Дефинитивным хозяином является человек и плотоядные животные. Регионы, в которых встречается описторхоз, — это бассейны рек (Обь, Иртыш); реки, впадающие в Каспийское, Азовское, Черное моря. Яйца гельминтас фекалиями попадают в воду, развитие до стадии церкариев проходит в моллюске. После выхода из моллюска проникают в подкожные слои мышц рыб и превращаются в метацеркариев. Размер их 0,2-0,3 мм. Проводят исследование раздавленных кусочков мышечной ткани под малым увеличением микроскопа. В цисте метацеркарий лежит согнутым, и при микроскопии мышц видны присоски и темный экскреторный пузырь.
Ветеринарно-санитарная оценка. В регионах, неблагополучных по описторхо-зу, рыба считается условно годной. Ее необходимо подвергать соответствующей технологической обработке, варке в течение 30 минут или замораживанию при температуре -15°С — 30 суток, -28°С — до 42 часов и при температуре -35°С — около 10 часов.
Дифиллоботриоз. Инвазионная болезнь человека и плотоядных животных (собак, кошек, лисиц), вызываемая личиночной стадией лентеца широкого. Половозрелый паразит обитает в кишечнике человека и животных, а личинки — плероцеркоиды — в мышцах и органах щуки, налима, окуня, ерша. Развитие возбудителя происходит с участием дополнительного и промежуточного хозяев. Зараженные лентецом широким человек и плотоядные животные с фекалиями выделяют во внешнюю среду яйца. Дальнейшее развитие происходит в воде, в конечном счете они попадают в тело рыбы. В жизненном цикле дифиллоботриума могут присутствовать резервуарные хозяева — хищные рыбы (лосось, озерная форель, хариус, угорь), в которых плероцеркоиды могут накапливаться в больших количествах. Продолжительность жизни лентеца широкого в организме окончательного хозяина — до 20 лет.
Плероцеркоиды — это личинки молочно-белого цвета в виде червяков, с поперечными морщинами на теле, длиной1-1,5 см. Головной конец плероцеркоида более широкий с двумя щелевидными бот-риями, с помощью которых личинка прикрепляется к стенке кишечника.
У ряпушки, сига, омуля, хариуса и других рыб, обитающих в Байкале, других водоемах Сибири и Севера находят личинок малого или узкого лентецов. Окончательным хозяином этих лентецов является человек, рыбоядные птицы. Цикл развития лентецов малого и узкого такой же, как и широкого. Плероцеркои-ды локализуются на серозных покровах желудочно-кишечного тракта.
Ветеринарно-санитарная оценка. Использовать для пищевых целей рыбу, зараженную плероцеркоидами, без соответствующей обработки запрещается. Она может быть использована после обеззараживания проваркой не менее 30 минут или для изготовления консервов. Обеззараживание наступает также после замораживания при температуре -18°С в течение 48 часов, а при -12°С — не менее 6 суток.
Рыбу можно обезвредить в микроволновой печи. Продолжительность обработки зависит от массы рыбы. Так, при массе 400 г достаточно 3 минут, 500 г — 5 минут, 850-900 г — 10 минут, 1000-1100 г — 12 минут.
В местах реализации рыбы в регионах, неблагополучных по дифиллоботри-озу, должны быть вывешены плакаты, оповещающие о необходимости тщательной проварки тушек рыбы.
Клонорхоз. Гельминтозная болезнь человека и плотоядных животных, связанная с поражением печени. Возбудителем является Clonorchis sinensis из семейства Opisthorchide.
Клонорхоз распространен очагово на Дальнем Востоке и в районах дальнего и среднего Приамурья (при потреблении сырой рыбы). Заражено семейство карповых. Развитие возбудителя клонорхиса аналогично развитию описторхиса. Дополнительным хозяином являются пресноводные рыбы (более 70 видов).
Ветеринарно-санитарная оценка. Такая же, как и при описторхозе.
Метагонимоз. Болезнь распространена у рыб в реках Амур, Днепр, Дунай, Днестр. Возбудитель — Metagonimus Jo-kogawai. Поражаются рыбы семейства карповых и лососевых. Гельминт развивается с участием дефинитивного хозяина, которым является человек, плотоядные животные и рыбоядные птицы. Половозрелая стадия паразитирует в кишечнике, выделяет яйца, которые с фекалиями попадают в воду. Дальнейшее развитие проходит с участием моллюсков и рыб. Церкарии проникают в кожный покров рыбы, под чешую, плавники, а также в жабры. Цисты имеют шаровидную форму диаметром 0,15-0,2 мм. Диагностику проводят с помощью микроскопа. Для этого берут чешую, помещают между двух предметных стекол, обрабатывают 50% глицерином и рассматривают под малым увеличением.
Ветеринарно-санитарная оценка. В регионах, неблагополучных по заболеванию, рыбу зачищают, удаляя плавники, жабры, чешую и подвергают варке в течение 30 минут, либо замораживанию до -20°С с последующей выдержкой 8-10 суток.
Триэнофороз. Это болезнь пресноводных рыб, человек не принимает участия в биологическом цикле развития. Возбудители — Triaenophorus nodulosus и Tr. crassus. Дефинитивным хозяином является щука, половозрелый паразит в кишечнике которой достигает 30 см. Яйца половозрелого паразита попадают в воду, из них развивается корацидий. Они заглатываются рачками. Это первые промежуточные хозяева. В дальнейшем рачок попадает в кишечник окуня, налима, судака, форели, корюшки — вторые промежуточные хозяева. Из кишечника рыбы личинки проникают в полость телаи поселяются в печени или брыжейке, превращаясь в плероцеркоид.
Развитие Tr. crassus проходит несколько по-другому. Дефинитивным хозяином является также щука, но личиночная стадия развивается, преимущественно, у сигов, и личинки локализуются не в полости тела, а в мускулатуре в капсулах размером с горошину.
При рассмотрении тех или других возбудителей под микроскопом находят личинки с наличием на головном конце крючьев.
Ветеринарно-санитарная оценка. Щук следует выпускать в реализацию в потрошеном виде. У рыб, пораженных пле-роцеркоидами, устанавливают степень зараженности, при слабой — используют на пищевые цели. Если у сигов поражена мускулатура, то такую рыбу утилизируют.
Лигулез. Болезнь регистрируется у рыб семейства карповых, они являются промежуточным хозяином. Возбудитель — Ligula intestinalis. Дефинитивные хозяева — чайки, каравайки, утки. Яйца гельминта попадают в воду, превращаются в корацидиев, которых заглатывают рачки, и в них образуется процеркоид. У рыб, заглотивших таких рачков, развивается личинка — плероцеркоид, который за несколько лет в брюшке достигает длины до 1 м. Их называют лигулами (рам-нецами). Брюшко рыбы сильно вздуто, иногда отмечается гидремия.
Ветеринарно-санитарная оценка. Учитывая безопасность лигул для человека, рыбу после потрошения можно реализовывать на пищевые цели, если нет гидре-мии. При наличии гидремии рыбу направляют на утилизацию или на корм животным.
При поражении рыб пиявками и ракообразными их удаляют, а рыбу используют без ограничений. При выявлении истощения или наличии изъязвлений направляют на утилизацию.
источник
480 руб. | 150 грн. | 7,5 долл. ‘, MOUSEOFF, FGCOLOR, ‘#FFFFCC’,BGCOLOR, ‘#393939’);» onMouseOut=»return nd();»> Диссертация — 480 руб., доставка 10 минут , круглосуточно, без выходных и праздников
Автореферат — бесплатно , доставка 10 минут , круглосуточно, без выходных и праздников
Адиатулин Ильяс Фаритович. Ветеринарно-санитарная экспертиза рыбы при описторхозе : диссертация . кандидата ветеринарных наук : 16.00.06 / Адиатулин Ильяс Фаритович; [Место защиты: Всерос. науч.-исслед. ин-т ветеринар. санитарии, гигиены и экологии (Всерос. науч.-исслед. ин-т ВСГЭ) РАСХН].- Москва, 2008.- 148 с.: ил. РГБ ОД, 61 08-16/4
Глава 1. Описторхоз рыб и его распространение на территории Российской Федерации 8
Глава 2. Биология возбудителя 19
Глава 3. Возбудитель описторхоза рыб и его устойчивость к ряду физических и химических факторов 25
Собственные исследования 37
Глава 4. Материалы и методы 37
4.1. Методы паразитологических исследований 38
4.2. Органолептические методы исследования 40
4.3. Физико-химические методы исследования 41
4.4. Методы определения химического состава мяса рыб 44
4.5. Санитарно-микробиологические методы исследования 49
4.6. Методы изучения относительной биологической ценности „ и токсико-биологической оценки мяса рыбы 55
4.7. Методы обезвреживания рыбы, пораженной описторхозом 58
Результаты исследований 59
Глава 5. Изучение распространенности описторхоза рыб 59
Глава 6. Клинический осмотр и патологоморфологические исследования больной рыбы 66
Глава 7. Исследования по сравнительной оценке методов индикации, определения жизнеспособности и дифференциальной диагностики метацеркарий O.felineus 69
7.1. Выявление метацеркарий O.felineus в рыбе 69
7.2. Дифференциальная диагностика O.felineus по анатомо-морфологическим признакам 72
7.3. Сравнительная оценка методов определения жизнеспособности метацеркарий O.felineus 74
Глава 8. Органолептические и физико-химические исследования рыб при описторхозе 76
8.1. Органолептические показатели мяса рыб 78
8.2. Физико-химические показатели мяса рыб 78
Глава 9. Санитарно-микробиологический контроль рыб, пораженных описторхозом 79
Глава 10. Изучение химического состава мяса рыб, пораженных метацеркариями O.felineus 81
Глава 11. Биологическая оценка мяса рыб при описторхозе 83
Глава 12. Обезвреживание рыб, пораженных описторхозом 84
Обсуждение результатов 88
Практические предложения 98
Актуальность темы. Рыба, являясь ценным пищевым продуктом, может стать причиной заболевания человека серьезными гельминтозами. На территории России регистрируется целый ряд паразитарных болезней, возбудители которых передаются человеку через рыбу, ракообразных, моллюсков и продукты их переработки. Наиболее тяжелым гельминтозом из числа трематодозов, распространенных на территории России, является описторхоз.
