Кровь на vi гемагглютинации на брюшной тиф

Скачать бланк анализа крови на брюшной тиф fb2

Расшифровка анализа крови на хеликобактер пилори. При брюшном тифе общий анализ крови показывает повышение количества бланков в первые два дня болезни и понижение в последующие дни. Специальная подготовка для взятия крови на анализ в Инвитро не требуется, Брать кровь брюшней натощак, или спустя тиф анализа после завтрака или обеда.

Больных тифом выписывают из стационара не ранее, чем через три недели после падения температуры, при условии отрицательных результатов бактериологических проб. Синонимы крови Анти-Vi-антитела, возбудитель брюшного тифа. Подхватить тиф можно и дома, и в путешествии.

Результаты всех медицинских осмотров и исследований заносятся в бланк личной медицинской книжки. Объем исследований и осмотра определяется строго предполагаемой специализацией будущего работника. Ниже мы приведём различные варианты оформления личной медицинской книжки, для различных видов деятельности работника Анализ крови на РНГА,брюшной тиф (сдается один раз при каждом новом трудоустройстве по данной специализации); Анализ кала на яйца глист; Анализ кала на энтеробиоз.

Брюшной тиф – это острое инфекционное заболевание с фекально-оральным путем передачи, возбудителем которого является Salmonella typhi. Инкубационный период длится в среднем дней. Заболевание начинается постепенно с общего недомогания, бессонницы и головной боли, затем к ним присоединяются лихорадка, симптомы поражения центральной нервной системы в виде заторможенности, нарушений сознания и бреда, а также нарушения стула и характерная сыпь в области живота и грудной клетки.

Источник инфекции – болеющие брюшным тифом и бактерионосители S. typhi. Общий анализ крови (без лейкоцитарной формулы и СОЭ). Лейкоцитарная формула. Скорость оседания эритроцитов (СОЭ). Анализ на брюшной тиф сдается при наличии всех характерных признаков из нижеперечисленных (за исключением сыпи, которая возникает не во всех случаях заражения): постоянная жажда при постоянном ощущении стягивания, сухости во рту, побледнение и шелушение кожи лица и тела, распухание и покрытие беловатым налетом языка Клинический анализ крови помогает определить изменение основных показателей состояния организма в целом.

Ведущими значениями, которые указывают на деятельность возбудителя тифа в организме, является искажение (по сравнению с показателями нормы) следующих данных: понижение уровня лейкоцитов; отсутствие в крови эозинофилов. Выбирая, где сдать анализ «Антитела к возбудителю брюшного тифа Salmonella typhi (РПГА тест на антитела к S. typhi, Typhoid fever semiquantitative IHA serum test)» в Москве и других городах России, не забывайте, что цена анализа, стоимость процедуры взятия биоматериала, методы и сроки выполнения исследований в региональных медицинских офисах могут отличаться. Рекомендуется взятие крови не ранее чем через 4 часа после последнего приема пищи. примеры результатов на бланке*.

Скачать пример. *Обращаем ваше внимание на то, что при заказе нескольких исследований, на одном бланке могут быть отражены несколько результатов исследований. В этом разделе. Кровь на RW, мазок, Дерматовенеролог 2 раза в год.

Кровь на RW, мазок, Дерматовенеролог раза в год. Кровь на RW, мазок, Дерматовенеролог раза в год. ЛОР, Стоматолог, бактериальный посев из зева и носа на патогенные формы стафилококка (ежегодно).

Брюшной тиф 1 раз в 5 лет или при перемене места работы. — Брюшной тиф 1 раз в 5 лет или при перемене места работы. — Кишечные инфекции 1 раз в 5 лет или при перемене места работы. Исследование на ВИЧ 1 раз в год. Анализ HBs (Гепатит В) 1 раз в год. Яйца гельминтов и энтеробиоз 1 раз в год. — ЛОР, Стоматолог, бактериальный посев из зева и носа на патогенные формы стафилококка (ежегодно).

