Для диагностики вирусного гепатита в рамках медицинского протокола используется несколько лабораторных и инструментальных методик. Одной из самых достоверных является иммуноферментный анализ (ИФА). Метод помогает определить наличие антигена к тому или иному виду вируса. Для этого выполняется стандартная процедура забора крови из вены пациента. Результаты становятся известны уже через неделю после взятия анализа.
Термин расшифровывается как «иммуноферментный анализ». Он подразумевает определение в крови комплексов антиген-антитело для уточнения этиологии возбудителя. Если это вирус, определяются его виды и подвиды. Антигены — это частички на поверхности клеток возбудителей, связывающиеся с определенными участками антител. Последние являются иммунными молекулами, вырабатываемыми организмом для собственной защиты. Антигены и антитела неповторимы, поэтому определение их структуры с помощью иммуноферментного анализа свидетельствует о наличии конкретной патологии в организме больного. В качестве меток используются ферменты, которые и дали название методике.
ИФА — это высокоточная методика, ее чувствительность достигает 90%. Она помогает проводить скрининг парентеральных гепатитов. Эти заболевания передаются путем инъекции, или через переливание крови. ИФА помогает выявить пациентов, у которых отсутствуют симптомы. Таковыми является большинство хронических больных. Они имеют риск развития цирроза. Его обнаружение на поздних стадиях — это плохой прогноз. Поэтому иммуноферментная методика позволяет своевременно определить заболевание и сэкономить деньги на лечение. ИФА верифицирует этиологию возбудителя и определяет прогноз недуга. Диагностические наборы для нее стоят недорого и длительно хранятся. За быстроту, удобство и точность данных ИФА называют экспресс-методом.
ИФА необходим, когда требуется уточнить этиологию вирусного возбудителя для определения схемы лечения. У пациента идентифицируют наличие хронического гепатита B и C, или перенесенного заболевания вирусом подтипа A. Методику нужно применять у членов семьи больного, которые могут заразиться. В инфекционном стационаре анализ выполняется всем пациентам, у которых присутствуют такие симптомы:
- Желтуха. Желтушность кожных покровов не сопровождается болями в правом подреберье и изменением цвета стула и мочи.
- Повышение температуры тела. Она вырастает до субфебрильных цифр, иногда наступает лихорадка.
- Диспепсия. Присутствуют тошнота и рвота, которая не приносит облегчение.
- Немотивированная слабость.
- Мелкоточечные высыпания на теле. Это мелкие кровоизлияния вследствие печеночной недостаточности.
- Тяжесть в правом подреберье. Симптом возникает вследствие растяжения увеличенной печенью собственной капсулы, содержащей множество нервных окончаний.
Основным показанием к выполнению анализа является наличие определенных анамнестических данных. Если пациент ранее страдал инъекционной наркоманией, ему переливали кровь или пересаживали органы — это повод выполнить ИФА.
Чтобы результаты ИФА были достоверными, требуется предварительно подготовиться. За день до сдачи крови пациенту рекомендуется перестать употреблять жирную и жареную пищу, продукты с высокой концентрацией красителей, стабилизаторов, консервантов, усилителей вкуса и аромата. Нежелательно непосредственно перед выполнением метода заниматься тяжелым физическим трудом и спортивными упражнениями. В день сдачи крови необходимо воздержаться от завтрака. Забор материала натощак позволит получить точный результат. Необходимо исключить из употребления некоторые лекарственные средства. Но самостоятельно это делать не рекомендуется, поскольку есть вероятность вреда для здоровья. Нужна предварительная консультация лечащего доктора.
Метод ИФА состоит из двух этапов. На первом выполняется забор материала, на втором последний исследуется в лаборатории. Начальный этап проходит стандартно. Ему предшествует подготовка пациента к сдаче крови. В стерильном помещении проводится забор биоматериала, отправляемый в герметических контейнерах на лабораторное исследование. Дальнейшее определение комплексов антиген-антитело происходит с помощью ферментов и тест-систем на специализированном оборудовании. Результат становится известен в течение недели и отправляется пациенту на электронную почту.
Интерпретация данных подразделяется на качественную и количественную. При качественном определении результаты анализа считаются позитивными, если обнаружены суммарные антитела к определенному подтипу вируса. Выявление anti-НАV IgМ свидетельствует про острый, а anti-НАV IgG — хронический гепатит А. Позитивный маркер НВsAg — признак инфицирования вирусом подтипа В. Он наблюдается в острой и хронической фазах заболевания. Если же выявлен HBCAg, у человека присутствует хронический гепатит С. А anti-НDV сигнализирует про инфицирование подвидом D. Пациенты, у которых определен положительный маркер к вирусу, нуждаются в дальнейшем обследовании для более точной верификации диагноза.
источник
Поверхностный антиген гепатита В в сыворотке крови в норме отсутствует.
Обнаружение поверхностного антигена (HBsAg) гепатита В в сыворотке подтверждает острое или хроническое инфицирование вирусом гепатита В.
При остром заболевании HBsAg выявляется в сыворотке крови в последние 1-2 недели инкубационного периода и первые 2-3 недели клинического периода. Циркуляция HBsAg в крови может ограничиваться несколькими днями, поэтому следует стремиться к раннему первичному обследованию больных. Метод ИФА позволяет выявить HBsAg более чем у 90% больных. Почти у 5% больных самые чувствительные методы исследования не обнаруживают HBsAg, в таких случаях этиология вирусного гепатита В подтверждается наличием анти-HBсAg JgM или ПЦР.
Концентрация HBsAg в сыворотке крови при всех формах тяжести гепатита В в разгар заболевания имеет значительный диапазон колебаний, вместе с тем имеется определенная закономерность: в остром периоде существует обратная связь между концентрацией HBsAg в сыворотке и тяжестью болезни.
Высокая концентрация HBsAg чаще наблюдается при легких и среднетяжелых формах болезни. При тяжелых и злокачественных формах концентрация HBsAg в крови чаще низкая, причем у 20% больных с тяжелой формой и у 30% со злокачественной антиген в крови может вообще не обнаруживаться. Появление на этом фоне у больных антител к HBsAg расценивается как неблагоприятный диагностический признак; он определяется при злокачественных формах гепатита В.
