Какой биохимический показатель позволяет заподозрить вирусный гепатит

При гепатите важно своевременное и адекватное лечение. Однако методы терапии и медикаменты, которые назначает врач, зависят от результатов исследования. Анализы крови при гепатите позволяют выявить концентрацию вируса, срок нахождения гепатита в организме и тип заболевания, поэтому данный вид исследования считается главным при подозрении на патологии печени.

Анализ крови назначается при многих заболеваниях, в том числе и при подозрении на гепатит. Таким образом, показаниями к назначению анализа являются клинические симптомы заболевания:

Тошнота

• тошнота;
• желтушность кожных покровов и слизистых;
• изменение цвета кала и мочи;
• повышенная утомляемость.

Однако на ранней стадии гепатит может себя не проявлять, как часто происходит при гепатите С, так что носительство вируса определить сложно. Также пациент может принять симптомы данного вирусного заболевания за признаки другой патологии, не связанной с вирусом. По этой причине необходимо пройти медицинское обследование и сдать кровь на анализ, поскольку этот метод определяет болезнь и дает врачу необходимую информацию для назначения адекватного лечения.

Симптомы гепатита могут иногда пропадать на некоторое время в период перехода от острой фазы к хронической – это опасно, поскольку пациент считает, что заболевание вылечено. Однако именно хроническая стадия характеризуется неприятными и выраженными симптомами, которые ухудшают качество жизни.

Исследование крови является обязательным пунктом медицинского обследования при подозрении на гепатит. Существуют следующие виды лабораторного исследования биологического материала:

ПЦР

• общий анализ крови;
• биохимический анализ;
• метод полимеразной цепной реакции (ПЦР);
• иммунологическое исследование крови.

Общий анализ отображает состояние пациента, однако он не несет специфической информации о вирусе гепатита. Тем не менее данные об изменениях уровня гемоглобина, лейкоцитов и лимфоцитов являются полезными для составления общей картины здоровья обследуемого человека. Как правило, в комплексе с анализом крови при гепатите сдается анализ мочи.

Биохимический анализ крови уточняет следующую информацию:

• количество печеночных ферментов, которые обнаруживаются в кровотоке вследствие поражения гепатоцитов (клеток печени);
• концентрация билирубина – прямого и общего;
• изменения в соотношении белковых фракций крови;
• уровень содержания триглицеридов.

Метод ПЦР позволяет определить тип вируса – его используют при подозрении на любое вирусное заболевание, так как он считается эффективным.

Иммунологическое исследование крови необходимо для выявления антител к вирусу и клеткам печени (при аутоиммунном гепатите). Тест имеет срок действия – для гепатитов B и C длительность составляет 12 недель. Анализ можно провести и в домашних условиях, для этого потребуются специальные полоски, которые выявляют антигены вируса B и антител к гепатиту C в биоматериале – слюне и крови.

Таким образом, кровь — это богатый источник информации о гепатите, который необходим для определения верного диагноза.

Чтобы анализы дали хороший, приближенный к действительности результат, необходимо правильно подготовиться к сдаче биоматериала в лабораторию. В случае сдачи крови важно проследить за потребляемыми продуктами, поскольку вещества, впитываемые кишечником, идут прямиком в кровоток и меняют концентрацию продуктов метаболизма. По этой причине кровь мутнеет, и показатели могут нарушаться.

Анализ крови сдается натощак

Рекомендуется делать анализ натощак утром. Перед забором крови поужинать следует за 10 часов, желательно легким, нежирным мясом или салатом. Потребление сахара значительно сказывается на качестве пробы, поэтому ни в коем случае нельзя пить сладкие напитки до посещения больницы. Иногда врачи даже советуют пропустить утренние гигиенические процедуры, поскольку в зубной пасте содержится сахар, а пасту можно случайно проглотить со слюной. До забора крови допускается выпить немного чистой воды, без добавок.

Нужно отметить, что и голодание в течение 2–3 суток также способно исказить результат анализа. Дело в том, что через пару дней без пищи в кровотоке повышается количество желчного пигмента – билирубина, который является важным составляющим исследования на вирус гепатита. Если человек не кушает в течение 2–3 дней, то в крови также снижается уровень глюкозы и увеличивается концентрация свободных жирных кислот и триглицеридов, но холестерин остается практически без изменения.

Чтобы добиться достоверности результатов, необходимо полноценное питание накануне сдачи крови. Стоит убрать из рациона чрезмерно соленые, жирные и острые блюда, поскольку вероятно повышение количества ферментов, жиров и калия. Кроме этого, жирные блюда делают кровь мутной: если употребить много сливочного масла вечером перед процедурой, исследование может быть затруднено. Также перед сдачей пробы следует отказаться от желтых и оранжевых овощей, так как они содержат большое количество каротиноидов, повышающих концентрацию билирубина.

До анализов нельзя есть фрукты и овощи оранжевого цвета

Диагностика гепатита методом лабораторных исследований требует совокупности коэффициентов, изменения которых указывают на наличие или отсутствие патологии. Расшифровать анализ может только специалист, однако некоторые показатели достаточно ярко отражают изменения в состоянии здоровья.

К основным показателям относят:

• иммуноглобулины;
• билирубин;
• АЛТ (аланинаминотрансфераза) и АСТ (астаспартатаминовая трансфераза) – печеночные ферменты;
• триглицериды;
• гемоглобин;
• лейкоциты.

Если результаты пробы крови не дали очевидных и однозначных результатов, то врач назначает дополнительные анализы.

У незараженного человека нет иммуноглобулинов анти-HCV, поскольку они появляются лишь при наличии вирусного белка гепатита.

Нормальная концентрация билирубина в крови человека составляет до 20 мкмоль/л, АЛТ колеблется от 0,1 до 0,68 мкмоль/л, а АСТ достигает значений в рамках 0,1-0,45 мкмоль/л.

В обычном состоянии у человека в крови от 0,4 до 2,9 ммоль/л триглицеридов. Норма гемоглобина составляет 120–160 г/л крови. Концентрация лейкоцитов – 4–9*109.

Специфические иммуноглобулины появляются вследствие реакции организма на ядра вируса гепатита и его геном. В первые 3–6 месяцев со дня заражения должны образоваться первые антитела – более долгий срок крайне редок.

