Таймасуков А.А. ОАО «Компания Кубаньптицепром»
Аденовирусный гидроперикардит бройлеров — остропротекающее и высоко контагиозное вирусное заболевание преимущественно бройлеров 3-5-тинедельного возраста, характеризующееся накоплением в перикарде транссудата, гепатитом, асцитом и нефрозо-нефритом. Степень тяжести болезни в естественных условиях зависит от влияния некоторых иммунодепрессивных инфекций, таких как инфекционная бурсальная болезнь (болезнь Гамборо), болезнь Марека и инфекционная анемия цыплят.
В настоящее время, во многих хозяйствах аденовирусный гидроперикардит начинает проявляться у 24-28 — дневных, а иногда у более молодых бройлеров, в свою очередь, провоцируя болезнь Гамборо или ухудшая формирование поствакцинального иммунитета против данного заболевания, а также Ньюкаслской болезни, инфекционного бронхита кур и других болезней. Источником инфекции является больная и переболевшая птица. Вирус передается аэрогенно, алиментарно и трансовариально. Возбудитель распространяется с воздухом, водой, кормом, предметами ухода, контактно, «с помощью» обслуживающего персонала. Переносчиками возбудителя инфекции могут быть дикие и синантропные птицы, насекомые и иксодовые клещи, а также простейшие микроорганизмы, в том числе кокцидии. Птицы родительского стада могут быть инфицированы аденовирусом перед началом или в процессе яйцекладки, что обуславливает интенсивную трансовариальную передачу возбудителя.
Аденовирусы птиц, по данным профессора В.А.Бакулина, условно дифференцированы на 3 группы. В первую группу входят 12 серотипов аденовирусов кур и других птиц, которые имеют общий группоспецифический преципитирующий антиген, например возбудители «CELO — инфекции», бронхита перепелов, панкреатита цесарок гепатита с включениями — гидроперикардита кур. Ко второй группе относятся аденовирусы, обладающие гемаглютинирующим антигеном и имеющие общий с первой группой преципитирующий антиген, в том числе аденовирус «Синдрома снижения яйценоскости-76 (ССЯ-76)». В третью группу включены аденовирусы с группоспецифическим преципитирующим антигеном, отличающимся от таковых первых двух групп — аденовирусы геморрагического энтерита индеек и болезни «мраморной селезенки» фазанов. В промышленных птицеводческих хозяйствах аденовирусы распространены повсеместно. Любые из имеющихся 13 серотипов аденовирусов в различных сочетаниях могут циркулировать в одном хозяйстве, а также в организме одной внешне здоровой птицы [3].
Инкубационный период при заражении аденовирусом составляет 24-72 часа. Наиболее часто аденовирусный гидроперикардит бройлеров связан с застойными явлениями в сердце и с гидремией, приводящих к анемии. При экспериментальном заражении цыплята угнетены, взъерошены, «не держат крылья», возможна анемия, диарея с выделением фекалий с примесью уратов, отсутствие реакции на внешние раздражители. Максимальная смертность птиц на 2-4 день после заражения. Общая смертность цыплят-бройлеров может достигать до 75-85%. При хроническом или субклиническом течении клинические признаки незначительные или отсутствуют. Смертность составляет 1-7%.
При вскрытии трупов павших бройлеров обнаруживают желтоватое окрашивание подкожной клетчатки и внутреннего жира, очаговые кровоизлияния в мышцах, скопления в сердечной сорочке от 5 до 20 мл. серозного транссудата соломенно-желтого цвета водянистой или желеподобной консистенции. У экспериментально зараженных цыплят иногда наблюдается появление небольшого количества асцитной жидкости.
Сердце деформированное и дряблое, с точечными кровоизлияниями в миокарде, особенно на верхушке сердца и в ушках предсердий. Легкие уплотнены и отечны, в некоторых случаях с наличием серозной жидкости. Печень увеличена, с очагами некроза. Почки увеличены, с точечными кровоизлияниями, мозаичные, иногда с канальцами и мочеточниками заполненными уратами. Селезенка может быть увеличена, мраморная, отмечается атрофия фабрициевой бурсы.
Диагноз на аденовирусный гидроперикардит бройлеров ставят на основании эпизоотологических, клинических и патологоанатоми-ческих данных, результатов выделения вируса (из печени) на развивающихся эмбрионах кур, в культуре клеток печени, почек, фиброблас-тов эмбрионов кур, а также результатов заражения восприимчивых цыплят 10 дневного возраста [1]. Завершающим этапом в постановке диагноза является идентификация выделенного вируса в реакции нейтрализации, диффузиозной преципитации в агаровом геле (РДП), ПЦР. Ретроспективная диагностика проводится на основании выявления антител к возбудителю в РДП, РН и ИФА.
В настоящее время РНГА считается более предпочтительной, чем тест диффузной преципитации в агаровом геле, так как дает меньше неспецифических реакций.
Аденовирусный гидроперикардит бройлеров необходимо прежде всего дифференцировать от гидроперикардитов другой этиологии. Так, при пастереллезе, стафиллококкозе и стрептококкозе иногда возникает серозный перикардит. Решающим фактором при постановке диагноза служит выделение чистой культуры бактерий, вызывающих эти заболевания, путем посева материала из внутренних органов больных птиц на искусственные питательные среды. Аденовирусный гидроперикардит бройлеров от гидроперикардита, возникшего при острой форме болезни Марека, дифференцируют по наличию при болезни Марека в начальной стадии единичных, а позднее множественных опухолей в мышцах и во внутренних органах. Необходимо исключить инфекционную бурсальную болезнь (болезнь Гамборо), так как она часто сопутствует аденовирусной инфекции. При инфекционном бурсите поражения фабрициевой сумки постоянны и сопровождаются некрозом и псевдоэозинофильной инфильтрацией лимфоидных фолликулов. Для аденовирусной инфекции изменения фабрициевой сумки не характерны. Точечные кровоизлияния размером со спичечную головку по тонкому отделу кишечника, а особенно в двенадцатиперстной кишке необходимо дифференцировать от Ньюкаслской болезни [4].
Парвовирусную анемию цыплят и геморрагический синдром, обусловленные микотоксинами и применением сульфаниламидов также необходимо дифференцировать от аденовирусного гидроперикардита бройлеров. При парвовирусной анемии цыплят внутриядерные тельца-включения в гепатоцитах отсутствуют. При исключении геморрагического синдрома и апластической анемии принимают во внимание анамнестические сведения и результаты анализа кормов и гистологических исследований печени [2].
Для предотвращения возникновения эпизоотии по аденовирусному гидроперикардиту бройлеров необходимо использовать все доступные методы профилактики, в том числе и организационно-хозяйственного и социально-экономического характера. Они включают в себя раздельное кормление и содержание разновозрастных групп птиц, привлечение к работе не контактирующего с птицей в личных подсобных хозяйствах обслуживающего персонала и многие другие вопросы, направленные на охрану птицеводческих хозяйств от заноса инфекции. Защита птицеводческих предприятий должна осуществляться посредством использования програмных мер безопасности, с обязательным соблюдением принципа «все пусто — все занято».
Распространение инфекции может произойти при диагностических исследованиях птицы, поэтому участники проведения вакцинации и диагностических исследований, особенно при работе с вирусвакцинами, должны строго соблюдать все меры санитарной профилактики.
Аденовирус весьма устойчив к условиям внешней среды и может длительное время сохраняться в помете и подстилке. В качестве более эффективных дезинфектантов рекомендуются йодсодержащие препараты и гипохлорид натрия.
В регионах, неблагополучных по аденовирусному гидроперикардиту, применение только санитарных мер было малоэффективным и в связи с этим возникла необходимость разработки специфических мер профилактики.
В настоящее время в неблагополучных хозяйствах для специфической профилактики аденовирусного гидроперикардита цыплят используются инактивированные гидроокисьалюминиевые или эмульсионные вакцины. Цыплят-бройлеров вакцинируют однократно в 10-17 дневном возрасте, внутримышечно или подкожно. Ремонтный молодняк и кур яйценоских пород вакцинируют дважды: в 10-17 дней и затем при переводе, в удвоенной дозе, не позднее чем за 30 дней до начала яйцекладки. В некоторых хозяйствах, ремонтный молодняк предназначенный для формирования родительских стад, в раннем возрасте вакцинируют дважды с 2-недельным интервалом, а затем третий раз в удвоенной дозе при переводе. Иногда вакцину применяют в суточном возрасте, одновременно с вакциной против болезни Марека. Иммунитет, регистрируемый в РДП, наступает через 14-21 день.
Эффективного специфического лечения и профилактики лекарственными препаратами при аденовирусном гидроперикардите не разработано [1].
Конкретную схему специфической профилактики для каждого птицеводческого хозяйства необходимо выбирать индивидуально, в зависимости от его эпизоотической ситуации.
- Алиев А.С., Сираждинов Р.С., Джавадов Э.Д., Алиев Г.С. Гидроперикардит (ГИП) птиц || Сборник Трудов ученых Академии менеджмента и агробизнеса нечерноземной зоны Российской Федерации «Пути совершенствования переподготовки руководящих кадров и повышения эффективности аграрного производства». — Санкт-Петербург. — 1996. — С.146-151.
- Алиев А.С., Никитина Н.В. Диагностика и специфическая профилактика инфекционного гидроперикардита птиц || Мат. научно-производственной конференции, посвященной 190-летию высшего ветеринарного образования в России и 100-летию вет. науки. С-Петербург. — 1998. — Ч.1 — С. 14-15.
