Тест системы для лямблиоза

Лямблии — распространённые паразиты. Каждый второй ребёнок, посещающий детский сад, школу, подвержен риску заболевания. Каждый пятый взрослый – носитель. Основной источник заражения — вода.

Выделяют два цикла развития паразита: трофозоит и циста. Функционал цисты – распространение. При поддержании необходимой влажности живет 70 дней в окружающей среде. Устойчива к концентрации хлора, используемой для обработки воды.

При реакции с секрецией желудка оболочка цисты растворяется, приобретает форму трофозоита. Десять личинок паразитов провоцируют инфицирование. Трофозоит при помощи присоски крепится к стенкам кишечника, становится цистой – делает невозможным выявление вегетативной формы в анализах кала при лямблиозе.

Известны способы, позволяющие диагностировать заболевание у детей и взрослых. Обследования не дают 100% гарантированного результата. Важно подходить к процессу комплексно. Начальные шаги определит врач на основании жалоб, наличествующих симптомов.

Диагностика лямблиоза проводится прямыми и косвенными способами. В первом случае постановка диагноза основана на обнаружении цист, их ДНК; во втором — антител, вырабатываемых организмом, защищаясь от инфицирования.

Врач назначает способы диагностики:

• копрограмма;
• биопсия;
• анализ на иммуноглобулины;
• анализ на антиген;
• ПЦР;
• фиброгастродуоденоскопия;
• энтеротест;
• биохимическая гепатограмма;
• ультразвуковое исследование печени.

Рассмотрим методы, сравним результативность.

Копрограмма — исследование кала специальными реагентами.

Цистогенез (образование новых личинок) — процесс непрерывный, учитывая комфортную для размножения среду кишечника, в которую паразит заносится с водой, продуктами. Общий инкубационный период — 2 недели. При особо острых формах цисты попадают в кал на 5-7 сутки после заражения.

Рекомендуют проводить анализ с промежутком в 1 неделю на протяжении 4-5 недель. Учитывается «слепой» период – цисты могут отсутствовать. Посуда для сбора материала должна быть чистой, плотно закупориваться.

Наряду с традиционным методом копрограммы используют прибор Paraset, увеличивающий шанс обнаружить паразитов. В пробирку наливается смесь эфира и формалина, закручивающаяся вместе с 1 г кала.

В лаборатории образец помещается в центрифугу. При скорости вращения 3000 оборотов в минуту лямблии проходят через фильтр, скапливаются в нижней части пробирки. Способ даёт быстрый результат, повышает достоверность исследования.

Биопсия – ценный для диагностики метод, дорогостоящий. По анализу с высокой точностью можно диагностировать лямблиоз у взрослых, исключить подозрения на опухоль в желудочно-кишечном тракте. Основан на изучении небольшого кусочка ткани определенного органа.

Используется для детской диагностики. Пациент глотает капсулу из желатина, внутри которой нейлоновая нить. Личинки паразитов налипают к нити. После выводятся из организма с каловыми массами, исследуются в лаборатории.

Фиброгастродуоденоскопия (дуоденальное зондирование) — манипуляция, проводимая врачом в стационарных условиях для извлечения и изучения содержимого двенадцатиперстной кишки.

Подготовка к исследованию проводится в течение 5 дней. В этот период прекращается приём желчегонных, слабительных, стимулирующих пищеварение лекарств.

Во время исследования при помощи зонда извлекается 20-25 мл желчи. Важно немедленно произвести микроскопическое исследование материала. Срочность необходима – вегетативные формы лямблий гибнут через 30 минут после извлечения. Метод трудоёмок, малоэффективен, применяется редко. Исследование назначают детям с 10 лет при условии тщательной подготовки к анализу. Переносится процедура тяжело, может оказать пагубное влияние на детскую психику.

Обнаружение лямблий в кале методом ПЦР. Экспериментальный метод молекулярной биологии. В основе лежит многократное копирование определенного участка ДНК. В природе подобным образом образуются раковые опухоли. В результате копирования должно получится количество генетического материала, достаточное для визуального анализа.

Копируется заданный участок ДНК, если он есть в исследуемом материале (кале). Лямблиоз диагностируется при наличии в кале ДНК паразита. Позволяет поставить диагноз в период отсутствия цист. Уровень достоверности метода — 98%. Исследование дорогостоящее, проводится в клиниках крупнейших городов.

Анализ на иммуноглобулины – серологическая диагностика относится к косвенным методам. Изучается сыворотка крови. Исследование показывает наличие антител, вырабатывающихся организмом в ответ на заражение. Анализ определяет инфекцию уже через 2 недели после заражения. Кровь из вены берётся натощак.

Различают IgM и IgG. Если обнаружено антитело первой группы – в организме происходит острая фаза патогенного процесса, если второй – хроническое течение, M и G – свидетельство хронической формы лямблиоза в период обострения. Количество антител повышается с интенсивностью заражения.

На уровень антител влияет ряд факторов, что иногда дает ложноотрицательные результаты. Пример: у детей с сильно сниженным иммунитетом, рецидивирующим заболеванием антитела не обнаруживаются. При перекрестной реакции с антителами на других паразитов дает ложноположительный результат. Достоверность анализа — 75-80%.

Достоверность метода близка к 100%. С помощью новейшей технологии выявляется антиген лямблий. Тест проводится быстро, особой подготовки не требует. Отсутствие субъективных факторов позволяет выявить цисты и вегетативную форму. В процессе исследования вмешательства в организм не происходит, что делает его удобным для детской диагностики. Исследуемый материал предоставляется в течении трёх суток (возможна заморозка).

Биохимическая гепатограмма используется в качестве эффективной альтернативы при невозможности проведения других анализов. Подходит для детской диагностики. Представляет обследование печени на основании результатов анализа венозной крови. Помогает выявить лямблии в печени (копрологические исследования ложноотрицательны).

Ультразвуковое исследование печени позволяет выявить поражение органа, использовать результаты для постановки диагноза.

Анализ на дисбактериоз – лабораторная диагностика, в процессе которой исследуют каловые массы. Лямблия агрессивно воздействует на микрофлору желудочно-кишечного тракта, вызывает дисбактериоз, кандидоз. Грибы Candida – источник витаминов В, необходимые для жизни паразитов. У детей до 3 лет выявляется патогенная флора. Дисбактериоз — возможный симптом лямблиоза.

Большая часть лабораторий предоставляет исследование, определяющее антитела к паразитам. Анализ ошибочно диагностирует ложноположительный результат, быстро подтверждать с его помощью выздоровление недостоверно – IgG могут проявляться через полгода после окончания лечения.

Исследование кала на цисты распространённый, но не массовый способ диагностики. Если анализ совпадает со «слепым» периодом, в котором выделение цист не происходит, то анализ – ложноотрицательный. Следует повторить обследование через 3 дня (при необходимости до трех раз, либо по одному анализу в неделю на протяжении 4-5 недель).

Анализ на антиген обладает высокой достоверностью в сравнении с другими методами. Минус – процедура отсутствует в перечне услуг многих клиник. Проверочный тест на лямблиоз должен проводиться минимум через три недели после выздоровления – антиген 2 недели присутствует в организме, искажает результаты анализа.

ПЦР — отличный метод, но для большинства людей это чисто теоретическая возможность.

Для профилактики лямблиоза медики советуют тщательно мыть овощи и фрукты, употреблять только кипяченую воду, посещать периодически терапевта для уверенности в отсутствии угрозы здоровью.

Лямблиоз не смертельно опасное заболевание. Существенно подтачивает иммунитет человека. Следует быть осторожнее с домашними животными – могут являться переносчиками паразитов.

источник

Диагностика лямблиоза — задача трудная. Патогомоничные симптомы у заболевания отсутствуют. Зачастую клиническая картина лямблиоза наслаивается на таковую других заболеваний желудочно-кишечного тракта. Не всегда удается по целому ряду причин выявить антитела в сыворотке крови. У микроскопического метода также имеются свои ограничения — неспособность отличать близко родственные виды лямблий, а периодичность выделения цист делает копрологический метод диагностики менее информативным.

