Для диагностики вирусных гепатитов используют

Термин «гепатит» включает группу заболеваний, которые характеризуются воспалительным поражением печени. Воспаление паренхимы (ткани) печени может быть вызвано различными причинами. Согласно современной классификации гепатитов различаем следующие виды этого заболевания ():

Инфекционный гепатит – вирусные гепатиты (Гепатит А, В, С, D, E, G), бактериальные гепатиты. Токсический гепатит – алкогольный гепатит, лекарственный гепатит, гепатит при отравлении различными химическими веществами (природные и промышленные яды). Аутоиммунный гепатит – разрушение тканей печени собственной иммунной системой организма. Лучевой гепатит – редкая форма гепатита развивающаяся при воздействии на организм больших дох ионизирующего излучения.

Из приведенных выше групп гепатитов, наиболее часто встречаются инфекционные, а именно вирусные гепатиты. В настоящее время наблюдается пандемическое распространение вирусного гепатита В. В некоторых развивающихся странах Африки и Азии заболеваемость вирусным гепатитом А среди детей достигает 100%, а вирусным гепатитом В – до нескольких сотен случаев на 100 000 населения.

Различные виды вирусных гепатитов характеризуются специфическим клиническим развитием и в разной степени нарушают функцию печени. Вирусный гепатит А протекает остро и полностью исчезает при клиническом выздоровлении больного. Для вирусных гепатитов В, С, D характерно острое и хроническое течение. Это наиболее опасные формы вирусных гепатитов. Переход заболевания в хроническую форму предполагает ухудшения прогноза заболевания из-за неэффективности лечения и длительного развития воспалительного процесса в печени. Хронические формы вирусных гепатитов считают одними из самых распространенных причин цирроза печени и первичного рака печени.

Диагностика вирусных гепатитов подразумевает установление возбудителя гепатита, определение формы заболевания и установление степени нарушения функции печени и сопутствующих осложнений.

Начальным этапом диагностики является сбор анамнестических данных и клинический осмотр больного.

Симптомы и клинические признаки заболевания зависят от типа вирусного гепатита и от этапа развития заболевания.

Обычно больные обращаются к врачу в период продромальной (начальной) фазы заболевания. Для этого периода характерно ухудшение общего состояния больного. Часто гепатит начинается с установления «гриппозного» состояния, с повышением температуры тела, болями в мышцах и суставах, головной болью, потерей аппетита. Также могут присутствовать нарушения со стороны желудочно-кишечного тракта: тошнота, рвота, диарея. Описанные выше симптомы носят неспецифический характер и могут служить лишь для предположения инфекционного заболевания. Более специфичными симптомами являются боли в правом подреберье, потемнение мочи (моча чайного цвета) и обесцвечивание каловых масс, увеличение селезенки. Определение подобных симптомов может послужить для ранней диагностики гепатитов, особенного вирусного гепатита А, часто встречающегося у детей дошкольного возраста. Установление со слов больного возможных причин заболевания имеет важную роль для дифференцировки различных форм вирусных гепатитов и для принятия эпидемиологических мер по предупреждению распространения заболевания. Как известно, вирус гепатита А передается с загрязненной пищей и водой, поэтому нарушение элементарных санитарно-гигиенических норм в учреждениях для детей дошкольного возраста, способствует появлению вспышек этого заболевания в учреждениях для детей дошкольного возраста. Вирусы гепатита В, С и D передаются исключительно парентеральным путем (то есть через кровь), поэтому наличие в истории болезни пациента эпизода посещения стоматолога, осуществления различных хирургических операций или инъекций, а также нанесение татуировок или пирсинг, помогают предположить именно эти формы вирусного гепатита.

Следующим важным и специфичным симптомом поражения печени является появление желтухи. Развитие желтухи означает переход заболевания в желтушную фазу. Желтуха обусловлена поражением тканей печени, которые становятся неспособными перерабатывать и выводить из организма продукты распада гемоглобина – билирубин, в результате чего билирубин накапливается в организме и окрашивает кожу в желтый цвет. Ранее всего желтушность появляется на слизистой оболочке под языком, затем желтеют склеры глаз и лишь потом кожные покровы. С появлением желтухи (5-10 дней с начала заболевания) состояние больного частично улучшается. Потемнение мочи и обесцвечивание каловых масс на этом этапе заболевания достигает максимальной величины и служат важным диагностическим признаком.

Фаза выздоровления характеризуется прогрессивным улучшением состояния больного, постепенным исчезновением желтухи и нормализацией цвета мочи и кала. Таким образом. общая продолжительность болезни может достигнуть 2-3 недель. Однако полное клиническое (нормализация всех функций организма) и серологическое (исчезновение вирусных антигенов из крови больного) выздоровление может продлиться до 9 недель в случае вирусного гепатита А, и до 16 недель в случае гепатита В. С точки зрения диагностики и лечения, оптимальным считается первый (продромальный) период заболевания. Важно обратить внимание родителей на описанные выше симптомы, при развитии которых у детей, нужно немедленно обратиться к врачу инфекционисту.

Как уже упоминалось выше, гепатит А заканчивается полным выздоровлением больного (крайне редко встречаются агрессивные формы болезни приводящие к смерти больного). Вирусный гепатит В, в свою очередь, может переходить в хроническую форму. Вероятность перехода заболевания в хроническую форму тем выше, чем меньше возраст больного. Хроническое течение также характерно и для гепатита С и D. При хроническом течении, симптомы и клинические признаки заболевания выражены слабо. Больной жалуется на периодическое недомогание, потерю аппетита, похудание. Периодически появляется слабая желтушность кожи. Заподозрить вирусный гепатит при такой форме развития исходя только из симптомов заболевания и клинических знаков очень тяжело или совсем невозможно. Для более детальной диагностики острых состояний и диагностики скрытых хронических форм вирусного гепатита применяют дополнительные методы исследования.

Поиск вирусных антигенов – является наиболее специфичным из всех существующих ныне тестов. Определение в крови больного вирусных антигенов (частиц вирусов) и антител к этим антигенам помогает не только точно установить возбудителя заболевания, но и оценить активность вирусного процесса. В диагностике хронического вирусного гепатита В применяют следующие виды маркеров:

Ag.HBs (поверхностный антиген, австралийский антиген) – является неоспоримым признаком инфекции гепатита В. Определение Ag.HBs возможно в самом начале заболевания еще до появления биохимических нарушений крови. Длительное присутствие в крови Ag.HBs говорит о хронической инфекции.
Anti-HBs (антитела против Ag.HBs) – появление антител анти Ag.HBs (Anti-HBs) после вакцинации или перенесенной болезни, является признаком полного выздоровления больного и приобретения противовирусного иммунитета. Антитела Anti-HBs защищают организм от повторного заражения вирусом гепатита В.
Anti-HBс – появляется в крови больного немного позже чем Ag.HBs. Определение Anti-HBс подтверждает диагноз вирусного гепатита В.
Ag.HBе – появление этого вирусного белка в крови наблюдается в инкубационный период сразу после появления Ag.HBs. Определение Ag.HBе является признаком активного размножения вируса. Присутствие Ag.HBе в крови более 3-х месяцев говорит о возможности перехода заболевания в хроническую форму. Исчезновение Ag.HBе и появление Anti-HBе говорит о снижении интенсивности размножения вируса и об уменьшении степени заразности больного.

Все анализы по определению описанных выше маркеров вирусного гепатита проводят в специальных лабораториях. Для проведения анализа производят забор нескольких миллилитров крови из вены.

Другим важным этапом диагностики является определение биохимического состава крови, который претерпевает значительные изменения при вирусном гепатите.

Определение печеночных ферментов
Повреждение тканей печени сопровождается выбросом в кровь ферментов из клеток печени и повышением их концентрации в плазме. В норме концентрация АСАТ (AST, аспартатаминотрансфераза) колеблется в пределах 5-35 Ед./л (U/l), а концентрация АЛАТ (ALT, аланинаминотрансфераза) – 5-40 Ед./л (U/l). При гепатите также наблюдается повышение плазматической активности щелочной фосфатазы (норма 30-115 Ед./л (U/l).

Определение фракций билирубина – при вирусном гепатите повышаются как фракция свободного, так и связанного билирубина. Связано это с неспособностью клеток печени пораженных вирусом выводить из организма пигмент билирубин. Физиологическая концентрация фракций билирубина в крови равняется 0,1-0,3 мг/дл для прямого (связанного) билирубина и 0,2-0,7 мг/дл для непрямого (свободного) билирубина.

Потемнение мочи при гепатите вызвано попаданием в мочу пигмента билирубина, который в здоровом организме, перерабатывается клетками печени и выводится с желчью. В норме билирубин в моче отсутствует.

Для диагностики морфологических изменений печени при гепатите используют ультразвуковое исследование. Этот метод позволяет определить изменения структуры паренхимы печени при хроническом гепатите или циррозе печени. Для более полного гистологического анализа тканей печени проводят гистологическое исследование образца тканей забранных на биопсию. Гистологическое исследование помогает установить морфологические особенности воспалительного процесса, влияющие на эволюцию заболевания.