Описторхоз — пероральный биогельминтоз, вызываемый трематодой из семейства Opisthorchidae, Opisthorchis felineus (Rivolta, 1884). Заражение человека, кошек, собак, лисиц, песцов, свиней и некоторых других плотоядных животных (окончательных хозяев данного паразита) происходит при употреблении в пищу инвазированной личинками описторхисов рыбы семейства карповых (язь, елец, чебак, вобла, лещ, красноперка и др.) При попадании в желудочно-кишечный тракт личинки, называемые метацеркариями, эксцистируются в двенадцатиперстной кишке и мигрируют через желчный пузырь во внутрипеченочные желчные протоки, где достигают половой зрелости и начинают откладывать яйца. У инвазированных лиц в 20-40% случаев описторхисы также обнаруживаются в протоках поджелудочной железы и желчном пузыре (Герасимов А.С., 1999; Грищенко-Л.И., 1999; Соторов П.П., 1999; Акбаев М.Ш.; Быков В. П., 2001; Судариков В.Е., 2002; Фаттахов Р.Г., 2004; Беэр С.А., 2005).
Ареал возбудителя описторхоза простирается практически непрерывно от Байкала до западных границ России с наивысшей интенсивностью циркуляции паразита в Обь-Иртышском бассейне, где сложилась наиболее неблагополучная эпидемиологическая и эпизоотическая ситуация. Волжско-Камский бассейн является
второй после Западной Сибири эндемичной по описторхозу территорией России (Никитин В.В., Куимова Р.Т., 1992, Довгалев А.С, 1999). Выявлены очаги описторхоза и степень заражения в них людей (Успенский А.В., Малахова Е.И., Шубадеров В.Я., 2007). По данным Всемирной Организации Здравоохранения за 1995′ год заболело описторхозом, вызываемым O.felineus, более 2 млн. человек. По данным Роспотребнадзора, ежегодно на территории Российской Федерации регистрируется до 40 тыс. больных описторхозом людей. Выявлен описторхоз среди населения практически всех субъектов Российской Федерации, а заболеваемость описторхозом на 2005 год составила 30,5 человек на 100 тыс. населения, а на долю описторхоза от всех биогельминтозов в год приходится 77,2% (Онищенко Г.Г., 2002).
При ветеринарно-санитарной экспертизе рыбы описторхоз регистрировался в 2005 году 6,7%, в 2006г. — в 5,4% случаев.
Основными задачами ветеринарной службы в рыбоводческих хозяйствах является охрана гидробионтов от инфекций, контроль за состоянием объектов аквакультуры, своевременное проведение лечебно-профилактических обработок, обеспечение населения безопасной и качественной рыбопродукцией (Борисова М.Н., 2004).
В связи с этим в- целях повышения эффективности ветеринарного контроля за рыбой и качеством пищевой продукции; получаемой из рыб, как возможных источников инвазионных заболеваний, необходимо, прежде всего, улучшить проведение ветеринарно-санитарной экспертизы и оценки рыб и рыбопродуктов, в частности, при описторхозе.
Этим обосновывается выбор и актуальность
Цель и задачи исследований. Целью настоящего исследования является разработка вопросов ветеринарно-санитарной экспертизы рыбы при описторхозе с решением следующих задач.
Изучить распространенность описторхоза среди рыб в различных регионах Российской Федерации.
Провести сравнительную оценку паразитологических методов исследования рыб при описторхозе.
Провести исследования по изучению органолептических и физико-химических показателей мяса рыб, пораженных описторхозом, с учетом интенсивности инвазии.
Изучить общий химический состав и биологическую ценность мяса рыб, пораженных описторхозом.
Провести микробиологические исследования мяса рыб при данном заболевании.
Изучить устойчивость метацеркарий описторхисов к воздействию ряда физических и химических факторов.
7. На основании проведенных исследований подготовить
«Методические рекомендации по проведению ветеринарно-
санитарной экспертизы рыбы при описторхозе».
Научная новизна. Изучена зараженность описторхозом различных видов пресноводных рыб бассейнов рек Обь (среднее течение в районе г. Ханты-Мансийска), Волга и Большой Могой (в районе г. Астрахани) и Тавда (приток Тобола в районе г. Тавда) с определением экстенсивности (ЭИ) и интенсивности инвазии (ИИ).
Установлено, что описторхоз рыб может протекать как моноинвазия, так и в смешанной форме с другими метацеркариями трематод, а именно: Paracaenogonimus ovatus (сем. Prohemistomidae), Bolbophorus confusus (сем. Posthodiplostomidae) и Hysteromorpha tribola (сем. Diplostomidae).
С учетом интенсивности инвазии определены органолептические, физико-химические и микробиологические показатели рыб, пораженных описторхозом.
При описторхозе с высокой интенсивностью инвазии из мяса рыб выделяется сопутствующая микрофлора (E.coli).
Впервые выявлена зависимость, что повышение интенсивности инвазии, сопровождающееся повышением влаги в мясе рыб, сопровождается уменьшением содержания белка, жира, золы, кальция и фосфора, что снижает его (мяса) калорийность в сравнении со здоровой рыбой.
Гистологическими исследованиями установлено, что заболевание рыб описторхозом сопровождается образованием в местах локализации метацеркарии капсул из соединительной ткани и поражением мышечной ткани в виде дегенеративных изменений.
Проведенными исследованиями разработаны (в дополнение к существующим) режимы обезвреживания мяса рыб, пораженных описторхозом, в частности: замораживание при —18 С и экспозиции 7 суток и -20 С — 48ч; воздействие высокими температурами (+60 С и экспозиции 35 мин, варка — 10 мин и прожарка — 15 мин); посол рыбы при применении хлорида натрия в концентрации 50 г/л в течение 30 суток, 100 г/л — 21 сутки и 150 г/л — 10 суток; применение СВЧ при мощности 900 Вт и экспозиции 3,5 мин и 600^ Вт и экспозиции 4,5 мин.
Установлено, что применение процессов вяления и воздействие ультразвуком не приводят к обезвреживанию от описторхисов.
Практическая ценность работы. На основании проведенных исследований подготовлены предложения по улучшению проведения ветеринарно-санитарной экспертизы и оценке рыб при
описторхозе и определению устойчивости описторхисов к физическим и химическим факторам, которые включены в разработанные нами «Методические рекомендации по проведению ветеринарно-санитарной экспертизы рыбы при описторхозе». (Утв. Отделением ветеринарной медицины РАСХН 04.09.2007 г.).
Публикации. По результатам выполненных исследований опубликовано 5 научных статей.
Объем и структура работы. Диссертация изложена на 114 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, обсуждения полученных результатов, выводов, списка литературы и приложений. Работа содержит 21 таблицу, 11 рисунков, в том числе 2 диаграммы. Список литературы включает 126 источников отечественных и зарубежных авторов.
Физико-химические исследования проводили согласно ГОСТ 7636-85 «Рыба, морские млекопитающие, морские беспозвоночные и продукты их переработки. Методы анализа» (качественные реакции определения аммиака и сероводорода). Исследования с целью определения показателей свежести больной и здоровой рыб (реакции на пероксидазу и с сернокислой медью, определение концентрации водородных ионов) проводили согласно «Правилам ветеринарно-санитарной экспертизы пресноводной рыбы и раков» (1989).
Определение аммиака. Метод основан на взаимодействии аммиака, образующегося при порче рыбы, с соляной кислотой и появлении при этом облачка хлористого аммония.
Проведение анализа. В широкую пробирку наливали 2-3 см3 смеси Эбера, закрывали пробкой и встряхивали 2-3 раза. Вынимали пробку из пробирки и сразу же закрывали ее другой пробкой, через которую продета тонкая стеклянная палочка с загнутым концом. На конец палочки прикрепляли кусочек исследуемого мяса рыбы с температурой близкой к температуре воздуха в лаборатории в момент проведения анализа. Мясо вводили в пробирку так, чтобы не запачкать стенок пробирки и чтобы оно находилось на расстоянии 1-2 см от уровня жидкости.
Обработка результатов. Через несколько секунд в результате реакции аммиака с соляной кислотой должно образовываться облачко хлористого аммония. Интенсивность реакции оценивали следующим образом: — реакция отрицательная; + реакция слабоположительная (быстро исчезающее расплывчатое облачко); ++ реакция положительная (устойчивое облачко, проявляющееся через несколько секунд после внесения мяса в пробирку с реактивом); -Н-+ реакция резко положительная (облачко появляется сразу после внесения мяса в пробирку с реактивом).
Определение сероводорода. Метод основан на взаимодействии сероводорода, образующегося при порче рыбы, со свинцовой солью с появлением темного окрашивания вследствие образования сернистого свинца.
Проведение анализа. 15-25 г исследуемого фарша из спинной мускулатуры рыб помещали рыхлым слоем в бюксу вместимостью 40-50 см3. В бюксу подвешивали горизонтально над фаршем полоску плотной фильтровальной бумаги, на поверхность которой, обращенной к фаршу, нанесены 3-4 капли раствора свинцовой соли диаметром 2-3 мм. Расстояние между бумагой и поверхностью фарша 1 см. Бюксу закрывали сверху крышкой, зажимая фильтровальную бумагу между крышкой и корпусом бюксы, и оставляли стоять при комнатной температуре. Параллельно проводили контрольный анализ без навески продукта. По истечении 15 мин бумагу снимали и сравнивали ее окраску с окраской бумаги, смоченной тем же раствором свинцовой соли (контрольный анализ). При наличии в исследуемом образце свободного сероводорода происходит побурение или почернение участков бумаги, смоченных раствором свинцовой соли.
Интенсивность реакции обозначали следующим образом: — реакция отрицательная; ± следы окрашивания капли; + реакция слабоположительная; ++ реакция положительная (бурое окрашивание всей капли, более интенсивное по краям); +++ реакция резко положительная (интенсивное темно-бурое окрашивание всей капли).
