Лабораторная диагностика оспы. Включает микроскопическое выявление в патологическом материале элементарных телец, заражение куриных эмбрионов, а в сомнительных случаях — проведение биопроби на чувствительных животных.
В лабораторию для исследования присылают везикулярную жидкость, набранную в капилляры пастеровських пипеток, и целые папулы, вырезанные ножницами на границе с непораженной тканью, которые вмещают в флакон с 50 %-г раствором глицерина. Для вирусоскопии готовят тонкие мазки и мазки-отражения оспенных поражений кожи и пустул, которые после высушивания исследуют в нативному состоянии или окрашивают за методом Морозова ли Пашена. Во время микроскопического исследования окрашенных за Морозов мазков на світло-брунатному фоне препарата вирусные частички имеют вид мелких округлых элементарных телец черного цвета, размещенных поодиночке, попарно, короткими цепочками или сосредоточениями. В окрашенных за Пашеном мазках мелкие округлые элементарные тельца имеют темно-красный цвет.
Для диагностики оспы в Птицы Осуществляют заражение патологическим материалом 10 — 12-дневных куриных эмбрионов. В случае положительных результатов на ХАО погибших (или забитых) вдоль первых
3-6 пор куриных эмбрионов находят размещенные в отдельности мелкие оспинки или собранные вместе значительные ячейки оспенных поражений.
При атиповой форме оспы у Овец Для диагностики применяют биопробу. Исследуемый патологический материал в объеме 0,1 мл вводят внутрикожно в бесшерстную поверхность хвоста неиммунной молодой овцы. В положительных случаях вдоль 10 пор на месте инокуляции развивается специфический местный оспенный процесс, который подтверждается нахождением в мазках элементарных телец. Для диагностики оспы у Свиней Патологический материал вытирают в надрезы кожи на внешней поверхности уха или внутренней поверхности бедра 2 — 3-месячных поросят. В положительных случаях через 6-8 ч на месте надрезов наблюдаются характерные оспенные поражения, специфичность которых подтверждается выявлением в мазках элементарных телец. Идентификацию вируса оспы, что способствовало заболевание свиней, осуществляют на двух переболевших поросятах, которым в свежоскарификованую поверхность кожи на тыльной стороне уха или на внутренней поверхности бедра вытирают вісповакцину. Отсутствие зажигательной реакции на месте введения вакцины свидетельствует про інфікованість свиней вирусом оспы коров или осповакцини. Положительная зажигательная реакция на месте введения вакцины свидетельствует про инфицырованость свиней оригинальным вирусом оспы свиней. Для диагностики оспы Коров Исследовательским патологическим материалом заражают кроликов в роговицу глазу (проба Рафаэля). При гистологическом исследовании пораженных участков роговицы обнаруживаются специфические тельца-включения Гварни-ери. В случае необходимости ставят биопробу на телятах.
Дифференциальная диагностика. Предусматривает необходимость отличать оспу овец и коз от парши и чесотки; оспу большого рогатого скота — от ящуру и нодулярного дерматита; оспу свиней — от висипу при сальмонеллезе, лептоспирозе и ящуре, а также при затронутом обмене веществ; оспу коней — от везикулярного стоматита. Парш в диагностируют выявлением в патологическом материале микроскопических грибков, чесотку — нахождением в корках специфических клещей. Ящур большого рогатого скота отличают от оспы за специфическими афтозно-ерозийными поражением слизистой оболочки ротовой пустоты и языка, на вымени не проявляют характерных для оспы «пупкообразных вдавливаний». В случае необходимости ставят очень показательную биопробу на морских свинках. Н в — дулярний дерматит большого рогатого скота не сопровождается характерной стадийностю развития поражений кожи, наблюдаются лишь узелковые высыпания. У свиней кожные поражения при сальмонеллезе и лептоспирозе не имеют характерной для оспы стадийности развития, бактериологическими исследованиями определяют соответствующий возбудитель болезни. У коней везикулярный стоматит проявляется характерным везикулярным висипом на слизистой оболочке ротовой пустоты, коже венчика межкопытнойщели. Вирус идентифицируется за РЗК и РН.
Лечение. Специфических средств лечения оспы не предложен. Больных животных изолируют в сухие, чистые, хорошо проветриваемые помещения, обеспечивают мягким питательным кормом. Проводят симптоматичное лечение. Слизистые оболочки сращивают антисептическими и вяжущими жидкостями, оспенные поражения кожи обрабатывают разными мазями (борная, прополисная, цинковая, салициловая), эмульсиями (стрептоцидовая, синтомициновая) и антисептическими жидкостями. Кожные покриви больных свиней через каждые 6-7 пор к отпадению корок смачивают непрочным раствором креолина, лизола или ‘едкого луга. При конюнктивитах у коней глаза промывают 1 %-г раствором цинка, 0,5 %-г раствором танину. Для профилактики и лечения осложнений бактериальной микрофлорой применяют антибиотики широкого спектра действия.
Иммунитет. В переболевших на оспу коров, верблюдов и коз формируется стойкий иммунитет на все жизнь, у овец и кур — на 2-3 года, у свиней и коней — на несколько месяцев. Для специфической профилактики применяют гидроксидалюминиеву формолвакцину против оспы овец, сухую культуральну вирус-вакцину против оспы овец и гидроксидалюминиеву формолглицеринову вакцину против оспы коз.
Гидроксидалюминиеву Формолвакцину против оспы овец Применяют с профилактической целью в неблагополучных или угрожающих хозяйствах. Прививают клинически здоровых животных независимо от их физиологического состояния и века. Ягнят, привитых к 2-месячному веку, ревакцинують через 2-3 мес, в дальнейшем их прививают дважды на год. Невосприимчивость у овец наступает на 15-ту пору после вакцинации и сохраняется в течение 6-8 мес.
Вирус-вакцину против оспы овец сухую Культуральну применяют для профилактической иммунизации клинически здоровых овец в епизоотичных ячейках и угрожающих относительно оспы районах. Молодняк вакцинируют из месячного века, ревакцинують в 6-месячном веку. Взрослых овец прививают единовременно через каждые 12 мес. Иммунитет наступает через 4-5 пор после вакцинации и сохраняется в течение 12 мес.
Гидроксидалюминиеву Формолглицериновую вакцину против оспы коз Применяют с профилактической целью во всех неблагополучных хозяйствах без любых ограничений. Молодняк ревакцинируют через 3-4 мес. Иммунитет сохраняется до 6 мес.
Профилактика и мероприятия борьбы. Предусматривают охрану хозяйств от занесения и распространения вируса оспы; защита животных от заражения оспой; своевременное установление диагноза; выявление, изоляцию и лечение больных животных и вакцинацию здоровых; ликвидацию болезни в неблагополучном пункте и предотвращение распространению инфекции в другие хозяйства; уничтожение возбудителя болезни в ячейки инфекции.
Чтобы предотвратить занесению оспы Овец И Коз, Не допускается завозка животных, кормов и инвентаря из неблагополучных относительно оспы хозяйств. Всех новоприбывших овец и коз вдоль 30 пор удерживают на карантине, во время которого за ними устанавливают постоянный ветеринарный надзор. Перед введением к общей отаре овец купают в креолиновых ваннах. За каждой отарой закрепляют постоянные пастбища, водопой и пути перегона. Не допускаются контакты с отарами других хозяйств и индивидуальных собственников; обеспечивается постоянный надзор за состоянием здоровья животных. С целью профилактики оспы все поголовье овец в угрожающей зоне регулярно вакцинируют.
В случае возникновения оспы овец или коз и подтверждение диагноза хозяйство объявляют неблагополучным относительно оспы, вводят карантин, выставляют охранно-карантинный ветеринарно-милицейский пост с круглосуточным дежурством. В неблагополучном пункте запрещается введение и вывод всех видов животных; перегруппировка животных внутри хозяйства, а также выпас, поение и удержание больных овец вместе с здоровыми животными всех видов; вывоз из неблагополучного пункта фуража; использование овечьего молока и полученных из него продуктов в необеззараженном виде; стрижка овец неблагополучных отар к снятию карантина; торговля животными и продуктами животноводства; проведение выставок, ярмарок, базаров; проезд всех видов транспорта по неблагополучной территории. За неблагополучной отарой закрепляют постоянных надсмотрщиков, транспорт, пастбища.
Трупы погибших животных сжигают, запрещается снимать шкуры и использовать шерсть из трупов. Больных и подозреваемых относительно заболевания животных изолируют и лечат. Всех клинически здоровых овец и коз прививают против оспы одной из существующих вакцин в соответствии с действующей инструкцией. Проводят также вакцинацию животных в угрожающих относительно оспы хозяйствах.
Вдоль всего периода карантина через каждые 5 пор осуществляют механическое очищение и дезинфекцию помещений и других мест удержания овец. Карантин снимают через 20 пор после полного выздоровление, гибели или забоя последней больной овцы, а также после проведения окончательной дезинфекции помещений, выгульных дворов и отрядов, где находились больные на оспу овцы. Овец и животных других видов, которые находились в ячейки оспы, в теплую пору года нужно выкупать в 1 %-и эмульсии креолина. После снятия карантина всех овец, которые поступают в хозяйство, в период 30-дневного карантина привмвают против оспы. В дальнейшем на территории неблагополучного в минувшем пункте проводят ежегодную вакцинацию овец против оспы в течение трех следующих лет.
В случае появления оспы овец в местностях, где она не регистрировалась три года и большее, осуществляют немедленный забой всех овец неблагополучной группы на специально оборудованной забойной площадке с соблюдением соответствующих ветеринарно-санитарных правил. После установления диагноза на оспу Свиней Хозяйство объявляют неблагополучным относительно оспы и вводят в нем карантинные ограничения. Больных на оспу свиней изолируют и лечат; здоровых свиней прививают вакциной. Свиней, которые погибли с имеющимися клиническими признаками оспы, утилизируют вместе с шкурой. В ячейки оспы каждые 5 пор проводят дезинфекцию помещений, оснащений, инвентаря. Спецодежда и обуви дезинфицируют каждый день в параформалиновой камере или обрабатывают 3 %-г раствором хлорамина, 3 %-г раствором хлорной извести; руки дезинфицируют 1 %-г раствором хлорамина. Карантинные ограничения из неблагополучного относительно оспы свиней хозяйства снимают через 21 пору после полного выздоровление, гибели или забоя больных на оспу животных, обработки кожных покровов свиней 1-1,5 %-г раствором креолина или лизола, 0,3 %-г раствором едкого луга, а также проведение окончательных мероприятий.