Если билирубин выше 20 мкмоль/л, то у человека развивается желтуха – один из главных признаков перехода гепатита С в хроническую фазу. Повышение показателей АЛТ и АСТ указывает на острую стадию гепатита и начало разрушения гепатоцитов. Снижение же характерно для развития цирроза печени.

Содержание триглицеридов при гепатите увеличивается. Снижение концентрации лейкоцитов и гемоглобина показывает наличие вируса в крови, повышенной кровоточивости или иной кровяной патологии.

Анализ крови необходим для выявления вида, фазы и продолжительности нахождения вируса гепатита в организме человека. При этом нужно правильно подготовиться к сдаче, чтобы анализ дал максимально точный результат: для этого важно проследить за питанием и не кушать до непосредственной сдачи анализа. Расшифровку же необходимо доверить специалисту, поскольку анализ крови на гепатит имеет комплексный характер и имеет множество нюансов, характерных для различных заболеваний.

источник

Специфическая диагностика вирусных гепатитов основывается на обнаружении в крови больных или отдельных антигенных структур вирусов, или антител к ним, т.е. так называемых маркеров вирусных гепатитов. С этой целью обычно используются ИФА (иммуноферментный анализ) и полимеразная цепная реакция (ПЦР).

У вируса гепатита А имеется единственный антиген, обозначаемый как HAVAg или HAAg. Его трудно обнаружить в крови больных, поэтому чаще используется методика обнаружения антител к нему (антиHAVIg). Диагностический интерес представляют иммуноглобулины (антитела) 2-х классов — M и G. IgM при вирусных гепатитах появляется в крови в остром периоде заболевания и сохраняется в больших титрах в течение нескольких месяцев. IgG достигает значительных титров в периоде реконвалесценции и сохраняется в крови годами. Отсюда очевидно, что подтверждением диагноза вирусного гепатита А является обнаружение в крови больных антиHAVIgM. Обнаружение антиHAVIgG свидетельствует о перенесенном в прошлом заболевании.

У вируса гепатита В диагностическое значение имеют 3 антигена: HBsAg (оболочечный), HBeAg (маркер репликации), HBcorAg (сердцевинный, тесно связан с вирусной частицей и в крови не обнаруживается). Практически в крови больного можно выявить 2-а антигена (HBsAg и HBeAg) и 3-и вида антител (антиHBs, антиHBe и антиHBcor). Выявление в крови больного HBsAg и антиHBcorIgM свидетельствует об остром процессе. Остальные маркеры имеют вспомогательное и прогностическое значение, а также обязательно учитываются при хронических процессах. Полимеразная цепная реакция способна выявить в крови больных вирусную ДНК (HВV-ДНК).

При вирусном гепатите С методом ИФА улавливаются только антитела (антиHCV). Полимеразная цепная реакция способна выявить в крови больных вирусную РНК (HCV-РНК).

Лечение. Количество назначаемых лекарственных средств должно быть минимальным в связи с возможностью нарушения их метаболизма в пораженной печени. Полипрагмазия при вирусных гепатитах увеличивает частоту аллергических реакций, неблагоприятных исходов и осложнений. Основа лечения вирусных гепатитов — это

· Режим (постельный режим соблюдается до мочевого криза (светлеет моча, окрашивается кал))

· Диета (в остром периоде назначается стол 5А по Певзнеру с последующим переходом на стол 5, режим питания предусматривает прием пищи 4-6 раз в сутки, исключаются жирные, острые, жареные блюда, большая часть белков должна быть растительного происхождения (но грибы, фасоль исключаются), масло преимущественно сливочное, следует избегать грубой клетчатки, свежего хлеба, необходимое количество углеводов обеспечивается за счет овсяной, гречневой каш, фруктов).

· Дезинтоксикация (всем больным показана оральная дезинтоксикационная терапия — частое дробное, обильное питье до 2,5-3 л в сутки; при среднетяжелом и тяжелом течении используется инфузионная дезинтоксикационная терапия; с этой целью вводятся раствор глюкозы 5%, изотонический раствор натрия хлорида, реополиглюкин, солевые растворы; хорошим дезинтоксикационным эффектом обладают энтеросорбенты (энтеросгель и др.)

· Витаминотерапия (рекомендуется прием комплексных витаминных препаратов, аскорбиновой кислоты, аскорутина)

Рекомендуются десенсибилизирующие средства (тавегил, диазолин) в обычных терапевтических дозировках. Остальные направления патогенетической терапии зависят от особенностей течения гепатита у конкретного пациента (наличие сопутствующих заболеваний, тяжесть течения, индивидуальная переносимость препаратов, возраст и др.).

Надежные этиотропные средства для лечения гепатита пока не найдены. Неоднозначно отношение к применению интерферона, нет единого мнения относительно целесообразности назначения других противовирусных препаратов (видабарин, ацикловир, гелданамицин и др). Объясняется это многими факторами: различной чувствительностью гепатотропных вирусов к этим препаратам, возможностью их токсического действия на печень и мутагенного действия не только на вирусы, но и на ДНК клеток человека.

Индивидуальная профилактика. Для профилактики гепатитов А и В разработаны рекомбинантные вакцины. В экстренных случаях применяют человеческий иммуноглобулин.

Не нашли то, что искали? Воспользуйтесь поиском:

Лучшие изречения: При сдаче лабораторной работы, студент делает вид, что все знает; преподаватель делает вид, что верит ему. 9070 — | 7213 — или читать все.

195.133.146.119 © studopedia.ru Не является автором материалов, которые размещены. Но предоставляет возможность бесплатного использования. Есть нарушение авторского права? Напишите нам | Обратная связь.

Отключите adBlock!
и обновите страницу (F5)
очень нужно

источник

Хронический вирусный гепатит В на сегодняшний день является одной из наиболее актуальных проблем инфекционной патологии и гепатологии (как во всем мире, так и в Российской Федерации), в связи с широкой распространенностью, тяжестью течения заболевания и его последствий [1, 10]. Особенно остро стоит этот вопрос для педиатрической практики, так как является одним из важнейших факторов детской инвалидизации [5].

Исследования, проведенные нами ранее, позволили изучить различные элементы патогенеза хронического гепатита В у детей [2, 3], но вопросов, связанных с объяснением механизмов его развития и течения, остается достаточно много.