При остром течении гепатита В концентрация HBsAg в крови постепенно снижается вплоть до полного исчезновения этого антигена. HBsAg исчезает у большинства больных в течение 3 месяцев от начала острой инфекции.
Снижение концентрации HBsAg более чем на 50% к концу 3-й недели острого периода, как правило, свидетельствует о близком завершении инфекционного процесса. Обычно у больных с высокой концентрацией HBsAg в разгар болезни он обнаруживается в крови в течение нескольких месяцев.
У больных с низкой концентрацией HBsAg исчезает значительно раньше (иногда через несколько дней после начала заболевания). В целом срок обнаружения HBsAg колеблется от нескольких дней до 4-5 мес. Максимальный срок обнаружения HBsAg при гладком течении острого гепатита В не превышает 6 месяцев от начала заболевания.
HBsAg может быть обнаружен у практически здоровых людей, как правило, при профилактических или случайных исследованиях. В таких случаях исследуют другие маркеры вирусного гепатита В – анти HBсAg JgM, анти- HBсAg JgG, анти HBеAg и изучают функцию печени.
При отрицательных результатах необходимы повторные исследования на HBsAg.
Если повторные исследования крови в течение более 3 месяцев выявляют HBsAg, такого пациента относят к хроническим больным вирусным гепатитом В.
Наличие HBsAg – довольно распространенное явление. В мире насчитывается более 300 млн. носителей, а у нас в стране – около 10 млн. носителей.
Прекращение циркуляции HBsAg с последующей сероконверсией (образование анти-HBs) всегда свидетельствует о выздоровлении — санации организма.
Исследование крови на наличие HBsAg применяется в следующих целях:
для диагностики острого гепатита В:
- инкубационный период;
- острый период заболевания;
- ранняя стадия реконвалесценции;
для диагностики хронического вирусного гепатита В;
при заболеваниях:
- персистирующем хроническом гепатите;
- циррозе печени;
для скрининга и выявления больных в группах риска:
- больные с частыми гемотрансфузиями;
- больные с хронической почечной недостаточностью;
- больные с множественным гемодиализом;
- больные с иммунодефицитными состояниями, в том числе СПИДом.
Результаты исследования выражаются качественно – положительный или отрицательный. Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие HBsAg в сыворотке крови. Положительный результат – выявление HBsAg свидетельствует об инкубационном или остром периоде острого вирусного гепатита В, а также при хроническом вирусном гепатите В.
В норме анти-HBcAg JgG в сыворотке отсутствует.
У больных анти-HBcAg JgG появляются в острый период вирусного гепатита В и сохраняются на протяжении всей жизни. Анти-HBcAg JgG – ведущий маркер перенесенного ВГВ.
Исследование крови на наличие анти-HBcAg JgG применяются для диагностики:
Результат исследования выражается качественно – положительный или отрицательный. Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие анти-HBcAg JgG в сыворотке крови. Положительный результат – выявление анти-HBcAg JgG свидетельствует об острой инфекции, реконвалесценции или ранее перенесенном вирусном гепатите В.
В норме HBeAg в сыворотке крови отсутствует.
HBeAg можно обнаружить в сыворотке крови большинства больных острым вирусным гепатитом В. Он обычно исчезает в крови раньше HBs-антигена. Высокий уровень HBeAg в первые недели заболевания или обнаружение его на протяжении более 8 недель дает основание заподозрить хроническую инфекцию.
Этот антиген часто обнаруживается при хроническом активном гепатите вирусной этиологии. Особый интерес к определению HBeAg связан с тем, что его обнаружение характеризует активную репликативную фазу инфекционного процесса . Установлено, что высокие концентрации HBeAg соответствуют высокой ДНК-полимеразной активности и характеризуют активную репликацию вируса.
Наличие HBeAg в крови свидетельствует о высокой ее инфекциозности, т.е. присутствии в организме обследуемого активной инфекции гепатита В, и обнаруживается только в случае присутствия в крови HBs-антигена. У больных хроническим активным гепатитом противовирусные препараты применяются только при обнаружении в крови HBeAg. HBeAg – антиген – маркер острой фазы и репликации вируса гепатита В.
Исследование крови на наличие HBe-антигена применяется для диагностики:
Результат исследования выражается качественно – положительный или отрицательный. Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие HBeAg в сыворотке крови. Положительный результат – выявление HBeAg свидетельствует об инкубационном или остром периоде острого вирусного гепатита В или продолжающейся репликации вируса и инфекциозности больного.
Анти-HBeAg в сыворотке в норме отсутствует. Появление анти-НВeAg антител указывает обычно на интенсивное выведение из организма вируса гепатита В и незначительное инфицирование больного.
Эти антитела появляются в острый период и сохраняются до 5 лет после перенесенной инфекции. При хроническом персистирующем гепатите анти-НВeAg обнаруживаются в крови больного вместе с НВsAg. Сероконверсия, т.е. переход HBeAg в анти-НВeAg, при хроническом активном гепатите, чаще прогностически благоприятна, но такая же сероконверсия при выраженной цирротической трансформации печени прогноза не улучшает.
Исследование крови на наличие анти-НВeAg применяются в следующих случаях при диагностике вирусного гепатита В:
Результат исследования выражается качественно – положительный или отрицательный. Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие антител к HBeAg в сыворотке крови. Положительный результат – выявление антител к HBeAg, которые могут свидетельствовать о начальной стадии острого вирусного гепатита В, остром периоде инфекции, ранней стадии реконвалесценции, реконвалесценции, перенесенном недавно вирусном гепатите В или персистирующем вирусном гепатите В.
Критериями наличия хронического гепатита В являются:
Вирус гепатита В в крови в норме отсутствует.
Качественное определение вируса гепатита В методом ПЦР в крови позволяет подтвердить наличие вируса в организме больного и тем самым устанавливает этиологию заболевания.
Данное исследование дает полезную информацию для диагностики острого вирусного гепатита В в инкубационном и раннем периоде развития заболевания, когда основные серологические маркеры в крови у пациента могут отсутствовать. Вирусную ДНК в сыворотке крови обнаруживают у 50% больных при отсутствии HBeAg. Аналитическая чувствительность метода ПЦР составляет не менее 80 вирусных частиц в 5 мкл, прошедшей выявление ДНК пробы, специфичность – 98%.
