Диагностический титр вирусного гепатита в

3 дня, исключая воскресенье (кроме дня взятия биоматериала)

Иммуноферментный анализ (ИФА)

Гепатит В — заболевание печени, которое вызывается ДНК-содержащим вирусом гепатита В (HBV) (семейство Hepadnaviridae). Вирус гепатита В состоит из оболочки и нуклеокапсида. Оболочка содержит поверхностный антиген – “s” (HBsAg). В нуклеокапсиде находятся ядерный антиген – “core” (HBcAg) и антиген “e” (HBeAg), а также ферменты и ДНК вируса. В ходе иммунного ответа во время заболевания к антигенам оболочки и ядра вируса образуются различные антитела.

Поверхностный антиген вируса гепатита B (HBsAg) — полипептид изменчивых размеров, являющийся компонентом внешней оболочки частиц вируса гепатита В. Присутствующая в HBsAg детерминанта α, против которой преимущественно направлена иммунная реакция, является общей для всех частиц вируса гепатита B. Кроме того, присутствуют и другие важные детерминанты – либо d, либо y и w, либо r. В результате различного влияния (антивирусная терапия, действие иммунной системы) вирус может экспрессировать различные мутантные формы HBsAg (так называемые «убегающие» мутанты). Наличие некоторых мутантов может привести к невозможности выявить инфицированного человека с помощью обычно используемых доступных коммерческих тест-систем.

При данном исследовании определяются антитела к поверхностному антигену вируса гепатита B (anti-HBs) классов IgM и IgG (суммарные). Антитела к поверхностному антигену вируса гепатита B (aнти-HBs) являются специфическими (в основном IgG) антителами, направленными против поверхностного антигена вируса гепатита В. Anti-HBs антитела могут образовываться при заболевании гепатитом В или после специфической вакцинации. Антитела направлены против детерминанты α поверхностного антигена вируса гепатита В (HBsAg), которая является общей для всех субтипов, и против других специфических к субтипу детерминант.

Наличие anti-HBs антител показатель защитного иммунитета против вируса гепатита В. У большей части больных, перенесших острый гепатит В, эти антитела обнаруживаются через 3 – 4 месяца после исчезновения HBsAg и сохраняются до года в зависимости от активности иммунной системы пациента. У небольшой части больных возможно обнаружение антител при хроническом течении вирусного гепатита В. Определение уровня anti-HBs антител используется для оценки течения заболевания и его исхода (критерий развития протективного иммунитета против вируса гепатита В). Уровень anti-HBs антител редко бывает высоким и постепенно снижается, хотя у некоторых людей антитела могут сохраняться пожизненно. Обнаружение anti-HBs антител в скрининговых исследованиях свидетельствует о имевшей место в прошлом инфекции или вакцинации. Определение anti-HBs антител также часто используют для контроля эффективности вакцинации.

• Определение наличия иммунитета к вирусу гепатита В, в том числе при подготовке к вакцинации.
• Подтверждение эффективности вакцинации.
• Оценка течения заболевания.

• Кровь на исследования рекомендуется сдавать натощак, пить можно только воду.
• С момента последнего приёма пищи должно пройти не менее 8 часов.
• Взятие крови на исследование необходимо проводить до начала приема лекарственных препаратов (если это возможно) или не ранее чем через 1-2 недели после их отмены. При невозможности отмены лекарственных препаратов в направлении на исследование должно быть указано какие лекарственные препараты получает больной и в каких дозах.
• За день до взятия крови ограничить жирную и жареную пищу, не принимать алкоголь, исключить тяжёлые физические нагрузки.

Врач общей практики, инфекционист, гепатолог, гастроэнтеролог, терапевт, хирург, иммунолог, гематолог, акушер-гинеколог.

Положительный результат ( 10 Ед/л) может быть после перенесенного гепатита В, после успешной вакцинации, при остром гепатите В (фаза выздоровления), иногда при хроническом гепатите В с низкой инфекционностью.

источник

Гепатит В – это воспалительное заболевание печени, которое провоцирует вирус гепатита B (HBV). Этот опасный недуг имеет тяжёлое течение и грозит серьёзными осложнениями. Когда происходит инфицирование, вирус быстро размножается, провоцируя разрушение печеночных клеток (гепатоциты).

По медицинской статистике, у 10% пациентов с гепатитом процесс хронизируется. Тогда повышается вероятность цирроза и рака печени. Выявить патологию на ранних этапах проблематично, так как выраженные симптомы не наблюдаются. Нередко инфекция протекает без признаков желтухи (окрашивание кои и видимых слизистых оболочек в жёлтый цвет), из-за чего диагностика ещё больше затрудняется.

Вирус проникает в организм через кровь, например, при незащищённом сексе, приёме внутривенных наркотиков, посещении медицинских учреждений или салонов красоты, где используют не продезинфицированные инструменты и т. д.

Во время диагностики большое значение имеют маркеры гепатита B. С их помощью можно выявить заболевание на ранних этапах, определить степень его тяжести и составить грамотную схему лечения.