Апросина З.Г. Хронический вирусный гепатит, М. : Медицина, 2004
Арямкина О.Л. Острый и хронический вирусные гепатиты : Распространенность, клиника, диагностика, лечение, Ульяновск , 2004
Дифференциальная лабораторная иммунодиагностика вирусных гепатитов, М., 2002

Сайт предоставляет справочную информацию исключительно для ознакомления. Диагностику и лечение заболеваний нужно проходить под наблюдением специалиста. У всех препаратов имеются противопоказания. Консультация специалиста обязательна!

источник

Гепатит А считается врачами относительно мягкой формой инфекционного процесса из-за редких случаев хронизации заболевания, но в последнее время этот недуг приобретает более широкое распространение. Вирусный гепатит А является наиболее распространенной формой гепатита. Микробиологические исследования доказали, что передается от человека к человеку инфекция парентальным путем, с пищей и питьем.

В некоторых случаях может иметь место молниеносный гепатит, такая разновидность патологического процесса способна закончиться смертельным исходом. По этой причине пускать развитие недуга на самотек нельзя.

Развитие болезни происходит в три этапа:

преджелтушная;
разгара болезни — желтушная;
реконвалесценции – выздоровления.

Сразу после инфицирования начинается инкубационный период, в течение которого, изменения не выявляются, этот период характеризуется накоплением вирусных частиц в организме.

Патогенез гепатита А сопровождается формированием в организме больного различных синдромов, представляющих собой комплексы симптомов, свидетельствующих о возникновении различных нарушений провоцируемых интоксикацией.

Диагностика гепатита А предполагает использование нескольких диагностических методов. При появлении подозрений на наличие указанной инфекции больной в первую очередь должен обратиться к врачу-инфекционисту для проведения экспресс-теста.

Для диагностирования наличия заболевания инфекционисту достаточно провести беседу с пациентом, в процессе которой выясняются особенности способа жизни человека. После проведения беседы врач осуществляет осмотр больного, обследует печень методом пальпации и ставит первичный диагноз.

Так как большинство симптомов у различных типов вирусных инфекций сходны между собой, поэтому требуется лабораторная диагностика гепатитов.

После первичного осмотра и обследования врач дает направление на анализы.

Проведение лабораторной диагностики гепатита А во многом сходно с лабораторной диагностикой гепатита С.

При проведении первичной диагностики вирусного гепатита А показательной будет следующая информация:

Посещал ли пациент в последнее время страны Азии и Африки, где недостаточно развита работа коммунальных служб. Это связано с тем, что передача инфекции осуществляется пищевым и водным путем.
Соблюдает ли человек элементарные гигиенические правила.
Важной является информация о том, контактировал ли пациент с больными гепатитом А.

На основании полученной информации врач может сделать предварительное заключение и проводить дальнейшую диагностику заболевания. Одновременно с проведением осмотра врач выясняет, как осуществляет функционирование пищеварительная система пациента, присутствуют ли признаки мышечной интоксикации. При проведении процедуры пальпирования доктор определяет размеры печени.

Очень часто течение заболевания происходит в безжелтушной форме, но опытный врач проводит осмотр склер глаз, появление даже небольшой желтушности говорит о возможном факте инфицирования организма.

В качестве первичного метода диагностики на наличие у пациента вирусной инфекции можно использовать экспресс-тест на определение антигена вируса гепатита А в составе кала или крови.

Фармацевтическая промышленность предлагает использовать два вида тестовых наборов – тест компании Vegal и иммуноферментные тест-системы Vintrotest Vitrotest HAV-IgM TK069.

Первая разновидность экспресс-тестов включает в своем составе весь комплект необходимых реактивов и инструментов. Для проведения исследования требуется не более 15 минут. Этот способ не дает 100% точности.

Иммуноферментные тест-системы Vintrotest Vitrotest HAV-IgM TK069 позволяют достаточно быстро определить присутствие антител IgM к вирусным частицам. Это исследование позволяет получить результат в домашних условиях уже через 15 минут.

Использование результатов гемотестов, несмотря на большое количество положительных отзывов о них, не могут использоваться в качестве единственного способа проведения диагностики.

После использования такого метода рекомендуется провести дополнительные лабораторные исследования. Помимо этого, в связи с тем, что появляющиеся симптомы могут свидетельствовать о наличии в организме не только гепатита, а также, например, у взрослых людей алкогольного гепатоза и некоторых других заболеваний печени. По этой причине требуется проведение дифференциальной диагностики. Дополнительно нужно установить какая разновидность вируса поразила организм и спровоцировала появление болезни.

Проведение диагностических мероприятий при подозрении на наличие патологии требует проведения целого комплекса исследований.

При диагностировании недуга применяются лабораторные и инструментальные методы проведения исследований.

Показательные данные позволяет получить биохимический анализ крови и мочи.

В том случае, если выявлены повышенный билирубин, а также увеличенная концентрация печеночных ферментов, то это означает, что развивающийся в организме гепатит уже привел к нарушению работы клеток печеночной паренхимы.

Проведение детальной расшифровки анализа крови и мочи позволяет определить в некоторых случаях степень повреждения печени и организма в целом.

Наиболее показательными лабораторными методами диагностики гепатита А являются:

анализ мочи;
общий анализ крови;
биохимия крови;
коагулограмма.

Лучше всего сдавать анализы натощак, это позволит получить наиболее точные результаты.

Присутствие вируса в организме можно увидеть по анализу мочи, при появлении в ней билирубина, она начинает светлеть. У здорового человека в моче оно не выявляется, при наличии гепатита А наблюдается повышение концентрации в составе мочи уробилиногена. При тяжелом течении патологии в моче выявляется наличие низкомолекулярных плазменных белков, которые не должны выявляться в моче здорового человека.

При общем анализе крови при гепатите А наблюдается снижение концентрации гемоглобина и лейкоцитов. Помимо этого фиксируется снижение концентрации тромбоцитов. Эти изменения свидетельствуют о наличии аномальных процессов в печени.

Биохимия крови позволяет выявить отклонения в концентрации печеночных ферментов. Такие отклонения свидетельствуют о патологических нарушениях в функционировании печени и разрушении гепатоцитов.

После проведения первичного осмотра и лабораторных анализов можно поставить диагноз, но для качественной диагностики требуется проведение дополнительных тестов и исследований.

После ряда анализов врач-инфекционист направляет больного для количественных и качественных обследований гепатита А.

Существует ряд методик, позволяющих определить количество вируса в организме и степень его агрессивности.

Наиболее распространенными методами проведения такой диагностики являются:

Иммуноферментная диагностика.
Ультразвуковое исследование.
Полимеразная цепная реакция.

Наиболее точной и специфической диагностикой является выявление РНК вируса в крови при помощи ПЦР.

Для точного определения наличия антител к вирусу необходимо проверить кровь на маркеры. Специфическими маркерами являются иммуноглобулины класса М анти-HAV IgM. Наличие этого компонента можно установить с первых дней после проникновения патогена в организм при помощи методики ИФА.

Иммуноглобулины появляются в организме больного в первые месяцы развития патологии. Выработка антител у больного происходит в независимости от тяжести, формы и симптомов болезни. Эти антитела носят название ранних, это связано с тем, что спустя полгода после инфицирования их уже невозможно выявить методом ИФА в организме. Спустя 6 месяцев наблюдается их возврат в крови пациента, после возвращения анти тела способны сохраняться в составе крови на протяжении всей жизни.

Наличие указанных антител к вирусу является доказательством того, что человек инфицировался гепатитом А и у него выработался иммунитет к этому патогену. Аналогичные антитела появляются у человека, если ему делалась прививка против вируса в качестве профилактики развития патологии.

Для определения наличия маркеров требуется сдать кровь для проведения лабораторных тестов. Сотрудники клинической лаборатории в процессе проведения тестов имеют возможность выявить не только само наличие антител, но и их количество в организме пациента.

Эта методика определения патологии относится к высокоточным лабораторным методам, требующим наличие специального оборудования и реактивов.

Применение ультразвукового исследования позволяет выявить наличие нарушений вызванных инфекционным процессом в структуре и форме печени. Такие нарушения являются частым спутником при развитии у человека гепатита А.

В процессе исследования выявляется наличие пятен на органе что говорит о повышении эхогенности, наличие уплотнений может свидетельствовать о развитии в печени цирроза.

УЗИ может помочь диагностировать присутствие в железе любых серьезных изменений на самых ранних стадиях их прогрессирования. Так, например, при помощи ультразвука выявляются нарушения, возникающие в результате развития холестаза и цитолиза гепатоцитов.

УЗИ может быть назначено человеку для подтверждения наличия вирусной инфекции даже в случае наличия у него на руках результатов ИФА, это требуется для того чтобы определить полную картину развивающихся патологических изменений в тканях железы.

Для получения максимально точной картины нарушений УЗИ рекомендуется проводить натощак, а за два дня до процедуры исключить из рациона питания такие продукты как:

Исключение указанных компонентов из рациона связано с тем, что они усиливают процессы газообразования, а это в свою очередь приводит к неточностям при проведении ультразвукового обследования.

