Оспа кур лабораторные исследования

Оспа у кур – высококонтагиозное инфекционное заболевание, вызываемое возбудителями, относящимися к роду авипоксвирусов. Оно характеризуется поражением кожи головы и слизистых оболочек верхних дыхательных путей птиц высыпаниями. Болезнь наносит серьёзный ущерб фермерским хозяйствам, поэтому важно узнать, как она проявляется и как защитить от неё поголовье.

В древние времена куриная оспа не считалась единым заболеванием. Её рассматривали как 2 отдельные болезни – дифтерит и оспу, ввиду того, что она протекает по-разному. Когда возбудитель был хорошо изучен, его отнесли к оспенным разновидностям. Исследованием болезни занимались учёные – Боллингер, Половинкин и Боррель. Эти люди внесли существенный вклад в изучение вирусной этиологии оспы птиц.

Вирус оспы обладает устойчивостью к физико-химическому воздействию. В курятнике при комнатной температуре он сохраняет жизнеспособность на протяжении 5 месяцев, а в пухе и перьевом покрове птиц – до полугода. Уничтожить его можно термическим воздействием – при температуре +60 градусов он погибает в течение часа. При нагревании до 80 градусов вирус оспы гибнет через четверть часа, а при кипячении – в течение 6 минут.

Возбудитель оспы неустойчив к слабым растворам уксусной, соляной и карболовой кислоты, а также йода и формалина. Его легко уничтожить этиловым спиртом в концентрации 96% и едким натром.

Вспышки болезни регистрируются в любое время года, но чаще всего они возникают в октябре или ноябре. Болезнь поражает птиц любого возраста, молодняк же переносит её тяжелее. У цыплят оспа протекает в дифтерийной или смешанной форме, а у взрослых особей – преимущественно в кожной.

Справка. Возбудитель проникает в организм курицы через микроповреждения на коже и слизистые оболочки.

Источником распространения инфекции являются больные птицы – как домашние, так и дикие. Переносчиками вируса нередко выступает и сам человек, который может занести его на своей одежде или инвентаре. Кожные паразиты также способствуют распространению оспы.

Внутри курятника передача вируса происходит при непосредственном контакте с заражённой особью, а также через подстилку, корм, воду, фекалии. Грызуны, проникающие в птичник, могут переносить инфекцию на своей шерсти.

Продолжительность инкубационного периода составляет 4–18 дней и зависит от степени вирулентности штамма, пути внедрения и резистентности организма птицы. После проникновения вируса в организм начинается его интенсивное размножение. Уже через сутки инфекция попадает в кровоток и поражает внутренние органы.

Клинические проявления оспы у кур

Клинические проявления оспы у кур зависят от формы течения болезни. Кожная форма имеет благоприятный прогноз. В этом случае выздоровление наступает через 3–4 недели. Процент смертности при поражении кожи оспинами не превышает 10%. Наиболее опасной является дифтерийная форма болезни, при которой поражаются слизистые оболочки трахеи и гортани. В этом случае смертность может достигать 70%. При смешанной форме наблюдается поражение кожных покровов головы и слизистых оболочек. Рассмотрим симптомы оспы у кур, характерные для разных форм течения заболевания.

Если вирус проник в организм птицы через эпидермис, чаще всего развивается кожная форма оспы. Её симптомы специфичны:

• на оголённых участках головы – веках, бородке, гребне, образуются светло-жёлтые пятна, которые позже приобретают красный цвет;
• затем пятна превращаются в узелки, которые могут сливаться друг с другом;
• из оспин выделяется серозная жидкость;
• после её высыхания на поверхности узелков образуются корочки, которые впоследствии отпадают;
• общее самочувствие птицы ухудшается;
• наблюдается угнетение и отсутствие аппетита.

Когда вирус внедряется в организм через слизистые оболочки, развивается дифтерийная форма оспы. Для неё характерны симптомы:

• угнетение;
• затруднённое дыхание, сопровождающееся хрипами;
• вытягивание шеи;
• отказ от пищи;
• на языке, в гортани и на слизистой пищевода образуются жёлтые пузырьки, из которых в дальнейшем выделяется творожистый секрет;
• отхождение слизи из носовых ходов;
• дыхание производится через открытый клюв;
• проявления конъюнктивита – слезоточивость, гнойные выделения из глаз, склеивание век.

Для этой формы оспы кур характерно появление узелков как на коже головы, так и на слизистых оболочках рта, гортани и пищевода. При своевременно начатой терапии исход благоприятный ­– выздоровление наступает через 4–6 недель в 70% случаев.

Эта форма болезни встречается редко. Для неё характерно поражение глаз курицы. Сначала у больной особи наблюдается светобоязнь и слезоточивость. Затем отекают веки, развивается гнойный конъюнктивит. Атипичная форма оспы может привести к полной слепоте.

При постановке диагноза принимают во внимание эпизоотологические данные, клиническую картину, результаты лабораторных исследований и патологоанатомического вскрытия. Основная задача работника ветеринарной службы – исключить проявления гипоавитаминоза А, аспергиллёз, инфекционный бронхит, ларинготрахеит и другие болезни, имеющие сходную симптоматику.

Справка. При гистологическом исследовании содержимого оспенных образований в нём обнаруживаются скопления телец Бореля.

В случае подтверждения диагноза оспа в хозяйстве объявляется карантин. На начальном этапе болезнь поддаётся лечению, особенно когда поражения затрагивают только кожные покровы. Заражённых кур пропаивают иммуностимулятором Анфлурон, добавляя лекарство в питьевую воду. Ветеринар может порекомендовать курс антибиотиков для предотвращения присоединения бактериальной инфекции и развития осложнений.

На крупных птицефермах заражённое поголовье не лечат, а уничтожают. Всех павших птиц, а также вызывающих подозрение ликвидируют в специально отведённых санитарных зонах. Пух и перо выдерживают в течение часа в растворе формальдегида, после чего их можно использовать.

В соответствии с правилами карантина запрещено:

• вывозить за пределы фермы кур и цыплят, в том числе для убоя на мясоперерабатывающие комбинаты;
• реализовывать мясную и яичную продукцию;
• нельзя вывозить яйца для инкубации.

Карантин снимается через 60 дней после выявления последнего случая заболевания оспы в хозяйстве. На ферме проводится вакцинация всего поголовья. В птичниках делают уборку, после чего помещение и инвентарь дезинфицируют 40% раствором формальдегида, едкого натра (3%) или препаратом Бровадез-плюс в концентрации 1,5%. Помёт обеззараживают биотермическим способом.

Условно здоровых кур после вакцинации содержат в чистых тёплых помещениях с хорошей вентиляцией. Рацион птиц обогащают витаминами и минеральными добавками.

При выявлении в близлежащих хозяйствах случаев заражения кур оспой на благополучных фермах проводится вакцинация поголовья. Цыплят можно прививать по достижении возраста 6–7 недель. Вакцины против оспы у кур:

Кур вакцинируют методом скарификации внешней части бедра или путём прокола перепонки крыла. Дозировка для каждой птицы составляет 0,01 мл.

Другие профилактические меры против оспы:

• содержание курятника в чистоте, регулярная дезинфекция пола, стен и инвентаря;
• защита птичника от проникновения грызунов;
• борьба с эктопаразитами;
• иммунизация молодняка витаминами;
• карантинирование вновь прибывших на ферму особей на срок 3 недели.

Вылечить оспу у кур можно, если болезнь обнаружена на ранней стадии. Шансы на благополучный исход намного выше при кожной форме заболевания. При своевременно начатой терапии недуг отступает через несколько недель, а об улучшении самочувствия птиц свидетельствует появление сухих корочек на месте узелков. Если диагностирована дифтерийная или смешанная форма оспы, лечение малоэффективно.

источник

Оспа птиц — Avian pox ( Avian Diphtheria ). Синонимы: контагиозная эпителиома, дифтерия птиц, злокачественный катар индеек, синусит индеек, заразная болезнь глаз индеек, кожная бугорчатка, ложноперепончатая ангиома, «моллюск» птиц.

Оспа птиц — это контагиозное вирусное заболевание, которое проявляется развитием оспенной экзантемы на неоперенных участках кожи ног, головы, на гребне, сережках, мочках, вокруг клюва и носовых отверстий, а также образованием дифтероидных поражений на слизистой ротовой полости, органов дыхания и глаз.

Историческая справка, распространение и экономический ущерб. Впервые оспа была описана в 1775 г. под названием заразного конъюнктивита. Длительное время внимание уделялось в основном дифтеритической форме болезни, оспенная — с поражением кожи — считалась не столь актуальной. Но затем регистрация в одном и том же стаде оспенных и дифтеритических поражений кожи и внутренних органов послужила основанием считать эти болезни тождественными. Вспышки оспы кур отмечают в ряде стран всех материков мира. Эта болезнь существует и в России, в основном на юге нашей страны, и наносит существенный экономический ущерб птицефабрикам, особенно когда заболевание протекает в респираторной форме. Экономический ущерб в основном складывается из смертности птицы (до 50-70%), выбраковки больной птицы (до 30%), снижением выводимости (до 80%), и яйценоскости (в 5 раз).

Возбудитель. Вирус оспы птиц из семейства Avipoxviridae, рода Avipoxvirus. Вирус содержит 3,2% ДНК и 91,9% РНК. Величина вируса составляет 260-390 нм. Вирус во внешней среде остается жизнеспособным очень длительное время. В сухом эпителии при температуре 37-38°С сохраняется 8 дней, при 0-6°С — 8 лет, при минусовой температуре, ниже -15°С — 15 лет. В оспенных корочках при -15°С возбудитель не теряет вирулентность более 2 лет, на поверхности пуха и пера — 195 дней, на скорлупе яиц — 59 дней, в водопроводной воде — 66 дней. Вирус неустойчив к действию солнечного света, кислот, а также к присутствию в патологическом материале гнилостных бактерий, ускоряющих распад тканей и разрушение вируссодержащих клеток. От прямых солнечных лучей вирус погибает в течение 6-11 ч. Инактивируется 1%-ным раствором едкого калия, сулемы, уксусной кислоты за 5 мин, 70-75%-ным этиловым спиртом за 10 мин, 50% -ным спиртом — за 30 мин.

Вирус оспы птиц агглютинирует эритроциты кур, кроликов, морских свинок, буйволов, овец, ослов, коз.

Установлено 4 вида оспы птиц: вирус оспы кур, вирус оспы индеек, вирус оспы голубей и вирус оспы канареек. Вирусы оспы кур, индеек и голубей антигенно родственны, а иммунологическая характеристика вируса канареек отличается от вирусов оспы кур и голубей. Антигенная структура вируса оспы птиц идентична таковой вируса оспы коров, экромиелии мышей, миксоматоза кроликов.