Анализ на лямблии включает в себя анализ кала, крови и дуоденального содержимого:

1. Микроскопия нативного (неокрашенного) и окрашенного раствором Люголя мазка на предмет обнаружения цистных форм в оформленных и прецистных форм паразита в жидких испражнениях. При поносе и в дуоденальном содержимом выявляются вегетативные формы возбудителей.
2. Обнаружение вегетативных форм лямблий при дуоденальном зондировании. Дуоденальная биопсия является наиболее надежным методом диагностики.
3. Выявление антител к возбудителю в сыворотке крови с применением ИФА и РНИФ является более чувствительным методом. В некоторых лабораториях производятся анализы на выявление антигенов паразитов в кале. Данная методика при диагностике лямблиоза является более предпочтительной, чем поиск цист в фекалиях больного.
4. Высокочувствительным считается молекулярно-генетический метод.
5. Лямблии культивируются на искусственных питательных средах, но данная методика на практике не применяется.

В связи с отсутствием 100% чувствительности каждого из вышеперечисленных методов диагностика лямблиоза должна проводиться комплексно.

Рис. 1. На фото лямблии (вегетативная форма паразита, трофозоиты).

При подозрении на заболевание сдаются анализы на лямблии: исследуются фекалии и дуоденальное содержимое. В фекальных массах выявляются цисты, при поносе (в жидких фекальных массах) выявляются и цисты и трофозоиты, в дуоденальном содержимом выявляются только трофозоиты (подвижные вегетативные формы паразитов).

Рис. 2. Лямблии под микроскопом.

Рис. 3. На фото подвижные вегетативные формы лямблий (на фото вверху) и циста паразита (фото внизу).

Копрологический метод исследования (анализ кала на лямблии) является наиболее доступным, но менее информативным. С его помощью выявляются цисты паразитов, выделяемые больным с фекальными массами с 5 — 7 дня заболевания прерывисто, через каждые 2 — 21 день (в среднем через 8 — 14 дней).

В «немой» период выделение цист прекращается. Это обстоятельство требует неоднократного исследования каловых масс и применения других лабораторных методик. В свежих фекальных массах, собранных за 15 — 20 минут до начала исследования, в 5% случаев выявляются вегетативные формы лямблий. В течение получаса или часа вегетативные формы погибают, а цисты «съеживаются» и сливаются с детритом, что делает невозможным их обнаружение.

Анализ на лямблии должны сдавать больные с заболеваниями желудочно-кишечного тракта со склонностью к хроническому течению, с сопутствующей нейроциркуляторной дисфункцией, с длительной эозинофилией и аллергическими заболеваниями.

Оптимизация копрологического исследования может быть достигнута следующим путем:

• проведение 4 — 5 кратного анализа кала на лямблии с интервалами 7 — 8 дней;
• исключение на 5 — 7 дней приема противопаразитарных препаратов;
• при невозможности доставить в лабораторию свежесобранный кал рекомендуется применение консервантов с расчета на одну часть кала три части консерванта;
• при запорах необходимо накануне проведения анализа кала на лямблии принять слабительное средство (гуталакс, сенаде и др.) и/или желчегонные препараты.

Рис. 4. На фото вегетативные формы паразитов — трофозоиты (электронная сканирующая микроскопия).

Рис. 5. Трофозоит (фото А) и цисты лямблий (фото В).

В дуоденальном содержимом при лямблиозе выявляются подвижные формы лямблий (вегетативные формы, трофозоиды) с большей частотой, чем в фекалиях. Однако если лямблии паразитируют в более низких отделах тонкого кишечника, получаются отрицательные результаты исследования. Исследования дуоденального содержимого должно проводиться одновременно с исследованием кала. В последнее время данный вид исследования применяется редко.

Рис. 6. На фото вегетативные формы (трофозоиты) Lamblia intestinalis, меченные антителами (флуоресцентное окрашивание, непрямая РИФ).

Анализ крови на лямблии сдается с целью выявления специфических иммуноглобулинов. Считается, что основным фактором патогенности Lamblia intestinalis (основным иммуногеном) является антиген Аг GSA-65, на основе которого созданы современные тест-системы, которые применяются для диагностики данного заболевания.

Методы иммуноферментного анализа (ИФА) и иммунофлуоресценции (РНИФ) являются перспективными в лабораторной диагностике лямблиоза. С их помощью выявляются сывороточные иммуноглобулины классов G и M больных и носителей и антигены в пробах фекалий. Чувствительность и специфичность данных методов диагностики лямблиоза составляет более 90%.

• Иммуноглобулины IgM и IgG появляются в крови с 12 — 14 дня заболевания. Наличие одновременно иммуноглобулинов IgM и IgG говорит о наличии у больного лямблиоза. После санации IgM исчезают, а IgG сохраняются до двух месяцев.
• УровеньIgM (при отсутствии IgG) говорит о наличии острого лямблиоза у больных, инвазия у которых произошла не более 3-х месяцев назад.
• Уровень IgG (в сочетании или без IgM) указывает на хроническое течение лямблиоза или на начальную стадию реконвалесценции острого лямблиоза.

Чем выше уровень антител в сыворотке крови больного, тем чаще наблюдается отрицательное цистовыделение.

Антитела не определяются у детей с лимфатико-гипопластическим диатезом и у больных с неэффективными механизмами гуморальной защиты, что способствует хронизации инфекционного процесса. Лечение лямблиоза в данном случае проводится по индивидуальным схемам.

Анализ на лямблии с одновременным использованием серологических и копрологических методов дает возможность более качественно выявлять заболевание. Диагностика лямблиоза только на основании результатов копрологических методов исследования считается неоправданной.

Рис. 7. На фото цисты Lamblia intestinalis.

Биопсия тонкого кишечника является ценным диагностическим методом исследования, позволяющая выявит и оценить степень повреждения слизистой оболочки и обнаружить паразитов. Методика используется в крайних случаях.

Рис. 8. При лямблиозе повреждаются ворсинки слизистой оболочки тонкого кишечника. На фото слева микроскопия биопсийного материала больного лямблиозом. На фото справа лямблии продвигаются к ворсинкам кишечника.

При заболевании у больного проводится общий анализ крови.

Рис. 9. Эозинофилия говорит о развитии аллергических реакций у больного лямблиозом (фото слева). При длительном и тяжелом течении заболевания развивается анемия (фото справа).

Лямблиоз следует отличать от бактериальных и вирусных гастроэнтеритов. Схожую картину дают кишечные гельминтозы, бактериальная и амебная дизентерия.

источник

Лямблиоз — паразитарное заболевание, относящееся к группе кишечных инфекций. Возбудитель, проникая в организм человека, вызывает поражение органов пищеварения (кишечника, двенадцатиперстной кишки, печени). Болезнь распространена как среди взрослых, так и в детских коллективах.

По сведениям статистики, лямблиоз обнаруживают при обследовании у 3–15% взрослого населения и у 30–40% организованных детей, включая школьников. Показатель выше в слаборазвитых странах. Своевременная диагностика лямблиоза позволяется вовремя провести противопаразитарное лечение и избавить людей от развития хронической патологии желудочно-кишечного тракта.

Первым описал причину заболевания русский доктор Д.Ф. Лямбль в 1859 г., с его именем и связано название паразита и заболевания. В европейских странах эта роль отдается французу А.Жиарду, поэтому можно встретить еще наименование болезни, как «жиардиаз».

Лямблия является простейшим одноклеточным жгутиковым микроорганизмом. Паразитирует в основном в начальных отделах тонкого кишечника человека (двенадцатиперстной и тощей кишке). Может существовать в двух формах: вегетативной (трофозоит) и спорах (цисты). Под микроскопом их несложно распознать по характерной грушевидной форме, присоскам и четырем парам жгутиков.

Лямблии питаются через оболочку путем всасывания из кишечника нужных веществ, отнимая их у организма зараженного человека. Размножение осуществляется быстро делением, удвоение численности происходит каждые 10–12 часов. Цисты лямблий снабжены двухконтурной капсулой, овальные по форме.

Находятся только в толстой кишке, выделяются с калом больного во внешнюю среду, где длительно сохраняют жизнеспособность. Эта особенность позволяет сравнительно просто организовать диагностику лямблиоза по исследованию испражнений. Человек заражается через немытые руки, овощи с грядки, воду, загрязненные пищевые продукты, в быту фекально-оральным путем. Возможными переносчиками цист служат домашние животные, мухи, тараканы.

Чтобы обнаружить лямблиоз, необходимо знать симптомы заболевания и учитывать возможные формы течения. Предполагаемый диагноз возникает у врача при анализе жалоб пациента, осмотре. Заболевание имеет острую и хроническую форму. Важной особенностью считается практически бессимптомное носительство у ¼ пациентов, слабовыраженные проявления — в половине случаев (субклиническое течение).