HBV устойчив к перепадам температуры, замораживанию, кислотной среде. Вирус содержит дезоксирибонуклеиновую кислоту в отличие от других возбудителей заболевания, геном которых представлен РНК (рибонуклеиновая кислота). Инфекционный агент встраивается в структуру гепатоцитов, блокирует синтез нормальных белков, вызывая воспаление печеночных клеток. Патогенные микроорганизмы могут поражать селезёнку, лимфоузлы, костный мозг. HBV тяжело отличить от клеток собственного организма, поэтому он может стать причиной аутоиммунного гепатита.

Анализы на маркеры вирусного гепатита B (ВГВ) и точная их интерпретация даёт возможность подтвердить инфекцию, спрогнозировать её течение, а также оценить силу иммунной реакции.

Цели диагностики для выявления маркеров ВГВ:

• Первичное выявление носителей вируса. Для этой цели определяют показатель HBsAg (показатель заболевания до появления первых симптомов), а также иммуноглобулины класса М (IgM), которые свидетельствуют об острой фазе инфекции.
• Подозрение на гепатит B с хроническим течением. Для выявления антител класса G (IgG), при которых болезнь имеет вялотекущее течение, назначают лабораторные исследования.
• Оценка напряжённости иммунитета. Анализ поможет определить пациентов из группы риска, которые нуждаются в вакцинации, и выявить силу реакции против HBV после иммунизации.
• Контроль над динамикой терапии. После исследования врач может вовремя скорректировать схему лечения.

Чтобы диагностировать болезнь, используют клинические анализы или экспресс-тесты. Они позволяют выявить разные стадии недуга: заражение, выздоровление, развитие.

Справка. Антигены – это чужеродные вещества для организма, при появлении которых образуются антитела. Это белковые молекулы или фрагменты HBV, которые появляются после инфицирования организма. Антитела – это белковые соединения, которые препятствуют размножению вируса и нейтрализуют его токсины.

ДНК вируса гепатита B свидетельствует о присутствии инфекционного агента. При длительном наличии этого маркер инфекция переходит в хроническую форму. Этот показатель указывает на то, что HBV стремительно размножается и разрушает печень. ДНК вируса гепатита B можно выявить на ранних этапах патологии.

HBs Ag – это ранний маркер гепатита В. Его ещё называют австралийским антигеном по той причине, что впервые его выявили у коренных жителей Австралии. Как упоминалось ранее, это внешняя белковая оболочка патогена. У этого генотипа выделяют несколько субтипов: ayw, aur, adw, adrq, adrq+, которые незначительно отличаются строением.

Этот маркер можно обнаружить во время инкубации гепатита или на протяжении 1 – 1,5 месяца после проявления первых симптомов. Если этот показатель обнаруживается в кровотоке более полугода, то повышается вероятность развития хронического ВГВ.

Донорскую кровь рекомендуется проверять на наличие HBs Ag. Однако многие иммуноферментные тесты не позволяют с точностью обнаружить данный маркер у пациентов. Тогда повышается вероятность ложноотрицательного или ложноположительного анализа на гепатит B. Ложноотрицательный результат получают, если исследование проводят через 3 – 4 недели после возможного инфицирования, если болезнь имеет пассивное течение, у пациента низкая концентрация HBs Ag либо редкие субтипы. Ложноположительный результат провоцируют различные факторы: неправильный забор биологического материала, онкологические заболевания и т. д.

Чтобы оценить течение патологии, а также спрогнозировать его исход, важно контролировать систему HBs Ag – анти-HBs. Антитела к поверхностному антигену вируса при гепатите B (острая форма) обнаруживают через длительный промежуток времени после исчезновения HBs Ag.

Если анти-HBs вновь обнаруживаются, то это свидетельствует о том, что постинфекционный иммунитет сформировался. То есть пациент выздоровел после ВГВ.

Если антитела обнаружили во время острого течения инфекции или сразу после того, как исчез HBsAg, то это плохой признак. Тогда повышается риск тяжёлого гепатита B, который сопровождается признаками печеночной энцефалопатии (нервно-психические нарушения вследствие дисфункции печени).

При хроническом ВГВ оба маркеры могут появляться одновременно.

Антитела к HBs могут присутствовать до конца жизни.

Анти-HBsAg – это единственные составляющие иммунной системы, которые обладают защитными свойствами. То есть эти иммуноглобулины защищают организм от повторного инфицирования гепатитом Б.

Сейчас для профилактики инфекции типа В применяют вакцины рекомбинантного HBsAg. Раствор вводят внутримышечно, после чего антитела начинают выделяться спустя 14 дней. Для формирования полноценного иммунитета прививку делают 3 раза.

Вакцинация считается успешной, если уровень антител превышает 100 мМЕ/мл. Через 9 – 12 лет их концентрация может немного снизиться. Если количество иммуноглобулинов не превышает 99 мМЕ/мл, то такая реакция иммунитета считается отрицательной или слабой.