Штаммы вируса подразделяются на высокопатогенные и природноослабленные.

Эпизоотологические данные. Оспа установлена у кур, индеек, цесарок, павлинов, голубей, куропаток, перепелов, попугаев, канареек, воробьев, зябликов, чаек, страусов, у хищных птиц, реже встречается у гусей, уток.

Источником инфекции является больная и переболевшая птица. Вирус оспы попадает во внешнюю среду с отпадающим детритом кожного эпителия, с выделениями из ротовой и носовой полостей, из глаз и с пометом. Поэтому корм, вода, инвентарь, подстилка, яйца, инкубационные и боенские отходы, инфицированные вирусом, также являются источником инфекции.Переносчиками вируса могут быть дикая птица, грызуны, кровососущие насекомые. Воротами инфекции служат ссадины кожи и слизистых оболочек.

Зачастую оспа регистрируется как стационарно протекающая инфекция и зависит от содержания вируса во внешней среде и от его вирулентности. У кур заболевание чаще встречается в возрасте 4-12 месяцев.

У индеек оспа чаще протекает хронически и может наблюдаться в хозяйстве месяцами. Смертность индеек от оспы зависит от формы течения болезни и может достигать 50% и более.

Канарейки болеют оспой в очень тяжелой форме, при этом наблюдается массовая гибель птицы. Течение болезни может быть сверхострое, острое и хроническое.

Патогенез. После проникновения в организм вирус оспы распространяется в ткани, окружающие место внедрения, а через 24-48 ч с током крови попадает в различные органы. Оспа птиц развивается как циклическая инфекционная болезнь. Местное поражение и разрастание патологической ткани у «ворот» инфекции переходит в первую фазу виремии, в результате которой вирус попадает во внутренние органы, где репродуцируется и накапливается. Вторая фаза виремии сопровождается широким распространением вируса с поражением кожи и слизистых оболочек.

Клинические признаки. Инкубационный период болезни у кур составляет 4-14 дней. Оспа птиц проявляется в кожной (наиболее типичной), дифтеритической, смешанной (наиболее часто встречаемой) и атипичной (с поражением внутренних органов) формах. Оспа кур при кожной и смешанной формах характеризуется поражением в области клюва, век, на гребне, сережках и других бесперьевых участках тела в виде круглых, сначала бледно-желтых, а затем красноватых пятнышек, превращающихся в бородавчатые эпителиомы (наросты), часто сливающиеся между собой и достигающие в диаметре 0,5 см. На 17-19-е сутки возможно вторичное высыпание оспин на непораженных еще участках тела. В участках локализации оспин меняется форма гребня и сережек, сильно утолщается кожа. Поражение век сопровождается их деформацией, в результате чего птица не способна закрыть глаза. Развивается конъюнктивит, кератит и панофтальмия.

При дифтеритической и смешанной формах оспы на слизистой оболочке органов дыхания и желудочно-кишечного тракта образуется сыпь в виде беловатых, непрозрачных и несколько приподнятых узелков. Они быстро распространяются, увеличиваются в размерах и, сливаясь между собой, образуют пленку, тесно связанную с подслизистой оболочкой. Если ее удалить, возникают кровоизлияния и эрозии. При локализации патологии в носовой полости развивается ринит, сопровождающийся серозными, слизистыми и затем гнойными истечениями.

Поражение носоглотки сопровождается распространением инфекции в слезный канал и подглазничную ямку. Под глазом образуется плотная болезненная припухлость, величиной с лесной или грецкий орех. Поражение ротовой полости сопровождается трудностями в приеме корма, а локализация патологического процесса в дыхательной системе — кашлем, приступами удушья. Птицы вытягивают шею, держа открытым или часто открывают клюв, издают свистящие звуки, с трудом вдыхают воздух и нередко погибают от удушья.

Оспа индеек характеризуется более частым поражением желудочно-кишечного тракта, при этом в большей степени поражается зоб и железистый желудок, в меньшей — кишечник. Патология последнего сопровождается профузной диареей с выделением фекалий с примесью крови.

Сверхострое течение оспы у канареек протекает без видимых клинических признаков. Острое течение болезни (легочная форма) сопровождается одышкой, конъюнктивитом, ринитом. При хроническом течении, кроме поражения клюва, глаз, век, крыльев наблюдаются оспинки на подошве и стопе лап, сопровождающиеся некрозом и отпадением пальцев.

Оспа голубей протекает чаще в кожной форме, с локализацией оспенных поражений по краям глаз, у основания клюва и при генерализации оспенного процесса — на ногах.

Патологоанатомические изменения. На коже и слизистых оболочках — характерные поражения. При вскрытии трупа обнаруживаются признаки аутоинтоксикации и истощения. У птиц при дифтеритической и смешанной форме оспы обнаруживают трудноснимаемые пленки на слизистой оболочкеорганов дыхания и пробки в воздухоносных мешках. При атипичной форме изменения на коже отсутствуют, но в печени выявляются мелкие желтоватые очаги. Встречается отек легких, точечные кровоизлияния на эпикарде и серозных оболочках кишечника.

При хроническом течении трупы птиц истощены, наблюдается перерождение печени, почек, сердца, набухание и коричнево-серое окрашивание селезенки.

Гистологические изменения. В цитоплазме клеток эпидермиса и эпителии слизистых оболочек наличие телец-включений (телец Боллингера), представляющих собой скопление вирусных частиц на различной стадии развития (виропласт). Включения хорошо окрашиваются гистологическими красками, в том числе эозином, Суданом III и Суданом черным, по Фельгену, осмиевой кислотой.

Иммунитет. Вирус оспы птиц вызывает образование в организме птиц вируснейтрализующих, комплементсвязывающих, вируспреципитирующих и антигемагглютинирующих антител, которые выявляются на 7-8-й день после вакцинации.

Диагноз ставится на основании клинико-эпизоотических, патологоанатомических данных и результатах лабораторных исследований.

На лабораторные исследования направляют головы птиц, пораженные участки кожи и внутренние органы. Подтверждают диагноз обнаружением оспенных телец в мазках-отпечатках, обработанных серебрением по Морозову или по методу Пашена, которые представляют собой скопления коричневых коккоподобных телец (вид россыпи) Бореля.

Выделение вируса проводят заражением на ХАО эмбрионов кур. Биопробу ставят на клинически здоровых курах, свободных от антител к вирусу оспы. Исследуемый материал втирают стерильной щеточкой в слегка скарифицированную поверхность гребня или фолликулы голени, освобожденные от перьев. Положительная биопроба сопровождается развитием на 5-7-й день после заражения оспенных поражений на гребне и типичного для оспы фолликулита на голени. Для ретроспективной диагностики используются МФА, ИФА, РДП, РИГА, метод иммунной электронной микроскопии.

Дифференциальный диагноз. Оспу дифференцируют от А-авитаминоза, кандидамикоза, аспергиллеза, инфекционного ларинготрахеита и бронхита кур, синусита индеек, трихомоноза у голубей.

Лечение. Оспины на коже размягчают нейтральными жирами, мазями или глицерином, а язвенные поверхности обрабатывают прижигающими средствами: 1%-ным йод-глицерином (йод — 0,1, калий йодистый — 1,0, глицерин — до 30,0), 3-5%-ными растворами хлорамина и др.

Носовую полость и конъюнктиву промывают теплой водой и орошают 2-3%-ными растворами борной кислоты, настоем ромашки и др. Птице дают воду без ограничений, добавляя в нее йодид калия. Антибиотики назначают для предупреждения осложнений (например, парациллин в дозе 1г на 1 л воды в течение 7 дней одновременно с витаминами).

Специфическая профилактика. Для специфической профилактики оспы кур применяют два типа ослабленных вакцин: содержащие куриный вирус оспы и содержащие голубиный вирус оспы. Эти вакцины могут быть использованы для иммунизации цыплят, кур и индеек. Вакцинация осуществляется методом пункции в подкрыльевую перепонку. Кур вакцинируют однократно в возрасте между 4-й и 12-14-й неделями; бройлерных цыплят прививают по достижении 4-недельного возраста. Племенных индеек вакцинируют путем скарификации бедра в 14-недельном возрасте. Появление местной реакции (опухание и краснота) на месте введения от 7 до 10 дней после проведения вакцинации показывает, что птица была правильно иммунизирована. Эта реакция исчезает в течение следующих 2-3 недель.

Профилактика и меры борьбы. При вспышке заболевания на хозяйство накладывают карантин. Больную птицу убивают. При выраженном генерализованном процессе оспы у птиц тушки с внутренними органами направляют в техническую утилизацию, при поражении только головы ее утилизируют, а тушки и органы выпускают после проварки. Навоз обеззараживают биотермически или сжигают. Пух, перо дезинфицируют 3%-ным формальдегидом на 1%-ном растворе едкого натра.

Карантин с хозяйства снимают через 2 месяца после ликвидации заболевания и проведения заключительной дезинфекции и дезинсекции.

Прививки против оспы в ранее неблагополучных хозяйствах проводят в течение двух лет. Если новых случаев заболевания не отмечается, то дальнейшие прививки не обязательны.

источник

Оспа кур (оспа-дифтерит) (Variola gallinarum) — контагиозная, преимущественно хронически протекающая болезнь птиц подотряда куриных, вызванная типичным возбудителем рода Avipoxvirus. Оспа у кур сопровождается конъюнктивитом и образованием очаговых специфических экзантем и энантем, чаще в области головы и верхних дыхательных путей.

Историческая справка. Заболевание известно с глубокой древности под различными названиями . Раньше оспа птиц рассматривалась не как единое заболевание, а как два самостоятельные болезни дифтерит и оспа. В дальнейшем, учитывая, что более характерной и специфической формой поражения является оспенная, а возбудитель ее вообще близок к оспенным вирусам, эту болезнь у птиц стали называть оспой. Оспа птиц в зарубежных странах распространена повсеместно (США, Канаде, в Южной Америке, Азии и в Европе).

Экономический ущерб. Оспа птиц приносит птицеводству большой экономический ущерб. Ежегодные убытки, наносимые оспой кур во Франции оценивались в 200млн. франков, в Голландии на долю оспы птиц приходится 12% от общих потерь в птицеводстве. Болезнь вызывает резкое снижение яйценоскости до 5 раз, ухудшении результатов инкубации яйца. Ущерб в птицеводстве усугубляется еще и тем, что появившись раз в стаде, становилась в дальнейшем ввиду большой стойкости вируса, стационарной, ежегодно повторяющейся и сопровождающейся высоким процентом заболеваемости и смертности. В СССР до введения профилактической профилактики в ряде птицеводческих хозяйств гибель от этой болезни доходила до 25-30% птицепоголовья.