Метод ПЦР дает возможность определить уровень нуклеиновых кислот и присутствие чужеродной ДНК или РНК.

Использование ПЦР позволяет выявить генетический материал патогена еще на самой начальной стадии, когда в составе крови отсутствуют антитела. Эта методика диагностики является наиболее многогранной и точной, что позволяет проводить наиболее раннюю диагностику заболевания.

Использование этого метода оправдано в тех случаях, когда требуется получение наиболее точного результата в максимально короткие сроки для предотвращения распространения инфекционного процесса.

Недостатком методики является высокая стоимость инструментов необходимых в процессе анализа, а также его недоступность в целом ряде стран с высокой степенью распространения вирусной инфекции.

Методика ПЦР дает возможность определить чувствительность вируса к определенным противовирусным препаратам и определяет точное расположение очагов заболевания – мест наибольшего скопления частиц патогена. Наличие у лечащего врача такой информации позволяет подобрать наиболее оптимальный вариант проведения терапевтических мероприятий.

Специфичность методики составляет около 98%. Наличие у ПЦР высокой степени чувствительности позволяет его использовать, как наиболее показательный при проведении диагностики гепатита А.

источник

Воспалительное заболевание паренхимы печени зачастую имеет вирусную природу возникновения. С учетом разновидностей возбудителей были выделены гепатиты А, В, С, Д и Е, которые различаются тяжестью клинической картины и воздействием на печень. Если их не дифференцировать, неправильно подобранное лечение может привести к смерти пациента.

Науке известно 11 генотипов этой патологии, но более 70% случаев заболеваемости приходятся на гепатит А, доля детей дошкольного и младшекольного возраста составляет 80%. С ним бороться легче, чем с остальными разновидностями, но и их опасность существенно выше. Сравнительная таблица самых распространенных вирусных гепатитов:

Тяжесть течения

начало болезни острое, течение преимущественно легкое, клиническая картина как у гриппа

легкие (безжелтушные), средние и тяжелые формы течения

преобладают безжелтушные и легкие формы (40–75% пациентов не имеют симптомов болезни), склонные к хронизации процесса

тяжелое течение, зачастую с неблагоприятным исходом

острая форма начинается медленно, но по симптоматике похожа на гепатит А;
болезнь тяжело протекает у беременных

Вероятность развития осложнений

низкая, фундаментальных повреждений печени не происходит

при хронизации болезни происходит нарушение обменных процессов печени;
при коинфекции с гепатитом Д наблюдаются тяжелые осложнения

высокая, у 25% пациентов формируются опасные для жизни патологии: цирроз, рак печени

при коинфекции (смешанное заражение) высокая вероятность цирроза, печеночной комы или летального исхода

высокая для почек и печени

Фульминантное течение (злокачественная форма гепатита, связанная с массивным некрозом печени)

почти не встречается, но существует риск для пожилых пациентов

наблюдается у больных с хронической формой, при коинфекции вирусами В и Д (зарегистрирована у 52% больных), при чистом вирусе В риск злокачественного течения – 1%

наблюдается при коинфекции вирусами В и Д (зарегистрирована у 42% больных)

почти не встречается, но возможно возникновение у беременных в отдельных регионах (эндемичные области по вирусному гепатиту Е) – регистрируется с частотой 20–40%

от инфицированного к здоровому вирус переходит при несоблюдении гигиены, контакты с предметами, которые потом попадают в рот

высокая, от инфицированного человека к здоровому вирусные агенты передаются через кровь (включая заражение ребенка от матери при родах) и половым путем со спермой;
при целостности кожных и слизистых покровов (через посуду, грудное молоко, поцелуи, рукопожатия) болезнь не передается;
гепатитом С часто заражаются при переливании крови

вирусная инфекция передается преимущественно через воду

Прогноз излечения

зачастую наблюдается полное выздоровление;
летальный исход – единичные случаи

острая форма – выздоровление в 80% случаев;
субклинический гепатит оканчивается хронической формой, выздоровление происходит редко

из-за стертой симптоматики патология с вероятностью 80–90% становится хронической

высокая вероятность летального исхода (до 20%) при коинфекции, формирование хронического носительства вируса

при своевременном лечении прогноз благоприятный, выздоровление наступает через 2 месяца но не исключены осложнения

Лабораторные и инструментальные исследования назначаются для своевременного выявления болезни и определения типа возбудителя, особенно при скрытых формах гепатита. Чем раньше будет проведена диагностика, тем выше шансы подобрать необходимую терапию и предотвратить возникновение тяжелых осложнений и переход заболевания в хроническую стадию.

Для выявления патологии пациенту необходимо посетить инфекциониста и гастроэнтеролога, по необходимости он будет перенаправлен к гепатологу. Обратиться к врачу требуется после полового акта с потенциальным носителем болезни, при планировании беременности, появлении первых симптомов недомогания: слабость, повышение температуры, потеря аппетита, боли справа под ребрами. Диагностика антигенов нужна при подготовке к вакцинации. Если при общем осмотре врач обнаружит увеличение печени или иные клинические признаки гепатита, будут назначены:

анализы кала, мочи;
серологическая диагностика (исследование состава крови);
инструментальные обследования.

Выбор конкретного метода диагностики осуществляет врач, который проведет оценку изменения состояния печени, выявит степень ее поражения, конкретные нарушения функционирования. После сопоставления этой информации с данными анамнеза и жалобами пациента подбирается оптимальный набор методов. Лабораторная диагностика гепатитов для получения максимально достоверных результатов проводится дважды и имеет более высокую информативность, чем инструментальная.

Для вирусных гепатитов типов А, В, Д и Е общие проявления схожи, поэтому дифференцировать их между собой в процессе первичной диагностики сложно. У гепатита С на начальном этапе (который длится месяцами или годами) внешние признаки могут полностью отсутствовать. При осмотре врач обращает внимание на:

цвет кожи, склер, слизистой ротовой полости – становится желтушным;
зуд кожных покровов (на фоне повышенного билирубина);
сыпь (возможна при гепатите В);
размеры печени – она увеличивается (гепатомегалия) или сокращается при злокачественной форме;
массу тела – сильно снижается;
сосудистые звездочки;
потемнение мочи вместе с обесцвечиванием каловых масс.

Сами внешние признаки болезни на конкретный тип вирусного гепатита указывают редко. К результатам клинической диагностики врач должен добавить жалобы пациента – тошнота, боли в правом подреберье, диарея, рвота, повышение температуры, слабость, недомогание. Дополнительно учитываются данные анамнеза, которые помогают найти возможный путь заражения, соотнести его с конкретным вирусом.

Один из самых специфичных тестов для диагностики гепатита используется для точного выявления возбудителя и оценки активности вирусного процесса. Поиск антигенов (частиц патогенного микроорганизма) осуществляется для раннего обнаружения болезни, особенно бессимптомных форм, во время проведения иммуноферментного анализа крови. Дополнительно проводят проверку на антитела или иммуноглобулины, которые иммунитет вырабатывает в ответ на вирусную инфекцию. У каждого вида вирусного гепатита свои маркеры:

А – Anti-HAV IgM наблюдается ближе к концу инкубационного периода, одновременно с появлением первых признаков болезни, и сохраняется до полугода. Наличие HAV-инфекции и формирование иммунитета к ней определяется по Anti-HAV-total.
В – на последней стадии инкубационного периода появляется антиген HBsAg, при хронической форме не выявляется. Антитела к нему вырабатываются через 3–12 месяцев. На начальной стадии развития болезни наблюдаются антитела Anti-HBcor IgM, а при развернутой клинической картине – Anti-HBcor IgG, которые не исчезают впоследствии и свидетельствуют о перенесенной вирусной инфекции. Определение Anti-HBsAg необходимо для оценки иммунного ответа, течения болезни и предположения ее исхода. Маркер Anti-HBs на фоне отсутствия HBsAg говорит о выздоровлении, а если его нет и течение болезни тяжелое, врачи допускают вероятность гибели пациента. О заразности больного говорит маркер HBeAg.
С – маркеры Anti-HCV возникают спустя 4–6 месяцев, свидетельствуют об острой/хронической форме. Если они не обнаружены, это говорит об отсутствии вируса С, инкубационном периоде. Маркер острой фазы – иммуноглобулин IgM, а перенесенной инфекции – IgG.
Д – при коинфекции Anti-HEV выше, чем при суперинфекции (заражение HBsAg-позитивных пациентов), что помогает провести дифференциальную диагностику болезни. В острой стадии обнаруживается большое количество IgM.
Е – антигены обнаруживаются в инкубационном периоде, антитела Anti-HEV выявляются в продромальном (начальном) и сохраняются на всю жизнь (IgG) или на полгода (IgM).