Только у 25% зараженных выявляются типичные симптомы лямблиоза (манифестное течение). В зависимости от превалирования признаков поражения органов и систем принято различать 4 формы болезни:

• кишечную — проявляется расстройством функционирования тонкого и толстого кишечника по типу дуоденита, энтерита и гастроэнтерита, вызывает дуодено-гастральный рефлюкс;
• билиарно-панкреатическую — симптомы лямблиоза у взрослых и детей похожи на клинику воспаления и дискинезии желчного пузыря, выводящих путей, панкреатита;
• внекишечную — отличается токсическими и аллергическими признаками, сопровождается неспецифичным астено-невротическим синдромом, вегетососудистой дистонией;
• смешанную — по симптомам сложно в диагнозе определить вариант поражения, для подтверждения необходим анализ на лямблиоз.

Симптомы лямблиоза обычно появляются спустя 1–3 недели после заражения. Такова продолжительность инкубации цист до превращения в вегетативную форму. В острой фазе воспаления пациенты жалуются:

• на неинтенсивные боли вокруг пупка, в подреберье справа;
• снижение аппетита;
• тошноту;
• тяжесть в зоне эпигастрия;
• отрыжку;
• усиленное газообразование в животе;
• склонность к диарее (стул до 5 раз за сутки, водянистый, пенистый, затем приобретает жирный блеск), понос может чередоваться с запором.

Если лямблиоз переходит в хроническую стадию, то пациенты заметно худеют, становятся раздражительными, страдают от повышенной усталости, слабости, непостоянных признаков гастродуоденита, дискинезии кишечника, еюнита (воспаление тощей кишки). Выраженность интоксикации зависит от массивности попадания цист в организм человека, длительности болезни.

Возможно повышение температуры, воспаление региональных лимфоузлов, аденоидов. Действием токсинов при лямблиозе на нервную систему объясняется резкая смена настроения, раздражительность, головокружение, снижение артериального давления.

В детском возрасте при обследовании неврологи обнаруживают нервные тики, навязчивые движения (гиперкинез), склонность к обморокам. Изменения кожи заключаются в повышенной сухости с шелушением, зудящих высыпаниях в виде пузырьков, кератозе, крапивнице, других видах дерматита.

Заподозрить лямблиоз у пациента необходимо при упорном блефарите и конъюнктивите (воспалении век и оболочек глаза). Аллергические проявления иногда доходят до астматического бронхита и бронхиальной астмы.

Из приведенных клинических симптомов лямблиоза видно, что пациенты с подобными проявлениями могут длительно лечиться у гастроэнтеролога, невролога, окулиста, дерматолога, аллерголога-иммунолога. УЗИ, холецистография только подтвердят наличие повреждения гепатобилиарной системы, но не помогут в выявлении причины.

Общие лабораторные методы мало специфичны для лямблиоза, но показывают уровень нарушений:

• В общем анализе крови обычно настораживает моноцитоз и эозинофилия.
• Среди биохимических тестов выявляется снижение белка крови (как альбуминов, так и глобулинов), рост фермента щелочной фосфатазы.
• В анализе кала обнаруживаются копрологические признаки воспаления и нарушения переваривания: много жировых включений, непереваренные волокна, слизь, лейкоциты, эритроциты.

Современный уровень диагностики требует обязательного проведения паразитологического анализа на лямблиоз. Учитывая этапность развития микроорганизма диагноз должен подтверждаться выявлением в кале цист лямблий, в содержимом двенадцатиперстной кишки — вегетативных форм. Для этого проводят микроскопию мазков взятого материала.

Начиная с подросткового возраста, микроскопическим способом можно выявить лямблии в желчи, ее исследуют после дуоденального зондирования. Эта процедура у детей невозможна. Микроорганизмы обнаруживаются на стекле (инвитро) по характерным признакам, для улучшения выявляемости лямблиоза используется специальная окраска.

Инфекционисты рекомендуют для более точной выявляемости учитывать цикличность размножения и выделения форм паразита с испражнениями. Для этого лучше сдать анализ повторно за месяц от трех до пяти раз с перерывами в 1–2 недели.

Метод прост в проведении не требует больших затрат. Забор кала производится в специальную стерильную емкость. Необходимо взять подозрительные скопления слизи, частицы с измененным цветом. Цисты обнаруживают при доставке в течение суток. Обнаружить вегетативную форму лямблий значительно сложнее, поскольку они погибают через 60 минут после дефекации. Значит, материал должен быть доставлен как можно быстрее или забор следует производить в лечебном учреждении.

Косвенное значение имеет исследование кала на кишечную флору. Подсчет показывает способность лямблий снижать долю бифидо- и лактобактерий, стимулировать рост прочих микроорганизмов, активизировать появление патогенных стафилококков, стрептококков, грибков.

источник

Материалом для исследований служат фекалии и дуоденальное содержимое. В дуоденальном содержимом обнаруживаются только трофозоиты L. intestinalis, в оформленных фекалиях — только цисты, в жидких и полуоформленных испражнениях — трофозоиты и цисты.

Классическим методом лабораторной диагностики лямблиоза являются протозоологические исследования.

· Микроскопическое исследование нативных и окрашенных раствором Люголя мазков из свежевыделенных фекалий.

Подготовка к исследованию.

1. Предварительно нанести на предметные стекла 1-2 капли физиологического раствора, раствора Люголя и метиленового синего.
2. Из пробы кала выбрать обычную порцию и порцию с патологическими признаками (слизь, кровь), смешать с каплей подготовленных на предметном стекле растворов, накрыть покровным стеклом.

3. Препарат должен быть почти прозрачным, светопроницаемой плотности, чтобы «можно было видеть газетный шрифт».
4. Микроскопировать при увеличении: окуляр х 10, объектив х 10, а затем окуляр х 10, объектив х 40. При необходимости можно осторожно использовать водную иммерсию и увеличение: окуляр х 10, объектив х 100.

При прохождении мною преддипломной практики в ГБУЗ ЛО «Волховской межрайонной больницы» проводила исследования по данному методу. Было просмотрено 67 препаратов, в которых цист лямблий не было обнаружено.

Учитывая циклическое выделение цист и трофозоитов с фекалиями, незначительные сроки жизни вегетативных форм во внешней среде, необходимо применять консервирующие жидкости для сохранения паразита в фекалиях и проводить многократные исследования (от 2 — 3 до 6 — 7 раз с интервалами 1-2 дня), а также использовать метод формалин-эфирного обогащения, метод флотации. В большинстве случаев цисты L. intestinalis в кале обнаруживаются уже при первом исследовании. Отрицательные периоды в выделении L. intestinalis могут колебаться от 2 — 3 суток до 2 — 3 недель. Поэтому при подозрении на лямблиоз можно также рекомендовать проводить протозоологическое исследование кала в течение 4-5 недель с интервалом в одну неделю.

В дуоденальном содержимом трофозоиты L. intestinalis обнаруживаются с большим постоянством, чем в фекалиях. Однако при паразитировании L. intestinalis в средних и дистальных отделах тонкой кишки результаты исследования дуоденального содержимого могут быть отрицательными, поэтому необходимо проводить исследование кала. Исследование секрета двенадцатиперстной кишки, полученного с помощью трехканального зонда в условиях вакуума, более эффективно для обнаружения паразита, чем микроскопия дуоденального содержимого, полученного с помощью обычных зондов. В настоящее время всё реже используется этот метод, т.к. он очень болезненный для пациента и требуется специально подготовленные сотрудники.

· Метод иммунохроматографического выявления антигена лямблий в фекалиях человека ( ИммуноХА — Лямблия — Экспресс).

Набор ИммуноХА — Лямблия — Экспресс предназначен для быстрого, качественного определения наличия специфического антигена лямблий в фекалиях человека методом иммунохроматографического анализа при диагностике лямблиоза и мониторинге лечения.

В основе определения лежит принцип иммунохроматографического анализа. Исследуемый образец всасывается поглощающим участком индикаторной полоски; при наличии в образце антигена лямблий последний вступает в реакцию с моноклональными антителами к антигену лямблий, связанными с частицами коллоидного золота, образуя окрашенный комплекс антиген–антитело. Этот комплекс движется с фронтом жидкости и связывается с другими антителами, иммобилизованными на мембране в виде линии, окрашивая ее в розово-фиолетовый цвет. Не связавшиеся реагенты продолжают двигаться по мембране дальше и образуют розово-фиолетовую линию в зоне контроля. Результаты реакции оценивают визуально(см.Рис. 1).