- Бакулин В.А. Патоморфология экспериментального проявления аденовирусного гепатита с тельцами-включениями || Передовой научно-производственный опыт в птицеводстве, рекомендуемый для внедрения. — Загорск. — 1991. — С.33-37.
- Бакулин В.А., Аксенова Е.Г., Горецкая Т.И. Ассоциированное течение инфекционных болезней респираторного комплекса, аденовирусной инфекции и болезни Гамборо || Мат. Всероссийской научно-производственной конф. «Ветеринарная биологическая наука сельскохозяйственному производству». — Н-Новгород. — 1997. — С.301-303.
В статье изложены распространения аденовирусной инфекции, клинические признаки и патологические изменения у цыплят-бройлеров. Предложены различные методы специфической профилактики аденовирусного гидроперикардита бройлеров.
Ключевые слова : аденовирусная инфекция птиц, аденовирусный гидроперикардит, дифференциальная диагностика болезни Гамборо и Марека, вакцинация бройлеров и ремонтного молодняка.
Ответственный за переписку с редакцией: Таймасуков Адам Азмето-вич, кандидат ветеринарных наук, генеральный директор ОАО «Компания Кубаньптицепром», 350000 г. Краснодар, ул. Северная 324, литер А, тел. 8 918 442 77 84, электронный адрес: kubpticeprom@yandex.ru.
ADENOVIRAL HYDROPERICARDITIS OF BROILER CHICKENS
Article describes distribution of adenoviral infection, its clinical signs and pathological changes in broiler chickens. Various methods of specific prevention of adenoviral hydropericarditis of broilers are offered.
Key words: adenoviral infection of birds, adenoviral hydropericarditis, differential diagnostics of Gumboro and Marek diseases, vaccination of broilers and young growth.
- Aliev A.S., Sirazhdinov R.S., Dzhavadov Eh.D., Aliev G.S. Gidroperikardit ptits [Hydropericarditis of birds]. St. Petersburg (1996): pp.146 — 151. Print (in Russ.).
- Aliev A.S., Nikitina N.V. Diagnostika i spetsificheskaya profilaktika infektsionnogo gidroperikardita ptits [Diagnostics and specific prophylaxis of infectious hydropericarditis of birds]. St. Petersburg (1998): pp. 14 — 15. Print (in Russ.).
- Bakulin V.A. Patomorfologiya eksperimentalnogo proyavleniya adenovirusnogo gepatita s teltsami-vklyucheniyami [Pathomorphology of experimental display of adenoviral hepatitis with corpuscules-inclusions]. (1991): pp.33 — 37. Print (in Russ.).
- Bakulin V.A., Aksenova E.G., Goretskaja T.I. Assotsiirovannoe techenie infektsionnykh bolezney respiratornogo kompleksa, adenovirusnoy infektsii i bolezni Gamboro [Associated course of infectious diseases of respiratory complex, adenoviral infection and Gumboro disease]. N.Novgorod (1997): pp. 301 — 303. Print (in Russ.).
Responsible for correspondence with the editorial board:
источник
Аденовирусный гепатит с включениями — гидроперикардит (гепатит с тельцами-включениями — ГТВ, острая катастрофа печени, инклюзионный гепатит, синдром гидроперикардита, гидроперикардит, болезнь Ангара, гепатит-анемия-гидроперикар¬дит, гидроперикардиальный синдром бройлеров, синдром гидроперикардита кур — СГПК, аденовирусный гепатит с включениями-гидроперикардит — АДВГГ) — адено¬вирусная, контагиозная болезнь, сопровождающаяся гепатитом, спленитом, панкреа¬титом, нефрозо-нефритом, перикардитом, а также поражением других внутренних ор¬ганов птиц. Впервые зарегистрирована в США в 1963 году и описана под названием «Острая катастрофа печени» или «Гепатит с тельцами-включениями».
Этиология. Возбудитель заболевания аденовирус с типичными физико-химическими свойствами. Хорошо сохраняется во внешней среде. Устойчив к действию эфира, хлороформа и некоторых растворителей липидов. Но хлороформ может снижать инфекционность аденовируссодержащего гомогената печени цыплят на 50%. При тем¬пературе -25°С вирус сохраняется до 3 и более лет. После прогревания в течение 1 часа при 60°С вируссодержащий гомогенат печени цыплят не инфекционен. Относительно стабилен при рН 6,0-9,0. Кислая рН среды — 3 и щелочная —.10 не влияют на инфекционные свойства вируса, находящегося в гомогенате печени. Возбудитель АДВГГ чувствителен к йодсодержащим препаратам. В организме птиц вирус вызывает выра¬ботку вируснейтрализующих и преципитирующих антител. Возбудителю присущи гепато- и эпителиотропные свойства, а при определенных условиях пантропизм.
При экспериментальном парэнтеральном заражении СПФ-цыплят гепатит с тельцами-включениями можно воспроизвести используя любой из 12 известных серотипов аденовирусов птиц. В естественных условиях АДВГГ чаще вызывают вирусы 4, не¬сколько реже 5, 6, 8 и 11 серотипов аденовирусов 1 группы. Определенная роль в этиопатогенезе АДВГГ периодически отводится аденоассоциированному (дефектно¬му) парвовирусу, а также вирусу инфекционной анемии кур. Заболевание лучше про¬является при стабильных нарушениях технолого-экологических режимов, чрезмерной эксплуатации птиц и систематических воздействиях на их организм иммунодепрессивных факторов, в том числе инфекционного и токсического происхождения (особенно микотоксины). Плохая вентиляция птичника, неудовлетворительные ветеринарно-санитарные мероприятия и присутствие в пылевом аэрозоле E.coli значительно усилива¬ет интенсивность течения АДВГГ. Наличие в популяции субклинических вирусоносителей предусматривает постоянную возможность впезапного и резкого обострения аденовирусной инфекции на птице любого возраста, даже при ее при контакте с лю¬бым, пусть условнопатогенным микроорганизмом.
Эпизоотология. Восприимчивы куры (всех пород и возрастов), перепела, цесар-ки, индейки, фазаны, голуби, утки, гуси и другие птицы. Среди цыплят АДВГГ чаще встречается в 3-6-недельном возрасте, но отмечен также среди более молодых (1-5-дневных) или старших птиц, а также у кур-несушек любого возраста. С момен¬та открытия и затем многие годы болезнь обычно регистрировалась в форме «гепатита с тельцами-включениями», со смертностью птиц при острой форме до 10-15%, но чаще протекала субклинически, без существенных патологоанатомических (макро¬скопических) изменений в печени, поджелудочной железе, селезенке, почках и дру¬гих органах и поэтому редко диагностировалась. Однако и в те времена в научной и методической литературе указывалось, что при заболевании возможно скопление небольшого количества жидкости в сердечной сорочке. Значительный ущерб наноси¬ло субклиническое течение аденовирусной инфекции с субклинической формой бо-лезни Гамборо, при котором за период выращивания «на мясо» цыплят-бройлеров или цыплят яйценоских пород (примерно до 60-дневного возраста) смертность в лучшем .случае составляла 30-35%. С 1984-1985 гг. во многих странах мира и в СССР начали отмечаться вспышки АДВГГ со смертностью птиц от 25 до 75% и бо¬лее. При вскрытии трупов павших птиц, наряду с традиционными для гепатита с тельцами-включениями изменениями во внутренних органах, отмечали интенсивные «гидроперикардиты» — скопление в сердечной сорочке большого количества (от 3 до 20 мл) жидкости или желеобразной массы. Новому проявлению аденовирус¬ной инфекции было присвоено название — «Гидроперикардит» и даже кое-кем сделана попытка выделения болезни в самостоятельную нозологическую единицу. Но тем лабораторными исследованиями было доказано, что это не самостоятельное заболевание, а тот же «гепатит с тельцами-включениями», но с дополнительным патогенетическим признаком, обусловленным нарушением функции сердечно-сосудистой системы. Как в экспериментальных, так и в естественных условиях один и тот же штамм вируса АДВГГ, в зависимости от условий содержания и физиологического состояния птиц, эпизоотологической ситуации и дозы вируса может вызвать острую форму со смертностью цыплят 80-100% (с полным комплексом ярких патологоанатомических изменений во многих внутренних органах), хроническую форму или субклиническое течение АДВГГ с незначительными патологоанатомическими изменениями, но с характерной патологией, выявляемой гистологически.
За последние 20 лет заболевание в виде острой формы АДВГГ, с высокой смертностью птиц, зарегистрировано более чем в 30 птицехозяйствах СССР, СНГ, а затем России, расположенных в самых разных природно-климатических зонах, и специлизировавшихся как на разведении цыплят-бройлеров, так и яйценоской птице. При энзоотической вспышке АДВГГ в одном и том же хозяйстве заболевание может практически одновременно регистрироваться у птиц, значительно отличающихся по возрасту. В прежние годы АДВГГ часто протекал в ассоциации с субклинической формой болезни Гамборо, которая создавала благоприятные условия для развития аденовирусной инфекции. В настоящее время во многих хозяйствах АДВГГ (от острой до субклинической формы) начинает проявляться у 5-10-дневных и более MOЛОдых цыплят и теперь часто он провоцирует болезнь Гамборо (и активизацию вторпенной бактериальной флоры, в т. ч. E.coli) или ухудшает результаты вакцинации против болезни Гамборо, а также ньюкаслской болезни, инфекционного бронхит; болезни Марека, инфекционного ларинготрахеита, инфекционной анемии цыплят и других болезней.