Определение рН. К 5 г фарша мяса рыбы добавляли 50 мл дистиллированной воды и настаивали в течение 30 мин при периодическом перемешивании, затем пропускали через бумажный фильтр. Фильтрат использовали для исследования. Определяли рН рН-метром (Hanna рН 211). Учитывали, что у рыбы свежей фильтрат слегка опалесцирует (рН до 6,9); у рыбы сомнительной свежести фильтрат слегка мутноватый (рН 7,0-7,2); у рыбы несвежей фильтрат мутный, запах неприятный (рН 7,3 и выше).
Реакция на пероксидазу. В бактериологическую пробирку вносили 2 мл водной вытяжки (1:100) из жаберной ткани и добавляли 5 капель 0,2%-ного спиртового раствора бензидина. Содержимое пробирки встряхивали, после чего вносили две капли 1%-ного раствора перекиси водорода.
Для определения химического состава мяса рыб использовали пробы свежей снулой рыбы (из спинной мускулатуры язей двухлеток), выловленных из реки Обь в районе города Ханты-Мансийск, исследования проводили согласно ГОСТ 7636-85 «Рыба, морские-млекопитающие, морские беспозвоночные и продукты их переработки. Методы анализа».
Определение массовой доли воды высушиванием при 100-105 С. Метод основан на испарении воды из продукта при тепловой обработке и определении изменении массы его взвешиванием.
Навеску спинной мускулатуры от 1,5 до 2 г, взвешенную с абсолютной погрешностью не более 0,001 г, помещали в чистую высушенную и тарированную бюксу со стеклянной палочкой, при помощи которой распределяли навеску продукта в бюксе ровным тонким слоем. Бюксу закрывали притертой крышкой, взвешивали на аналитических весах и высушивали в сушильном шкафу при 100-105 С до постоянной массы. Первое взвешивание проводили через Зч после начала сушки, последующие — через 30-40 мин. Постоянная масса считалась достигнутой, если разница между двумя взвешиваниями не превышала 0,001 г. В бюксу предварительно вносили 5-10 г песка и навеску продукта тщательно перемешивали.
Массовую долю Х3 в процентах вычисляли по формуле Х3 = (mrm2) 100/mi-m, где m — масса бюксы с песком г, т\ — масса бюксы с навеской и песком до высушивания, г; т2 — масса бюксы с навеской и песком после высушивания, г.
За окончательный результат принимали среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, допускаемые расхождения между которыми не превышало 0,5%.
Определение массовой доли белка по Къельдалю. Метод основан на окислении органического вещества при сжигании его в серной кислоте в присутствии катализатора, отгонке образующегося аммиака паром, улавливании его раствором серной кислоты и определении содержания азота методом титрования.
Навеску мышечной ткани массой 0,6-1 г взвешивали с абсолютной погрешностью не более 0,0005 г, помещали в колбу для сжигания вместимостью 100 см, добавляли несколько мелких кристаллов медного купороса и приливали 10-20 см3 серной кислоты плотностью 1840 кг/м . Колбу осторожно нагревали в вытяжном шкафу, не допуская разбрызгивания жидкости. Когда содержимое колбы становилось однородным, прекращали нагревание, давали остыть, добавляли 0,5 г сернокислого калия и продолжали нагревание до тех пор, пока жидкость в колбе не становилась прозрачной, зеленовато-голубой окраски без бурого оттенка. По окончании сжигания содержимое колбы охлаждали и количественно переносили в отгонную колбу вместимостью 500-750 см . Приемником служила коническая колба вместимостью 250-300 см , с 25-30 см серной кислоты 0,05 моль/дм . Конец трубки холодильника погружали в раствор серной кислоты. В отгонную колбу осторожно, по стенкам, избегая смешивания жидкостей, приливали 50-70 см раствора гидроокиси натрия 330 г/дм , бросали кусочек лакмусовой бумаги и быстро закрывали ее пробкой, соединенной посредством каплеуловителя с холодильником, осторожно перемешивали содержимое и нагревали. Реакция жидкости в колбе должна быть резко щелочной. После закипания жидкости в колбе приемник опускали так, чтобы конец трубки холодильника находился на некотором расстоянии от поверхности раствора и продолжали отгонку до тех пор, пока не отгонится не менее 2/3 жидкости. Конец отгонки определяли по лакмусовой бумаги. Если отгонка закончена, капля дистиллята не должна вызывать посинения красной лакмусовой бумаги. По окончании отгонки конец трубки холодильника обмывали водой в приемную колбу и содержащийся в ней избыток серной кислоты оттитровывали раствором гидроокиси натрия 0,1 моль/дм в присутствии метилового красного. Одновременно проводили контрольный анализ без навески исследуемого образца.
Стоить отметить также, что большинство из исследованных нами рыб были инвазированы другими метацеркариями трематод, а именно: Paracaenogonimus ovatus (сем. Prohemistomidae), Bolbophoras confiisus (сем. Posthodiplostomidae) и Hysteromorpha tribola (сем. Diplostomidae), как моноинвазия, так и в смешанной форме. Так, для P.ovatus ЭИ у красноперки составила 60-100%, ИИ 1-ЗОэкз.; у густеры — ЭИ 80%, ИИ 1-11экз.; у леща — ЭИ 50%, ИИ 1-5экз; у воблы — ЭИ 20%, ИИ 2экз. Для B.confusus у красноперки ЭИ составила 38,46-40%, ИИ 1-11экз.; у леща — ЭИ 8,33%, ИИ 1 экз.; у воблы — ЭИ 20%, ИИ 1 экз.; для H.tribola для густеры ЭИ составила 60%, ИИ 1-3 экз.
Видовую принадлежность метацеркарий определяли по Сударикову В.Е. (2002). Приведенные автором описание метацеркарий свели в единую таблицу 12, так как мы считаем, что их нужно дифференцировать исходя из анатомо-морфологических признаков, имея в виду, что до наших исследований не указывалось на наличие этих трематод. Принцип дифференциации указанных видов трематод основан на строении метацеркарий, размеру и форме цист, размеру и форме метацеркарий, освобожденных из цисты.
При обнаружении личинок в рыбе, в том числе при оценке эффективности ее обеззараживания, необходимо определять их жизнеспособность. Нами проведена сравнительная оценка ряда методов определения жизнеспособности личинок описторхисов.
По морфологическим признакам. Метацеркарий трематод, выделенных из тканей рыбы с помощью препаровальной иглы, помещали в каплю теплой воды или физраствора (37-40?С) на предметное стекло, накрывали покровным стеклом и исследовали под малым и большим увеличением микроскопа. Явное нарушение целости оболочек цист, грубые изменения внутреннего строения личинки, распад ее содержимого, разрушение экскреторного пузыря являются признаками гибели метацеркарий. Отсутствие указанных показателей свидетельствует о наличии живых личинок.
Метод механического воздействия. Как известно, метацеркарий обладают способностью совершать движения,, находясь в цисте. Наличие даже самых слабых самостоятельных движений личинки свидетельствует о ее жизнеспособности. В этой связи движение личинок стимулировали слабым придавливанием. метацеркарий покровным стеклом.
Метод химического воздействия. Вызвать движение личинок можно желчью животных или трипсином. На выделенных метацеркарий наносили несколько капель химического реагента так, чтобы полностью покрыть личинок. Для ускорения эксцистирования предметное (часовое) стекло с личинками слегка подогревали над пламенем спиртовки. Через несколько секунд под воздействием химического раздражителя начинался выход личинок из цист и их активное движение, что служило показателем жизнеспособности. Процесс эксцистирования личинок контролировали под микроскопом типа МБС.
При отсутствии в течение 30 мин всякой двигательной реакции следует учитывать как гибель личинок.
Метод окрашивания. Для определения жизнеспособности метацеркарий использовали окрашивание раствором; розоловош кислоты (аурина).
Кусочки мышц с личинками освобождали от жира. На ткань наносили капли розоловош кислоты, а через 2 мин — 0,1; н раствор? гидроксида калия, равномерно распределяя: его по; ткани. Избыток жидкости с препарата снимали фильтровальной бумагой. Накрывали покровньшистеклом и микроскопировали. В этих опытах ткань рыбы окрашивалась в розовый цвет, живые личинки совершенно не окрашивались; мертвые личинки становились розовыми.
Метод биологической пробы. Метод основан на способности большинства видов гельминтов, паразитирующих у человека, приживаться и у других млекопитающих. Кусочки мышц рыбы с личинками скармливают лабораторным животным (котятам). Через определенное для каждого вида гельминта время, в фекалиях животного обнаруживают яйца паразита. Затем животное усыпляют (умерщвляют); и вскрывают методом неполного гельминтологического вскрытия. Обнаруженных; гельминтов определяют до вида.
Выделение яиц O.felineus начинается через 20-25 суток после: заражения. При вскрытии животных через 3-5 недель после заражения половозрелых трематод обнаруживают в желчных протоках печени, желчном пузыре. Метод дает 100% эффект заражения, что подтверждает жизнеспособность.
Выделение условно-патогенных микроорганизмов из опытных проб рыб, пораженных описторхозом с ИИ более 51 экз., по-видимому, можно объяснить их проникновением вместе с личинками во время их внедрения через кожный покров рыб, их миграции и в связи с этим ослаблением общей резистентности организма рыб.
Для определения химического состава мяса рыб использовали пробы свежей снулой рыбы (из спинной мускулатуры язей двухлеток), выловленных из реки Обь в районе города Ханты-Мансийск. Были определены массовые доли воды, белка, жира, содержание золы, фосфора и кальция. На основании этих показателей расчетным путем определена энергетическая ценность мяса рыб, пораженных описторхозом с учетом степени инвазии. В качестве контроля исследовано мясо здоровой рыбы (язя). Результаты этих исследований представлены в таблице 17.