Рисунок 1—Индикаторные полоски тест-системы

Выявление в рабочей зоне двух линий (тест и контроль) розово-фиолетового цвета свидетельствует о положительном результате анализа, т.е. в анализируемом образце фекалий содержится антиген лямблий, что свидетельствует о наличии в кишечнике самих паразитов.

Выявление в рабочей зоне только одной линии (контроль) розово-фиолетового цвета свидетельствует об отрицательном результате анализа, т.е. в анализируемом образце антигена лямблий нет или же его концентрация ниже порогового значения.

Если линия контроля не появилась, анализ признается недействительным, и определение необходимо повторить с использованием другой индикаторной полоски.

· Иммуноферментный анализ для определения антигена лямблий в фекалиях человека ( ИммуноФА – Лямблия — Ar)

Набор ИммуноФА-Лямблия-Аг предназначен для качественного определения наличия специфического антигена лямблий в фекалиях человека методом иммуноферментного анализа (ИФА) при диагностике лямблиоза и мониторинге его лечения. Набор рассчитан на проведение анализа 94 неизвестных образцов и 2 контрольных проб (всего 96 определений).

Определение основано на принципе двустадийного иммуноферментного «сэндвич» — анализа: сначала антиген лямблий, содержащийся в исследуемом образце, специфически связывается с сорбированными на твердой фазе (лунки полистироловых планшетов) моноклональными антителами к антигену лямблий, а затем после промывания — с другими антителами к антигену лямблий, конъюгированными с пероксидазой. Количество связавшегося конъюгата определяют с помощью раствора субстрата (3,3`,5,5` — тетраметилбензидин с добавлением перекиси водорода). Интенсивность окраски продукта окисления субстрата прямо пропорциональна концентрации антигена лямблий, содержащегося в анализируемом образце.

Оптическая плотность отрицательного контроля при правильно проведенном анализе должна находиться в пределах 0,050 — 0,100 ед. ОП, а положительного — в пределах 1,0 — 2,0 ед. ОП.

Образцы с оптической плотностью, превышающей оптическую плотность отрицательного контроля на 0,050 ед. ОП и более, следует рассматривать как положительные.

Образцы с оптической плотностью, превышающей оптическую плотность отрицательного контроля менее чем на 0,050 ед. ОП, следует рассматривать как сомнительные. В этом случае анализ следует повторить.

Иммуноферментный анализ для определения антител
к антигенам лямблий в сыворотке крови.

Тест-система предназначена для выявления IgM и IgG к антигенам лямблий в сыворотке крови обследуемых лиц при диагностике острого лямблиоза в комплексе с другими методами, при изучении патогенеза и иммуногенеза лямблиоза в клинических и научно-исследовательских лабораториях.

Определение основано на принципе двустадийного иммуноферментного «сэндвич» — анализа: сначала антитела лямблий, содержащиеся в сыворотке крови, специфически связываются с сорбированными на твердой фазе (лунки полистироловых планшетов) антигенами лямблий, а затем — после промывания — с другими антигенами к антителам лямблий, конъюгированными с пероксидазой. Количество связавшегося конъюгата определяют с помощью раствора субстрата (3,3`,5,5`-тетраметилбензидин с добавлением перекиси водорода). Интенсивность окраски продукта окисления субстрата прямо пропорциональна концентрации антител лямблий, содержащихся в анализируемом образце.

При правильно проведенном анализе оптическая плотность отрицательного контроля (ОП К¯) должна находиться в пределах 0,050–0,100 ед. ОП, а положительного – в пределах 1,0–2,0 ед. ОП.

Образцы с оптической плотностью, превышающей ОП К¯на 0,050 ед. ОП и более, следует рассматривать как положительные.

Образцы с оптической плотностью, ОП К¯ контроля менее чем на 0,050 ед. ОП, следует рассматривать как сомнительные. В этом случае анализ следует повторить.

Лямблии обитают в начальном отделе тонкой кишки, поэтому для него характерно развитие местных иммунологических реакций. Однако и в сыворотках крови зараженных лямблиями людей выявляются антитела к их антигенам, относящиеся к различным классам иммуноглобулинов. При воспалении слизистой оболочки кишечника ее проницаемость возрастает, и попадание антигенов лямблий в периферическую кровь увеличивается в результате резорбции. Выявление IgМ к антигенам лямблий в сыворотке крови может свидетельствовать о наличии острого лямблиоза, диагностика которого возможна на 10 — 14 день от начала инвазии. Выявление IgG к антигенам лямблий в сыворотке крови может свидетельствовать о наличии хронического лямблиоза.

Анализ на антитела нельзя назвать точным методом диагностики данного заболевания. Обычно полностью антитела к L. intestinalis исчезают из крови через 2-6 месяцев. К тому же иммуноглобулины класса G и M могут появиться в ответ на проникновение иных видов паразитов и бактерий.

В результате сравнительной характеристики лабораторных методов исследования был сделан вывод, что копрологический метод исследования на лямблиоз является наиболее точным и оптимальным, однако требует высокой подготовки и знаний медицинского лабораторного техника при проведении этого исследования. Метод ИФА в основном используется в совокупности с другими методами, поэтому он чаще используется для профилактики.

Общие условия выбора системы дренажа: Система дренажа выбирается в зависимости от характера защищаемого.

источник

*Импакт фактор за 2017 г. по данным РИНЦ

Журнал входит в Перечень рецензируемых научных изданий ВАК.

Актуальность проблемы Лямблиоз – достаточно распространенное заболевание в мире [1], в Российской Федерации регистрируется более 130 тысяч случаев лямблиоза в год. Из них 70% составляют дети в возрасте до 14 лет [2]. Эта цифра может колебаться в большую или меньшую сторону в зависимости от санитарно–бытовых условий, возможностей диагностики и настороженности врачей по поводу данной паразитарной инвазии [3]. Актуальность лямблиоза определяется также и тем, что его клинические проявления часто маскируются различными вариантами гастроэнтерологической патологии, синдромами избыточного роста кишечной флоры, мальабсорбции, поливитаминной недостаточности, а также развитием аллергических заболеваний – рецидивирующей крапивницей, атопическим дерматитом, гастроинтестинальной формой пищевой аллергии, которые без адекватной противолямблиозной терапии приобретают рецидивирующее течение [3,4]. Данное заболевание может отягощать сопутствующие заболевания желудочно–кишечного тракта, приводя к развитию синдрома мальабсорбции и длительной диареи [1,5]. Наиболее подвержены заболеванию дети. В России у детей в возрасте до 2 лет в организованных коллективах пораженность лямблиозом составляет 34,5%, а в 3–4 года – до 70%, в среднем у детей младшего возраста в организованных коллективах лямблиоз выявляют в 9,3% случаев и в 0,9% – у воспитываемых в домашних условиях [6]. Наиболее эндемичным регионом по лямблиозу в мире является Экваториальная Африка [7]. В этих регионах у детей инфицированность лямблиями впервые регистрируется после 3–4 месяцев по появлению в крови специфических IgМ–антител, а в возрасте 8 месяцев примерно у 80% детей выявляются диагностические титры специфических противолямблиозных IgM–анти­тел [8]. Передача инфекции чаще реализуется водным путем, реже – через продукты питания. Диаг­нос­тика лямблиоза является трудной за­да­чей: у некоторых больных с длительнотекущим лямблиозом антитела в сыворотке крови могут отсутствовать, что свидетельствует о неэффективности механизмов гуморальной защиты [9]. Антитела часто отсутствуют у страдающих лямблиозом детей с лимфатическим типом конституции; распространение практики постановки диагноза лямблиоза без проведения копрологического исследования нельзя считать оправданным.