Значимость имеют уровень лейкоцитов (снижается), скорость оседания эритроцитов (растет), альбумин (падает), особенно при выявлении гепатита А. После общего и биохимического анализов определение состава крови проводят через:

Иммунологический анализ, ИФА – необходим для обнаружения антигенов и антител, их качественных и количественных показателей. При хроническом гепатите наблюдаются только IgG и/или IgA, при остром добавляется IgM. Все 3 иммуноглобулина присутствуют при обострении хронической формы, а IgG одиночно говорит о поствакциональном или постинфекционном иммунитете.
Полимеразную цепную реакцию, ПЦР – обязательный и самый информативный метод диагностики, при котором выявляются частицы ДНК или РНК вирусных агентов, даже если их концентрация минимальна. С помощью ПЦР можно установить момент заражения (если диагностирован вирусный гепатит А), стадию болезни, эффективность проводимого лечения, вирусную активность.

Метод ПЦР может назначаться для проверки данных ИФА, поскольку его достоверность абсолютна, а у ИФА возможны ложноположительные или ложноотрицательные результаты при наличии хронических воспалительных заболеваний. Исключение составляет гепатит А, для которого преимущественно используют только иммуноферментный (иммунологический) анализ.

При повреждении тканей больного органа в результате вирусной активности в кровь выбрасывается большое количество ферментов из гепатоцитов (печеночные клетки). На фоне этого у пациента снижается уровень альбумина и общего белка, повышаются показатели:

АЛТ (АлАТ), АСТ (АсАТ) – выше нормы в 20–50 раз, имеют коэффициент АЛТ/АСТ ниже 0,5 единиц;
щелочной фосфатазы – говорит о застое желчи;
тимоловой пробы (повышение нормы наблюдается уже на ранней стадии вирусного гепатита);
ГГТ – повышается при всех печеночных заболеваниях, одиночно на гепатит не указывает.

Посредством биохимического анализа крови врач выявляет повышение фракций свободного и связанного билирубина: пигмента, который перестает выводиться поврежденными клетками печени с желчью, поэтому попадает в мочу. На фоне этого у пациента наблюдается и желтушность кожи. В норме уровень связанного билирубина составляет 0,1-0,3 мг/дл, а свободного – 0,2-0,7 мл/дг. У пациентов с вирусной злокачественной формой билирубин возрастает резко за 3–5 суток, соотношение свободного к связанному превышает 1 единицу.

В дополнение к серологическим обследованиям пациентам с гепатитом назначается ультразвуковая диагностика – она нужна для оценки происходящих в печени и соседних органах изменения (появление опухолей, камней), определения степени ее увеличения, состояния сосудов. Реже назначают магнитно-резонансную или компьютерную томографию. Дополнительно с помощью УЗИ выявляется оптимальная точка прокола для пункционной биопсии, которая помогает изучить структуру тканей печени при гепатите вирусного происхождения, является высокоинформативным методом диагностики.

источник

Диагностика острых и хронических гепатитов обязательно должна носить комплексный характер.

Прежде всего она направлена на определение возбудителя данного заболевания. Также врач обязательно должен оценить степень нарушения работы печени и выявить сопутствующие осложнения. Начальной стадией диагностики является изучения анамнеза и осмотр пациента. После этого специалист назначает другие методы диагностики вирусных гепатитов – лабораторные и инструментальные.

В процессе ПЦР-диагностики заболевания определяют маркеры острых и хронических гепатитов. К ним относят следующее:

Маркеры гепатита А. Анти-НАV IgM появляются в крови к окончанию инкубационного периода. В этот момент у человека возникают первые симптомы гепатита. Антитела присутствуют в сыворотке около полугода. Благодаря выявлению данных веществ методом ПЦР можно говорить о текущей или недавно возникшей инфекции.
Анти-НАV-total возникают в сыворотке позже. Они говорят о присутствии HAV-инфекции и последующем формировании иммунитета. Данный показатель, полученный в процессе исследований методом ПЦР, может использоваться для определения эффективности профилактики с помощью вакцин.
Маркеры гепатита В. В эту категорию входит НВsAg, который является поверхностным антигеном гепатита В и появляется в завершающей стадии инкубационного периода. Его не удается выявить в 10 % острых случаев заболевания и большинстве хронических.
Антитела анти-НВs возникают спустя 3-12 месяцев после начала развития патологии. Они присутствуют в организме примерно 5 лет. Ангиген НbcorA не удается определить в сыворотке крови. Его удается выявить лишь в гепатоцитах.
Анти-Нвcor IgM представляет собой антитела к ядерному антигену, которые характерны для завершения инкубационного периода и начала развития болезни. Определение данных веществ является значимым критерием при проведении ПЦР-диагностики.
Анти-Нвcor IgG характерны для парентеральных гепатитов во время развернутой клинической картины. Они сохраняются на всю жизнь и свидетельствуют о том, что человек перенес инфекцию. В завершение инкубационного периода можно обнаружить НвeAg. Он сохраняется в течение 10-12 недель и говорит о репликации парентеральных вирусов.
Анти-Нве представляют собой антитела к HbeAg и возникают во время развернутых проявлений. Данные вещества сохраняются на 5 лет после заболевания. При хронических парентеральных гепатитах их выявляют и по истечении указанного времени.

Помимо ПЦР-диагностики, очень важно оценить количество ферментов печени. Поражение тканей органа сопровождается попаданием в кровь ферментов, что влечет их увеличение в составе плазмы. В нормальном состоянии количество АСАТ составляет 5-35 Ед./л, а АЛАТ – 5-40 Ед./л.
Лабораторная диагностика вирусных гепатитов должна включать определение плазматической активности щелочной фосфатазы. В случае развития гепатита она увеличивается. В норме данный показатель составляет 30-115 Ед./л.
Немаловажное значение имеет оценка фракций билирубина – свободного и связанного. Его повышение обусловлено неспособностью клеток печени выводить из организма данный пигмент. В норме концентрация связанного билирубина составляет 0,1-0,3 мг/дл, а свободного – 0,2-0,7 мг/дл.

Наши постоянная читательница

Наша постоянная читательница справилась с ГЕПАТИТОМ С действенными медикаментами — Софосбувир и Даклатасвир. По отзывам пациентов — результат 97% — полное избавление от вируса. Мы решили посоветовать ДЕЙСТВЕННУЮ терапию Вам. Результат почти 100%. ДЕЙСТВЕННЫЙ МЕТОД.

Чтобы обследовать органы брюшной полости, обычно применяют ультразвуковое исследование. Это достаточно простой метод, который помогает визуализировать увеличение печени и других органов, а также оценить происходящие в них изменения. Также с помощью УЗИ оценивается состояние сосудов. Если же врач планирует сделать пункционную биопсию, данный метод поможет выбрать оптимальное место для прокола.
С помощью данного аппарата удается увидеть на мониторе определенные сечения внутренних органов. В результате можно визуализировать локальные изменения в них – камни, опухолевые образования и т.д.
Неправильные результаты можно получить исключительно в том случае, если работа органа нарушается на клеточном уровне. Вследствие этого весь орган поражен. К примеру, при изменении клеток печени удастся обнаружить нарушение оттенка тканей. Однако информацию относительно характера и тяжести болезни получить не удастся.
В такой ситуации проводится пункционная биопсия. Это наиболее точная методика, которая позволяет получить максимальное количество информации. С помощью данного способа оценивается структура тканей печени, что позволяет наиболее точно диагностировать гепатит.

Гепатит у беременных – очень опасная патология, поскольку она практически всегда провоцирует нарушения в развитии плода. При поражении вирусом типа В практически всегда заражается и ребенок. Наличие гепатита С у беременных провоцирует несколько иную картину. Тем не менее, нельзя сказать, развитие данного заболевания у беременных спровоцирует инфицирование малыша.
Чтобы провести правильную диагностику, прежде всего нужно сдать анализ крови и провести ПЦР-диагностику. При гепатите В у беременных имеет значение наличие HBsAg и НВеАg. Если они присутствуют, риск заражения ребенка повышается. В такой ситуации также уменьшается эффективность вакцины для беременных.
Если же будущая мама заболевает гепатитом С, инфицирование ребенка происходишь лишь в 5 % случаев. При этом данный вид заболевания передается от беременных к плоду лишь при условии активного протекания недуга. В большинстве случае ребенок заражается от матери при родах.
При выявлении вирусного гепатита у беременных обязательно требуется стационарная терапия. Если у женщин развивается цирроз печени, нужно принимать все меры, чтобы беременность и вовсе не наступила. Дополнительные нагрузки на организм, которые возникают у беременных, спровоцируют сильное обострение болезни.
При хронизации процесса беременность не оказывает влияния на клиническую картину патологии. Иногда у беременных женщин воспаления в печени и вовсе прекращаются. Однако нужно быть готовой к тому, что после родов гепатит резко обострится. Потому так важно держать данный процесс под контролем.

Дифференциальная диагностика проводится для того, чтобы отличить вирусный гепатит от острых поражений печени, связанных с воздействием химических веществ. Особенно важно провести диф диагностику алкогольной формы заболевания. На начальном этапе развития этого недуга часто ставят ошибочный диагноз, принимая его за вирусный гепатит. Это происходит в 50 % случаев.
Чтобы провести диф диагностику этих процессов, нужно учитывать, что алкогольный гепатит развивается исключительно на фоне постоянного употребления большого количества спиртного. Важными критериями диф диагностики в данном случае является следующее:

источник

Диагностика вирусных гепатитов важный этап в жизни в любого человека, ведь зачастую течение заболевания может долго не проявляться. А в это время наносить сильный вред организму человека. Помимо этого инфицированный человек, не зная о наличии болезни может долгое время инфицировать окружающих.