Резистентность к вакцине наблюдается у пациентов с ВИЧ или весом выше 70 кг. По мнению медиков, чтобы достичь адекватных результатов иммунопрофилактики гепатита B, дозу препарата нужно увеличить.

Осторожно . Проводить вакцинацию лиц, которые перенесли ВГВ, не рекомендуется, так как это чрезмерная нагрузка на и без того, ослабленный иммунитет. Поэтому перед прививкой нужно провести исследования на наличие HBsAg, анти-HBs, а также HB core-антител. Если хотя бы один из маркеров присутствует в крови, то вакцинация противопоказана.

При снижении количества антител после иммунизации рекомендуется провести ревакцинацию (повторная прививка). Хотя в большинстве случаев поствакцинальный иммунитет сохраняется, даже если концентрация анти-HBsAg снижается. В дополнительной дозе препарата нуждаются только пациенты с ВИЧ, хронической недостаточностью почек, болезнями печени, а также лица, которым назначили гемодиализ (внепочечное очищение крови).

Этот антиген локализуется только в ядрах печеночных клеток заражённого человека. Обнаружить его можно при биопсии печени, в кровотоке HBcore-Ag не циркулирует. Из-за того что антиген занимает сердцевинное положение в вирусной частице, он обладает высокой иммуногенностью. Именно по этой причине антитела к нему начинают выделяться практически с первых дней болезни, когда внешние симптомы ещё отсутствуют.

Антитела к HBcore-Ag делят на 2 вида: иммуноглобулины класса М (IgM) и G (IgG). IgM выявляют ещё во время латентного периода, когда клинические проявления отсутствуют. Этот маркер свидетельствует о ВГВ с острым течением. Его можно наблюдать от 6 месяцев до 1 года, а после излечения он исчезает. IgM обнаруживают, когда хронический процесс обостряется.

Анализ на IgM и IgG помогает диагностировать гепатит B в «серонегативный» период, когда отсутствую другие HBS-маркеры.

Справка. Иногда HBcore-IgM и IgG могут указывать на заболевания костно-мышечной системы.

Такой антиген гепатита B, как HBeAg обнаруживается в кровотоке во время инкубации или при первых симптомах болезни. Если у больного определяют высокую концентрацию этого маркера, то он требует особого внимания. Если его активность сохраняется на протяжении 3–4 недель, то повышается вероятность перехода инфекции в хроническую форму. Снижение его уровня или полное отсутствие свидетельствует о выздоровлении.

При появлении этого антигена повышается заразность крови и других биологических жидкостей больного. Если острый гепатит протекает легко, то уровень HBeAg уменьшается спустя 20–40 дней после заражения. При этом одновременно повышается концентрация анти-HBe, пока они полностью не замещают антигены.

Быстрое увеличение количества антител свидетельствует о скором выздоровлении, которое исключает возможность перехода инфекции в хроническую форму. Если концентрация данных маркеров низкая или они отсутствуют, то повышается риск хронизации патологического процесса.

Если при гепатите B с хроническим течением количество HBeAg и ДНК вируса повышается, то это говорит о том, что его активная репликативность (способность к воспроизведению подобного себе потомства) сохраняется. Когда уровень антигена и ДНК снижается, речь идёт об интегративном гепатите, когда генный аппарат вируса и гепатоцита объединяются.

Иногда при инфицировании штаммом «е» или мутации инфекционного агента HBeAg может не проявляться, при этом его антитела присутствуют, а способность к размножению сохраняется. Тогда уровень ДНК HBV превышает 10˄5 копий/мл.

После того как человек выздоравливает, антитела к HbeAg сохраняются от полугода до 5 лет.

Лабораторная диагностика гепатита B помогает обнаружить серологические маркеры, ДНК, определить стадию инфекции и спрогнозировать её исход. Наиболее информативным считается анализ крови. Перед исследованием запрещено принимать пищу на протяжении 8 часов до назначенного времени.

Чтобы выявить HBV, применяют следующие анализы:

• ПЦР (полимеразная цепная реакция) для выявления ДНК вируса.
• Качественное выявление антител класса Ig G к Hbc и HBsAg.
• Исследование крови, которое позволяет определить HBeAg и иммуноглобулины класса М к HBcor.

С помощью иммунологических тестов по нескольким маркерам можно дополнить картину:

• Обнаружение вирусных частиц HBsAg может указывать на наличие вируса, хотя нередко их обнаруживают у здоровых людей. Отрицательный результат – до 0,05 МЕ/мл, положительный – более 0,05 МЕ/мл.
• HBe-антиген обнаруживают почти у каждого больного. Этот маркер свидетельствует об остром гепатите и высокой заразности больного. Отсутствие белка – это норма.
• Антитела класса М указывают на острый BГВ, кровь и другие биологические жидкости больного заразны, существует вероятность хронизации процесса. У здорового человека этот маркер отсутствует. Иммуноглобулины класса G свидетельствуют о том, что иммунитет против болезни сформировался.
• Антитела к HBe – это признак благоприятного течения инфекции и формирования иммунной защиты. Такое же значение имеет маркер анти-Hbs.