Перепела восприимчивы к экспериментальному заражению возбудителем АДВГI выделенному от цыплят и переболевают подостро или субклинически, с характерными для аденовирусной инфекции гепатитами, а также поражением других органов но чаще без «гидроперикардитов». Тем не менее, у перепелов, как и у цесарок, попугаев и других птиц при заражении возбудителем АДВГГ кур, даже несмотря на су клиническое течение, инфекция носит генерализованный характер с поражением различных систем. Неоднократно наблюдались вспышки гепатита с включения J у перепелов со смертностью птиц до 60%, а выделенный от них аденовирус в экслериментальных условиях вызывал заболевание не только у перепелов, но и у цыплят-бройлеров.
Источник инфекции: больная и переболевшая птица. Вирус передается трансовариально, аэрогенно и алиментарно. Распространение инфекции происходит с воздухом, водой, кормом, контактно, с мелким инвентарем, с «помощью» обслуживающего персонал с простейшими микроорганизмами, гельминтами, кровососущими насекомыми, клещами. Восприимчивые родители воспроизводят восприимчивое потомство. Птицы родительского стада могут быть инфицированы возбудителем АДВГГ, с развитием болезни, перед началом или в процессе яйцекладки, что обуславливает интенсивную трансовариальную передачу высокопатогенного вируса. Возможна передача вируса с живыми вакцинам! против других инфекций, изготовленными не на СПФ-эмбрионах (или на таковых, не некачественных и не проверенных на носительство аденовирусов и наличие к ним антител), особенно если они получены из хозяйств неблагополучных по АДВГГ.
Клинические признаки. Инкубационный период при экспериментальном заражении 24-72 часа, но иногда более длительный. При воспроизведенном экспериментально остром течении болезни цыплята угнетены, взъерошены, «не держат крылья», возможна анемия, диарея с выделением фекалий с примесью уратов. Перед гибелью цыплята сидят, нахохлившись, опустив крылья и уткнувшись клювом в полик клетки, не реагируя на внешние раздражители. Максимальная смертность птицы отмечается на 2-4 день после экспериментального заражения. В экспериментальных условиях, в зависимости от дозы вируса, возраста птиц и их иммунного статуса по аденовирусной инфекции и прочих причин можно воспроизвести заболевание со смертностью от 0 до 100%.
В естественных условиях инкубационный период зависит от интенсивности тече¬ния инфекции, а также от наличия содействующих ее развитию факторов. Острое проявление болезни сопровождается смертностью цыплят 25-75% и более. При хроническом течении (смертность до 5-7%; клинические признаки хорошо выражены у птиц, для которых заболевание завершается летальным исходом, у остальных они незначительные и проявляются у отдельных групп цыплят, расположенных в различных участках птичника, в то время как основная масса птиц выглядит здоровыми. При субклиническом течении АДВГГ клинические признаки болезни встречаются лишь у отдельных особей. Длительность болезни, в зависимости от остроты проявления, в экспериментальных условиях 4-6 (до 10) дней, в естественных условиях при острой форме 9-14 дней.
У больных птиц отмечается снижение уровня гематокрита, эритропения, лейкопения. Повышение уровня молочной гедирогеназы, щелочной фосфатазы и аланинтрансферазы расценивается как следствие патологии печени и почек. Поражение печени сопровождается гипопротеинемией.
Патоморфология. При острой форме отмечается анемия видимых слизистых оболочек, отек, геморрагии в скелетных мышцах и подкожной клетчатке, признаки нарушения свертываемости крови. Печень обычных размеров или увеличенная, дряблая, глинистая, желтушная. Может быть вишневого цвета, но со светло-бежевыми (иногда красноватыми в центре) очагами неправильной формы по краям долек, иногда с одиночными, светлыми полосами, пересекающими орган в различных на¬правлениях или с наличием точечных кровоизлияний и небольших очагов некроза. В сердечной сорочке скопление (3-20 мл) серозного, прозрачного, чаще соломенного цвета, водянистого или студневидного транссудата. Сердечная мышца при болез¬ни без значительных изменений. Легкие отечны. Почки увеличены, мозаичные, иногда с канальцами и мочеточниками, заполненными уратами. Селезенка иногда «мраморная». При подостром, переходящем в хроническое течение АДВГ наблюдается нарушение свертываемости крови, патология печени та же, что и при острой форме, «гидроперикардиты» встречаются реже. Сердце деформировано, миокард дряблый, иногда с точечными кровоизлияниями. Почки увеличены, мозаичные, с четко контурированными канальцами и мочеточниками, иногда заполненными уратами. Селезенка может быть увеличена, в единичных случаях «мраморная». Легкие при экспериментальной форме обычно без изменений или слегка отечны, при естественном течении болезни в птицехозяйстве — отечны, темно-вишневого цвета. Фабри- циева сумка гипоплазирована, костный мозг, в некоторых случаях, бледно окрашен. При хронической и субклинической форме, в основном, находят незначительные изменения в печени, реже одновременно в почках.
При гистологическом исследовании, независимо от формы проявления АДВГГ, отмечается гепатит с наличием внутриядерных эозинофильных и базофильных телец-включений в гепатоцитах, панкреатит с внутриядерными включениями в клетках железистой ткани, спленит с характерными включениями в ядрах ретикулярных клеток, нефрозо-нефрит, гипоплазия лимфоидных фолликулов фабрициевой сумки, у некоторых видов птиц с внутриядерными включениями в ядрах ее ретикулоэпителиальных клеток, гипоплазия тимуса и костного мозга, отек легких, неспецифический миокардит.
У эмбрионов кур встречается отек, утолщение, помутнение и гиперемия хориоал- лантоисной оболочки, наличие в ней очагов некроза и кистозных разрастаний. Эмбрионы отстают в развитии, гиперемированы, с подкожными кровоизлияниями. Печень эмбрионов гиперемирована, с очагами некроза и кровоизлияний. Максимальная смертность эмбрионов происходит на 4-5 день после заражения. Гистологически в ядрах эктодермального эпителия ХАО и гепатоцитов находят тельца-включения. При заражении культуры клеток отмечается сморщивание, округление и дегенерация клеток с наличием внутриядерных телец-включений.
Диагностика. Диагноз ставят на основании эпизоотологических, клинических, и патморфологических данных, результатов выделения вируса на развивающихся эмбрионах кур, в культуре клеток печени, почек, фибробластов эмбрионов кур, на восприимчивых цыплятах, идентификации выделенного вируса в реакциях нейтрализации, РДП, ПЦР или электронномикроскопически и постановке биопробы. Ретроспективная серологическая диагностика проводится выявлением антител к возбудителю в РДП, РН, МФА и ИФА.
Лечение и профилактика. Для специфической профилактики АДВГГ используются инактивированные гидроокисьалюминиевые и эмульсионные вакцины. Цыплят-бройлеров вакцинируют однократно в 10-17-дневном возрасте, внутримышечно или подкожно. Ремонтный молодняк и кур яйценоских пород вакцинируют дважды: в 10-17 дней и затем при переводе, в удвоенной дозе, не позднее, чем за 30 дней до начала яйцекладки. В некоторых хозяйствах, ремонтный молодняк, предназначенный для формирования родительских стад, в раннем возрасте вакцинируют дважды с 2-недельным интервалом, а затем третий раз в удвоенной дозе при переводе. Иногда вакцину применяют в суточном возрасте, одновременно с вакциной против болезни Марека. Иммунитет, регистрируемый в РДП, наступает через 14-21 день. Однако при использовании достаточно эффективной вакцины цыплята через 8-10 дней после вакцинации становятся невосприимчивыми к экспериментальному заражению массивными дозами возбудителя. Конкретную схему специфической профилактики для каждого птицехозяйства необходимо выбирать индивидуально, в зависимости от его энзоотической ситуации.
источник
Аденовирусная инфекция птиц — хроническая в основном у птиц и летальная у КЭ инфекция, вызываемая вирусами CELO (Chicken Embrio Lethal Orphan) и GAL (Gallus Adeno-Like virus ). Первые сообщения о выделении штаммов, которые позднее были классифицированы как аденовирусы птиц (АВП), поступили из Южной Африки и США. С тех пор в ряде лабораторий были выделены многочисленные изоляты АВ, в том числе от домашних кур, индеек, уток, фазанов, перепелов, цесарок, голубей, а также от диких птиц. До тех пор, пока не были выяснены связи между изо-лятами и болезнями птиц, выделенные изоляты получали самые разные названия, например, энтеровирус, латентный вирус или энтероцитопатогенный птичий вирус орфан (ЕСАО). Так, выделенный из КЭ вирус соответственно его патогенному действию назвали Chicken Embtyo Lethal Orphan (CELO). Вирус, выделенный как контами-нант из iut. RPL-I2 лимфоидного лейкоза, из-за сходства с АВ получил название Gallus Adeno-Like (GAL). Лишь в 1977 г. Мс Ferran, Adair предложили в названии вирусов, выделенных от птиц, отражать как вид птицы, от которого они выделены, так и их серотип. Таким образом, название «аденовирусы птиц» остается общим для обозначения всех изолятов от птиц.