Для дезинфекции помещений и предметов ухода применяют горячие 2-4 %-ой растворы едкого натра и калу; 20 %-ом смесь свежогашеной извести; просветленный раствор хлорной извести, которая содержит не менее чем 2 % активного хлора; горячий 3 %-и раствор сульфатно-карболовой смеси; 2 %-и раствор формальдегида. Гной обеззараживают вдоль Из недель биотермическим методом, гноивку — путем засыпания в гноєзборники негашегого или хлорной извести из расчета 1 часть извести на 5-6 частей гноивки. Одежда и обувь обслуживающего и ветеринарного персонала дезинфицируют в параформалиновой камере.
В случае появления оспы у Большого рогатого скота Больных животных изолируют и лечат. Молоко от больных коров пастеризуют.
Больных на оспу Коней Изолируют и лечат. В ячейках оспы проводят надлежащие ветеринарно-санитарные мероприятия.
Оспа у человека. У людей различают натуральную оспу, источником возбудителя которой есть больной человек, коровью оспу как профессиональную болезнь доярок. Особой злокачественной формой болезни есть геморагичная (черная) оспа человека. Возможная также «вакцинная» оспа.
Натуральная оспа распространяется путем контактов с клинически больными людьми, а также через одежду, постельное белье, посуда. Инкубационный период длится 12-13 пор. Ранними симптомами болезни есть трясучка, головная боль, состояние прострации. В первые 2-4 поры в 10 % случаев наблюдается появление нестойкого еритематозного или петехиального высыпание на боковых поверхностях живота, в подпахных впадинах, паховому участку. На 3 — 4-ту пору на слизистой оболочке рта и глотки, на коже лица, предплечье и кистях рук появляются оспенные высыпания, температура снижается, состояние больного улучшается. В следующие 5-6 пор высыпания проходят все специфические стадии развития, распространяясь по всему телу. В конце 3-ей недели наступает выздоровление, хотя рубцы остаются на все жизнь.
При злокачественной форме оспы высыпания приобретают сливного характера, в основе пустул развиваются геморагии. Прогноз неблагоприятный. Больную наиболее заразные на 3 — 10-ту пору болезни.
Коровья оспа наблюдается у доярок, рабочих животноводческих ферм, которые обслуживают инфицированный скот, ветеринарных специалистов. Поражение отмечаются на кистях рук, в особенности на пальцах и в первому межпальцевом промежутках, а также на предплечьях, лице. Возможное генерализованое высыпание, которое сопровождается трясучкой, регионарным лимфаденитом. Прогноз благоприятный. Оспенные высыпания проходят все стадии развития и исчезают вдоль 2-4 недель.
Вакцинная оспа есть следствием прививки человека против оспы. Может также возникнуть у лабораторных работников, которые изготовляют вакцину из телячьей лимфы. На 3 — 4-ту пору после заражения появляется небольшая красная папула, которая постепенно увеличивается, на 6 — 7-му пору превращается в везикулу, со временем на пустулу, которая подсыхает и образовывает корочку, которая в течение 3 недель облущивается, оставляя рубец.
Благодаря невероятным усилиям медицинских работников вдоль последнего столетия оспу человека ликвидирован на сегодня почти во всем мире.
источник
Доставка вакцин и сывороток осуществляется ТОЛЬКО в пределах Москвы в связи с особыми температурными условиями хранения и транспортировки.
Страницы: 3 (всего товаров — 61)
Форма выпуска: Упаковка 10 флаконов (10 доз) по 1 мл в каждом
Показания к применению: Для профилактики и лечения микроспории и трихофитии кошек
Единица измерения: Флакон
Форма выпуска: Упаковка 10 флаконов (10 доз) по 1 мл в каждом
Показания к применению: Профилактика и лечение дерматофитозов (трихофитии и микроспории) кошек, собак, пушных зверей и кроликов
Единица измерения: Флакон
Форма выпуска: Упаковка — 10 ампул по 10 доз в ампуле
Показания к применению: Профилактика миксоматоза и ВГБК кроликов
Единица измерения: 1 ампула (10 доз)
Наличие: ТОВАР ПОД ЗАКАЗ
звоните по тел. (495) 510-86-04; (495) 972-74-06
Форма выпуска: Флакон 100 мл (20 доз)
Показания к применению: Назначают телятам, ягнятам и поросятам в целях специфической профилактики энтерококковой инфекции в неблагополучных или угрожаемых по данному заболеванию хозяйствах и индивидуальном секторе
Единица измерения: Флакон
Наличие: ТОВАР ПОД ЗАКАЗ
звоните по тел. (495) 510-86-04; (495) 972-74-06
Форма выпуска: 1 ампула 50 доз
Показания к применению: Профилактическая иммунизация свиней против классической чумы
Единица измерения: Флакон
Наличие: ТОВАР ПОД ЗАКАЗ
звоните по тел. (495) 510-86-04; (495) 972-74-06
Форма выпуска: 1 флакон 100 доз
Показания к применению: Профилактическая иммунизация свиней против классической чумы
Единица измерения: Флакон
Наличие: ТОВАР ПОД ЗАКАЗ
звоните по тел. (495) 510-86-04; (495) 972-74-06
Форма выпуска: Однородная сухая пористая масса бежевого цвета для приготовления суспензии для инъекций. 10 доз — 1 флакон
Единица измерения: 10 доз
Наличие: ТОВАР ПОД ЗАКАЗ
звоните по тел. (495) 510-86-04; (495) 972-74-06
Форма выпуска: Упаковка 10 флаконов по 10 доз в каждом флаконе
Для кого предназначено: Крупного рогатого скота
Единица измерения: Упаковка
Наличие: ТОВАР ПОД ЗАКАЗ
звоните по тел. (495) 510-86-04; (495) 972-74-06
Форма выпуска: Флакон 100 мл
Для кого предназначено: для молодняка сельскохозяйственных животных и пушных зверей
Единица измерения: Флакон
Вакцина ПЛАР (инактивированная концентрированная против парвовирусной болезни, лептоспироза, болезни Ауески и РРС свиней), фл. 100 мл (50 доз)
Наличие: ТОВАР ПОД ЗАКАЗ
звоните по тел. (495) 510-86-04; (495) 972-74-06
Форма выпуска: Суспензия белого цвета. Флакон 100 мл содержит 50 доз вакцины
Показания к применению: Для активной иммунизации свиней против парвовирусной болезни, лептоспироза, болезни Ауески и репродуктивно-респираторного синдрома
Единица измерения: Флакон
Вакцина ПЛАХ (инактивированная концентрированная против парвовирусной болезни, лептоспироза, болезни Ауески и хламидиоза свиней), фл. 100 мл (50 доз)
Форма выпуска: Суспензия белого цвета. Флакон 100 мл содержит 50 доз вакцины
Показания к применению: Для специфической профилактики парвовирусной болезни свиней, лептоспироза, болезни Ауески и хламидиоза свиней
Единица измерения: Флакон
Наличие: ТОВАР ПОД ЗАКАЗ
звоните по тел. (495) 510-86-04; (495) 972-74-06
Форма выпуска: Флакон 25 доз
Показания к применению: Предназначена для профилактической иммунизации свиней, крупного рогатого скота и овец против болезни Ауески.
Единица измерения: Флакон
Наличие: ТОВАР ПОД ЗАКАЗ
звоните по тел. (495) 510-86-04; (495) 972-74-06
Форма выпуска: Флакон 10 доз
Показания к применению: Для профилактической иммунизации лошадей
Единица измерения: Флакон
Форма выпуска: Флакон 100 мл
Показания к применению: Для профилактической иммунизации сельскохозяйственных животных и пушных зверей против лептоспироза
Единица измерения: Флакон
Форма выпуска: Прозрачная бесцветная или слегка опалесцирующая жидкость от бесцветного до слегка желтоватого цвета, с серо-белым осадком на дне флакона. Упаковка 10 флаконов по 2 мл (10 доз)
Показания к применению: Назначают лошадям в неблагополучных по лептоспирозу хозяйствах, при выпасе животных в зоне природного очага лептоспироза, при выявлении в хозяйствах животных, сыворотка крови которых реагирует на лептоспироз в реакции микроагглютинации (РМА)
Единица измерения: 1 доза
Форма выпуска: Флакон 100 мл
Показания к применению: Для профилактической иммунизации свиней против лептоспироза
Единица измерения: Флакон
Форма выпуска: Сухая пористая масса бледно-желтого или слегка розоватого цвета. Выпускают во флаконах по 4 дозы
Показания к применению: Назначают лошадям в целях специфической профилактики ринопневмонии
Единица измерения: Флакон 4 дозы
Наличие: ТОВАР ПОД ЗАКАЗ
звоните по тел. (495) 510-86-04; (495) 972-74-06
Форма выпуска: В упаковке 10 флаконов (100 доз). В одном флаконе 10 доз
Показания к применению: Профилактическая и вынужденная вакцинация против рожи свиней
Единица измерения: Упаковка
Наличие: ТОВАР ПОД ЗАКАЗ
звоните по тел. (495) 510-86-04; (495) 972-74-06
Форма выпуска: Флакон 10 доз
Показания к применению: Профилактическая и вынужденная вакцинация против рожи свиней
Единица измерения: Флакон
Наличие: ТОВАР ПОД ЗАКАЗ
звоните по тел. (495) 510-86-04; (495) 972-74-06
Форма выпуска: Флакон 15 доз
Показания к применению: Профилактическая и вынужденная вакцинация против рожи свиней
Единица измерения: Флакон
Наличие: ТОВАР ПОД ЗАКАЗ
звоните по тел. (495) 510-86-04; (495) 972-74-06
Форма выпуска: Флакон 20 доз
Показания к применению: Профилактическая и вынужденная вакцинация против рожи свиней
Единица измерения: Флакон
Форма выпуска: Вакцина состоит из двух компонентных систем: первая Вангард DA2Pi — представляет собой лиофильно высушенную пористую массу бежевого цвета; вторая Вангард CPV-L — представляет собой прозрачную жидкость светло-розового цвета. Каждую компонентную систему вакцины расфасовывают по 1 дозе в стеклянных флаконах
Показания к применению: Назначают щенкам и взрослым собакам в целях специфической профилактики чумы плотоядных и инфекционного гепатита, аденовироза, парагриппа, парвовирусного энтерита и лептоспироза
Единица измерения: 1 доза
Форма выпуска: Вакцина состоит из двух компонентов: сухой компонент представляет собой однородную лиофильно высушенную пористую массу желто-белого цвета, жидкий – гомогенную взвесь светло-розового цвета. Компоненты вакцины расфасованы по 1 дозе в стерильные стеклянные или пластиковые флаконы
Показания к применению: Назначают щенкам и взрослым собакам для профилактики чумы, инфекционного гепатита, аденовирусной и коронавирусной инфекции, парагриппа плотоядных, парвовирусного энтерита и лептоспироза
Единица измерения: 1 доза
Форма выпуска: Вакцина состоит из жидкого компонента расфасованной в ампулы по одной дозе (2, 2 мл), представляющей собой гомогенную суспензию розового цвета и сухого компонента расфасованного в ампулы по одной дозе, представляющей собой сухую пористую массу светло-желтого цвета с розовым оттенком.