Повреждение и регенерация ткани печени, изменения ее функционального состояния при хронических гепатитах в значительной степени зависит от интенсивности и направленности реакций метаболизма [9]. Сравнение на разных стадиях хронизации вирусного гепатита B биохимических показателей крови [4], отражающих, в числе прочего, и функциональные возможности печени при этой патологии [6], позволят уточнить механизмы развития и некоторые элементы патогенеза указанного заболевания. В доступной литературе сведения об исследованиях подобного рода у детей практически отсутствуют.

Цель исследования: определение биохимических показателей крови у детей, больных хроническим вирусным гепатитом В, и выявление зависимости этих параметров от стадии хронизации заболевания.

Материалы и методы исследования

Обследованы 22 ребенка в возрасте 12-16-и лет с диагнозом «Хронический вирусный гепатит В», который устанавливался в условиях специализированного стационара с помощью набора стандартных клинико-биохимических, а также иммуноферментных методов исследования и подтверждался морфологически при пункционной биопсии печени (под контролем УЗИ) с учетом гистологического индекса степени активности (ГИСА) и гистологического индекса стадии хронизации (ГИСХ) – по В.В.Серову [8]. При этом у 12-и человек выявлена 2-я стадия хронизации процесса (слабая или умеренная степень активности с умеренно выраженными фиброзными изменениями в печени) и еще у 10-и – 3-я стадия хронизации (слабая или умеренная степень активности с тяжелым фиброзом в печени).

Функциональное состояние обменных процессов обследованных больных детей характеризовалось следующими биохимическими показателями: концентрацией в крови общего белка, альбуминов, мочевины, общего холестерина, глюкозы, общего билирубина, активностью аминотрансфераз (АлАТ и АсАТ) и щелочной фосфатазы, содержанием β-липопротеидов, пробой Вельтмана.

Контрольная группа состояла из 30 практически здоровых детей того же возраста, у которых исследовались аналогичные биохимические показатели крови.

Полученные данные обработаны методами статистического анализа, используемыми в биологии и медицине, с применением пакета прикладных программ Statistica 6,0 и соответствующих рекомендаций [7]. В таблицах представлены среднегрупповые показатели (М), ошибки средних (m), достоверность непараметрического U-критерия Манна-Уитни для различий между показателями групп (р), результаты однофакторного дисперсионного анализа.

Результаты исследования и их обсуждение

Сравнение среднегрупповых значений биохимических показателей больных детей с соответствующими показателями детей из контрольной группы показало наличие многих изменений оцениваемых параметров, зависящих от стадии хронизации гепатита B (табл. 1).

Биохимические показатели крови здоровых детей и больных детей с разными стадиями хронизации вирусного гепатита В (M±m)

источник

Биохимические показатели при вирусном гепатите А…………………………8

Гепатит А – одно из самых распространенных на Земле заболеваний человека. Оно встречается повсеместно. В мире ежегодно регистрируется около 1-4 млн случаев ВГА. В развивающихся государствах Африки Юго-Восточной Азии и Латинской Америки заболеваемость составляет 500-1000 на 100000 населения, а в высоко развитых странах восточной Европы, США – менее 10. В России частота встречаемости ВГА составляет 3000 человек на 100000 населения.[2]

Актуальность темы: за последнее время с проблемой вирусных гепатитов столкнулись миллионы людей. Эти опасные инфекционные заболевания получили колоссальную распространенность по всему миру во многом из-за несоблюдения правил гигиены и отсутствия должной информации о путях распространения вируса, методах защиты и лечения.

В данной работе была поставлена цель: выявить зависимость биохимических показателей при вирусном гепатите А.

Основныезадачи исследования:

· Проанализировать истории болезней с ВГА

· Составить таблицу биохимических показателей

· Провести анализ и выявить корреляцию БП

· Ознакомиться с литературой по ВГА

Гепатит А – это инфекционное заболевание печени, вызываемое вирусом.

Инфекция, обусловленная вирусом гепатита А, может развиться у любого человека. Возможны эпидемические вспышки заболевания.[9]

Вирус гепатита А имеет кислотоустойчивую оболочку. Это помогает вирусам, попавшим с загрязненными продуктами и водой, пройти кислый защитный барьер желудка.[4]

Вирус гепатита А устойчив в водной среде, поэтому эпидемии гепатита A часто имеют водный путь передачи.[4]

Вирус гепатита А отличается высокой иммуногенностью, после перенесенного заболевания формируется стойкий пожизненный иммунитет.[4]

Возбудитель гепатита A — РНК-содержащий вирус, диаметром 28 нм, устойчивый во внешней среде при комнатной температуре может сохраняться в течение нескольких месяцев, при положительной температуре близкой к нулю — несколько лет. Вирус погибает в кипящей воде в течение 5 минут, чувствителен к формалину и ультрафиолету, стандартным дезинфекционным средствам (хлорамин в концентрации 1 г на литр убивает вирус в течение 15 минут при комнатной температуре).[9]

Эпидемиология

Гепатит A — болезнь грязных рук. Источником возбудителя является больной субклинической или манифестной формой заболевания. Вирус выделяется с фекалиями больного в течение 2-3 недель, начиная с инкубационного периода, и сохраняется в первые дни желтухи. Особое эпидемиологическое значение имеют больные с бесжелтушными, стертыми формами гепатита A, число которых во много раз превышает число «желтушных больных».[7]

Клиническая картина

Гепатит А бывает двух форм: субклинической (большинство случаев) и манифестной — стертой, безжелтушной и желтушной; по тяжести — легкой, средней, тяжелой; по течению — острой и затяжной.

При манифестных формах заболевания выделяют следующие периоды: инкубационный, преджелтушный, желтушный (период разгара), реконвалесценции.[6]

Инкубационный период, как правило, составляет 3-4 недели. После чего следует преджелтушный период длительностью 5-7 дней, характеризующийся разнообразными клиническими проявлениями. Существует несколько вариантов его течения: гриппоподобный (лихорадочный, наиболее часто встречающийся), диспептический, астеновегетативный и смешанный.[6]

Гепатит А начинается остро — температура тела повышается до 38-39°C и держится в течение 1-3 дней. У больных наблюдается головные боли, общая слабость, разбитость, могут быть умеренно выражены признаки воспаления верхних дыхательных путей, отсутствие аппетита, дискомфорт и ощущение тяжести в эпигастрии.[2]

Через 2-4 дня у больного меняется цвет мочи, которая становится темно-коричневой, кал приобретает цвет белой глины, может быть неоформленным. При осмотре больного выявляют увеличенную, болезненную при пальпации, печень. Уже в этот период может быть увеличена селезенка.[6]

После этого наступает период разгара, который длится в среднем 2-3 недели. Наиболее полно картина заболевания представлена во время болезни средней тяжести с желтухой, которую сопровождает заметное улучшение самочувствия больных — у них нормализуется температура тела, уменьшается или исчезает головная боль. Но, при этом сохраняются слабость, астения, диспептические симптомы, тяжесть и распирание в области эпигастрия и правом подреберье. Желтуха протекает в три фазы: нарастания, максимального развития, угасания. Как правило, интенсивность желтухи соответствует тяжести болезни.[3]

При обследовании больных наблюдается брадикардия, артериальная гипертензия, приглушенные сердечные тона, язык обложен белым или желтоватым налетом, печень увеличена, болезненна.