Лямблиоз – достаточно распространенное заболевание в мире [1], в Российской Федерации регистрируется более 130 тысяч случаев лямблиоза в год. Из них 70% составляют дети в возрасте до 14 лет [2]. Эта цифра может колебаться в большую или меньшую сторону в зависимости от санитарно–бытовых условий, возможностей диагностики и настороженности врачей по поводу данной паразитарной инвазии [3]. Актуальность лямблиоза определяется также и тем, что его клинические проявления часто маскируются различными вариантами гастроэнтерологической патологии, синдромами избыточного роста кишечной флоры, мальабсорбции, поливитаминной недостаточности, а также развитием аллергических заболеваний – рецидивирующей крапивницей, атопическим дерматитом, гастроинтестинальной формой пищевой аллергии, которые без адекватной противолямблиозной терапии приобретают рецидивирующее течение [3,4]. Данное заболевание может отягощать сопутствующие заболевания желудочно–кишечного тракта, приводя к развитию синдрома мальабсорбции и длительной диареи [1,5]. Наиболее подвержены заболеванию дети. В России у детей в возрасте до 2 лет в организованных коллективах пораженность лямблиозом составляет 34,5%, а в 3–4 года – до 70%, в среднем у детей младшего возраста в организованных коллективах лямблиоз выявляют в 9,3% случаев и в 0,9% – у воспитываемых в домашних условиях [6]. Наиболее эндемичным регионом по лямблиозу в мире является Экваториальная Африка [7]. В этих регионах у детей инфицированность лямблиями впервые регистрируется после 3–4 месяцев по появлению в крови специфических IgМ–антител, а в возрасте 8 месяцев примерно у 80% детей выявляются диагностические титры специфических противолямблиозных IgM–анти­тел [8]. Передача инфекции чаще реализуется водным путем, реже – через продукты питания. Диаг­нос­тика лямблиоза является трудной за­да­чей: у некоторых больных с длительнотекущим лямблиозом антитела в сыворотке крови могут отсутствовать, что свидетельствует о неэффективности механизмов гуморальной защиты [9]. Антитела часто отсутствуют у страдающих лямблиозом детей с лимфатическим типом конституции; распространение практики постановки диагноза лямблиоза без проведения копрологического исследования нельзя считать оправданным.
Впервые лямблии были обнаружены Левен­гуком (Leeuwenhoek) у больного с жидким стулом, и уже позже, в 1859 г. были описаны Д.Ф. Лямблем как возбудитель лямблиоза. Несмотря на давнюю историю изучения и важное медицинское значение, многие стороны патогенеза лямблиозной инвазии и биологии возбудителя остаются нераскрытыми [2,3]. Так, до сих пор является загадкой, как вегетативные формы лямблий (трофозоиты) являясь неинвазивными патогенами, не выделяя известных токсинов, способны вызывать длительную диарею. Не менее интересна и биология лямблий, позволяющая им выживать и колонизировать достаточно агрессивную среду тонкой кишки, преодолевая местные факторы защиты. Поразительным остается также и факт бессимптомного носительства лямблий у половины инфицированных [7,10]. В связи с этим в этой работе представлены современные данные, касающиеся проблем диагностики и особенностей иммунного ответа у инфицированных.
На основе морфологических исследований выделяют три вида лямблий: G. lamblia, G. muris и G. agilis [11]. Патогенной для человека и большинства млекопитающих считается только G. lamblia. Доказательств того, что два других вида могут вызывать заболевания у людей, нет. G. muris инфицирует главным образом грызунов, птиц и рептилий, а G. agilis найдена только у амфибий.
Особенности иммунного ответа
при лямблиозе
В экспериментальных и клинических наблюдениях показано, что при заражении лямблиями в организме человека развиваются ответные иммунные реакции у большинства инфицированных и в последующем происходит самопроизвольная санация, даже в отсутствие противолямблиозной терапии [10]. Кроме того, было отмечено, что у лиц проживающих в районах, эндемичных по лямблиозу, наблюдается большая устойчивость к вторичному заражению [3]. Приобретенный иммунитет против лямблий является не завершенным, и часто особенно у детей развиваются повторные эпизоды инфекции. Дети до 6 лет, в связи с незрелостью иммунной системы являются более восприимчивыми к инфекции, чем взрослые и подростки. Взрослые становятся особо восприимчивыми к лямблиозной инфекции только при развитии выраженного иммунодефицита [3,7,12]. В формировании противолямблиозного иммунитета основную роль играют клеточные механизмы. Кооперация В–лимфоцитов, продуцирующих IgA, и Т–лимфоци­тов–хел­перов (CD4+) необходима для контроля над данной инфекцией [13–15]. У пациентов с выраженным иммунодефицитом, связанным с дефектами в Т– и В–кле­точном звене, повышается восприимчивость к лямблиозной инфекции и наблюдается большое ее распространение [12]. Отмечено, что пациенты с клеточным иммунодефицитом более восприимчивы к инфекции, чем пациенты, имеющие избирательный дефицит IgA [12]. Анти­лямблиозные секреторные IgA играют важную роль в разрушении лямблий и санации кишечника, что было подтверждено целым рядом экспериментальных исследований [16]. Для других классов иммуноглобулинов (IgG, IgM) показан их цитотоксический эффект на лямблии и нарушение процессов инкапсулирования трофозоитов [3]. На продолжительность течения и тяжесть лямблиоза у человека влияет и состояние факторов местной неспецифической защиты кишечника. К ним относят в верхних отделах кишечника желчь и ее соли, слизь кишечника, а также целый ряд антимикробных веществ, образуемых клетками слизистой кишечника и содержащихся в пищеварительных секретах. Желчь обладает бактериостатическим действием, является мощным детергентом, а также ингибирует рост многих простейших. Желчь стимулирует цистообразование лямблий, а кишечная слизь способствует прикреплению лямблий к эпителию. К факторам, способным ингибировать рост лямблий в тонком кишечнике, относят ненасыщенные жирные кислоты, образуемые из триглицеридов пищи и особенно грудного молока (под действием липазы панкреатического сока или грудного молока при грудном вскармливании ребенка). Однако лямблии в силу колонизации верхних отделов, защищены от действия жирных кислот слизью и желчью. Более эффективными ингибиторами роста и развития лямблий в верхнем отделе кишечника являются секретируемые эпителием крипт кишечника белки дефензины [17]. Установлена способность кишечных эпителиоцитов, расположенных в области верхушек кишечной ворсинки, выделять NO и продукты распада окиси азота. Роль NO в контроле над инфекционными агентами, не вторгающимися в клетку, менее изучена. Как предполагают, продукты распада окиси азота или сама окись азота могут повреждать вегетативные формы лямблий, ингибировать инкапсулирование и выход из цисты вегетативных форм [4]. В процессе существования и эволюции лямблии оказались способными вырабатывать устойчивость к системе защиты энтероцитов, связанной с окисью азота. Они активно метаболизируют аргинин, тем самым лишая энтероциты необходимого субстрата для синтеза NO [4] и ослабляя важную систему защиты от инвазии энтеропатогенных возбудителей.
Диагностика лямблиоза
До сих пор наиболее часто применяемым тестом в лабораторной диагностике лямблиоза остается микроскопия осадочных компонентов фекалий или содержимого, полученного при дуоденальном зондировании с целью выявления цист лямблий. К сожалению, указанные тесты лабораторной диагностики лямблиоза обладают низкой чувствительностью, подвержены влиянию ряда субъективных и объективных факторов, среди которых такие, как непостоянное выделение цист при лямблиозе, трудность микроскопической идентификации, требование специальной подготовки персонала, занятого микроскопической диагностикой [18,19]. Основное ограничение микроскопического метода – его неспособность дифференцировать близко родственные разновидности, имеющие различное значение в патологии человека [20]. Суммируя данные литературы и собственный опыт для оптимизации копрологического исследования, мы использовали:
• 3–4–кратное исследование кала с различными интервалами (8–7 дней);
• исследование, по возможности, жидких фракций фекалий (прилежащей к тонкой кишке), собранных из 6–7 мест;
•• исключение приема медикаментов перед исследованием на 5–7 дней в связи с возможностью повреждения морфологии цист;
• применение консервантов при невозможности доставки материала в лабораторию в течение короткого времени (в частности, оптимальным для исследования на лямблии является консервант Сафаралиева).
Перспективными способами лабораторной диагностики лямблиоза у человека сегодня остаются методы иммунофлуоресценции и иммуноферментного анализа (Методические указания МУ 3.2.1173–02: «Профи­лак­тика паразитарных заболеваний. Серологические методы лабораторной диагностики паразитарных заболеваний»). Они позволяют выявлять антигены данных возбудителей в пробах фекалий и в сыворотке крови больных и носителей [21–23]. С этой целью используют коммерческие иммуноферментные и иммунохроматографические тест–системы, выявляющие специфические антитела в сыворотке крови и антигены в фекалиях [24] Они обладают большей чувствительностью (66,3–98,9%) и высокой специфичностью (92,6%) в отличие от рутинных микроскопических методов в диагностике лямблиоза. За рубежом сконструированы ряд диагностических ИФА тест–систем, работающих на выявление специфических противолямблиозных секреторных антител в слюне. Данные тест–системы прошли успешную апробацию и могут быть рекомендованы для использования в лабораторной диагностике лямблиоза [25]. Тест–сис­те­мы выявляют специфические суммарные иммуноглобулины (IgG, A, M), которые представлены по вкладу в оптическую плотность преимущественно IgG антител, а также специфические иммуноглобулины класса IgM. Используемый коэффициент позитивности позволяет оценивать степень инвазии, а также проводить оценку эффективности антилямблиозной терапии. Суммируя данные, повышенный уровень IgG антител отражает наличие хронического лямблиоза или начало стадии реконвалесценции острого лямблиоза (в сочетании с наличием IgM антител). Наличие только IgМ антител в зависимости от коэффициента позитивности отражает наличие острого лямблиоза при инвазии различной степени выраженности (те же авторы). Для более эффективного использования лабораторных тестов необходима разработка дифференциально–диагностических алгоритмов для рационального использования тест–систем. Параллельное использование копрологических и серологических методов диагностики позволяют более надежно и эффективно выявлять лямблиоз. Опыт использования комплексной диагностики лямблиоза на базе поликлиники Казанского НИИЭМ позволил нам разработать алгоритм диагностики лямблиоза, учитывающий данные копрологического и серологического исследования (табл. 1).
Серологическое обследование лиц с аллергическими заболеваниями показало, что у 63,8% больных был выявлен повышенный уровень антител к антигенам лямблий в сыворотке крови (серопозитивные лица). При этом 16% больных имели повышенный уровень IgМ антител, наличие которых является признаком активного заболевания, из них у 4,8% больных цисты не были выявлены, у 8,9% повышенный уровень IgM антител сочетался с наличием антител класса IgG, что мы расценивали, как реактивацию или реинфицирование при массивной инвазии. У 46,8% больных имел место повышенный уровень IgG антител в сыворотке крови. При этом доля больных с отрицательным цистовыделением была более высокой в группе больных с низким коэффициентом позитивности (от 1,0 до 2,0) по сравнению с больными с высоким коэффициентом позитивности – >2,0 (10,5 против 14,5). Таким образом, частота отрицательного цистовыделения связана с уровнем инфицированности, определяемым по наличию IgG антител.
Особую группу составили серонегативные больные с наличием цистовыделения, что объясняется, во–пер­вых, наличием иммунодефицита, когда иммунная система не способна нарабатывать антитела в достаточном количестве, даже при наличии активной лямблиозной инфекции. Особенно часто такая ситуация имеет место у детей при транзиторной младенческой гипогаммаглобулинемии. Во–вторых, может отсутствовать транслокация антигенов лямблий через кишечную стенку при невысокой степени инвазии и сохранности местного иммунитета [12]. В любом случае данный вариант требует индивидуального подхода как к диагностике, так и к лечению лямблиоза. Рекомендуемый нами алгоритм позволяет избежать ненужных многократных исследований, оперативно устанавливать диагноз лямблиозной инфекции и активность процесса (табл. 1).