Показания к применению: Профилактика болезней собак: чумы плотоядных, инфекционного гепатита, аденовироза, парвовирусного энтерита и лептоспироза
Единица измерения: Упаковка
Форма выпуска: Флакон 1 мл (1 доза)
Показания к применению: Назначают для профилактики бешенства у собак и кошек
Единица измерения: 1 доза
Форма выпуска: Вакцина состоит из 2 компонентов. Жидкой инактивированной вакцины Пентавак, используемой в качестве растворителя, фасуют в ампулы по 2, 2 мл (1 доза). Сухой Дивак, фасуют в ампулы, заполненные инертным газом.
Показания к применению: Профилактика болезней собак: бешенства, чумы плотоядных, парвовирусного энтерита, инфекционного гепатита, аденовироза и лептоспироза
Единица измерения: Упаковка
Форма выпуска: Вакцина состоит из двух компонентов, которые смешиваются в момент применения: лиофилизат для приготовления суспензии для инъекций (живая вакцина) – сухая однородная пористая масса кремового цвета;
жидкий компонент (инактивированная вакцина) – суспензия от кремового до светло-желтого цвета.
1 доза — 2 флакона по 1 мл.
Показания к применению: Профилактика чумы, инфекционного гепатита, аденовирусной инфекции, парагриппа, парвовирусного энтерита и лептоспироза собак
Единица измерения: доза
КОМБОВАК Вакцина против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи, респираторно-синцитиальной, рота- и коронавирусной болезни телят, фл. 100 мл
Наличие: ТОВАР ПОД ЗАКАЗ
звоните по тел. (495) 510-86-04; (495) 972-74-06
Форма выпуска: Флакон 100 мл (50 доз)
Показания к применению: Применяют для иммунизации коров и телят в хозяйствах, неблагополучных по желудочно-кишечным и респираторным болезням новорожденных телят
Единица измерения: Флакон
Форма выпуска: Упаковка — 4 ампулы по 1 дозе в каждой
Для кого предназначено: Для собак, кошек, пушных зверей, кроликов и нутрий
Показания к применению: Вакцина для лечения и профилактики трихофитии и микроспории
Единица измерения: Упаковка
МУЛЬТИКАН 4 Вакцина против чумы, аденовирусных инфекций, парвовирусного и коронавирусного энтеритов собак, 2 фл. (1 доза)
Форма выпуска: 1 доза — 2 флакона
Показания к применению: Против чумы, парвовирусного энтерита, аденовирусных и коронавирусных энтеритов собак
Единица измерения: 1 доза
Товары для животных:
Разделы каталога:
Подпишись на новости
ветаптеки VETLEK!
источник
Вакцина предназначена для профилактической иммунизации овец против оспы и заразного узелкового дерматита (нодулярного дерматита) КРС в неблагополучных и угрожаемых пунктах и хозяйствах. Лекарственная форма – лиофилизированная масса. По внешнему виду вакцина представляет собой однородную сухую пористую массу светло-желтого цвета, полностью растворяющуюся в стерильном 0,9% растворе хлорида натрия (физиологическом растворе) в течение 1,5 минуты.
Вакцина предназначена для профилактической иммунизации овец против оспы и заразного узелкового дерматита (нодулярного дерматита) КРС в неблагополучных и угрожаемых пунктах и хозяйствах. Запрещено прививать клинически больных и/или ослабленных животных.
Способ вакцинации
Вирусвакцину вводят овцам подкожно в бесшерстстый участок кожи (подмышечная область, подхвостовая складка) с соблюдением правил асептики в дозе 1 см3. Перед применением сухую вирусвакцину, соблюдая правила асептики, растворяют охлажденным до 4 °C физиологическим раствором. Для чего во флакон, содержащий 50 прививных доз вирусвакцины, при помощи шприца вносят 2 см3, а во флакон, содержащий 100 прививных доз –4 см3 физиологического раствора и тщательно встряхивают до полного ресуспендирования. После ресуспендирования вирусвакцину объединяют с 48 см3 или 96 см3 (для получения 50 и 100 прививных доз) стерильного физиологического раствора и тщательно встряхивают. Для вакцинации используют шприцы и иглы, которые стерилизуют кипячением в течение 20 минут. Допускается использование одноразовых шприцов. Дезинфекция шприцов и игл химическими средствами не допускается. Поверхность кожи в месте введения вирусвакцины обрабатывают 70% этиловым спиртом или другими антисептиками. При плановой вакцинации прививают овец с 3-месячного возраста. Ревакцинацию животных проводят через каждые 12 месяцев. В неблагополучном пункте и хозяйствах угрожаемой зоны вакцинируют животных всех возрастных групп, не имеющих признаков заболевания оспой, не зависимо от срока предыдущей вакцинации. При этом молодняк в возрасте до 6 месяцев прививают двукратно с интервалом 14 суток. Ревакцинируют молодняк через 6–7 месяцев, а взрослых животных – через 12 месяцев. При плановой вакцинации для профилатики нодулярного дерматита КРС прививают животных с 3х месячного возраста. Ревакцинацию животных проводят через каждые 6 месяцев. В неблагополучном пункте и хозяйствах угрожаемой зоны вакцинируют животных всех возрастных групп, не имеющих признаков заболевания нодулярным дерматитом, не зависимо от срока предыдущей вакцинации. При этом молодняк в возрасте до 6 месяцев прививают двукратно с интервалом 14 суток. Через 6 месяцев молодняк и взрослых животных ревакцинируют. Вирусвакцину вводят КРС подкожно в область средней трети шеи, с соблюдением правил асептики, в дозе 1 см3. Перед применением сухую вирусвакцину, соблюдая правила асептики, растворяют охлажденным до 4 °C физиологическим раствором. Для чего во флакон, содержащий 5 прививных доз вирусвакцины, при помощи шприца вносят 2 см3, а во флакон, содержащий 10, 20 или 50 прививных доз –4 см3 физиологического раствора и тщательно встряхивают до полного ресуспендирования. После ресуспендирования вирусвакцину объединяют с 3 см3 (для получения 5 прививных доз), 6 см3 (для получения 10 прививных доз), 16 см3 (для получения 20 прививных доз), 46 см3 (для получения 50 прививных доз) стерильного физиологического раствора и тщательно встряхивают.
Вирусвакцина вызывает формирование иммунного ответа у привитых овец против оспы и заразного узелкового дерматита (нодулярного дерматита) КРС через 5 суток после однократного применения, продолжительностью не менее 12 месяцев. Вакцина безвредна, лечебными свойствами не обладает.
Условия хранения
Вакцину хранят и транспортируют в сухом темном месте при температуре от 2 °C до 8 °C. Срок годности вакцины 24 месяца с даты выпуска при соблюдении условий хранения и транспортирования. По истечении срока годности вирусвакцина к применению не пригодна.
источник
Минимальный заказ — 100 шт.
Нодулярный дерматит крупного рогатого скота (кожная бугорчатка, кожно-узелковая сыпь, узелковая экзантема), болезнь «кожного отека» у буйволов (Dermatitis nodularis bovum) — инфекционная болезнь крупного рогатого скота, сопровождающаяся лихорадкой, отеком подкожной соединительной ткани и органов, образованием кожных узлов, поражением глаз, слизистой оболочки дыхательного и пищеварительного трактов.
Экономический ущерб. Летальность при нодулярном дерматите крупного рогатого скота не превышает 10%. В то же время по данным ряда авторов экономический ущерб значительный, ввиду того что снижается молочная и мясная продуктивность, качество кожевенного сырья, нарушается половая цикличность у коров, а у быков развивается временная половая стерильность.
Клинические признаки. Инкубационный период — от 3 до 30 дней, чаще 7-10 дней. Продромальный период короткий. При острой форме в начальной стадии болезни после повышения температуры тела до 40°С у животного происходит снижение аппетита, появляется слезотечение, серозно-слизистые выделения из носа. Через 48 часов на коже шеи, груди, живота, паха, конечностей, головы, вымени образуются плотные круглые или несколько вытянутые узелки с плотной поверхностью, диаметром 0,5-7см, высотой до 0,5см. Число узелков колеблется от десяти до нескольких сотен. Их легко прощупать, и они более заметны у животных с короткой шерстью, гладкой, на бесшерстных или слабо покрытых шерстью участках. Иногда узелки сливаются.
Через несколько часов после появления по краям узелков начинает отделяться эпидермис, а в центре образуется характерная впадина и начинается некроз ткани. Некротические участки окаймлены валиком шириной 1-3мм, состоящим из грануляционной ткани. Через 7-20 дней после появления узелка некротизированный участок секвестируется, и его можно извлечь или, подсыхая, он отпадает. Тогда он будет иметь вид пробки размером 1×2см.
Если процесс не осложняется, то образовавшаяся полость заполняется грануляционной тканью и зарастает непигментированной кожей с шерстью. Если же процесс осложнился, то образуются язвы. Несеквестированные узлы уплотняются и в таком состоянии могут оставаться до года и более. Отек, появившийся в начале болезни или позже, может увеличиваться и распространяться на соседние области. У лактирующих коров на вымени часто появляются узелки. Молоко становится розоватым, густым, сдаивается болезненно по каплям, а при нагревании застывает в гель. Лимфатические узлы увеличены и легко пальпируются, особенно предлопаточные.
При тяжелой форме отмечается длительная лихорадка, потеря аппетита, исхудание животного. Узелки прощупываются по всему туловищу, отмечаем сильное поражение органов дыхания и желудочно-кишечного тракта. На слизистой оболочке образуются плоские круглые эрозии и серовато-желтые некротические бляшки. В дальнейшем отмечают их нагноение изъязвления. На веках появляются эрозии и язвочки, роговица мутнеет, наступает частичная или полная слепота. Изо рта выделяется густая тягучая слюна, из носа — гнойная слизь со зловонным запахом. Если изъязвления в дыхательных путях сопровождаются выраженным отеком, то животное нередко погибает от удушья.
Атипичная форма нодулярного узелкового дерматита наблюдается у новорожденных телят и характеризуется перемежающей диареей, лихорадкой, при отсутствии заметных признаков кожных поражений.
Инанпарентная форма протекает бессимптомно, но сопровождается вирусоносительством и образованием вируснейтрализующихся антител.
У выздоровевших животных отеки и узелки исчезают, шерсть на пораженных участках тела выпадает, кожа трескается и отпадает лоскутками («лоскутная болезнь кожи») и постепенно заменяется новой. Наиболее часто «бугорчатка» осложняется трахеитом, пневмонией, сопровождающейся затрудненным дыханием, поражением половых органов, у самок-отсутствием эструса и пропуском 4-6 половых циклов, у самцов — временной половой стерильностью. Болезнь может осложняться разной микрофлорой; в этом случае у больных животных нередко поражаются суставы.