Фаза угасания желтухи протекает медленнее, чем фаза нарастания, и характеризуется постепенным исчезновением признаков болезни, после чего наступает период реконвалесценции, продолжительность которого составляет от 1 до 12 месяцев — у больного восстанавливается аппетит, угасают астеновегетативные симптомы, нормализуются размеры печени и функциональные тесты.

Безжелтушные стертые формы гепатита А протекают легко, малосимптомно. В редких случаях развивается затяжная форма болезни продолжительностью в несколько месяцев, которая заканчивается выздоровлением.[6]

Прогноз при гепатите А, как правило, благоприятный (летальность составляет не более 0,04%) — примерно 90% больных полностью выздоравливают. В остальных случаях отмечаются остаточные явления в виде гепатофиброза, астеновегетативного синдрома. Гепатит А может привести к манифестации синдрома Жильбера с повышением в сыворотке крови уровня свободного билирубина.[6]

Диагностика

Наиболее постоянным лабораторным показателем для гепатита А является повышение активности АЛТ более чем в 10 раз по сравнению с нормой, которое выявляется уже в преджелтушный период и сохраняется в период разгара болезни. Нормализуется показатель после угасания клинических проявлений заболевания и служит критерием выздоровления. Ранним показателем нарушения пигментного обмена служит обнаружение уробилиногена и желчных пигментов в моче. При желтушной форме болезни наблюдается увеличение содержания билирубина в крови.[4]

Дифференциальная диагностика. Гепатит А следует дифференцировать в преджелтушный период от гриппа, ОРВИ, малярии; в период разгара болезни — от лептоспироза, инфекционного мононуклеоза, псевдотуберкулеза, желтой лихорадки.[4]

Ющук Н.Д., Е.А. Климова и И.В. Маев в статье вирусные гепатиты отмечают, что при ВГА характерно значительное повышение показателя тимоловой пробы, который может остаться измененным длительное время и в период реконвалесценции. [1]

Биохимические показатели при вирусном гепатите А

Биохимический анализ крови при гепатите включает в себя многие показатели, которые отражают функцию печени на момент исследования. Эти показатели очень изменчивы, поэтому для достоверной оценки течения гепатита необходимы многократные повторные их определения.[11]

К основным биохимическим анализам крови при вирусных гепатитах относятся печеночные ферменты (аминотрансферазы), билирубин, щелочная фосфатаза, общий белок и белковый спектр крови. Аминотрансферазы — аланиновая (АЛТ) и аспарагиновая (ACT) — это ферменты, которые находятся внутри печеночных клеток. В норме небольшие концентрации этих веществ определяются в крови. При повреждении печени, в частности, в результате вирусного воздействия, печеночные клетки разрушаются и печеночные ферменты обнаруживаются в крови в повышенных количествах. Пределы колебаний этих показателей очень широки и в определенной степени отражают остроту и активность воспаления печеночной ткани при гепатите. Основным ориентиром при этом служит уровень АЛТ. Для точного определения характера поражения печени этого исследования недостаточно, для этого существуют специальные диагностические методы, в частности, пункционная биопсия печени. Кроме того, значения аминотрансфераз могут меняться очень существенно и быстро, даже без всякого медикаментозного воздействия, т. е. самопроизвольно. В связи с этим при вирусном гепатите для мониторинга за течением болезни необходимо регулярное исследование крови на активность печеночных ферментов. Во время противовирусной терапии нормализация уровней АЛТ и ACT свидетельствует об эффективности лечения.[11]

Билирубин— это желчный пигмент, который образуется в крови человека в результате распада красных кровяных клеток (эритроцитов). Затем билирубин захватывается клетками печени и с желчью через кишечник выводится из организма. Попавший в печеночные клетки билирубин называется связанным, а находящийся в крови (т.е. до попадания в печень) — свободным. В норме небольшие количества билирубина (преимущественно за счет свободного) обнаруживаются в крови. При вирусном гепатите А в печени содержание общего билирубина (сумма свободного связанного) может повышаться, что выражается желтушным окрашиванием кожи и склер.[11] М.В. Маевская в своей статье «Гепатит А» отмечает, что билирубинемия при гепатите А в 70-80% случаев не превышает 100 мкмоль/л.[5]

Щелочная фосфатаза (ЩФ) — фермент, активность которого отражает процессы перемещения желчи по желчевыводящим путям (из печеночной клетки в желчный пузырь и далее в кишечник). Задержка оттока желчи бывает не только при вирусных гепатитах и циррозах, но и при медикаментозных поражениях печени, закупорке желчных протоков камнем, спайками, опухолью и т. д. При задержке оттока желчи (холестаз) уровень ЩФ в крови возрастает и превышает норму.[10]В.В.Василенко в своей статье

«Интерпретация печеночных тестов» обратил внимание,что период полужизни ЩФ составляет неделю,поэтому она начинает расти через 1-2 дня после наступления билиарной обструкции и сохраняется повышенной несколько дней после её разрешения. .[3]

Общий белок и белковый спектр крови — это группа показателей, которые отражают способность печени и клеток иммунной системы к выработке определенных белков. Общий белок крови состоит из так называемых альбумина и глобулинов. Печень синтезирует альбумин. Эта способность уменьшается при повреждении печеночных клеток, и тогда в анализе белкового спектра отмечается снижение уровня альбумина. Степень снижения соответствует глубине поражения печени.[11]

Практическая часть

Материалы и методы.

В качестве материалов нами были взяты истории болезней детей с диагнозами «гепатит А», которые нам предоставила детская городская больница №15. Истории болезней принадлежали в основном младенцам до года. Нас интересовали биохимические показатели, которые были определены во время поступления больных. Из биохимических показателей измерялись аминотрансферазы: АСТ, АЛТ; щелочная фосфотаза, билирубин общий, тимоловая проба, мочевина, глюкоза и белок общий.