Как установлено исследованиями, мясо рыб, пораженных описторхозом, характеризуется более повышенным содержанием влаги в сравнении со здоровой рыбой: при низкой ИИ на 1,26%, при средней ИИ — на 1,36% и при высокой — на 3,06%. В этой связи отмечается зависимость, что чем выше ИИ я содержание влаги, тем меньше уровень содержания белка, жира, золы, кальция и фосфора соответственно: — при низкой ИИ: белка- на 1,25%, жира — на 0,1%, золы — на 0,059%, фосфора — на 0;36%, кальция — на 0;34%; — при средней ИИ: белка — на 0,67%, жира — на 0;5%, золы — на 0,082%, фосфора — на 0,66%, кальция — на 0j5%; — пршвысокой ИИ: белка — на 2,42%, жира— на 0j55%, золы— наО; 177%, фосфора,- на 0;86%, кальция — на 0;90%
Расчетным путемі, исходя из таблицы Покровского К.С (1971) по определению пищевой; ценности продуктов, было определено; что энергетическая ценность на 100 г мяса (ккал) рыб, пораженных описторхозом в сравнении со здоровой рыбой составляет: при низкой ИИ- 95,9; при средней ИИ — 94,62 и при высокой ИИ- 87,17 ккал, что указывает на снижение их калорийности соответственно на 5,8% 7,1% и 19,9% в сравнении с контролем.
Данные обработаны методом определения достоверности различий между двумя? средними величинами; с использованием t критерия. Различие статистически? значимо с вероятностью 95%: Расчеты по снижению; веществ в мышечной ткани? проведены! по определению абсолютного снижения, т.к. считаем этот подход показывает более объективно изменения по химическому составу.
Таким образом, исходя из полученных данных, рыба, инвазированная O.felineus, особенно при: высокой ИИ; характеризуется более низкой энергетической ценностью в сравнении со здоровой рыбой.
Определение относительной биологической ценности (ОБЩ. Материалом для определения ОБЦ служила рыба (красноперка и язь), пораженная описторхозом, от которой отбирали пробы мышечной ткани в области спинной мускулатуры. Так, при низкой и средней ИИ относительная биологическая ценность ниже на 1-1,7%, что недостоверно. Что касается мяса рыб с высокой ИИ, то снижение относительной биологической ценности составляет 2,7%, что является достоверным показателем и указывает на пониженную его биологическую ценность.
Токсико-биологическая оценка. Токсико-биологическая оценка рыбы, пораженной описторхозом, была проведена с применением культур Tetrahymena pyriformis и Colpoda steinii, а также при постановке биопробы на белых мышах. Результаты исследований представлены в таблице 19.
источник
Дифиллоботриоз. Дифиллоботриоз — инвазионная зооантропонозная болезнь хищных рыб (окуневых, щук, налимов, лососевых), вызываемая личиночной стадией лентеца широкого плероцеркоидом. Дифиллоботриоз широко распространен в Ленинградской, Новгородской областях, в Поволжье и других регионах России.
Развитие возбудителя происходите участием дополнительного и промежуточного хозяев. Половозрелый паразит обитает в кишечнике человека и плотоядных млекопитающих, которые с фекалиями выделяют во внешнюю среду яйца. Попав в воду, яйца превращаются в личинок корацидиев, которых поедают рачки-циклопы и через две-три недели они становятся инвазионными для рыбы. В организме рыбы, съевшей инвазированного рачка, формируются плероцеркоиды. При поедании инвазированной рыбы плероцеркоиды попадают в желудочно-кишечный тракт дефинитивного хозяина, где они закрепляются на стенке кишечника при помощи ботрий и начинают расти. Взрослые гельминты могут достигать в длину 10 м. Продолжительность жизни лентеца широкого в организме окончательного хозяина до 20 лет.
Ветеринарно-санитарная экспертиза при дифшыоботриозе. Для выявления плероцеркоидов вскрывают брюшную полость рыбы и тщательно осматривают внутренние органы, а также вскрывают мышцы. Плероцеркоиды видны невооруженным глазом, они могут располагаться как внутри фиброзных капсул диаметром до 5 мм, так и без них; наиболее крупных плероцеркоидов находят в брюшной полости. Сколекс у только что извлеченных плероцеркоидов втянут, а сами они имеют булавовидную форму. Поэтому для определения видовой принадлежности плероцеркоидов их помещают на предметное стекло в каплю теплого изотонического раствора, где они выворачивают сколекс, и просматривают под малым увеличением микроскопа. Плероцеркоиды лентеца широкого — это ленточные гельминты молочно-белого цвета, продолговатой формы, с поперечными складками на теле, длиной 1—4,5 см и шириной 1—3 мм, головной конец плероцеркоида более широкий с двумя щелевидными ботриями, с помощью которых личинка прикрепляется к стенке кишечника окончательного хозяина (рис. 49). Плероцеркоиды других ленточных гельминтов имеют сколекс, вооруженный хитиновыми крючьями.
Рис. 49. Плероцеркоиды:
/ — плероцеркоид лентеца широкого; 2 и 3 — сколексы плероцеркоидов лентеца широкого и триенофоруса; 4 — хитиновые крючья
Ветеринарно-санитарная оценка. Использовать для пищевых целей рыбу, зараженную плероцеркоидами лентеца широкого, без соответствующей обработки запрещается. При хороших органолептических показателях рыба обеззараживается: проваркой не менее 20 мин, прожаркой в виде котлет, или тонких ломтиков до 100 г, или рыбного фарша
20—25 мин или направляется для изготовления консервов; заморозкой —12 °С — 72 ч, —15 °С — 50 ч, -20 °С — 36 ч; посолом при помоши рассола плотностью 1180-1200 кг/м 3 — 14 суток.
Описторхоз. Описторхоз — зооантропонозная инвазионная болезнь, поражающая преимущественно рыб семейства карповых. Возбудителем является личинка кошачьей двуустки (Opisthorchis felineus).
Описторхоз распространен в бассейнах рек Обь, Иртыш, в реках, впадающих в Каспийское, Азовское, Черное моря, на Украине и Дальнем Востоке. Описторхоз у человека протекает очень тяжело, и при высокой степени инвазии заканчивается смертельно, вызывая цирроз печени.
Дефинитивными хозяевами являются человек и плотоядные животные, у которых половозрелая стадия гельминта паразитирует в печени, желчном пузыре и протоках поджелудочной железы. Яйца гельминта с фекалиями попадают в воду, развитие до стадии церкариев проходит в моллюске большом прудовике. После выхода из моллюска они внедряются в подкожные слои мышц рыб семейства карповых и превращаются в метацеркариев, инвазионных для человека.
Ветеринарно-санитарная экспертиза при описторхозе. Размер метацеркариев кошачьей двуустки составляет 0,2—0,3 мм, поэтому обнаружить их невооруженным глазом практически невозможно. При исследовании рыбы на описторхоз готовят срезы мышечной ткани, раздавливают их в компрессориуме и просматривают под малым увеличением микроскопа. В цисте метацеркарий лежит согнутым в форме «подковы» и при микроскопии мышц видны присоски и темный мочевой (экскреторный) пузырь (рис. 50).
Рис. 50. Кошачья двуустка:
а — половозрелая; б — метацеркарий; 1 — присоски; 2 — экскреторный пузырь
Ветеринарно-санитарная оценка. В регионах, неблагополучных по описторхозу, рыба считается условно годной. Использовать для пищевых целей зараженную рыбу без соответствующей обработки запрещается.
При хороших органолептических показателях рыба обеззараживается: проваркой не менее 20 мин, прожаркой в виде котлет или тонких ломтиков до 100 г — 20—25 мин или направляется для изготовления консервов; заморозкой —28 °С — 72 ч, —35 °С — 50 ч, -40 °С — 7 ч; посолом при помощи рассола плотностью 1200 кг/м 3 до достижения массовой доли соли в рыбе 14%.
Метагонимоз и клонорхоз. Это зооантропонозные болезни рыб, вызываемые трематодами Metagonimus yokogawai, Clonorchis sinensis. Эти болезни распространены в бассейне реки Амур и странах Юго-Восточной Азии. Метагонимозом поражаются рыбы семейства карповых, лососевых, окуневых, клонорхозом — только рыбы семейства карповых, которые являются промежуточными хозяевами этих паразитов. Дефинитивными хозяевами клонорхоза являются человек и плотоядные животные, а метагонимозом, кроме того, могут поражаться и рыбоядные птицы. Цикл развития этих трематод аналогичен описторхозу.
Ветеринарно-санитарная экспертиза при метагонимозе и клонорхозе. Ме- тацеркарии метагонимоза локализуются в кожном покрове рыбы, под чешуей, в плавниках и жабрах. Цисты имеют шаровидную форму диаметром 0,15—0,2 мм. Диагностику проводят с помощью микроскопа. Для этого берут соскоб чешуи, плавники или жабры помещают между двух предметных стекол, обрабатывают 50%-ным водным раствором глицерина и просматривают под малым увеличением микроскопа. Цисты имеют шаровидную форму диаметром 0,15-0,2 мм, внутри располагается личинка, изогнутая дугой, имеющая две присоски и покрытая тонкими шипами. Личинки кло- норхиса локализуются преимущественно в мышцах, для их обнаружения готовят срезы так же, как при диагностике описторхоза.
Ветеринарно-санитарная оценка. В регионах, неблагополучных по заболеванию, рыбу зачищают, удаляя плавники, жабры, чешую и подвергают проварке не менее 20 мин, прожарке в виде котлет, или тонких ломтиков до 100 г, или рыбного фарша 20-25 мин или направляют для изготовления консервов, либо обеззараживают заморозкой —28 °С — 72 ч, -35 °С — 50 ч, -40 °С — 7 ч; или посолом при помощи рассола плотностью 1200 кг/м 3 до достижения массовой доли соли в рыбе 14%.
При браковке рыбы или удалении пораженных паразитами частей тушки следят, чтобы они не попадали в водоемы и не служил и источником заражения других рыб. Нельзя скармливать плотоядным животным в свежем виде мясо, внутренности и рыбные отходы, зараженные паразитами, опасными для человека и животных.
Анизакидоз. Это инвазионная зооантропонозная болезнь многих видов морских рыб, вызываемая личинками нематод семейства Anisakidae, характеризующаяся поражением печени, кишечника, брюшной полости, реже мышц. Дефинитивным хозяином анизакид являются морские млекопитаюшие, однако эти гельминты могут приживаться в желудке и кишечнике человека, вызывая сильный гастроэнтерит и аллергию. Однако в организме человека анизакиды не развиваются до половозрелого состояния. Инва- зионность этих гельминтов для человека сравнительно невысокая, чаще всего заболевают люди с пониженной кислотностью желудка.