Этот метод имеет важное значение для диагностики и мониторинга течения хронического ВГВ. Примерно 5-10% случаев цирроза и других хронических заболеваний печени обусловлены хроническим носительством вируса гепатита В. Маркерами активности таких заболеваний является наличие HBeAg и ДНК вируса гепатита В в крови.
Метод ПЦР позволяет определять в крови ДНК вируса гепатита В как качественно, так и количественно. Определяемым фрагментом в обоих случаях служит уникальная последовательность ДНК гена структурного белка вируса гепатита В.
Обнаружение ДНК вируса гепатита В в биоматериале с помощью ПЦР необходимо для:
Исчезновение ДНК вируса гепатита В из крови – признак эффективности терапии
Этот метод дает важную информацию об интенсивности развития заболевания, об эффективности лечения и о развитии резистентности к активным препаратам.
Для диагностики вирусного гепатита методом ПЦР в сыворотке крови применяются тест-системы, чувствительность которых составляет 50-100 копий в пробе, что позволяет детектировать вирус при его концентрации 5 Х 10^3 -10^4 копий/мл. ПЦР при вирусном гепатите В безусловно необходима для суждения о вирусной репликации.
Вирусную ДНК в сыворотке крови обнаруживают у 50% больных при отсутствии HBeAg. Материалом для выявления ДНК вируса гепатита В могут служить сыворотка крови, лимфоциты, гепатобиоптаты.
- Оценку уровня виремии осуществляют следующим образом:
- менее 2.10^5 копий/мл (менее 2.10^5 МЕ/мл) – низкая виремия ;
- от 2.10^5 копий/мл (2.10^5 МЕ/мл) до 2.10^6 копий/мл (8.10^5 МЕ/мл) – средняя виремия;
- более 2.10^6 копий/мл – высокая виремия.
Существует зависимость между исходом острого вирусного гепатита В и концентрацией ДНК ВГВ в крови больного. При низком уровне виремии процесс хронизации инфекции близок к нулю, при средней – хронизация процесса наблюдается у 25-30% больных, а при высоком уровне виремии острый вирусный гепатит В чаще всего переходит в хронический.
Показаниями для лечения хронического ВГВ интерфероном-альфа следует считать наличие маркеров активной репликации вируса (выявление HBsAg, HBeAg и ДНК ВГВ в сыворотке крови в течение предшествующих 6 месяцев.).
Критериями оценки эффективности лечения служат исчезновение HBeAg и ДНК ВГВ в крови, что обычно сопровождается нормализацией уровня трансаминаз и долговременной ремиссией заболевания, ДНК ВГВ исчезает из крови к 5-му месяцу лечения у 60%, к 9-му месяцу – у 80% больных. Снижение уровня виремии на 85% и более к третьему дню от начала лечения по сравнению с исходным служит быстрым и достаточно точным критерием для прогнозирования эффективности терапии.
источник
Своевременная диагностика гепатита С минимизирует риски развития тяжелых последствий болезни. Вирус, размножаясь в организме, приводит к уничтожению гепатоцитов и развитию стойкого аутоиммунного воспаления. Основные методы диагностики помогают выявить вирус на ранних стадиях инфицирования. Если заболевание обнаружено, необходимо более полное обследование. Для этого проводятся инструментальные виды проверки течения болезни.
Если болезнь протекает в безжелтушной смазанной форме, то практически невозможно понять, что у тебя гепатит С. В 80% случаев заболевание остается незамеченным, а возбудитель вируса постепенно разрушает печеночные клетки и весь организм.
Для верификации диагноза и осложнений заболевания у взрослых и у детей обязательно используют аппаратные и лабораторные методы диагностики. Аппаратные процедуры позволяют визуализировать страдающий орган, определить степень разрушения гепатоцитов, отсутствие или наличие тяжелых осложнений (опухоли, фиброза, жирового гепатоза и т. д). Лабораторные анализы – часть дифференциальной диагностики. По анализу крови можно выявить самого возбудителя или наличие антител к нему.
Как определить гепатит С в домашних условиях? Для этого существуют новейшие экспресс-тесты (подробнее о них можно почитать в данной статье). Они помогают с высокой точностью обнаружить заболевание после самостоятельно проведенного анализа дома. Для проверки необходима капля крови или слюны. Однако окончательный диагноз ставится только после проведения лабораторных исследований в медицинском учреждении.
В настоящее время лабораторная диагностика HCV позволяет не только с точностью определить наличие вируса в организме человека, но и установить, сколько приблизительно времени прошло с момента заражения, насколько активно происходит развитие заболевания.
Первичные диагностические исследования проходят в несколько этапов и позволяют получить ответы на ряд вопросов, необходимых для определения дальнейшей тактики терапии:
- насколько эффективно иммунная система отреагировала на контакт с вирусом;
- как давно HCV находится в организме человека;
- какова фаза инфекции (острая или хроническая в стадии обострения);
- насколько тяжело протекает заболевание (чем выше вирусная нагрузка, тем активнее патологический процесс);
- генотип и подтип вируса (имеет решающее значение для назначения конкретных препаратов).
Но перечисленные исследования целесообразно проводить только после окончательного подтверждения диагноза. Для этого сдают несколько лабораторных анализов.
После попадания в организм начинается активная репликация вируса. Однако до достижения определенного уровня, HCV в крови не обнаруживается. Самые современные высокочувствительные тест-системы ПЦР способны выявить болезнь спустя 3–4 недели. Но при подозрении на возможность заражения и отрицательном результате исследования рекомендуют провести повторный тест.
Анализ на гепатит Ц путем проведения иммуноферментного исследования (ИФА) информативен на сроке 10–16 недель после заражения. За это время антитела к вирусу вырабатываются в достаточном для определения количестве.
Но при этом необходимо учитывать возможность как ложноотрицательных, так и ложноположительных результатов ИФА. Такая вероятность существует при:
- беременности (вне зависимости от срока);
- иммунодефицитных состояниях;
- аутоиммунных заболеваниях;
- онкологии, затрагивающей систему кроветворения.