Этиология. Вирусную этиологию оспы кур установил Ф.П. Половинкин (1902). До этого Боллингер (1873) обнаружил в эпителиальных клетках кожи больных оспой птиц специфические внутриплазматические включения. А.Борель(1904) выявил элементарные тельца (вирионы) вируса, известные как тельца Бореля. Включения. открытые Боллингером и названные позже тельцами его имени, представляют собой скопления десятков тысяч вирионов, и их выявление имеет диагностическое значение. Вирус фильтруется через свечи Беркефельда V и пластинку Зейтца, но не проникает через свечи Беркефельда W и N. Вирус способен проникать через коллодийную мембрану с порам величиной в 0,3, но уже через поры в 0,25 не проходит. По одним данным, величина частиц птичьего оспенного вируса равна 120т/х, а по другим 125-175 т/х. Вирус устойчив к физико-химическим воздействиям. В помещении птичников вирус выживает до 158 дней, а на пухе и пере- до 182 дней. При обычных атмосферных условиях высушенный вирус может быть активнее в течение двух лет. В рассеянном свете он сохраняет свою инфекционность при 0-6°С месяцами, а в отдельных случаях около года и более. При 60°С оспенный вирус погибает через час, а при 80°С в течении 15-30минут, кипячение убивает его за 6 минут. В условиях низкой температуры (-190°С) он остается жизнеспособным в течении нескольких дней.

Вирус теряет инфицирующую способность в 1% уксусной кислоты и в 1% сулеме через 5 минут, в 0,1% сулеме-через20минут. Он погибает также в 3%-ном растворе карболовой кислоты, в 0,5-1%-м растворе формалина, слабом растворе йода (1:10 000), 2,5%-ном растворе серной и соляной кислот. Глицерин даже при 25°С медленно обезвреживает вирус (в течение 12 дней).

При воздействии на вирус 1%-ного раствора едкого калия, раствора уксусной кислоты в той же концентрации, раствора сулемы 1:1000 он быстро инактивируется. Вирус погибает, при воздействии в течение 10 минут 70° и 96° этилового спирта, при температуре 20° и в течение 30минут-при воздействии 50° спирта. В практических условиях ветеринарным специалистам для дезинфекции приходится применять 1-2%-ный раствор едкой щелочи (едкого натра). Еще более надежным является дезинфекция едкой щелочью растворенной в 5%-ном известковом молоке.

Эпизоотические данные. Заболевание птиц оспой вызывается заносом инфекции в хозяйство извне, а также вирусом длительно сохраняющимся в самом хозяйстве. Если не проводить надлежащих ветеринарно-санитарных мероприятий и тщательной дезинфекции, то оспа может стать стационарной инфекцией и возникать в любое время года. Взрослая птица чаще и тяжелее болеет в период линьки, осенью и зимой. Наиболее чувствительны к оспе молодняк и птицы декоративных пород, у которых болезнь протекает и в дифтероидной и смешанной формах. У взрослой птицы воротами для вируса является поврежденная кожа и поэтому преобладает кожная форма оспы.

Источником инфекции является больная и переболевшая птица (в течение 2 месяцев после переболевания), загрязненные вирусом оспы яйца, пух и перо, почва, корм, вода, инвентарь и спецодежда обслуживающего персонала.

Заражение происходит как путем прямого контакта здоровой птице с больной, так и посредством заражения вирусом предметов ухода, корма, через обслуживающий персонал, а также через укусы кровососущих насекомых. В москитах и комарах, нападавших на больную оспой птицу, вирус может сохраняться около 210 дней, в мухе-жигалке-20 дней, в персидском клеще -30 дней, в орнитодорусе-97 дней, в клопах-35 дней. Переносчиками вируса оспы также являются домашние и дикие птицы и грызуны.

Установлено также, что в теплое время года и в странах с жарким климатом у птиц обычно регистрируют кожную форму, а зимой дифтероидную, когда чаще происходит процесс поражения слизистой оболочки. Этот факт объясняется недостатком витамина А, нарушением минерального обмена и другими факторами, снижающими резистентность организма. При этих условиях вирус проникает и через неповрежденную слизистую оболочку. Больная оспой птица и вирусоносители выделяют вирус в окружающую среду с отпадающими вируссодержащими корками и пленками; фекалиями и истечениями из носа, рта и глаз, а также со снесенными яйцами.

Вспышки оспы обычно протекают в виде энзоотий, а иногда и эпизоотий. Птица переболевает оспой в течение 6 недель и больше. При неудовлетворительных условиях содержания и кормления птицы погибает до 50-70% птицы. У больной птицы в 5 раз и более снижается яйценоскость, которая после выздоровления восстанавливается медленно, выводимость цыплят во время болезни и в течение длительного времени после переболевания кур остается низкой и нередко составляет около 20-25%. Переболевшая птица надолго утрачивает естественную резистентность и становится более чувствительной к другой микрофлоре.

В зависимости от вирулентности штамма вируса, путей его проникновения в организм, возраста и физиологического состояния организма птицы инкубационный период составляет от 4 до 20 дней.

Патогенез. Оспенный процесс носит генерализованный характер, при этом наиболее ярко выраженные поражения бывают в эпителиальной ткани кожного покрова и слизистых оболочках (гребень, бородка, кожа тела, слизистая оболочка ротовой полости и глотки).

После попадания оспенного вируса на поврежденную кожу гребня или бородки у кур возникает оспенная экзантема, а при попадании на фолликулы кожи — оспенный фолликулит. Оспенный процесс может распространиться на значительные участки кожи или слизистой на местах нанесения вируса и принимать генерализованное течение. При генерализованном течении вирус оспы обнаруживается в крови, печени, почках, яичниках, в головном мозге и других органах и тканях птицы.

Степень тяжести оспенного процесса у больной птицы зависит как от резистентности зараженной птицы, так и от вирулентности вируса, попавшего в организм, и от вторичной микрофлоры, обычно осложняющей оспенный процесс.

Для больной оспой птицы наиболее опасно поражение слизистой гортани. Вследствие участия в нем бактерий из группы кокков, палочки некроза и других микроорганизмов это поражение имеет характер дифтиритических налетов, пленок, наложений, которые затрудняют дыхание и питание птицы, а в отдельных случаях вызывают полную закупорку гортанной щели и гибель птицы от удушья.

Клинические признаки. На коже у основания клюва, век, на гребне, бородках и других участках тела появляются круглые, сначала бледно- желтые, а затем красноватые пятна, постепенно превращающиеся в небольшие узелки. Эти узелки часто сливаются, и через несколько дней их поверхность покрывается серозным клейким экссудатом, который засыхает, превращаясь в красно-коричневые корки. Если оспа протекает без осложнений, то через 7-10 дней, оспины отпадают, не оставляя заметных рубцов. Под снятым струпом заметно скопление серозного экссудата.

Оспины у кур высыпают обычно не одновременно. На 17-19-й день после заражения иногда возникает вторичный оспенный процесс на ранее не пораженных участках кожи. Дифтеритическое воспаление конъюнктивы глаз у птиц обуславливает слезотечение, светобоязнь, отечность век, слизисто-гнойное истечение из глаз, с последующим образованием корочки, которая склеивает веки. Иногда оспа у птиц сопровождается образованием кератита, а при осложнении микрофлорой — панофтальмита. В некоторых случаях наступает прободение роговицы и полное разрушение глаза. Общее состояние больной птицы угнетено, перья взъерошены, аппетит плохой или
отсутствует.

При дифтероидной и смешанной формах на слизистой оболочке рта, языка, носа, гортани, трахеи, бронхов, придаточных полостей (иногда под кутикулой желудка и на слизистой кишечника) появляется сыпь в виде беловатых, непрозрачных, несколько приподнятых узелков. Они, быстро увеличиваясь в размерах, нередко сливаются между собой, становятся желтоватыми и содержат творожистую некротическую массу или напоминают пленку, плотно соединенную с подслизистым слоем. Если удалить эти фибриноподобные наложения (пленки), то образуются кровоточащие эрозии. Дифтероидные наложения затрудняют дыхание, поэтому рот у птиц часто открыт, и при дыхании они издают свистящие или хрипящие звуки.

Патологоанатомические изменения, наиболее характерны в коже и слизистой оболочке, отражают ту или иную форму оспенного переболевания. При разрезе оспин внутри их находят серовато-желтую жирную кашицеобразную массу. Оспины у птиц отличаются от таковых у млекопитающих отсутствием типичных пустул с углублением в центре. Если патологические изменения локализованы в подглазничных синусах, то последние выпячены в виде бугровидных возвышений. Иногда подобные изменения находят в стенках воздухоносных мешков и кишечника. При вскрытии птиц, павших в период острого течения оспы, можно обнаружить увеличение селезенки, отечные явления в легких, точечные кровоизлияния на серозных оболочках, на эпикарде и мелкие фокусы в печени, имеющие желтоватый цвет.

При гистологическом исследовании оспенных поражений находят изменения в эпителиальной ткани в виде утолщения слоя эпидермиса вследствие усиленного размножения этих клеток. Клетки становятся увеличенными в объеме и набухшими, у них около ядра расположены тельца Боллингера, представляющие собой колонии вируса в липопротеидной оболочке. Величина их может быть различной, и такие включения занимают большую часть клетки. Тельца Боллингера дают положительные гистохимические реакции на ДНК, жир, фосфатазы. Они хорошо импрегнируются азотнокислым серебром при обработке срезов по предложенной методике В.М. Апатенко (1964), а также хорошо выявляются в раздавленных срезах после окраски суданом 3.

Диагноз основан на анализе эпизоотологических, клинических данных, патологоанатомических изменений и результатов лабораторных исследований, включающих гистоисследования, вирусоскопию, РДП, биопробу с выделением идентификацией вируса на ЭК, культурах ФЭК, цыплятах и голубях, электронно-микроскопические исследования.

Дифференциальный диагноз. Оспу кур дифференцируют от гиповитаминоза А, инфекционного ларинготрахеита кур, инфекционного бронхита цыплят, насморка кур, паршу, аспергиллеза, кандидамикоза, респираторного микоплазмоза, пастереллеза. При этом необходимо учитывать, что некоторые из них могут протекать одновременно, в том числе и с оспой.