Ветеринарным вирусологам были известны три птичьих вируса до того, как они были отнесены к семейству аденовирусов: 1) возбудитель бронхита перепелов (Quail Bronchitis Virus — QBV), впервые выделенный в 1949 г. N. O. Olson в Западной Вирджинии (США); 2) CELO- кишечный сиротский летальный вирус КЭ, изолированный в 1962 г. доктором V. J. Yates и являющийся причиной гибели эмбрионов. До недавнего времени вирус CELO не вызывал заболевания цыплят после вылупления; 3) вирус, изолированный в 1958 г. доктором G. R. Sharpless из общего пула с вирусом лимфоматоза птиц, а в 1960 г. идентифицированный B. R. Burmester как аденоподобный вирус GAL. Он был выделен позднее, чем QBV (вирус бронхита перепелов) и вирус — CELO. В 1959 г. было показано близкое родство (но не идентичность) между вирусами CELO и QBV, и лишь в 1963 г. вирусы CELO и GAL были отнесены к аденовирусам.
В настоящее время насчитывается 13 различных серотипов АВ, относящихся к группам CELO, GAL, и один тип — возбудитель синдрома снижения яйценоскости или литья яиц — EDS-76 (Egg Drop Syndrome -76). АВ инфекция в промышленном птицеводстве приобрела особое значение по ряду причин. Во-первых, у кур она вызывает такие болезни, как гепатит с тельцами-включениями, у индеек — геморрагический энтерит, у фазанов — вирусный гепатит и мраморная болезнь селезенки, у перепелов — бронхит. Во-вторых, АВ часто выступают в роли вторичного фактора при других инфекционных болезнях, особенно при инфекционном бронхите кур, микоплазмозе и других заболеваниях дыхательных путей птицы. В-третьих, АВ отрицательно влияют на яйценоскость и качество яиц. И наконец, вследствие вертикальной передачи АВ птиц, контаминируя КЭ, часто являются помехой в использовании эмбрионов с целью репродукции других вирусов. АВ птиц широко распространены в США, Канаде, Германии, Швеции, Франции, Венгрии, Италии, Югославии, Чехии, Северной Ирландии, Южной Ирландии, Японии, Индии, Корее, Египте, Австралии, Великобритании.
Клинические признаки и патологоанатомические изменения. В Естественных условиях CELO-инфекция может протекать остро или латентно. АВ в ассоциации с другими возбудителями вызывают развитие инклюзионного гепатита, респираторных болезней, воспаления органов яйцеобразования, теносиновитов, апластической анемии, геморрагического энтерита, геморрагии в мышечной ткани и органах. Наиболее патогенным оказался вирус CELO. Вирус GAL распространен широко, однако его роль недостаточно ясна; аденовирус IBH (Inclusion body hepatitis), вызывающий инклюзи-онный гепатит с тельцами-включениями в печени, продолжается 5—7 недель с летальным исходом до 31 %. Многообразие клинических симптомов и патологоанато-мических изменений, вызванных вирусом CELO, или, возможно, некоторыми другими типами АВ, могут быть связаны с поражением респираторных органов, печени и диареей, нервными симптомами, слабостью конечностей, отставанием в развитии или снижением яичной продуктивности.
Течение АВ инфекции у кур и цыплят может усиливаться или ослабляться сопутствующими факторами: наличием специфических AT, возрастом птицы, поражением ее бактериями, микоплазмами, вирусом инфекционного бронхита и усугубляться условиями содержания, излишней плотностью посадки птицы, плохой вентиляцией и проводимой в птичниках дезинфекцией. Помимо вялой, клинически нечетко проявляющейся аденоинфекции птиц, известны еще 4 нозологически обособленных болезни, вызываемые аденовирусами группы CELO. Это инклюзионный гепатит, мраморная болезнь селезенки фазанов, бронхит перепелов и геморрагический энтерит индеек.
После первичного инфицирования слизистой оболочки верхних дыхательных путей у зараженной птицы в течение 3—14 дней отмечается виремия. В этот период вирус можно выделить из крови, трахеи, легких, почек, печени и селезенки. Однако с повышением титра AT уровень виремии постепенно снижается, но в течение 1—2 недель еще удается выделять вирус из слизистой оболочки кишечника, верхних дыхательных путей, иногда помета, т. е. из мест, благоприятных для размножения АВ.
Механизм воздействия АВ на изменение яичной скорлупы, пока недостаточно ясен. При гистологическом исследовании яйцевода у естественно больных птиц находили незначительные изменения, отек его с умеренной инфильтрацией плазматическими клетками, лимфоцитами и гетерофилами в соединительную пластину и уменьшение или исчезновение секреторных гранул в эпителии матки. Анализ сыворотки показывает уменьшение алкалинфосфатов, энзимов, входящих и участвующих в формировании скорлупы. Исследования матки показали, что на 3-й день она была нормальной, на 7-й — находили в клетках складок эпителия тельца-включения, на 10-й — отмечали тельца-включения и некроз эпителия с воспалением и артериитом, на 15-й день — сильное воспаление и некротическо-пролиферативный артериит.
Патология КЭ. Это наиболее патогномоничные признаки АВ инфекции (группы CELO) в птицеводстве. В естественных условиях она проявляется уменьшением объема амниотической жидкости и увеличением аллантоисной, геморрагией КЭ, аналогичной той, которая вызывается вирусом ИБК, утолщением и помутнением ХАО. В ядрах клеток эктодермального эпителия оболочек обнаруживают базофильные включения, гиперемию эмбрионов и дегенеративные изменения в печени. КЭ меньше контрольных, отекшие, с кровоизлияниями. На 17-й день вирус влияет на вылуп-ление. Winterfield R. W. считал, что поражения, возникающие в КЭ, зависят от возраста его и метода введения вируса. Mandelti G. заражал эмбрионы АВ птиц (шт. 1123/75 и PV, выделенными из образцов печени с ядерными включениями в клетках) и наблюдал в 20—60 % случаев их гибель. При вскрытии таких КЭ отмечалась их бледность, печень имела светло-коричневый или зеленоватый цвет с обширными некротическими очагами вдоль краев печеночных долей. При инокуляции вируса на ХАО через 6—7 дней появлялись небольшие беловатые фокусы. При гистологическом исследовании печеночные поражения представляли собой ишемические некрозы, окруженные интенсивной перифокальной гиперемией, в остальной паренхиме печени были дегенеративные явления и слабо эозинофильные внутриклеточные включения. В эпителиальных клетках фокусов эктодермы ХАО просматривались большие внутриядерные эозинофильные включения.
У КЭ, зараженных в аллантоисную полость или желточный мешок, в гепатоцитах и в меньшей степени эпителиальных клетках кишечника и почечных канальцев обнаруживаются внутриядерные тельца-включения. Причем, в тех случаях, когда вирус не инокулировался в аллантоисную полость, вирусный АГ в эмбрионе не выявляется. При заражении КЭ в аллантоисную полость вирусный АГ успешно выявлялся ИФ в легких, почках, кишечнике, слизистой оболочке носовой полости и костном мозге, а внутриядерные тельца-включения — в клетках печени тех эмбрионов, которые ино-кулировались вирусом GAL. Вирус GAL, инокулированный на ХАО эмбриона, также индуцировал образование внутриядерных включений в клетках гепатоцитов.
Патологоанатомические изменения у больной птицы нетипичны, иногда они проявляются легким опуханием верхней части трахеи. При гистологическом исследовании в подслизистой области трахеи находили небольшую пролиферацию моно-нуклеарных клеток. Описаны изменения у кур, как тяжелые поражения в виде хронического гепатита. Более ранние поражения печени проявлялись инфильтрацией лимфоцитов и фибробластов в портальную область. Цитоплазма гепатоцитов содержала маленькие жировые вакуоли, а внутри — ядерные эозинофильные включения в гепатоцитах также выявлялись, но в меньшей степени, чем в печени. В большинстве случаев печень поражалась лимфоцитарной и гетерофильной инфильтрацией в портальной области. В области фокусов отмечалась достаточно обширная жировая инфильтрация.
При интравенозном заражении 12-месячных кур вирусом СЕЮ (шт. Ote) отмечали изменения только в печени в виде серовато-белых фокусов размером от булавочной головки до просяного зерна или серовато-белых поражений на поверхности и разрезе органа.
Внутриядерные включения в гепатоцитах печени находили на 2—6-й день после инокуляции вируса. В почках их также обнаруживали на 2—6-й день после заражения. В эпителии протоков отмечали слабую дегенерацию и некроз. Внутриядерные включения в трахее были в эпителиальных клетках слизистой оболочки на 2—6-й день после инокуляции, а в легких они отмечались в ядрах эпителиальных клеток бронхов. В пластинках соединительной ткани, в основном в бронхах, обнаруживалась легкая лимфоцитарная и гетерофильная инфильтрация. Лишь у кур, зараженных вирусом интратрахеально, отмечали гистопатологические изменения в трахее. Базофильные внутриядерные включения в эпителиальных клетках трахеи обнаруживали редко.
Патологоанатомические изменения у птиц, инокулированных интравенозно, обнаружены в печени, селезенке, поджелудочной железе и почках. Поражения поджелудочной железы отмечали на 4-й день после инокуляции вируса. В эпителиальных клетках концевого отдела панкреатической железы были также обнаружены внутриядерные включения. Поражения селезенки отмечали на 2-й и на 4-й день после заражения. Они состояли в периваскулярном увеличении числа лимфоцитов и появлении внутриядерных телец-включений. В кишечнике отмечался незначительный острый катаральный энтерит.