Метод ПЦР – это современный и высокоинформативный анализ на гепатит Б, который позволяет выявить ДНК HBV в гепатоцитах. Медики выделяют следующие виды исследования:

• Качественное ПЦР назначается при подозрении на ВГВ. Если результаты колеблются от 10 до 500 МЕ/мл, а уровень ДНК низкий, то HBV не обнаружен.
• Количественное ПЦР дает представление о том, насколько показатели крови больного далеки от норм. Это исследование позволяет определить фазу заболевания и составить тактику лечения. Количественный анализ более чувствительный, чем качественный. Врач подсчитывает обнаруженные ДНК, которые выражают в копиях на мл или МЕ/мл.

Чтобы правильно расшифровать анализы, нужно сравнить результаты с нормальными показателями и сопоставить их с присутствующими симптомами гепатита B. При правильной расшифровке качественных и количественных характеристик маркеров гепатита врач выявит инфекцию, определит её стадию, форму и составит прогноз.

Гепатит B – это опасная патология, которая не имеет яркой выраженности и часто приобретает хроническое течение. Серологические маркеры помогут выявить недуг даже на ранней стадии, когда вероятность осложнений ещё минимальная. Предупредить ВГВ поможет вакцинация. Чтобы подстраховать себя, рекомендуется время от времени сдавать анализ на маркеры гепатита B.

источник

Показатель наличия защитного иммунитета против вируса гепатита В. Anti-HBs-антитела у большей части больных, перенесших острый гепатит В, обнаруживаются в отдаленный период, спустя длительное время после исчезновения HBs-Ag. Продолжительность этого разрыва обычно составляет 3–4 мес с колебаниями до года, в зависимости от особенностей иммунного статуса и активности иммунной реакции пациента. Лишь у небольшой части больных обнаруживают этот тип антител при хроническом течении вирусного гепатита В с продолжающей-ся HBs-антигенемией. Определение уровня anti-HBs-антител используют для оценки течения инфекционного процесса и его исхода (в качестве критерия развития протективного иммунитета против вируса гепатита В).Титр anti-HBs-антител редко бывает высоким и постепенно снижается вплоть до неопределяемых концентраций, хотя у некоторых людейanti-HBs-антитела могут сохраняться пожизненно. Обнаружение anti-HBs-антител в скрининговых исследованиях подтверждает имевшую место в прошлом инфекцию вирусом гепатита В. У 10–15 % людей после перенесенного гепатита В и выздоровления (даже спустя годы после исчезновения HBsAg) anti-HBs-антитела могут не выявляться.Определение anti-HBs-антител часто используют для контроля эффективности вакцинации против вируса гепатита В. В отличие от естественно приобретенного иммунитета, при иммунитете, развивающемся после вакцинации, пациенты становятся anti-HBs-положительными и anti-HBc-отрицательными. Исследование титра anti-HBs-антител проводят до вакцинации, после ее окончания и через 5 лет после вакцинации. Минимальный защитный уровень anti-HBs-антител и рекомендуемые сроки повторного вакцинирования указаны ниже:

Информация, касающаяся референсных значений показателей, а также сам состав входящих в анализ показателей может несколько отличаться в зависимости от лаборатории!

В пределах референсных значений:

1. Отсутствие гепатита В в анамнезе (если результаты исследования других маркеров гепатита В отрицательны).

2. Невозможность исключения острого гепатита В: инкубационный или острый периоды.

3. Невозможность исключения хронического гепатита В с высокой инфекционностью.

4. Невозможность исключения носительства HBs-антигена с низкой репликацией.

5. В случае обследования после вакцинации: эффект вакцинации не достигнут.

1. Определение наличия протективного иммунитета к вирусу гепатита В, в том числе при подготовке к вакцинации.

2. Подтверждение эффективности вакцинации.

3. Оценка течения иммунного ответа при вирусном гепатите В.

1. Успешная вакцинация против гепатита В.

2. Острый гепатит В: фаза выздоровления.

3. Хронический гепатит В с низкой инфекционностью (иногда).

Найдите этот анализ в другом населенном пункте

Гепатит В — это инфекционное заболевание печени. Для него характерно разнообразие клинических проявлений, начиная от неярко выраженных субклинических форм и заканчивая явлениями печеночной недостаточности, цирроза или рака печени. Антитела к гепатиту В — это белковые соединения, которые вырабатываются в ответ на проникновение вирусных антигенов — структурных элементов возбудителя. В клинической практике они также носят название маркеров. В данном случае возбудителем является HBV — вирус гепатита В.

При попадании вируса гепатита наш организм начинает вырабатывать антитела. Их можно определить с помощью серологических методов — реакций взаимодействия антигена и антитела. К таким принадлежит ИФА — реакция иммунофлюоресценции, а также ИХЛА — иммунохемолюминесцентный анализ. Материалом для определения маркеров вирусного гепатита В может быть или цельная кровь, или плазма.