Прогноз благоприятный только при не осложненной кожной форме оспы (что бывает редко), если оспенные поражения локализуются только на голове. При дифтероидной форме прогноз неблагоприятный. Процент гибели птицы во многом зависит от их возраста, состояния, условий содержания и кормления. В отдельных птичниках погибает от 10 до 70% птиц. Особенно большой падеж наблюдается среди молодняка при оспе, осложненной вторичной микрофлорой. Содержание переболевшей оспой птицы, особенно кур-несушек, нерентабельно.

Иммунитет и средства специфической профилактики. У вакцинированной здоровой (как и у переболевшей) птицы образуется иммунитет, особенно напряженный в стадии нестерильной невосприимчивости, причем вырабатывается он как на гомогенный вирус оспы кур, так и гетерогенный вирус оспы голубей, хотя на последний и менее напряженный. Клинически здоровое животное иммунизируют вирусвакциной.

Вакцинируют также всю клинически здоровую птицу, принадлежащую населению, проживающему в неблагополучном хозяйстве или угрожаемой зоне.

Профилактика и меры борьбы. В благополучных по оспе хозяйствах проводят мероприятия, направленные на недопущение заноса возбудителя оспы и обеспечивающие повышение резистентности организма птицы. Особенно тщательно эти меры должны выполнять лица, работающие в хозяйстве и имеющие птиц в своем личном подворье. Всю завозимую птицу обязательно карантинируют, и она должна постоянно находиться под наблюдением ветеринарных специалистов.

При установлении в хозяйстве диагноза оспа кур, хозяйство Постановлением Губернатора области объявляют неблагополучным по оспе птицы и накладывают карантин. В хозяйстве проводят мероприятия в соответствии с инструкцией о мероприятиях по борьбе с оспой птиц. Утвержденной Главным управлением ветеринарии Министерства сельского хозяйства СССР 14 сентября 1970г.

По условиям карантина запрещается:

1) вывоз птицы всех возрастов и видов, в том числе и реализацию цыплят населению (за исключением вывоза для убоя на мясоперерабатывающие предприятия).

Примечание. В отдельных случаях при условии надежной изоляции цеха инкубации от неблагополучных по оспе птичников (птицеферм) и соблюдении других мер, исключающих разнос инфекции, по решению ветеринарного отдела областного (краевого) управления сельского хозяйства, министерства сельского хозяйства автономной республики, главного управления (управления) ветеринарии МСХ союзной республики, не имеющей областного деления, допускается вывоз суточных цыплят, индюшат, цесарят, гусят и утят в специализированные птицеводческие хозяйства в пределах соответствующей области (края), республики;

2) вывоз яиц для племенных целей.

По условиям карантина разрешается:

• реализацию яиц через торговую сеть непосредственно после их дезинфекции в порядке, установленном действующими правилами;
• инкубация яиц, полученных от птиц благополучных птичников, с целью воспроизводства поголовья внутри этого же хозяйства при условии дезинфекции яиц непосредственно перед закладкой в инкубатор;
• ввоз водоплавающей птицы, а также кур, фазанов, павлинов, индеек и цесарок, привитых против оспы (спустя 20 дней после вакцинации).

В неблагополучном по оспе птиц хозяйстве:

а) при появлении среди птицы заболевания оспой вся больная и подозрительная по заболеванию, а также слабая птица подлежит убою на санитарной бойне данного хозяйства.

Вывоз такой птицы для убоя на мясоперерабатывающие предприятия запрещается.

Остальную, условно здоровую птицу, не имеющих клинических признаков болезни, с учетом экономической целесообразности рекомендуется также убить на мясо или вывезти на мясоперерабатывающие предприятия. В последнем случае вывоза птицы разрешается при соблюдении условий, предусмотренных Правилами ветеринарного осмотра убойных животных и ветеринарно-санитарной экспертизы мяса и мясных продуктов.

Послеубойную ветеринарно-санитарную экспертизу и санитарную оценку мяса проводят также в соответствии с указанными Правилами. При этом вывоз тушек, полученных от убоя больной птицы, пригодной для использования в пищу, разрешается только после термической обработки. Не разрешается реализация таких тушек без предварительной термической обработки также и внутри хозяйства.

Примечание. При убое в птицехозяйствах или мясоперерабатывающих предприятиях больших партий птицы, по разрешению ветеринарного отдела областного (краевого) управления сельского хозяйства, министерства сельского хозяйства автономной республики, главного управления (управления) ветеринарии министерства сельского хозяйства союзной республики, не имеющей областного деления, тушки вывозят на ближайшие пищевые предприятия внутри соответствующей области (края), республики для использования в сети общественного питания.

б) всю клинически здоровую птицу иммунизируют против оспы вакциной из голубиного вируса, согласно наставлению по ее применению. За вакцинированной птицей ведут наблюдение и, если в течение 20 дней после вакцинации среди нее будут выделяться больные оспой (из привитых в инкубационном периоде), то их убивают и поступают, как указано в подпункте «а».

в) с профилактической целью вакцинируют также птицу в хозяйствах, угрожаемых по заносу в них оспы (в том числе и птиц в личном пользовании граждан);

г) перо, пух, полученные при убое больной и подозрительной по заболеванию птицы, дезинфицируют погружением в щелочной раствор формальдегида (3 %-ный формальдегид на 1%-ном растворе едкого натрия) с экспозицией 1 час и вывозят на перерабатывающие предприятия в таре с двойной упаковкой с указанием в ветеринарном свидетельстве форма № 3-вет (ветсправке 4-вет) о неблагополучие хозяйства по оспе;

д) проводят тщательную механическую очистку, а также дезинфекцию, дезинсекцию и дератизацию помещений, оборудования, инвентаря и производственной территории в порядке, предусмотренном инструкцией по проведению ветеринарной дезинфекции, дезинвазии, дезинсекции и дератизации; помет после удаления из птичников подвергают биотермическому обеззараживанию; птичники содержат постоянно чистыми и сухими, не допуская в них скученного содержания птицы;

е) птицу обеспечивают полноценными кормами, в рацион рекомендуется добавлять молочные продукты.

На мясоперерабатывающих предприятиях и в заготовительных пунктах при обнаружении оспы проводят убой всей птицы, при этом карантин накладывают на время убоя и проведения оздоровительных мероприятий. Ввоз в них вновь поступившей птицы допускается после реализации всей птицеводческой продукции и проведения ветеринарно-санитарных оздоровительных мероприятий (механической очистки, дезинфекции, дезинсекции, дератизации).

Карантин с неблагополучного хозяйства снимают через 2 месяца после ликвидации болезни (последнего случая выявления клинических признаков оспы у птиц) и проведения заключительной дезинфекции.

Вывоз подрощенных цыплят и взрослой птицы в другие хозяйства для комплектования допускается не ранее как через 6 месяцев после снятия карантина.

В бывших неблагополучных хозяйствах после ликвидации болезни проводят в течение двух лет профилактическую поголовную вакцинацию против оспы всех восприимчивых к этой болезни птиц.

источник

Оспа птиц (Variolaavium, оспа-дифтерит птицы) — контагиозная болезнь, характеризующаяся образованием на коже специфических оспин, а на слизистых оболочках полости рта, верхних дыхательных путей и конъюнктиве глаз — дифтеритический пленок и наслоений.

Историческая справка. Оспа известна еще с XVIII в., Когда Гузард подробно описал это заболевание в 1775 г. под названием «конъюнктивит кур». Возбудитель болезни впервые установили в 1902 г. Е. Маркс и И. Штиккер. После этого на протяжении двух десятилетий господствовало мнение, что оспа и дифтерит, означающие две формы клинического проявления одной болезни, являются двумя различными болезнями (Борде, фале, 1910). И только в 1935 г. было доказано единую природу их возбудителей и заменено название болезни «оспа-дифтерит» на «оспу». В 1904 г. А. Бо-ррель обнаружил в коже больного оспой птицы элементарные тельца (ви-Риони) вируса, которые стали называть «тельцами Борреля». Другие внутриклеточные включения, которые были открыты Боллингером, впоследствии приобрели диагностического значения и были названы его именем, представляют собой накопление десятков тысяч вирионов.

Заболевания птицы оспой регистрируется во многих странах мира. Экономический ущерб, который наносит оспа птицы, связанные с высокой летальностью (15 — 60%), длительным снижением несущей, низким выходом птенцов при инкубации, значительными затратами на проведение карантинно-ограничительных и ветеринарных мероприятий по ликвидации заболевания. Над разработкой мер профилактики и борьбы с оспой птицы плодотворно работали И. Н. Дорошко, Н. В. Ли-хачов, А. Б. Байдевлятов, В. Ф. Зборщенко.

Возбудитель болезни — ДНК-геномный вирус из семейства Poxviridae, рода Avipoxvirus. Имеет цеглиноподибну форму с округлыми краями, размеры 170 х 350 нм, сложный тип симметрии. В пораженных тканях вирус проявляется в виде телец Борреля или телец Боллингера. Окрашенные по Пашена вирионы оспы проявляются при среднем увеличении под световым микроскопом. Различают следующие антигенные виды вируса, как вирус оспы кур, вирус оспы голубей, вирус оспы канареек, вирус оспы индюков, вирус оспы скворцов. Возбудитель оспы хорошо культивируется на хорион-алантоисний оболочке в 10 — 12-дневных куриных эмбрионах и в культуре клеток фибробластов куриного эмбриона.

Вирус оспы очень устойчив во внешней среде. Оспинки, отступивших из кожи, сохраняют свою заразительность при рассеянном свете до 2 мес, на зерне — до 180 суток, в птичнике — до 158 суток, на земляном полу — до 120 суток, на поверхности перьев и пуха — 182 суток, в водопроводной воде — до 90 суток. При температуре — 15 ° С вирус остается жизнеспособным до 2 лет, в лиофилизированном состоянии под вакуумом — до 8 лет. Солнечный свет разрушает вирус через 1 — 7 суток, нагревание до 56 ° С — через ЗО мин, кипячение — через 55 мин. Чувствителен к этилового спирта, быстро погибает при гниении.

Эпизоотология болезни. Оспой болеют куры, индюки, голуби, цесарки, куропатки, павлины, фазаны и мелкие певчие птицы. Более чувствительны молодые птицы, особенно в период полового созревания. Заболевания цыплят в возрасте до 30 дней наблюдается очень редко. Утки и гуси мало-восприимчивы к вирусу оспы. Источником возбудителя инфекции является больной и переболевшая птица, которая в течение 2 мес после выздоровления выделяет вирус с оспенных корочками, фекалиями, слизью из ротовой и носовой полостей, истечениями из глаз. Факторами передачи возбудителя могут быть контаминированы возбудителем корма, вода, яйца, подстилка, инвентарь, предметы ухода за птицей, одежду и обувь обслуживающего персонала. Вирус может распространяться через жалящих и кровососущих насекомых и клещей. Заражение происходит контактно при совместном содержании больной и здоровой птицы, перорально и респираторным путем.

