных обнаруживаются аутоантитела: антиядерные, аутоантитела против мембранных аутоантигенов гепатоцитов, включая LSP. Кроме них выявляются антитела против вирусных антигенов (кори, краснухи). Антиген LSP способен индуцировать реакцию гиперчувствительности замедленного типа. Доказана связь развития АГ с иммунопатологическими реакциями с участием антигенов HLA-A, HLA-B8, HLA-B12, DRW3 у молодых женщин до 30 лет. Эти данные указывают на роль Х-ромосомы и половых гормонов, главным образом эстрогенов, в патогенезе АГ. При этой форме ХГ эффективна иммунодепрессивная терапия.

Морфологическими маркерами АГ являются:

1. частое обнаружение LE-клеточного феномена — полиморфноядерные лейкоциты и макрофаги с внутрицитоплазматическим фагоцитированным поврежденным клеточным ядром;

2. внепеченочные поражения, свойственные системной красной волчанке;

3. выраженная воспалительная инфильтрация печени с преобладанием плазматических клеток;

4. преобладание признаков высокой степени активности с частым развитием мостовидных некрозов;

5. образование гепатоцитами в перипортальных зонах гландулярных (железистых) структур;

6. воспаление мелких желчных протоков и холангиол портальных трактов;

7. лимфоциты инфильтрата нередко образуют в портальных трактах лимфоидные фолликулы;

III. Хронические гепатиты лекарственной этиологии

Медикаменты, вызывающие поражение печени (гепатотоксины), делят на истинные и гепатотоксины идиосинкразии. Истинные гепатотоксины, в свою очередь, подразделяют на две группы: прямого и опосредованного действия. В настоящее время препараты первой группы истинных гепатоксинов не применяются — хлороформ, карботетрахлорид и др. Гепатотоксины опосредованного действия могут быть цитотоксическими, холестатическими и канцерогенными.

Среди гепатотоксинов идиосинкразии одни вещества вызывают в печени аллергические реакции с гранулематозом, эозинофилией и сыпью, другие — альтеративные изменения печени в результате воздействия токсических метаболитов (изониозида, ипрониазида и др.).

Лекарственные поражения могут приводить к развитию любого из известных заболеваний печени. При этом морфологическая картина однотипна и почти не зависит от этиологии. Для постановки диагноза ятрогенного заболевания печени имеют значение анамнез, лабораторный анализ функций печени, доза и длительность приема гепатотоксических препаратов. Галотан, изониозид, ацетоминофен способны вызывать центролобулярные и массивные некрозы печени; альфа-метилдофа — острый или хронический гепатит; альфа-метилдофа, салицилаты, метотрексат, этанол и винилхлорид — хронический гепатит с развитием выраженного фиброза вплоть до цирроза; анаболические и противозачаточные стероиды — холестаз, пелиоз и тромбоз печеночных вен.

Следует также отметить, что практически все лекарственные препараты вызывают адаптационные изменения печени, не сопровождающиеся функциональными нарушениями: гиперплазия гладкой эндоплазматической сети гепатоцитов, образование липофусцина и гемосидерина.

Морфологическими маркерами лекарственного ХГ являются:

1) жировая дистрофия гепатоцитов;

2) очаги колликвационного некроза вокруг центральных вен;

3) воспалительный инфильтрат со значительным числом эозинофильных лейкоцитов;

4) неспецифические гранулемы;

5) поражение желчных ходов с дистрофическими изменениями их эпителия;

6) холестаз в перипортальных отделах долек;

7) пелиоз — токсическое расширение синусоидов.

IV. Хронические наследственные гепатиты

Патология печени развивается почти при всех видах нарушений обмена веществ, однако выраженные изменения возникают лишь при некоторых наследственных метаболических заболеваниях:

а) Недостаточность 1-антитрипсина:

Определение этого генетического дефекта крайне важно, так как он часто приводит к тяжелым заболеваниям печени, возникающим в младенческом и раннем детском возрасте.

Большая часть гликопротеина 1-антитрипсина синтезируется в гепатоцитах. Этот фермент обнаруживается в зведчатых ретикулоэндотелиоцитах (ЗРЭ), эпителии желчных протоков и др. При недостаточности этого фермента в расширенных цистернах эндоплазматического ретикулума гепатоцитов накапливаются вещества подобные 1-антитрипсину и обладающие антигенными свойствами. В гистологических препаратах эти вещества выявляются при окраске гематоксилином и эозином в виде эозинофильных “шаров”, положительно окрашивающихся при ШИК-реакции.