Поверхностный антиген HBsAg. Этот чужеродный белок появляется через 8–12 недель после заражения, то есть фактически в инкубационный период. Его можно определить раньше, чем появятся биохимические маркеры — АЛТ (аланинаминотрансфераза) и АСТ (аспартатаминотрансфераза) — и какая-либо симптоматика. Такие антигены циркулируют в крови еще четыре–шесть месяцев, а их наличие после этого периода считается признаком хронической формы болезни.

Антитела класса анти-HBs. Являются ответом на проникновение в организм HBsAg. Появляются после исчезновения последних. Поэтому определение таких маркеров считается признаком реконвалесценции — выздоровления больного. Также следует заметить, что у значительного количества населения, перенесшего гепатит В, эти антитела циркулируют в крови на протяжении всей оставшейся жизни. Поэтому их также изучают с целью определения эффективности и целесообразности вакцинации.

В последние годы распространяется метод количественного определения анти-HBs антител, с помощью которого возможно различить острый период инфекции и обычное носительство. Также это позволяет оценить эффективность лечения интерфероном.

Антиген HВсore. Является компонентом сердцевины вируса. Это оболочка, которая сохраняет генетический его аппарат. В свободном состоянии отсутствует в организме. Его наличие можно определить только после воздействия на кровь реагентом.

Определяют через одну-две недели после заражения. Также этот антиген можно выявить при биопсии печени и исследовании биоптата.

Антитела анти-HBc IgM и анти-HBc IgG. Существует два вида маркеров такого типа. Их расшифровка помогает врачам и лабораторным диагностам уточнить характер течения болезни. Преимуществом этих антител является то, что их можно найти в крови даже в период так называемого серологического окна. Это промежуток времени, что лежит между исчезновением HBsAg и появлением анти-HBs. Наличие этого окна может быть причиной ложных негативных результатов при исследовании.

Продолжительность такого периода составляет от четырех до семи месяцев. Неблагоприятным прогностическим признаком является почти мгновенное появление антител к HBsAg после исчезновения самого антигена.

1. IgM анти-HBc являются маркерами острой формы вирусного гепатита. В ряде случаев их наличие может быть единственным критерием. Также их определяют в случае обострения хронического гепатита В. Выявление антител данного класса может иметь некоторые трудности. Например, у людей с ревматизмом определяются ложноположительные результаты, что ведет к диагностическим ошибкам. Кроме того, при очень высокой концентрации IgG происходит недостаточное выявление IgM анти-HBcor.
2. IgG анти-HBc появляются только спустя некоторое время после исчезновения из крови IgM (несколько недель). Со временем они становятся преобладающим классом. Сохраняются пожизненно вместе с анти-HBs, но в отличие от последних, не обладают никакими защитными свойствами. Анти-HBcor в 10 % случаев могут быть единственными признаками гепатита. Это объясняется тем, что иногда возникают микст-гепатиты, когда антиген HBsAg производится в очень малых количествах.

Антиген HBe; антитела к нему — анти-HBe. Этот антиген является маркером вирусной репликации. Репликация — это активное деление вируса путем построения и удвоения ДНК. Его наличие говорит о тяжелом течении болезни, а также если он выявлен у беременной женщины, то о высоком риске осложнений со стороны плода.

Расшифровка и определение антител к HBeAg позволяют подтвердить начало выздоровления и выведение возбудителя из организма. Если у пациента хронический вирусный гепатит В, то наличие этих антител тоже считается положительным признаком: говорит о прекращении размножения вируса. Существует особый феномен, когда в крови повышается концентрация вирусной ДНК и анти-НВе, но без увеличения количества антигена HBe. Такая ситуация показывает врачу-диагносту, что вирус мутировал, следует изменить тактику лечения. После перенесенного заболевания анти-HBe находятся в крови человека от пяти месяцев до пяти лет.

Согласно международным рекомендациям Европейской ассоциации по изучению заболеваний печени, врачам следует придерживаться таких правил:

1. Для скрининга используются тесты на определение HBsAg и анти-HBs, а также антител к HBcor.
2. Тесты для дальнейшей и более глубокой диагностики гепатита. К ним принадлежат определения антигена HBe и, соответственно, антител к нему. К этим исследованиям может причисляться также определение количества вирусной ДНК в крови методом полимеразной цепной реакции (ПЦР).
3. Дополнительные методы исследования, что дают возможность понять целесообразность лечения и определить его тактику. К ним относят биохимическое исследование крови, биопсию печени.

Известно, что вакцинирование людей, перенесших гепатит В, не только экономически нецелесообразно, но и опасно для пациента. Это объясняется тем, что дополнительная антигенная нагрузка может стать причиной возникновения гепатита, ассоциированного с вакциной. Именно поэтому перед тем как делать прививку, необходимо провести скрининг на определение HBsAg, анти-HBs и анти-HBcor. Если в крови выявляется присутствие хотя бы одного из вышеперечисленных маркеров, то необходимо отказаться от вакцинации. Но данная процедура, к сожалению, проводится крайне редко, что негативно сказывается на здоровье пациентов.