При анализе историй болезней мы наблюдали повышение вышеперечисленных биохимических показаталей. Повышение уровня аминотрансфераз объясняется тем, что при вирусном гепатите А гепатоциты печени разрушаются и ферменты попадают в кровь, что и подтверждается при биохимическом анализе. F.de Ritis, G.Giusti, F.Piccinino, L.Cacciatore

в статье «Клиника инфекционных болезней» отмечают что, поражение печени сопровождается повышением активности сывороточных ферментов, из которых наиболее информативными являются уровни АСТ И АЛТ, которые иногда достигает 200-400% и редко не превышает 100%. [3]

Повышение уровня щелочной фосфатазы связано с задержкой оттока желчи из печени, т.к. повреждены гепатоциты.

Уровень билирубина при гепатите А повышается из-за того, что поврежденные клетки печени не могут захватить билирубин и вывести из организма вместе с желчью. Об этом изменении также пишет Ющук Н.Д в своей статье «вирусные гепатиты». [2].

Глюкоза в печени откладывается в виде гликогена, при разрушении же клеток печени глюкоза не откладывается, следовательно, уровень глюкозы понижается.

Результаты исследования.

При исследовании биохимических показателей были обнаружены повышение уровня АЛТ, АСТ, ЩФ и других показателей, о чем уже говорилось выше.

В норме АЛТ у новорожденных детей составляет 13-45 ЕД/л, при гепатите А это показатель повысился на 490%.

Дата добавления: 2015-11-05 ; просмотров: 1032 | Нарушение авторских прав

источник

Биохимический анализ крови при гепатите включает в себя многие показатели, которые отражают функцию печени на момент исследования. Эти показатели очень изменчивы, поэтому для достоверной оценки течения гепатита необходимы многократные повторные их определения.[11]

К основным биохимическим анализам крови при вирусных гепатитах относятся печеночные ферменты (аминотрансферазы), билирубин, щелочная фосфатаза, общий белок и белковый спектр крови. Аминотрансферазы — аланиновая (АЛТ) и аспарагиновая (ACT) — это ферменты, которые находятся внутри печеночных клеток. В норме небольшие концентрации этих веществ определяются в крови. При повреждении печени, в частности, в результате вирусного воздействия, печеночные клетки разрушаются и печеночные ферменты обнаруживаются в крови в повышенных количествах. Пределы колебаний этих показателей очень широки и в определенной степени отражают остроту и активность воспаления печеночной ткани при гепатите. Основным ориентиром при этом служит уровень АЛТ. Для точного определения характера поражения печени этого исследования недостаточно, для этого существуют специальные диагностические методы, в частности, пункционная биопсия печени. Кроме того, значения аминотрансфераз могут меняться очень существенно и быстро, даже без всякого медикаментозного воздействия, т. е. самопроизвольно. В связи с этим при вирусном гепатите для мониторинга за течением болезни необходимо регулярное исследование крови на активность печеночных ферментов. Во время противовирусной терапии нормализация уровней АЛТ и ACT свидетельствует об эффективности лечения.[11]

Билирубин — это желчный пигмент, который образуется в крови человека в результате распада красных кровяных клеток (эритроцитов). Затем билирубин захватывается клетками печени и с желчью через кишечник выводится из организма. Попавший в печеночные клетки билирубин называется связанным, а находящийся в крови (т.е. до попадания в печень) — свободным. В норме небольшие количества билирубина (преимущественно за счет свободного) обнаруживаются в крови. При вирусном гепатите А в печени содержание общего билирубина (сумма свободного связанного) может повышаться, что выражается желтушным окрашиванием кожи и склер.[11] М.В. Маевская в своей статье «Гепатит А» отмечает, что билирубинемия при гепатите А в 70-80% случаев не превышает 100 мкмоль/л.[5]

Щелочная фосфатаза (ЩФ) — фермент, активность которого отражает процессы перемещения желчи по желчевыводящим путям (из печеночной клетки в желчный пузырь и далее в кишечник). Задержка оттока желчи бывает не только при вирусных гепатитах и циррозах, но и при медикаментозных поражениях печени, закупорке желчных протоков камнем, спайками, опухолью и т. д. При задержке оттока желчи (холестаз) уровень ЩФ в крови возрастает и превышает норму.[10]В.В.Василенко в своей статье

«Интерпретация печеночных тестов» обратил внимание,что период полужизни ЩФ составляет неделю,поэтому она начинает расти через 1-2 дня после наступления билиарной обструкции и сохраняется повышенной несколько дней после её разрешения. .[3]

Общий белок и белковый спектр крови — это группа показателей, которые отражают способность печени и клеток иммунной системы к выработке определенных белков. Общий белок крови состоит из так называемых альбумина и глобулинов. Печень синтезирует альбумин. Эта способность уменьшается при повреждении печеночных клеток, и тогда в анализе белкового спектра отмечается снижение уровня альбумина. Степень снижения соответствует глубине поражения печени.[11]

источник

На основании только клинических данных бывает трудно дифференцировать вирусный гепатит и другие заболевания печени (особенно механическую желтуху). Поражение печени сопровождается повышением активности сывороточных ферментов. Мы установили, что наиболее информативными являются уровни ГОТ и ГПТ, а также коэффициент ГОТ/ГПТ. Для вирусного гепатита характерно увеличение активности обоих ферментов и снижение коэффициента ГОТ/ГПТ, который в норме превышает1.

При механической желтухе повышение активности аминотрансфераз может напоминать таковое при вирусном гепатите, однако эти состояния можно дифференцировать на основании определения уровней ферментов в динамике. Для подтверждения обструкции желчных путей можно определять уровни других ферментов, таких как щелочная фосфатаза и лейциламинопептидаза. Осадочные пробы и электрофорез белков плазмы имеют ограниченное значение в диагностике острого вирусного гепатита, однако они могут быть использованы для оценки активности заболевания и его прогрессирования с развитием хронического активного гепатита и цирроза. Функциональные печеночные пробы (нагрузочные) или определение сывороточного железа не позволяют подтвердить диагноз вирусного гепатита. Анализ сывороточного билирубина и различных фракций билирубина в крови также не имеют дифференциально-диагностического значения за исключением очень редких случаев. По этим причинам более важное значение имеют две группы диагностических тестов: (а) изменения уровни белков плазмы, которые часто отмечаются при вирусном гепатите; (б) повышение активности некоторых сывороточных ферментов.