У новорожденных этот генетический дефект может сопровождаться “чистым” холестазом, как при окклюзии внепеченочных желчных ходов, или гепатитом с гигантоклеточной трансформацией гепатоцитов, содержащих 3-4 ядра. Иногда поражение печени проявляется в полугодовалом возрасте, при этом характерна гипоплазия внутрипеченочных желчных протоков, сужение и многочисленность внепеченочных. Возможно раннее развитие цирроза печени (в возрасте до 1,5 месяцев), но чаще — в течение нескольких лет.

Патогенез поражения печени при недостаточности 1-антитрипсина точно не известен. Считается, что при этом генетическом дефекте печень теряет способность предотвращать цитотоксическое действие протеаз различного происхождения (вирусного, бактериального, элементов воспалительного инфильтрата).

источник

Вирусный гепатит – тяжелая патология печени, которая приводит к различным осложнениям – фиброз, жировая инфильтрация, циррозное поражение. Лечебный эффект напрямую обусловлен своевременностью терапии, поэтому важно как можно раньше диагностировать опасное заболевание.

Маркеры гепатитов – одно из исследований, которое позволяет диагностировать недуг на ранней стадии развития. Оно базируется на выявлении специфических антигенов и антител, которые находятся в сыворотке крови.

Особенность вирусных гепатитов в том, что на фоне раннего развития они не проявляются негативной симптоматикой. Когда проявляются симптомы, с которыми пациент идет к доктору, в большинстве случаев уже имеются функциональные нарушения печени.

Маркеры вирусного гепатита B и C – это специфические антигены и антитела в крови. Их определение в сыворотке крови подтверждает наличие патологии. Их можно обнаружить на фоне раннего развития болезни.

Чтобы выявить специфические и серологические маркеры к вирусным гепатитам, в медицинской практике используют разные исследования:

• Иммунохимическая реакция крови посредством ИФА.
• Реакция иммунной системы на вирусные инфекции.
• Специализированное скрининговое исследование.
• Иммунологические методики.

В зависимости от целей диагностики врачи назначают два вида исследований – специфический и неспецифический.

Анализ на маркеры гепатита B и C позволяет выявить вид вирусной инфекции, который стал причиной заболевания. Специфическими маркерами выступают антигены гепатитов. Под антигенами понимают отдельные части вируса.

Когда они попадают в благоприятную среду – человеческий организм, то активно участвуют в формировании новых вирусных клеток, что приводит к быстрому прогрессированию патологии.

К этому типу маркеров вирусных гепатитов относят антитела к имеющимся антигенам в крови больного. Такой вариант диагностики базируется на возможности организма продуцировать антитела – клетки иммунной системы, которые ориентированы на борьбу с патогенным возбудителем.

Если было выявлено наличие антител к антигенам, то это значит, что имеются патологические процессы в печени.

На фоне лабораторной диагностики вирусных гепатитов определение маркеров – один из достоверных способов, позволяющих на ранней стадии выявить болезнь.

Тяжелое заболевание. На ранней стадии отсутствуют негативные симптомы, морфологические признаки на УЗИ; основной путь передачи инфекции – парентеральный. Однако с помощью маркеров на ранней стадии можно диагностировать заболевание.

В таблице представлены маркеры, которые присутствуют в крови больного на фоне заражения гепатитом B:

С помощью алгоритма иммуноферментного исследования не только подтверждают отсутствие/наличие заболевания, но и выявляют стадию патологического процесса. Благодаря этому можно составить более точный прогноз, назначить результативную терапию.

Среди всех гепатитов считается наиболее опасным. Согласно статистике, в мире более 150 млн людей, имеющих патологию в анамнезе.

Каждый год умирает свыше 350 тыс. человек.

Плохая статистика обусловлена периодом инкубации недуга – отсутствием симптоматики либо их незначительным проявлением.

Выявить гепатит в организме можно посредством таких маркеров:

1. HCV-RNA. Присутствует наличие в крови и печеночных тканях, когда патология находится в острой стадии. Определяется даже сразу после заражения.
2. Anti-HCV total (совокупные антитела). В крови можно диагностировать через 6 недель после инфицирования. При положительном результате говорят о вирусном агенте в организме. Обнаруживаются даже после полного излечения.
3. Anti-HCV core IgG. В крови больного определяются только спустя 11 недель после инфицирования. Наличие IgG свидетельствует о хронической форме патологии.
4. Anti-NS3. Всегда выявляются в крови на фоне острого течения патологического процесса.

