Реакция агглютинации райта при бруцеллезе

Постановка реакции агглютинации (реакция Райта) на бруцеллез

1. Для постановки реакции агглютинации на бруцеллез применяются свежие сыворотки, не имеющие гнилостного запаха, значительной коагуляции белка и гемолиза. Допускается исследование сывороток, консервированных фенолом до 0,5%, со сроком их давности не свыше 15 дней.

2. Реакция ставится на физиологическом растворе (0,85%) поваренной соли в 4 разведениях: для свиней, коз, овец и собак 1 : 25; 1 : 50; 1 : 100; 1 : 200, для крупного рогатого скота лошадей и верблюдов 1 : 50; 1 : 100; 1 : 200; 1 : 400 в количестве 1 мл каждого разведения в пробирках с ровным выпуклым дном.

При массовых исследованиях допускается постановка реакции в двух первых разведениях: для свиней, овец, коз и собак 1 : 25 и 1 : 50, для крупного рогатого скота, лошадей и верблюдов 1 : 50 и 1 : 100.

Для предохранения от прорастания посторонней микрофлорой рекомендуется постановка реакции на фенолизированном 0,5% физрастворе.

3. Контроль реакции ставится:
а) с отрицательной — негативной сывороткой в тех же разведениях, как и испытуемые сыворотки;
б) с положительной — позитивной сывороткой до предельного титра;
в) антиген с 1 мл физраствора.

4. Во все пробирки, в том числе и контроль, при постановке прибавляется 0,05 мл 10-миллиардного антигена, приготовленного согласно особой инструкции. Затем все пробирки тщательно встряхиваются до получения равномерной взвеси.

Допускается разлив сывороток в соответствующих дозах и микропипеткой. В этом случае антиген приливается по 1 мл, предварительно разведенный до 500 миллионов микробных тел в 1 мл. Сыворотки разливаются в дозах 0,04, 0,02, 0,01 и 0,005, что соответствует разведениям 1 : 25; 1 : 50; 1 : 100; 1 : 200.

5. При разливе сывороток обязательна тщательная промывка пипеток после каждой сыворотки не менее 6 раз в двух-трех посудах.

6. После тщательного встряхивания пробирки ставятся на 4—10 часов в термостат при температуре 37—38°С, затем пробирки выдерживаются при комнатной температуре 24—18 часов.

Учет реакции производится макроскопически.

7. Диагностически положительной испытуемая проба сыворотки считается при наличии макроскопической агглютинации в разведении 1:50 для свиней, овец, коз и собак и 1 : 100 для крупного рогатого скота, лошадей и верблюдов с оценкой их не менее чем на два креста.

8. Диагностически сомнительной испытуемая проба сыворотки считается при наличии макроскопической агглютинации только в разведении 1 : 25 для свиней, овец, коз, собак и 1 : 50 для крупного рогатого скота, лошадей, верблюдов с оценкой не менее чем на два креста.

9. Все сыворотки, давшие агглютинацию в каких-либо разведениях, исследуются повторно из той же пробы в 4 разведениях: для свиней, овец, коз и собак: 1 : 25; 1 : 50; 1 : 100; 1 : 200; для крупного рогатого скота, лошадей, верблюдов: 1 : 50; 1 : 100; 1 : 200; 1 : 400. При получении сомнительной реакции кровь от животного берется повторно через 3—4 недели.

10. При получении положительных или сомнительных реакций в ответе хозяйству указывается разведение, в котором получена реакция.

11. Сыворотки крупного рогатого скота, поступающие из хозяйств, в которых имелись или имеются аборты на почве бруцеллеза или выделяется значительное количество положительно реагирующих по реакции агглютинации (свежая инфекция), исследуются в 4 разведениях: 1 : 25; 1 : 50; 1 : 100; 1 : 200. При наличии макроскопической агглютинации в разведении 1 : 25, 1 : 50 не менее чем на два креста проба считается диагностически сомнительной. Если через 3—4 недели при повторном исследовании сывороток сомнительно реагирующих животных титр агглютинации не будет превышать 1 : 25, то проба признается диагностически отрицательной.

12. Если при исследовании сывороток свиней и лошадей будут получены только сомнительные реакции (у свиней 1 : 25, у лошадей 1 : 50) и при повторной проверке этих животных титр агглютинации не повысится, то при условии отсутствия в хозяйстве клинических признаков бруцеллеза среди этих видов животных и реагировавших в более высоких разведениях пробы признаются диагностически отрицательными.

13. Оценка реакции агглютинации в крестах:
++++ полное просветление жидкости при наличии явно выраженного зонтика (при встряхивании зонтик разбивается на хлопья, комочки и крупинки);
+++ те же явления, что отмечены для 4 крестов, но жидкость слегка опалесцирует (недостаточно полное просветление);
++ просветление жидкости выражено слабо, имеется наличие зонтика, который при встряхивании разбивается на хлопья, комочки и крупинки;
+ отсутствие или весьма незначительное просветление при наличии слабо выраженного зонтика или его следов, при встряхивании в жидкости заметны комочки и крупинки;
— отрицательная реакция агглютинации.

Отсутствие просветления и зонтика. Микробы могут оседать на дно в виде точки, при встряхивании разбиваются в равномерную муть.

источник

Серологические реакции и аллергическая проба являются общедоступными методами и применяются для диагностики бруцеллеза наряду с бактериологическим и биологическим методами.

В случае малой обсемененности пробы и отрицательных результатов, полученных при посеве исследуемого материала на питательные среды и заражении лабораторных животных, серологический метод может быть единственным, позволяющим диагностировать бруцеллез. В зависимости от целей исследования используют те или иные серологические методы.

При проведении эпидемиологического исследования бруцеллеза в очагах применяют 1.реакцию агглютинации пластинчатую (Хеддльсона) и 2.Объемную (Райта), а так же реакции Кумбса, РСК, РДСК, РПГА, кожную аллергическую пробу, иммуноферментный анализ (ИФА). Перед профилактической вакцинацией населения можно ограничиться постановкой пластинчатой реакции агглютинации (Хеддльсона) и кожной аллергической пробы.\

Реакция Райта (Реакция агглютинации с бруцеллезным антигеном в пробирках )

Реакция Райта проводится в пробирках в объеме 1 мл с разведениями сыворотки 1:50, 1:100, 1:200, 1:400, 1:800 и единым бруцеллезным диагностикумом. Последний представляет собой взвесь убитых нагреванием и фенолом бруцелл. Для пробирочной реакции диагностикум разводят в 10 раз карболизированным (0,5%) физраствором. Методика разведения сыворотки обычна для пробирочной реакции агглютинации. Пробирки встряхивают, ставят в термостат при температуре 37° до следующего дня. Учет реакции проводят обычным способом или по 50% агглютинации (2+) в сравнении со стандартом мутности. Серийные титры 50% агглютинации 1:50, 1:100, 1:200, 1:400,1:800 свидетельствуют о том, что в 1 мл исследуемой сыворотки содержится соответственно 50, 100, 200, 400, 800 МЕ антител. Выраженность реакции больного оценивают по следующей схеме: титр 1:50 оценивается как сомнительный, 1:100 – слабо положительный, 1:200 и 1:400 – положительный, 1:800 – резко положительный.

При остром бруцеллезе реакция Райта положительна у больных в титре 1:200-1:800, тогда как при хроническом бруцеллезе – в титре 1:50-1:100. В то же время обострение хронического бруцеллеза сопровождается повышением титра 1:200-1:400.