Ветеринарно-санитарная экспертиза при анизакидозе. Личинки аниза- кид видны невооруженным глазом. Их обнаруживают при стандартном патолого-анатомическом исследовании рыбы. Гельминты рода Anisakis имеют вид круглых голых червей с заостренными концами длиной до 2 см, свернутых в спираль, и располагаются внутри капсул, расположенных на брыжейке, печени, гонадах, кишечнике и других органах. Анизакиды рода Pseudoterranova еще крупнее и достигают в длину 35-60 мм, имеют красно-коричневую окраску и локализуются в мышцах, печени и гонадах.
Ветеринарно-санитарная оценка. Рыбу, пораженную анизакидами, имеющую хорошую органолептические показатели, потрошат, зачищают от паразитов. Затем она должна быть направлена на замораживание при температуре -18 °С в течение 11 суток, при температуре -20 «С — 24 ч и -30 °С — 10 мин или подвергнута тепловой обработке (изготовление консервов). После заморозки определяют жизнеспособность паразитов. Для этого рыбу размораживают, извлекают гельминтов, помешают их на предметном стекле в каплю теплого изотонического раствора и определяют их подвижность под малым увеличением микроскопа, при необходимости раздражая их препаровальной иглой. Если хотя бы один из гельминтов сохранил жизнеспособность, то рыба считается необеззараженной.
Триэнофороз. Это инвазионная болезнь пресноводных рыб, вызываемая цестодами Triaenophorus nodulosus, Triaenophorus crassus, характеризующаяся поражением печени, брыжейки и мышц. Дефинитивным хозяином является щука, половозрелый паразит в кишечнике которой достигает 30 см. Яйца половозрелого паразита попадают в воду, из них развивается корацидий. Они заглатываются рачками. В дальнейшем рачок попадает в кишечник окуня, налима, судака, форели, корюшки и других рыб. Из кишечника рыбы личинки проникают в полость тела и поселяются в печени или брыжейке, Triaenophorus nodulosus или в мышцах Triaenophorus crassus, превращаясь в плероцеркоид. Зараженная рыба поедается щукой, в кишечнике которой плероцеркоид закрепляется, начинает расти, превращаясь во взрослого гельминта.
Ветеринарно-санитарная экспертиза при триэнофорозе. При патологоанатомическом осмотре рыбы на печени и в брызжейке обнаруживают плероцеркоидов Triaenophorus nodulosus, а в мышцах обнаруживают пле- роцеркоидов Triaenophorus crassus, образующих капсулы размером с горошину. Обнаруженных плероцеркоидов помешают на предметном стекле в каплю теплого изотонического раствора и просматривают под малым увеличением микроскопа с целью дифференцировать их от плероцерко- идовлентеца широкого, опасного для человека. Сколекс триэнофорусов вооружен хитиновыми крючьями характерной формы.
Лигулез. Это инвазионная болезнь рыб семейства карповых, характеризующаяся поражением органов брюшной полости истощением, вздутием брюшка. Дефинитивные хозяева — чайки, утки, в кишечнике которых паразитируют половозрелые ремнецы. Яйца гельминта попадают в воду, превращаются в корацидиев, которых заглатывают рачки. В кишечнике и брюшной полости рыб, заглотивших инвазированных рачков, развиваются плероцеркоиды.
Ветеринарно-санитарная экспертиза при лигулезе. При патологоанатомическом осмотре рыбы отмечают ее истощение, гидремичность мышц, вздутое брюшко, при вскрытии которого обнаруживают плероцеркоиды белого цвета с вооруженным сколексом длиной от нескольких сантиметров до I м.
Ветеринарно-санитарная оценка при лигулезе, триэнофорозе и других гельминтозоврыбы, неопасных для человека. Если пораженная гельминтами рыба истощена или имеет значительные патолого-анатомические изменения, то она направляется в техническую утилизацию. При хороших органолептических показателях рыбу в целях придания ей надлежащего товарного вида потрошат, тушки тщательно зачищают от паразитов и направляют в реализацию либо перерабатывают на фарш.
источник
ЭКСПЕРТИЗА РЫБЫ
ПРИ ИНВАЗИОННЫХ
Описторхоз. Поражаются рыбы семейства карповых. Возбудителем является личинка Opisthorchis felineus, именуемая кошачьей или сибирской двуусткой. Половозрелая стадия паразитирует у постоянного хозяина в печени, желчном пузыре и протоках поджелудочной железы. Дефинитивным хозяином является человек и плотоядные животные. Регионы, в которых встречается описторхоз, — это бассейны рек (Обь, Иртыш); реки, впадающие в Каспийское, Азовское, Черное моря. Яйца гельминта с фекалиями попадают в воду, развитие до стадии церкариев проходит в моллюске. После выхода из моллюска проникают в подкожные слои мышц рыб и превращаются в метацеркариев. Размер их 0,2-0,3 мм. Проводят исследование раздавленных кусочков мышечной ткани под малым увеличением микроскопа. В цисте метацеркарий лежит согнутым, и при микроскопии мышц видны присоски и темный экскреторный пузырь.
Ветеринарно-санитарная оценка. Врегионах, неблагополучных по описторхозу, рыба считается условно годной. Ее необходимо подвергать соответствующей технологической обработке, варке в течение 30 минут или замораживанию при температуре -15°С — 30 суток, -28°С — до 42 часов и при температуре -35°С — около 10 часов.
Дифиллоботриоз. Инвазионная болезнь человека и плотоядных животных (собак, кошек, лисиц), вызываемая личиночной стадией лентеца широкого. Половозрелый паразит обитает в кишечнике человека и животных, а личинки — плероцеркоиды — в мышцах и органах щуки, налима, окуня, ерша. Развитие возбудителя происходит с участием дополнительного и промежуточного хозяев. Зараженные лентецом широким человек и плотоядные животные с фекалиями выделяют во внешнюю среду яйца. Дальнейшее развитие происходит в воде, в конечном счете они попадают в тело рыбы. В жизненном цикле дифиллоботриума могут присутствовать резервуарные хозяева — хищные рыбы (лосось, озерная форель, хариус, угорь), в которых плероцеркоиды могут накапливаться в больших количествах. Продолжительность жизни лентеца широкого в организме окончательного хозяина — до 20 лет.
Плероцеркоиды — это личинки молочно-белого цвета в виде червяков, с поперечными морщинами на теле, длиной 1-1,5 см. Головной конец плероцеркоида более широкий с двумя щелевидными ботриями, с помощью которых личинка прикрепляется к стенке кишечника.
У ряпушки, сига, омуля, хариуса и других рыб, обитающих в Байкале, других водоемах Сибири и Севера находят личинок малого или узкого лентецов. Окончательным хозяином этих лентецов является человек, рыбоядные птицы. Цикл развития лентецов малого и узкого такой же, как и широкого. Плероцеркоиды локализуются на серозных покровах желудочно-кишечного тракта.
Ветеринарно-санитарная оценка.Использовать для пищевых целей рыбу, зараженную плероцеркоидами, без соответствующей обработки запрещается. Она может быть использована после обеззараживания проваркой не менее 30 минут или для изготовления консервов. Обеззараживание наступает также после замораживания при температуре -18°С в течение 48 часов, а при -12°С — не менее 6 суток.
Рыбу можно обезвредить в микроволновой печи. Продолжительность обработки зависит от массы рыбы. Так, при массе 400 г достаточно 3 минут, 500 г — 5 минут, 850-900 г — 10 минут, 1000-1100 г — 12 минут.
В местах реализации рыбы в регионах, неблагополучных по дифиллоботриозу, должны быть вывешены плакаты, оповещающие о необходимости тщательной проварки тушек рыбы.
Клонорхоз. Гельминтозная болезнь человека и плотоядных животных, связанная с поражением печени. Возбудителем является Clonorchis sinensis из семейства Opisthorchide.
Клонорхоз распространен очагово на Дальнем Востоке и в районах дальнего и среднего Приамурья (при потреблении сырой рыбы). Заражено семейство карповых. Развитие возбудителя клонорхиса аналогично развитию описторхиса. Дополнительным хозяином являются пресноводные рыбы (более 70 видов).
Ветеринарно-санитарная оценка.Такая же, как и при описторхозе.
Метагонимоз.Болезнь распространена у рыб в реках Амур, Днепр, Дунай, Днестр. Возбудитель — Metagonimus Jokogawai. Поражаются рыбы семейства карповых и лососевых. Гельминт развивается с участием дефинитивного хозяина, которым является человек, плотоядные животные и рыбоядные птицы. Половозрелая стадия паразитирует в кишечнике, выделяет яйца, которые с фекалиями попадают в воду. Дальнейшее развитие проходит с участием моллюсков и рыб. Церкарии проникают в кожный покров рыбы, под чешую, плавники, а также в жабры. Цисты имеют шаровидную форму диаметром 0,15-0,2 мм. Диагностику проводят с помощью микроскопа. Для этого берут чешую, помещают между двух предметных стекол, обрабатывают 50% глицерином и рассматривают под малым увеличением.
Ветеринарно-санитарная оценка. Врегионах, неблагополучных по заболеванию, рыбу зачищают, удаляя плавники, жабры, чешую и подвергают варке в течение 30 минут, либо замораживанию до -20°С с последующей выдержкой 8-10 суток.
Триэнофороз. Это болезнь пресноводных рыб, человек не принимает участия в биологическом цикле развития. Возбудители — Triaenophorus nodulosus и Tr. crassus. Дефинитивным хозяином является щука, половозрелый паразит в кишечнике которой достигает 30 см. Яйца половозрелого паразита попадают в воду, из них развивается корацидий. Они заглатываются рачками. Это первые промежуточные хозяева. В дальнейшем рачок попадает в кишечник окуня, налима, судака, форели, корюшки — вторые промежуточные хозяева. Из кишечника рыбы личинки проникают в полость тела и поселяются в печени или брыжейке, превращаясь в плероцеркоид.