Маркеры anti-NS4 и anti-NS5 выявляются только в запущенных случаях, когда наблюдаются функциональные поражения печени. После терапевтического курса их количество уменьшается – это говорит об эффективности проводимой терапии.

Болезнь Боткина – патология, характеризующаяся острым течением.

Распространенная причина инфицирования – несоблюдение элементарных правил гигиены.

К характерной симптоматике относят:

• Пожелтение кожного покрова (не всегда, но в большинстве картин).
• Нарушение работы железы.
• Увеличение температуры тела.
• Боль в правом боку.

Какой-либо особенной подготовки к исследованию не проводится, желательно сдавать кровь натощак. Болезнь отличается быстрым течением, отсутствием тяжелых осложнений, простотой терапии.

При исследовании на болезнь Боткина определяют такие маркеры:

1. РНК вирусного возбудителя. Признак того, что вирус стремительно размножается.
2. Свидетельствует о самом факте вирусного заражения.
3. Анти-ВГА IgG. Или патология в анамнезе, либо наличие иммунитета к болезни Боткина.
4. Анти-ВГА IgM – острый вирусный процесс.

Гепатит E получил широкое распространение в странах с жарким климатом. Причина – антисанитарные условия проживания людей. Приводит к нарушению функциональности тракта пищеварения, боли в области правого ребра. Расшифровывать маркеры гепатита E должен врач.

В таблице представлены основы расшифровки:

Под разновидностью D понимают антропонозную инфекцию, диагностируют только совместно с гепатитом типа B.

Симптоматика этих видов похожа, однако когда присоединяется форма D, возрастают риски скопления свободной жидкости в брюшной полости, выраженной отечности.

Маркеры гепатита с расшифровкой анализа:

• РНК – активное распространение инфекционного процесса.
• Анти-ВГД IgM – будет означать острое течение.
• HDAg – наличие заболевания, если результат отрицательный – вируса нет.
• Анти-ВГД IgG – пациент ранее болел, есть иммунитет.

Разновидность G возникает только совместно с другими гепатитами в анамнезе человека – при формах B, C, D. Так как симптоматика проявляется только в исключительных случаях, чаще всего протекает в хронической форме.

ИФА позволяет выявить наличие вируса, а ПЦР показывает количественные характеристики. Для диагностики недуга используется несколько методов в совокупности. Прогноз благоприятный при своевременном обнаружении, усугубляется, если присутствует алкогольное/аутоиммунное поражение печени, ВИЧ-инфекция, СПИД и др. тяжелые заболевания.

При подозрении на гепатит пациент получает рекомендации от доктора по поводу диагностики; анализы можно сделать в частных лабораториях, например, Инвитро, Гемотест и др.

Примерная цена исследований:

1. Анализ на определение болезни – выявление anti-HAV IgG – качественное исследование – 600 рублей, срочно 1000 рублей. При качественном анализе результат отрицательный или положительный.
2. Количественное исследование на гепатит B путем определения anti-HBs 800 рублей (в результате будет конкретная цифра).
3. Диагностика гепатита C обойдется в 1500 рублей (два исследования).
4. Качественное ПЦР исследование гепатита B стоит около 1000 рублей, а количественное 4000 рублей. Ультрачувствительный качественный анализ – 3000 рублей, а количественный 3800 рублей.
5. Исследование на предмет устойчивости возбудителя к средствам противовирусного свойства – 12 000 рублей.

При выявлении заболевания дополнительно назначаются другие исследования, чтобы оценить состояние печени. Принцип лечения подразумевает комбинированную схему, в которую входят гепатопротекторы (средства улучшают работу печени), ферменты, противовирусные препараты, антибиотики (если выявлен инфекционный процесс) и др. лекарства.

источник

Эта группа морфологических маркеров неоднородна. Одни из них характерны, но непостоянны; другие и характерны, н постоянны.

К более характерным, но непостоянно встречающимся мор­фологическим маркерам вирусной природы заболевании печени (вирус гепатита В) следует отнести: матово-стекловидные гепатоциты, изменения ядер гепатоцитов в виде «песочных», тель­ца Каунсилмена, характерные ультраструктурные изменения гепатоцитов и звездчатых ретикулоэндотелиоцитов, киллерный эффект Т-лимфоцитов в отношении гепатоцита.