Анализ HCV (Гепатит С) 1 раз в год. Серологическое исследование крови на брюшной тиф с Vi-антигеном. Диагностический серологический анализ по выявлению в сыворотке крови антител к Vi-антигенам возбудителя брюшного тифа предназначен для подтверждения либо отрицания факта носительства. Сроки выполнения. дней. Синонимы (rus). Серологический анализ на Vi-антитела возбудителя брюшного тифа в сыворотке крови. Cинонимы (eng). Indirect hemagglutination assay for Salmonella typhi Vi antibodies.

Формы брюшного тифа. Иногда брюшной тиф может протекать атипично, то есть не включать в себя специфические симптомы. Различают абортивные и стертые субклинические формы. Возможными изменениями клинического анализа крови при брюшном тифе являются: умеренное повышение лейкоцитов (белых клеток крови); лейкопения (уменьшение числа лейкоцитов).

Брюшной тиф и паратифы у детей. РЦРЗ (Республиканский центр развития здравоохранения МЗ РК) Версия: Клинические протоколы МЗ РК — Категории МКБ: Брюшной тиф (A), Паратиф a (A), Паратиф b (A), Паратиф c (A), Паратиф неуточненный (A). Разделы медицины: Инфекционные болезни у детей, Педиатрия. Общая информация. ОАК.

общий анализ крови. ОАМ. общий анализ мочи.

Когда назначаются анализы на брюшной тиф?

Инфекция развивается в результате активной деятельности сальмонеллы. Однако признаки не являются специфичными, часто наблюдается при прочих заболеваниях желудочно-кишечного тракта:

Нарушение опорожнения. Возможен как запор, так и выраженная диарея.
Кровотечение ЖКТ. В кале присутствует кровь.
Тошнота и рвотные позывы.
Бессонница, апатия, слабость, потеря аппетита.
Сильная жажда.
Кожная сыпь.
Повышение температуры вплоть до 40 градусов.
Болезненность в области живота и правого подреберья.
Язык покрывается налетом серого оттенка, но кончик по-прежнему красный.

При тяжелом состоянии клиническая картина включает бред и дезориентацию в пространстве.

В РФ предусмотрено обязательное ежегодное обследование на брюшной тиф для работников пищевой промышленности, больниц, детских учреждений. Желательно пройти диагностику и туристам, вернувшимся из экзотических стран, где распространена патология.

Выделить возбудителя легко в первые 2 суток. Поэтому обращаться в больницу нужно при начальных признаках.

Где можно сдать биоматериал на анализ?

Сегодня исследования выполняются в муниципальных и частных лабораториях, так как оно необходимо для оформления санкнижки. Естественно, в платной клинике придется отдать небольшую сумму за справку. Но получить результаты можно намного быстрее.

Стоимость анализа крови на брюшной тиф

Серологическая диагностика потребует 600–800 рублей.
Общий анализ крови обойдется в 300–400 р.
Бактериологический посев в 700–900 р.
Биохимия в 300–400.
ИФА и РИФ в среднем 500–800 р.

Конечно, получается приличная сумма, но для точного диагноза необходимо сопоставление нескольких видов исследований. Расшифровка результатов помогает не просто выявить возбудителя, но и определиться с программой терапии.

В муниципальной клинике большинство работ по исследованию образцов крови, мочи или кала выполняют бесплатно.

В основном для изучения предпочитают брать биологические материалы. При подозрении на брюшной тиф используют различные способы лабораторной диагностики.

Метод применяется в первую очередь, но не дает полной гарантии. Учитывают косвенные показатели — завышенное СОЭ, понижение концентрации лейкоцитов, рост уровня лимфоцитов, отсутствие эозинофилов. Результаты помогают установить наличие инфекции, воспалительного процесса.

Чтобы обследовать пациента инвитро, в лабораторных условиях, достаточно взять образец из пальца либо венозного сосуда.