Профилактика и меры борьбы. Для иммунизации крупного рогатого скота против бугорчатки, вызываемой вирусами типа Nettling, применяют три штамма вируса оспы овец, выращенных в культурах тканей семенников ягнят и хориоаллантоисе куриных эмбрионов. Вакцинацию проводят подкожно. Примерно у 10% вакцинированных животных наблюдают местные реакции, выражающиеся в образовании узелка и припухлости, которые исчезают не позднее чем через 2 недели. Длительность иммунитета 1 год. Организуют и проводят мероприятия, препятствующие возникновению и распространению болезни. При появлении ее в ранее благополучных районах немедленно убивают всех заболевших и подозрительных по заболеванию животных и проводят тщательную дезинфекцию и дезинсекцию. Строго выполняют все правила ветеринарно-санитарных и карантинно-ограничительных мероприятий. В стационарно-неблагополучных районах больных и подозрительных по заболеванию животных тщательно изолируют, обеспечивают их полноценными витаминизированными кормами. Лечение симптоматическое.
При нодулярном дерматите КРС, животных прививают с 3-х месячного возраста однократно подкожно. Животных возрастной группы 3-6 месяцев прививают в 5-кратной овечьей дозе, а животных возрастной группы старше 6 месяцев в 10-кратной овечьей дозе с последующей ревакцинацией через 12 месяцев в 10-кратной овечьей дозе.
Обязательно ознакомьтесь с полным текстом инструкции по применению вирус-вакцины!
источник
В последние годы для активной иммунизации против оспы овец с положительными результатами применяют гидроокись-алюминиевую формолвакцину против оспы овец, предложенную научным сотрудником Государственного научно-контрольного института ветеринарных препаратов Н. В. Лихачевым.
Вакцину применяют для активной иммунизации как в местах, неблагополучных в отношении данной инфекции, так и с профилактической целью в благополучных по оспе овцеводческих хозяйствах.
Лечебными свойствами вакцина не обладает, а поэтому в неблагополучных хозяйствах прививаются только здоровые животные. Вакциной прививают (за исключением больных) всё поголовье: молодняк различных возрастов и маток, как холостых, так и суягных. Больным оспой овцам инъицируют сыворотку против оспы овец.
Перед прививкой флаконы с вакциной тщательно встряхивают до получения равномерной взвеси. Встряхивание повторяют каждый раз, перед тем как набрать вакцину в шприц. Вакцина инъицируется подкожно в области средней части шеи, при этом место прививки выстригают и дезинфицируют. Вакцину инъицируют в дозе 5 см 3 однократно. На месте инъекции у привитых животных образуется небольшое утолщение вследствие слабой рассасываемости гидроокиси алюминия.
У привитых животных не должно быть клиники общего переболевания оспой или оспенного процесса на месте инъекции вакцины. Эти животные безопасны в смысле рассеивания вируса оспы. Иммунитет у привитых овец наступает через 10—12 дней. В течение указанного срока привитые овцы не должны соприкасаться с больными оспой. Продолжительность иммунитета свыше 4 месяцев.
Для активной иммунизации овец против оспы применяют также овину или овину, заключённую в желатину (желатинизированиую овину). Овину прививают всем овцам в неблагополучных по оспе пунктах.
Овина и желатинизированная овина рассылается в ампулах ёмкостью в 1 см 3 . Одновременно с овиной рассылают физиологический раствор во флаконах ёмкостью в 50 см 3 .
Перед прививкой овину, после тщательного встряхивания ампулы, вливают во флаконы с физиологическим раствором с таким расчётом, чтобы получить разведение 1 :50, т.е. 1 см 3 овины на 50 см 3 физиологического раствора. Желатинизированную овину перед прививками предварительно расплавляют, для чего ампулы с овиной погружают в ванночку, наполненную тёплой водой (+25—+30°С). Расплавленную, как указано овину, разводят физиологическим раствором в отношении 1 :50. Овина должна быть защищена от прямых солнечных лучей и высокой температуры. Перед тем как набрать овину в шприц, флакон с разведённой овиной тщательно встряхивают. Шприц с имеющейся в нём овиной перед каждым впрыскиванием также встряхивают. Доза овины, разведённой указанным способом, равна 0,1 см 3 , а желатинизированной овины—0,2 см 3 , независимо от возраста прививаемых овец.
Овину вводят шприцем в области нижней бесшёрстной поверхности хвоста или на внутренней поверхности уха. Иглу вкалывают в толщу кожи с последующим незначительным оттягиванием её обратно. Место прививки сначала тщательно обтирают ватой, овлажняют водой, обсушивают сухой ватой, а затем обтирают ватой, смоченной спиртом, и обсушивают. Применение других дезинфицирующих средств не допускается.
Признаки привившейся оспы определяют тщательным поголовным осмотром привитых овец через 10—12 дней после прививки. У привитых овец на месте прививки должна быть папула или пузырь. У животных повышается температура, на бесшёрстных местах иногда появляется слабая папулёзная сыпь, исчезающая через несколько дней. У привитых овиной овец иммунитет наступает примерно через 20 дней и сохраняется до года и более.
Всех овец, не давших реакции, после просмотра вторично прививают овииой в той же дозе или методом овинной школки. Для этого берут опец, привитых овиной, на 10—11-й день после прививки с непрорвавшимся пузырём 1½ — 2½ в диаметре, содержащим чистую прозрачную лимфу. Поверхность пузыря и окружающую кожу осторожно очищают спиртовым тампоном и при высыхании пузырь прокалывают у основания. Вытекающую из него жидкость—лимфу—собирают и иглой прививают овцам. Овцы, привитые овиной и овнной-школкой, карантинируются в течение двух месяцев. Не следует прививать овиной и овиной-школкой маток во второй половине беременности и ягнят до трёх месяцев. Указанные группы животных прививают противооспенной сывороткой.
При осложнениях от прививки вводят оспенную сыворотку в лечебных дозах. Привитые овиной овцы рассматриваются как больные, за ними организуется особо тщательный уход до 20 дней, их обеспечивают лучшими кормами, а при необходимости применяют лечение. В холодное время года должно быть уделено особое внимание обеспечению этих овец кошарами и защите их от холода, ветра, дождя и снега. Указанные меры необходимо проводить особенно тщательно, если овцы острижены вскоре после прививки.
Противооспенную сыворотку применяют с профилактической и лечебной целью. Дозы сыворотки против оспы для разных возрастов овец, прививаемых с профилактической целью, следующие (в см 3 ):
ягнятам весом до 15 кг . . 10
овцам » от 15 до 25 кг . . 10—15
С лечебной целью сыворотку применяют в двойных дозах. Иммунитет при пассивных прививках сывороткой сохраняется до 12—15 дней.
Сыворотку вводят подкожно, на внутренней поверхности бедра.
Допускаются также симультанные прививки, т. е. Одновременное введение сыворотки и овины. При этом сыворотку вводя г подкожно на внутренней поверхности бедра, а овину в установленных дозах внутрикожно, на внутренней бесшёрстной поверхности хвоста.
Через 1½ месяца после прививки формолвакциной и через 20 дней после прививки овнной ветперсонал учитывает результаты прививки и акт отсылает в контрольную лабораторию биофабрики, изготовившей препарат.
источник
ГОСТ 33275-2015 Средства лекарственные для ветеринарного применения. Вакцины против оспы птиц. Технические условия
Текст ГОСТ 33275-2015 Средства лекарственные для ветеринарного применения. Вакцины против оспы птиц. Технические условия
МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СОВЕТ ПО СТАНДАРТИЗАЦИИ, МЕТРОЛОГИИ И СЕРТИФИКАЦИИ
INTERSTATE COUNCIL FOR STANDARDIZATION, METROLOGY AND CERTIFICATION
Средства лекарственные для ветеринарного применения
Цели, основные принципы и основной порядок проведения работ по межгосударственной стан» дартизации установлены ГОСТ 1.0—92 «Межгосударственная система стандартизации. Основные положения» и ГОСТ 1.2—2009 «Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные. правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, применения, обновления и отмены»
1 РАЗРАБОТАН Федеральным бюджетным учреждением «Всероссийский государственный Центр качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов» (ФГБУ «ВГНКИ»)
2 8НЕСЕН Федеральным агентством по техническому регулированию и метрологии (Росстан-
3 ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол от 18 июня 2015 г. № 47)
За принятие проголосовали:
Краткое наименование страны по МК 5 С 5 Л1 И П Д »-’
Должны быть иммуногенными
4.4 Фасование и лиофилизация
Вируссодержащую суспензию (гомогенат) с защитной средой расфасовывают по 1—5 см 3 в стерильные ампулы или по 2—20 см 3 в стерильные флаконы соответствующей вместимости, замораживают и лиофилизируют.
После лиофилизации ампулы запаивают под вакуумом, флаконы укупоривают стерильными резиновыми пробками и обжимают алюминиевыми колпачками.
4.5.1 Флаконы (ампулы) с вакцинами упаковывают в картонные коробки ло ГОСТ 12301 или пачки из картона по ГОСТ 12303. или блистеры излолистироласналичием гнезд или перегородок, обеспечивающих сохранность вакцин при транспортировании. В каждую коробку (лачку, блистер) вкладывают инструкцию по применению вакцин.
Примечание — вакцины могут быть упакованы в комплекте с разбавителем для вакцин против оспы птица объеме, соответствующем числу доз вакцины во флаконе.
4.5.2 Коробки (лачки, блистеры) с вакциной упаковывают в ящики из гофрированного картона по ГОСТ 9142 или другие аналогичные, обеспечивающие сохранность вакцины при транспортировании. В каждый ящик вкладывают четыре-пять экземпляров инструкции по применению и упаковочный лист с указанием:
• числа коробок (пачек, блистеров) в ящике;
— фамилии или номера упаковщика.
Примечание — Допускается не вкладывать упаковочный лист а транспортную тару. Масса ящиков с вакциной должна быть не более 15 кг.
4.6.1 Каждая упаковочная единица должна иметь маркировку, характеризующую вакцину и отвечающую требованиям нормативных документов, действующих на территории государства, принявшего стандарт.
4.6.2 На флаконы (ампулы)с вакциной наносят маркировку с указанием:
— наименования и товарного знака организации-производителя;
• числа доз вакцины во флаконе (ампуле);
— объема вакцины во флаконе (ампуле);
• дозировки (содержания вируса в вакцинальной дозе):
— даты выпуска (месяца и года);
— срока годности (месяца и года);
• надписи: «Для ветеринарного применения».
На этикетку может быть нанесена дополнительная информация.