источник

Антитела к антигенам лямблий суммарные IgA, IgM, IgG (анти-Lamblia intestinalis IgA, IgM, IgG суммарные; anti-Giardia Lamblia IgA, IgM, IgG total)

Лямблиоз — одно из наиболее распространенных паразитарных заболеваний человека.

По данным ВОЗ, ежегодно лямблиями заражаются около 200 млн. человек. Клинические проявления лямблиоза регистрируются почти у 500 млн. больных в год. Заболевание распространено повсеместно.

Возбудитель лямблиоза у человека — широко известный протозойный организм Lamblia intestinalis, поселяющийся в тонком кишечнике и вызывающий расстройства пищеварения.

В организме человека и животных лямблии существуют в двух формах. В виде вегетативной формы (такие лямблии называются трофозоидами) они находятся преимущественно в верхних отделах тонкой кишки, а при попадании в толстую кишку превращаются в цисты (споровая форма), которые с испражнениями выделяются во внешнюю среду. Лямблии в форме цист могут длительно находиться в «законсервированном» состоянии и только при наступлении благоприятных условий превращаться в трофозоиды.

Попав в кишечник, лямблии превращаются в трофозоиды, прикрепляясь к поверхностным клеткам слизистой оболочки и отсасывая из нее питательные вещества. Их жизненный цикл от трёх до сорока дней. Несмотря на то, что это достаточно короткий период, заболевание может протекать очень длительно, так как всё время происходит повторное самозаражение. В результате длительного существования лямблий в организме формируется синдром хронической эндогенной интоксикации. При сниженной иммунной защите это может привести к повреждению практически всех органов и систем организма.

Различают три основных пути передачи лямблиоза:

Чаще всего заражение происходит при употреблении плохо очищенной водопроводной воды или воды из открытых водоёмов. При контактно-бытовом пути попадание в организм осуществляется через загрязнённые цистами предметы обихода: бельё, игрушки, посуду. Возможно также заражение при употреблении инфицированных цистами пищевых продуктов, особенно без их термической обработки (овощи, ягоды, фрукты).

Как проявляется лямблиоз у взрослых?

Инкубационный период заболевания продолжается 1-3 недели. Как правило, лямблиоз протекает без каких-либо проявлений. При большом количестве паразитов внутри человеческого организма заболевание протекает с выраженной клинической симптоматикой и имеет острое или хроническое течение.

При острой форме заболевание начинается с появления жидкого водянистого стула без примесей слизи и крови. Появляются боли в подложечной области. Образуется большое количество газа, раздувающего кишечник, наблюдается отрыжка. У больных отмечается снижение аппетита, тошнота, рвота, незначительное повышение температуры тела.

У большинства заболевших проявления болезни исчезают самопроизвольно в течение 1-4 недель. Затем болезнь переходит в хроническую форму, которая периодически проявляется вздутием живота, болями в подложечной области, разжиженным стулом.

У всех больных лямблиозом отмечаются признаки недостаточности витаминов: бледность кожи, синева под глазами, заеды в углах рта, аллергические высыпания.

Чем опасен лямблиоз для ребёнка?

У детей лямблиоз развивается значительно чаще и протекает тяжелее, чем у взрослых.

Современные эпидемиологические исследования показали, что лямблиями заражено около 30% детей дошкольного возраста. При этом, в большинстве случаев, лямблиоз у ребёнка проявляется симптомами, которые имитируют другие заболевания и затрудняют выявление истинной причины болезни.

Попадая в кишечник ребёнка, лямблии начинают активно размножаться, используя питательные вещества, необходимые ребенку для роста. В результате возникает нехватка витаминов в организме, что тормозит нормальное развитие ребенка.

В процессе жизнедеятельности лямблии выделяют также ряд токсических веществ. Это приводит к сильной аллергизации организма ребенка и подавляет его иммунитет. По этой причине одним из частых проявлений лямблиоза у детей являются: атопический дерматит, бронхиальная астма, хронический сухой кашель и частые простуды.

Каковы последствия лямблиоза?

Лямблиоз может отягощать течение любых других, сочетающихся с ним заболеваний желудочно-кишечного тракта. Он маскирует их и способствует возникновению аллергических реакций.

Достаточно распространены ситуации, когда за диагнозом лямблиоз скрываются такие хронические заболевания желудочно-кишечного тракта, как воспаление поджелудочной железы, дискенезия (нарушение двигательной активности) желчного пузыря, воспаление кишечника различного характера и т.д.

Часто страдает нервная система. Больные жалуются на общую слабость, утомляемость, раздражительность, неглубокий сон, тревожные сновидения, головные боли, головокружения. Возможно развитие гипотонических кризов с обморочными состояниями. Достаточно распространены вегето-сосудистая дистония и аритмия.

При хроническом лямблиозе у детей и у взрослых выявляются поражения кожных покровов: бледность, неравномерная окраска кожи («разноцветная кожа»), поражение красной каймы губ. Степень выраженности поражений бывает различной: от лёгкого шелушения и сухости до выраженного хейлита с трещинами, заедами.