Биохимический анализ крови

Делать нужно до применения антибактериальной терапии. Необходимо 5–10 мл для выявления белков в острой фазе, которые продуцируются организмом при брюшном тифе.

Серологический анализ крови

Нужно сдавать образец из капилляра. Срок 4–5 сутки с момента инфицирования, когда в плазме присутствуют антигены типа О, Vi и Н, характерные для сальмонеллы. Исследование повторяют на 8–10-й день пребывания пациента в стационарном отделении.

РНГА (реакция непрямой гемагглютинации)

Метод рпга на брюшной тиф помогает выявить антитела и антигены на основании скорости выпадения в осадок эритроцитов. Забор делается натощак, как и при прочих способах обследования. Необходимо воздерживаться от пищи на протяжении 8 часов. Материал берут из локтевой вены.

Положительный результат диагностируется при минимальных показателях — для О титр 1:200, для Vi 1:80.

РПГА (реакция пассивной гемагглютинации)

Основное направление — это поиск антител, присутствующих сыворотке. Данный анализ крови на брюшной тиф проводят к окончанию 2 недели болезни и повторяют спустя 5 суток. При острой форме патологии отмечается повышение титров.

Образец берут из локтевого сосуда, натощак. Положительному результату соответствуют показания в 1:40 для Vi-антител и 1:200 для О.

В крови недостаточно сальмонелл, поэтому ткань, взятую для анализа, помещают в питательный бульон и убирают в термостат. Размножаясь, микроорганизм образует колонии. Лабораторное исследование позволяет определить вид бактерии.

Результат готов на 4–5 сутки. Из всех методов бакпосев является наиболее точным. Помогает определить антибиотические средства, эффективные в случае брюшного тифа. Для работы подходят кровь, моча, если с момента заражения прошло около недели можно использовать кал.

Реакция иммунной флуоресценции (РИФ)

Быстрый способ, позволяющий выявить патологию в начальном развитии. В биоматериал вводят антитела, заранее помеченные специфическими веществами. При наличии антигенов изучение с помощью микроскопа в образце показывает характерное свечение.

Иммуноферментный анализ (ИФА)

Высокочувствительный метод, определяющий наличие антител и антигенов, помогающий уточнить их концентрацию. Важен как для диагностики, так и для отслеживания динамики в состоянии больного.

Бактериологическое исследование кала (копрокультура)

Наиболее часто у пациента берут кровь на брюшной тиф. Но через 1–1,5 недели возбудитель присутствует в фекалиях. Применяется для выявления зараженных, но не болеющих.

Бактериологическое исследование мочи (уринокультура)

Спустя 8–10 дней после инфицирования, патоген можно обнаружить в урине. При этом отмечается лейкоцитоз — увеличение концентрации белых клеток в начальном этапе болезни и резкое падение показателя через неделю.

Для достоверности анализа нужна тщательная подготовка: необходимо запастись стерильной емкостью и промыть наружные половые органы. Достаточно собрать всего 40–50 мл жидкости.

Бактериологическое исследование желчи (биликультура)

Анализ используют, если с начала заражения прошло около 2 недель. К этому времени сальмонелла исчезает из сыворотки крови, но распространяется в прочие жидкости.

Иногда для исследования берут пункцию костного мозга. Методика сложная, но достоверная, так как присутствие возбудителей прочих патологий исключается.

Чтобы диагностика была максимально точной, необходимо заранее готовиться к забору образцов тканей:

На протяжении 72 часов желательно не принимать никакие фармакологические средства, особенно антибиотики. В противном случае необходимо сообщить врачу о виде препарата, времени приема, дозировке.
Оптимально сдавать кровь утром с 8 до 11.
Вечером отказываются от ужина. За сутки до анализа прекращают употребление спиртного, жареного, жирного, острых специй, молочных продуктов и яиц.
В течение нескольких часов до забора не курят.