Перечисленные показатели относятся к больным, заражение которых происходило в период их кратковременного пребывания в сельской местности, неблагополучной по бруцеллезу, или в результате систематического употребления некипяченого «фляжного» молока в городе.

Иногда резко выраженная реакция Райта наблюдается у больных со слабо выраженными клиническими проявлениями бруцеллеза.

Серологическая реакция агглютинации на стекле (реакция Хеддльсона)

Реакция Хеддльсона (пластинчатая – применяют на стекле) чувствительна, но менее специфична, дает возможность выявлять агглютинины в первые дни болезни, быстро получить ответ. На большое (9х12см) хорошо обезжиренное сухое стекло на расстоянии 3-4 см друг от друга микропипеткой наносят исследуемую сыворотку в дозах 0,04, 0,02, 0,01 мл (опытные капли) и 0,02 мл (контрольная капля). К трем первым каплям сыворотки добавляют по 0,03 мл единого неразведенного диагностикумума, к последней – 0,03 мл физраствора. Максимальный срок наблюдения – 8 минут. Учет осуществляют невооруженным глазом по 4+ системе. При положительной реакции в опытных каплях появляются хлопья и жидкость становится более или менее прозрачной. Агглютинацию во всех трех дозах 4+ принимают за резко положительный результат, в первой и второй дозах – за положительный результат, только в первой дозе – сомнительный результат, отсутствие агглютинации во всех дозах – отрицательный результат.

Реакция Кумбса либо антиглобулиновый тест.

Его проводит для обнаружения антител, которые атакуют эритроциты.

Для обнаружения бруцеллеза используется прямая реакция. Эта реакция различает антитела, которые напрямую связаны с эритроцитами. Если антиглобулиновый тест показывает отрицательный результат – значит кровь чистая, и антител нет. Положительный результат означает появление антител, которые активно борются с эритроцитами.

ПЦР-диагностика основывается, на обнаружении ДНК-цепей бруцелл из биологического материла пациента. Для этого материал обеззараживают, прибавляя метиолят натрия концентрацией 0,01% с дальнейшим прогреванием в течение получаса. Когда завершится инкубирование в лизирующем растворе, который содержит, все необходимые реагенты для экстракции ДНК при поддерживании температуры в 66С на протяжении 10-15 минут биологическая ткань обезвреживается.

Этот анализ обладает положительной чертой в том плане, что можно использовать абсолютно любую биологическую ткань пациента.

источник

Один из методов лабораторной диагностики — выделение культуры возбудителя от больных с острым бруцеллезом. Для посева используется кровь, реже моча, желчь, костный мозг. Материал засевается на мясо-пептонный агар и мясопептонный бульон с добавлением 1% глюкозы и 2% химически чистого глицерина, а также питательный бульон и агар Д.

Для возбудителей бруцеллеза при выделении их от больных характерен крайне медленный рост на питательных средах. Посев выдерживают при 37°С в течение 30 дней, а в случае выделения В. abortus необходимо присутствие в воздухе повышенного содержания углекислого газа. Бактериологическое исследование длится от 20 до 30 дней.

Выделенные культуры идентифицируются на основании морфологических и культуральных признаков, в реакции агглютинации и фаголизиса.

Иммунологическая диагностика бруцеллеза у человека является ведущей, поскольку бактериологические исследования практически не применяются.

Широкое распространение получили серологические реакции агглютинации, связывания комплемента, непрямой гемагглютинации, опсонофагоцитарная проба, аллергическая проба и, за последнее время, иммунофлуоресцентный анализ.

Реакция агглютинации бруцелл сывороткой больного или переболевшего (и привитого) осуществляется в пробирочном варианте (реакция Райта) и в ускоренном, за 8 минут, на оконном стекле (реакция Хеддльсона).

Первая производится в лабораторных условиях, вторая, как правило, — при массовых полевых обследованиях и не исключает в последующем постановки реакции Райта.
Для обеих реакций применяется стандартный единый бруцеллезный диагностикум.

При постановке реакции Райта положительные результаты учитываются при титре 1:200 и выше, при постановке реакции Хеддльсона положительной считают агглютинацию во второй или третьей дозе (0,02— 0,01 мл сыворотки); агглютинация на 4 креста во всех дозах сыворотки (от 0,04 до 0,01 мл) — результат резко положительный.

Разведения сыворотки в реакции Хеддльсона не сопоставляют с титрами реакции Райта, первая играет в основном роль качественной реакции, о высоте титров агглютининов судят по результатам пробирочной реакции.

Наиболее высокие титры реакции агглютинации наблюдаются обычно через 1—2 месяца от начала заболевания (у 80% обследованных больных), затем они начинают падать. Реакция Райта может сохраняться положительной в течение 3—7 лет после перенесенного заболевания, если данное лицо продолжает находиться в условиях возможной реинфекции. В случае отрицательного или сомнительного результатов реакцию следует повторить через 7—10 дней.

Реакция связывания комплемента при бруцеллезе специфична и более чувствительна, чем реакция агглютинации. Она широко применяется ветеринарными специалистами при обследовании сельскохозяйственных животных. Для повышения чувствительности РСК используют ее модификацию — связывание комплемента при 4°С в течение 18 часов. У людей эту реакцию можно применять с 20-го по 25-й день болезни.

Для выявления неполных (блокирующих) антител при бруцеллезе проводят реакцию Кумбса. На выполнение реакции требуется 18—20 часов. Неполные антитела, в отличие от агглютининов — полных антител, появляются в крови больного раньше и сохраняются дольше, что делает эту реакцию пригодной для целей ранней и ретроспективной диагностики.

За последние годы для определения агглютининов успешно используется реакция непрямой гемагглютинации. В качестве диагностикума служат эритроциты барана или человека О-группы, сенсибилизированные полисахаридным антигеном бруцелл.

Кожно-аллергическая проба при бруцеллезе становится, как правило, положительной на 3-й неделе заболевания, у привитых она нарастает значительно медленнее и достигает 72—90% к 6 месяцам после иммунизации, сохраняясь до 1 года. У больных реакция Бюрне сохраняется много лет после перенесенного бруцеллеза. На практике для текущей или ретроспективной диагностики бруцеллеза у человека или определения иммунологической эффективности прививок, следует проводить комплекс серо-аллергических исследований, которые взаимно дополняют друг друга.

Молоко больных коров, коз и овец может содержать агглютинины к бруцеллезному антигену. Для их выявления обезжиренное свежее молоко или молочная сыворотка исследуются по реакции Хеддльсона с единым бруцеллезным диагностикумом. Для этой же цели, но с цельным молоком, применяется так называемая кольцевая реакция (КР), сущность которой заключается в том, что применяют специальный окрашенный бруцеллезный антиген.

При наличии в молоке специфических агглютининов они соединяются с антигеном, образуя в верхней части пробирки (где скапливаются сливки) окрашенное кольцо, остальная часть молока остается неокрашенной. КР в настоящее время приобретает все большее значение как полевая ориентировочная серологическая проба на бруцеллез и представляет интерес как для медицинских, так и для ветеринарных работников.

В настоящее время при помощи флуоресцирующих бруцеллезных антител можно выявить бруцеллы из разнообразных субстратов — воды, крупяных продуктов, молока, брынзы, абортированных плодов, а также непрямым методом можно выявить антитела в сыворотке .крови больных, переболевших или привитых. В последнем случае положительным следует считать свечение бруцелл на 2—3 креста при разведении сыворотки 1:10—1:20. По некоторым данным, в реакции иммунофлуоресценции можно обнаружить специфические антитела в 2,5 раза чаще, чем в реакции Райта.