В организм вирус попадает через поврежденную кожу и слизистые оболочки ротовой полости и пищевода. Первичное возникновение в хозяйстве оспы птицы чаще обусловливается занесением возбудителя болезни извне. В таком случае энзоотии оспы проявляется быстрым распространением болезни, которая на протяжении 2 — 3 недель охватывает большую часть поголовья. Большая скученность птицы, недостаточная вентиляция, гиповитаминоз А способствуют осложнению болезни секундарной микрофлорой, обусловливают высокую летальность — до 70% и более. Заболевания в стадии длится 3 — 4 недели. Переболевшая птица становится устойчивой против последующей инфекции в течение 1 — 2 лет. Поэтому инфекция угасает, однако, постоянно поддерживаясь вирусоносителями и возбудителем по окружающей среде, приобретает стационарного характера. В стационарных ячейках оспа проявляется только среди нового неиммунного молодняка птицы, чаще осенью, зимой и весенней поры на фоне неблагоприятных условий содержания и неполноценного кормления. Такая эпизоотическая особенность оспы значительно затрудняет борьбу с инфекцией и требует решительных действий для окончательной ее ликвидации.

Патогенез. После проникновения в эпителиальные клетки поврежденной кожи или слизистых оболочек вирус быстро размножается, попадает в кровь, вызывая виремии и генерализацию процесса. С током крови возбудитель болезни разносится по всему организму и на 7 — 15-е сутки оказывается в почках, селезенке, головном мозге, а также в оспины. Характерной особенностью патогенетического действия вируса оспы является образование специфических эпителия на гребне и бородке и дифтеритический пленок на слизистых оболочках ротовой полости, гортани, трахеи. Дифтеритическое наслоения нередко становятся причиной затруднения дыхания, удушья и даже гибели больной птицы. В органах и тканях переболевших кур вирус персистирует до 487 суток.

Клинические признаки и течение болезни. Дифтеритическое форма имеет более медленный ход, сопровождающийся образованием на слизистой оболочке ротовой полости, глотки, языка, а иногда гортани и пищевода, дифтеритический пленок, имеющих вид серовато-желтых налетов и плотно прилегают к слизистой. После удаления пленок обнажаются кровоточащие эрозии и язвы, которые вскоре снова покрываются пленками. В заболевшего птицы наблюдают затруднено, с сопением, дыхания, истощение, малоподвижность, трудности в приеме кормов и воды, резкое снижение яйценоскости. Нередко заболевание осложняется секундарной микрофлорой, что значительно ухудшает общее состояние птицы. Выздоровление наступает в конце 5 — 6-й недели. В переболевшей птицы очень медленно восстанавливается яйценоскость.

При смешанной форме болезни оказывается одновременное поражение кожи и слизистых оболочек. Течение заболевания тяжелое, часто заканчивается гибелью. В части птицы оспа приобретает хроническое течение, сопровождается резким похуданием, удушьем, часто осложняется энтеритом, что приводит к полному истощению и гибели.

Патологоанатомические изменения. Наиболее характерные на коже и слизистых оболочках и отображают клиническую форму перенесенной болезни. У птицы, в отличие от оспенных поражений млекопитающих, отсутствуют типичные пустулы с углублением в центре. Дифтеритическое поражение слизистых оболочек ротовой и носовой полостей, гортани, трахеи, бронхов, воздухоносных мешков имеют вид сырообразных налетов желто-серого или бурого цвета. Воздухоносные мешки и трахея иногда заполнены фибринозной массой. При гистологическом исследовании обнаруживают набухание и увеличение в объеме эпителиальных клеток, в которых у ядра определяются тельца-включения Боллингера, представляющие покрытые липопротеидной оболочкой колонии вируса оспы.

Диагноз основывается на анализе эпизоотологических, клинических данных, патологоанатомических изменений и результатов лабораторных исследований.

Лабораторная диагностика. Включает световую и электронную вирусоскопию мазков из патологического материала для обнаружения элементарных телец Борреля и телец-включений Боллингера; выделение вируса из патологического материала в куриных эмбрионах или в культурах клеток фибробластов куриных эмбрионов; индикацию и идентификацию вируса оспы в патологическом материале, взятом от больной птицы, а также в околоплодной жидкости инфицированных куриных эмбрионов и первичной культуре клеток фибробластов с помощью серологических реакций — реакции иммунофлюоресценции (РИФ) и реакции диффузной преципитации (РДП) в агаровом гели, проведение биологической пробы на 3 — 4-месячных цыплятах.

В лабораторию для исследования направляют 5 — 6 клинически больных птиц (кур, индеек, голубей, цесарок). Из свежих оспин или дифтеритический поражений слизистой оболочки гортани и трахеи готовят мазки-отпечатки и окрашивают их серебрением по Морозову или по Пашена. Во время микроскопического исследования оспенные вирионы выявляются в виде круглых или цеглиноподибних образований черного или темно-коричневого цвета, размещенных поодиночке, попарно, короткими цепочками или скоплениями. В окрашенных по Пашена препаратах определяются мелкие круглые оспенные вирионы темно-красного цвета.

Для выделения вируса оспы проводят заражения ХАО 10 — 12-дневных куриных эмбрионов 10%-ю суспензией патологического материала, взятого от больных птиц. Через 3 — 6 суток инкубации все погибшие куриные эмбрионы или охлажденные при 4 ° С вскрывают и исследуют на наличие оспенных поражений на ХАО. Вирус оспы кур вызывает образование на ХАО мелких плоских поражений, иногда с неровными краями, серовато-белого цвета; вирус оспы голубей — толстых, крупных, припиднятих посередине оспенных поражений и желеобразного отек всей оболочки (вид медузы); вирус оспы индюков — слабо определенных очаговых оспин, часто окруженных кольцеобразной зоны поражения. Мазки-отпечатки с оспенных поражений ХАО окрашивают и исследуют под микроскопом для выявления вирусных элементарных телец и телец-включений. Изготовленную из оспенных поражений хорион-алантоиснои оболочки суспензию исследуют с помощью РДП со специфическими преципитувальнимы сыворотками для идентификации вирусного антигена. В сомнительных случаях прибегают к биопробы на неиммунных к вирусу оспы молодых курах 3 — 4-месячного возраста, которым патологический материал втирают в скарификовану поверхность кожи гребня и бородок или в перьевые фолликулы голени сразу после выщипывания перьев. В случае наличия в исследуемом патологическом материале вируса оспы через 5 — 7 суток после заражения на коже гребня и бородок появляются характерные оспины, а на голени развивается типичный для оспы фолликулит. Во время микроскопического исследования окрашенных мазков-отпечатков с оспин и пораженных перьевых фолликулов голени проявляют оспенные вирионы. Патологический материал из соскобов гребня и перьевых фолликулов исследуют с РДП на специфичность.

Для установления диагноза большое значение имеет выявление пато-гномоничних телец-включений Боллингера. Для этого из пораженных очагов кожи и слизистой оболочки делают очень тонкие срезы, раздавливают их между двумя предметными стеклами и окрашивают Суданом-3. Во время микроскопического исследования тельца-включения Боллингера определяются в протоплазме клеток в виде окрашенных в желтый цвет круглых накоплений вирионов с равномерной зернистостью.

Дифференциальная диагностика. Предусматривает исключение инфекционного ларинготрахеита, пастереллеза, гиповитаминоза А, аспергиллеза, кандидомикоза. При инфекционном ларинготрахеите кур наблюдается быстрое распространение болезни, острый ее течение, никогда не бывает поражений кожи. Пленки на слизистой оболочке легко снимаются, не кровоточат. Нахождение под микроскопом цитоплазматических телец-включений Боллингера в раздавленных срезах с пораженной кожи или слизистой оболочки позволяют быстро и надежно дифференцировать оспой от инфекционного ларинготрахеита кур. За острого течения пастереллеза характерные явления геморрагического диатеза; посевы из крови и органов трупов птицы дают возможность уже через сутки выявить биполярные бактерии и выделить возбудителя болезни. Хроническое течение пастереллеза сопровождается поражением суставов и сережек, на вскрытии устанавливают бронхопневмонию. Во время бактериологического исследования выделяется культура пастерел. Дифтеритическое форму оспы нужно отличать от авитаминоза А, при котором пленки снимаются очень легко, не оставляя кровоточащих язв. Кроме того, при авитаминозе на слизистой оболочке пищевода образуются многочисленные узелки величиной с просяное зерно, а при оспе — большие дифтеритическое наслоения. При гипоавитаминози А не бывает кожных поражений, в эпителиальных клетках не выявляются тельца-включения Боллингера. А с-пергильоз и кандидамикоз устанавливают на основании результатов микологических исследований — микроскопического выявления мицелия грибов и выделение чистой культуры соответствующего возбудителя на среде Чапека, агаре Сабуро или сусло-агаре.

Лечение. Специфических методов лечения оспы не разработано. Больному птицы добавляют в корма зелень, морковь, сенная мука. При дифтеритический форме пленки со слизистых оболочек ротовой полости удаляют, эрозионные поверхности смазывают эмульсией пенициллина на рыбьем жире, йод-глицерином или пиоктанином. Рекомендуются внутримышечные инъекции 40%-го раствора уротропина из расчета 0,6 — 1,0 г / кг массы или террамицин в дозе 1 мг / кг.

Иммунитет. В переболевшей оспой птицы длится 2 — 3 года. Для проведения предохранительных прививок против оспы предложено сухую вирусвакцину из вируса оспы голубей из штамма НД. Вакцину применяют для прививок цыплят с 1 — 1,5-месячного возраста путем втирания в перьевые фолликулы голени. Иммунитет наступает через 3 недели и продолжается у цыплят до 3 мес, у взрослых кур — до 10 мес.

Профилактика и меры борьбы. Основываются на организации защиты птицеферм от заноса возбудителя оспы, своевременной диагностике заболевания, выявлении и ликвидации источника возбудителя болезни и факторов его распространения. Особое внимание следует уделять выполнению зоогигиенических и ветеринарно-санитарных мероприятий при удержании молодых цыплят, обеспечению птицы полноценными рационами, своевременному проведению предупредительных прививок против оспы в неблагополучных хозяйствах.