Лучше воздержаться от физических нагрузок, меньше нервничать, так как даже эти факторы способны влиять на биохимический состав материала.

Как прочитать результаты анализов?

При брюшном тифе отмечается завышенное содержание лейкоцитов в первые 2 суток и снижение уровня в дальнейшем. Одновременно наблюдается:

Рост концентрации лимфоцитов.
Увеличение тромбоцитов.
Высокая СОЭ.

После серологического анализа выдается справка, в которой проставлен вердикт. При «положительно» приводится количество антител.

Всегда ли результат «отрицательно» в бланке говорит об отсутствии заболевания?

Необязательно означает, что у человека нет возбудителя. Характерные белковые соединения иногда появляются в крови позднее, поэтому при поступлении пациента в стационар в первое время не обнаруживаются. Тогда проводят дополнительное обследование через несколько суток.

Отсутствие антител нередко свидетельствует о том, что пациент был болен, но успел выздороветь.

О чем говорит результат анализа «положительно»?

Такой вердикт означает 2 варианта:

Заболевание в острой фазе.
Присутствие неактивной сальмонеллы.

Носителями патогена являются 3–4% людей, переболевших брюшным тифом. Присутствуют риски заражения окружающих.

К какому врачу обратиться?

При выраженных симптомах необходимо обеспечить быстрое поступление больного в стационар. Но иногда человек самостоятельно посещает медицинское учреждение, жалуясь на признаки отравления. В этом случае лучше отправляться на прием к инфекционисту, но даже опытный терапевт заподозрит клиническую картину брюшного тифа.

Заболевание легко передается при личном контакте, с продуктами питания и предметами обихода. Чтобы обезопасить себя и близких, желательно при первых симптомах выполнить все рекомендуемые анализы.

Клинический анализ крови и инфекционные болезни

Выявление изменений показателей периферической крови, имеющих диагностическое и прогностическое значение.

Противопоказаний для проведения исследования нет.

Подготовка к исследованию

Плановое исследование проводят утром и желательно натощак, по экстренным показаниям и при поступлении — в любое время суток. Повторное плановое исследование проводят каждые 10 сут. Особенной подготовки не требуется.

Кровь берут из концевой фаланги IV пальца (мочки уха или пятки у новорождённых и детей раннего возраста), предварительно обработав место прокола стерильным ватным тампоном, смоченным 70% спиртом.

Анализ крови — вирусная или бактериальная инфекция

Прокол кожи производят одноразовым скарификатором. Первую каплю крови удаляют сухим стерильным ватным тампоном. Можно использовать кровь из вены, взятую в пробирку с ЭДТА.

Общий анализ крови включает определение количества гемоглобина, эритроцитов, тромбоцитов, ретикулоцитов, лейкоцитов (с подсчётом лейкоцитарной формулы), скорости оседания эритроцитов (СОЭ) и вычисление цветового показателя. Традиционные рутинные определения количества эритроцитов, лейкоцитов, гемоглобина, лейкограммы в современных лабораториях проводят на автоматических анализаторах; для определения СОЭ используют капилляр Панченкова. Исследование мазка крови проводят под микроскопом.

Интерпретация результатов клинического анализа крови

• Гемоглобин — 130–160 г/л (муж.); 120–140 г/л (жен.).

• Эритроциты — 4,0–6,0×1012/л (муж.); 3,9–4,7×1012/л (жен.).

• Цветовой показатель — 0,86–1,05.

— миелоциты и метамиелоциты — отсутствуют;

— палочкоядерные нейтрофилы — 1–6%;

— сегментоядерные нейтрофилы — 47–72%;

— плазматические клетки — отсутствуют.

• СОЭ — 2–10 мм/ч (муж.), 2–15 мм/ч (жен.).