При аэрозольном заражения шт. Ote и В1209 вируса CELO развивались обширные поражения легких, сопровождающиеся гиперемией и некоторым уплотнением. Поражения воздухоносных мешков состояли в помутнении и утолщении задней торакально-абдоминальной части, иногда наполненных пенистым или кремообразным экссудатом. У птиц, зараженных внутривенно или в костный мозг вирусом GAL, наблюдали только анемию.
Морфология и химический состав. АВ птиц, так же как и млекопитающих, имеют размер 95—100 нм с гексагональным профилем в сердцевине. Полые капсомеры в виде растянутых призм длиной 10—11 нм и шириной 5—6 нм имеют полигональные секции пересечения. Капсомеры кажутся упакованными в равносторонние треугольные грани, которые на ребрах разделены. По периферии частиц имеется 30 капсомеров в виде осей двойной симметрии, в каждом ребре по 4 капсомера, разделенных верхушками. АВ птиц имеет икосаэдральную форму кубической симметрии в соотношении 5:3:2, строение капсомеров сходно со стоением АВ человека типа 5. Вирионы его содержат 252 капсомера. Различие между АВ птиц и человека состоит в пустых вытянутых капсомерах, которые по форме приближаются к капсомерам вируса герпеса и полиомы. В препаратах инфицированных клеток, окрашенных ФВК, вирус GAL появлялся в ядре в виде кристаллических конгламератов и имел гексагональный профиль.
Ультраструктура очищенного вируса CELO такая же, как и вируса GAL. Каждый капсомер окружен 5, а некоторые 6 соединительными капсомерами. При ЭМ вируса бронхита перепелов обнаружено два типа частиц: большие (70—75 нм), похожие на вирус CELO, и маленькие (20—24 нм), возможно возникшие из больших частиц или представляющие лишь их внутренний компонент.
В монослое клеток почки КЭ, инфицированных вирусом CELO, вирионы иногда представлены в виде цепочки в ядре пораженной клетки, но никогда не обнаруживаются в виде кристаллоподобной ракетки, как об этом сообщалось в отношении вируса GAL. В виде кристаллов вирус CELO был обнаружен лишь в ядрах эндодермальных клеток ХАО КЭ, инокулированных в аллантоисную полость.
Вирионы АВ птиц не имеют липопротеиновой оболочки, плотность их в CsCl составляет 1,34—1,35 г/см3. Они не содержат липидов или жиров, что обусловливает их устойчивость к жирорастворителям (эфиру и хлороформу). В результате внутриядерной репродукции вирусов CELO и GAL формируются внутриядерные включения, имеющие диагностическое значение. ДНК и белок в вирусе CELO составляют 17,3 и 80,7 % соответственно.
Геном — линейная 2двуспиральная молекула ДНК с мол. м. 30 кД. Наибольший полипептид вируса CELO представляет гексон АГ, который был определен методом электрофореза в ПААГ. Так же были идентифицированы два полипептида пентона и два внутренних компонента.
Описаны такие структурные белки вируса CELO как V-антиген и неструктурный специфический Т-, или tumor (опухолевый)-антиген (или нео — антиген). Эти АГ обнаружены и в онкогенных птичьих АВ. Сообщалось о трансплантационном специфическом АГ вируса CELO, однако связь этого АГ с Т-АГ не установлена.
АГ вариабельность и родство. В 1980 г. идентифицировали 16 АВ птиц, в том числе 12 шт., выделенных из печени при гепатите, три — при респираторном заболевании и один — при разрыве связок ног. Пять из них оказались вирусами CELO серотипа 1; 11, изолированных из печени кур при гепатите, классифицировали по 4 различным серологическим группам: 1 — Р36 (тип 7); 2 — HI (тип 8); 3 — варианты типа 6, 7, 8; 4 — изолят 50, не проявлял родства ни с одной из испытанных сывороток, полученных к изучаемым штаммам.
Некоторые изоляты относительно легко типируются, другие, напротив, в перекрестных тестах проявляют широкую нейтрализующую активность, охватывающую многие типы. Jurajada V. предложил назвать их вариантами определенного серотипа или интермедиарными штаммами.
АВ птиц терморезистентны. Это относится к вирусу CELO (шт. Phelps) и к вирусу бронхита перепелов. У разных штаммов терморезистентность неодинакова, причем она зависит от соотношения в среде моно — и бивалентных катионов. Устойчивость к температуре 36 °С являлась маркером дифференциации вирусов CELO, бронхита перепелов (QBV) и инфекционного бронхита цыплят. Стандартных методов тестирования штаммов АВ птиц по их термостабильности еще нет. Поэтому Burke предложил использовать температурные тесты, которые могут считаться стандартными для характеристики 7- американских штаммов. Последние были тестированы в различных разведениях и в присутствии 1М моно — и бивалентных катионов и оказались чувствительны к нагреванию до 50 °С.
Среди структурных АГ АВ пентон наименее стоек к воздействию физических и химических факторов. Он термолабилен, разрушается в течение 10 мин при температуре 60 °С; чувствителен к трипсину, который переваривает его основание. Бивалентные катионы АВ придают ему высокую термолабильность. Вирус активен после воздействия на него температуры 56 °С более 1 ч. Его репродукцию не нарушает пребывание в среде с рН 3—8.
Описаны характеристики температурочувствительных мутантов вируса CELO, полученных из эпизоотического вируса при обработке мутагенами. Такие мутанты размножались крайне слабо в условиях 40 °С (пермиссивная температура) и хорошо — при 31 °С (непермиссивная температура). Вирус CELO относительно устойчив к ультрафиолетовым лучам, но чувствитен к фотодинамической инактивации. Обработка вируса CELO генетроном (З-флуорто-3-хлорэтаном), используемым для очистки вируса, существенно не снижала его титр. Титр вируса CELO не изменяется в широких пределах рН (2—9). Гусиный штамм АВ птиц не снижал свою инфекционность даже при РН 3.
АГ структура и АГ активность. У АВ птиц АГ идентифицируют по структурным субъединицам вируса, которые обозначают: 1) гексон АГ; 2) пентон АГ; 3) фибер АГ. В АВ птиц данные о длине фибера различаются. Показано наличие 3- типов АГ вируса CELO, которые были обозначены как А, В и С. Аналогичные АГ были выделены элюцией на ДЕАЕ-целлюлозе и названы Е-АГ (рано элюирующими), L (позднее элю-ирующими) и Т (токсином). Компонент, называемый в настоящее время гексоном, идентифицирован как группоспецифический АГ, так как он ответственен за групповую реактивность, и обозначен А АГ. Однако сыворотка, полученная на очищенный гексон, не только группоспецифична, но и нейтрализует инфекционность вируса, т. е. гексон обладает также типоспецифичностью.
АВ птиц индуцируют AT, определяемые в РСК, ИФ, РДП, ИФА, РН, РЗГА. ВНА, КСА и анти-ГА появляются через 7 дней после инокуляции вируса и достигают максимального титра через 2—3 недели. КСА циркулируют от 2—3 до 6—12 месяцев, а ВН — более 1 года. AT одного и того же типа обнаруживали также и в желтке яиц инфицированных кур-несушек. У цыплят материнские AT сохраняются до 5—6 недельного возраста.
При заражении кур вирусом CELO оральным путем в начале их яйценоскости об—разовывалось больше ВНА, чем ПА. Последние сохранялись до 11 — 14 недель, однако при инокуляции вируса интратрахеально ПА сохранялись дольше. При этом у взрослых кур их образовывалось больше, чем у молодых. Преципитирующие AT образовывались у птицы как при прямом заражении ее, так и контактно. У SPF-кур ВНА появлялись через 1—2 недели после интраназального заражения. Реинфицирование цыплят через 8 недель повышало их титр. Через 8 недель птица была чувствительна, хотя и имела специфические AT, но выделяла вирус с пометом.
Местный иммунитет при АВ инфекции играет более важную роль, чем гуморальный, так как препятствует размножению вируса на слизистых оболочках.
Все известные АВ птиц имеют общий групповой АГ. Он выявляется при двойной иммунодиффузии (ПААГ) или ИФ. В РН в культуре клеток установлено 12 различных серотипов АВ птиц. Вирус EDS-76 (Egg drop syndrome -76) не проявляет родства ни с одним из известным серотипом АВ птиц.
В современных птицеводческих хозяйствах АВ — постоянные (убиквитарные) вирусы. Их часто изолируют от внешне здоровых птиц. Совершенно неправильно считать, что у больных птиц АВ циркулируют в высоких титрах и что именно они — причина болезни птицы. Действительно, в одном случае они могут быть причиной болезни, в то же время могут быть только частью нормальной вирусофлоры птицы.
ГА свойства. В Отличие от АВ человека, АВ птиц не агглютинируют эритроциты, за исключением некоторых штаммов серотипа 1 (EV-89, Phelps, GAL-3, GAL-4 и 93), которые агглютинируют эритроциты крыс. Вирус CELO типа 1 из 10 видов эритроцитов агглютинирует лишь эритроциты крыс в условиях 37 °С; но реакция не протекала при 4 «С. Штаммы, относящиеся к типам 2—8 и двум серотипам АВ индеек (ТА-1, ТА-2), также не обладали гемагглютинирующими свойствами. Недавно был описан микротест задержки гемагглютинации для обнаружения аденовирусных AT.