Кроме того нельзя исключать и человеческий фактор, то есть лабораторную ошибку, допущенную при выполнении анализа. Поэтому при положительном результате доктора рекомендуют сделать исследование повторно. Аналогичной тактики придерживаются и в том случае, если специфические симптомы прогрессируют на фоне отрицательных ИФА и/или ПЦР.
Диагностическое обследование пациента с возможной HCV-инфекцией регламентировано международными медицинскими протоколами.
В соответствии с рекомендациями ВОЗ, анализы проводят в таком порядке:
- печеночные пробы (на начальной стадии заболевания или латентном течении гепатита С показатели могут укладываться в физиологические границы нормы);
- ИФА (на первом этапе рекомендуют сделать суммарный ИФА, определяющий совокупность иммуноглобулинов типа G и M, при положительном результате выполняют отдельно анализы на IgG и IgM к HCV);
- полимеразная цепная реакция (ПЦР), делится на качественный (определяет только наличие патогенной РНК в крови), количественный (оценивает уровень РНК) и генотипирование (выявляет точную разновидность HCV – генотип и подтип).
В дополнение врач назначает и стандартный перечень анализов. Он включает исследование на ВИЧ и другие виды вирусного и инфекционного гепатита, ОАК и ОАМ, оценку липидного и белкового профиля крови, иммунограмму и др. При подозрении на наличие фиброза, цирроза или гепатоцеллюлярной карциномы показана биопсия печени.
Исследования, проводимые методом ПЦР, считаются наиболее достоверными способами диагностики гепатита C. Проведение полимеразной цепной реакции позволяет выявить специфические вирусные РНК в крови человека, оценить их количество и структуру нуклеотидной цепи.
ПЦР диагностика может проводиться несколькими методами (каждый отличается по технологии проведения и стоимости для пациента):
| Разновидность ПЦР | Описание анализа |
| Качественный | Направлен только на выявление РНК вируса гепатита C |
| Количественный | Проводится для оценки вирусной нагрузки (расшифровку проводит только врач) |
| Генотипирование | Необходимо для определения разновидности инфекции |
ПЦР рекомендуют проводить после исследования анти HCV методом ИФА, который позволяет определить специфические антитела к гепатиту С. Наличие IgM свидетельствует об остром течении инфекции, IgG – о хроническом или латентном. По титру антител можно предположить активность патологического процесса, однако точную вирусную нагрузку определяют только методом ПЦР.
Качественный анализ является своего рода проверкой, есть ли РНК HCV в крови человека. В отличие от результатов ИФА, которые зависят от определенных факторов (например, наличия беременности или состояния иммунной системы) данные ПЦР однозначны. Но при помощи этого исследования можно выявить, есть ли РНК гепатита С или нет.
Для полной клинической картины необходимы другие тесты. Поэтому в бланке лаборатории указано только наименование анализа и полученный результат. Средняя стоимость качественного ПЦР в частных клинических кабинетах составляет порядка 1000 рублей.
Проводится для определения уровня вирусной нагрузки, то есть количество копий вируса гепатита С в определенном объеме плазмы крови. Единицы измерения МЕ/мл. Высокие показатели указывают на острое течение заболевания и часто свидетельствуют о риске серьезных поражений печени.
Данные для расшифровки результатов анализа приведены в таблице, но интерпретировать исследования и ставить окончательный диагноз должен только инфекционист-гепатолог.
| Полученный результат | Расшифровка |
| Отрицательный | Человек не заражен HCV или количество РНК в крови слишком низко для определения при помощи лабораторных тест-систем (возможно в течение 1–4 недель после инфицирования) |
| 1,5 МЕ/мл | Низкая вирусная нагрузка, прогноз благоприятен |
| 4ˑ106 –2ˑ108МЕ/мл | Средняя вирусная нагрузка, служит показанием к немедленному началу терапии |
| Выше 2ˑ108МЕ/мл | Высокая вирусная нагрузка, прогноз неблагоприятен. Необходима противовирусная терапия после всесторонней оценки состояния печени |
В лабораториях могут отличаться марки тест-систем и, соответственно, используемые единицы измерения и нормы. Поэтому при расшифровке рекомендуют ориентироваться на референсные значения.
Стоимость исследования в платной лаборатории достигает 2500 рублей.
Генотипирование один из основных анализов на этапе подготовки пациента к началу курса противовирусной терапии. Исследование основано на отличиях в структуре известных 6 разновидностей (и около 100 подтипов) HCV. В бланке с результатами указывают выявленный генотип и субтип, например, 1b или 3a и т.д. Полученные данные позволяют врачу определить перечень назначаемых препаратов и продолжительность лечения, объяснить пациенту возможные исходы терапии.
Цена проведения генотипирования в частной клинике колеблется в пределах 1000 рублей.
Экспресс-тест на вирусный гепатит С рассчитан на выявление антител, которые вырабатывает иммунная система после попадания вируса в организм.
Тест-полоски бывают:
- Для диагностики по крови. В коробке содержится набор всех необходимых инструментов, сразу после вскрытия система готова к работе. Прилагается инструкция, описывающая пошаговый алгоритм действия, начиная с забора крови, заканчивая оценкой полученного результата.
- Диагностика по слюне. Специальным одноразовым аппаратом собирают небольшое количество слюны или десневой жидкости. Результат оценивают через 20 минут.
Cito-тесты можно купить в аптеке без рецепта. Их достоверность выше 96%. Все зависит от правильности забора биоматериала, соблюдения правил проведения тестирования, фирмы-изготовителя, способа хранения и т. д. Цены на изделия разнятся от 300 до 1600 рублей.
Для выработки антител в организме требуется как минимум 2–3 недели. В некоторых случаях это процесс удлиняется до полугода.
Общий анализ крови сдают в любое время, по истечении часа от приема пищи. Анализ крови на биохимические показатели строго натощак утром, с 9 до 11 часов. Причина в биологическом ритме организма. Ночной голод должен быть не менее 10 часов.
При использовании тест-полосок дома, важно чтобы гематокрит (текучесть крови) был в пределах нормы. Густая кровь искажает полученные результаты.