Матово-стекловидные гепатоциты часто встреча­ются при заболеваниях печени вирусной этнологии [Strorneyer F., 1980; Stepliano I., 19811. При светооптическом исследо­вании они представлены крупными клетками с бледноэозинофильной мелкозернистой цитоплазмой, которая отделена от оболочки клетки светлым ободком; ядро смещено к оболочке клетки (рис. 18, а). Цитоплазма богата гликогеном, в ней мож­но встретить гранулы липофусцина. Эти клетки хорошо видны при окраске препаратов ткани печени треххромовым методом по Массону н на полутонких срезах, заключенных в эпон и

17. Методы выявления HBcAg в гепзтоцитах.

а — иммунолюминесценция со специфической сывороткой. Х200: б — электронно-микроскопическое исследование; скопление включений высокой плотности. х36 000.

окрашенных толуидиновым синим [Блюгер А. Ф., Карташооа О. Я., 1978]. В цитоплазме таких гепатоцитов можно обнару­жить HBsAg с помощью гистологических, нммунофлюоресцентного (рис. 18, б) и электронно-микроскопического методов.

Матово-стекловидные гепатоциты обнаружены не только при заболеваниях печени вирусной (вирус гепатита В) природы. Их находят в ткани печени при лечении больных фенобарбиталом, миоклональной эпилепсии, гепатоцеллюлярном раке, а также у больных алкоголизмом после лечения антабусом [Stromeycr F., 1980; Desmet V., 1981; Stephanos I., 1981; Wolff-Pcetcrs C, 1982].

Во всех случаях матово-стекловидные гепатоциты имеют одинаковую ультраструктуру: расширение цистерн ГЦС, умень­шение числа элементов ЗЦС. Однако только при вирусной этно­логии процесса в цитоплазме матово-стекловидных гепатоцитов обнаруживают HBsAg с помощью гистологических и иммуногистохимического методов и находят характерные тубулярно-филаментозные структуры при электронно-микроскопическом исследовании [Мироджов Г. К., 1980; Schaff Z . 1982; Thaler Н., 1982]. В матово-стекловидных гепатоцитах, расположенных в узлах гепатоцеллюлярного рака, с помощью иммуногистохимического метода выявляют скопления фибрина и а-фетопротеина, вероятно, синтезируемых клетками опухоли [Stromcyer F., 1980; Stephanos I . 1981].

Число матово-стекловидных гепатоцитов, в которых обнару­живают HBsAg, различно при разных заболеваниях вирусной этиологии. Так, по данным I. Stephanos и М. Hadzijannis (1981), у больных хроническим гепатитом и циррозом печени эти клетки встречаются в 23—89% биоптатов, причем при персистирующем гепатите их значительно меньше, чем при актив­ном. У бессимптомных носителей HBsAg они встречаются в 100% наблюдений, причем до 20% гепатоцитов в пунктате пе­чени являются матово-стекловидными.

«Песочные ядра» (soundid nuclei) — также довольно характерны для вирусных заболеваний печени. Песочными на­зывают просветленные ядра, в которых хроматин располагается по периферии, а центральная часть представлена мелкогранулярнымн эозинофильными включениями (рис. 18, в). При забо­леваниях вирусной этнологии в таких ядрах с помощью иммунофлюоресцентного и электронно-микроскопического методов обнаруживают HBcAg.

Тельца Каунсил мена, возникающие при коагуляцион­ном некрозе печеночных клеток, — характерный признак вирус­ного гепатита. Эти тельца имеют вид четко отграниченных округлых образований с гомогенной эозинофильной цитоплаз­мой, в которой отсутствует ядро или видны его остатки (рис. 18, г, д). Локализуются тельца в печеночных балках или просвете синусоидов, где они могут быть фагоцитированы ЗРЭ.

18. Непрямые морфологические маркеры вируса гепатита В.

а — матово-стекловидные гепатоциты. Окраски гематоксилином и эозином. Х400: 6 — HBsAg в матово-стекловидных гепатоцитах.

При электронно-микроскопическом исследовании тельце Каунсилмена частично окружено мембраной, и нем видны тесно рас­положенные сморщенные органеллы клеток («мумифицирован­ные гепатоциты»), остатки ядерного хроматина [Фрейнд Г. Г. и др.. 1979; Wallnofer Н., 1974; Thaler II.. 1982).