Развитие Tr. crassus проходит несколько по-другому. Дефинитивным хозяином является также щука, но личиночная стадия развивается, преимущественно, у сигов, и личинки локализуются не в полости тела, а в мускулатуре в капсулах размером с горошину.
При рассмотрении тех или других возбудителей под микроскопом находят личинки с наличием на головном конце крючьев.
Ветеринарно-санитарная оценка.Щук следует выпускать в реализацию в потрошеном виде. У рыб, пораженных плероцеркоидами, устанавливают степень зараженности, при слабой — используют на пищевые цели. Если у сигов поражена мускулатура, то такую рыбу утилизируют.
Лигулез.Болезнь регистрируется у рыб семейства карповых, они являются промежуточным хозяином. Возбудитель — Ligula intestinalis. Дефинитивные хозяева — чайки, каравайки, утки. Яйца гельминта попадают в воду, превращаются в корацидиев, которых заглатывают рачки, и в них образуется процеркоид. У рыб, заглотивших таких рачков, развивается личинка — плероцеркоид, который за несколько лет в брюшке достигает длины до 1 м. Их называют лигулами (рамнецами). Брюшко рыбы сильно вздуто, иногда отмечается гидремия.
Ветеринарно-санитарная оценка.Учитывая безопасность лигул для человека, рыбу после потрошения можно реализовывать на пищевые цели, если нет гидремии. При наличии гидремии рыбу направляют на утилизацию или на корм животным.
При поражении рыб пиявкамии ракообразными их удаляют, а рыбу используют без ограничений. При выявлении истощения или наличии изъязвлений направляют на утилизацию.
источник
Описторхоз — инвазионная болезнь, вызываемая метацеркариями (личиночной стадией) трематоды Opisthorchis felineus (кошачьей двуусткой), локализующимися в подкожной клетчатке и мышцах карповых рыб.
У дефинитивных хозяев (человек, кошка, собака, свинья, волк, лисица, медведь и др.) половозрелый паразит обитает в желчных протоках печени, желчном пузыре и поджелудочной железе. При длительном течении описторхоз ведет к хроническому заболеванию этих органов, способствует возникновению рака печени. Яйца описторхиса выделяются с фекалиями. После попадания яйца в водоем, паразит проходит несколько последовательных стадий развития в пресноводных моллюсках и рыбах семейства карповых. Человек и животные заражаются в результате употребления в пищу карповых рыб и продуктов их переработки, содержащих живых личинок (метацеркариев) паразита.
В местностях, неблагополучных по описторхозу, рыбу необходимо выборочно исследовать на наличие личинок этого паразита. При микроскопии кусочков мышечной ткани, сдавленных между пластинами компрессориума, в межмышечной соединительной ткани обнаруживают овальные цисты размером с маковое зерно белого цвета, в которых находятся подвижные метацеркарии, веретенообразной формы с двумя присосками (ротовой и брюшной) и круглым экскреторным пузырем черного цвета (рис.5 ).
Дифиллоботриозы — инвазионные болезни хищных рыб, вызываемые плероцеркоидами (личинками) лентецов: Diphyllobotrium latum, D. dendriticum, D. klebanovski, D. luxi и др.
лентецы паразитируют в тонком кишечнике у человека и плотоядных животных. Первый промежуточный хозяин — рачки-циклопы и диаптомусы, а второй — хищные рыбы: щука, окунь, ерш, налим. У других видов лентецов — рыбы семейства лососевых (сиг, омуль, хариус, ряпушка). В кишечнике дефинитивных хозяев развивается половозрелая цестода, яйца от которой с фекалиями попадают в воду. Корацидий, вышедший из яйца, заглатывается рачком-циклопом или диаптомусом, а последний — рыбой. В рыбе развиваются плероцеркоиды, которые локализуются во внутренних органах, икре, мышцах и представляют собой молочно-белого цвета червячков длиной 0,5-1,5см, шириной 2-3мм, свободно лежащих в тканях. Плероцеркоиды других видов лентецов локализуются в полости тела и на серозных покровах желудочно-кишечного тракта (рис.7 ).
Анизакидоз — гельминтоз, вызываемый личинками некоторых представителей нематод семейства Anisakidae. В пресноводных рыбах, экологически не связанных с морской акваторией, не встречается. Нематода во взрослой стадии паразитирует в кишечнике морских млекопитающих и рыбоядных птиц; а в личиночной — в полости тела, на поверхности или внутри паренхиматозных органов и мускулатуре рыб (треска, скумбрия, сайра, сельдь, натотения и др.). Личинки патогенных анизакид чаще бывают в свернутом состоянии (форма спирали, широкого кольца) или вытянутыми, беловато-желтого цвета, в полупрозрачных капсулах или без них. Цисты имеют, как правило, в поперечнике 3,5-5мм, в толщину 1-1,5мм. Извлеченная из цисты личинка достигает в длину до 4см при толщине тела 0,4-0,9мм.
Личинки, попав в кишечник человека с сырой рыбой, обычно не достигают половой зрелости, а проникают в стенку желудка и кишечника, вызывают воспаление, аллергизацию организма, иногда со смертельным исходом.
Рыба, в которой при лабораторых исследованиях не обнаружено живых гельминтов, опасных для человека и животных, подлежит сертификации и реализации.
Рыба, содержащая живых гельминтов, опасных для человека и животных, в реализацию не допускается и переводится в разряд “условно годной” (при хорошей товарной кондиции) или “непригодной” (при высокой интенсивности инвазии и ухудшении качества продукта).
“Условно годная” рыба допускается для переработки на пищевые продукты или в реализацию только после обеззараживания с последующей сертификацией при наличии документов, в которых указан метод проведенной обработки и предприятие, где она проводилась.
Условия обеззараживания или утилизации рыбы, содержащей гельминтов, опасных для человека и животных, определяет производитель по согласованию с органами Госсанэпиднадзора и Госветслужбы.
При наличии в рыбе погибших , опасных для человека и животных, или не опасных гельминтов, при удовлетворительных органолептических показателях качества продукта, оценку пригодности рыбы в пищу проводят согласно требований, представленных в табл.4 и 5..
Условия реализации рыбной продукции, содержащей погибших (опасных) и не опасных для здоровья человека и животных гельминтов, не превышающих нормативы, приведенные в табл.4 и 5, но при неудовлетворительных показателях качества по органолептическим и физико-химическим показателям, определяются исходя из нормативов табл. 2 и 3..
При наличии в рыбе погибших (опасных) и не опасных для человека и животных, гельминтов в количестве равном или превышающем нормы таблицы 4, рыбу считают непригодной и утилизируют.
Если в полости тела и на внутренних органах рыбы обнаружены паразиты, видимые без применения оптических средств, рыба направляется на обработку для удаления паразитов и внутренних органов.
источник
ИНСТРУКЦИЯ ПО САНИТАРНО-ГЕЛЬМИНТОЛОГИЧЕСКОЙ ОЦЕНКЕ РЫБЫ, ЗАРАЖЕННОЙ ЛИЧИНКАМИ ДИФИЛЛОБОТРИИД (ВОЗБУДИТЕЛЯМИ ДИФИЛЛОБОТРИОЗОВ) И ЛИЧИНКАМИ ОПИСТОРХИСА (ВОЗБУДИТЕЛЕМ ОПИСТОРХОЗА), И ЕЕ ТЕХНОЛОГИЧЕСКОЙ ОБРАБОТКЕ
В целях охраны населения и животных от заболеваний дифиллоботриозами (возбудители — Diphyllobothrium latum, D. dendriticum, D. ditremum) и описторхозом (возбудитель Opisthorchis felineus) через рыб, инвазированных личинками дифиллоботриид и описторхисов, вылавливаемых из водоемов на территориях, неблагополучных по этим гельминтозам, следует руководствоваться следующим.
1. В областях, краях, автономных республиках, особенно в районах, эндемичных по дифиллоботриозу и описторхозу, где на пресноводных водоемах производится промысловый и любительский лов щуки, налима, окуня, ерша, пеляди, сига, хариуса, омуля, ряпушки, гольца и др., а также рыб семейства карповых: язя, леща, плотвы, ельца, красноперки, усача, подуста, жереха, уклеи, линя, густеры, синца, гольяна — необходимо проводить гельминтологические исследования этих рыб на зараженность личинками дифиллоботриид и описторхиса.
2. Организация и проведение исследований рыбы из естественных водоемов и водохранилищ на зараженность личинками дифиллоботриид и описторхиса осуществляются территориальными санэпидстанциями и ветеринарными лабораториями 1 раз в 3 года. Заключение о порядке использования и обработки рыбы выдается территориальными СЭС. При этом рыбохозяйственные организации представляют необходимое (в соответствии с п. 3 настоящей Инструкции) количество рыбы за свой счет и своим транспортом.
В случае исследования рыбы из вышеуказанных водоемов специалистами ихтиопатологической службы и других учреждений они должны сообщить о результатах исследований в соответствующие территориальные санэпидстанции и главному ветеринарному врачу района.
Рыба из водоемов, где проводится ее лов членами рыболовных любительских обществ, представляется для исследования за счет районных отделений этих обществ и их транспортом. Срок доставки рыбы устанавливается на местах областными (краевыми, АССР) санитарно-эпидемиологическими станциями и ветеринарными лабораториями совместно с областными (или другими соответственно) управлениями рыбохозяйственных организаций.
3. На зараженность личинками дифиллоботриид исследуются: щука, налим, окунь, ерш, пелядь, омуль, сиг, хариус, ряпушка, голец, муксун, лосось, форель озерная, чир, тугун, нельма, кета, нерка, кумжа, таймень, корюшка по методике, изложенной в Приложении 1 настоящей Инструкции. На зараженность личинками описторхиса исследуются рыба семейства карповых, язь, лещ, плотва различных подвидов (чебак, сорога, вобла и др.), елец, красноперка, усач, подуст, жерех, уклея, линь, густера, синец, гольян по методике, изложенной в Приложении 2 настоящей Инструкции.
Исследуют по 15 экземпляров каждого вида рыб, обитающего в данном водоеме.