Также после вакцинации в 2–30 % случаев не наблюдается желаемого увеличения количества антител. Это связано с индивидуальными особенностями каждого человека. К ним принадлежат: возраст пациента, состояние других органов и систем, наличие первичного (врожденного) или вторичного (СПИД, тяжелые заболевания) иммунодефицита.

Антитела к антигену S вируса гепатита B, Антитела к поверхностному антигену, Антитела к антигену S, Антитела к Hbs, Anti-HBs, Печень и желчевыводящие пути. Гепатиты. Вирусные гепатиты, гепатит

3 дня, исключая воскресенье (кроме дня взятия биоматериала)

Иммуноферментный анализ (ИФА)

Гепатит В – заболевание печени, которое вызывается ДНК-содержащим вирусом гепатита В (HBV) (семейство Hepadnaviridae). Вирус гепатита В состоит из оболочки и нуклеокапсида. Оболочка содержит поверхностный антиген – “s” (HBsAg). В нуклеокапсиде находятся ядерный антиген – “core” (HBcAg) и антиген “e” (HBeAg), а также ферменты и ДНК вируса. В ходе иммунного ответа во время заболевания к антигенам оболочки и ядра вируса образуются различные антитела.

Поверхностный антиген вируса гепатита B (HBsAg) – полипептид изменчивых размеров, являющийся компонентом внешней оболочки частиц вируса гепатита В. Присутствующая в HBsAg детерминанта α, против которой преимущественно направлена иммунная реакция, является общей для всех частиц вируса гепатита B. Кроме того, присутствуют и другие важные детерминанты – либо d, либо y и w, либо r. В результате различного влияния (антивирусная терапия, действие иммунной системы) вирус может экспрессировать различные мутантные формы HBsAg (так называемые «убегающие» мутанты). Наличие некоторых мутантов может привести к невозможности выявить инфицированного человека с помощью обычно используемых доступных коммерческих тест-систем.

При данном исследовании определяются антитела к поверхностному антигену вируса гепатита B (anti-HBs) классов IgM и IgG (суммарные). Антитела к поверхностному антигену вируса гепатита B (aнти-HBs) являются специфическими (в основном IgG) антителами, направленными против поверхностного антигена вируса гепатита В. Anti-HBs антитела могут образовываться при заболевании гепатитом В или после специфической вакцинации. Антитела направлены против детерминанты α поверхностного антигена вируса гепатита В (HBsAg), которая является общей для всех субтипов, и против других специфических к субтипу детерминант.

Наличие anti-HBs антител показатель защитного иммунитета против вируса гепатита В. У большей части больных, перенесших острый гепатит В, эти антитела обнаруживаются через 3 – 4 месяца после исчезновения HBsAg и сохраняются до года в зависимости от активности иммунной системы пациента. У небольшой части больных возможно обнаружение антител при хроническом течении вирусного гепатита В. Определение уровня anti-HBs антител используется для оценки течения заболевания и его исхода (критерий развития протективного иммунитета против вируса гепатита В). Уровень anti-HBs антител редко бывает высоким и постепенно снижается, хотя у некоторых людей антитела могут сохраняться пожизненно. Обнаружение anti-HBs антител в скрининговых исследованиях свидетельствует о имевшей место в прошлом инфекции или вакцинации. Определение anti-HBs антител также часто используют для контроля эффективности вакцинации.

• Определение наличия иммунитета к вирусу гепатита В, в том числе при подготовке к вакцинации.
• Подтверждение эффективности вакцинации.
• Оценка течения заболевания.

• Кровь на исследования рекомендуется сдавать натощак, пить можно только воду.
• С момента последнего приёма пищи должно пройти не менее 8 часов.
• Взятие крови на исследование необходимо проводить до начала приема лекарственных препаратов (если это возможно) или не ранее чем через 1-2 недели после их отмены. При невозможности отмены лекарственных препаратов в направлении на исследование должно быть указано какие лекарственные препараты получает больной и в каких дозах.
• За день до взятия крови ограничить жирную и жареную пищу, не принимать алкоголь, исключить тяжёлые физические нагрузки.

Врач общей практики, инфекционист, гепатолог, гастроэнтеролог, терапевт, хирург, иммунолог, гематолог, акушер-гинеколог.

Положительный результат ( 10 Ед/л) может быть после перенесенного гепатита В, после успешной вакцинации, при остром гепатите В (фаза выздоровления), иногда при хроническом гепатите В с низкой инфекционностью.

источник

Комплексное исследование при подтвержденном вирусном гепатите В (HBV). Анализ маркеров инфекции позволяет установить клиническую стадию заболевания, иммунологический статус обследуемого, а также оценить эффективность лечения. Включает в себя определение белков вируса (антигенов), основных классов специфических антител, а также обнаружение ДНК вируса в крови.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

• Исключить из рациона жирную пищу в течение 24 часов до исследования.
• Не курить за 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Вирусный гепатит B (HBV) – инфекционное заболевание, которое является причиной серьёзных поражений печени. Зачастую гепатит B переходит в хроническую форму, его течение становится затяжным и провоцирует возникновение цирроза и рака печени.