Для ряда инфекционных болезней характерна анемия различного генеза. Так, гипохромная анемия со снижением числа эритроцитов, уровня гемоглобина и цветового показателя типична для геморрагических лихорадок (ГЛ), тяжёлых глистных инвазий; гемолитическая анемия свойственна малярии, лептоспирозу; гиперхромия — дифиллоботриозу. Анемия может иметь сочетанный генез. Так, при сепсисе возникает гемолиз и угнетение эритропоэза. Развитие анемии может быть результатом кровопотери, например, при кишечном кровотечении у больных брюшном тифом.

Важное прогностическое значение имеет тромбоцитопения, которая характерна для сепсиса, ГЛ, лептоспироза. Снижение тромбоцитов до уровня менее 30 000 в 1 мкл, как правило, сопровождается повышенной кровоточивостью. Большое значение имеет определение лейкоцитоза и лейкоцитарной формулы. Для инфекционных болезней, вызванных бактериальной кокковой флорой (стрепто-, стафило-, менинго-, пневмококки), некоторыми грамотрицательными палочковидными бактериями, характерен нейтрофильный лейкоцитоз со сдвигом влево. Отсутствие лейкоцитарной реакции (сепсис, менингококкемия) прогностически неблагоприятно, исключение — коклюш, при котором наблюдается лимфоцитарный лейкоцитоз.

При большинстве инфекций, вызванных грамотрицательной палочковидной флорой, риккетсиями, лейкоцитоз менее выражен, возможна лейкопения, однако сохраняется нейтрофильный сдвиг влево.

Для большинства вирусных инфекций (грипп, корь, краснуха, вирусные гепатиты, ГЛ и др.) характерна лейкопения и лимфоцитоз, СОЭ не увеличивается или увеличивается незначительно, однако при многих инфекциях, например при энтеровирусных, риккетсиозах, картина крови малохарактерна.

При некоторых вирусных инфекциях происходит смена лейкопении на лейкоцитоз, например при ГЛ, в других случаях (грипп, корь) появление лейкоцитоза может указывать на развитие бактериальных осложнений.

В остром периоде большинства инфекций наблюдают анэозинофилию или эозинопению, а при инфекциях, которым свойственна аллергизация организма, — эозинофилию (иерсиниозы). Особенно она характерна для глистных инвазий с миграциями возбудителя в организме, причём степень эозинофилии (до 60–70%) соответствует интенсивности инвазии. Отсутствие эозинофилии при массивной инвазии (трихинеллёз) прогностически неблагоприятно.

В некоторых случаях картина крови имеет решающее значение для постановки диагноза. Например, для инфекционного Эпстайна–Барр-вирусного мононуклеоза характерен лейкоцитоз, лимфоцитоз и появление в крови атипичных мононуклеаров (более 10%).

Факторы, влияющие на результат клинического анализа крови

Обезвоживание, гиперволемия, забор крови после еды.

Осложнения крайне редки. При коагулопатиях может развиться капиллярное кровотечение.

Автор: Инфекционные болезни: национальное руководство под ред Н.Д.Ющука,Ю.Я.Венгерова. 2009

WBC анализ крови (исследование на лейкоциты) относится к общему исследованию крови. Его задачей является определение количества лейкоцитов в сыворотке крови. По результатам данного анализа врач оценивает общее состояние пациента и состояние его иммунной системы. Уровень лейкоцитов относится к наиболее важным характеристикам крови человека.

WBC в анализе крови: норма и отклонения

Лейкоциты (WBC – white blood cell) – это белые тельца крови, которые выполняют иммунную функцию. Данные кровяные тельца образуются в красном костном мозге и лимфатических узлах человека. Их основной функцией является защита организма от болезнетворной инфекции – бактерий, вирусов, паразитов. WBC в общем анализе крови является важным диагностическим показателем. С его помощью специалист определяет основные реакции иммунной системы человека.