В случае появления заболевания птицеферму объявляют неблагоп-лучной и вводят карантин с запретом вывоза птицы и яиц для инкубации. Всю больную и подозреваемую по заболеваемости оспой птицу, а также слабую молодежь птицы забивают на санитарной бойне. Условно здоровую птицу, которая не имеет клинических признаков болезни, используют на мясо. Клинически здоровых кур прививают вирусвакциною оспы голубей из штамма НД. После удаления птицы проводят тщательную очистку и дезинфекцию птичника и оборудование 2%-м раствором гидроксида натрия, 20%-ю суспензию свежегашеной извести, просветленным раствором хлорной извести, содержащей 2% активного хлора, 2% раствором формальдегида. Ограни-из неблагополучной птицефермы снимают через 2 мес после ликвидации заболевания и проведения окончательной дезинфекции.

источник

1. Обнаружение в патологическом материале вирусных оспенных частиц;

2. Выделение вируса на куриных эмбрионах;

4. Микроскопическое выявление в патологическом материале элементарных телец;

5. Заражение куриных эмбрионов, а в сомнительных случаях — проведение биопробы на чувствительных животных;

6. Индикацию вирионов оспы методом световой микроскопии;

7. Выделение вируса на куриных эмбрионах или на цыплятах;

8. Идентификацию выделенного вируса методом световой микроскопии, вирусоскопии, РИФ и РДП [1].

В ветеринарную лабораторию направляют 5…6 клинически больных или павших птиц (куры, индейки, голуби, канарейки и др.)

Из свежих оспин или с мест поражений слизистых оболочек птиц готовят на предметных стеклах тонкие мазки – отпечатки для микроскопического исследования. Одновременно отбирают патологический материал (эпителиомы, дифтерические наложения) для выделения вируса.

Отобранный патологический материал тщательно растирают в ступке со стерильным битым стеклом и готовят 10% — ную суспензию на стерильном физиологическом растворе с рН 7,2…7,4, которую затем обрабатывают в течение 12 ч при 4 градусах смесью в составе 500 ЕД/мл пенициллина, 250 мкг/мл стрептомицина и 50 ЕД/мл нистатина. После указанной обработки суспензию центрифунгируют 10 мин при 1500 об/мин и делают высевы на МПБ, МПА с целью исключения бактериальной контаминации.

Для обнаружения вирусных оспенных частиц приготовленные мазки – отпечатки подсушивают на воздухе, перед окраской выдерживают 10…15 мин в дистиллированной воде и окрашивают методом серебрения по Морозову или по методу Пашена. При микроскопическом исследовании мазков (окраска по Морозову) на светло – коричневом фоне препарата обнаруживают вирусные оспенные частицы в виде мелких круглых образований темно – коричневого или черного цвета, расположенных поодиночке, парно, короткими цепочками или скоплениями; при окрашивании препаратов по Пашену при наличии вирусных оспенных частиц в поле зрения микроскопа видны мелкие округлые образования темно – красного цвета.

Также вирус оспы птиц выделяют на 10…12 – суточных КЭ, полученных из хозяйства, благополучного по инфекционным болезням птиц. Из полученной и обработанной 10% — ной суспензии, свободной от контаминации микрофлорой, дополнительно готовят суспензию на физиологическом растворе 10-2 и 10-3 и затем каждым разведением в объеме по 0,2 мл заражают на хорионаллантоисную оболочку (ХАО) по 4 эмбриона. После заражения КЭ инкубируют в течение 6 сут в термостате при 36,5…36,7 о С и относительной влажности 60…70%. Эмбрионы ежедневно овоскопируют. КЭ, погибшие в первые 48 ч после заражения, не учитывают (неспецифическая гибель). Эмбрионы, погибшие на 3 – и сутки и позже и все оставшиеся живыми на 6 – е сутки после заражения, охлаждают в холодильнике при 4оС в течение 4…5ч, затем их вскрывают и просматривают состояние ХАО. В положительных случаях на ХАО обнаруживают отдельно расположенные или слившиеся оспины. При обнаружении на ХАО оспин надо учитывать, что вирус оспы кур вызывает образование на ХАО мелких плоских поражений, иногда обширных, беловатого цвета. Из оспенных поражений ХАО делают тонкие мазки или мазки – отпечатки на предметных стеклах и окрашивают методом серебрения по Морозову или по методу Пашена для выявления в них вирусных (оспенных) частиц.

В случае неясности результатов, полученных при выделении вируса в первом пассаже, проводят второй последовательный пассаж испытуемого вируса.

Биологическую пробу ставят в случаях получения сомнительных результатов исследований мазков – отпечатков и при выделении вируса на КЭ.

Биопробу проводят на неиммунных к вирусу оспы цыплятах 3…4 – месячного возраста, полученных из хозяйств, благополучных по инфекционным болезням птиц. Суспензию исследуемого материала, приготовленную, как указано в п. 2.3, втирают в слегка скарифицированную поверхность гребня и в фолликулы голени сразу после выщипывания перьев. При наличии в исследуемом материале вируса оспы птиц на 5…6 – й день после заражения на гребне появляются характерные эпителиомы, а на голени – типичный для оспы фолликулит. При микроскопическом исследовании мазков – отпечатков, приготовленных из эпителиом гребня или из пораженных фолликулов голени и окрашенных методом серебрения по Морозову или по методу Пашена, обнаруживают вирусные оспенные частицы.

Лабораторный диагноз на оспу считают установленным в случаях: обнаружения в мазках – отпечатках из патологического материала вирусных оспенных частиц; выделения возбудителя оспы на КЭ; получения положительных результатов биологической пробы.

Сроки исследований: микроскопических – 1 день; выделение вируса на КЭ – 6 сут; при проведении второго пассажа – 12 сут; биологичкой пробы – 8 сут. [2].

Библиографический список

Барышников, П. И. Ветеринарная вирусология [Текст] : учебное пособие для студ. вузов, обучающихся по спец. 111201 — «Ветеринария» : рек. УМО по образованию / П. И. Барышников. — М. : ФОРУМ, 2009. – С. 14 – 16.

Барышников, П.И. Лабораторная диагностика вирусных болезней животных [Электронный ресурс] : учеб. пособие / П.И. Барышников, В.В. Разумовская. — Санкт-Петербург : Лань, 2015. — С. 443 – 446.

источник

Московская Государственная Академия Ветеринарной Медицины и Биотехнологии им. К.И.Скрябина

ИММУНИТЕТ И СПЕЦИФИЧЕСКАЯ ПРОФИЛАКТИКА

Variola avium, Epitheliosis contagiosa cutis et mucosae avium, Epithelioma et diptheriae avium (лат.); Fowl pox, Bird or chicken pox and avian diphtheria, Avian pox, Contagious epithelioma, Borreliota avium (англ.); Vogelpocken, Geflugelpocken und Geflugrldiph-

therie (нем.); Variole aviaire (франц.)

Оспа птиц (ОП) — контагиозная болезнь кyp, голубей, канареек, скворцов, индюков, фа­занов. У кур проявляется в 2-х формах: оспенной и дифтеритической. Возможно смешанное течение болезни.

Болезнь распространяется повсеместно, проявляется во все времена года, но чаще вес­ной и осенью. Экономический ущерб заключается в резком и продолжительном снижении яйценоскости, вынужденном, убое больных и переболевших птиц.

Клинические признаки и патологоанатомические изменения. Инкубационный период длится 15-20 дней, при экспериментальном заражении — 10-14 да. Общее состояние больной птицы ухудшается, аппетит исчезает, появляется вялость; у кур-несушек резко сни­жается яйценоскость. В дальнейшем на коже гребня, бородок, углов рта, век, иногда на опе­ренных частях головы, шеи, затылка, живота, конечностей, окружности клоаки, появляются бледно-желтые пятнышки. Вскоре оспинки покрываются желто-серым или красно-бурым кровянистым струпом, становятся очерченными и твердыми. Рядом расположенные оспины сливаются друг с другом, образуя небольшие бугры-бородавки. Процесс высыхания и обра­зования струпа длится 2-3 недели. Больные куры часто склевывают друг у друга оспинки, способствуя распространению инфекции.

Дифтеритическая форма ОП проявляется поражением слизистых оболочек ротовой и носовой полости, подглазничной ямки. На слизистой оболочке ротовой полости вначале возникают мелкие, ясно очерченные округлые желтовато-белые возвышающиеся пятна величиной от чечевицы до 10-копеечнои монеты, которые, разрастаясь, сливаются в ложные перепонки – мягкие, иногда кашицеобразные (особенно у голубей), легко снимающиеся или сухие плотные творожистые, трудно снимающиеся. Дифтерические пленки появляются главным образом под языком или по краям его, на щеках, в углах рта, вдоль небной щели, в зеве, окружности гортани или даже трахее. Для пленок оспенного характера типично глубокое их врастание в слизистую оболочку. Гортань поражается наиболее часто. Дыхание сильно затруднено, больные птицы вытягивают шею, дышат с открытым клювом. Приём пищи затруднён, рот часто открыт. При распространении дифтеритического процесса на носовую полость появляется насморк. Из ноздрей вытекает серозная или слизистая, впоследствии гнойная жидкость грязно-желтого цвета, которая, подсыхая, заклеивает носовые ходы. При поражении носоглотки в процесс вовлекается слёзный канал и подглазничная ямка. Последняя заполняется воспалительным экссудатом и выпячивается под глазом в виде горячей болезненной припухлости плотной консистенции величиной с лесной орех.

Часто отмечается поражение глаз. Появляется светобоязнь, покраснение и отечность их. Слизисто-гноиный экссудат высыхает у краев век и склеивает их. При искусственном рас­крывании глазной щели на роговице видно гнойно-творожистое наложение, а на поздних стадиях процесса обнаруживается засохший беловатый гной. Чаще поражаются оба глаза («совиная голова»). Воспаление может распространиться на склеру и роговицу.

При кожной форме оспы обычно обнаруживают бородавчатые образования, покрытые бурым кровянистым струпом, чаще на гребне, бородках, сережках, у основания клюва, на щеках, иногда на коже по всему туловищу. Течение болезни преимущественно хроническое. Оспа, протекающая без осложнений, заканчивается в течение 5-6 недель. Кожная форма чаще протекает доброкачественно. Нередко отмечают стертые формы ОП. Переболевшие куры становятся истощенными, многие слепнут на один или оба глаза. Летальность среди взрос­лых кур достигает 10-20%, среди молодняка, особенно в холодное время года — 50-70%.

Прогноз при дифтеритической форме в общем неблагоприятный.