4.6.3 На коробку (пачку, блистер) с вакциной наносят информацию с указанием:
— наименования организации-производителя, ее адреса, телефона и товарного знака (в том числе страны);
• числа флаконов (ампул) в коробке (пачке, блистере);
• объема вакцины во флаконе (ампуле);
• числа доз во флаконе (ампуле);
— дозировки (содержания вируса в вакцинальной дозе);
• даты выпуска (месяца и года);
— срока годности (месяца и года);
• обозначения настоящего стандарта;
— информации о подтверждении соответствия;
• номера регистрационного удостоверения;
• надписи: «Для ветеринарного применения»
4.6.4 На каждую единицу транспортной тары (ящик) наносят транспортную маркировку по ГОСТ 14192 с указанием манипуляционных знаков: «Хрупкое. Осторожно». «Пределы температуры». «Верх».
4.6.5 Маркировка, характеризующая упакованную в транспортную тару продукцию, должна содержать следующие данные:
— наименование организации-производителя, ее товарный знак, адрес (в том числе страну), телефон:
— число коробок (пачек, блистеров) в ящике;
• срок годности (месяц и год);
• условия хранения и транспортирования;
— надпись: «Для ветеринарного применения».
5.1 По биологической безопасности вакцина должна соответствовать требованиям ГОСТ 12.1.008.
5.2 К работе по производству вакцины допускаются лица, прошедшие обучение по безопасности труда в соответствии с требованиями ГОСТ 12.0.004.
5.3 Организаций процесса производства вакцины должна соответствовать требованиям ГОСТ 12.3.002. производственное оборудование — ГОСТ 12.2.003.
5.4 Средства защиты работающих — по ГОСТ 12.4.011, воздух рабочей зоны должен соответствовать требованиям ГОСТ 12.1.005.
5.5 Контроль за выбросами во внешнюю среду должен быть организован в соответствии с ГОСТ 17.2.3.02.
5.6 Обеззараживание вакцин с истекшим сроком годности, серий, не выдержавших контрольных испытаний, а также флаконов (ампул) с вакциной и других материалов и инструментов, оставшихся после испытаний, проводят путем автоклавирования в течение 1 ч при температуре (126 ± 2) X и давлении 1,5 атм (151.99кПа или 1.5 кгс/см 2 ) и утилизируют.
6.1 Каждая серия вакцины должна быть принята (проверена) в организации-производителе отделом, отвечающим за проведение контроля качества продукции, в соответствии с ГОСТ 31929.
6.2 Серией вакцины считают определенное количество вакцины, произведенное за один технологический цикл и оформленное одним документом о качестве.
6.3 В документе о качестве указывают:
• дату изготовления (число, месяц, год);
• объем серии в единицах объема или штуках:
• результаты испытания по показателям качества;
• срок годности (месяц и год);
• номер и дату выдачи документа о качестве;
• заключение и подпись уполномоченного лица, выдавшего документ о качестве.
6.4 Для контроля качества вакцины от каждой серии отбирают выборку в соответствии с ГОСТ 31929. Из выборки выделяют среднюю пробу в количестве 40 флаконов (ампул). 20 флаконов (ампул)сеакциной используют для проведения испытания по показателям качества, указанным етабли-це 1. а 20 флаконов (ампул) после проведения испытаний по показателям качества направляют в архив отдела, отвечающего за контроль качества готовой продукции организации-производителя.
6.5 Архивные пробы маркируют надписью «Архив» и снабжают документом с указанием:
• даты изготовления (числа, месяца и года):
• должности и подписи лица, отобравшего пробы;
• срока годности (месяца и года):
• обозначения настоящего стандарта:
• срока хранения проб в архиве.
6.6 При неудовлетворительных результатах испытаний хотя бы по одному из показателей проводят повторные испытания по этому показателю на удвоенном количестве проб вакцины, отобранной от той же серии, и на удвоенном количестве материалов и животных. Результаты повторного испытания считают окончательными и распространяют на всю серию.
6.7 В случае неудовлетворительных результатов повторного испытания серию вакцины считают не соответствующей требованиям настоящего стандарта, ее бракуют и уничтожают в соответствии с 5.6.
7.1 Условия выполнения испытаний
7.1.1 Общие требования проведения микробиологического анализа и работы с микроорганизма ми III—IV групп патогенности — по ГОСТ ISO 7218.
7.1.2 Общие требования к помещениям — по ГОСТ ISO 7218.
7.1.3 Требования кперсоналу — по ГОСТ ISO 7218. ГОСТ ИСО/МЭК17025.
К проведению испытаний допускаются квалифицированные сотрудники, имеющие опыт работы с микроорганизмами III—IV групп патогенности, изучившие методики выполнения микробиологических работ.
7.2 Средства измерения, аппаратура, материалы, реактивы и посуда
7.2.1 Для проведения испытаний вакцин используют:
• часы наручные по ГОСТ 10733 или секундомер;
• термостат, способный поддерживать температуру (37,0 ± 0.5) С;
• титратор объемометрический для определения влаги по Карлу Фишеру;
• инъектор игольный перфорирующего типа;
• СПФ-цыплят в возрасте 15сут;
• СПФ-змбрионы курсами , десятисуточной инкубации;
• штамм вируса оспы кур вирулентный с инфекционной активностью не менее 4.4 !дИД , ;
• наборы диагностические для постановки ИФА и РТГА для выявления в сыворотках крови 1 цыплят наличия антител к вирусам;
• тест-системы для постановки ПЦР;
• раствор натрия хлорида 0.9 %-ный изотонический с pH (7.0 ± 0.2) или разбавитель для сухих вакцин против оспы птиц;
— воду дистиллированную по ГОСТ 6709;
• шприцы инъекционныеоднократногоприменениястврильныелоГОСТ1507886-1 вместимостью 1 см 3 или шприцы многократного применения по ГОСТ 22967;
• иглы инъекционные однократного применения стерильные по Г ОСТ ISO 7864 или иглы многократного применения по ГОСТ 25377;
• пробирки стеклянные по ГОСТ 25336;
— пипетки стеклянные градуированные выдувные по ГОСТ 29230 вместимостью 1.5 и 10 см 3 ;
7.2.2 Указанная В7.2.1 птицадолжнабыть ранее не иммунизирована вакцинами лротиеоспы птиц.
7.2.3 Допускается применение других средств измерений с метрологическими характеристиками, а также аппаратуры, материалов, реактивов и посуды по качеству не ниже указанных.
7.3 Определение внешнего вида
Для определения внешнего вида все флаконы (ампулы) с вакциной просматривают визуально. Наличие механической примеси и других посторонних включений проверяют в ресуспензированной вакцине. Флаконы (ампулы) с ресуспензированной вакциной встряхивают и просматривают в проходящем свете. Одновременно проверяют прочность укупорки, целостность флаконов и правильность маркировки.
7.4 Определение массовой доли влаги
Массовую долю влаги определяют по Г ОСТ24061 или с применением автоматического оборудования типа объемометрического титратора. Определение массовой доли влаги проводят в соответствиис инструкцией к прибору.
7.5 Определение вакуума в ампулах
Определение наличия вакуума в ампулах проводят по ГОСТ 28083.
7.6 Определение времени ресуспенэирования
Для определения времени ресуспензирования в три флакона (ампулы) с лиофилиэированкой вакциной вносят разбавитель для живых сухих вакцин против ослы лтиц или дистиллированную воду, или 0.9 %-ный раствор натрия хлорида изотонический в объеме, соответствующем объему вакцины до лиофилизации. Флаконы встряхивают и определяют время ресуслензирозания вакцины с помощью наручных часов по ГОСТ 10733 или секундомера.
7.6.2 Обработка результатов
Содержимое флаконов (ампул) должно ресуслензироваться в течение от 1 до 5 мин с образованием гомогенной взвеси.
7.7 Определение контаминации бактериальной и грибной микрофлорой
Определение контаминации бактериальной и грибной микрофлорой проводят в соответствии с
7.8 Определение контаминации микоплаэмами
Определение контаминации микоплаэмами проводят в соответствиис требованиями ГОСТ 28085.
7.9 Определение контаминации посторонними вирусами
7.9.1 Определение контаминации посторонними вирусами с использованием ПЦР
7.9.1.1 Проведение испытания
Проверку контаминации вакцины посторонними вирусами проводят с использованием метода ПЦР по нормативным документам, действующим на территории государства, принявшего стандарт, или с использованием соответствующих тест-систем.-
7.9.1.2 Обработка результатов
Проведенные исследования методом ПЦР должны иметьотрицательные результаты, т.е. евакци-не не должны обнаруживаться фрагменты геномов вирусов ньюкаслской болезни, инфекционной бурсальной болезни, инфекционного бронхита кур. синдрома снижения яйценоскости, инфекционного ларинготрахеита птиц, инфекционной анемии цыплят, инфекционного энцефаломиелита и реовирусов птиц.
7.9.2 Определение контаминации посторонними вирусами с использованием иммунологических методов
7.9.2.1 Проведение испытания
Определение контаминации посторонними вирусами с использованием иммунологических методов (ИФА и Р’ГГА) проводят в случае получения положительного ил и сомнительного результата при ПЦР.
вакцину из трех флаконов (ампул) ресуспензируют по 7.6.1. содержимое флаконов (ампул) объединяют. Берут 15 СПФ-цыплят. десять из которых вакцинируют внутрикожно в перепонку крыла инъек* тором и окулярно в объеме 0.03 см 3 однократно, а пять цыплят оставляют невакцинированными (контрольные птицы). Через 14 сут от вакцинированных и контрольных птиц получают пробы сывороток крови, которые исследуют на присутствие антител к посторонним вирусам согласно инструкциям, прилагаемым к диагностическим наборам.
7.9.2.2 Обработка результатов
8 сыворотках крови вакцинированных и контрольных цыплят антитела к посторонним вирусным контаминантам должны отсутствовать.
7.10 Определение безвредности
7.10.1 Общие требования поолределениюбезвредности — по ГОСТ 31926.
7.10.2 Проведение испытания
вакцину из трех флаконов (ампул) ресуспензируют по 7.6.1. содержимое объединяют и вводят внутрикожно четырем цыплятам в три точки перепонки крыла с помощью инъектора. За птицей наблюдают в течение 21 сут.
7.10.3 Обработка результатов
У всех цыплят на месте введения должна проявляться местная реакция (узелки, оспины в месте укола). Отсутствие заболевания и генерализации оспенного процесса на коже и слизистых оболочках рта и верхних дыхательных путей, а также конъюнктивита указывает на безвредность вакцины.