Тельца Каунсилмена обнаруживают в печени не только при вирусном гепатите, но и при инфекционном мононуклеозе, жел­той лихорадке, при гепатите, вызванном простым и злокачест­венным герпесом [Bendersky N.. 1980; Еу I.. 1981; Vieira W. et al., 1983. При желтой лихорадке электронно-микроскопическое ис­следование позволяет выявить в тельцах липиды и скопления цероида, что имеет дифференциально-диагностическое значение (Vieira W. ct al., 1983).

Характерные ультраструктурные изменения гепатоцитов и ЗРЭ являются косвенным морфологическим подтверждением репликации вируса в клетках и персистенции его в ткани печени.

Изменения гепатоцитов представлены атипичной ультраструктурной организацией [Biezyskow N.. 1979): ядра имеют многочисленные поры, наружная оболочка их содержит боль­шое число рибосом, в цитоплазме наряду с уменьшением эле­ментов ЗЦС увеличено число свободных рибосом и полисом, характерное околомитохондриальное расположение канальцев ЗЦС нарушено. Полярность у таких гепатоцитов отсутствует; на плазмолемме, обращенной в сторону синусоида, обнаружи­ваются лишь единичные ворсинки. Важно подчеркнуть, что уль­траструктурная атипия выявляется даже в тех гепатоцитах, которые при светооптическом исследовании выглядят сохран­ными.

Ультраструктурные особенности гепатоцитов согласуются с результатами G. Jamada и соавт. (1982), показавших с помощью метода электронной микроскопии в сочетании с иммунопероксидазным методом, что сборка частиц вируса (частиц Дейна) при персистенции его в клетке происходит в цитоплазме и на поверхности гепатоцитов.

Изменения ЗРЭ свидетельствуют об их высокой синте­тической активности: крупные ядра клеток имеют изрезанные контуры, в цитоплазме большое число рибосом и полисом, цис­терны ЗЦС образуют гладкостенные вакуоли, заполненные рых­лым содержимым умеренной электронной плотности.

Киллерный эффект Т-лимфоцитов в отноше­нии гепатоцитов, обнаруживаемый при электронно-микро­скопическом исследовании, — достаточно характерным для за­болеваний вирусной этнологии феномен. Описаны 3 морфологи­ческие разновидности этого феномена [Фрейнд Г. Г. и др., 1979; Серов В. В. и др., 1982; Kawanishi Н., 1977; Gabos I. et al„ 1975): 1) периполез (peripolesis; греческая приставка peri — вокруг, снаружи и poleomai— бродить, блуждать) — соприкос­новение лимфоцита с гепатоцитом, что может сопровождаться лизисом мембраны гепатоцита; 2) инвагинация погружение участка плазмолеммы в цитоплазму гепатоцита с наличием лимфоцита в инвагинате; 3) эмпериполез (emperipolesis; греч. приставка ет — находиться внутри и греч. приставка peri вокруг, снаружи и греч. poleomai — бродить, блуждать) пенетрация лимфоцитом плазмолеммы и внедрение в цито­плазму гепатоцита с последующим его лизисом. Следствием этих изменений становятся очаги лизиса гепатоцитов с агрега­тами лимфоцитов. При этом лимфоциты имеют характерный вид (активные лимфоциты): крупные неровные ядра с большими ядрышками; в широком ободке цитоплазмы большое число эле­ментов ЗЦС. много рибосом и полисом; плазмолемма образует многочисленные выросты, местами нечетко контурирована, осо­бенно в участках контакта с гепатоцитами.

К постоянно встречающимся морфологическим маркерам ви­русной природы заболеваний печени следует отнести: 1) бел­ковую дистрофию (гидропическую и баллонную; 2) очаги колликвационного некроза, которые в зависимости от локализации и степени распространенности могут быть сту­пенчатыми. мостовидными и мультилобулярными; 3) воспа­лительный инфильтрат из лимфоцитов и макро­фагов (с примесью плазматических клеток и полиморфно- ядерных лейкоцитов); 4) перестройку структуры пе­чени с образованием ложных долек преимущественно мультилобулярного типа, разделенных широкими полями соединительной ткани.