Элюция птичьих ГА вирусов с эритроцитов происходит при более низкой температуре, сам ГА антиген инактивируется при 56 °С в течение 15—30 мин, хотя инфекционность вируса при этой температуре остается стабильной в течение часа. При центрифугировании 54000 g ГА АГ седиментирует полностью в течение 1 ч. Прикрепление вируса CELO к эритроцитам крыс происходит и при 4 °С, несмотря на отсутствие видимой агглютинации.
Описана пассивная ГА вируса CELO. Достаточно четко охарактеризованы АВ птиц по их патогенности. Изоляты, вызывающие инклюзионный гепатит и инфекционную анемию, представлены тремя разными серотипами. Данные по АГ различию
Культивирование. АВ птиц (CELO и GAL) успешно репродуцируются в КЭ, культурах клеток и органных культурах — тканевых эксплантатах. С момента открытия вируса QBV/CELO (возбудителя бронхита перепелов) КЭ широко используют для выделения, репродукции и изучения АВ птиц. Птичьи АВ (включая шт. Tipton) также хорошо репродуцируются в культуре клеток почек КЭ. Гомогенат ХАО используется для приготовления активного АГ при постановке РДП. Если клетки почек цыпленка, печени и почки эмбриона в равной степени чувствительны к вирусу CELO, то фибробласты КЭ почти в 100 раз менее чувствительны. По чувствительности и пригодности для выделения полевых изолятов вируса КЭ неоднозначны. Лишь японские изоляты CELO во всех разведениях вызывают 100 %-ную гибель эмбрионов.
Адаптация вируса GAL к куриным эмбрионам, в отличие от штаммов CELO, происходит более медленно и требует интравенозной инокуляции вируса в высоком титре. Гибель зараженных эмбрионов в этих случаях наступает лишь через 3—4 дня. После адаптации вирус GAL также оказывался летальным для эмбрионов при любом методе инокуляции. Размножение в эмбрионах других птичьих АВ, кроме CELO и GAL, изучено недостаточно. Размножение АВ птиц в эмбрионах птиц других видов происходило плохо, хотя вирусы бронхита перепелов и СЕШ-вирус успешно размножались в эмбрионах индеек.
источник
Выращивание домашних животных, лечение, болезни, уход
Данная инфекция вызывает гибель эмбрионов в период инкубации. Среди взрослых птиц протекает остро или латентно.
Возбудитель — онкогенный аденовирус, содержащий ДНК. Широко распространен среди кур. Отдельные штаммы возбудителя даже одного серотипа имеют широкий спектр вирулентности для птиц различных видов и цыплят разного возраста. Обладая онкогенными свойствами, вирус CELO вызывает у новорожденных хомячков образование опухолей-фибросаркомы, аденокарциномы, а также трансформацию культуры клеток хомяков и человека. Вирус содержит группо-специфический антиген. Выявлено два антигенных типа вируса (1 и 2). Известные штаммы отдельных серотипов идентичны в антигенном отношении, вызывают образование в организме птицы специфических антител. С помощью РСК удается выявить в сыворотке крови антитела к вирусному (V) и Т-антигенам. Вирус хорошо культивируется на куриных эмбрионах, в культуре клеток почек цыплят и эмбрионов кур.
Возбудитель. Эпизоотологические особенности инфекций, вызываемых указанным вирусом, изучены недостаточно. В естественных условиях заболевают куры, индейки, перепела и птицы других видов отряда куриных. Из организма больных птиц вирус выделяется через желудочно-кишечный и респираторные тракты, передается трансвариально и горизонтальным путем.
Эпизоотология. Болезнь высококонтагиозна и быстро распространяется среди восприимчивого поголовья. Среди птиц неблагополучного стада может быть длительное вирусоносительство.
Симптоматика. Инкубационный период колеблется от 2—4 дней до 1— 3 недель. На клиническое проявление ее влияют вирулентность возбудителя, возраст птицы, наличие материнских антител, сопутствующие болезни (микоплазмоз, инфекционный бронхит, болезнь Гамборо и др). Болезнь может протекать остро с признаками респираторной инфекции, диареи и сопровождаться высокой смертностью птицы (1—20%). У взрослых кур отмечают угнетение, сонливость, слабые признаки нарушения функции органов дыхания и снижение яйценоскости. У экспериментально зараженных цыплят отмечают депрессию, отказ от корма, признаки и нарушения функции органов дыхания, понос и нервные явления. У перепелов болезнь проявляется остро, смертность птицы может достигать 80%. У индеек наблюдают признаки нарушения функции органов дыхания, диарею. У птиц других видов болезнь изучена недостаточно.
Патологоанатомические изменения. При вскрытии обнаруживают геморрагические энтериты, гепатиты, нефриты, кровоизлияния и некрозы в печени, кровоизлияния в мышцах груди и ног, трахеиты, аэросакулиты, аплазию костного мозга, атрофию фабрициевой сумки. Гистологически выявляют внутриядерные тельца-включения в гепатоцитах, некрозы, кровоизлияния и лимфоидные фолликулярные образования в печени.
Диагноз ставят с учетом эпизоотологических данных и симптомов болезни. Проводят лабораторные исследования с целью выделения вируса, специфических антител в сыворотке крови и микроскопических изменений в органах и тканях. Вирус выделяют на эмбрионах кур, в культуре клеток почек куриных эмбрионов и цыплят. Антитела выявляют в реакциях нейтрализации и диффузионной преципитации в агаре. Болезнь дифференцируют от болезни Гамборо, инфекционного энцефаломиелита, кокцидиоза, инфекционного бронхита и вибрионного гепатита.
Меры борьбы и профилактика основываются на выполнении общесанитарных мероприятий. Средства специфической профилактики не разработаны.
источник
В.А. Бакулин, д.в.н., профессор кафедры микробиологии, вирусологии и иммунологии ФГУ ВПО С.-Пб.ГАВМ, главный научный сотрудник отдела вирусологи ГНУ ВНИВИП; А.С. Дубовой, главный научный сотрудник отдела вирусологи ГНУ ВНИВИП.
Семейство Adenoviridae объединяет большую группу вирусов поражающих животных, птиц и людей. В состав семейства входит два рода. Род Mastadenovirus включает аденовирусы млекопитающих: человека – 47 серотипов, обезьян – 27 серотипов, КРС – 10, овец – 6, свиней – 4, собак – 2, лошадей – 1, коз – 1. Род Aviadenovirus представлен аденовирусами птиц, в том числе кур – 13 серотипов, индеек – 3, уток – 2, фазанов – 1. Антигеннородственные аденовирусы выделены также от перепелов, гусей, голубей, куропаток, цесарок, дроздов, лебедей, попугаев и других видов декоративных и диких птиц. Аденовирусы птиц условно дифференцированы на 3 группы. В первую группу входят 12 серотипов аденовирусов кур и других птиц, которые имеют общий группоспецифический преципитирующий антиген, например возбудители «CELO-инфекции», бронхита перепелов, панкреатита цесарок, гепатита с включениями-гидроперикардита кур. Ко второй группе относятся аденовирусы, обладающие гемагглютинирующим антигеном и имеющие общий с первой группой преципитирующий антиген, в том числе аденовирус «Синдрома снижения яйценоскости-76(ССЯ-76). В третью группу включены аденовирусы с группоспецифическим преципитирующим антигеном, отличающимся от таковых первых двух групп – аденовирусы геморрагического энтерита индеек и болезни «мраморной селезенки» фазанов. В промышленных птицехозяйствах аденовирусы распространены повсеместно. Любые из имеющихся 13 серотипов аденовирусов в различных сочетаниях могут циркулировать в одном хозяйстве, а также в организме одной внешне здоровой птицы. Цыплята не имеющие каких-либо признаков заболевания, но зараженные аденовирусом способны выделять его во внешнюю среду около 7 месяцев. Имеются случаи изоляции аденовирусов от клинически здоровых 4–5-летних кур. Обычно контакт птиц с аденовирусами завершается развитием субклинической патологии, с поражениями органов, выявляемыми только при гистологическом исследовании. Но в последнее время аденовирусная инфекция на цыплятах и, реже, курах проявляется в виде синдрома «гепатита с тельцами включениями – гидроперикардита», с высокой смертностью птиц.
Аденовирусный гепатит с включениями-гидроперикардит (АДВГГ) – широко распространенная болезнь кур, наносящая значительный социально-экономический ущерб промышленному птицеводству и дестабилизирующая эпизоотическую ситуацию по другим инфекционным заболеваниям. Поражение аденовирусом различных жизненно важных систем организма птиц, пагубно влияет на развитии цыплят, повышает их восприимчивость к другим инфекционным заболеваниям и усиливает проявление патологий незаразного происхождения. При экспериментальном парэнтеральном заражении СПФ-цыплят гепатит с тельцами-включениями можно воспроизвести используя любой из 12 известных серотипов аденовирусов птиц первой группы. Научно-обоснованная система и средства диагностики АДВГГ нуждаются в дополнительных исследованиях и постоянной доработке.
В связи с этим перед исполнителями была поставлена следующая задача: усовершенствовать, разработанные во ВНИВИП наборы компонентов для диагностики АДВГГ в реакции дифузионной преципитации и проверить их эффективность их в комиссионных испытаниях.