Гипергаммаглобулинемия При остром вирусном гепатите с обратимым поражением печени отмечают умеренное снижение уров- ней альбумина в плазме и увеличение содержания b- и g-гаммаглобулинов, в то время как при остром необратимом поражении печени (острая атрофия) снижение концентрации альбумина сопровождается снижением уровней a- и b-глобулинов и увеличением концентрации g-глобулинов. При механической желтухе наблюдаются иные изменения уровней сывороточных белков – увеличение содержания a- и b-глобулинов при нормальной концентрации g-глобулинов. Подобные изменения отмечаются, если механическая желтуха развилась недавно, в то время как при персистировании желтухи появляются признаки функционального поражения печени, которые позволяют предсказать развитие билиарного цирроза (Viollier, 1957). Соответственно, гипергаммаглобулинемия свидетельствует в пользу диагноза гепатита только при кратковременном сохранении желтухи. Нормальный уровень g-глобулинов в таких случаях указывает на обструкцию желчных путей. Однако результаты электрофореза белков сыворотки не специфичны и имеют небольшое практическое значение при дифференциальной диагностике вирусного гепатита и механической желтухи. Осадочные пробы В прошлом осадочные пробы широко использовали для диагностики безжелтушного гепатита, а также хронического активного гепатита и цирроза печени. Однако этот метод имеет существенные ограничения, такие как субъективность, недостаточная точность и вариабельность результатов тестов, выполненных в различных лабораториях. Техническое совершенствование метода с целью повышения чувствительности, специфичности и воспроизводимости неизбежно приведет к его усложнению. При интерпретации результатов осадочных проб следует учитывать их неспецифичность. Например, при персистировании желтухи и развитии поражения печени осадочные пробы становятся положительными, как при остром или подостром вирусном гепатите. Кроме того, у значительного числа пациентов с желтушным и безжелтушным вирусным гепатитом осадочные пробы отрицательные. Применение осадочных проб в сочетании с ферментативным тестами не приводит к значительному повышению точности диагностики, однако результаты проб могут быть полезными индикаторами активности и прогрессирующего течения гепатита.

Тест Jirgl С помощью этого теста определяют фракции плазмы, которые растворимы в сульфосалициловой кислоте и не растворимы в фосфорновольфрамовой кислоте. Положительный результат пробы указывает на механическую желтуху. Однако результаты исследования оказываются ложноположительными в 25% случаев и ложноотрицательными в 10%. Результаты теста имеют ограниченное диагностическое значение (Jirgl, 1957; Coltorti et al., 1963). В течение последних нескольких лет при вирусном гепатите было установлено важное диагностическое значение повышения сывороточной активности различных ферментов, которая практически всегда нормальная у здоровых людей (De Ritis et al., 1955a, b). Первый вопрос, который сразу возникает: насколько специфичны эти ферменты с этиологической точки зрения. Ответ на этот вопрос отрицательный. Характер биохимических изменений плазмы при поражения печени (от дистрофии до некроза) зависит не от его этиологии, а от типа поражения. При гепатите преобладают некротические изменения печени, а сходное выделение ферментов в кровь происходит при некрозе невирусного прохождения (ишемическом, токсическом). Второй вопрос – специфично ли повышение активности ферментов для заболевания печени.

В идеале было бы желательным определять в плазме активность ферментов, которые содержатся только в клетках печени. Некоторые ферменты соответствуют этому требованию, однако они не имеют существенного диагностического значения. С другой стороны, определенные ферменты не обладают абсолютной органоспецифичностью, тем не менее, их активность претерпевает характерные изменения при вирусном гепатите. Сывороточные аминотрансферазы Этот тест был предложен De Ritis, Coltorti & Giusti (1955a, b) в 1955 году. В последующем те же авторы подтвердили его важность в диагностике вирусного гепатита (De Ritis, Coltorti & Giusti, 1956a,b; 1957; 1961; De Ritis, Ascione et al., 1959). Восьмилетний опыт применения и изучения роли сывороточных аминотрансфераз позволяет сделать следующие выводы: (1) При остром вирусном гепатите отмечается значительное увеличение активности ГОТ и ГПТ, которое иногда достигает 2000-4000% и редко не превышает 1000%.

Для гепатита характерно увеличение как ГОТ, так и ГПТ (до 40 норм). Активность ГПТ увеличивается в большей степени, поэтому коэффициент ГОТ/ГПТ снижается менее 1 (в норме он превышает этот показатель). (2) Сходные изменения наблюдаются при безжелтушном гепатите (соответственно, этот диагноз легко установить на основании анализа активности аминотрансфераз). (3) Повышение активности аминотрансфераз предшествует развитию желтухи и положительным результатам осадочных проб. Следует отметить, что при биопсии печени у пациентов с высокой активностью аминотрансфераз, но без желтухи обнаруживали типичные признаки активного гепатита. У таких больных желтуха может появиться только через 20-30 дней (Tolentino et al., 1957; Delkeskamp et al., 1959). (4) Активность аминотрансфераз не зависит от степени гипербилирубинемии, сывороточных уровней белков и результатов осадочных проб. (5) При вирусном гепатите активность аминотрансфераз вариабельная, что отражает течение болезни печени. (6) В период выздоровления абсолютные уровни аминотрансфераз нормализуются, однако коэффициент ГОТ/ГПТ остается низким в течение одной или нескольких недель, что иногда позволяет установить диагноз вирусного гепатита ретроспективно. (7)