Вирус гепатита B (Hepadnaviridae) содержит двухцепочечную ДНК, окруженную нуклеокапсидом размером 27 нм, в состав которого входит антиген HBcAg, и внешней оболочкой, содержащей антиген HBsAg. Этот антиген обнаруживается в крови за 6 недель до появления симптомов заболевания и может выявляться длительное время как при их наличии, так и в при их отсутствии (при хроническом гепатите и носительстве). На ранних стадиях заболевания присутствует у 90-95 % больных.

Особенностью вируса гепатита B является то, что он поступает непосредственно в кровь и циркулирует в ней на протяжении всего периода заболевания. У некоторых пациентов вирус в крови сохраняется всю жизнь. По этой причине источником заражения могут стать не только те, кто болен гепатитом в его острой форме, но также те, кто уже перенес данное заболевание, а также люди, у которых заболевание не проявляется, однако они являются носителями вируса.

Полное выздоровление регистрируется у 92-95 % больных острым гепатитом В, и лишь у 5-8 % из них отмечается переход заболевания в хроническую форму.

Гепатит B лечится исключительно в условиях стационара. Это заболевание в случае длительного течения является фактором риска развития первичной гепатоцеллюлярной карциномы (рак печени).

В жизнедеятельности вируса гепатита В различают две фазы: фазу репликации и фазу интеграции. В фазе репликации происходит воспроизведение (размножение) вируса. ДНК вируса проникает в ядро гепатоцита, где с помощью ДНК-полимеразы синтезируется нуклеокапсид, содержащий ДНК вируса, антигены HBcAg, HBeAg, которые являются основной мишенью иммунной системы. Затем нуклеокапсид мигрирует из ядра в цитоплазму, где реплицируются белки внешней оболочки (HBsAg), и, таким образом, происходит сборка полного вириона. При этом избыток HBsAg, не использованный для сборки вируса, через межклеточное пространство попадает в кровь. Полная сборка (репликация) вируса заканчивается презентацией его растворимого нуклеокапсидного антигена – HBeAg на мембране гепатоцита, где происходит его «узнавание» иммуноцитами. Антиген HBcAg серологическими методами не определяется, потому что отсутствует в крови в свободном виде. Определяется наличие в крови антител (anti-HBc) к этому антигену, вырабатывающихся вследствие его высокой иммуногенности.

Маркерами фазы репликации вируса гепатита В являются:

• выявление в крови антигенов HBeAg и anti-HBc (Ig M).

У 7-12 % больных хроническим вирусным гепатитом В возможен спонтанный переход фазы репликации в нерепликативную фазу (при этом из крови исчезает HBeAg и появляются anti-HBe). Именно фаза репликации обусловливает тяжесть поражения печени и контагиозность больного.

В фазе интеграции происходит интегрирование (встраивание) фрагмента вируса гепатита В, несущего ген HBsAg, в геном (ДНК) гепатоцита с последующим образованием преимущественно HBsAg. При этом репликация вируса прекращается, однако генетический аппарат гепатоцита продолжает синтезировать HBsAg в большом количестве.

Вирусная ДНК может быть интегрирована не только в гепатоциты, но и в клетки поджелудочной железы, слюнных желез, лейкоциты, сперматозоиды, клетки почек.

Фаза интеграции сопровождается становлением клинико-морфологической ремиссии. В этой фазе в большинстве случаев формируется состояние иммунологической толерантности к вирусу, что приводит к купированию активности процесса и носительству HBsAg. Интеграция делает вирус недосягаемым для иммунного контроля.

Серологические маркеры фазы интеграции:

• наличие в крови только HBsAg или в сочетании с anti-HBc (IgG);
• отсутствие в крови ДНК-вируса;
• сероконверсия HBeAg в anti-HBe (т.е. исчезновение из крови HBeAg и появление anti-HBe).

Пациенты, перенесшие инфекцию и имеющие антитела к вирусу, не могут повторно заразиться гепатитом B. В некоторых случаях полное выздоровление не наступает и человек становится хроническим вирусоносителем. Вирусоносительство может протекать бессимптомно, но в некоторых случаях развивается хронический активный гепатит B. Ключевым фактором риска активного вирусоносительства является возраст, когда человек был заражен: для грудных детей уровень риска превышает 50 %, в то время как для взрослых остается на уровне 5-10 %. Исследования показывают, что мужчины чаще становятся носителями, чем женщины.

HBsAg – поверхностный антиген вируса гепатита В

Поверхностный антиген вируса гепатита В (HВsAg) является белком, который присутствует на поверхности вируса. Обнаруживается в крови при остром и хроническом гепатите В. Самый ранний маркер. Достигает максимума к 4-6-й неделе заболевания. Сохраняется до 6 месяцев при остром гепатите, свыше 6 месяцев – при переходе заболевания в хроническую форму.