В ходе исследований оптимизирована схема получения антигенов аденовирусов птиц 1-го и 4-го серотипов для постановки РДП. Для накопление аденовируса 1-го серотипа (штамм Фелпс) наиболее оптимальны следующие режимы: заражение развивающихся эмбрионов кур 9 дневного срока инкубации в аллантоисную полость, 96 часов инкубации при (37,0±0,5)0С. В качестве материала использовали экстраэмбриональную жидкость и ХАО. Для получения аденовируса 4-го серотипа (штамм «Т-12») использовали цыплят 10-дневного возраста. Вируссодержащим материалом служил гомогенат печени экспериментально зараженных цыплят павших на протяжении трех суток.
Выбраны наиболее технологичные и эффективные схемы гипериммунизации цыплят для получения высокоактивных специфических сывороток. Для аденовирусов как 1 серотипа (штамм Фелпс), так и 4 серотипа (штамм «Т-12») наиболее оптимальными оказались две следующие схемы иммунизации позволяющие получить сыворотки с активностью в РДП 1:32 и выше.
Схема № 1: парэнтеральное введение живого вируса, через 21–28 дней одно или двухкратная иммунизация инактивированным вирусом в эмульсионной форме. Схема №2: парэнтеральное введение инактивированного вируса (только антигена), через 21-28 дней одно– или двухкратная иммунизация инактивированным вирусом в эмульсионной форме.
Проведено определение титров антигенов и сывороток (по отдельности для каждого серотипа аденовируса), исходя из чего, выбран оптимальный вариант объединения антигенов с одинаковыми титрами, а также и сывороток (с одинаковыми титрами и в равных объемах).
Отработана постановки РДП с объединенными как антигенами 1-го и 4-го серотипов, так и с объединенными гипериммунными сыворотками с целью повышения эффективности разрабатываемого диагностикума.
Выбрана оптимальная схема постановки реакции с полученными компонентами и разработана комплектация набора. Наработан и испытан в Комиссионных внутриинститутских испытаниях (ГНУ ВНИВИП) набор компонентов для диагностики АДВГГ в реакции дифузионной преципитации.
В набор входят:
1. смесь атнигенов аденовируса птиц 1 и 4 серотипов – 3 ампулы объемом 1 мл;
2. смешанная гипериммунная сыворотка к аденовирусам 1 и 4 серотипов – 1 ампула 1 мл;
3. отрицательный антиген – смесь надосадочной жидкости гомогената печени интактного (здорового цыпленка) и аллантоисной жидкости незараженного развивающегося эмбриона 10-дневного возраста;
4. отрицательная сыворотка 1 ампула 1 мл;
5. солевая смесь, состоящая из хлористого натрия – 8 г. и высокоочищенного агара Дифко.
Таким образом, выбран оптимальный режим получения антигенов аденовирусов птиц 1-го и 4-го серотипов в титрах до 1:32 и выше для постановки РДП. Отработаны схемы гипериммунизации цыплят для получения высокоактивных (в титрах до 1:32) специфических сывороток, на аденовирусы как 1-го, так и 4-го серотипов для РДП.
Выбрана оптимальная схема постановки РДП с полученными компонентами и разработана комплектация набора компонентов для диагностики аденовирусного гепатита-гидроперикардита (АДВГГ) кур, в реакции диффузионной преципитации (РДП).
Изготовлены и исследованы в лабораторных условиях две экспериментальные серии набора специфических компонентов для диагностики аденовирусного гепатитагидроперикардита (АДВГГ) кур в (РДП) реакции диффузионной преципитации.
источник
В птицеводческих хозяйствах и на птицефабриках, в связи с концентрацией большого поголовья птицы на малых территориях, создается опасность массового заражения их инфекционными болезнями.
Диагностика инфекционных болезней должна проводиться комплексно, с учетом эпизоотической ситуации, клинических симптомов, данных патологоанатомического вскрытия трупов и лабораторных исследований. В этом комплексе результаты патоморфологических исследований часто имеют большое и решающее значение. При этом микроскопическое исследование органов и тканей, экскретов, содержимого полостей является важной составной частью вскрытия. Оно дополняет вскрытие, а при многих болезнях в сочетании с гистологическими данными дает возможность поставить правильный диагноз.
От своевременно и правильно поставленного диагноза инфекционной болезни зависит эффективность лечебно- профилактических мероприятий. При этом, чтобы правильно поставить соответствующий нозологический диагноз, ветеринарный специалист должен знать патологическую анатомию и гистологию, уметь поставить патологоанатомический диагноз и провести дифференциальную диагностику.
Семейство Adenoviridae объединяет большую группу вирусов, поражающих животных, птиц и людей. В состав семейства входит два рода. Род Mastadenovirus включает аденовирусы млекопитающих: человека — 47 серотипов, обезьян — 27 сероти- пов, КРС — 10, овец — 6, свиней — 4, собак — 2, лошадей — 1, коз — 1. Род Aviadenovirus представлен аденовирусами птиц, в том числе кур — 13 серотипов, индеек — 3, уток — 2, фазанов — 1. Антигеннородственные аденовирусы выделены также от перепелов, гусей, голубей, куропаток, цесарок, дроздов, лебедей, попугаев и других видов декоративных и диких птиц. Аденовирусы птиц условно дифференцированы на 3 группы. В первую группу входят 12 серотипов аденовирусов кур и других птиц, которые имеют общий группоспецифический преципитирующий антиген, возбудители «CELO-инфекции», бронхита перепелов, панкреатита цесарок, гепатита с включениями-гидроперикардита кур. Ко второй группе относятся аденовирусы, обладающие гемагглютинирующим антигеном и имеющие общий с первой группой преципитирующий антиген, в том числе штаммы «В 8-78» и «127» вируса «Синдрома снижения яйценоскости-76» (ССЯ-76). В третью группу включены аденовирусы с группоспецифическим преципитирующим антигеном, отличающимся от таковых первых двух групп — аденовирусы геморрагического энтерита индеек, болезни «мраморной селезенки» фазанов. Аденовирусы широко распространены среди домашних и других видов птиц. Любые из имеющихся 13 серотипов аденовирусов в различных сочетаниях могут циркулировать в одном хозяйстве, а также в организме одной внешне здоровой птицы. Цыплята, не имеющие каких-либо признаков заболевания, но зараженные аденовирусом, способны выделять его во внешнюю среду 7 месяцев и более. Имеются случаи изоляции аденовирусов от клинически здоровых 4-5-летних кур. Обычно контакт птиц с аденовирусами завершается развитием субклинической патологии, с поражениями органов, выявляемыми только при гистологическом исследовании. Но в последнее время аденовирусная инфекция на цыплятах и, реже, курах проявляется в виде синдрома «гепатита с тельцами-включениями— гидроперикардита», сопровождающегося высокой смертностью птиц.
Аденовирусы представляют собой изометрические частицы, имеющие форму икосаэдра и величину 70-90 нм, без наружной оболочки, не содержащие липидов и гликопротеидов. Вирионы состоят из сердцевины, сформированной ДНК и белком, и капсида, построенного из 252 капсомеров. На ребрах равносторонних треугольных граней, общих для соседних треугольников, лежит по 6 капсомеров. Каждый из 240 капсомсров, расположенных па поверхности и ребрах треугольных граней, находится в окружении 6 капсомеров и называется гексоном. Полипептид гексонов имеет группо- и типоспецифические антигенные детерминанты, которые в организме животных и птиц индуцируют синтез антител. Каждый из 12 капсомеров на вершине икосаэдра окружен пятью соседними капсомерами и носит название пентона. В каждом пентоне имеется основание, закрепленное в капсиде, от которого отходит нить, состоящая из стержня, заканчивающегося головкой величиной 4 нм. Размеры нити варьируют у аденовирусов различных серотипов от 10 нм до 31 нм.
Нить пеитона участвует в адсорбции вируса на поверхности клетки и в индуцировании антител, обладающих вируснейтрализующей активностью. Некоторые аденовирусы имеют характерные фибриллярные структуры, состоящие из двух нитей с утолщениями, причем длина одной из них равна 42,5 нм, а другой 8,5 нм. Молекулярная масса вириона составляет 170-175 Мд, плавучая плотность в градиенте хлорида цезия 1,32-1,35 г/см 3 , константа седиментации 560 S. В вирионах содержится 86-88% белка и 12-14% ДНК. Молекулярная масса вирионов 170 Мд. Геном сформирован одной двухспиральной молекулой ДНК. Синтез полипептидов вируса происходит в цитоплазме, транскрипция и репликация ДНК, а также сборка вириона — в ядре. Аденовирусы устойчивы во внешней среде, к действию эфира, хлороформа и некоторых растворителей липидов, сапонину, дезоксихолату натрия, 0,25% раствора трипсина, 2% фенола (карболовой кислоты), 50% раствору этилового спирта. Относительно стабильны при рН 6,0-9,0. При температуре минус 25°С вирус сохраняется до трех и более лет. При повышенной температуре происходит инактивация аденовирусов, но степень ее выраженности у разных серотипов и даже у различных штаммов одного серотипа может значительно отличаться. В среднем при температуре плюс 60
70 о С на инактивацию требуется от 30 мин. до 1 часа. Аденовирусы устойчивы к многократному повторному замораживанию и оттаиванию и не теряют инфекционных свойств при сублимационном высушивании. Аденовирусы инактивируются бетта-пропиолактоном, формальдегидом, гидроксиламином, ультрафиолетовыми лучами, абсолютным этиловым спиртом или его йодным раствором, производными этиленимина. Иногда устойчивость аденовирусов к некоторым химическим и физическим инактиваторам, используемым при определенных параметрах, может быть, на первый взгляд, необоснованно повышенной. Что обусловлено устранением повреждений вирусной ДНК с помощью защитных механизмов клетки-хозяина и появлению новой, функционально полноценной, генерации вирионов. Поэтому в начальном периоде инактивации действие производных этиленимина может проявляться незначительно.