источник

Диагностика HCV– поэтапный процесс, требующий всестороннего обследования пациента и проведения нескольких тестов. Но подтверждение заболевания происходит только в том случае, если обнаружены маркеры гепатита С. Это показатели лабораторных исследований, которые однозначно указывают на наличие вирусной инфекции.

Из-за особенностей проведения анализов, точный диагноз невозможно поставить на основании одного теста. Для получения полной клинической картины следует не только выявить специфические показатели, появляющиеся при инфицировании гепатитом С. Существует и ряд других признаков, которые служат дополнительным подтверждением наличия патологии.

Гепатит С – вирусное заболевание, избирательно поражающее клетки печени. В медицинской литературе чаще обозначается по русской или английской аббревиатуре – ВГС или HCV соответственно. Инфицирование провоцирует ряд изменений: начинается выработка иммуноглобулинов (их структура строго специфична в соответствии с протеиновым строением антигенов гепатита С), в плазме появляется патогенная РНК вируса, изменяется уровень форменных элементов крови, нарушается функционирование печени.

Подобные процессы не могут не отражаться на картине лабораторных показателей. Что значит маркеры гепатита С? Это основные параметры, играющие роль в диагностике острой и хронической формы HCV.

При расшифровке и определении, что означает тот или иной показатель анализов крови, принимают во внимание общую клиническую картину и наличие других заболеваний.

Большую роль играет:

• самочувствие человека (на гепатит Ц может указывать слабость, сонливость, субфебрильная температура, разнообразные нарушения пищеварения);
• наличие аутоиммунных расстройств;
• состояние иммунной системы;
• прием лекарств, влияющих на резистентность к инфекциям, на работу печени.

Помимо результатов анализов крови, учитываются данные инструментального диагностического обследования.

При оценке общего состояния больного важна:

• информация, полученная в ходе ультразвукового осмотра органов брюшной полости (при гепатите С обычно изменены размеры, а также очертания печени);
• данные процедуры «Фиброскан» (могут обнаруживаться очаги соединительной ткани, в зависимости от их размеров устанавливают степень фиброза печени либо подтверждают его отсутствие);
• данные томографии (процедура дает представление о структуре паренхимы печени, позволяет обнаружить очаги злокачественной малигнизации клеток);
• результаты гистологии после малоинвазивной пункционной биопсии печени (микроскопическое исследование образца тканей не может выявить вирусные частицы, но предоставляет информацию о наличии и тяжести цирроза, установить тип опухоли при ее наличии).

Многие пациенты интересуются, сколько маркеров учитываются при постановке диагноза острого либо хронического типа HCV. Ключевую роль играют параметры ИФА (серологические маркеры вирусных гепатитов) и ПЦР. Остальные показатели имеют вспомогательное значение для оценки общего состояния пациентов, определения стратегии терапии и последующей реабилитации.

Положительные маркеры вирусного поражения печени HCV – это специфические лабораторные показатели, которые позволяют однозначно подтвердить наличие возбудителя гепатита С в организме. Но выявление подобных параметров не освобождает от необходимости проведения дальнейшего обследования.

В целом все виды диагностических тестов можно разделить на лабораторные и инструментальные. Первые включают исследования биологических жидкостей: крови, мочи, кала, спермы, слюны, желудочного секрета, желчи, биоптатов тканей. Инструментальные проводят при помощи специального медицинского оборудования (ультразвуковых сканеров, томографов, рентгена, эндоскопов). При подозрении на гепатит С выполняются и лабораторные, и инструментальные тесты.

Специфические для HCV маркеры определяются только при анализе крови.

Основные разновидности тестов, применяемых в протоколах диагностики гепатита С, перечислены в таблице.

Прочие тесты (биохимия крови, общеклинические исследования, печеночные пробы) являются лишь вспомогательными.

Целью их проведения служит:

• определение степени поражения печени;
• оценка риска развития осложнений;
• выявление возможных сопутствующих заболеваний, которые могут прямо или косвенно повлиять на ход лечения (аутоиммунные патологии, онкологические новообразования, нарушения функции почек, кардиоваскулярные расстройства);
• выявление скрытых, латентно протекающих системных инфекций (ВИЧ, туберкулеза, хронического пиелонефрита, гломерулонефрита).

При сомнительных или положительных результатах дальнейшим ведением пациента должен заниматься врач. Только специалист может грамотно расшифровать анализы, а затем составить схему обследования. К этапу лечения можно переходить, когда определены основные маркеры гепатита C и выполнены дополнительные тесты.