Опсонофагоцитарная реакция (ОФР) основана на способности сегментоядерных нейтрофилов фагоцитировать бруцеллы благодаря наличию в крови больного специфических опсонинов, нарастающих в процессе инфекции или иммунизации. Реакцию ставят с нейтрофилами крови больного или привитого со специальным антигеном (взвесь убитых бруцелл в физиологическом растворе без консерванта).

На проведение реакции уходит 1 час. Подсчитывают количество фагоцитированных бруцелл в 25 лейкоцитах. Если общее количество этих бруцелл более 25, реакцию считают ясно положительной, от 50 до 75 бруцелл — резко положительной. У здоровых людей показатель ОФР не превышает 5.

Некоторые данные свидетельствуют о высокой результативности ОФР. У больных она бывает положительной в 95,4% случаев, у переболевших—в 100%, у работников боен — в 57%, у ветработников — в 72%, у контактировавших с животными — в 5%. ОФР имеет также и прогностическое значение, показатели ее увеличиваются к периоду выздоровления или при хорошо компенсированном инфекционном процессе. ОФР при бруцеллезе воспроизводится не менее длительно, чем реакция Райта.

Широко применяется кожно-аллергическая проба с бруцеллином (реакция Бюрне), которая дает положительные результаты у больных, переболевших и привитых. Постановку и учет пробы проводят как обычно. Средний размер кожной реакции (гиперемии и инфильтрата), отмечаемой через 24 часа, — 4×6 см. Диагностическое значение имеет инфильтрат не менее 2×3 см через 24 часа.

— Читать «Профилактика бруцеллеза и противоэпидемические меры»

Оглавление темы «Бруцеллез. Сибирская язва»:

1. Профилактика сальмонеллеза и противоэпидемические меры
2. Бруцеллез — история, география, возбудители
3. Источник бруцеллеза и его резервуар
4. Клиника бруцеллеза у животных и человека
5. Лабораторная диагностика бруцеллеза
6. Профилактика бруцеллеза и противоэпидемические меры
7. Сибирская язва — история, география, возбудители
8. Источник сибирской язвы и ее резервуар
9. Клиника сибирской язвы у животных и человека
10. Лабораторная диагностика сибирской язвы

• •Предисловие
• •I. Краткие сведения об инфекции и иммунитете
• •II. Бактерийные препараты и химиотерапевтиче- ские средства, применяемые в ветеринарной практике
• •Вакцины
• •Вакцины, изготовленные из ослабленных живых (матриксов) культур
• •Вакцины, изготовленные из культур, убитых формалином
• •Вирусы. Используемые для вакцинации
• •Иммунные сыворотки, применяемые для серотерапии и серопрофилактики
• •Средства, применяемые для диагностической цели
• •Препараты, применяемые для диагностических реакций на животных
• •Препараты, применяемые для лабораторных диагностических реакций
• •Химиотерапевтические препараты
• •III. Хранение и транспортировка прививочных средств
• •IV.Инструментарий, применяемый при прививках
• •V. Организация и техника проведения прививок организация прививок
• •Фиксация животных
• •Подготовка препаратов и инструментария
• •Способ введения препаратов
• •VI. Предохранительные, лечебные и вынужденные прививки
• •1. Прививки против сибирской язвы
• •Предохранительные прививки
• •Вынужденные прививки
• •Комбинационные прививки
• •Пассивные прививки
• •Возможные осложнения при прнпивках
• •Учёт результатов прививок
• •Производство прививок против сибирской язвы северным оленям
• •2. Прививки против эмфизематозного (шумящего) карбункула
• •3. Прививки против паратифа и колибациллеза телят
• •4. Прививки против рожи свиней
• •Способ применения
• •Возможные осложнения после прививки
• •Учет результатов
• •5. Прививки против паратифа поросят
• •6. Прививки против дизентерии ягнят
• •7. Прививки против столбняка
• •8. Прививки против геморрагической септицемии сельскохозяйственных животных и холеры птиц
• •9. Прививки при мыте лошадей
• •10. Прививки против чумы свиней
• •11. Прививки против оспы овец
• •12. Прививки против чумы крупного рогатого скота
• •13. Прививка против бешенства
• •14. Прививки крупного рогатого скота против перипневмонии
• •15. Прививки против оспы-дифтерита птиц
• •VII. Аллергические реакции у животных
• •1. Диагностика туберкулёза у крупного рогатого скота. Свиней и птиц
• •Внутрикожная нроба у крупного рогатого скота
• •Внутрикожная туберкулинизация у свиней
• •Глазная туберкулинизация
• •Подкожная туберкулинизация
• •Диагностика туберкулёза птиц с помощью туберкулина
• •2. Диагностика сапа у однокопытных животных с помощью маллеина
• •Глазная маллеинизация
• •Подкожная маллеинизация
• •3. Диагностика бруцеллёза у овец и коз с помощью бруцеллизата
• •4. Диагностика бруцеллёза у крупного рогатого скота с помощью абортина
• •VIII. Серологические методы лабораторной диагностики
• •1. Методика постановки реакции преципитации на сибирскую язву
• •2. Методика постановки реакции агглютинации (реакции райта) на бруцеллёз сельскохозяйственных животных
• •8. Методика постановки реакции агглютинации при инфекционном аборте лошадей
• •4. Методика постановки реакции агглютинации со свежей каплей крови при диагностике бациллоносителей белого поноса у кур
• •5. Методика постановки реакции связывания комплемента при бруцеллезе
• •Компоненты реакции
• •Титрация компонентов реакции
• •Титрация гемолизина
• •Титрация комплемента в гемолитической системе
• •Титрация комплемента в бактериологической системе
• •Титрация бруцеллёзного антигена
• •Примерный результат реакции
• •Главный опыт
• •Оценка результатов реакции
• •6. Методика постановки реакции связывания комплемента при сапе
• •Компоненты реакции
• •Титрация компонентов реакции
• •Титра ция гемолизина
• •Титрация комплемента в гемолитической системе
• •Титрация комплемента в бактериологической системе
• •Разведение комплемента для главного опыта
• •Главный опыт
• •Титрация сапного антигена
• •7. Методика постановки рск при перипневмонии крупного рогатого скота
• •Титрация компонентов реакции
• •Титрация комплемента в гемолитической системе
• •Титрация комплемента в бактериологической системе
• •Разведение комплемента для главного опыта
• •Титрация антигена
• •Главный опыт
• •Учёт реакции
• •8. Методика постановки реакции связывания комплемента при случной болезни
• •Титрация компонентов реакции
• •Титрация гемолизина
• •Титрация комплемента в гемолигической системе
• •Подтитровка комплемента на сыворотках
• •Разведение комплемента в установленном титре
• •Главный опыт
• •Титрация трипанозомного антигена
• •IX. Применение химиотерапевтических препаратов
• •1.Применение наганина
• •Техника приготовления раствора наганина
• •Техника введения раствора
• •Применение наганина с профилактической целью
• •Применение наганина с лечебной целью
• •Терапия осложнений после лечения
• •2. Применение новарсенола
• •3. Применение, флавакридина (трипафлавина, акрифлавина. Эифлавина)
• •Способ применения и возможные осложнения
• •4. Применение трипанблау (трипансинь)
• •Признаки побочного действия трипанблау
• •Профилактическое применение трипанблау
• •Лечебное применение трипанблау
• •Техника приготовления растворов
• •5. Применение альбаргина
• •6. Применение новоплазмина (лп4)
• •7. Применение сульфантрола (сульфамид — с55)
• •8. Применение пироплазмина (акаприн)
• •

Реакция агглютинации— РА(от лат. aggluti-natio — склеивание) — простая по постановке реакция, при которой происходит связыва­ние антителами корпускулярных антигенов (бактерий, эритроцитов или других клеток, нерастворимых частиц с адсорбированными на них антигенами, а также макромолекуляр-ных агрегатов). Она протекает при наличии электролитов, например при добавлении изо­тонического раствора натрия хлорида.