4. При обнаружении в водоеме рыбы, зараженной личинками дифиллоботриид и описторхиса, всю рыбу соответствующих видов независимо от степени зараженности ее следует считать условно годной и допускать к использованию в пищу только после обработки в соответствии с действующими инструкциями по технологической обработке рыбы и п. п. 7 — 10 настоящей Инструкции.
5. Реализация населению свежей и охлажденной необеззараженной условно годной рыбы через предприятия общественного питания и торговли запрещается. В случае отсутствия возможности обработки условно годной рыбы на местах лова допускается ее транспортировка к ближайшему пункту обработки в пределах района, области.
6. Использование условно годной рыбы в пищевых целях допускается в зависимости от ее вида после обработки путем засолки, замораживания, копчения, вяления, специальной кулинарной обработки или консервирования.
7. Посол условно годной рыбы осуществляется рыбообрабатывающими предприятиями:
а) при зараженности личинками дифиллоботриид: смешанным крепким и средним посолом до содержания соли в мясе рыбы крепкосоленой свыше 14%, среднесоленой от 10 до 14% с плотностью тузлуков 1,18 — 1,20 в течение 14 сут.; смешанным слабым посолом до содержания соли в мясе рыбы 8% при плотности тузлуков 1,15 — 1,16 в течение 16 сут.;
б) при зараженности личинками описторхиса: только смешанным крепким посолом до содержания соли в мясе рыбы 14% и выше при плотности тузлука 1,2 в течение 14 сут.
8. При посоле икры в качестве самостоятельного продукта обеззараживание личинок лентецов осуществляется следующими методами:
теплый посол (15 — 16 °С) проводится при количестве соли (в % к массе икры) в 12% — 30 мин.; 10% — 1 ч; 8% — 2 ч; 6% — 6 ч;
охлажденный посол (5 — 6 °С) при тех же количествах соли проводится вдвое дольше.
9. Рыба холодного копчения при зараженности ее личинками описторхиса изготовляется только из обезвреженного соленого полуфабриката с содержанием соли в мясе рыбы не ниже 14% с последующим отмачиванием в соответствии с действующими технологическими инструкциями.
10. На рыбообрабатывающих предприятиях необходимо обеспечить проведение мер профилактики заражения личинками лентецов и описторхиса работающих. Лица, занятые переработкой условно годной рыбы, должны соблюдать меры личной профилактики, в частности не допускать пробования сырого рыбного фарша и других полуфабрикатов рыбных блюд и икры, своевременно обеззараживать отходы, получаемые при разделке рыбы, согласно п. 12 настоящей Инструкции.
11. Запрещается сбрасывать в водоемы, на мусорные свалки и скармливать сырую рыбу и ее отходы домашним плотоядным и всеядным животным и пушным зверям клеточного содержания. Отходы, получаемые при обработке рыбы, направляются для переработки на кормовую рыбную муку, а в случае отсутствия жиромучных установок провариваются в котлах в течение 30 мин. с начала закипания воды.
12. На рынках, в помещениях баз рыболовных обществ, в рыбодобывающих предприятиях и рыбоприемных пунктах в районах, эндемичных по дифиллоботриозу и описторхозу, вывешивают плакаты с перечнем местных видов рыб, от которых можно заразиться дифиллоботриозом и описторхозом. В плакатах необходимо указать методы обеззараживания рыбы, в частности режимы термической обработки рыбы.
Термически обработанная рыба считается обеззараженной при поджаривании в пластованном виде с величиной куска до 100 г. Куски рыбы, приготовленные для жарения, вначале укладывают на сковородку кожей вниз. Общее время жарения кусков мелкой рыбы и котлет из рыбного фарша массой до 100 г не менее 25 мин. Варка такой рыбы и фарша проводится в течение 20 мин. после закипания.
Особенно важно проводить санитарно-просветительную работу на территориях с наличием неблагополучных водоемов, не имеющих рыбопромыслового значения.
13. Ответственность за выполнение настоящих положений по обработке рыбы, зараженной личинками дифиллоботриид и описторхисов, возлагается на руководителей рыбообрабатывающих предприятий.
Лица, виновные в выпуске для питания населения необеззараженной условно годной рыбы, зараженной личинками дифиллоботриид и описторхисов, с нарушением данных правил привлекаются к ответственности.
14. Контроль за выполнением мероприятий возлагается на санитарно-эпидемиологические станции, органы государственного ветеринарного контроля, а также ведомственные санитарную и ихтиопатологическую службы Минрыбхоза СССР.
С утверждением настоящей Инструкции отменяются «Временные правила санитарно-гельминтологической оценки рыбы, зараженной плероцеркоидами широкого лентеца, направляемой в предприятия рыбной промышленности и общественного питания», утвержденные Министерством здравоохранения СССР 17 мая 1960 г. N 326-60.
Плероцеркоиды лентеца широкого (D. latum) локализуются в полости тела, икре, внутренних органах, мышцах обычно без капсул (в основном у щуки, налима, окуня, ерша). Длина живых плероцеркоидов от 1 мм до 2,5 см и более. Личинки беловато-молочного цвета. Характерно наличие на теле личинок глубоких складок (ложная сегментация), которые сохраняются даже после расслабления в воде. Сколекс у плероцеркоидов, только что извлеченных из рыбы, обычно втянут (инвагинирован), и личинка имеет булавовидную форму, но при помещении ее в теплую воду сколекс вскоре вытягивается (при этом становятся хорошо заметны и присасывательные щели) и перистальтически сокращается. Личинка активно движется, то сокращаясь, то сильно вытягиваясь. Сколекс при этом приобретает вид удлиненного, заостренного на конце конуса.
Установить наличие сколекса у личинок очень важно, так как иногда за плероцеркоидов могут быть приняты фрагменты их или других цестод. Исследование живых плероцеркоидов проводят с помощью лупы и микроскопа.
Плероцеркоида помещают на предметное стекло в каплю воды или физиологического раствора, накрывают покровным стеклом и исследуют вначале под малым, а затем под большим увеличением микроскопа.
Для личинок лентеца широкого характерна толстая (до 22 мкм) кутикула, лишенная ворсинок на теле и сколексе. Субкутикулярная «светлая» зона (пространство между кутикулой и зоной сплошного расположения известковых телец) у личинок лентеца широкого узкая, не шире толщины кутикулы. Характерно также наличие желез проникновения не только в сколексе, но и в теле личинки; субкутикулярная мускулатура однослойная (что хорошо выявляется на поперечных срезах).
При установлении видовой принадлежности плероцеркоидов используют также способность личинок к осморегуляции. Для этого извлеченного из физиологического раствора плероцеркоида быстро промывают в воде и помещают в чашку Петри с водой. Плероцеркоиды лентеца широкого выживают в воде около суток. Продолжительность жизни плероцеркоидов других видов короче (см. ниже).
Плероцеркоиды лентеца чаечного (D. dendriticum) обычно располагаются в капсулах диаметром 3 — 10 мм на стенках и в толще стенок пищевода и желудка, иногда на других органах и в мышечной ткани (в основном у сиговых и лососевых рыб). Не образуется анатомически выраженных капсул при локализации личинок в икре, а у рыб некоторых видов (например, у сибирской ряпушки) наряду с плероцеркоидами в капсулах встречаются личинки, свободно залегающие в полости тела. Личинки кремового или желтоватого цвета. Развитые плероцеркоиды длиной 1 — 10 см, а отдельные особи — до 25 см. Тело имеет глубокие складки, которые при расслаблении личинок исчезают. У живых сокращенных плероцеркоидов сколекс втянут, выступающие вперед участки тела образуют у головного конца подобие «плечей». В теплом физиологическом растворе личинки столь же активны, как и плероцеркоиды лентеца широкого. По краям ботридиальных листков заметны характерные втяжения, т.е. эти края приобретают фестончатый вид. При микроскопировании живых личинок на кутикуле видны редкие короткие ворсинки, которые на сколексе едва заметны.
Субкутикулярная зона широкая, в 1,5 — 3 раза шире кутикулы. Из гистологических признаков характерны:
а) субкутикулярная мускулатура представлена 1 — 2 (редко 3) слоями;
б) железы проникновения не распространяются за пределы сколекса. В воде личинки лентеца чаечного выживают до 2,5 ч, молодые плероцеркоиды — не более 1 ч. У расслабленных личинок тело лишается складок, сколекс приобретает миндалевидную форму, ботридиальные щели широко раскрываются, тело становится полупрозрачным.
Кроме описанных плероцеркоидов, у рыб встречаются личинки других видов лентецов, не имеющих эпидемиологического значения, но похожих на первых. Из них наиболее распространены плероцеркоиды D. ditremum. Они встречаются преимущественно у лососевых (ряпушка и др.), у корюшковых рыб, в мелких (1 — 3 мм диаметром) капсулах на пищеводе и желудке. В воде выживают не более 5 — 7 мин.
Санитарно-гельминтологической экспертизе подлежат виды рыб, являющиеся дополнительными хозяевами дифиллоботриид.
На зараженность исследуют щук, налимов, окуней, ершей, также лососевых, хариусовых, корюшковых рыб (лосось, озерная форель, омуль, пелядь, чир, сиг, муксун, тугун, нельма, кета, нерка, кумжа, таймень, голец, хариус, корюшка).
Рыбу исследуют свежевыловленную. Перед вскрытием рыбу отмывают от слизи, протирают, взвешивают и измеряют ее длину. Для определения возраста берут: у щук — чешую впереди от спинного плавника выше боковой линии; у окуней, кроме того, — жаберные крышки, у налимов — только оттолиты. Очищенную чешую помещают в чешуйную книжку из бумаги — от каждой рыбы на отдельный лист, на котором отмечают номер рыбы, вид, время, место отлова и число найденных плероцеркоидов.
Рыбу можно вскрывать в большой эмалированной кювете, но лучше это делать на широкой гладкой доске. При вскрытии рыбы рекомендуется придерживаться определенной последовательности. Сначала делают короткий надрез вперед от анального отверстия, в надрез вводят тупой конец ножниц и разрезают рыбу вдоль по средней линии брюшка. Разрез продолжают до угла нижней челюсти. Затем делают дугообразный разрез, вырезают левую брюшную стенку, отделяют ее, после чего полость тела и внутренние органы внимательно осматривают, извлекая свободно лежащих плероцеркоидов.