Вирусологический анализ на гепатит (определение антигенов и антител) делают из венозной крови, она обладает большей диагностической ценностью. Между забором биоматериала и последним приемом пищи должно пройти 4–6 часов. Накануне лучше отказаться от слишком жирной пищи, алкоголя, переедания.
Если недавно проходили Rg-графию, ректальный осмотр прямой кишки, физиопроцедуры, присутствовал прием сильнодействующих препаратов и антибиотиков, то необходимо сказать об этом своему доктору или лаборанту.
Покажет ли общий анализ крови гепатит С? Нет, в нем отсутствуют показатели для дифференциальной диагностики вируса. Но опытного врача-гепатолога должен насторожить лейкоцитоз и резкое увеличение показателей СОЭ (скорость оседания эритроцитов). Развернутый анализ на биохимию, выявит характерные для болезни изменения в работе печение, появление грозных осложнений хронического и острого гепатита С.
Приведем типичные лабораторные тесты и их диагностическую ценность:
| Исследуемый показатель | Диагностическая ценность | |||||||||||||||||||||||||||||||||
| Аспартатаминотрансфераза (АсАт) | Если фермента больше нормы, то говорят о гибели гепатоцитов или миоцитов. Исключение – беременные женщины, где допускается незначительное превышение нормы | |||||||||||||||||||||||||||||||||
| Аланинаминотрансфераза (АлАт) | При гепатитах норма фермента превышена в несколько раз | |||||||||||||||||||||||||||||||||
| Щелочная фосфатаза (ЩФ) | >нормы при костных патологиях, туб- или онкопроцессах в печени, циррозе, любых гепатитах вирусного генеза | |||||||||||||||||||||||||||||||||
| Лактатдегидрогеназа (ЛДГ) | > нормы при разрушении печеночной ткани | |||||||||||||||||||||||||||||||||
| Глутаматдегидрогеназа (ГДГ) | Отклонения от нормы наблюдают при тяжелых расстройствах работы печени, желчевыводящих путей, острых токсических воздействий | |||||||||||||||||||||||||||||||||
| Сорбитолдегидрогеназа (СДГ) | В норме практически отсутствует. Появление фермента укажет на вирусный или невирусный гепатит, цирроз | |||||||||||||||||||||||||||||||||
| Гамма-глутамилтрансфераза (ГГТ) | >нормы при гепатитах на фоне систематических алкогольных интоксикациях | |||||||||||||||||||||||||||||||||
| Фруктозо-монофосфат-альдолаза (ФМФА) | В норме содержится только в следовых количествах. Активное присутствие фермента наблюдают при острых формах гепатитов, особенно сопряженных с профессиональной вредностью | |||||||||||||||||||||||||||||||||
| Общий белок | >нормы при неправильной работе печеночной ткани | |||||||||||||||||||||||||||||||||
| Альбумин | нормы при серьезных погрешностях питания, циррозе, но особенно на фоне алкоголизма | |||||||||||||||||||||||||||||||||
| Триглицериды | ||||||||||||||||||||||||||||||||||
| Молекулярный тест, проведенный по методике ПЦР | Иммуноферментный анализ |
| Мишени для исследования | |
| РНК вируса в крови | Антитела к гепатиту С (класса G и М) |
| Разновидности анализа и изучаемые критерии | |
| Качественный анализ позволяет ответить на главный вопрос, здоров человек или болен | Anti HCV Total определяет в крови общий титр всех антител к возбудителю гепатита С вне зависимости от класса |
| Количественное исследование оценивает вирусную нагрузку | Определение иммуноглобулинов по классам: обнаруженные маркеры IgG свидетельствует о хронической инфекции, IgM – об острой |
| Генотипирование служит для выявления разновидности патологии | Антитела с белку core и неструктурным протеинам HCV – это развернутый анализ, назначается нечасто, служит для дифференциальной диагностики инфекции с другими заболеваниями, прогнозирования особенностей течения и исхода |
| Сроки диагностики | |
| до 3 дней | 3–5 дней |
| Сроки обнаружения (с момента инфицирования) | |
| 10–14 дней | Через 3–4 недели |
| Вероятность получения ложных результатов и ошибочной расшифровки | |
| Минимальна, ошибки могут быть связаны с неправильной подготовкой образцов либо нарушением правил постановки реакции | Неправильные результаты (ложноотрицательные или ложноположительные) могут быть следствием определенных заболеваний и состояний (например, беременности, аутоиммунных патологий, ВИЧ, системных инфекций и т.д.) |
Качественный анализ, предназначенный для выявления патогенной РНК строго специфичен, поэтому используется для дифференциальной диагностики хронического вирусного гепатита С и для первичного определения наличия заболевания. Современные наборы реактивов, используемые для проведения исследования, характеризуются высокой чувствительностью. Достоверная диагностика возможна уже через 1,5–2 недели после инфицирования.
Расшифровка анализа не отличается сложностью. Если частицы вируса обнаружены, человек болен либо произошла реконвалесценция болезни. Отрицательный результат свидетельствует в пользу отсутствия патологии или о диагностическом окне, когда человек заражен, но уровень РНК патогена слишком низок для лабораторного обнаружения.
При помощи качественного анализа методом ПЦР возможна ранняя диагностика вирусной инфекции.
Исследование проводится после подтверждения диагноза гепатита С по качественной ПЦР. По анализу определяют показатель вирусной нагрузки. Этот параметр определяет активность патологического процесса. В зависимости от результата количественного анализа выделяют несколько уровней вирусной нагрузки (представлено в таблице).
| Уровень вирусной нагрузки (измеряется в МЕ/мл) | Расшифровка |
| Ниже 3ˑ104 | Низкая виремия |
| 3ˑ104–8ˑ105 | Средняя виремия |
| Сверх 8ˑ105 | Высокий уровень виремии |
Чем выше параметр вирусной нагрузки (ВН), тем активнее происходит репликация вируса, хуже прогноз и выше вероятность необратимых изменений структуры тканей печени. Как правило, высокая виремия сопровождается достаточно характерными клиническими проявлениями инфекции. Обнаружение низкой ВН, особенно на фоне острой фазы заболевания является предиктором самостоятельного выздоровления. В таком случае начало терапии откладывают на 7–14 дней, после чего исследование повторяют.