Раннее исследование вируса С необходимо для того, чтобы предотвратить серьезные осложнения работы печени. Так как первые симптомы этого заболевания практически отсутствуют, а некоторые штампы и вовсе долгое время никак себя не проявляют.

Своевременное обнаружение и лечение помогают справиться с недугом на начальной стадии без инфицирования окружающих людей. Особенно раннее обследование необходимо женщинам во время вынашивания ребенка, так как есть вероятность инфицировать малыша.

Заболевание делится на такие формы, как: инфекционный, лучевой, токсический и аутоиммунный.

Токсический тип развивается вследствие воздействия алкогольных напитков, лекарств, наркотических и химических веществ. Это своего рода реакция организма на сильную и частую интоксикацию организма.

Лучевая форма болезни весьма редкая и является следствием продолжительного или частого ионизирующего облучения пациента. А вот аутоиммунный развивается на фоне атаки иммунитета организма собственного органа в силу различных сбоев.

Самым распространенным же считается именно инфекционный тип.

У каждого из маркеров есть стадии инкубационного периода и период обострения при которых симптомы проявления разные. Но в каждой форме при инкубационном периоде признаки отсутствуют. Далее они у всех характерны:

расстройство ЖКТ,
повышение температуры тела,
усталость и боль суставов,
увеличение печени и боль при ее пальпации,

При хронической инфекции наблюдается:

изменение цвета мочи и кала,
появляется желтушность глаз и кожи,
может наблюдаться сыпь кожных покровов (при форме В),
боль в области правого подреберья становится постоянной,
желтушность ярко выраженная,
появляется отвращение к пище,
нарушается сон,
появляются носовые кровотечения (при форме С).

Также стоит отметить, что симптомы у всех могут быть различны, это зависит от иммунитета больного и сопротивляемости организма.

При маркере А первые симптомы проявляются только по окончанию инкубационного периода болезни. Результаты пцр анализа помогают получить представление о составе крови пациента и выявление типа антигенов.

На основе этих данных удается понять, когда примерно было инфицирование и сопровождается ли инфекцией. После окончания инкубационного периода могут проявляться такие клинические признаки болезни:

расстройство ЖКТ,
слабость, вялость,
повышение температуры тела, озноб, повышенная потливость,
желтушность глаз, тела или языка.

Очень часто желтушность может и не наблюдаться, а остальные симптомы подходят и под другие заболевания. Так что больной может и не обратиться к врачу.

По сравнению с маркером А, тип В более опасен, так как может спровоцировать печеночный рак или цирроз. Данный штамп куда более агрессивен, но не передается через быт или при контакте с носителем. Клинические признаки:

боли в правой части тела на уровне ребер,
нарушение пищеварения (тошнота, рвота),
вялость, апатия,
боль в области суставов,
желтуха ,
моча темнеет, а кал светлеет.

Маркер С отличается тем, что чаще мутирует и не дает возможности для создания вакцины. Также от последствий этого типа чаще всего настает смерть.

Штамп имеет все те же симптомы, что и другие виды, но к ним добавляется увеличение размеров селезенки и печени. Заразиться можно через медицинские не стерилизованные инструменты, кровь, плазму.

Методы диагностики вирусных гепатитов делятся на инструментальные, лабораторные исследования и дифференциально.

К инструментальным относится:

Лабораторный метод включает:

Биохимия состава крови. Дает данные о воспалении органа и активности гепатита.
Куагулограмма. С помощью этого метода оценивается показатель свертываемости крови.
Экспресс тест. Определяет наличие в крови появление антител.
Биопсия печени. С помощью биопсии можно получить данные о степени пораженности печени.
ПЦР. Метод помогает определить код инфекции.
ИФА. С помощью этого исследования определяется возможное инфицирование и наличие антител для борьбы с ним в крови.
исследование на билирубин. При сильном повреждении количество билирубина возрастает, поэтому результат дает краткую клиническую картину без забора образца органа.
Проба на белки.

Алгоритм на подтверждение гепатитов состоит в следующем:

сдача общего анализа крови и биохимии,
ПЦР,
исследование на антитела и антигены.

По результатам данных исследований назначается дальнейшее исследование и лечение.

Лабораторная диагностика гепатитов дает возможность получить более полную картину о заболевании: его виду, степени прогресирования, реакции организма и тем самым помогает в назначении правильного лечения. В то время как инструментальное обследование эффективно только, когда ранняя стадия болезни.

При подозрении на тип А назначаются:

анализ на антиген,
проба на белки и антитела,
на определение кода вируса с помощью анализа ПЦР.

на наличие патогена,
на антитела,
ПЦР,
на интерлейкин-28 Бета.

Практически в любой форме заболевания для сдачи требуются одни и те же анализы.

Лабораторная диагностика и обследование также включает инструментальное исследование. Оно проводится для определения точных размеров печени, а также для динамикой результативности лечения.

Путем фиброэластографии можно следить за прогрессированием патогена, а также за изменениями в структуре и тканях печени без хирургического вмешательства. Фиброэластография проводится с помощью специального аппарата фиброскана.

Диагностика вирусных гепатитов с помощью дифференциального метода необходима для определения точного кода вируса и особенностей антигенов. Также данный метод помогает исключить других возбудителей (токсоплазма например), желтуху, пищевую интоксикацию, кишечные вирусы, желчекаменную болезнь и др. Она осуществляется с помощью различных лабораторных анализов.

При сдаче ПЦР результаты расшифровываются таким образом:

при содержании рибонуклеиновой кислоты менее 60 МЕ/мл — результат отрицательный,
при содержании рибонуклеиновой кислоты от 102 до 108 МЕ/мл — положительный,
при содержании рибонуклеиновой кислоты более 108 МЕ/мл — положительный с подозрением на тип вируса С.

Для подтверждения диагноза на наличие гепатита С проводится ВГС диагностика. На основании чего ставится диагноз. После получения ПЦР результатов и подтверждения наличия вируса специалист назначает дополнительные анализы для составления полной клинической картины.

Амбалов Юрий Михайлович — диагностика и принципы лечения острых вирусных гепатитов.

источник

В предыдущей статье мы кратко рассказали о распространённых вирусах А, В и С-гепатита и важности их ранней диагностики. Вирусы, вызывающие воспалительные заболевания печени, несмотря на то, что орган-мишень у них один, отличаются по структуре и по клиническим проявлениям. Поэтому диагностика каждого гепатита (С, B, G и D др.) имеет характерные нюансы, связанные с их особыми свойствами.

Особые свойства гепатита В:

Генетический материал – основная часть вируса – представлен двойной цепочкой ДНК.
По-другому его называют «сывороточный гепатит», потому что для заражения достаточно попадания в кровь крайне малого количества вируса. То есть объём зараженной крови для передачи вируса может быть совсем небольшим.
Высокая опасность заражения стала одной из причин, по которой прививка от гепатита В вошла в календарь иммунизации и проводится детям, медицинским работникам и рекомендуется всем остальным.
Особенно часто переходит в хроническую форму у детей.
Является вирусом-помощником для существования гепатита D. Без него дельта-гепатит не жизнеспособен.
Самая опасная – молниеносная форма болезни, которая приводит к быстрой массовой гибели печеночных клеток и развитию комы, в большинстве случаев развивается из-за комбинированной инфекции гепатитом B и D.

Особые свойства гепатита С:

Его еще называют вирус «ни А ни В» гепатита. В отличие от возбудителя типа В, этот содержит весь свой генетический материал в одной цепочке РНК.
Антигены вируса находятся в крови в очень низкой концентрации, что создает серьезные трудности в его обнаружении.
Иногда называют «посттрансфузионным гепатитом», потому что заражение нередко происходило при переливании крови.
Считается наиболее опасной для здоровья формой вирусного гепатита, способствующей развитию онкологии печени и фиброзных изменений в органе.
Вирус гепатита G в комбинации с вирусом гепатита С может стать причиной цирроза печени. Сочетание двух этих вирусов ухудшает прогноз, несмотря на проводимое лечение.
Редко сопровождается желтухой и подъёмом температуры, в отличие от гепатита В. Поэтому острая фаза гепатита С способна маскироваться под пищевое отравление, грипп и т.д.

Особые свойства гепатитов D и G:

Вирус дельта-гепатита (D) способен к размножению и активной жизнедеятельности только если уже имеется заражение гепатитом В. Вместе они формируют более тяжелые формы поражения органа (в том числе и молниеносную), создавая серьезные трудности в лечении и усиливая разрушение клеток печени.
Вирус типа G считается самостоятельным возбудителем гепатита. Проявления могут быть схожи с заражением С-вирусом, но протекает заболевание легче. Способен проходить в острой и хронической форме. Очень часто обнаруживается в сочетании с РНК гепатита С, что ухудшает прогноз заболевания.
Заражение гепатитами D и G особенно вероятно для инъекционных наркоманов, любителей тату и пирсинга на дому, а также при беспорядочных сексуальных связях.
Раннее выявление этих двух видов вирусного гепатита имеет огромное значение для прогнозирования дальнейшего развития болезни и подбора схемы лечения. Для этого используется самый точный метод идентификации вирусных частиц – ПЦР.