Накладывают лигатуры на кишечник близ анального отверстия и на пищевод в его начальном отделе, чтобы не повредить пищеварительный тракт. Извлекают затем внутренние органы. Вырезают яичники и семенники, помещая их в отдельные чашки Петри. Так же поступают и с другими исследуемыми органами. Кровь из полости тела собирают в чашку Петри и просматривают. Плавательный пузырь осматривают снаружи, затем изнутри. Почки, лежащие вдоль позвоночника, соскабливают тупым инструментом, собирают в чашку Петри и исследуют компрессорным методом. Вырезают и осматривают сердце, делая при необходимости разрезы. Осматривают также сердечную полость. Содержимое, оставшееся в полости тела, собирают и исследуют компрессионно. Полость тела протирают марлевой салфеткой, одновременно соскабливают париетальную брюшину.
Затем приступают к исследованию извлеченных внутренних органов. Сначала отделяют печень и исследуют ее. Особое внимание уделяют осмотру жировой ткани, окружающей желудочно-кишечный тракт и другие органы. Жировую ткань отделяют от органов, одновременно осматривая ее и удаляя плероцеркоидов. Освобожденный от жировой ткани пищеварительный тракт осматривают, отыскивая плероцеркоидов, просвечивающих через серозные покровы.
Пилорические придатки (развитые у лососевых, налима и др.) расслаивают и осматривают снаружи. Стенку желудка и пищевода после наружного осмотра исследуют послойно. Мелких плероцеркоидов обычно находят под бинокуляром (МБС-1, 2, 9).
Жировую ткань исследуют компрессионно между двумя стеклами на темном фоне или в полупроходящем свете. Поджелудочную железу сначала разрезают на тонкие пластинки. Селезенку режут на тонкие пласты и исследуют компрессионным методом. Также исследуют сердце.
Печень осматривают снаружи, затем косые разрезы. Исследовать печень следует особенно внимательно у налима, так как молочно-белый цвет печени затрудняет обнаружение личинок.
Яичник разрезают, содержимое соскабливают и компрессируют. При исследовании крупных икринок применять компрессию необязательно, достаточно их разъединить.
После просмотра внутренних органов приступают к исследованию мускулатуры. С рыбы снимают кожу и осматривают ее внутреннюю сторону, а часть мышц, отделившихся с кожей, разрезают на пластинки или соскабливают и компрессируют. Мышцы исследуют полностью, разрезая их в косом направлении на пластинки толщиной не более 3 — 5 мм.
Определение жизнеспособности плероцеркоидов проводят при оценке эффективности обеззараживания рыбы. Извлеченные из органов и тканей рыбы плероцеркоиды могут быть неподвижными. Их помещают в подогретый физиологический раствор или желудочный сок, осторожно раздражая личинку препаровальной иглой. Даже слабые движения плероцеркоидов свидетельствуют о жизнеспособности личинок. Изменение цвета плероцеркоидов, отслоение кутикулы, деструктивные изменения тела указывают на нежизнеспособность личинок.
При проверке эффективности обеззараживания рыбы можно применять метод окрашивания живых плероцеркоидов водным раствором нейтральрота в разведении 1:20000 — 1:50000 в течение 30 — 40 мин. Затем рыбу с плероцеркоидами обеззараживают одним из указанных в Инструкции методов, проверяя через определенное время жизнеспособность личинок. Обесцвечивание личинок, ранее окрашенных нейтральротом в розовый цвет, является одним из показателей их гибели.
Столы лабораторные, табуреты, лампа настольная, шнур-удлинитель, клеенка простая, клеенка полиэтиленовая, весы с гирями и разновесами, доски разделочные, стекло толстое, кюветы и лотки эмалированные, линейка или лента сантиметровая, микроскопы МБИ, бинокулярные лупы (МБС-1, 2 или 9), лупа ручная, микрометр, ножи, брусок для заточки ножей, ножницы большие и малые, скальпели, пинцеты анатомические, чашки Петри, стекла предметные и покровные, стекла для компрессии 9 х 12 и 6 х 9 см, пипетки глазные, воронки, мерная посуда (мензурки, стаканы), банки большие с притертыми пробками, пробирки и пенициллиновые флаконы с корковыми или резиновыми пробками, соль поваренная, формалин, физиологический раствор, желудочный сок, нейтральрот, бумага черная, вата, марля, фартуки клеенчатые, перчатки резиновые, полотенца для рук и посуды, мыло туалетное и хозяйственное, порошок стиральный, тазы, ведра, дезинфицирующие растворы.
При учете результатов исследований рыбы на зараженность плероцеркоидами лентецов в лабораторном журнале должны быть отражены следующие данные и показатели: административная территория (АССР, край, область, район, населенный пункт), водоем, какой организацией доставлена рыба для исследований, дата, вид рыбы, длина, масса, возраст, число обнаруженных плероцеркоидов (в полости тела и внутренних органах, кроме яичников; в яичниках, в мускулатуре, всего), вид плероцеркоидов (в необходимых случаях — описание личинок).
В организме дополнительного хозяина описторхиса — рыб семейства карповых — развиваются личинки гельминта — метацеркарии, которые локализуются в подкожной клетчатке и мышцах рыбы, преимущественно вдоль ее средней линии на спинной стороне. Значительно реже метацеркарии паразита обнаруживаются в плавниках, жабрах, глазах, чешуе.
Зрелые метацеркарии описторхиса представляют собой цисту овальной формы, внутри которой находится в согнутом состоянии личинка гельминта. Оболочка цисты двойная: наружная — соединительнотканная, образована за счет тканей хозяина, внутренняя — тонкая, образована секретом паразита.
Внутри цисты личинка описторхиса подвижна и периодически совершает маятникообразные или «переливающиеся» движения, хорошо заметные при наблюдении под бинокуляром или обычным световым микроскопом в течение 1 — 2 мин.
Личинка гельминта покрыта шипиками, снабжена ротовой и брюшной присосками. В задней части ее тела расположен экскреторный пузырь темного цвета, хорошо видимый под бинокуляром МБС при увеличении в 16 раз. Циста имеет размеры 0,23 — 0,37 х 0,18 — 0,28 мм; длина личинки (без цисты) — 0,44 — 0,63 мм, размеры присосок — 0,07 — 0,08 х 0,06 — 0,07 мм.
Перечисленные в Инструкции (см. п. 3) виды рыб семейства карповых могут являться дополнительными хозяевами для других видов трематод, не имеющих эпидемиологического значения, метацеркарии которых следует отличать от метацеркариев описторхиса (см. «Методику определения возбудителей гельминтозоонозов в пресноводных рыбах», утвержденную Главным управлением ветеринарии Министерства сельского хозяйства СССР 21.03.83 N 115-6а).
Для обнаружения метацеркариев в тканях рыбы используют компрессионный метод или метод переваривания. Более точные результаты будут получены при исследовании всей поверхностной мышечной ткани рыбы, которая тщательно отделяется вместе с подкожно-жировой клетчаткой от кожи и плавников.
Компрессионный метод. Для компрессионного исследования с целью экономии времени допустимо исследовать по 5 проб мышц с подкожной клетчаткой с обеих сторон рыбы: по 3 пробы из спинной и 2 из брюшной части мышц с каждой стороны. Каждая проба мышц берется с площади 1 — 2 кв. см на глубине 2 — 3 мм.
Мышечную ткань, подлежащую исследованию, измельчают и порциями по 1 — 1,5 г раскладывают либо в компрессории, либо между двумя стеклами размером 6 — 8 х 12 — 15 см. При исследовании вяленой, соленой, копченой рыбы рекомендуется ее предварительно сутки вымачивать в воде.
Готовые компрессионные препараты просматривают под бинокуляром при увеличении в 16 раз. Число найденных метацеркариев подсчитывают. При необходимости метацеркариев выделяют из окружающей ткани с помощью препаровальных игл.
Методы переваривания. Для метода переваривания вся поверхностная мышечная ткань (до 0,5 см) отделяется от кожи, тщательно измельчается ножом или в мясорубке.
Мышечную ткань рыбы заливают в соотношении 1:10 искусственным желудочным соком (11 мл концентрированной соляной кислоты, 7 г пепсина, 9 г поваренной соли на 1 л дистиллированной воды). Пробу помещают в термостат на 3 ч при температуре 36 — 37 °С, после чего содержимое фильтруют в стеклянные цилиндры через металлический фильтр с размером ячеек 1 х 1 мм. Через 15 — 20 мин. верхний слой желудочного сока с переваренной мышечной тканью сливают, а осадок переносят в чашку Петри или на часовое стекло, где метацеркариев подсчитывают.
Для лучшего отделения личинок в чашку Петри наливают физиологический раствор, делают несколько круговых движений, в результате которых метацеркарии концентрируются в центре чашки Петри, а излишки физраствора с остатками мышечной ткани удаляют пипеткой.
Метод выделения метацеркариев в искусственном желудочном соке применим в полевых условиях. При этом вместо термостата можно использовать стерилизатор для кипячения медицинских инструментов, в который помешают банки с пробами, наливают воду температурой 36 — 37 °С и поддерживают такую температуру в течение 3 ч. Для приготовления искусственного желудочного сока в полевых условиях реактивы разводят дождевой водой. При использовании речной воды ее сначала отстаивают, а затем фильтруют.
Эффективность метода переваривания (в сравнении с компрессионным) в 1,5 раза выше. Метацеркарии, выделенные методом переваривания из свежей рыбы, сохраняют свою структуру и жизнеспособность. Кроме рыбы промысловых размеров, в ряде случаев с целью эпидемиологического изучения территории возникает необходимость исследования на пораженность метацеркариями описторхиса мальков (сеголетков) карповых рыб. При этом применяют компрессирование мальков целиком.
Учет результатов. Пораженность рыбы метацеркариями описторхисов (экстенсивность инвазии) вычисляют по формуле:
P — общая пораженность в процентах;
N — число зараженных экземпляров рыб;
n — число исследованных экземпляров рыб.
Интенсивность инвазии (среднее число метацеркариев в 1 экз.) определяют по формуле:
источник