7.11 Определение инфекционной активности
7.11.1 Определение инфекционной активности на куриных эмбрионах
7.11.1.1 Подготовка к испытанию
Вакцину из трех флаконов (ампул) ресуспензируют по 7.6.1, содержимое объединяют. Из объединенной пробы готовят десятикратные разведения вакциныот 10- 1 до 10-*. длячвгоберут шесть пенициллиновых флаконов или пробирок, в каждый (ую) из которых пипеткой вносят по 4,5 см 3 0.9 %-ного раствора натрия хлорида изотонического. Содержимое флакона (пробирки) с ресуспензированной вакциной тщательно перемешивают встряхиванием, затем другой пипеткой отбирают 0.5 см 3 вакцины, переносят в первую пробирку и перемешивают, затем из первой пробирки берут 0.5 см 3 полученной взвеси и переносят во вторую пробирку и т. д.
7.11.1.2 Проведение испытания
Инфекционную активность вакцины оценивают на СПФ-эмбрионах. Для испытания каждого разведения вакцины используют не менее пяти эмбрионов и не менее двух эмбрионов используют для контроля. Заражение эмбрионов проводят на ХАО в искусственно созданную (боковую) воздушную камеру.
Для этого эмбрионы овоскопируют и отмечают на скорлупе графитным карандашом границу воздушной камеры и бессосудистый участок ХАО с боковой стороны эмбриона. Скорлупу эмбриона обрабатывают антисептическим раствором. В скорлупе образуют два отверстия диаметром 1—2 мм в отмеченных участках: одно — со стороны естественной воздушной камеры, другое — сбоку (не повреждая при этом целостность ХАО). Эмбрионам придают горизонтальное положение, обращая второе отверстие вверх. Через первое отверстие в естественной воздушной камере эмбриона кратковременно создают отрицательное давление (отбирая резиновой грушей около 0.2 см 3 воздуха), что в свою очередь приводит к проникновению воздуха через второе отверстие, отслаиванию ХАО от скорлупы и образованию искусственной воздушной камеры. Далее в искусственную воздушную камеру вводят инъекционную иглу (на глубину не более 2—3 мм) и вносят определенное разведение вакцины в объеме 0.2 см 3 . После этого оба отверстия в скорлупе заливают стерильным расплавленным парафи-ном.
Инфицированные эмбрионы в течение 24 ч сохраняют в горизонтальном положении.
Аналогичную операцию проводят и в контрольной группе эмбрионов, где вместо разведения вакцины в искусственнуювоэдушную камеру на ХАО вносят 0,9%-ный раствор натрия хлорида изотонического в объеме 0,2 см 3 .
Инфицированные и контрольные эмбрионы инкубируют при температуре (37.0 ± 0.5) *С и относительной влажности воздуха 60 %—70 % в течение семи суток, ежедневно овоскопируя.
Эмбрионы, погибшие в первые 36 ч после заражения, считают неспецифически павшими и исключают из дальнейшей работы. Овоскопию эмбрионов, инкубируемых свыше 36 ч, проводят ежедневно, во время просмотра оценивают степень развития инфекционного процесса, обусловленного вакцинным вирусом оспы птиц. Определяют изменения сосудистого русла и структуры ХАО эмбриона (возникновение характерных пятен или узелков, имеющих большую оптическую плотность сравнительно с нормальной тканью ХАО). При необходимости картину воспалительного процесса ХАО на месте внесения вируссодержащего материала сравнивают с контролем.
На седьмые сутки после заражения эмбрионы охлаждают до температуры 2 «С—6’’С и проводят их вскрытие, делая отверстие в скорлупе со стороны острого конца яйца с целью обнаружения признаков размножения вакцинного вируса оспы птиц в ткани ХАО. Установленные у эмбриона (живого или погибшего) специфические для вируса ослы птиц поражения ХАО (локализованные на месте введения материала или генерализованные) считают положительной реакцией.
7.11.1.3 Обработка результатов
Оценку величины инфекционной активности вируса оспы птиц для эмбрионов проводят по методу Кербера в модификации Ашмарина.
Предварительно вычисляют инфекционную активность для эмбрионов в дозе для инъекции0.2см э 1дЭИД80й2си, по формуле
где D — разведение вакцины, вызывающее 100 %-ное специфическое поражение ХАО; d — логарифм кратности разведения;
L — отношение числа эмбрионов, погибших (пораженных) при заражении дозой D„, к общему числу
зараженных этой дозой эмбрионов:
i — порядковый номер разведения вакцины (минимальное разведение принимают за первое);
0.5 — постоянный коэффициент.
Вычисляют инфекционную активность для эмбрионов в 1,0 см 3 к> ЭИД^^, по формуле
источник
Вакцина содержит вируссодержащий материал аттенуированного штамма Sheep capripoxvirus ВНИИЗЖ с титром биологической активности 10 5,0 -10 6,0 ТЦД50/мл и стабилизатор в соотношение 80-90/10-20. Штамм ВНИИЗЖ адаптирован к перевиваемой культуре клеток гонад Capra hircus L. В качестве стабилизатора затора используют защитную среду, включающую 3% пептона, 5% сахарозы и 1% желатина. Полученная вакцина представляет гомогенную массу желтовато-белого цвета без посторонней примеси. Вакцину вводят животным однократно в дозе 1 см 3 подкожно. Продолжительность иммунитета 12 месяцев. Технический результат от использования изобретения заключается в обеспечении высокой иммуногенной активности, безвредности, ареактогенности для овец и низкой себестоимости. 4 табл.
Изобретение относится к ветеринарной вирусологии и биотехнологии, представляет собой лиофилизированную вирусвакцину из аттенуированного штамма вируса оспы овец, выращенного на перевиваемой культуре клеток гонад козы, и может быть использовано для профилактической иммунизации овец.
Оспа овец — контагиозная вирусная болезнь, характеризующаяся интоксикацией организма, лихорадкой, папулезно-пустулезными поражениями кожи и слизистых оболочек. Она наносит овцеводству огромный экономический ущерб, слагающийся из гибели и вынужденного убоя больных животных, снижения продуктивности, затрат на проведение ветеринарно-санитарных и охранно-карантинных мероприятий. К оспе овец восприимчивы домашние козы, а также дикие животные — сайгаки и козероги, служащие источником инфекции и переносчиками возбудителя. Оспа овец внесена в список наиболее опасных (конвенционных) болезней сельскохозяйственных животных. Она широко распространена во многих странах Азии, Африки и Ближнего Востока. В СССР ее эпизодически регистрировали в южных пограничных регионах.
В нашей стране для специфической профилактики в течение многих лет использовали инактивированную ГОА-формолвакцину, приготовленную из суспензии органов и тканей больных оспой овец (Лихачев Н.В. Ветеринария, 1945, N 2).
Наряду с положительными качествами она имеет ряд недостатков: трудоемка в приготовлении, для получения сырья требуются вирулентный вирус и овцы высокочувствительных пород; иммунитет у животных формируется медленно сроком на 5,5 месяцев, поэтому необходима двукратная иммунизация их в течение года.
В связи с этим предпринимались попытки создать более экономичные, безопасные и эффективные живые вакцины против оспы овец из аттенуированных штаммов. В последние десятилетия предпочтение отдавали культуральным вирусвакцинам.
По сообщениям зарубежных авторов получено несколько аттенуированных культуральных вариантов вируса оспы, отличающихся реактогенностью и продолжительностью создаваемого у овец иммунитета, однако большинство из них изучено лишь в лабораторных опытах (Jassim F.A. et al. Indian Vet. J., 1981, 58, 10; Martin W.B. et al. Res. Vet. Sci., 1973, 14; Mateva-Penkova V. et al. Bull. Off. Int. Epiz., 1974, 81; Ramisse J. et al. Rev. Elev. Med. Vet. Pays trop. , 1978, 31, 1; Pamyar H. et al. Bull. Off. Int. Epiz., 1974, 81; Soman J.P. et al. Indian J. Anim. Sci., 1979, 49, 8).
Известно использование в ряде стран вирусвакцины из аттенуированного штамма RM/65, но она малоэффективна против некоторых местных полевых изолятов вируса оспы в Индии и Марокко (Fassi-Feliri M. et al. Ann. Rech. Vet., 1984, 15, 1; Sharma P.C. et al. Indian J. Anim. Sci., 1987, 57, 9; Singh F. P. et al. J. Anim. Sci., 1984, 54, 7). Поэтому были разработаны аттенуированные варианты вируса оспы овец из местных эпизоотических штаммов (Das S.K. et al. Indian J. Exp. Biol. 1986, 24, 6; Kalra S. K. et al. Indian J. Anim. Sci., 1984, 54, 5).
В нашей стране получили культуральную вирусвакцину против оспы овец из вируса, адаптированного к культуре клеток почки крольчат, и проверили ее в производственных условиях (Жидкова Л.А. и соавт. Тез. докл. IV Всес. вет. вирусол. конф., 1976, 2; Лихачев Н.В. и соавт. Докл. ВАСХНИЛ, 1972, II; Лихачев Н.В. и соавт. Науч.отчет ВГНКИ, 1977; Лихачев Н.В. и соавт. Мат. к заседанию НТС МСХ СССР, 1978).
Указанная вакцина широкого практического применения не нашла по причине ее низкой иммуногенности.
Известен также штамм культивируемых клеток гонад Capra hircus L. — продуцент вирусов животных. Указанный штамм монослойных клеток получен из первичнотрипсинизированной ткани гонад 3-дневной козы путем последовательного пассирования на полусинтетических питательных средах, обладает стабильными морфологическими характеристиками и чувствительностью к заражению вирусами ящура A22-663, O1-194, Азия-1-48, болезни Гамборо, болезни Ауески и африканской чумы лошадей, репродуцирует их при культивировании в монослое в титрах 5,0 — 8,25 lg ТЦД50/мл, хранится в музее клеток ВНИИЗЖ и депонирован на 234 пассаже в монослое в ВСКК (СХЖ) РАСХН под N 45 (пат. РФ N 2061753; МПК 6 C 12 N 5/06, 7/00; 02.08.94 г.).
Наиболее близкой предлагаемому изобретению по совокупности существенных признаков является вакцина против оспы овей, включающая вируссодержащий материал аттенуированного штамма Variola ovina ВГНКИ (НИСХИ) N 77, репродуцированного в культуре клеток почки ягнят с титром биологической активности 10 5,0 — 10 6,0 ТЦД50/мл, и стабилизатор при следующем соотношении компонентов, мас.%: Вируссодержащий материал — 40 — 60 Стабилизатор — 40 — 60 В качестве стабилизатора используют защитную среду, включающую 3% пептона и 5% сахарозы (Иванющенков В.Н. и соавт. Реактогенные и иммуногенные свойства вирусвакцины против оспы овец. Ветеринария, 1990, 7, 28 — 30).
Недостатки известной вакцины состоят в ее низкой иммуногенной активности, реактогенности и трудностях, обусловленных получением сырья в виде почек ягнят. Почки телят можно получить только после окотной кампании.