В связи с обнаружением у ребёнка лямблий в кале и появлении у него характерных жалоб, требуется дополнительное обследование с целью выявления скрыто протекающих хронических воспалительных заболеваний желудочно-кишечного тракта.

Как проводится диагностика лямблиоза?

Многообразие клинических проявлений лямблиоза и отсутствие симптомов, характерных только для этого заболевания, требуют обязательного лабораторного подтверждения диагноза. Материалом для исследований служат фекалии и дуоденальное содержимое. В дуоденальном содержимом обнаруживаются только трофозоиды, в оформленных фекалиях — только цисты, в жидких и полуоформленных испражнениях — трофозоиды и цисты.

В настоящее время с целью диагностики лямблиоза применяется ряд методик, которые различаются между собой чувствительностью, специфичностью и общедоступностью. Независимая лаборатория ИНВИТРО предлагает широкий спектр исследований, позволяющих выявить наличие лямблий в организме человека.

Самым доступным методом лабораторной диагностики лямблиоза является копрологическое исследование. При проведении исследований необходимо помнить, что цисты в кале можно обнаружить не всегда. Непостоянное выделение цист с калом требует неоднократного исследования фекалий, а также использование других методов лабораторного исследования.

Больным с клиническими проявлениями лямблиоза, но при отрицательном результате исследования фекалий, целесообразно исследовать аспирант двенадцатиперстной или верхнего отдела тощей кишки. Как правило, в нём содержится большое количество лямблий, в том числе и трофозоидов (они видны в свежих мазках).

Анализ неудач в выявлении лямблий при исследовании фекалий позволил систематизировать основные причины ложноотрицательных результатов. К ним отнесены:

Выявление лямблий возможно уже у 76% больных при устранении данных причин при первом обследовании кала. После второго исследования вероятность увеличивается до 90 %.

Самым надёжным методом диагностики лямблиоза является дуоденальная биопсия. Показаниями для проведения дуоденальной биопсии являются:

Иммунологические методы (метод ИФА выявления антигена Giardia lamblia) в последнее время широко используются во всем мире для диагностики лямблиоза. Подобные тест-системы обладают очень высокой чувствительностью и специфичностью, и позволяют одновременно выявлять как цисты, так и трофозоиды в образцах стула. Обычно G lamblia выявляется у 50-70% больных после единичного анализа стула. После трехкратного анализа – у 90% .

Выявление антител суммарных классов IgA, IgM, IgG к антигенам лямблий (серологические методы) является косвенным методом лабораторной диагностики лямблиоза. Может использоваться как дополнительный диагностический метод, позволяющий определить иммунный ответ организма на внедрение возбудителя.

1. Паразитарные болезни человека (протозоозы и гельминтозы). Руководство для врачей. (Ред. Сергеева В.П., Лобзина Ю.В., Козлов С.С.) Спб., 2006. 586 стр.
2. Wallach J. Interpretation of diagnostic test Lippincott — 2000 pp. 864 — 885.

В комплексе с другими методами исследования при диагностике лямблиоза. Серологическое тестирование целесообразно проводить через 1-2 недели от появления клинической симптоматики, если повторные исследования кала в более ранний период не дали результата.

Интерпретация результатов исследований содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.

источник

N1103 RIDA Quick Лямблии, экспресс-тест, опред. в кале (R-Biopharm AG), общий вид

ДN1103 RIDA Quick Лямблии, экспресс-тест, опред. в кале (R-Biopharm AG), пипетки

N1103 RIDA Quick Лямблии, экспресс-тест, опред. в кале (R-Biopharm AG), тестовые устройства

N1103 RIDA Quick Лямблии, экспресс-тест, опред. в кале (R-Biopharm AG), буфер для экстракции

Назначение и особенности

Тест предназначен для быстрого качественного определения антигенов Giardia lamblia в образцах кала человека с целью диагностики лямблиоза.

Giardia lamblia – жгутиковое простейшее, вызывающее после проглатывания цист поражение тонкого кишечника. Из-за повсеместного распространения этот организм стал считаться одной из основных причин хронической диареи, а также диареи путешественников. Заражение происходит при заглатывании цист Giardia lamblia с водой или пищей, загрязненными фекалиями. В Соединенных Штатах Giardia lamblia – является наиболее часто выявляемым возбудителем во время вспышек диареи, обуслолвенных загрязненной водой. В развивающихся странах Giardia являются одной из наиболее частых причин заболеваемости у детей младше 10 лет, с частотой заболеваемости около 15-20 %. Обычно лямблиозы распространены в слоях населения c низким уровнем личной гигиены и передаются орально-фекальным путем. Этот путь передачи наблюдают среди детей в центрах медицинской помощи, среди сексуально активных мужчин-гомосексуалистов (до 19%), а также среди людей, живущих в учреждениях закрытого типа (больница, тюрьма). Заболевание также может передаваться от детей их родителям. У инфицированных детей более старшего возраста заболевание может протек бессимптомно, при этом они выделяют во внешнюю среду цисты и могут служить источником заражения других людей. Лямблиоз характеризуется острой или хронической диареей, также может отмечаться асимптоматическая элиминация цист. Инкубационный период составляет от 3 до 42 дней. При острой инфекции наблюдается внезапное начало водянистого кала (частая дефекация, желтоватый, пенистый с неприятным запахом кал и флатуленция), потеря аппетита, рвота, угнетение и снижение веса; кровь, гной и слизь в кале обычно отсутствуют. В прошлом для диагностики лямблиоза чаще всего проводили исследование кала на наличие трофозоитов или цист с помощью микроскопии, которая требует наличие квалифицированного персонала. Кроме того, исследование необходимо проводить длительное время из-за периодического выделения паразита. Альтернативный метод диагностики – иммунохроматографический тест для обнаружения антигенов Giardia lamblia в образцах кала. Метод обладает той же чувствительностью, что и микроскопия, не требует специального обучения персонала лаборатории проведению микробиологических исследований, прост в исполнении, не трудоемок.

Принцип метода

RIDA®Quick Giardia является одностадийным иммунохроматографическим тестом, включающим специфичные к лямблиям антитела с окрашенными латексными частицами и специфичные антитела к патогену, прикрепленные к мембране. Вначале образец кала суспендируют в буфере для экстракции, затем проводят процедуру осаждения. Аликвоту супернатанта образца вносят в окошко тестового стрипа. Если образец содержит антигены, то происходит образование комплекса антигенов с латексными частицами через специфические антитела; этот комплекс при прохождении через мембрану связывается со специфическими антителами, закрепленными в тестовой полосе.

Регистрационное удостоверение

Тест-системы для экспресс-диагностики без использования приборов — обзорный буклет (наборы экспресс-тестов Human, R-Biopharm, Standard Diagnostics, Veda.Lab)

(За версией инструкции для конкретного лота диагностического набора/реагента обращайтесь в отдел продукции ЗАО » Аналитика «)

источник

Лямблиоз относится к самым распространённым микробным заражениям, требующим неотложной терапии. Чаще всего им заражаются дети, т. к. они не осознают всей серьёзности соблюдения гигиенических норм, особенно при контакте с животными, почвой и другими детьми. Однако когда ребёнок начинает жаловаться на плохое самочувствие и хроническое недомогание, обычно выявляют лямблиоз, спровоцированный простейшими микроорганизмами – лямблиями.

Как правило, лямблии – возбудители лямблиоза длительное время не вызывают у человека никаких симптомов, поэтому обычно диагностику осуществляют на хронической стадии болезни, когда появляются симптомы такого характера:

• Расстройства системы ЖКТ.
• Аллергические реакции.
• Тошнота, рвота.
• Повышение телесной температуры.
• Депрессия или нестабильное настроение.
• Кожные или хронические заболевания, появившиеся без причины.
• Неправильный стул.

Кроме того, зараженные лямблиозом люди склонны к потере веса, т. к. организму не хватает полезных минералов и витаминов для полноценной жизнедеятельности, а учитывая воздействие паразитов на центральную нервную систему детей, они становятся капризными, раздражительными, плаксивыми, неусидчивыми, начинают отставать в интеллектуальном и физическом развитии от своих сверстников.

Аллергическая реакция является одним из самых распространённых симптомов лямблиоза. Она появляется одной из первых, и её интенсивность увеличивается на протяжении всего периода инвазии. Если вдруг у человека появляется беспричинная аллергия или другие хронические болезни, вероятность заражения гельминтами или лямблиями составляет 70%.