Данный анализ проводят только в том случае, если в крови обнаружена вирусная РНК и установлено ее количественное содержание. Генотипирование – единственное исследование, которое определит разновидность возбудителя гепатита С. Только так можно правильно назначить курс терапии и установить продолжительность их применения.
В настоящее время диагностика вирусной инфекции возможна дома, при этом человеку не нужны какие-либо специальные медицинские навыки. Экспресс-тест на гепатит С «работает» по принципу иммуноферментного анализа, то есть набор позволяет определить наличие антител к HCV в образце биологического материала. Большинство тест-систем предназначены для проверки крови. Но появились наборы, позволяющие выяснить, есть ли иммуноглобулины к гепатиту С в слюне.
Относительно достоверности экспресс-тестов было проведено несколько клинических исследований. Установлено, что подобные наборы – не самый точный способ диагностики инфекции, многое зависит от правильности забора биологического материала, соблюдения других правил выполнения анализа. Однако проведение такого теста дает возможность самостоятельно определить инфицирование, не посещая доктора и лабораторию.
Цена одной тест-системы, позволяющей проверить наличие вируса, колеблется в пределах 800–2000 рублей в зависимости от производителя и способа выполнения анализа. Исследование выполняют следующим образом. На тест-полосу наносят образец биологического материала (слюна либо кровь) и ждут отведенное время. Появление одной контрольной полоски свидетельствует об отрицательном результате, две линии – о возможном инфицировании.
При подготовке к проведению обследования необходимо соблюдать такие правила:
- исключить токсическое влияние алкоголя на печень (отказаться от употребления спиртного за 5–7 дней до сдачи анализов);
- соблюдать диету с ограничением жирных, жареных, копченых блюд (стол №5) за неделю до проведения обследования;
- сдавать кровь строго натощак (прием пищи запрещен за 12–14 часов до забора крови);
- не курить за 8 часов до исследования.
Существует несколько способов проведения диагностики. Можно сдать кровь в частной лаборатории, где не требуется направлений от врача. Необходимые тесты выполняют по полису страхования, но перед этим придется получить направления у участкового терапевта или инфекциониста.
Нередко пациенты интересуются, покажет ли общий анализ крови гепатит С, ведь общеклинические исследования сдаются регулярно при вирусных заболеваниях и других, более распространенных инфекциях. Но изменения картины крови возникают далеко не всегда. Кроме того, подобные нарушения неспецифичны и не позволяют провести точную диагностику заболевания.
Приблизительно в 20–30% случаев возникают следующие изменения:
- снижение общего уровня лейкоцитов за счет лимфоцитов;
- уменьшение содержания гемоглобина;
- изменение уровня тромбоцитов за счет нарушений свертывающей системы крови;
- повышение параметров скорости оседания эритроцитов.
Еще одним способом, как обнаружить вирусное поражение печени, служат показатели биохимического исследования крови.
О возможном инфицировании свидетельствует повышение концентрации:
Нарушения функциональной активности печени проходят по мере приема противовирусных препаратов.
Диагноз гепатита С не ставят на основании результатов печеночных проб и стандартного клинического исследования крови.
Для получения полной картины состояния пациента необходимо проведение дополнительных инструментальных исследований. Это связано с длительным бессимптомным течением патологии. Нередко о наличии болезни пациент узнает на стадии фиброза, а при неблагоприятном прогнозе – на этапе цирроза либо злокачественной малигнизации гепатоцитов.
От состояния печени во многом зависит тактика терапии. При декомпенсированных формах цирроза прием таргетных противовирусных препаратов дополняется рибавирином, либо продолжительность лечения увеличивают до 24 недель.
Процедура проводится для определения стадии и степени цирроза, а также подтверждения злокачественного перерождения клеток (предварительно опухоль обнаруживают при помощи ультразвукового исследования). Пункцию выполняют в условиях стационара под местной анестезией.
Под контролем УЗИ специалист делает прокол и вводит в паренхиму печени специальную иглу с системой захвата, позволяющей взять образец биологического материала. Кусочек ткани помещают в специальную среду, при необходимости добавляют краситель и исследуют под микроскопом.
Противопоказанием к проведению процедуры служит паразитарное поражение печени и тяжелые нарушения системы свертывания. Кроме того, возможность выполнения манипуляции напрямую зависит от согласия самого пациента. Для принятия взвешенного решения врач должен подробно объяснить, для чего необходимы результаты биопсии, каковы риски при проведении процедуры.
Ультразвуковое исследование сочетает в себе высокую информативность, безболезненность и безопасность. В течение 15–20 минут доктор может получить подробные данные о размерах и структуре печени и других органов брюшной полости.
Как правило, УЗИ, проведенное на фоне гепатита С, демонстрирует:
- нарушения кровоснабжения органа;
- изменения, связанные с оттоком и секрецией желчи;
- наличие уплотнений, очагов воспаления, некроза, в тяжелых случаях возможно обнаружение новообразований;
- увеличение размеров печени.
По итогам УЗИ доктор поймет масштабы поражения печени, однако точная диагностика гепатита С возможна только по результатам анализа крови.
Сама техника выполнения обследования напоминает ультразвуковую диагностику. Эластометрия – неинвазивное безболезненное исследование, предназначенное для оценки плотности паренхимы печени. Таким образом доктор может определить стадию и тяжесть фиброза, при котором нормальная ткань органа замещается соединительной. Без соответствующей терапии и таргетного противовирусного лечения развивается цирроз печени.
Подобные методики информативны при диагностике цирроза и наличия злокачественных новообразований. Томограмма имеет ряд противопоказаний. Но подобное исследование гораздо информативнее УЗИ и эластометрии, позволяет в полной мере оценить состояние печени.
Самостоятельная диагностика вируса без проведения должных исследований и их грамотной расшифровки невозможна. Человек может предположить наличие инфекции по ряду симптомов, например, повышенной утомляемости, постоянной слабости, сочетающихся с расстройствами пищеварения. К группе риска относят людей, часто подвергающихся инвазивным медицинским или эстетическим процедурам, пренебрегающими барьерными методами защиты при случайных половых контактах.