Снижение коэффициента ГОТ/ГПТ менее 1 не дает возможность установить диагноз вирусного гепатита, если уровни двух ферментов нормальные или повышены умеренно. При других заболевания печени (гепатите с бактеральным гепатохолангитом, циррозе, опухоли) и заболеваниях других органов не наблюдали сходных изменений активности аминотрансфераз за очень редкими исключениями (например, распространенное опухолевое поражение с тяжелым некрозом печени или амебный гепатит). В некоторых случаях внезапный стаз и ретроградный ток желчи при механической желтухе (природа обструкции не имеет значения) сопровождается повреждением гепатоцитов, которое может привести к развитию некроза. Соответственно, возможно повышение активности аминотрансфераз, напоминающее таковое при вирусном гепатите (обычно значительно более умеренное). В таких случаях дифференцировать механическую желтуху от вирусного гепатита позволяет повторное определение уровни аминотрансфераз в динамике, даже при отсутствии других клинических критериев или лабораторных данных, таких как повышение активности щелочной фосфатазы или гипер холестеринемия. При механической желтухе повышенная активность аминотрансфераз имеет тенденцию к снижению, а коэффициент ГОТ/ГПТ нормализуется, в то время как при вирусном гепатите он остается очень низким (0,5-0,6), а концентрации двух ферментов не снижаются или иногда еще больше повышаются. Применение этих критериев позволяло диагностировать вирусный гепатит даже у пациентов с холелитиазом, у которых одним из первых симптомов была боль в правом подреберье. Диагностическое значение сывороточных аминотрансфераз было подтверждено при обследовании 263 пациентов с желтухой (у 195 имелся вирусный гепатит, у 23 – бактериальный холангиолит, у 45 – холестатическая желтуха). В зависимости от активности ферментов 195 больных вирусным гепатитом были разделены на две группы – с резким и менее выраженным повышением сывороточных уровней ферментов. Пациенты этих групп были затем распределены на две подгруппы в зависимости от коэффициента ГОТ/ГПТ (0,70-0,99 или вирусный гепатит в анамнезе или страдает им в настоящее время. Ответить на этот вопрос позволяет определение активности ферментов в динамике. В последнем случае уровни аминотрансфераз увеличиваются, а коэффициент ГОТ/ГПТ снижается менее 1. Уровни аминотрансфераз необходимо обязательно определять у всех доноров. Оценка эффективности лечения вирусного гепатита Определение активности ГОТ и ГПТ в динамике каждые 4-5 дней у пациентов с желтухой может быть полезным для оценки эффективности медикаментозной терапии. Мы провели контролируемое исследование, в котором изучали эффективность преднизона у пациентов с вирусным гепатитом (De Ritis et al., 1964). Полученные результаты не достигли статистической значимости, хотя средние уровни аминотрансфераз и билирубина в группе преднизона были несколько ниже, чем в группе плацебо. Отсутствие статистической значимости объяснялось тем фактом, что преднизон у большого числа пациентов не оказывал никакого влияния на лабораторные показатели. С другой стороны, в группе плацебо у определенной части пациентов наблюдалось раннее спонтанное улучшение уровней ферментов, которое было сопоставимым с таковым у больных, ответивших на лечение прднизоном. Определение уровня аминотрансфераз при оценке активности перенесенного вирусного гепатита В большинстве случаев повышенные уровни аминотрансфераз нормализуются через 3-6 недель после появления желтухи, в то время как коэффициент ГОТ/ГПТ остается значительно сниженным (менее 1) в течение от одной до нескольких недель. Нормальный уровень аминотрансфераз в динамике у пациента, перенесшего желтушную форму гепатита, может расцениваться как признак выздоровления даже при сохранении коэффициента ГОТ/ГПТ менее 1, если параллельно улучшаются клинические проявления (нормализация размеров печени и селезенки, белкового состава крови и т.д.).

В других случаях не происходит плавного снижения активности аминотрансфераз, которая периодически повышается, что, возможно, отражает вспышки некроза печени. Эпизоды увеличения уровней ферментов, по нашему опыту, часто сопровождаются снижением коэффициента ГОТ/ГПТ, в то время как при снижении активности ферментов этот коэффициент увеличивается. У ограниченного числа пациентов несмотря на исчезновение желтухи и улучшение общего состояния уровни аминотрансфераз остаются высокими, а их отношение составляет менее 1. Подобные изменения могут сочетаться с диспротеинемией и положительными осадочными пробами, но могут и не сопровождаться другими лабораторными признаками активности заболевания. Повышение активности печеночных ферментов может предшествовать новым эпизодам желтухи (рецидивирующий гепатит). В других случаях сохраняющиеся биохимические изменения не сопровождаются рецидивами желтухи, однако печень постепенно увеличивается в размерах. При биопсии печениу пациентов с повышенными уровнями аминотрансфераз обнаруживали отчетливые признаки активного и прогрессирующего гепатита. В таких случаях часто отмечают хроническое течение гепатита и тенденцию к развитию цирроза. По нашему мнению, активность аминотрансфераз является наиболее надежным признаком активности гепатита. ЗАКЛЮЧЕНИЕ Вирусный гепатит часто очень трудно дифференцировать от механической желтухи. Многочисленные исследования, проводившиеся в разных странах мира на протяжении последних 8 лет, позволили сделать вывод, что “трансаминазовый тест”, предложенный De Ritis, Coltorti & Giusti в 1955 году остается самым информативным, так как при вирусном гепатите наблюдаются характерные изменения активности ГОТ и ГПТ, позволяющие установить диагноз в 98% случаев. При остром вирусном гепатите их уровень иногда увеличивается на 2000-4000% (обычно не менее 1000%). При этом концентрация ГПТ увеличивается в большей степени, чем ГОТ, поэтому коэффициент ГОТ/ГПТ снижается менее 1.

Повышение уровней аминотрансфераз предшествует развитию желтухи и появлению положительных печеночных проб. При биопсии печени у пациентов без желтухи, но с высокой активностью аминотрансфераз обнаруживали типичные признаки активного гепатита. В таких случаях желтуха развивалась позднее – через 20-30 дней. Снижение коэффициента ГОТ/ГПТ менее 1 нельзя считать характерным для вирусного гепатита, если активность ферментов нормальная или повышена умеренно. Сходные изменения активности ферментов за очень редкими исключениями не наблюдаются при других заболеваниях печени. Иногда внезапный стаз желчи при недавно развившейся механической желтухе сопровождается повреждением гепатоцитов, которое приводит к их некрозу и изменению активности аминотрансфераз, характерному для вирусного гепатита. В таких случаях определение активности ферментов в динамике облегчает дифференциальный диагноз даже при отсутствии клинических критериев или других лабораторных изменений. В сомнительных случаях проводят дополнительные исследования: определение уровней щелочной фосфатазы и лейциламинопептидазы, осадочные пробы, электрофорез белков, измерение сывороточного уровня железа или СОЭ. Активность аминотрансфераз имеет важное значение для оценки активности подострого и хронического гепатита и эффективности лечения, а также для диагностики безжелтушного гепатита и носительства вируса среди доноров крови. Сохранение повышенных уровней аминотрансфераз в сочетании со снижением коэффициента ГОТ/ГПТ – это чувствительный показатель активности болезни.