Применяются различные варианты реакции агглютинации: развернутая, ориентировоч­ная, непрямая и др. Реакция агглютинации проявляется образованием хлопьев или осад­ка (клетки, «склеенные» антителами, име-

ющими два или более антигенсвязывающих центра — рис. 13.1). РА используют для:

1) определения антител в сыворотке крови боль­
ных, например, при бруцеллезе (реакции Райта,
Хеддельсона), брюшном тифе и паратифах (реак­
ция Видаля) и других инфекционных болезнях;

2) определения возбудителя, выделенного от больного;

3) определения групп крови с использова­нием моноклональных антител против алло-антигенов эритроцитов.

Для определения у больного антител ставят развернутую реакцию агглютинации: к разве­дениям сыворотки крови больного добавля­ют диагностикум (взвесь убитых микробов,) и через несколько часов инкубации при 37 °С отмечают наибольшее разведение сыворотки (титр сыворотки), при котором произошла агглютинация, т. е. образовался осадок.

Характер и скорость агглютинации зави­сят от вида антигена и антител. Примером являются особенности взаимодействия диа-гностикумов (О- и //-антигенов) со специ­фическими антителами. Реакция агглютина­ции с О-диагностикумом (бактерии, убитые нагреванием, сохранившие термостабильный О-антиген) происходит в виде мелкозернис­той агглютинации. Реакция агглютинации с Н-диагностикумом (бактерии, убитые фор­малином, сохранившие термолабильный жгу­тиковый Н-антиген) — крупнохлопчатая и протекает быстрее.

Если необходимо определить возбудитель, выделенный от больного, ставят ориентиро­вочную реакцию агглютинации, применяя диа­гностические антитела (агглютинирующую сыворотку), т. е. проводят серотипирование возбудителя. Ориентировочную реакцию проводят на предметном стекле. К капле диа­гностической агглютинирующей сыворотки в разведении 1:10 или 1:20 добавляют чистую культуру возбудителя, выделенного от больно­го. Рядом ставят контроль: вместо сыворотки наносят каплю раствора натрия хлорида. При появлении в капле с сывороткой и микроба­ми хлопьевидного осадка ставят развернутую реакцию агглютинации в пробирках с увели­чивающимися разведениями агглютинирую­щей сыворотки, к которым добавляют по 2-3 капли взвеси возбудителя. Агглютинацию учитывают по количеству осадка истепени просветления жидкости. Реакцию считают положительной, если агглютинация отмеча­ется в разведении, близком к титру диагнос­тической сыворотки. Одновременно учитыва­ют контроли: сыворотка, разведенная изото­ническим раствором натрия хлорида, должна быть прозрачной, взвесь микробов в том же растворе — равномерно мутной, без осадка.

Разные родственные бактерии могут агглю­тинироваться одной и той же диагностической агглютинирующей сывороткой, что затрудня­ет их идентификацию. Поэтому пользуются адсорбированными агглютинирующими сыво­ротками, из которых удалены перекрестно

реагирующие антитела путем адсорбции их родственными бактериями. В таких сыво­ротках сохраняются антитела, специфичные только к данной бактерии. Получение таким способом монорецепторных диагностических агглютинирующих сывороток было предло­жено А. Кастелляни (1902).

Реакция непрямой (пассивной) гемагглюти-нации (РНГА, РПГА)основана на использова­нии эритроцитов (или латекса) с адсорбиро­ванными на их поверхности антигенами или антителами, взаимодействие которых с соот­ветствующими антителами или антигенами сыворотки крови больных вызывает склеива­ние и выпадение эритроцитов на дно пробирки или ячейки в виде фестончатого осадка (рис. 13.2). При отрицательной реакции эритроци­ты оседают в виде «пуговки». Обычно в РНГА выявляют антитела с помощью антигенно­го эритроцитарного диагностикума, который представляет собой эритроциты с адсорбиро­ванными на них антигенами. Иногда приме­няют антительные эритроцитарные диагнос-тикумы, на которых адсорбированы антитела. Например, можно обнаружить ботулиничес-кий токсин, добавляя к нему эритроцитарный антительный ботулинический диагностикум (такую реакцию называют реакцией обратной непрямой гемагглютинации — РОНГА). РНГАприменяют для диагностики инфекционных болезней, определения гонадотропного гор­мона в моче при установлении беременности, для выявления повышенной чувствительнос­ти к лекарственным препаратам, гормонам и в некоторых других случаях.

Реакция коагглютинации. Клетки возбуди­теля определяют с помощью стафилококков, предварительно обработанных иммунной диагностической сывороткой. Стафилококки, содержащие белок А, имеющий сродство кFc-фрагменту иммуноглобулинов, неспеци­фически адсорбируют антимикробные анти­тела, которые затем взаимодействуют актив­ными центрами с соответствующими микро­бами, выделенными от больных. В результате коагглютинации образуются хлопья, состо­ящие из стафилококков, антител диагности­ческой сыворотки и определяемого микроба.

Реакция торможения гемагглютинации (РТГА)основана на блокаде, подавлении ан­тигенов вирусов антителами иммунной сы­воротки, в результате чего вирусы теряют свойство агглютинировать эритроциты (рис. 13.3). РТГА применяют для диагностики мно­гих вирусных болезней, возбудители которых (вирусы гриппа, кори, краснухи, клещево­го энцефалита и др.) могут агглютинировать эритроциты различных животных.

Реакцию агглютинации для определения групп крови применяют для установления системы АВО (см. разд. 10.1.4.1) с помощью агглютина­ции эритроцитов антителами иммунной сы­воротки против антигенов групп крови А (II), В (III).Контролем служат: сыворотка, не содер­жащая антител, т. е. сыворотка АВ (TV) группы крови; антигены, содержащиеся в эритроцитах групп А (II), В (III). Отрицательный контроль не содержит антигенов, т. е. используют эрит­роциты группы 0 (I).

В реакции агглютинации для определения резус-фактора (см. разд. 10.1.4.1) используют антирезусные сыворотки (не менее двух раз­личных серий). При наличии на мембране ис­следуемых эритроцитов резус-антигена проис­ходит агглютинация этих клеток. Контролем служат стандартные резус-положительные ирезус-отрицательные эритроциты всех групп крови.

Реакцию агглютинации для определения антирезусных антител (непрямую реакцию Кумбса) применяют у больных при внутрисо-судистом гемолизе. У некоторых таких боль­ных обнаруживают антирезусные антитела, которые являются неполными, одновалент­ными. Они специфически взаимодействуют с

резус-положительными эритроцитами, но не вызывают их агглютинации. Наличие таких неполных антител определяют в непрямой реакции Кумбса. Для этого в систему анти-резусные антитела + резус-положительные эритроциты добавляют антиглобулиновую сыворотку (антитела против иммуноглобули­нов человека), что вызывает агглютинацию эритроцитов (рис. 13.4). С помощью реакции Кумбса диагностируют патологические состо­яния, связанные с внутрисосудистым лизисом эритроцитов иммунного генеза, например ге­молитическую болезнь новорожденных: эрит­роциты резус-положительного плода соединя­ются с циркулирующими в крови неполными антителами к резус-фактору, которые пере­шли через плаценту от резус-отрицательной матери.