Наиболее простой способ самостоятельной диагностики – проведение экспресс-теста либо сдача анализов в платной лаборатории. Однако при наличии характерной для вирусного поражения печени лучше пройти комплексное обследование под контролем врача.
Обследование на гепатит С при беременности является обязательным и выполняется дважды: при первой консультации у гинеколога и постановке на учет, а затем в середине последнего триместра. Доктор назначает анализы, выполняемые по методики ИФА. Но основная проблема заключается в получении ложноположительных результатов. После зачатия в организме женщины начинается выработка протеинов, близких по структуре к антителам к гепатиту С.
Поэтому позитивный ИФА при беременности не всегда является признаком инфицирования и требует подтверждения методом ПЦР. Также в период вынашивания ребенка возможно обследование органов брюшной полости при помощи УЗИ, иногда проводится эластометрия. Но при подтверждении диагноза лечение может навредить плоду. Поэтому назначают поддерживающие здоровье женщины медикаменты, а основную терапию начинают после родов.
Лечение гепатита С вполне реально как на острой, так и на хронической фазе. Но одно из условий успешной терапии – своевременная диагностика, когда еще возможно восстановление функциональной активности печени. Поэтому специалисты рекомендуют самостоятельно либо по направлению от врача сдавать соответствующие тесты, а при позитивном результате незамедлительно обращаться за медицинской помощью.
источник
Для того чтобы с высокой точностью определить вид гепатита после постановки предварительного диагноза, спрогнозировать течение заболевания, установить стадию его развития, используют различные серологические исследования. Наиболее точные данные получают после проведения иммуноферментного анализа. Используя ИФА гепатит С, диагностируют в 95% случаев. Именно данный анализ даёт возможность выявить антитела антивируса гепатита С (антивирус HCV) и оценить не только степень активности патологического процесса, но и уровень результативности противовирусной терапии, назначенной лечащим врачом и проведённой под его контролем.
Гепатит С является самым опасным видом данного заболевания, так как отличается длительным скрытым (латентным) периодом и опасными последствиями. Избежать появления и развития позволяет правильная и своевременная диагностика, одним из самых информативных методов которой признан иммуноферментный анализ.
Подтвердить наличие в крови пациента HCV инфекции можно с помощью серологических маркеров, а получить наиболее полные и достоверные данные о существовании антител позволяет анализ, который основан на комплексе структурных и неструктурных вирусных пептидов. У здоровых людей антитела к вирусу гепатита С в крови пациента отсутствуют, а их обнаружение свидетельствует о наличии патогена и развитии патологического процесса.
В ходе исследования специалисты выявляют суммарные антитела класса IgM и IgG, имеющие непосредственное отношение к структурным и неструктурным белкам HCV. Проведение данного исследования позволяет на ранней стадии заболевания выявить больных, инфицированных вирусом гепатита C. Присутствие суммарных антител в крови пациента говорит о начале болезни или перенесённой инфекции.
О начале заболевания свидетельствует наличие антител класса IgM, а о перенесённом гепатите типа С можно судить по выявленным антителам класса IgG. Они же становятся подтверждением реконвалесценции (заключительной стадии болезни).Для этого периода характерно анатомическое и функциональное восстановление поражённых недугом органов.
Своевременно проведённый ИФА (иммуноферментный анализ) позволяет на ранней стадии развития выявить патологический процесс, с высокой точностью диагностировать заболевание и увеличить шансы на быстрое выздоровление. Тест ИФА даёт возможность определить не только наличие вируса, но и количество специфических суммарных антивирус антител.
- Женщинам в состоянии беременности при постановке на учёт в женской консультации.
- Пациентам, у которых обнаружены симптомы острого или хронического гепатита.
- Медицинским работникам, постоянно контактирующим с биологическими материалами.
- Пациентам с диагнозом СПИД.
- Наркозависимым гражданам.
- Больным алкоголизмом и тем, кто ведёт асоциальный образ жизни.
Направление на тест ИФА (иммуноферментный анализ) получают и сотрудники правоохранительных органов или работники коммунальных служб. Необходимость в проведении ИФА возникает при подозрении на нарушение функциональности печени или при получении сомнительных данных о состоянии органа после ультразвукового исследования. Врач может дать пациенту направление на иммуноферментный анализ крови, если последнему предстоит сложное хирургическое вмешательство. Если женщина (особенно в возрасте старше 30 лет) планирует беременность, а в анализе крови обнаружены повышенные значения билирубина или трансфераз (АЛТ, АСТ).
Специфические антивирусные антитела IgG обнаруживаются на протяжении нескольких лет. Их концентрация постепенно снижается, что является подтверждением положительной динамики. Что касается хронического гепатита С, то в этом случае количество суммарных анти-HCV антител не меняется. Точная диагностика основана на определении уровня содержания антител класса IgM.
Течение гепатита С зависит от генотипа вируса, ставшего причиной развития заболевания. Современной медицине известны 11 их разновидностей. В самых сложных ситуациях возможно инфицирование сразу несколькими генотипами вируса, и один из них всегда оказывается доминирующим. Только точная диагностика поможет выбрать наиболее эффективные лекарственные препараты для результативной терапии, подобрать их дозировку и установить длительность проведения терапевтических мероприятий.
Для постановки диагноза при подозрении на наличие гепатита С и получения ориентировочной информации о количестве и качестве возбудителя проводится иммуноферментный анализ (ИФА), в ходе которого специалисты получают подтверждение присутствия в организме вируса и могут судить о его активности.
С помощью данного исследования можно сделать выводы о:
- вирусной нагрузке;
- степени риска развития хронического процесса;
- активности воспроизведения (репликации) молекулы РНК вируса HCV;
- продолжительности течения патологического процесса;
- степени поражения печени.
Оценивается и уровень риска перехода заболевания в хроническую форму. Выявленные с помощью ИФА антивирус HCV антитела свидетельствуют о вирусной репликации. Конечные результаты требуют подтверждения с помощью более точных исследований.