Сообщалось об изменении клинического проявления ОП, наблюдаемой с 1973-1974 гг. Тяжелые поражения были только в трахее: сильное воспаление и обширное набухание сли­зистой оболочки трахеи с некротическими наслоениями вызывали сужение и закупорку про­хода, что вызывало высокую смертность птицы (10-35%) вследствие удушья.

Трахеальную форму ОП наблюдали в Новой Зеландии, Южной Америке. Ею поража­лись только куры-несушки, содержащиеся в клетках.

Описаны и атипичные случаи ОП у молодых несушек в зимний период. Процесс проте­кал атипично и характеризовался незначительным снижением яйценоскости, ломкостью пе­чени и казеозными наложениями в верхней части трахеи.

Формы болезни известны давно. Вначале их считали различными инфекциями. После того, как Маркс и Штиккер в 1902 г. доказали, что кожная форма вызывается вирусом, а в 1907 г. Карноут показал, что вируссодержащими эпителиомами можно вызвать оспенное поражение слизистых оболочек, установилось единое представление о возбудителе оспы и дифтерита птиц. За последние 10-15 лет в отечественной и зарубежной литературе опубликован ряд сообщений о биологических свойствах полевых и вакцинных штаммах вируса оспы кур, диагностики инфекции и её эпизоотологических особенностях.

Строение вириона вируса оспы при рассечении в плоскости АОВ:

1-фрагмент цитоплазматической оболочки;

3,4,5 – внешняя, средняя и внутренняя осмиофильная мембраны;

12,13,14 – внешняя средняя и внутренняя оболочки нуклеоида;

16,19,20 – компоненты S-структуры нуклеоида.

Устойчивость. Вирус чувствителен к высокой температуре. Высушивание и холод кон­сервируют его. В оспенных корочках при температуре -15°С он выживает до 2х лет и более. В лиофилизированном виде при хранении под вакуумом оспенный материал остаётся вирулентным до 8ми лет. Чувствителен к этиловому спирту, быстро погибает в гниющем субстрате.

АГ структура. В составе очищенного вируса ОП обнаружено 29 полипептидов с молекулярной массой 14-138 кД. Наивысшей и иммуногенной активностью обладают полипептиды с молекулярной массой 35 и 37 кД. За индукцию ВНА вируса ОП ответственны АГ, расположенные на поверхности наружной оболочки вириона и прежде всего белок 58кД, являющийся основным структурным компонентом трубочек(ворсинок). Антисыворотка к этому белку нейтрализует инфекционность вируса и предотвращает образование синцития в культуре клеток. Этот белок ответственен за выбаботку иммунитета. Выявлен 21 белок, кодирующий вирус оспы птиц. Эти белки можно разделить на пререпликативные и пострепликативные по аналогии с вирусом осповакцины.в первую группу входит белок 70кД.

Внеклеточные вирионы вируса ОП покрыты дополнительной наружной оболочкой отсутствующей у внутриклеточных вирионов. Она играет важную роль в индукции синтез! ВНА. Используются рекомбинантные вакцины на основе вируса ОП. Размер генома вируса допускает встраивание нескольких генов, позволяя получить мультивалентные вакцины, а также вакцины. Эффективными вакцинами показали себя экспрессируемые с рекомбинантным вирусом ОП антигены вируса НБ, гриппа птиц, ИББ, БМ. Приведены данные разных лабораторий по получению и испытанию этих препаратов. Пока не ясно, можно ли с их по­мощью решить проблему вакцинации в 1-й день жизни, при наличии у вылупляющихся птен­цов высокого уровня материнских AT.

Антигенная вариабельнось и родство. Между вирусами оспы кур, голубей и индеек имеется родство. Вирус оспы канареек в иммунологическом отношении отличается от воз­будителей оспы кур и голубей (табл. 1. 1).

Таблица 1. 1. Сравнительная патогенность и иммунологическое

родство между вирусами оспы птиц

АГ вариабельность у вируса оспы кур не установлена. Шт. существенно различаются по спектру патогенности и степени вирулентности. С помощью РСК, РН и РДП установлено антигенное родство вируса оспы кур с вирусами оспы овец и коз. Антигены ВОП, миксома-тоза кроликов, эктромелии мышей и оспы коров идентичны. Вирус оспы перепелов иммуно-логически отличен от вирусов оспы голубей и кур и защищает цыплят, голубей и индеек только против себя. Также иммунологически отличен вирус оспы попугаев.

Локализация вируса. В естественных условиях у больной птицы вирус локализуется в оспинах. В период предшествующей генерализации оспенного процесса (на 17-20-й день после инфицирования), вирус можно обнаружить в крови, почках, яичниках, селезенке, головном мозге и других органах. Однако он чаще обнаруживается в бесперьевых участках кожи го­ловы и на слизистой оболочке глотки, гортани, трахеи. В органах и тканях переболевших кур вирус выживает до 487 дней (срок наблюдения). Наружу вирус выделяется с вируссодержащим корочковым материалом больных птиц.

АГ активность. В сыворотках крови больных и экспериментально зараженных кур с 4-7-го дня появляются анти-ГА в титре 1:10- 1:80 и достигающие к 22-30 дней. титра 1:160 — 1:640, далее идет снижение титра. РЗГА специфична, ее можно использовать для диагно­стики оспы. У гипериммунизированных вирусом оспы кур выявляются специфические AT -преципитины. Преципитирующая сыворотка при 4°С сохраняет активность до 300 дней. АТ в сыворотке крови кур после 1-кратного введения им оспенного вируса реагируют только с полипептидами молекулярной массы 37 и 35 кД, тогда как AT после вторичной инокуляции курам вируса оспы реагируют ещё с 6-ю другими структурными белками вируса ОП. Иногда полевые вирулентные изоляты вызывают образование анти-ГА в высоком титре, но ВНА – в низком.

Экспериментальная инфекция. Легко воспроизводится ВОК у неиммунных цыплят и кур при заражении в скарифицированную кожу гребня, бородки, сережек и обнаженные перьевые фолликулы. Вирусы оспы кур и голубей хорошо размножаются на ХАО КЭ, различаясь между собой по характеру поражения мембраны и степени генерализации. Штаммы, относящиеся к куриному вирусу оспы, как правило поража.т ХАО и обнаруживаются в тканях и органах зародыша, а голубиный вирус оспы обычно не вызывает генерализованного процесса в эмбрионе и размножается преимущественно в зоне отслоенного участка ХАО.

Кроме эмбрионов, вирус оспы кур культивируются в клетках фибробластов КЭ, вызывая ЦПИ(округление и вакуолизацию клеток, образование гигантских клеток с 5-7 ядрами). Максимум инфекционной активности наблюдается к 72 ч. Вирус хорошо репродуцируется в перевиваемой линии клеток QT-35. вирус оспы перепёлок размножается в культуре фибробластов. В первых пассажах он не вызывает ЦПД.

ГА свойства. Вирус способен АГ эритроциты кур пород белой русской и леггорн. Оптимальными условиями реакции ГА являются: 0,5%-ная взвесь эритроцитов, РН физиологи­ческого р-ра 7,2-7,4 и температура 37°С. Адсорбированные ГА с эритроцитов не элюируют их удается отделить специфической иммунной сывороткой. Суспензия вируса оспы консервированная 0,5%-ным формалином, при хранении в темном месте при 4°С сохраняет свою ГА активность более 8 месяцев и может быть использована в РГА и РЗГА. Все шт. вируса про­являют одинаковую ГА-активность. За ГА-активность вируса ОП ответствен полипептид 85 кД и гликопептид 41 кД. Внутриклеточные вирионы (без дополнительной оболочки) не со­держат полипептида 85 кД. Неструктурный ГА формируется на цитоплазматических мем­бранах. С его образованием инфицированные клетки приобретают способность адсорбиро­вать эритроциты (5).

Источники и пути передачи инфекции. Основной источник — больная птица. Пере­носчиками могут быть насекомые. Доказана передача вируса оспы кур посредством Guliceides arakawae. Механические носители ВОП — клещи A. persicus, D. gallina, S. bipectinatus и клопы Cimex lectularius. Вирус оспы кур в организме зараженных в естест­венных условиях клещей A. persicus сохраняет активность до 730 дней, передается в после­дующее поколение трансовариально, в организме клещей D.gallinae — соответственно до 300 и 240 дней. Однако чаще птицы заражаются при контакте с больной птицей, через загрязнен­ные вирусом корма, инвентарь, одежду обслуживающего персонала. В организм вирус про­никает через поврежденные кожу и слизистые оболочки.

Спектр патогенности в естественных условиях. Большинство выделяемых полевых штаммов вируса оспы кур патогенны для птиц этого вида. Однако в экспериментальных условиях некоторые штаммы могут вызвать раздражение норок, уток, ястребов, канареек. Встречаются так назваемые бипатогенные и трипатогенные штаммы оспы кур; они заражают кур и голубей или кур, голубей и индеек. Штаммы Никано и Хоккей обладают широким спектром патогенной активности; вызывают оспенную реакцию цыплят, голубей и кроликов. По спектру патогенности ВОП могут быть расположены в таком порядке: голуби, индейки, куры, канарейки. Вирус оспы перепелов вызывает гибель перепелов-цыплят. При кожном заражении у голубей развивается слабовыраженная фолликулярная реакция. Вирус оспы выделен из бородавкоподобных поражений у 3х видов автралийских диких птиц: сороки, белоглазки и птичьего жаворонка. Все 3 вируса не вызывали ЦПД в культуре фибробластов КЭ. В РН, РДП показана АГ близость этих вирусов с вирусами оспы кур и голубей, но они не давали антигенных перекрёстов с вирусом осповакцины.

Диагноз на ОП ставят на основании эпизоотологических данных, результатов клинического обследования птиц, вирусологических и серологических исследований. Если имеются тичные оспенные поражения кожи, гребня, сережек и лицевой части головы, диагноз поставить не трудно. Если же поражения локализуются только в ротовой и носовой полостях диагностировать болезнь значительно труднее.

Выделение вируса на КЭ. Из 10%-нои суспензии, свободной от микрофлоры, готовят разведения 10-2 и 10-3 на физиологическом растворе. Каждым разведением (по 0,2 мл) заражают на ХАО по 4 10-12-дн КЭ, которые инкубируют в течение 6 дней. КЭ, погибшие на 3-й сутки и позже, а также оставшиеся живыми на 6-е сутки после заражения охлаждают и вскрывают. В положительных случаях на ХАО обнаруживают отдельно расположенные или слившиеся оспины. Под влиянием вируса оспы голубей возникают наиболее крупные, толстые, ком­пактные, с выпуклой серединой очаги оспенных поражений диаметром 5-6 мм, не имеющие признаков некроза. При высокой заражающей дозе наблюдается значительное утолщение и железообразный отек всей оболочки (вид медузы).