Полный цикл репродукции аденовируса в клетке (при заражении культуры клеток), после 12-24-часового латентного периода (от заражения клетки до начала формирования зрелых вирионов) длится 24 часа. Затем следует 24-часовой период накопления вирионов в виропласте ядра клетки-хозяина до критического количества. Исход взаимодействия аденовируса и клетки зависит от многих причин, в том числе от типа вируса, остроты течения инфекции и других. При литическом (или «взрывном») варианте после завершения созревания определенного количества вирионов происходит разрушение ядерной оболочки и выход всей массы вирусов. Возможен выход вирионов по мере созревания одиночно или группами, почкованием от оболочки ядра, а затем оболочки клетки.
В связи с эпителио-, гепато-, а, при определенных ситуациях, пантропностыо аденовирусов, они поражают различные органы и ткани птиц. При остро протекающих инфекциях, через 3-4 суток после заражения, аденовирусы выделяли из гомогенатов печени, селезенки, поджелудочной железы, фабрициевой сумки, трахеи, конъюнктивы, легких, периферической крови, лейкоцитов и сыворотки крови, репродуктивных органов, пищевода, кишечника, его содержимого и фекальных масс, назальных, глоточных и клоакальных смывов, из центральной нервной системы (обычно при интрацеребральном заражении).
Аденовирусы с 1 по 9 серотипы (не гемагглютинирующие, в т. ч. не вирус ССЯ-76) способны вызывать снижение яичной продуктивности у кур-несушек. Трудно считать этот признак специфичным для аденовирусов, поскольку снижение яичной продуктивности наблюдается по многим причинам. Однако имеются сведения о зависимости между снижением яичной продуктивности, снесением яиц со слабой скорлупой или бесскорлупных яиц, особенно у мясных кур-несушек, около 30-недельного возраста и наличием в популяции аденовирусов. При эксперимеитальном комбинированном заражении кур-несушек (одновременно — интраназальном и внутримышечном) отмечается снижение яйценоскости на 12%, наблюдающееся в течение 10-21 дней.
Многие штаммы аденовирусов, особенно относящиеся к 1 и 2 серотипам, могут поражать дыхательную систему птиц и вызывать различные заболевания. Однако зависимость между наличием поражения органа дыхания и выделением от больных кур аденовирусов не доказывает, что аденовирусы были единственной первопричиной патологии. Но попадание в организм дополнительного, даже условно патогенного агента, токсинов или интенсивное воздействие на организм птиц какого-либо фактора небиологического происхождения может активизировать латентные аденовирусы, локализующиеся в различных участках дыхательной системы. Возникает респираторный симптомокомплекс: угнетение, снижение двигательной активности, бронхит, трахеит, иногда пневмония. Вирус выделяется из назальной и трахеальной слизи, гомогенатов трахеи и легких
Аденовирусная инфекция имеет зооантропонозное значение, поскольку отмечена чувствительность млекопитающих к аденовирусам некоторых серотипов. Аденовирусы птиц, как и собак, КРС, человека обладают онкогенными свойствами. Трансформирующая (онкогенная) активность установлена у вирусов первого серотипа и штаммы Phelps и Ote; второго — штамм SR-48; третьего — штамм SR-49; четвертого — штамм KR-95; шестого — CR-119. Притом некоторые штаммы трансформируют не только клетки птиц, но также млекопитающих, в том числе людей.
Аденовирусы индуцируют выработку вируснейтрализующих, атигемагглютинирующих, комплементсвязывающих и вируспреципитирующих антител.
CELO-инфекция (абривиатура от chiken embio lethal orphan), в основном болезнь эмбрионов кур, а также цыплят первых дней жизни.
Возбудитель вирус из семейства Adenoviridae, рода Aviadenovirus, с характерными для данного семейства морфо-биологическими свойствами. Относятся к 1 серотипу аденовирусов птиц 1 группы. В организме птиц индуцирует выработку антител, выявляемых МФА, в реакциях: РДП, РСК, ИФА, РН. Гемагглютини- рующие свойства отмечены лишь у некоторых штаммов аденовирусов 1 группы (EV-89, Phelps, Gal-3, Gal-4 и 93) — агглютинирующих эритроциты крыс при температуре 37°С. Вирус CELO ранее считался наиболее частым контаминантом культур клеток куриного и иного происхождения.
Восприимчивы эмбрионы кур, в значительно меньшей степени эмбрионы других видов птиц. Источник инфекции: птицы-вирусоносители. Передача вируса в основном трансовариальная, а также контактная. Персистенция возбудителя широко распространена, но не всегда сопровождается клиническим проявлением болезни. Особенностью CELO-инфекции является трансовариальная передача и вируса и антител, что не мешает спонтанному развитию болезни или латентному вирусоносительству, а также экспериментальному заражению аденовирусом.
Заболевание может протекать как остро, так и субклинически. CELO-инфекция считается заболеванием преимущественно эмбрионов кур и сопровождается их гибелью на заключительных этапах инкубации или цыплят сразу после вывода (до 40-80%) и в первые 1-2 дня жизни. У выживших особей наблюдаются слизистые истечения из носа, диарея, паралич крыльев и конечностей, крайне редко — гангренозный дерматит.
При экспериментальном заражении новорожденных или 1-дневных цыплят отмечается небольшое угнетение, признаки нарушения дыхания, выделение вируса с фекалиями до 14 дня после заражения. При пероральном заражении 1-дневных цыплят
штаммом Ote вирус выделяется (на 4 сутки и/з) из сыворотки крови, а также из трахеи, легких, глоточных смывов, кишечника до 13 дня после инфицирования птиц, а из фекалий — до 20 дня. Из внутренних органов экспериментально зараженных суточных СПФ цыплят вирус выделяется в более высоких титрах (10 6 ) и длительнее — 11-18 дней. Заражение тем же вирусом 21-дневных цыплят сопровождается выделением вируса до 11 дня, в относительно небольшом титре (10 4,5 ). Но подобные научные сведения нуждаются в проверке.
При заражении 19-дневных эмбрионов штаммом Phelps вирус можно выделить из трахеи, печени, почек, слепых отростков кишечника в течение 10 дней и выявить в сыворотке, полученной от цыплят сразу после вывода, а также в эпителии яйцевода до 21-дневного возраста. При инфицировании этим же штаммом 12-месячных кур, аденовирус можно выделить из внутренних органов до 9 суток. При внутривенном, интратрахеальном, внутримышечном, внутриперитонеальном заражении цыплят, даже имеющих высокий уровень антител к аденовирусу, развивается виремия, с последующим выделением аденовируса из большинства органов и тканей. Но в центральной нервной системе идентифицировать аденовирус, как правило, ранее не удавалось, чему вероятно препятствует гематоэнцефалический барьер.
Экспериментальное заражение взрослых кур вирусом CELO часто приводит лишь к субклиническому вирусоносительству. Но иногда у них болезнь проявляется незначительным угнетением, сонливостью, умеренным поражением дыхательной системы. Сведения о восприимчивости к CELO-инфекции цыплят и кур различного возраста очень противоречивы. Это обусловлено отличием биологических свойств у полевых штаммов CELO вируса и различным иммунологическим статусом птиц, используемых для экспериментальных исследований.
У новорожденных хомячков, зараженных подкожно вирусом CELO, в месте введения агента, через 88-95 дней, может развиться фибросаркома или аденокарцинома, а также выявляются поражения печени. Неоплазмы образуются значительно чаще у самок, чем у самцов. Опухоли возникали также, когда хомячкам вводили лишь суспензию культуры клеток, трансформированных вирусом CELO.
При сравнительных исследованиях установлено, что культура клеток печени и почек эмбрионов кур более чувствительна к трансформирующему действию аденовирусов, чем культура клеток фибробластов. При этом развивалось несколько типов опухолей: 1 — сформированная из плотно прилегающих друг к другу многогранных клеток; 2 — состоящая из многогранных, овальных и веретенообразных клеток; 3 — образованная только из веретенообразных клеток. Однако формирование «канальцев» и дифференциация клеток в аденокарциномные, характерные для трансформации клеток вирусом SV-40 не отмечалось. В трансформированных клетках (как в большинстве опухолевых клеток) не выявляется не только цельный инфекционный вирус, но и его ДНК, которая интегрируется в геном клетки.
Аденовирус CELO вызывает трансформацию культуры клеток человека, в т. ч. способен инфицировать и трансформировать клетки плаценты человека.
При естественном течении инфекции патология развивающихся эмбрионов кур, зараженных аденовирусом, в основном выявляется на заключительной стадии инкубации. Отмечается уменьшение объема амниотической и увеличением количества аллантоисной жидкости, отеком, гиперемией, помутнением и утолщением ХАО, с наличием в пей очагов некроза и кистозных разрастаний. Наблюдается отставание эмбрионов в развитии, отек и гиперемия кожи, наличие в ней кровоизлияний, гиперемия трахеи, легких, головного мозга, некротические очаги в легких и в печени.
источник