Точно поставить диагноз вирусного гепатита и определить его тип возможно только с помощью лабораторной диагностики.

Вирусное поражение печени можно заподозрить при:

Гриппоподобных симптомах (слабость, повышение температуры, боли в мышцах). Иногда они бывают единственными проявлениями острой фазы болезни, особенно при инфицировании гепатитом С или G.
Симптомах, схожих с ревматоидными заболеваниями – ломоте и боли в суставах.
Болях в подреберье справа, желтухе, потемнении мочи и обесцвечивании кала.
Периодически беспокоящей тошноте, рвоте, беспричинной слабости, которая усиливается к вечеру.

Поэтому рекомендуется провести анализ на гепатиты В и С, D и G, если беспокоят подобные симптомы и нет других известных причин их появления.

Универсальный биологический материал для выявления вирусных гепатитов – это венозная кровь.

Сейчас это «золотой стандарт» для диагностики вирусных гепатитов B, C, D, G. Он нацелен на обнаружение ДНК или РНК возбудителя в крови. Метод обладает высокой точностью и позволяет не только обнаружить факт инфицирования, но и оценить количество вирусных частиц в крови, а также определить генотип вируса (это особенно актуально для гепатита С). Такие уточнения бесценны при выборе правильной схемы лечения.

Направлен на обнаружение антител к вирусу, которые вырабатывает иммунная система, а также на выявление антигенов (частей самого вируса) в биоматериале. Метод позволяет оценить титр антител и антигенов (концентрацию этих частиц в плазме крови). По этим данным тоже можно судить об активности вируса и динамике изменений. Но методика имеет больший процент ошибок.

Анализы на гепатиты могут выполнять разные задачи:

Качественный анализ направлен на установление факта наличия материала вируса в крови.
Количественный анализ на гепатиты С и В определяет концентрацию вируса в крови, что имеет значение для выбора и коррекции терапии.

Поскольку вирусное поражение печени имеет серьёзные последствия и требует приёма определённых препаратов, постановка диагноза должна быть точной. Поэтому после первого положительного результата теста на гепатит необходим дополнительный подтверждающий анализ.

Первый анализ на гепатиты B, С, D, G может быть проведён с помощью иммунологического метода, который направлен на обнаружение антител вируса в крови. Если результат положителен, высокоточный анализ-ПЦР помогает подтвердить или опровергнуть предполагаемый диагноз. Генетический метод ПЦР позволяет оценить количество вирусных частиц в крови (показатели «вирусной нагрузки»). Эти данные используются при выборе лечения и контроле за его результатами.

При отрицательном результате:

Действуйте в соответствии с рекомендациями лечащего доктора. Если остаются подозрения на вирусное поражение печени (симптомы, результаты других методов обследования), можно будет повторить анализ или выполнить диагностику методом ПЦР вместо определения антител в крови.
Обследоваться на гепатиты также нужно, если имеются факторы риска заражения – уколы и травмы нестерильными острыми предметами, которые не являются объектами только Вашего использования (иголки, ножницы и др.), переливания крови, нанесение татуировок и пирсинг, регулярное посещение процедуры маникюра и педикюра в салонах и у мастеров на дому и т.д.

Особенности диагностики гепатитов С и В:

Очень малое количество антигена гепатита С в крови, по сравнению с вирусом типа В. Поэтому ПЦР-диагностика предпочтительнее, для точной постановки диагноза С-гепатита и наблюдения за динамикой.
Хронические гепатиты В и С могут длительное время проходить с минимальными клиническими проявления или протекать абсолютно бессимптомно до наступления масштабных необратимых изменений в печени. Поэтому часто вирусные поражения печени обнаруживают случайно – при профилактических осмотрах, обследовании перед госпитализацией по другим поводам и т.д.
Если есть сомнения по поводу диагноза, анализ требует повторения, так как в редких случаях возможны ложноотрицательные результаты.
После первого положительного анализа крови на гепатит С и В обязательно проводится повторный тест для подтверждения или исключения диагноза.
Следует вспомнить об этих особенностях, если Вас беспокоят проблемы со здоровьем, но Вы откладываете визит к врачу, считая их незначительными или временными.

Проходить обследование при подозрении на болезни печени необходимо под руководством специалиста. Доктор, оценив жалобы и симптомы, предоставит Вам перечень тестов, которые необходимо пройти. Окончательный диагноз формулируется только на основании совокупности данных осмотра, лабораторной и инструментальной диагностики:

Определение факта наличия вируса или антител к нему, а также оценка «вирусной нагрузки», выявление особенностей вируса (иммунологический метод и метод ПЦР).
Определение биохимических показателей состояния печени. Оцениваются печёночные ферменты АЛТ и АСТ, белок, билирубин, щелочная фосфатаза и т.д. Изменения этих показателей дают представление о признаках разрушения клеток печени и степени нарушения её нормальных функций.
Визуализация состояния печёночной ткани. Обычно проводится с помощью УЗИ, МРТ, эластография (аппаратом «Фиброскан»). Позволяет видеть площадь поражения органа, признаки фиброзных изменений, появление новообразований. Для более подробной оценки состояния органа проводят биопсию печени
Развёрнутый общий анализ крови, оценка свёртываемости (коагулограмма). Изменения этих показателей также могут дать врачу важную информацию о состоянии печени, поскольку данный орган принимает участие в синтезе компонентов системы свёртывания крови.
Дополнительно: анализ на гормоны, анализы на аутоиммунные заболевания. В процессе планирования и проведения терапии доктору может понадобиться оценить функцию вашей щитовидной железы и другие показатели эндокринных функций, а также выявить наличие ревматоидного фактора.

Лабораторная диагностика абсолютно незаменима при вирусных гепатитах (С, В, D, G). В Lab4U Вы можете пройти полный перечень необходимых анализов по доступным и выгодным ценам:

источник

А. Для обнаружения вируса — заражение животных (обезьяны шимпанзе, мармозеты; электронная и иммуноэлектронная микроскопия.

Б. Для обнаружения антител к вирусу (или к его антигенам) иммунологические реакции: РСК, гемагглютинация иммунного прилипания, иммунофлуоресценция, иммуноферментный и радиоиммунный методы, реакция пассивной гемагглютинации и др.способы.

Наиболее специфичным методом диагностики гепатита А является использование иммуноферментного метода «захвата» антител класса IgМ. Суть метода. На стенках полистироловых луночек вначале адсорбируют антитела против IgM(анти-IgM, затем добавляют исследуемую сыворотку, в которой определяют наличие антител класса IgМ к вирусу гепатита А. Если они имеются, то образуется комплекс IgM- анти IgM. Далее добавляют специфический антиген (вирус гепатита А)-который связывается с противовирусными антителами. Для обнаружения образовавшегося комплекса добавляют противовирусные антитела; меченные ферментом (пероксидазой). После отмывания луночек в них добавляют субстрат для фермента (ортофенилендиамин) и определяют интенсивность образующейся окраски. Схема.

Методика постановки реакции обратной пассивной гемагглютинации для определения поверхностного антигена вируса гепатита В

Определение поверхностного антигена вируса гепатита В (HB_SAg) в сыворотке больного или носителя осуществляется с помощью анти-тельного эритроцитарного диагностикума, который представляет собой лиофилизированные формалинизированные куриные эритроциты с адсорбированными: на них антителами к НВ_sАg.

К содержимому ампулы с сенсибилизированными эритроцитами добавляют 5 мл 0,9%-ного раствора натрия хлорида (ФР). Исследуемую сыворотку разводят 1:8. Для этого в лунку планшета вносят при помощи пипеточного дозатора 200 мкл ФР, добавляют 25 мкл исследуемой сыворотки крови, перемешивают и 25 мкл приготовленного разведения переносят в пустую луночку планшета. В качестве контрольных образцов используют сыворотку заведомо положительную в разведении 1:8 и ФР. В лунки, содержащие по 25 мкл исследуемых проб, добавляют 25-33 мкл 1%-ной взвеси сенсибилизированных эритроцитов. Реагенты перемешивают постукиванием о край планшета в течение 30 ,сек и выдерживают 20-30 мин при комнатной температуре. Результаты РОПГА считают отрицательными при отсутствии гемагглютинации с исследуемой сывороткой и ФР, но при наличии ее в заведомо положительной пробе. Все сыворотки, агглютинирующие сенсибилизированные эритроциты, исследуют в подтверждающем тесте. Суть его состоит в том, что в лунках планшета готовят два ряда двукратных разведений исследуемой сыворотки крови от 1:2 до 1:256 в объемах по 25 мкл. В контрольный ряд добавляют несенсибилизированные эритроциты. Планшеты с разведениями выдерживают не менее 30 минут при комнатной температуре, а затем добавляют в оба ряда по 25-33 мкл сенсибилизированных эритроцитов. Результаты реакции считают положительными, если в опытном ряду наблюдается по крайней мере 4-х кратное снижение титра исследуемой сыворотки.