Качественная оценка итога иммуноферментного анализа выражается как положительный или отрицательный результат. ИФА позволяет выявить гепатит С на ранней стадии развития недуга, а также при течении заболевания в безжелтушной форме.
Анализ имеет определённые преимущества, среди которых:
- Точность качественных и количественных показателей.
- Минимальные сроки исследования.
- Поэтапное проведение теста.
Иммуноферментный анализ принадлежит к числу обследований, отличающихся высокой точностью, но несмотря на все преимущества, в некоторых случаях не позволяет выявить возбудителя, присутствующего в организме человека.
Для исследования лаборант берёт венозную кровь пациента и помещает её в специальные ёмкости. Спустя определённое время антигены (чужеродные микроорганизмы) прикрепляются к стенкам сосуда. Специалист вводит в сосуд иммуноглобулины (антитела) и добивается иммунной реакции.
Полученные результаты сверяют с данными специально составленной таблицы. Результат оценивается как:
Положительный, свидетельствующий о наличии острой формы заболеваний, если в ходе исследования крови определяется наличие антител классов IgA, IgG, IgM.
Отрицательный – все три типа антител не выявлены, отсутствуют.
Ложноположительный – результат ИФА положительный, но не получивший подтверждения после проведения ПЦР (полимеразной цепной реакции).
Сомнительный – маркеры в крови не определяются при наличии гепатита С. Такое возможно при слишком ранней диагностике. Требуется повторное проведение анализа через 2-3 недели. Для постановки точного диагноза делают анализ ПЦР.
Ложноотрицательный результат анализа возможен у пациентов, принимающих лекарственные препараты, оказывающие подавляющее действие на защитную систему организма.
Как ложноположительный, так и ложноотрицательный результаты проведённого анализа возможны по нескольким причинам. В первую очередь – это минимальная вирусная нагрузка на самой ранней стадии развития заболевания. Не менее важно состояние иммунной системы пациента и индивидуальные особенности его организма. На результатах исследования заметно сказывается приём лекарственных препаратов из числа иммунодепрессантов.
Нельзя быть полностью уверенным в точности результата иммуноферментного анализа, если пациентка – это женщина в состоянии беременности. Ложные результаты возможны и в тех случаях, когда анализ проводят пациентам, страдающим аутоиммунными недугами, онкологическими заболеваниями, имеющим доброкачественные новообразования.
Дополнительное исследование проводится в том случае, если пациент недавно перенёс тяжёлое инфекционное заболевание, у него диагностировано нарушение обмена веществ или сбой в работе эндокринной системы. Если в составе крови повышено содержание гепарина или заметно снижен уровень содержания микроэлементов.
Увеличить точность проведённого анализа можно, соблюдая существующие правила подготовки к его сдаче:
- Кровь сдают только натощак. Последний приём пищи разрешён не менее чем за 8-10 часов до забора материала.
- Вечером перед анализом требуется отказаться от употребления в пищу жирных, жареных, острых, копчёных продуктов и блюд.
- Не может быть речи об употреблении спиртосодержащих напитков.
- Лучше отказаться от курения за сутки до сдачи крови.
Делать иммуноферментный анализ можно только тем пациентам, которые в данное время не болеют простудными, воспалительными или инфекционными заболеваниями, не жалуются на недомогание.
Нарушение перечисленных правил и требований приводит к тому, что результат анализа оценивается как ложноположительный. Такая ситуация складывается в 15-20% случаев. Однако для полной уверенности врачи направляют пациентов на дополнительное обследование, в ходе которого им нужно сдать кровь на ПЦР.
Постановка диагноза невозможна только на основании результатов иммуноферментного анализа. Наличие антител не является доказательством присутствия болезнетворного вируса в организме на момент исследования. Ошибочное тестирование может спровоцировать нервный срыв или ещё более острую реакцию пациента. Постановка диагноза на основании результатов ИФА не является точной. Требуется дополнительное исследование, по итогам которого и будет вынесен окончательный вердикт врачей.
Важно помнить, что ложноположительный результат анализа возможен у людей, которые в данный момент болеют другими инфекционными заболеваниями, однако их иммунная система неправильно отреагировала на проникновение в организм болезнетворных микроорганизмов или вирусов.
Диагностировать гепатит С позволяет ряд лабораторных исследований, особое место среди которых занимает иммуноферментный анализ (ИФА). Качественная оценка показателей определяется как положительный или отрицательный результат. Отсутствие вируса гепатита в крови пациента – норма, но в некоторых случаях после проведённого исследования специалисты заявляют об обнаружении в биологическом материале незначительных концентраций некоторых фрагментов РНК (рибонуклеиновой кислоты). Выявляют их с помощью ПЦР (полимеразной цепной реакции).
Этот анализ крови даёт возможность выявить возбудителя гепатита С на ранней стадии развития заболевания и с высокой точностью поставить диагноз. Основано исследование на том, что вирусы имеют в составе структуры молекулы ДНК (гепатит B) или РНК (гепатит C).
В ходе анализа ПЦР с помощью специальной обработки образцов крови пациента:
- увеличивают концентрацию молекул нуклеиновых кислот;
- определяют их тип;
- устанавливают вид возбудителя.
Если в крови человека есть небольшое количество фрагментов РНК возбудителя, то с помощью ПЦР все они будут выявлены. Это и даёт возможность поставить точный диагноз. Главное отличие данного анализа от всех иных методов исследования – на 100% точная диагностика.
Такой анализ проводится при исследовании крови беременных женщин, обратившихся в женскую консультацию для постановки на учёт, при подозрении на наличие гепатита С с длительным латентным (скрытым) периодом, при затруднении в постановке точного диагноза с помощью ИФА. Проведения ПЦР необходимо в тех случаях, когда после иммуноферментного анализа получен сомнительный результат.
Вирус гепатита С в данной ситуации есть в организме больного, но ещё не спровоцировал стремительное развитие недуга. Это и есть латентное течение заболевания. Анализ делается довольно быстро, так как для получения результата нет необходимости выращивать возбудителя, используя питательную среду. Главное отличие ПЦР от иммуноферментного анализа (ИФА) заключается в том, что в данном исследовании не существует такого понятия, как ложноположительный или сомнительный результат.
источник