Читайте также: Пятна при брюшном тифе

Норма WBC в анализе крови взрослого человека составляет 4,0–9,0×109/л, у ребенка от 12 до 15 лет – 4,3–9,5×109/л, от 6 до 12 лет – 4,5–10,0×109/л, от года жизни до шести лет – 5,0–12,0×109/л, от 6 до 12 месяцев – 6,0–12,0×109/л, у месячного малыша – 5,5–12,5×109/л.

Повышение объема лейкоцитов в крови называется лейкоцитозом. Различают физиологический лейкоцитоз (возникает у здоровых людей в некоторых ситуациях) и патологический лейкоцитоз (указывает на развитие заболеваний).

Физиологическое повышение лейкоцитов в крови бывает при следующих состояниях:

через несколько часов после употребления пищи;
после психоэмоционального напряжения;
после чрезмерных физических нагрузок;
после принятия холодной или горячей ванны;
у женщин перед менструацией;
во второй половине беременности.

В связи с этим рекомендуется сдавать анализ крови утром натощак, избегая накануне значительных физических и эмоциональных нагрузок.

Согласно расшифровке анализа крови на WBC, лейкоцитоз является симптомом следующих заболеваний:

инфекции разной природы;
менингит – воспалительный процесс оболочек головного и спинного мозга;
рожа;
отит;
бронхиты, пневмонии;
воспаления подкожной клетчатки – абсцесс, флегмона, панариций;
воспаления и нагноения брюшной полости – аппендицит, перитонит;
острый панкреатит;
лейкозы (опухолевые заболевания);
диабетическая кома;
хроническая почечная недостаточность;
инфаркты;
травматические повреждения тканей;
эклампсия;
уремия;
болезни щитовидной железы;
острое кровотечение.

Снижение объема лейкоцитов в крови называют лейкопенией. Критическую лейкопению, при которой содержание лейкоцитов в крови уменьшается до минимальных значений, именуют агранулоцитозом. Данное состояние представляет серьезную опасность для жизни человека.

В расшифровке анализа крови на WBC указываются следующие причины уменьшения концентрации лейкоцитов в крови:

онкологические заболевания, при которых развиваются метастазы в костный мозг;
гипопластические или апластические патологии, в результате которых сокращается образование лейкоцитов в костном мозге;
болезни, при которых увеличивается функция селезенки – туберкулез, сифилис, лимфогранулематоз, циррозы печени;
ранние стадии развития лейкозов;
некоторые инфекционные поражения, такие как грипп, корь, малярия, краснуха, вирусный гепатит, брюшной тиф, бруцеллез;
системная красная волчанка;
анемии, развивающиеся из-за дефицита витамина В12;
лучевая болезнь.

Общий анализ крови: WBC и лейкоцитарная формула

Чаще всего в общем анализе крови WBC определяют с лейкоцитарной формулой. Существует пять видов лейкоцитов, которые исследуются в анализе крови – нейтрофилы, эозинофилы, базофилы, лимфоциты, моноциты. Лейкоцитарной формулой называется процентное соотношение данных видов лейкоцитов.

1. Нейтрофилы – наиболее многочисленный вид лейкоцитов, который играет основную роль в обеспечении иммунитета организма. В норме содержание нейтрофилов в крови составляет у взрослых 60–75% от всех лейкоцитов, у детей от 6 до 12 лет – 30–65%.

Повышение уровня нейтрофилов (нейтрофилия) наблюдается при инфекционных заболеваниях (пневмония, бронхит, кишечная инфекция, синусит, ангина), артрите, тиреоидите, перитоните, панкреатите, остеомиелите, гангрене, флегмоне, абсцессе, раковых опухолях, уремии, сахарном диабете, инфарктах.

Пониженное содержание уровня нейтрофилов (нейтропения) может указывать на некоторые инфекции (краснуха, вирусный гепатит, ветрянка, грипп, брюшной тиф), острый лейкоз, апластическую анемию, тиреотоксикоз.

2. Эозинофилы – принимают участие в защите организма от паразитов, аллергических реакций. Норма в WBC анализе крови эозинофилов составляет 1–5% от числа всех видов лейкоцитов.