Известны следующие формы вирусных гепатитов:

1.Гепатит А (инфекционный гепатит).

2.Гепатит В (сывороточный гепатит).

3.Гепатит-дельта — эпидемиологически сходен с гепатитом В, но вызывается дельта-вирусом.

4.Гепатит С (гепатит ни А ни В) — заражение происходит главным образом парентеральным путем, но возбудитель отличается от вирусов А и В.

5.Гепатит Е (гепатит ни А ни В) — заражение происходит, как при гепатите А, главным образом фекально-оралъным путем, но возбудитель отличается от вирусов А и В.

Вирус гепатита А — изометрический РНК-содержащий вирус. Геном представлен однонитчатой позитивной РНК с м.м. 2,6 млн. Диаметр вириона 27 нм, суперкапсида нет, тип симметрии кубический, икосаэдр. Капсид имеет 32 капсомера Оболочка образована 4 полипептидами.

Возбудитель гепатита В — ДНК-содержащий сферический вирус. Диаметр вириона 42 ны. Геном представлен двунитчатой кольцевидной ДНК с м.м. 1,6 млн; одна нить имеет брешь. Вирион содержит обратную транскриптазу, принимающую участие в репликации. С ее участием происходит синтез на прегеномной РНК вначале минус, а затем плюс-цепей ДНК, в составе генома только четыре гена: S,С,Р и X. Оболочка вириона состоит из трех белков (главного, большого и среднего). Схему строения вириона см. на стр.124.

В составе вириона имеется три основных антигена: НВSАg-поверхностный антиген; 2)НВсАg — сердцевинный и 3) антиген НВeАg.

Возбудитель дельта-гепатита имеет сферическую форму с диаметром З5-37 нм.

Геном представлен РНК с м.м. 500000. Внешняя оболочка вириона состоит из поверхностного антигена вируса гепатита В (НВ_SАg), а при ее разрушении выделяется компонент со специфической антигенностью (дельта-антиген).

Б. Культивирование вирусов гепатитов удается с большим трудом и требует соблюдения ряда условий. В нашей стране разработан метод культивирования вируса гепатита А в культуре клеток 4647 (перевиваемая линия клеток почек зеленых мартышек).

В. Для профилактики гепатита А создаются различные вакцины:

1.Цельновирионные из ослабленных или инактивированных (формоловые) вирусов вакцины.

3.Вакцины химические (из химических аналогов антигенных детерминант вируса).

4.Генно-инженерные вакцины (гены вируса гепатита А рекомбинированы в геном вируса осповакцины).

Одним из важных условий борьбы с гепатитом В в глобальном плане, по мнению ВОЗ, является массовая иммунизация новорожденных и детей раннего возраста. Полный курс иммунизации против гепатита В состоит из трех прививок: первая доза вводится сразу после рождения, вторая через 1-2 месяца и третья — до конца первого года жизни ребенка.

Для вакцинации против гепатита В применяется два типа высоко эффективных вакцин: плазменная вакцина (плазма хронических носителей вируса содержит огромное количество поверхностного антигена вируса гепатита В, он извлекается и надежно обезвреживается) и реком-бинантная генно-инженерная вакцина, которая готовится на основе рекомбинантного клона дрожжей, несущего гены НВsАg.

Тема: МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА СИНДРОМА ПРИОБРЕТЕННОГО ИММУНОДЕФИЦИТА ЧЕЛОВЕКА (СПИДа)

1.Особенности структурной организации вируса и его генома.

2.Механизм взаимодействия вируса СПИДа с клеткой, особенности патогенеза инфекции.

3.Вирусологическая диагностика ВИЧ-инфекции.

4.Серологическая диагностика ВИЧ-инфекции:

а)определение противовирусных антител у больных и носителей с помощью коммерческих тест- систем; демонстрация;

б)метод иммуноблотинга и его значение.

5.Знакомство с иммунопрепаратами, применяемыми для диагностики, профилактики и лечения вирусных заболеваний. Обязательные прививки против кори, полиомиелита и гепатита В.

§ I. Вирус СПИДа (ВИЧ) имеет шаровидную форму, его диаметр 100 нм. Оболочка вируса имеет форму многогранника, составленного из 12 пятиугольников и 20 шестиугольников. В центре и углах каждого шестиугольника расположены молекулы gp120 (всего 80 молекул на вирион), оболочка содержит двойной слой липидов, над которыми выступают молекулы gp120, а через мембрану проходит трансмембранный белок gр41.

Сердцевина вириона имеет форму снаряда, составляющие его молекулы из трех-четырех белков образуют поверхность в виде дельта-икосаэдра.

Белок gp120 является рецептором вируса, взаимодействующим с рецептором СД4 чувствительных к нему клеток (Т- лимфоциты, макрофаги, моноциты).

В сердцевине вириона содержится его геном. Он представлен двумя идентичными молекулами РНК (у ВИЧ-1 из 9213 нуклеотидов), двумя молекулами затравочной РНК, двумя молекулами полимеразы, обладающей пятью активностями (протеазной, обратной транскриптазы, РНК-азы, ДНК-зависимой ДНК-полимеразы и эндонуклеазы, или интегразы). РНК связана с нуклеокапсидным белком.

Особенности организации генома

ДНК провируса (ВИЧ-1) состоит из 9283 нуклеотидных пар (н.п.) и фланкирована LTR из 638 н.п.

В составе генома (ДНК-провируса) девять генов, которые контролируют синтез 8 структурных и 6 регуляторных белков:

gag — p17, р30, р15 — эти белки образуют сердцевину вириона;

роl — р12 (протеаза). р51 — p66 (обратная транскриптаза , РНКаза Н, ДНК-зависимая ДНК-полимераза), р32 (интеграза, или эндонуклеаза);

env- белки оболочки (gp120, gp41).

Указанные восемь белков входят в состав вириона.

Регуляторные гены и белки

tat — pI4 (TAT); vif — р23 (VIF);

rev — pI2 (REV); vpu — pI6 (VPU);

Таким образом, девять генов вируса кодируют синтез 14 белков. Это связано с тем, что некоторые гены имеют экзонно-интронную структуру и имеют несколько рамок считывания.

Схематическое расположение генов вируса можно изобразить следующим образом:

Сложность работы генома вируса связана с наличием в LTR специальных регуляторных элементов:

г)элемент позитивной регуляции (TAR)

д)элемент негативной регуляции (NRE)

Кроме того, обнаружены элементы, участвующие в регуляции сплайсинга РНК (CRS — стимулирует сплайсинг) и CAR (ингибирует сплайсинг при наличии белка REV ), и элемент Psi , который контролирует упаковку геномной РНК в капсид. В LTR имеются элементы, которые определяют участок прикрепления затравочной РНК (тРНК л из ) для синтеза минус-цепи ДНК и участок, служащий затравкой для синтеза плюс-цепи ДНК.

В регуляции вируса особенно важную роль играют белки ТАТ (позитивный контроль размножения вируса через участок TAR), и NEF и VPU-негативный контроль репродукции вируса (через участок NRE) и белок REV (позитивно-негативный контроль через участок CAR). Белок REV контролирует экспрессию генов gag pol env и осуществляет негативную регуляцию сплайсинга.

Таким образом, размножение вируса СПИДа находится под сложным тройным контролем — позитивным, негативным и позитивно-негативным .

§ 2. Взаимодействие вируса с клеткой протекает по следующей схеме: — адсорбция вируса — окаймленная ямка — окаймленный пузырек-лизосома — слияние мембран — выход нуклеокапсида в цитоплазму -синтез обратной транскриптазой минус-цепи ДНК — разрушение РНК-азой Н вирионной РНК — синтез ДНК-полимеразой плюс-цепи ДНК-образование LTR-проникновение ДНК-провируса в ядро (в хромосому с помощью интегразы). Активация вируса-синтез полноразмерных и субгеномных РНК клеточной РНК-полимеразой — протеолиз и процессинг env- белков -синтез других белков — ассоциация двух молекул геномной РНК с кап-сидными белками — включение двух молекул РНК (а также двух молекул затравочной тРНК и pol- белков) в капсид — мембрана клетки — липидная оболочка — белки gp4I и gpI20 — отпочкование вирионов — образование симпластов из Т-лимфоцитов — их гибель — иммунодефицит — нарушение других систем — присоединение оппортунистических инфекций.

Заражение вирусом — начало вирусоносительства. Активация Т-лимфоцита (и, соответственно, вируса) — начало болезни.

§ 3. Вирусологический диагноз ВИЧ-инфекции трудно осуществим, так как животные к вирусу не чувствительны, а вирус размножается только в одном клоне лимфоцитов (Н9), которых лаборатории не имеют. Наличие вируса или его антигенов можно обнаружить с помощью некоторых иммунологических реакций, но для этого требуются специфические антитела, получение которых связано с большими трудностями. В принципе, возможно использование также метода РНК-зонда.