Для получения достоверных результатов важно соблюдать все правила, как сдавать кровь. Негативное влияние на печень из-за неправильной диеты, употребления спиртных напитков и воздействия других факторов может исказить результаты тестирования. Основное требование – это соответствующая диета.

Принципы режима питания, которые нужно соблюдать как минимум за 5 дней до исследования, состоят в следующем:

1. Не есть жирные сорта мяса, рыбы, птицы. Их заменяют нежирной морской и речной рыбой, говядиной, индейкой, курицей, кроликом.
2. Ограничить употребление молока, кисломолочных продуктов с высоким процентом жирности. Разрешены нежирные йогурты, кефир, молоко, творог.
3. Исключается сдоба, любые кондитерские изделия, содержащие какао продукты. Из хлебобулочных изделий разрешены лаваши, черный хлеб.
4. Категорически запрещены любые алкогольные напитки.
5. Не пить сладкую газировку, энергетики.
6. Исключается фастфуд и колбасные изделия.

При приготовлении блюд руководствуются следующими рекомендациями:

• нужно обязательно следить за качеством приобретаемых продуктов питания;
• мясо, рыбу, птицу нужно употреблять в отварном или тушеном виде, разрешены блюда из фарша – котлеты (паровые), тефтели, суфле;
• каши и другие гарниры можно готовить с использованием растительного масла;
• разрешены бутерброды с маслом и сыром (через день во время завтрака или обеда, но не чаще 1 раза в сутки).

Диету нужно соблюдать не только перед анализами, но и до получения результатов и их расшифровки. При подтверждении диагноза гепатита С таким принципам питания следуют до восстановления печени.

Другие правила подготовки:

• сдавать кровь натощак;
• за несколько часов до посещения клиники нельзя курить;
• за 1–2 дня ограничить физические нагрузки (это не означает постельный режим, но от посещения тренировки или спортивного зала лучше отказаться).

При выборе клиники, где сдать кровь на маркеры гепатита С, можно руководствоваться несколькими критериями. Обследование проводят бесплатно (при наличии полиса ОМС и направления от терапевта) в поликлинике по месту жительства. Чтобы не ждать в очереди, некоторые пациенты предпочитают частные лаборатории. В таком случае документов от доктора не требуется, достаточно факта оплаты и личных данных. Последний способ удобнее и в плане получения результатов. Сейчас не обязательно повторно посещать лабораторию – бланк отправят по оставленному электронному адресу.

Сколько ждать результатов, определяют в лаборатории. Обычно этот срок не превышает 3 дней. Средняя стоимость анализов зависит от региона. Например, для Москвы цена исследования ИФА составляет около 500 рублей.

Диагностика гепатита С начинается со следующих маркеров: ИФА и ПЦР. Иммуноферментный анализ относят к группе рутинных и проводится как при подозрении на HCV, так и при профилактической диспансеризации. Как правило, назначают тест anti-HCV Тотал, определяющий общее количество антител без их дифференцировки на классы. В дальнейшем требуется проведение дифференцированного исследования, в ходе которого отдельно устанавливают титр иммуноглобулинов типа G и класса М.

Более расширенный анализ на серологические маркеры HCV (определение антигенов) выполняется по строгим показаниям из-за сложностей и дороговизны проведения обследования.

Следующий этап диагностики – полимеразная цепная реакция (ПЦР). Основной маркер наличия вируса – позитивный результат качественного теста. Обнаружение частиц патогена в плазме свидетельствует о заражении, дальнейшие тесты направлены на определение тяжести и активности вирусного патологического процесса.

К числу обязательных относят исследования, которые на первый взгляд не имеют отношения к поражению печени. Но результат этих тестов необходим для определения хода лечения и предупреждения возможных осложнений терапии, определения противопоказаний.

Так, нужно сдать кровь на:

• ВИЧ;
• иммунограмму;
• коагулограмму;
• биохимию;
• печеночные пробы;
• венерические заболевания;
• другие формы вирусных гепатитов (особенно, HBV);
• туберкулез;
• беременность (для женщин детородного возраста).

Но ход диагностического процесса иногда корректируют в зависимости от особенностей пациента. Например, получение ложных результатов ИФА возможно при:

• беременности;
• иммунодефиците (любой этиологии, в том числе вызванном приемом лекарств);
• онкологических заболеваниях;
• аутоиммунных процессах;
• тяжелых системных инфекциях;
• перенесенном HCV;
• у детей, рожденных у инфицированных матерей (до 3–5 лет).