HBeAg – ядерный ‘е’-антиген вируса гепатита В

Антиген, находящийся в ядре вируса. Появляется в крови одновременно с HBsAg и сохраняется в течение 3-6 недель. HBeAg появляется в крови больного острым гепатитом В одновременно с HBsAg или вслед за ним и сохраняется в крови 3-6 недель. Указывает на активное размножение и высокий риск передачи вируса при половом контакте, а также перинатально. Инфекционность HBeAg-положительной сыворотки в 3-5 раз выше, чем HBsAg-положительной. Выявление HBeAg в крови более 8-10 недель свидетельствует о переходе заболевания в хроническую форму. При отсутствии репликативной активности вируса во время хронической инфекции HBeAg не выявляется. Его появление же свидетельствует о реактивации вируса, что чаще происходит на фоне иммуносупрессии.

При лечении вирусного гепатита В исчезновение HBeAg и появление антител к HBe-антигену свидетельствует об эффективности терапии.

anti-HBc (Ig M) – специфические антитела класса IgМ к ядерному ‘core‘ антигену вируса

Начинают вырабатываться еще до клинических проявлений, указывают на активную репликацию вируса.

Появляются в крови через 3-5 недель, сохраняются в течение 2-5 месяцев и исчезают в период выздоровления.

anti-HBc – суммарные антитела (IgM+IgG) к ядерному ‘core’ антигену вируса гепатита В

Важный диагностический маркер, особенно при отрицательном значении HBsAg. Антитела класса IgM вырабатываются через 3-5 недель. Антитела класса IgG начинают вырабатываться с 4-6-го месяца и могут сохраняться пожизненно. Подтверждают контакт организма с вирусом.

anti-HBs – суммарные антитела к поверхностному антигену вируса гепатита В

Появляются медленно, достигая максимума через 6-12 месяцев. Указывают на перенесенную инфекцию или наличие поствакцинальных антител. Выявление этих антител свидетельствует о выздоровлении и развитии иммунитета. Обнаружение антител в высоком титре в первые недели заболевания может быть связано с развитием гипериммунного варианта фульминантного гепатита В.

anti-HBe – антитела к ‘е’-антигену вируса гепатита В

Появляются на 8-16-й неделе после инфицирования у 90 % больных. Свидетельствуют о завершении острого периода болезни и начале периода реконвалесценции. Могут сохраняться до 5 лет после перенесенного заболевания.

HBV (ДНК) – ДНК вируса гепатита В

Маркер наличия и репликации вируса. Методом ПЦР можно определить ДНК вируса качественно или количественно. Благодаря качественному методу подтверждается присутствие вируса гепатита В в организме и его активное размножение. Это особенно важно в сложных диагностических случаях. При инфицировании мутантными штаммами вируса результаты теста на специфические антигены HBsAg и HBeAg могут быть отрицательными, но при этом риск распространения вируса и развития заболевания у зараженного человека сохраняется.

Качественное определение ДНК вируса играет важную роль в раннем выявлении гепатита В у людей с высоким риском инфицирования. Генетический материал вируса обнаруживается в крови на несколько недель раньше, чем HBsAg. Положительный результат ПЦР за период более 6 месяцев указывает на хроническую инфекцию. Определение вирусной нагрузки (количество ДНК вируса в крови) позволяет оценить вероятность перехода заболевания в хроническую форму.

Повышенные уровни печеночных трансаминаз при положительном результате ПЦР являются показателями необходимости проведения терапии. Во время лечения вирусного гепатита В исчезновение ДНК вируса свидетельствует об эффективности лечения.

Для чего используется исследование?

• Для оценки серологического профиля;
• для выяснения стадии заболевания и степени контагиозности;
• для подтверждения заболевания и уточнения его формы (острая, хроническая, носительство);
• для наблюдения за течением хронического гепатита В;
• для оценки эффективности противовирусной терапии.

Когда назначается исследование?

• При выявлении у пациента поверхностного антигена вируса гепатита В (HBsAg);
• при подозрении на инфицирование вирусом гепатита В и сомнительных результатах серологических тестов;
• при микст-гепатитах (сочетанные вирусные гепатиты В и С);
• при динамическом наблюдении за больным гепатитом В (определение стадии процесса при совместном исследовании на другие специфические маркеры инфекции).

Для каждого показателя, входящего в состав комплекса:

Острый гепатит В. Выделяют «дикий» штамм (естественный) и «мутантный» штамм (вид) вируса. Определение штамма вируса имеет определенное значение при выборе противовирусного лечения. Мутантные штаммы вируса несколько хуже поддаются лечению в сравнении с «диким».

Хронический гепатит В (ХВГВ). Выделяют три серологических варианта:

1. ХВГВ с минимальной активностью (ранее использовали термин «носительство HBsAg»);
2. НВе-негативный ХВГВ;
3. НВе-позитивный ХВГВ.

Интерпретация сочетаний серологических маркеров гепатита В

источник