От вируса оспы кур появляются более мелкие (3-5 мм в диаметре) плоские поражения, иногда с неровными краями. При большой заражающей дозе наблюдаются обширные утол­щения оболочки, которая имеет беловатую окраску. Вирус оспы индеек дает беловатые сла­бо выраженные очаги поражения диаметром 2-3 мм, часто окруженные кольцеобразной зо­ной. Вирус оспы канареек образует дифференцированные очаги. Первичные очаги средней величины, разлитые и напоминают поражения, вызываемые оспой голубей. Вторичные оча­ги имеют вид мелких беловатых точек. От вируса осповакцины появляются хорошо види­мые очаги уже на 3-й день после инфицирования. Они плоские, диаметром 2-3 мм, с отчетли­во видимым центральным некрозом в первичных очагах. Из оспенных поражений ХАО де­лают тонкие мазки или отпечатки на предметных стеклах и окрашивают по Морозову или Пашену для выявления элементарных оспенных телец (вирионов). Выделение вируса на КЭ проводят до 3-х пассажей.

Биопроба. Биопробу проводят на неиммунных к вирусу оспы цыплятах 3-4-мес возрас­та. Для этого используют 10%-ную суспензию материала, полученного от естественно боль­ной птицы, или суспензию ХАО зараженных КЭ. В том и другом случаях испытуемый ма­териал осторожно втирают стеклянной палочкой или зубной щеткой в скарифицированную поверхность гребня, бородок, а также в освобожденные от перьев фолликулы голени. При наличии в материале вируса оспы на месте втирания на 5-6-й день развиваются оспенные по­ражения: припухание и покраснение фолликулов, появление на поверхности их гнойных пробочек, затем струпьев, которые в дальнейшем, сливаясь, дают общий струп коричневого цвета. Специфичность оспенных поражений у экспериментально зараженной птицы в каж­дом случае может быть подтверждена при помощи вирусоскопии мазков. У кур, заражен­ных вирусом оспы голубей в перьевые фолликулы, развивается доброкачественный фолли­кулит (без некроза), который к 10-12-му дню исчезает. Вирус оспы кур после нескольких пассажей на индейках может вызывать оспенный процесс у голубей, а после нескольких пассажей через них ослабить свою вирулентность по отношению к курам и индейкам.

Вирусоскопия. Готовят мазки из воспаленных фолликулов голени экспериментально зараженных кур или голубей или из свежих оспенных бородавок естественно больной пти­цы. Окрашивают их методом серебрения по Морозову, на присутствие элементарных телец можно окрашивать также по методу Герцберга или Пашена.

При иммерсионной микроскопии элементарные тельца Борреля просматриваются в виде мелких (200-300 нм) округлых образований темно-коричневого или черного цвета, распо­ложенных поодиночке, парами, короткими цепочками, в виде скоплений. Присутствие ос­пенного вируса считается подтверждением только при обнаружении характерных телец в массовом количестве. Достоинством метода вирусоскопии следует считать быстроту ответа /0 5-1 ч после доставки материала в лабораторию), простоту и доступность. Однако есть и некоторые недостатки? наиболее четкие результаты при вирусоскопии можно получить при использовании срезов от свежих везикул (до нагноения) или везикулярной жидкости; при исследовании пустулезной жидкости, особенно корок, возможность обнаружения элемен­тарных телец и достоверность полученных результатов значительно снижаются. Вирусоскопические исследования могут быть проведены также с использованием техники фазово-контрастной микросколии.

ЭМ. В эпителии оспин можно найти вирус ЭМ методом после адсорбции на коллодие-вую пленку. При этом выявляются’ как незрелые пузырьковидные вирусные частицы разме­ром от 60 до 200 нм, так и типичные кирпичеобразные и овальные зрелые вирионы. При не­гативном контрастировании видны филаментозные структуры вирионов. Диагноз считают установленным при наличии в препаратах одиночных или расположенных группами оспен­ных вирионов (Рис. 108), Метод позволяет определить не только размеры исследуемых ви­русов, но и форму и структуру их.

Обнаружение телец-включений. В цитоплазме инфицированных клеток обнаружива­ют 2 типа телец-включений (телец Боллингера): первые представляют собой волокнистый материал, соответствующий зрелым вирионам (тельца-включения типа В), вторые — зрелые вирионы (тельца-включения типа А), имеют структуру, идентичную структуре других штаммов вируса оспы кур. Предложен метод определения телец Боллингера в раздавленных срезах, изготовление которых доступно каждому ветеринарному специалисту непосредст­венно в производственных условиях. Для этого лезвием безопасной бритвы срезают вер­хушку оспины, следующий, предназначенный для исследования срез, делают как можно тоньше. Со слизистой оболочки срез производят ножницами. Полученный срез в расправ­ленном состоянии кладут в капле воды между двумя предметными стеклами, которые для удобства микроскопии смещают продольно относительно друг друга на 1,5-2 см. Раздавлен­ный срез осторожно снимают с предметного стекла, красят Суданом III10-15 мин, после че­го промывают в воде и в капле воды накрывают покровным стеклышком (1).

Быстрый и простой метод гистологических исследований (18) позволяет в течение не­скольких часов обнаружить цитоплазматические тельца-включения и дифференцировать ос­пенную инфекцию от ИЛТ кур.

РДП. При оспенной форме болезни для приготовления AT ex tempore используют ку­сочки гребешка или кожи с оспенными поражениями, легкие, печень, а при дйфтеритической форме — гортань, трахею, легкие и инфицированные вирусом ХАО КЭ. Преципитирующие линии из суспензии легкого и печени довольно четкие, но они в 2-3 раза слабее, чем из суспензии гребешка и кожи. Положительная РДП подтверждает диагноз на оспу, а отри­цательная не дает права исключать ее.

Помимо РДП для исследования сывороток используют тест встречного ИЭФ. В сыво­ротках бройлеров с помощью РДП AT выявляются позже, чем в тесте ВИЭФ. Последний имеет преимущества в отношении выявления ранних преципитинов. Тест прост и быстро производится. Для проведения ВИЭФ требуется всего лишь 45 мин в условиях комнат­ой температуры. Линии преципитации видны без окрашивания (16).

ИФ. Для индикации вируса используют метод простого флюорохромирования акриди-ым оранжевым, а также метод флюоресцирующих AT. Последний является экспресс-методом диагностики ОП при исследовании препаратов-отпечатков из оспенных поражений больной птицы, зараженной культуры клеток КЭ и т.д. Результаты исследования материала можно иметь через 5-7ч после поступления его в лабораторию.

Серодиагностика и ретроспективная диагностика. Разработана методика постановки РНГА для диагнстики оспы кур с использованием как нативных, так и формализироанных бараньих эритроцитов. В диагностических лабораториях применяется РДП в агаровом геле. Антигеном служат ХАО, собранные на 4-5-й день после заражения КЭ. Преципитирующую сыворотку получают от естественно больонй и переболевшей птицы. С помощью РДП с заведомо «активным» эмбриональным вирусом оспы кур можно выявить присутствие неспецифических АТ у кур, не имеющих видимых клинических признаков заболевания. РДП ставят по методу Джордани и Чабб(1962), модифицированному Г.А.Лежава(1964). При этом надо учитывать, что ПА в сыворотке крови обычно появляются между 11-36 днями после заболевания кур оспой. Сыворотка крови птицы, зараженной сильно вирулентным штаммом вируса оспы, обычно дает выраженную РДП. Однако преципитирующая сыворотка реконвалесцентов часто оазывается слабоактивной, а у 15% больных оспой кур ПА не удаётся выделить совсем.

Разработан ELISA для определения AT к вирусу ОП.

Дифференциальная диагностика. ОП следует дифференцировать от авитаминоза А ИЛТ, ИБК, пастереллеза, парши, аспергиллеза и респираторного микоплазмоза. ИММУНИТЕТ И СПЕЦИФИЧЕСКАЯ ПРОФИЛАКТИКА

Куры, переболевшие оспой в естественных условиях, приобретают иммунитет на 2-3 года.. Поствакцинальный иммунитет менее продолжителен и зависит от характера вакцины. Для специфической профилактики ОП применяют живые вакцины 2-х типов: приготовленные из иммуногенных и ареактогенных штаммов гетерологичного вируса оспы голубей или из атгенуированного или природно ослабленного ВОП 27-АШ. В СНГ применяют сухую вирусвакцину из вируса оспы голубей (шт. НД). Вирусвакцину из голубиного вируса (Рис. 108) оспы реко­мендуют для цыплят 1-1,5-мес возраста. Иммунитет у привитой птицы наступает через 3 недели и сохраняется около 3 месяцев у цыплят и до 10 месяцев у кур. При использовании вакцины из вируса оспы голубей напряженность и длительность создаваемого иммунитета во многом зависит от числа воспалившихся после вакцинации перьевых фолликулов. Считают, что для создания напряженного иммунитета у птицы голубиной вакциной каждая доза последней должна иметь титр не менее 105 ЭИД 30, а у птицы, привитой вакциной в рабочем разведе­нии, должно быть не менее 15 воспалившихся фолликулов. Проведены успешные опыты аэ­розольного применения вирус-вакцины из голубиного штамма оспы Нью-Джерси. При та­ком методе вакцинации иммунитет у цыплят формируется к 11 суток и сохраняется не менее 190 дней. Ф.Б. Ширинов выделил природно ослабленный ВОП и, всесторонне изучив его, рекомендовал для широкого применения в качестве живой вакцины с профилактической це­лью. 5-летний срок использования этой вакцины дал основания оценить ее положительно. Однако в настоящее время в РФ применяется сухая вакцина из шт. ВГНКИ из куриного ви­руса. Ее готовят на основе аттенуированного культурального штамма К. Птицу иммунизируют методом укола в перепонку крыла. Реакция на введение вакцины наступает на 5-8-й день и ха­рактеризуется образованием на наружной и внутренней поверхностях перепонки крыла ос­пин, которые исчезают через 28-30 дней. По эффективности и иммунобиологическим показате­лям технологии изготовления и применения эта вакцина превосходит все предыдущие.

В Австралии проводят вакцинацию цыплят путем добавления в корм коммерческого препарата. По данным авторов, вакцинация per os с кормом дешевле аэрозольной вакцина­ции, поскольку требует гораздо меньшего количества вируссодержащего материала при одинаковом индуцировании AT.

Серологическая оценка поствакцинального иммунитета не разработана.

источник