Расшифровка анализов крови на инфекции

Причиной повышенного содержания данного вида лейкоцитов в крови бывают аллергические реакции, паразитарная инфекция (энтеробиоз, аскаридоз, лямблиоз, эхинококкоз, описторхоз), злокачественные новообразования, болезни кроветворной системы, склеродермия, узелковый периартериит, ревматоидный артрит.

Понижение эозинофилов наблюдается при сепсисе, гнойных процессах, интоксикациях тяжелыми металлами, в начале развития воспалительных процессов.

3. Лимфоциты – особый вид лейкоцитов, который отвечает за формирование специфического иммунитета организма. Интересно, что в крови детей до 4–6 лет преобладает данный вид лейкоцитов. И только после этого возраста происходит постепенное преобладание нейтрофилов над лимфоцитами. Нормальное содержание лимфоцитов в крови взрослых – 20–35%.

Повышение уровня лимфоцитов в крови может указывать на развитие вирусных инфекций (гриппа, парагриппа, аденовируса), туберкулеза, тиреотоксикоза, бронхиальной астмы, детских инфекций (скарлатина, коклюш, краснуха, корь). Значительное увеличение лимфоцитов бывает при лимфолейкозе – опухолевом поражении костного мозга.

Снижение объема лейкоцитов может быть симптомом бактериальных заболеваний (пневмонии, сепсиса), инфаркта миокарда, лимфомы, системной красной волчанки, ВИЧ-инфекции.

4. Моноциты – незрелые кровяные клетки, которые превращаются в макрофаги при попадании в ткани организма. Макрофаги поглощают возбудителей заболеваний, чужеродные микроорганизмы, погибшие клетки организма. Расшифровка WBC анализа крови указывает норму содержания моноцитов – 4–10%.

Моноцитоз, или повышение содержания моноцитов, может быть при лимфогранулематозе, лимфоме, некоторых видах лейкоза, подостром эндокардите, туберкулезе, сепсисе, бруцеллезе, малярии, сифилисе, мононуклеозе, токсоплазмозе.

Пониженная концентрация моноцитов бывает при дисфункции или поражении костного мозга, лучевой болезни.

5. Базофилы (тучные клетки) – вид лейкоцитов, которые отвечают за выделение гистамина (гормона, провоцирующего аллергическую реакцию организма). В норме содержание базофилов составляет 0–1%.

Повышение базофилов в крови может указывать на аллергические заболевания, мегакариобластную лейкемию, хронический миелолейкоз, системный мастоцитоз, некоторые инфекции (грипп, ветрянка, туберкулез), болезнь Ходжкина.

Понижение содержания базофилов часто бывает симптомом острой инфекции, гипертиреоза, анафилактического шока, бронхиальной астмы.

Дискуссионный Клуб Русского Медицинского Сервера > Форумы врачебных консультаций > Педиатрия > ОРВИ (под вопросом бронхит) у ребенка