В задачу создания изобретения входила разработка вакцины против оспы овец аттенуированного штамма вируса, адаптированного к перевиваемой культуре клеток гонад козленка (Capra hircus L.). Технический результат от использования изобретения заключается в обеспечении высокой иммуногенной активности, безвредности, ареактогенности для овец и низкой себестоимости.
Указанный технический результат достигнут созданием изобретения, охарактеризованного следующей совокупностью признаков: 1) вакцина против оспы овец; 2) вируссодержащий материал аттенуированного штамма Sheep capripoxvirus ВНИИЗЖ, репродуцированного в перевиваемой культуре клеток гонад Capra hircus L. , с титром биологической активности 10 5,0 — 10 6,0 ТЦД50/мл в концентрации 80 — 90%; 3) стабилизатор в концентрации 10 — 20%.
В качестве стабилизатора используют защитную среду, включающую 3% пептона, 5% сахарозы и 1% желатина.
Предлагаемое изобретение включает совокупность существенных признаков, обеспечивающих получение технического результата во всех случаях, на которые испрашивается правовая охрана: 1) вакцина против оспы овец; 2) вируссодержащий материал аттенуированного штамма Sheep capripoxvirus ВНИИЗЖ, репродуцированного в перевиваемой культуре клеток гонад Capra hircus L. , с титром биологической активности 10 5,0 — 10 6,0 ТДЦ50/мл в концентрации 80-90%; 3) стабилизатор в концентрации 10-20%.
Признаками изобретения, характеризующими предлагаемую вакцину и совпадающими с признаками прототипа, в том числе родовое понятие, отражающее назначение, являются:
1) вакцина против оспы овец;
2) вируссодержащий материал аттенуированного штамма вируса оспы овей, репродуцированного в культуре клеток, с титром биологической активности 10 5,0 — 10 6,0 ТДЦ50/мл;
3) стабилизатор.
По сравнению с прототипом существенными отличительными признаками изобретения являются использование в качестве вируссодержащего материала аттенуированного штамма Sheep capripoxvirus ВНИИЗЖ, репродуцированного в перевиваемой культуре клеток гонад Capra hircus L. По сравнению с вирусвакциной-прототипом вирусвакцина на основе штамма ВНИИЗЖ обладает более высокой иммуногенной активностью, является ареактогенной и безвредной для овец, более дешевой по себестоимости. Перевиваемая линия клеток исключает необходимость убоя животных для получения почек и позволяет в любое время года получить необходимое количество вирусного сырья. Экономия средств включает также стоимость убоя животных.
Аттенуированный штамм Sheep capripoxvirus ВНИИЗЖ, используемый для изготовления вакцины против оспы овец, депонирован 27.06.96 г. в коллекции вирусов Всероссийского государственного научно-исследовательского института контроля, стандартизации и сертификации ветеринарных препаратов (ВГНКИ), имеет регистрационный шифр «ВНИИЗЖ». Местом хранения штамма определена коллекция микроорганизмов Всероссийского научно-исследовательского института защиты животных (600900, Владимир, п/о Юрьевец).
Штамм вируса оспы ВНИИЗЖ получен путем адаптации исходного вируса оспы овец ВГНКИ (НИСХИ) N 77 к перевиваемой культуре клеток гонад Capra hircus L.
Проведенный заявителем анализ уровня техники, включающий поиск по патентам и научно-техническим источником информации, и выявление источников, содержащих сведения об аналогах заявленного изобретения, позволили установить, что заявитель не обнаружил источник, характеризующийся признаками, тождественными (идентичными) всем существенным признакам заявленного изобретения. Определение из перечня выявленных аналогов прототипа, как наиболее близкого по совокупности признаков аналога, позволило установить совокупность существенных по отношению к усматриваемому заявителем техническому результату отличительных признаков в заявляемой вакцине, изложенных в формуле изобретения. Следовательно, заявляемое изобретение соответствует условию патентоспособности «новизна».
Для проверки соответствия предлагаемого способа условию патентоспособности «изобретательский уровень» проведен дополнительный поиск известных решений для выявления признаков, включенных в отличительную часть формулы предлагаемого изобретения. Результаты поиска показали, что предлагаемая вакцина не вытекает для специалиста явным образом из известного уровня техники, изложенного в соответствующем разделе описания (не выявлены решения, имеющие признаки, совпадающие с отличительными признаками заявляемого изобретения), а также не выявлено влияние предусматриваемых существенными признаками предлагаемого изобретения преобразований для достижения технического результата, изложенных в п. 19.5.3. Правил составления, подачи и рассмотрения заявки на выдачу патента на изобретение. Следовательно, предлагаемая вакцина соответствует условию патентоспособности «изобретательский уровень».
Пример 1. Вирус адаптирован в 5 последовательных пассажах к перевиваемой линии культуры клеток гонад козленка. В первом пассаже цитопатогенное действие на площади 70-80% монослоя клеток отмечали через 5-6 дней. С увеличением количества пассажей выявлялось сокращение сроков патогенного действия вируса до 2-3 дней. Титр вируса достигал 10 5,0 — 10 6,0 лог. Специфическое действие вируса характеризовалось образованием клеток со светопреломляющим эффектом по всей поверхности монослоя клеток.
Пример 2. Штамм вируса оспы овец ВНИИЗЖ характеризуется следующими признаками и свойствами.
Морфологические свойства
Вирус штамма обладает морфологическими признаками, характерными для возбудителя оспы овец.
Культуральные свойства
Штамм ВНИИЗЖ выращивается и поддерживается в перевиваемой культуре клеток гонад козленка. Вирус адаптируют к указанной культуре клеток путем проведения 3-5 пассажей. Цитопатогенное действие наступает через 48-96 часов на 18-100% поверхности монослоя заражения культуры клеток вирусом. При стационарном способе культивирования в культуре клеток гонад козленка вирус накапливается в титрах 10 5,0 — 10 6,0 ТЦД50/мл.
Антигенные свойства
При подкожном введении овцам вызывает образование вируснейтрализующих и комплементсвязывающих антител.
Безвредность
Штамм безвреден для овец при подкожном введении. Не передается контактным путем чувствительным животным. Для лабораторных животных (кроликов, морских свинок, мышей) не является патогенным. При введении вакцины в прививной дозе в разведении 1:25 кожной и температурной реакции не отмечается.
Реактогенность
Штамм ареактогенен для овец при подкожном введении. У овец может вызывать исчезающую через 5-7 дней местную реакцию в виде воспалительного отека размером 2х3 см при введении штамма в нативном виде по 5 мл подкожно в бесшерстный участок подмышечной области.
Иммуногенные свойства
При подкожном введении штамм в дозе 1000 ТЦД50 создает стойкий иммунитет у привитых овец на 4-5 день после вакцинации продолжительностью 12 месяцев.
Реверсибельность и контагиозность
Штамм ВНИИЗЖ не восстанавливает вирулентных свойств после пяти последовательных пассажей на овцах (не реверсибелен) и не передается при совместном содержании привитых и интактных овец (не контагиозен).
Стабильность свойств при пассировании
Основные биологические свойства штамма стабильно сохраняются на протяжении 10 пассажей в перевиваемой культуре клеток гонад козленка (период наблюдения).
Сохраняемость
В нативном состоянии штамм вируса оспы овец ВНИИЗЖ не снижает своей активности в течение 3 месяцев при +4 o C, в лиофилизированном виде в присутствии 3% пептона, 5% сахарозы и 1% желатина его активность остается на исходном уровне при +4 o C и -20 o C в течение 2 лет (срок наблюдения). После восстановления из лиофилизированного состояния физиологическим раствором вирус не инактивируется при комнатной температуре в течение 24 часов, при -4 o C — 7 суток.
Пример 3. Изготовление вакцины для профилактики оспы овец на основе штамма ВНИИЗЖ.
Вирус выращивают в перевиваемой монослойной культуре клеток гонад козленка (ГК). Для этого штамм клеток ГК, хранящийся в жидком азоте, размораживают путем оттаивания в водяной бане при 37-38 o C и проводят 1-2 пассажа для восстановления исходной скорости роста в монослое. Из культурального сосуда с монослоем клеток удаляют среду культивирования. Монослой клеток дважды обрабатывают диспергирующим раствором, содержащим 0,25% раствор трипсина и 0,02% раствор версена, взятых в соотношении 1:3, с добавлением 0,5% декстрозы, до начала отслаивания клеток. Диспергирующий раствор сливают, вносят среду Игла с 10% сыворотки КРС и 0,03% глутамина и суспензию разливают в культуральные сосуды. Культуру клеток инкубируют при 37 o C в течение 48-72 часов до момента формирования плотного монослоя. Для пересева выбирают сосуды с культурой клеток ГК в виде сформировавшегося равномерного монослоя. Для выращивания вируса используют сосуды емкостью 200 см 3 с выросшим плотным монослоем клеток ГК. В сосуды вносят 5 см 3 расплодки вируса ВНИИЗЖ производственной серии. После этого сосуда ставят на 1 час в термостат при 37 o C, вносят в них поддерживающую питательную среду Игла по 100 или 200 см 3 в зависимости от объема сосудов и инкубируют при 37 o C. Для контроля оставляют 2-3 сосуда с неинфицированной культурой клеток, в которые вносят поддерживающую среду и инкубируют в тех же условиях, что и инфицированную культуру клеток. Смену среды осуществляют через каждые 2 суток после инфицирования клеток. На 3-5 сутки после заражения клеток при наличии цитопатогенных изменений на 80-90% и более площади монослоя содержимое сосудов подвергают замораживанию при -20 o C и оттаиванию при 25 o C, энергично встряхивая для отделения монослоя. Из каждого сосуда берут пробу по 3 мл для определения загрязнения и цитопатической активности.
Полученный материал хранят при 40 o C + 2 o C не более 30 суток до получения результатов контроля. Содержимое сосудов без бактериального заражения оттаивают, сливают в одну емкость, тщательно перемешивают и из общей массы берут 3 пробы для определения биологической активности. Вируссодержащую суспензию хранят в замороженном состоянии при -20 o C не более 6 мес. При активности вируса не ниже 10 4,5 ТЦД50/мл стерильный вируссодержащий материал используют для изготовления производственной серии вирусвакцины. Для этого его оттаивают при 25 o C, добавляют стабилизатор, содержащий 3% пептона, 5% сахарозы и 1% желатина, тщательно перемешивают, разливают в стерильные флаконы по 4,0 см 3 и помещают в холодильники при +4 o C. Лиофилизацию вирусного материала производят при 50 o C. Величину вакуума в камере сублимационного аппарата устанавливают в пределах 4-7 Па. Конечная температура полок аппарата в процессе высушивания 30-40 o C. Высушивание при подогреве полок до указанной температуры осуществляют до того момента, когда температура материала достигнет 8-10 o C, после чего обогрев переводят на температуру 28-30 o C. Высушивание при температуре материала 24-26 o C проводят в течение 5-6 часов. Конечная температура материала не должна превышать 28-30 o C. Ампулы с высушенной вакциной запаивают на карусельно-коллекторном аппарате при остаточном давлении 25-30 Па. Полученная вакцина представляет гомогенную массу желтовато-белого цвета без посторонней примеси. Остаточная влажность препарата составляет 3-6%. Полученная вакцина против оспы овец имеет компонентный состав ,%, представленный в табл. 1.