Дата добавления: 2016-02-04; просмотров: 1356;

Клинический подход к пациенту с желтухой должен базироваться на понимании метаболизма билирубина (рис. 14-2, 14-3).

Первый этап метаболизма билирубина заключён в распаде эритроцитов в ретикулоэндо- телиальной системе с выделением гема и образованием неконъюгированного (непрямого) билирубина.

Он относительно малорастворим и его обнаружение в сыворотке требует добавления спирта в качестве растворителя перед проведением реакции с диазореактивом в реакции Ванденберга. Добавление спирта — основа непрямой реакции Ванденберга. В норме билирубин в крови пребывает почти исключительно в этой форме. Любое усиление гемолиза может вызывать желтуху, но так как неконъюгированный билирубин плохо растворим в воде, он не появляется в моче, и поэтому гемолитическую желтуху также называют ахолурической. С другой стороны, конъюгированный билирубин растворим в воде и, следовательно, способен реагировать напрямую с реактивом в реакции Ванденберга и попадать в мочу. Ги- пербилирубинемию с повышением конъюгированного билирубина наблюдают при всех видах обструктивной желтухи.

Неконъюгированный билирубин в крови пребывает в связанном с белками виде, преимущественно с альбумином. При вытеснении его из связи с белком он, обладая аффинитетом к липидам, может проникать в головной мозг у новорождённых, но у взрослых он не проходит через гематоэнцефалический барьер. Некоторые препараты, например, сульфонамиды и салицилаты, способны воздействовать на связь билирубина с белком. У новорождённых при развитии физиологической желтухи, вызванной незрелостью конъюгирующих ферментов печени, назначение таких лекарственных средств иногда усиливает тяжесть желтухи и может спровоцировать развитие ядерной желтухи.

На следующем этапе билирубин захватывается печёночными клетками и переносится в эндоплазматический ретикулум, где находится фермент глюкуронил трансфераза. Здесь происходит конъюгация билирубина с глюкуро- нидом с образованием конъюгированного водорастворимого (прямого) билирубина. Нарушения на этих этапах обусловливают развитие врождённых гипербилирубинемий, из которых чаще всего встречают болезнь Жильбера. Данная патология наследуется по аутосомно-до- минантному типу. Преимущественно нарушен захват неконъюгированного билирубина печёночными клетками, но в некоторых случаях
возможен и дефект собственно конъюгиро- вания. В этом случае производство фермента глюкуронил трансферазы может быть индуцировано фенобарбиталом. Мужской папоротник, использовавшийся для лечения глистной инвазии, влияет на транспортировку билирубина в эндоплазматический ретикулум, а новобиоцин® воздействует на конъюгирование, что также приводит к развитию желтухи.

Конъюгированный билирубин затем накапливается в гепатоцитах и экскретируется в канальцы и далее переносится в более крупные ветви билиарного дерева.

Наследственный дефект экскреции по типу гипербилирубинемии болезнь Дубина—Джонсона характеризует коричнево-чёрное окрашивание печени, возмож
но, за счёт меланина. Контраст, применяемый для холецистографии, конкурирует с конъюгированным билирубином и поэтому при наличии его избытка он не концентрируется и даже может усиливать желтуху. Метилтестостероновая желтуха (а также желтуха, вызванная другими препаратами С17-алкилированного тестостерона для приёма внутрь) возникает из-за нарушения канальцевой экскреции билирубина. Данный феномен зависит от дозы, в отличие от внутрипечёночного холестаза по механизму гиперчувствительности, наблюдаемого у некоторых больных, принимающих фенотиазины.

Практически весь конъюгированный билирубин экскретируется в ЖКТ, где превращается в стеркобилиноген, а затем в стеркобилин. Не-

которая часть стеркобилиногена всасывается из кишечника и снова экскретируется с жёлчью. Определённая доля экскретируется с мочой в виде уробилиногена мочи. При неспособности печёночных клеток повторно экскретировать стеркобилиноген возникает избыток уробилиногена мочи, что является простым, но очень чувствительным методом для оценки функции печени. Это также имеет существенное значение для проведения дифференциальной диагностики при желтухе. Наличие полной обструкции любой этиологии предполагает исчезновение уробилиногена из мочи, так как жёлчь не попадает в кишечник. При вирусном гепатите возможно повышение концентрации уробилиногена на ранней стадии за счёт повреждения печёночных клеток. В фазу внутрипечёночного холестаза при вирусном гепатите уробилиноген отсутствует и появляется в моче вновь только при стихании холестаза. Обструктивную желту
ху характеризует осветление кала из-за исчезновения жёлчных пигментов, в то время как при гемолитической желтухе кал может быть темнее, чем обычно, из-за избытка образования стеркобилиногена. Стойкая полная обструкция с длительным отсутствием уробилиногена в моче свидетельствует о наличии рака головки поджелудочной железы, так как при камне в общем жёлчном протоке, как правило, всё же небольшое количество жёлчи проходит в кишечник. Ежедневная оценка внешнего вида кала и мочи, таким образом, простой метод обследования, но важный и для диагностики, и для прогноза.

источник

В постановке диагноза бруцеллез очень важна роль лабораторных методов исследования, которые довольно часто приобретают решающее значение в диагностике бруцеллеза или в исключении его у обследуемого больного при учете клинико-эпидемиологических данных.

К основным методам лабораторной диагностики бруцеллеза относятся бактериологический, биологический, реакции агглютинации сыворотки крови или ликвора больных со специфическим антигеном, аллергическая проба Бюрне.

Бесспорным признаком бруцеллеза является выделение бруцелл из различных биосубстратов (кровь, моча, ликвор, костный мозг, мокрота, желчь, вагинальные выделения, экссудат из очагов воспаления, молоко кормящей женщины). Разумеется, отрицательные результаты посева еще не исключают наличие бруцеллеза.

Выделение гемокультуры зависит от температурной реакции, напряженности специфического иммунитета больного и, разумеется, от качества лабораторных сред и методов бактериологического исследования. Объединенный комитет экспертов ВОЗ по бруцеллезу рекомендует в качестве основных питательных сред использовать сыворочно-декстрозный агар, приготовленный на мясном экстракте, агар из картофельного настоя с сывороткой или кровью.

Очень редко Бруцелла выделяется из мочи, желчи, мокроты, ликвора, межплевральной жидкости, влагалищных выделений и грудного молока.
Реакция агглютинации с бруцеллезным антигеном в пробирках (реакция Райта)

Одним из основных серологических методов диагностики бруцеллеза до настоящего времени остается реакция агглютинации в пробирках, предложенная Райтом и Семплем в 1897 году. Она проста в постановке, чувствительна, высокоспецифична и положительна в титрах 1:200 в конце первой и на второй неделе болезни. При хроническом бруцеллезе титр снижается, и реакция становится сомнительной. Нарастание титра антител свидетельствует об обострении заболевания.