При беременности проводят ИФА, но предупреждают женщину о возможности ложноположительных результатов. У остальных категорий пациентов серологическое исследование всегда выполняют вместе с качественной ПЦР. Косвенным признаком гепатита С, требующим ИФА, служит повышение уровня печеночных ферментов, билирубина и явные клинические признаки поражения печени.

С учетом роста количества выявленных случаев инфицирования тестирование на маркеры HCV рекомендуют проводить ежегодно всем людям старше 18 лет. Но в особую группу риска попадают работники здравоохранения, зараженные ВИЧ, посетители сомнительных нелицензированных салонов красоты, мастеров, выполняющих пирсинг и тату, перманентный макияж, занимающихся мезотерапией. Также регулярное обследование требуется мужчинам и женщинам, ведущим беспорядочную половую жизнь, особенно если были случаи незащищенных сексуальных контактов.

Несмотря на то, что практически все современные лаборатории в бланке указывают референсные значения, интерпретацию результатов всех исследований лучше доверить врачу. В целом, расшифровка серологических маркеров на гепатит С и данных ПЦР приведена в таблице ниже.

Бывает, что анализ на РНК отрицательный, а маркеры положительные. То есть в крови пациента были обнаружены антитела к HCV, но последующая качественная ПЦР продемонстрировала негативный результат.

Как правило, подобная ситуация – следствие ложноположительного ИФА, и человек, скорее всего, здоров. Но для исключения латентной инфекции тесты на обнаружение маркеров вируса проводят еще несколько раз с интервалом в 4–5 месяцев. Дополнительно необходимо точно установить причину ошибочного ИФА.

источник

Маркеры гепатита В.
Поверхностный антиген (HBsAg, hbs антиген, hbs ag, австралийский антиген) является поверхностным белком HBV. Он может быть обнаружен в крови при остром или хроническом гепатите. Этот антиген, как правило, вызывает образование антител к HBsAg, как часть нормальной иммунной реакции на инфекцию.
Положительный анализ крови на HBs антиген (анализ hbs, hbs антиген анализ, hbsag реакция) означает наличие острой или хронической HBV-инфекции (носительство hbs антигена) и возможность передачи вируса здоровым людям.
Отрицательный тест означает с большой долей вероятности отсутствие HBV в крови.
Антитела к поверхностному антигену (анти-HBs, anti HBsAg, HBsAb) представляют собой протекционные антитела, которые вырабатываются в ответ на попадание в организм поверхностного антигена.
Положительный тест означает:
Человек защищен иммунитетом от попадания HBV вследствие одной из двух причин:
успешно была сделана прививка;
организм справился с острой инфекцией и человек не может заразиться снова.
Антитела к сердцевинному антигену (анти-HBc) представляет собой антитела, которые вырабатываются в организме в ответ на присутствие в организме части вируса, называемого «основной антиген» или «сердцевинный антиген». Смысл этого теста часто зависит от результатов двух других тестов: анти-HBs и HBsAg.

Положительный тест означает инфицированность вирусом в настоящее время или прошлом.
IgM антитела к сердцевинному антигену (IgM анти-HBc) используется для выявления острой инфекции.
Положительный тест означает инфекцию в течение последних 6 месяцев или обострение хронической инфекции.
Ядерный «е» антиген гепатита B (HBeAg) является белком, который присутствует во время активной репликации HBV в тканях печени.
Положительный тест означает высокую инфекционность крови и высокий риск передачи вируса другим людям. Этот маркер используется также для контроля эффективности лечения ХВГ.
Антитела HBeAb или анти-HBe представляют собой белки, которые образуются в организме в ответ на «e» антиген гепатита В.
Положительный тест означает наличие хронического гепатита более низкой активности в связи с низким уровнем HBV в крови или может указывать на начало стадии реконвалесценции.
ДНК HBV — тест на присутствия ДНК вируса гепатита В у человека в крови.
Положительный тест означает, что вирус активно размножается в организме человека и такой человек несет потенциальную опасность заражения HBV. Если человек имеет хронический гепатит вирусной этиологии, наличие вирусной ДНК, также, означает, что человек, возможно, подвергается повышенному риску повреждения печени. Этот критерий используется и для контроля эффективности лекарственной терапии хронического гепатита В.

источник