источник

Гепатит А коварен тем, что заразившийся представляет угрозу для окружающих последние пять дней инкубационного периода, когда заболевание протекает в скрытой форме. Люди с хорошим иммунитетом переносят болезнь Боткина легко, без желтушности, при этом так же активно высевают вирус, по нескольку миллиардов в сутки, для заражения хватит 100 особей.

По симптомам заболевания печени схожи с проявлениями ОРВИ, поэтому присутствие в крови патогена заподозрить всё-таки можно, особенно если был контакт с выявленным больным, или человек находился в зоне возможного поражения. Вирус гепатита А живуч, длительное время живет на поверхностях, к которым прикасался больной, в воде он спокойно существует до 10 месяцев.

Показатели крови меняются, если печень поражена. Выявить присутствие патогена помогает анализ на гепатит А. По результатам несложно установить факт заражения. Специальные маркеры определяют в крови вирусы гепатита А, антигены к заболеванию, их концентрацию. Исследования проводятся в диагностических и профилактических целях, в первую очередь обследуют людей группы риска.

На нарушения работы печени указывают отклонения некоторых показателей от нормы общего анализа крови, когда кровь берут из пальца. При воспалительном процессе любой этиологии изменяется скорость осаждения эритроцитов.

Развернутую картину состояния здоровья позволяют получить биохимические исследования проб, взятых из вены. Например, билирубин: по его концентрации судят о присутствии патологических изменений в паренхиме. На заболевание указывают сразу несколько показателей. Но установить факт заражения по биохимическому анализу нельзя.

Вирус гепатита А выявляется по ферментам, которые организм начинает выделять, когда патоген попадает в гепатоциты. С большой точностью определяют гепатит А анализы:

• Anti-HAV-IgG на наличие анител класса IgG, они появляются в крови когда организм начинает противостоять вирусу гепатита А и после прививок, когда вырабатывается иммунитет;
• Anti-HAV-IgM выявляет антитела класса IgM, их количество возрастает в период заболевания, резко снижается при выздоровлении;
• тест на РНК-вирус, этот генетический анализ проводится методом ПЦР (полимеразная цепная реакция), исследуется сыворотка крови.

Существует утвержденный Минздравом список лиц, которые регулярно проходят обследования, это:

• сотрудники медицинских учреждений;
• кадровый состав и учащиеся образовательных учреждений (детских садов, школ, специализированных учебных заведений);
• специалисты, контактирующие с неорганизованными детьми в группах их дневного пребывания;
• работники интернатов;
• люди, занятые в сфере торговли, общепита, переработки продуктов питания;
• военнослужащие и гражданские лица, служащие в исправительных учреждениях.

• беженцы;
• лица, находящиеся в очаге возможного заражения (когда выявляются случаи заболевания, обследуют родственников заразившегося, соседей, коллег по работе или учебе);
• люди, устраивающиеся на работу в детские учреждения, школы, другие предприятия, где требуется санитарная книжка;
• сотрудники, выезжающие в командировки в страны с высоким уровнем заболеваемости гепатитом;
• туристы, посещающие страны Ближнего востока, Африки;
• люди, проживающие в районах, где канализационные стоки попали в питьевой водоем, вышла из строя система хозпитьевого водоснабжения.

В группе риска находятся и другие категории граждан, которым рекомендуется анализ крови на гепатит:

• люди, пренебрегающие правилами личной гигиены;
• любители орального секса, гомосексуалисты;
• асоциальные элементы, проживающие в антисанитарных условиях;
• жильцы общежитий, сотрудники учреждений, контактирующие с большим числом посетителей.

От болезни Боткина нет лекарственных средств, больному снимают интоксикацию, поддерживают защитные функции организма. Иммунитет самостоятельно вырабатывает антитела или они вводятся в процессе вакцинации. Они бывают двух типов, сначала появляются антивирусы IgM, затем IgG. Определяются они иммуноферментным анализом Anti-HAV.

Как оцениваются результаты исследований:

• при отсутствии возбудителя в крови не обнаруживаются АНТИ-HAV IgM, АНТИ-HAV IgG;
• когда вырабатывается иммунитет, у человека отрицательный результат теста АНТИ-HAV IgM, положительный на присутствие IgG-антител;
• если в крови одновременно есть антигены IgM и IgG, организм заражен вирусом гепатита А.

Качественную и количественную оценку вируса гепатита А позволяет получить анализ методом ПЦР. Ген в специальной питательной среде с содержанием особых ферментов заставляют искусственно размножаться, чтобы затем определить генотип вируса: 1а, 1b или 1с. Существует два типа анализа ПЦР:

• качественный определяет наличие штамма в крови, положительный ПЦР говорит о заболевании,
• отрицательный ПЦР у здоровых людей;
• количественный анализ позволяет определить концентрацию вируса, этот показатель характеризует степень опасности инфицированного для окружающих.

Метод ПЦР выявляет заболевание на ранних стадия, когда нет внешних проявлений желтухи. Когда гепатит А протекает в латентной форме, вовремя выявить вирус гепатита А очень важно, распространение болезни происходит молниеносно, особенно в контактных группах. Изолировав больного, можно предотвратить эпидемию.

Результаты помогают в постановке предварительного анализа, у больного снижается уровень гемоглобина, меняется показатель свертываемости – уровень тромбоцитов падает, количество эритроцитов увеличивается, лейкоциты, наоборот, быстро разрушаются.

Каких-то характерных изменений при гепатите А в анализе не выявляется. Можно судить только об интоксикации, ухудшении состояния здоровья зараженного. Такая клиническая картина характерна для многих заболеваний.

Отклонения от норм являются поводом проводить дальнейшие исследования. Какие показатели общего анализа крови при гепатите А считаются нормальными, указано в таблице.

Результаты ОАК при гепатите А

(концентрация стандартная, указанная в бланках)

дети до 3 лет

Возрастная группа:

дети от 3 до 12 лет

Возрастная группа:

лица, старше 12 лет

уровень лейкоцитов 6–17 5–11 4–9,5 количество лимфоцитов 2–9,5 2–9,5 1–5 концентрация эритроцитов 1–12 1–12 1–15 уровень тромбоцитов 100–450 100–450 180–400 СОЭ (скорость осаждения эритроцитов) 4–8 4–12 2–20