Реакция Райта проводится в пробирках в объеме 1 мл с разведениями сыворотки 1:50, 1:100, 1:200, 1:400, 1:800 и единым бруцеллезным диагностикумом. Последний представляет собой взвесь убитых нагреванием и фенолом бруцелл. Для пробирочной реакции диагностикум разводят в 10 раз карболизированным (0,5%) физраствором. Методика разведения сыворотки обычна для пробирочной реакции агглютинации. Пробирки встряхивают, ставят в термостат при температуре 37° до следующего дня. Учет реакции проводят обычным способом или по 50% агглютинации (2+) в сравнении со стандартом мутности. Серийные титры 50% агглютинации 1:50, 1:100, 1:200, 1:400,1:800 свидетельствуют о том, что в 1 мл исследуемой сыворотки содержится соответственно 50, 100, 200, 400, 800 МЕ антител. Выраженность реакции больного оценивают по следующей схеме: титр 1:50 оценивается как сомнительный, 1:100 – слабо положительный, 1:200 и 1:400 – положительный, 1:800 – резко положительный.

При остром бруцеллезе реакция Райта положительна у больных в титре 1:200-1:800, тогда как при хроническом бруцеллезе – в титре 1:50-1:100. В то же время обострение хронического бруцеллеза сопровождается повышением титра 1:200-1:400.

Перечисленные показатели относятся к больным, заражение которых происходило в период их кратковременного пребывания в сельской местности, неблагополучной по бруцеллезу, или в результате систематического употребления некипяченого «фляжного» молока в городе.

Иногда резко выраженная реакция Райта наблюдается у больных со слабо выраженными клиническими проявлениями бруцеллеза. Приводим пример истории болезни № 13.

Больная С., 44 года, домохозяйка. Поступила с жалобами на общую слабость. Других жалоб не предъявляла. Обратилась к участковому терапевту с просьбой назначить ей рентгеноскопию легких, так как болела раньше туберкулезом легких (снята с учета два года назад). Объективно: температура 37,1-37,5°(в течение восьми дней), кожные покровы бледные, повышенной влажности. Шейные лимфоузлы величиной с горошину, безболезненные. Костно-мышечная система без особенностей. Тоны сердца ясные, ритмичные, ЧСС – 88 ударов в минуту. В легких – дыхание жесткое, хрипы не выслушиваются. Печень и селезенка не пальпируются. Общее состояние удовлетворительное. Ввиду наличия в населенном пункте эпизоотии бруцеллеза среди овец и коз, находящихся в личных хозяйствах, больная была своевременно обследована на бруцеллез. Реакция Райта – резко положительная (1:1600), реакция Хеддльсона – резко положительная, проба Бюрне – отрицательная. Из крови выделена Bruccella melitensis.

Основным фактором, определяющим классическую форму острого бруцеллеза, является бактериемия, фаза гематогенного заноса, сопровождающаяся реактивной перестройкой организма и появлением специфических антител в сыворотке крови больных.

В патогенезе же хронических форм бруцеллеза решающую роль играют аллергия и парааллергия, что не может, в свою очередь, не отразиться на уменьшении титра антител в крови.
Серологическая реакция агглютинации на стекле (реакция Хеддльсона)

Реакция Хеддльсона (пластинчатая – применяют на стекле) более чувствительна, но менее специфична, дает возможность выявлять агглютинины в первые дни болезни, быстро получить ответ. На большое (9х12см) хорошо обезжиренное сухое стекло на расстоянии 3-4 см друг от друга микропипеткой наносят исследуемую сыворотку в дозах 0,04, 0,02, 0,01 мл (опытные капли) и 0,02 мл (контрольная капля). К трем первым каплям сыворотки добавляют по 0,03 мл единого неразведенного диагностикумума, к последней – 0,03 мл физраствора. Максимальный срок наблюдения – 8 минут. Учет осуществляют невооруженным глазом по 4+ системе. При положительной реакции в опытных каплях появляются хлопья и жидкость становится более или менее прозрачной. Агглютинацию во всех трех дозах 4+ принимают за резко положительный результат, в первой и второй дозах – за положительный результат, только в первой дозе – сомнительный результат, отсутствие агглютинации во всех дозах – отрицательный результат.

Применяется в модификации Е. Кайтмазовой для массовых обследований.
Другие серологические методы диагностики

Используются РСК, РПГА, положительная с разведения 1:100, реакция иммунофлюоресценции и антиглобулиновая проба Кумбса. В последнее время апробирована и получила высокую оценку, особенно в диагностике хронического бруцеллеза (до 65%), реакция агрегат-гемагглютинации (РАГА), позволяющая определять антигенемию бруцелл.
Аллергическая внутрикожная проба Бюрне

Одним из основных факторов, определяющих клинические проявления бруцеллеза, является гиперчувствительность замедленного типа.

Степень специфической сенсибилизации организма при различных клинических формах бруцеллеза неодинакова. Она проявляется как общей, очаговой, так и местной реакцией. Исходя из этого, в 1922 году Бюрне предложил с целью диагностики бруцеллеза внутрикожную аллергическую пробу. Известно, что эта проба основана на способности организма, зараженного бруцеллезом, отвечать местной реакцией на внутрикожное введение бруцеллезного антигена.

Местная реакция может проявляться в виде отека, болезненности, гиперемии. Внутрикожная проба Бюрне ставиться согласно общепринятой методике. Используется 0,1 мл бруцеллина, который вводится внутрикожно на внутреннюю (ладонную) поверхность предплечья. Слабооположительная реакция считается при наличии отека при1-3 см, положительная реакция – при отеке 3-6 см, резко положительная реакция – при отеке более 6 см. Проба Бюрне считается также резко положительной (независимо от размера отека), если имеется лимфангоит или лимфаденит, либо некроз в месте введения бруцеллина. Оценку реакции проводят через 24 (рис. 18) и 48 часов (рис. 19). Значение ее выше в хронической стадии заболевания. Проба может быть положительной у вакцинированных лиц.

Рис. 18. Проба Бюрне через 24 часа.

Рис. 19. Проба Бюрне через 48 часов.

Особо необходимо отметить появление у некоторых больных бруцеллезом гиперергической реакции в ответ на введение аллергена, которая выражается в значительном повышении температуры (39-40°), в усилении болевого синдрома, иногда в появлении аллергической сыпи. В этих случаях повторная постановка пробы Бюрне противопоказана.

Для каждой формы бруцеллеза характерны следующие методы диагностики:

1. При остросептической форме бруцеллеза, соответствующей фазе выраженной генерализации инфекции, наблюдаются высокие титры реакции Райта и резко положительная реакция Хеддльсона. РСК при остросептической форме бруцеллеза отстает по чувствительности от реакции агглютинации. Наряду с этим наблюдается нерезко выраженная сенсибилизация к бруцеллезному антигену.
2. Переход остросептической формы бруцеллеза в септико-метастатическую и вторично-хроническую форму характеризуется патогенетическим метастазированием возбудителя в органы и системы, сопровождается снижением гуморального иммунитета. Об этом свидетельствует существенное уменьшение числа положительных реакций агглютинации Райта и реакции Хеддльсона. Наряду с этим значительно увеличивается количество больных с положительной и резко положительной аллергической пробой Бюрне.
3. При первично-хронической форме бруцеллеза, начинающейся постепенно, исподволь и отличающейся меньшей выраженностью клинических симптомов, положительные реакции Райта и Хеддльсона обнаруживаются несколько реже, чем при вторично-хронической форме. Более чувствительной, чем серологические реакции, при первично-хроническом бруцеллезе является внутрикожная аллергическая проба Бюрне. Серологические реакции, как и аллергическая проба Бюрне, при первично-хроническом бруцеллезе наиболее выражены в первые два года от начала заболевания, после чего наблюдается их постепенное «угасание».