Кому назначают диагностику на лямблиоз в обязательном порядке:

• Дети проходят исследование перед началом учебного года, поступлением в садик, накануне поездки в санаторий или другие учреждения, принимающие на обучение или отдых группы детей.
• Взрослые сдают анализы на лямблиоз, если устраиваются на работу в пищевые блоки, магазины, рестораны, медицинские, учебные учреждения, заводы, а также, если приобретают абонемент на посещение бассейна.

Лямблии способны поражать любого человека, независимо от его возраста и социального статуса, но прежде всего, назначают анализы на лямблиоз и людям, страдающим от желудочных/кишечных болезней хронического характера, а также при недостаточной защитной функции организма.

Если человек обратился к специалисту по причине появления симптомов заболевания, врач-паразитолог направляет пациента на углублённое исследование комплексного характера, включающее в себя исследование различных биологических образцов.

Для диагностики лямблиоза применяют такие методы исследования:

• Копрограмму. Благодаря ей в каловых массах видят цисты паразитов.
• Биопсию, позволяющую оценить состояние кишечника.
• Инструментальные исследования, такие как УЗИ показывают, имеются ли паразиты в 12-типерстной кишке или её содержимом.
• Анализ крови показывает реакцию организма на посторонние организмы, поселившиеся внутри человека.

Биопсия. Является высокоинформативным метод диагностики лямблиоза. Однако не каждый человек может пройти данное исследование из-за его дороговизны. Обычно, пациенты прибегают к такой диагностике, когда все дешёвые анализы не уточняют диагноз. Также биопсию применяют при подозрении на опухоль кишки.

ПЦР. Один из дорогостоящих, но высокоинформативных методов диагностики лямблий по крови. Благодаря ему можно обнаружить генетические структуры паразитов, даже если их цисты отсутствуют. Такое исследование выполняют исключительно в частных клиниках, используя очень дорогое, современное оборудование.

Энтеротест. Такой анализ появился совсем недавно и обычно его применяют для обследования детей. Суть проведения такой диагностики:

• Проглотить пилюлю, внутри которой находится нейлоновая нить.
• Попадая в пищеварительную систему человека, капсула растворяется, нить высвобождается и проходит в кишечник, где на неё налипают живые паразиты.
• Спустя 2-3 часа нить выходит из организма естественным путём, и её рассматривают под микроскопом.

Современная высококачественная диагностика лямблиоза характеризуется проведением не только описанных выше лабораторных исследований, но и инструментальных диагностик. Например, при подозрении на дисфункцию желчевыводящих путей или патологии данного органа назначают ультразвуковое исследование поджелудочной железы, её протоков и печени. Если исследования показали наличие лямблий в организме, больной должен немедленно приступить к лечению, даже если симптомы и клинические признаки болезни отсутствуют.

В качестве микроскопического исследования для постановки диагноза – лямблиоз, обычно используют желчь или каловые массы, взятые из организма зараженного в домашних условиях или, в результате дуоденального зондирования. Однако эта методика исследования не всегда показывает точный результат, ведь лямблии откладывают цисты неравномерно.

Забор образцов с помощью зондирования обычно применяют для детей и взрослых от 10 лет. Чтобы узнать точный результат таким способом, диагностику выполняют 3 раза, с интервалом между исследованиями 1-2 недели.

Дополнительные условия, повышающие качество результата:

• Рекомендуется сдавать биозабор в те дни, когда ночью можно видеть полную луну. В этот период паразиты наиболее активно выделяют цисты.
• Если во время полнолуния не удаётся сделать забор кала, то можно выполнить эту процедуру за 2-3 дня до или после полнолуния.
• Дополнительно следует выполнить копрограмму, определяющую, имеется ли у заражённого копрологический синдром.

Однако важно не только знать, когда собирать образцы, но и как правильно это делать, когда относить в лабораторию.

Собирая кал на лямблиоз, нужно придерживаться таких правил:

• Нужно собирать около 10 г. биоматериала (примерно столовую ложку кала).
• Требуется брать участки экскрементов, содержащие в себе слизистые скопления или имеющие изменённый цвет, консистенцию.
• Сложить фекалии требуется в герметично закрывающуюся баночку из стекла или пластика. Лучше всего для этого подходит специальный контейнер, продающийся в аптеке, т. к. он стерилен и имеет специальную ложечку, облегчающую выполнять забор фекалий.

Получившийся биоматериал требуется отнести в лабораторию, как можно быстрей, т. к. живые цисты и микроорганизмы погибают вскоре после выведения из кишечника носителя, поэтому рекомендуется опорожняться утром, накануне самого исследования. Однако принимать слабительное для ускорения дефекации категорически запрещается. Если вы собираете кал, не более чем за сутки до сдачи, его требуется поместить в холодильник.

Каждая лаборатория выдаёт результаты по-разному. Частные больницы обычно отдают результаты, в течение 2 суток со дня сдачи, а государственные – направляют их сразу в кабинет к врачу, как правило, в течение 24 часов. Но иногда результаты задерживаются, если в клинике не хватает реактивов или, если специалисты не успевают исследовать анализы всех пациентов.

Дополнительная диагностика при лямблиозе позволяет уточнить ущерб, нанесённый паразитами человеку. Обычно из-за простейших нарушается кишечная микрофлора и появляется дисбактериоз, подтверждаемый методом сдачи анализа кала на дисбактериоз.

На фоне такого нарушения, в организме детей и взрослых могут появиться микроорганизмы условно-патогенного происхождения:

Также на дополнительном исследовании в экскрементах человека выявляют специфические антитела, благодаря иммунодиффузии и иммуноэлектрофорезу.

Чтобы распознать паразитарную инвазию любого вида, врачи обязательно назначают забор крови. На первый взгляд, кажется, что это лишнее, но на самом деле в плазме крови содержится вся информация о жизнедеятельности и здоровье человека. Опираясь на результаты крови можно подтвердить или опровергнуть лямблиоз, с точностью 80%, ведь спустя месяц после заражения в крови появляются антитела, старающиеся защитить организм от чужеродных организмов.

Глядя на результаты исследований, врачи оценивают такие параметры:

• IgM – значение говорит, находится ли заболевание на острой стадии.
• IgG – свидетельствует о хронической инвазии.
• IgM и IgG подтверждают обострение лямблиоза хронического характера.

Данные антитела принято называть иммуноглобулинами. Исследование проводят в обязательном порядке, если имеются подозрения на лямблиоз, однако опираясь на результаты сложно сказать, что именно лямблии стали источником появления данных антител, ведь они появляются и при других разновидностях микробных инвазий. Чтобы уточнить наличие паразитов в организме, берут во внимание результаты общего значения крови, показывающие повышенный уровень скорости оседания эритроцитов, эозинофилию и анемию.

Печень является излюбленным местом лямблий, т. к. она максимально комфортна для размножения. Именно внутри этого органа чаще всего обнаруживают паразитов, вызывающих ярко или слабовыраженную симптоматику лямблиоза. Чтобы подтвердить наличие болезни, в первую очередь проводится сбор анамнеза и осмотр пациента.

Затем врач оценивает такие факторы:

• При лямблиозе увеличенная печень.
• Вздувается брюшная полость.
• Появляется повышенное газообразование, отрыжка, урчание в животе.
• На языке появляется жёлтый налёт.

Обычно, больной обращается к специалисту, находясь на стадии хронического лямблиоза. Тогда у больного появляются боли под ребром (с правой стороны) и в области пупка. В качестве инструментальной диагностики лямблиоза печени используют ультразвуковое исследование печени и печёночные пробы.

Печёночные пробы показывают, насколько паразиты повредили печёночные ткани и привели ли к дискинезии желчевыделительной системы. Конечным фактором, позволяющим установить наличие печёночного лямблиоза, является наличие щелочной фосфатазы, в результатах биохимической гепатограммы.

Следовательно, лямблиоз – болезнь, требующая тщательной и многократной диагностики, позволяющей обнаружить внутри человека самих паразитов, их цисты и тяжесть повреждений. Однако предотвратить заражение намного проще, чем лечить его. Для этого требуется еженедельно пить противолямблиозные отвары и чаще мыть руки, особенно перед едой, после туалета, общественных мест и общения с другими людьми, т. к. они тоже нередко являются распространителями многих разновидностей глистов и бактерий.

источник