Полученная вакцина против оспы овец при титровании в культуре клеток ГК имеет титр 4,5-5,5 lgТЦД50/мл.
Пример 4. Проведены испытания вакцины, содержащей, мас.%:
Вируссодержащий материал аттенуированного штамма оспы овец ВНИИЗЖ, репродуцированного в перевиваемой культуре клеток ГК, с титром биологической активности 10 5,0 -10 6,0 ТЦД50/мл — 80
Стабилизатор — 20
Определение иммуногенной активности вакцины проводят на 4 овцах. В качестве контроля используют 2 неиммуногенные овцы. Вакцину вводят животным однократно в дозе до 1 см 3 подкожно в область бесшерстного участка подмышечной области. Через 12 дней всех вакцинированных и контрольных животных заражают эпизоотическим вирусом оспы овец штамм «Афганский» при 500 ИД50/0,5 см 3 внутрикожно в область внутренней поверхности хвоста. Вакцинированные овцы остались устойчивыми к заражению. Контрольные животные заболели оспой в генерализованной форме.
Пример 5. Проведены испытания вакцины против оспы овец, имеющей следующий компонентный состав, мас.%:
Вируссодержащий материал аттенуированного штамма оспы овец ВНИИЗЖ, репродуцированного в перевиваемой культуре клеток ГК, с титром биологической активности 10 5,0 — 10 6,0 ТЦД50/мл — 85
Стабилизатор — 15
Определение иммуногенной активности вакцины проводят на 4 овцах. В качестве контроля используют 2 неиммуногенные овцы. Вакцину вводят животным однократно в дозе по 1 см 3 подкожно в область бесшерстного участка подмышечной области. Через 12 дней всех вакцинированных и контрольных животных заряжают эпизоотическим вирусом оспы овец штамм «Афганский» по 500 ИД50/0,5 см 3 внутрикожно в область внутренней поверхности хвоста. Вакцинированные овцы остались устойчивыми к заряжению. Контрольные животные заболели оспой в генерализованной форме.
Пример 6. Проведены испытания вакцины против оспы овец, имеющей следующий компонентный состав, мас.%:
Вируссодержащий материал аттенуированного штамма оспы овец ВНИИЗЖ, репродуцированного в перевиваемой культуре клеток ГК, с титром биологической активности 10 5,0 — 10 6,0 ТЦД50/мл — 90
Стабилизатор — 10
Определение иммуногенной активности вакцины проводят на 4 овцах. В качестве контроля используют 2 неиммуногенные овцы. Вакцину вводят животным однократно в дозе по 1 см 3 подкожно в область бесшерстного участка подмышечной области. Через 12 дней всех вакцинированных и контрольных животных заражают эпизоотическим вирусом оспы овец штамм «Афганский» по 500 ИД50/0,5 см 3 внутрикожно в область внутренней поверхности хвоста. Вакцинированные овцы остались устойчивыми к заражению. Контрольные животные заболели оспой в генерализованной форме.
Пример 7. Изучение безвредности вакцины против оспы овец из штамма ВНИИЗЖ.
Для определения безвредности используют 2 овец 1-2-летнего возраста массой не менее 30 кг. Лиофилизированную вакцину разводят физиологическим раствором до исходного объема и вводят каждому животному подкожно в область бесшерстного участка подмышечной области по 5,0 см 3 . Через 3-4 суток на месте введения вакцины образуется отечность, исчезающая через 5-7 дней. Температура тела остается в пределах нормы.
Пример 8. Изучение иммуногенной активности вакцины против оспы овец из штамма ВНИИЗЖ.
Определение иммуногенной активности вакцины проводят на 4 овцах. В качестве контроля используют 2 неиммуногенные овцы. Для этого лиофилизированную вакцину разводят физиологическим раствором в соотношении 1:25 и вводят по 1 см 3 подкожно в область бесшерстного участка подмышечной области каждому животному. Через 12 дней всех вакцинированных и контрольных животных заражают эпизоотическим вирусом оспы овец штамм «Афганский» по 500 ИД50/0,5 см 3 внутрикожно в область внутренней поверхности хвоста. Вакцинированные овцы остались устойчивыми к заражению. Контрольные животные заболели оспой в генерализованной форме. Результаты исследований приведены в табл. 2.
Пример 9. Изучение эффективности вакцины против оспы овей из штамма ВНИИЗЖ при иммунизации различными дозами.
Определение иммуногенной активности вакцины проводят на 8 овцах. Вакцину разводят физиологическим раствором до исходного объема, а затем из него готовят разведения таким образом, чтобы в 1 см 3 содержалось вируса 1200 и 300 ТЦД50/1 см 3 . Каждую указанную дозу вводят 4 животным подкожно в область бесшерстного участка подмышечной области. Через 12 дней всех вакцинированных и 2 контрольных неиммунных овец заражают вирулентным вирусом оспы овец штамм «Афганский» внутрикожно в область внутренней поверхности хвоста по 500-1000 ИД50/см 3 . Вакцинированные овцы остались устойчивыми к заражению. Контрольные овцы заболели оспой в генерализованной форме. Результаты исследований приведены в табл. 3.
Пример 10. Изучение эффективности вакцины с титром вируса 10 5,5 ТЦД50/1,0 см 3 .
Эффективность вакцины оценивают по устойчивости овец, иммунизированных различными дозами вакцины. Для этого вакцину разводят физиологическим раствором до исходного объема, из которого готовят разведения таким образом, чтобы в прививной дозе 1,0 см 3 содержалось 40000, 10000, 1000 и 100 ТЦД50/см 3 . С этой целью 12 овец размещают в 4 группы и каждую группу прививают вышеуказанными дозами подкожно в бесшерстный участок подмышечной области. Через 12 дней всех вакцинированных и 2 контрольных овец заражают вирулентным вирусом оспы овец штамм «Афганский» внутрикожно в область внутренней поверхности хвоста по 500-1000 ИД50/см 3 . Все вакцинированные овцы оказались устойчивыми к заражению. Контрольные животные заболели оспой в генерализованной форме (см. табл. 4).
Таким образом, изложенные сведения свидетельствуют о выполнении при использовании предлагаемой вакцины следующей совокупности условий:
вакцина против оспы овец, воплощающая предлагаемое изобретение, предназначена для использования в сельском хозяйстве, а именно в ветеринарии;
для предлагаемой вакцины в том виде, как она охарактеризована в независимом пункте формулы изобретения, подтверждена возможность ее осуществления с помощью описанных в заявке или известных до даты приоритета средств и методов;
вакцина, полученная в соответствии с предлагаемым изобретением, обладает высокой иммуногенной активностью, безвредностью, аректогенностью и низкой себестоимостью.
Следовательно, предлагаемое изобретение соответствует условию патентоспособности «промышленная применимость».
Источники информации
1. Лихачев Н.В. Ветеринария, 1945, 2.
2. Jassim F.A. et al. Indian. Vet.J., 1981, 58, 10.
3. Martin W.B. et al. Res. Vet. Sci., 1973. 14.
4. Matewa-Penkova V. et al. Bull. Off. Int. Epiz., 1974, 81.
5. Ramisse J. et al. Rev. Elev. Med. Vet. Pays trop., 1978, 31, 1.
6. Ramyar H. et.al. Bull. Off. Int. Epiz., 1974, 81.
7. Soman J.P. et. al. Indian J. Anim. Sci., 1979, 49, 8.
8. Fassi-Fehri M., et. al. Ann. Rech. Vet., 1984, 15, 1.
9. Sharma P.C. et. al. Indian J. Anim. Sci., 1987, 57, 9.
10. Singh J.P. et. al. Anim Sci., 1984. 54, 7.
11. Das S.K. et. al. Indian J. Exp. Biol., 1986, 24, 6.
12. Kabra S.K. Anim. Sci., 1984, 54, 7.
13. Жидкова Л.А. и соавт. Тез. докл. IV Всес.вет.вирусол. конф., 1976, 2.
14. Лихачев Н.В. и соавт. Докл. ВАСХНИЛ, 1972, 11.
15. Лихачев Н.В. и соавт. Научн.отчеты ВГНКИ, 1977.
16. Лихачев Н.В. и соват. Материалы к заданию НТС МСХ СССР, 1978.
17. Патент РФ N 2061753, МПК 6 C 12 N 5/06, 7/00; 02.08.94 г.
18. Иванющенков В.Н. и соавт. Реактогенные с иммуногенные свойства вирусвакцины против оспы овец. /Ветеринария, 1990, 7, 28 — 30 (прототип).
19. Авт. свид. СССР N 1356460, МПК 4 C 12 N 7/00, 05.06.85.
20. Авт. свид. СССР N 1614201, МПК 5 A 61 K 39/275,24.03.89.
21. Иванющенков В.Н. и соавт. Биологические свойства вакцинного штамма НИСХИ вируса оспы овец. /Ветеринария, 1990, 8.22 — 26.
22. Черняк Е.П. и соавт. Биологические свойства производственных штаммов вируса оспы овец. /Ветеринария, 1991, 3, 24 — 26.
23. Курченко Ф.П. и соавт. Эффективность сухой культуральной вирусвакцины из штамма НИСХИ против оспы овец. /Ветеринария, 1991, 10, 21 — 24.
24. Иванющенков В.Н. и соавт. Реактогенные и иммуногенные свойства вирусвакцины против оспы овец из штамма НИСХИ. Вирусные и микробные болезни животных. Сб. науч. трудов. Владимир, 1995, 186 — 191.
25. Иванющенков В.Н. и соавт. Биологические свойства вакцинного штамма НИСХИ вируса оспы овец. Вирусные и микробные болезни животных. Сб. науч. трудов. Владимир, 1995, 254 — 259.
Вакцина против оспы овец, включающая вируссодержащий материал аттенуированного штамма оспы овец и стабилизатор, отличающаяся тем, что в качестве вируссодержащего материала вакцина содержит штамм Sheep capripoxvirus ВНИИЗЖ, репродуцированный в перевиваемой культуре клеток гонад Capra hircus L., с титром биологической активности 10 5,0 — 10 6,0 ТЦД50/мл при следующем соотношении компонентов, мас.%:
Вируссодержащий материал штамма Sheep capripoxvirus ВНИИЗЖ, репродуцированного в перевиваемой культуре клеток гонад Capra hircus L., с титром биологической активности 10 5,0 — 10 6,0 ТЦД50/мл — 80 — 90
Стабилизатор — 10 — 20п
источник