В постановке диагноза нейробруцеллеза важную роль играют такие методы диагностики, как компьютерная томография головного мозга и магнитно-резонансная томография.

АЛГОРИТМ ОБСЛЕДОВАНИЯ БОЛЬНЫХ БРУЦЕЛЛЕЗОМ

Обязательные диагностические исследования:

1. Общий анализ крови, общий анализ мочи, RW, биохимический анализ крови (общий белок и его фракции, С-реактивный белок, сиаловые кислоты, серомукоид, билирубин, трансаминазы, тимоловая проба), сахар крови, анализ крови на ревмопробы.
2. Бактериологический метод при подозрении на острый бруцеллез (посевы крови, пунктата костного мозга, лимфатических узлов).
3. Реакция Райта.
4. Реакция Хеддельсона.
5. Проба Бюрне.

Дополнительные диагностические исследования (по показаниям и наличии возможности)

1. КТ и МРТ головного мозга.
2. Электроэнцефалография.
3. Компьютерная паллестезиометрия
4. Анализ ликвора.
5. Исследование глазного дна.
6. Анализ синовиальной жидкости и биоптата синовиальной оболочки, рентгенологическое и ультразвуковое исследование (артросонография), радинуклеидная сцинтиграфия опорно-двигательного аппарата.
7. Консультации ортопеда, ревматолога, невролога, окулиста, кардиолога, уролога, гинеколога, гастроэнтеролога, дерматолога, иммунолога.

ЛЕЧЕНИЕ БРУЦЕЛЛЕЗА

Большое количество разнообразных средств и методов, предложенных для лечения больных бруцеллезом, свидетельствует о клиническом полиморфизме данной инфекции и о недостаточной эффективности этих средств. Вот почему проблема лечения бруцеллеза до настоящего времени не нашла удовлетворительного разрешения, хотя, по справедливому замечанию Коровицкого Л.К., мнение о полной неизлечимости бруцеллеза следует считать ошибочным.

Показания и противопоказания

В лечении нуждаются все пациенты с наличием совокупности клинико-эпидемиологических данных и результатов специального обследования, позволяющих поставить диагноз «бруцеллез».

При выявлении положительных серологических и (или) аллергологических тестов при отсутствии клинических проявлений заболевания (группа положительно реагирующих на бруцеллез) лечение не проводится. В этом случае необходимо тщательное обследование врачом инфекционистом два раза в год с обязательным лабораторным исследованием сыворотки крови на бруцеллез и, при необходимости, специалистами по профилю выявленной патологии.

Дифференциальные подходы к терапии бруцеллеза

Эффективность лечения больного бруцеллезом зависит от многих факторов. Прежде всего, это своевременное установление диагноза и назначение адекватной специфической и патогенетической терапии. Однако и при выявлении этого условия лечение бруцеллеза представляет трудную проблему. Одной из причин является многообразие клинических форм, механизмов, лежащих в основе тех или иных проявлений; в связи с этим необходимо индивидуализировать терапию.

Так, при наличии активного инфекционного процесса (острый, острый рецидивирующий, хронический активный бруцеллез в стадии обострения), сопровождающегося свободной циркуляцией возбудителя в кровеносном русле, требуется назначение антибактериальных средств. При хроническом бруцеллезе чаще всего на первое место выступают патологические иммунологические реакции, в связи с чем место этиотропной терапии занимает патогенетическая. Кроме того, наличие многочисленных очаговых проявлений и сопутствующей патологии вносит свой вклад в неизбежность полипрагмазии и, соответственно, увеличения риска побочных реакций.

Таким образом, при составлении плана лечения больного бруцеллезом необходимо учитывать форму заболевания, стадию процесса, совокупность и характер очаговых поражений, наличие сопутствующей патологии, аллергологический анамнез, возраст пациента – то есть терапия должна быть строго дифференциальной.

Антибактериальная (этиотропная) терапия составляет основу лечения больных с острой и рецидивирующей формой бруцеллеза. При выборе антибактериального средства необходимо, прежде всего, учитывать чувствительность к нему бруцелл, а также преимущественно внутриклеточную локализацию возбудителя и механизм транспорта лекарственного препарата внутрь клетки. Имеет значение спектр побочных эффектов антибиотика и совокупность органопатологии у больного, наличие индивидуальной непереносимости медикаментов.

источник

Реакция Райта – один из самых распространенных, можно сказать, официальный способ диагностики бруцеллеза в мире. Как можно догадаться, изобрел метод выявления болезни ученый по фамилии Райт.

Нередко можно встретить информацию о том, что в каком-то конкретном случае проводился такой анализ, как реакция Райта-Хеддельсона. Метод выявления бруцеллеза по Хеддельсону имеет свои отличия, но в целом решает схожие задачи: выявление упомянутого заболевания у людей. Особенностей данного анализа мы тоже коснемся.

Кровь на реакцию Райта сдать очень просто, сама процедура проведения исследования – тоже несложная. При помощи анализа можно выявить заболевание как на ранней стадии, так и на поздней. Также имеется возможность поставить ретроспективный диагноз, так как исследование Райта выявляет антитела к бруцеллезу на протяжении 1-4 лет, спустя то время, как антиген попал в организм.

Для осуществления реакции агглютинации Райта приготавливают особую смесь:
1. Берут сыворотку пациента.
2. Добавляют к ней диагностикум, состоящий из взвеси большого количества бруцелл.
3. Все это разводят раствором хлорида натрия с добавлением небольшого количества фенола.

Пробирки с указанной смесью помещают на 18-20 часов в термостат, после чего – выдерживают около 2 часов при комнатной температуре, а уже потом оценивают результаты. Нужно отметить, что соотношение диагностикума и сыворотки в каждой пробирке свое. На основе анализа степени прохождения реакции в каждой из пробирок, подводятся результаты исследования.

Реакция Райта при бруцеллезе, или отсутствии болезнетворных организмов в теле, может дать следующие результаты:
• 50 МЕ – сомнительная реакция. Можно предположить, что пациент бруцеллезом не болен, а реакция произошла по каким-либо другим причинам. Необходимо дополнительное обследование.
• 100-200 МЕ – положительная реакция.
• 400-800 МЕ – резко положительная реакция, когда сомнений в наличии заболевания нет.

Положительная реакция может быть выявлена у тех, кто ранее уже победил бруцеллез, а также у лиц, которые были привиты от данной болезни. Естественно, что количество антител в организме таких людей будет не очень большим. Поэтому через какое-то время необходимо будет провести дополнительные исследования, чтобы понять: имеет ли место динамика роста числа антител. Если иммунные клетки, призванные бороться с бруцеллезом, увеличиваются в числе, то можно говорить о прогрессировании болезни.

Часто сдают кровь на реакцию Райта-Хеддельсона. Отметим, что при осуществлении реакции Хеддельсона используется тот же самый диагностикум, но метод несколько отличается от вышеописанного.

Можно отметить, что реакция Хеддельсона на бруцеллез – это экспресс-тест, который, конечно, часто позволяет выявить заболевание у пациента, но, скорее, дает возможность определить круг тех лиц, которые должны будут пройти дополнительные исследования. Поэтому-то сдается комплекс: реакция Райта-Хеддельсона на бруцеллез.

Для проведения исследования необходимо иметь:
• чистое обезжиренное стекло;
• восковой карандаш;
• сыворотку пациента;
• диагностикум;
• горелку или иной источник огня.