4. Основным способом диагностики ВИЧ-инфекции и особенно выявления вирусоносительства является использование метода иммуноферментного анализа. Имеющиеся коммерческие тест-системы просты в употреблении, содержат сенсибилизированные антигеном лунки в планшетах, все необходимые ингредиенты и контроли. В силу своей универсальности этот метод получил повсеместное применение. Демонстрация отечественных тест-систем для иммуноферментного определения антител к вирусу СПИДа. Постановка опыта (методика опыта описана в занятии 11).

§ 5. Недостатком иммуноферментного метода является то, что нередко он дает ложнопозитивные результаты. Поэтому в случае сомнения такая сыворотка подвергается контрольному испытанию более чувствительными специфичными методами, например с помощью метода иммуноблотинга или иммунопреципитации.

Метод иммуноблотинга представляет собой тестирование твердо-фазным иммунологическим анализом электрофоретически разделенных белков. Реакция ставится в следующей последовательности: электрофоретическое разделение анализируемого материала на индивидуальные белки или полипептиды в геле; получение реплики путем переноса исследуемых белков с геля на твердофазный матрикс; блокирование незанятых центров связывания белков матрикса; инкубирование со специфической тест-сывороткой; отмывка от избытка сыворотки; инкубирование с меченым иммунореагентом на антитела специфической сыворотки; отмывка от избытка меченого иммунореагента; выявление тестируемых белков или полипептидов с помощью метки иммунореагента.

Для разделения анализируемого материала используют чаще всего различные варианты электрофореза в полиакриламидном геле (ПААГ).

После электрофоретического разделения белков их иммобилизуют на твердой фазе (матриксе), в качестве которой в основном применяют нитроцеллюлозные мембраны (НЦМ). На ПААГ помещают НЦМ и проводят электрофоретический перенос в перпендикулярном к гелю направлении.

На полученной нитроцеллюлозной реплике блокируют активные центры связывания во избежание неспецифической адсорбции реагентов. С этой целью НЦМ инкубируют с раствором бычьего сывороточного альбумина в концентрации 2-5% в течение 1-2 часов.

После блокирования активных мест связывания НЦМ инкубируют с эмпирически подобранным разведением специфической сыворотки (т.е. заведомо положительной сывороткой), причем время инкубирования изменяется в широком диапазоне в зависимости от авидности компонентов. Обычно инкубирование в течение двух часов при 37° или в течение ночи при 4° дает хорошие результаты. НЦМ несколько раз отмывают блокирующим раствором от неспецифически адсорбированной сыворотки и тестируют специфические антитела одним из методов твердофазного иммунного анализа, чаще всего используют ИФМ или РИМ. В том и другом случае НЦМ после обработки специфической сывороткой инкубируют с меченными ферментом антивидовыми антителами, в качестве метки используют пероксидазу хрена (ИФМ) либо радиоактивный йод (РИМ).

После отмывки физиологическим буфером избытка меченых антител на заключительном этапе проведения иммуноблотинга выявляют тестируемые антитела по ферментативной реакции с соответствующим субстратом или авторадиографическим методом.

Контрольные вопросы по вирусологии

Что собой представляют вирусы, являются ли они живыми существами или неживыми структурами?

Каким образом происходит проникновение вируса в клетку?

Какие вакцины применяют для профилактики гриппа? Чем отличаются вирусы от всех прочих живых существ?

Рис.1 СХЕМА СТРОЕНИЯ ВИРИОНА ВИРУСА СПИДа

Каким способом происходит заражение вирусом гепатита В? Какие формы вирусных гепатитов Вы знаете?

С какой целью производится фаготипирование бактерий, например, стафилококков?

Какие методы культивирования вирусов Вы знаете и какие методы их типирования применяются?

Что собой, представляют аденовирусы и какие наиболее характерные признаки проявления аденовирусной инфекции?

Какие вирусы являются возбудителями острых респираторных заболеваний (ОРЗ)?

Каким образом происходит заражение человека вирусом иммунодефицита?

По каким признакам можно судить о размножении вирусов в культуре клеток?

Какие клетки организма поражает вирус иммунодефицита и какой рецептор имеют эти клетки?

В чем заключается сущность иммуноферментного метода (ИФМ) диагностики инфекционных заболевании?

Сколько типов вирусов гепатита Вы знаете?

Какие серологические реакции применяются для диагностики гриппа?

Какие серологические реакции можно использовать для диагностики вирусных инфекций?

Какие вирусы вызывают острые кишечные заболевания (ОКЗ)?

Из каких основных этапов складывается процесс взаимодействия вируса с клеткой?

Какие типы вирусных геномов Вы знаете?

Чем характеризуются арбовирусы? Какие типы флавивирусов вызывает клещевой весенне-летний энцефалит и омскую геморрагическую лихорадку?

Каковы методы микробиологической диагностики клещевого энцефалита?

Из каких структурных компонентов состоят вирусы? Что такое капсид? Нуклеокапсид? Какие типы их симметрии Вы знаете?

Изменение каких наружных белков вируса гриппа приводит к появлению пандемических вариантов его и почему?

Как устроен вирус гриппа? Каковы особенности его генома?

Какая вакцина применяется в нашей стране для создания активного коллективного иммунитета против полиомиелита?

В каком возрасте делают прививки против полиомиелита?

Каким образом можно выделить от больного гриппом возбудителя и установить его серотип?

Как устроен вирус полиомиелита и каковы способы заражения этим возбудителем?

Как устроен вирус иммунодефицита человека?

Сколько генов имеет вирус иммунодефицита и какие белки они контролируют?

Какие регуляторные элементы содержатся в длинных концевых повторах (LTR) генома вируса иммунодефицита?

Каков механизм развития иммунодефицита человека в результате заражения его возбудителем?

Какие методы применяются для диагностики вирусного гепатита А?

Какая иммунологическая реакция применяется для обнаружения поверхностного антигена (HBsAg) вируса гепатита В у больных и вирусоносителей?

Какие вакцины используются для создания активного коллективного иммунитета против гепатита В?

Что собой представляет возбудитель дельта-гепатита?

Чем характеризуется возбудитель гепатит А?

Как устроен вирус — возбудитель гепатита В? Какую роль играет содержащаяся в вирионе обратная транскриптаза?

Каковы особенности размножения ретровирусов, почему они получили такое название?

Какие механизмы лежат в основе противовирусного иммунитета?

Как распознают Т-киллеры клетки, инфицированные вирусом?

Какую роль играют в патологии человека вирусы Коксаки и ЕСНО?

Каковы методы диагностики заболеваний, вызываемых энтеровирусами?

Почему для диагностики вирусного гепатита А наиболее приемлемой является методика «захвата» антител, относящихся к иммуноглобулинам класса IgM?

Какие Т-лимфоциты обеспечивают защиту организма от вирусов?

С помощью какой серологической реакции можно определить наличие вируса иммунодефицита в организме человека и в чем сущность этой реакции?

Что такое иммуноблотинг и для какой цели он применяется?

Почему лица, пораженные вирусом иммунодефицита, становятся легко восприимчивыми к различным, даже слабо патогенным, микроорганизмам, иначе говоря,почему у них часто развиваются оппортунистические инфекции?

Какие типы симметрии известны у вирусов?

Как проникает в организм вирус гриппа и из каких основных этапов складывается процесс его внутриклеточного размножения?

Каково значение гемагглютининов вируса гриппа?

Каков механизм противовирусного действия интерферона? Как происходит заражение гепатитом В?

Какие клетки поражает вирус иммунодефицита человека и как он распознает их, т.е. какие рецепторы содержат эти клетки для вируса?

Что такое лизогения и лизогенная конверсия и какими фагами она вызывается — вирулентными или умеренными?

Каковы механизмы персистирования вирусов в организме человека?

Каким образом бактериофаг может изменить генетические свойства бактерий?

Что такое первично-трипсинизированные культуры клеток и перевиваемые культуры клеток?

Каким образом РНК-содержащие вирусы могут интегрировать в хромосому клетки?

Каким образом онкогенные вирусы вызывают трансформацию нормальных клеток в злокачественные? Что такое протоонкоген и онкоген?

Почему вирусы являются облигатными паразитами?

Как устроен вирус дельта-гепатита? Какой нуклеиновой кислотой представлен его геном?

Каков механизм реакции торможения гемагглютинации?

Из каких основных этапов складывается процесс взаимодействия вируса СПИДа с клеткой?

Какие типы антигенной изменчивости вируса, гриппа Вы знаете и каково их значение в эпидемиологии этой болезни?

Каков механизм формирования вириона гриппа в клетке?

Как осуществляется специфическая профилактика бешенства и какие препараты применяются для этой цели и в каких случаях?

Как осуществляется микробиологическая диагностика бешенства?

Как устроены аденовирусы, чем представлен их геном, какой тип симметрии имеет вирион и сколько у него капсомеров?

Каковы особенности репликации вирусов, у которых геном представлен однонитчатой ДНК?

о Каковы особенности репликации вирусов, у которых геном представлен однонитчатой РНК?

Какая разница между позитивными и негативными вариантами однонитчатых РНК-геномов?

В чем заключается сущность радиоимиунного метода (РИМ) диагностики инфекционных заболеваний?

источник