Проводится реакция таким образом: стекло разделяют карандашом на несколько квадратов. На каждый из квадратов помещают небольшое количество сыворотки, добавляют к ней диагностикум и все аккуратно перемешивают. Далее стекло нагревают над огнем на протяжении нескольких минут. Если антитела к бруцеллезу имеются, то сыворотка светлеет, в ней образуются хлопья.

Иногда ситуация складывается таким образом, что сдавать анализы не имеется желания или возможности. Тогда можно купить анализы при условии, что вы уверены в отличном состоянии своего здоровья.

Анализы в Москве продает большое количество компаний различного уровня. Рекомендуем обратиться по данному вопросу именно в «Документы РФ», поскольку наша фирма обладает следующими преимуществами:
• Мы продаем справки в Москве в широком ассортименте и самого высокого качества. Полностью повторяем оригинал, используем специальное оборудование, указываем все необходимые реквизиты;
• Купить справки в Москве у нас – это недорого.
• Купить анализы в Москве в компании «Документы РФ» – это быстро.

источник

Бруцеллёз – серьёзное заболевание, переносчиком которого являются домашние животные. Его опасность заключается в том, что симптомы бруцеллёза у человека схожи с теми, которые сигнализируют о начале простудного заболевания. Между тем бруцеллёз поражает многие органы и без должного лечения способен привести к инвалидности. Для того чтобы своевременно выявить заболевание, в подавляющем количестве случаев достаточно сдать кровь на реакции Райта и Хеддельсона. Данные методы являются быстрыми и информативными.

Возбудителями бруцеллёза являются бактерии, имеющие название бруцеллы. Они устойчивы во внешней среде и погибают исключительно под воздействием высоких температур.

Основными носителями и переносчиками инфекции являются животные (в зависимости от вероятности заражения расположены в списке по убыванию):

Существуют следующие пути заражения человека:

• контактный – при уходе за животными, разделывании туш, работе с навозом;
• алиментарный – при употреблении в пищу мясных и молочных продуктов, не прошедших термическую обработку;
• аэрогенный – при вдыхании воздуха с пылью, содержащей бруцеллы (например, в загонах и на пастбищах).

Бруцеллы жизнеспособны: в воде они сохраняют свою активность не менее 2 месяцев, в парном мясе – 3 месяца, в засоленном – 1 месяц, в молоке – 1,5 месяца, в брынзе – 2 месяца, в шерсти животного – 4 месяца.

Важно, что заболевание не передаётся от инфицированного человека здоровому.

В большинстве случаев симптомы бруцеллёза у человека схожи с простудными, иногда вовсе отсутствуют на раннем этапе развития заболевания.

Чаще всего бруцеллёз поражает следующие системы человеческого организма:

• нервную;
• сердечно-сосудистую;
• опорно-двигательную;
• мочеполовую;
• репродуктивную;
• пищеварительную;
• зрительную;
• лимфатическую.

Когда бруцеллёз переходит в хроническую форму (спустя 3 месяца после инфицирования), в организме человека происходят необратимые изменения, чаще всего приводящие к инвалидности. Симптомы проявляются тем ярче, чем тяжелее степень заболевания.

На начальной стадии отмечаются:

• слабость, общее недомогание;
• повышенная утомляемость;
• дискомфорт при движении конечностями;
• нервозность;
• головная боль;
• нарушение аппетита;
• бессонница.

На более позднем этапе появляются следующие симптомы:

• высокая температура тела (отметка на термометре может достигать 40 градусов), которую крайне тяжело или невозможно снизить;
• сильные мышечные и суставные боли;
• дискомфорт при любом движении тела;
• повышенное потоотделение (наблюдается как в дневные, так и в ночные часы);
• психические и эмоциональные расстройства.

На осмотре врач при пальпации обнаруживает увеличение в размерах печени, селезёнки и лимфоузлов.

Во время первичного приёма терапевту необходимо дать ответы на вопросы:

• какие симптомы беспокоят;
• профессиональная занятость;
• имеется ли контакт с домашними животными;
• район проживания.

При подозрении на бруцеллёз специалист назначает пациенту один из возможных видов диагностики или сразу несколько:

• анализ крови;
• пункция лимфоузлов;
• пункция спинномозговой жидкости.

В подавляющем большинстве случаев диагноз исключается или подтверждается после анализа взятой у пациента крови.

Одними из самых эффективных методов лабораторной диагностики бруцеллёза являются реакции Хеддельсона и Райта.

Реакция Хеддельсона и реакция Райта – серологические методы (т. е. подразумевающие выявление и исследование антител в биоматериале человека), дополняющие друг друга.

На практике широко используются реакции агглютинации в пробирках (реакция Райта) и на стекле (реакция Хеддельсона). Тест на агглютинацию предполагает выявление антител, вступающих в реакцию с антигенами бруцелл. Изучение антител реакцией Хеддельсона широко применяется при необходимости обследования большого числа людей. Это обусловлено его простотой и эффективностью.

Показаниями для анализа служат:

• массовые вспышки инфекции;
• частые контакты с домашними животными, в т. ч. по профессиональной необходимости;
• оценка состояния иммунитета перед введением вакцины;
• наблюдение за развитием уже имеющегося заболевания.

Перед тем как сдать кровь, необходимо подготовиться:

• за 4 часа до забора крови запрещается принимать пищу, допускается пить только бутилированную негазированную воду;
• за 1-2 дня рекомендуется снизить интенсивность физических нагрузок;
• за 48 час. исключить курение и употребление алкогольных напитков.

Реакция Хеддельсона – качественный анализ, он не даёт информацию о количественном содержании антител.

Результаты анализа, их интерпретация:

• «отрицательный» — в крови антитела не выявлены, бруцеллёз исключён;
• «сомнительный» — необходимо сдать кровь повторно для подтверждения или исключения бруцеллёза, перед этим строго следовать правилам подготовки;
• «положительный» — бруцеллёз подтверждён, нужно дополнительно сдать кровь на реакцию Райта для определения количественного содержания антител.

Показаниями для анализа служат:

• диагностика бруцеллёза;
• количественное определение антител в крови и окончательное подтверждение диагноза после проведённого анализа крови на реакцию Хеддельсона.

Следует отметить, что, несмотря на большое количество серологических исследований, данный метод диагностики наиболее информативен.

• забор крови осуществляется в утренние часы натощак (минимум 4 часа до анализа запрещено употреблять пищу);
• за 48 час. исключить курение и употребление алкогольных напитков;
• за 7 дней рекомендуется значительно ограничить физические нагрузки.

Реакция Райта – количественный анализ, его результаты выдаются в виде числового значения титра:

• 0-40 – результат отрицательный, бруцеллёз исключён;
• 40-50 – результат сомнительный, требуется повторно сдать кровь на анализ, строго соблюдая правила подготовки;
• 50-100 – не исключается наличие бруцеллёза, возможно 2 варианта: пациент уже когда-то перенёс бруцеллёз и в его организме имеются антитела, либо болезнь на начальной стадии развития; рекомендуется дополнительное обследование с целью подтверждения или исключения заболевания;
• 100-200 – бруцеллёз подтверждён, высока вероятность перехода заболевания в хроническую форму;
• свыше 200 – подтверждена острая форма бруцеллёза.

Реакции Райта и Хеддельсона на бруцеллёз – два уникальных метода диагностики, позволяющих выявить заболевание на любой стадии и определить количественное содержание антител, что позволяет своевременно начать лечение и подобрать максимально эффективную схему терапии.

источник