Просмотр полной версии : ОРВИ (под вопросом бронхит) у ребенка

Здравствуйте. Ребенок 2,11, вес 12 кг, активно болеет 4й день. Неделю как кашляет. Обострение началось в воскресенье с температуры 38,5 + кашель, из носа текла кровь. В понедельник пригласили педиатра, при прослушивании жесткое дыхание. Предварительный диагноз — острый бронхит или пневмония. Назначены анализы крови, мочи + рентген и лор (кровь из носа — аденоиды?). Днем шли сопли. В следующую ночь температура доходила до 39,5 сбивали дважды свечками эффералган. С утра отвезли мочу на анализ. Насморка почти не было. Снова был педиатр, который поставил вопрос об антибиотиках. Я сказала, что после результатов анализов. Анализ ОАК и рентген удалось сдать сегодня. Педиатр приходила сегодня по собственной инициативе и принесла копию результата ОАК. Снимок и ОАМ я не видела, она сказала, что на рентгене бронхит, в моче — кетоновые (при высокой температуре сдали, но под вопросом эндокринология, тк у ребенка бывает часто запах изо рта). На вопрос вирусный бронхит или бактериальный она сказала, что скорее всего бактериальный, указывая на ОАК. Сегодня снова насморк, пшикала аквамарисом. Уважаемые доктора, прошу Вас, прокомментируйте анализ. Гемоглобин 108 Эритроциты 4,1 (сказала анизоцитоз) лейкоциты 7,4 палочкоядерные 5 (сказала много) сегментоядерные 48 лимфоциты 41 моноциты 6 соэ 55 Назначение — аугментин 400, 2 р*5 мл во время еды, ацепол (не будем), амбробене (тоже), регидрон (?) — ребенок мало пьет. Про остальные лекарства, что были с понедельника назначены, но не приняты — зиртек, виброцил, називин, лазолван.

Забыла указать, что сегодня температуры нет. Ребенок уже 3 недели в октябре просидел дома с ОРВИ. 2 недели походил в сад и снова заболел. В прошлую болезнь в результатах ОАК лейкоциты были сильно повышены. Педиатр без физиопроцедур не давала нам справку, 4 раза с магнитом на спине сидели. В нынешнюю болезнь она предлагает нам госпитализироваться.

Добрый вечер. Я практически всегда на вашем форуме находила ответ на вопросы по лечению ребенка и старалась им следовать. Может я не донесла до профессионалов свой вопрос, но для меня очень важе ваш ответ. Я не знаю приступать ребенку к приему антибиотика или нет. Я бы следовала обычным указаниям, которые вы даете при лечении ОРВИ, но этот анализ крови, в котором то анемия, то повышены палочкоядерные, то вообще нереальная СОЭ. Температура ребенка сейчас 37,7 (электронный градусник). Ест плохо, но это в принципе у нас огромная проблема. Пришу Вас, прокомментируйте анализы, пожалуйста.

Снижение гемоглобина на фоне воспаления не должно Вас пугать, это нормально.

Расшифровка общего анализа крови у детей — интерпретация результатов самого распространенного лабораторного исследования, указывающего на состояние здоровья пациентов, начиная с 1 дня жизни и заканчивая 16 годами.

В педиатрии общеклинический анализ крови играет особую роль, поскольку маленькие пациенты не в состоянии на словах описать изменения самочувствия.

В отличие от взрослых, детям не нужна подготовка перед сдачей анализа. Интерпретация полученных значений осуществляется врачом-гематологом, после чего результаты передаются педиатру.

Детский ОАК имеет несколько особенностей, что обусловлено постоянным ростом организма, когда изменения претерпевает и кровь. Для оценки параметров общеклинического изучения крови выделяется 7 возрастных групп:

1 день с момента рождения;
1 месяц;
полгода;
12 месяцев;
1–6 лет;
от 7 до 12 лет;
от 13 до 16 лет.

Каждой из возрастных категорий присуща индивидуальная норма, повышение или понижение показателей которой дает возможность с точностью поставить правильный диагноз.

Чтобы клиницист получил полную картину состояния здоровья ребенка, во время расшифровки необходимо учитывать много показателей, соответствующих составным частям крови.

Среди основных форменных компонентов крови стоит выделить:

Гемоглобин или Hb — вещество, содержащееся в красных кровяных тельцах. Отвечает за газообмен и насыщение внутренних органов кислородом.
Эритроциты или RBC — считаются самыми многочисленными клетками крови, благодаря которым биожидкость имеет красный цвет. Принимают участие в переносе кислорода, углекислого газа, питательных веществ, медикаментов и токсинов.
Цветовой показатель или MCHC — дает возможность понять, сколько гемоглобина содержится в эритроцитах. Если кровяные тельца чрезмерно яркие или слишком бледные, это указывает на проблемы со здоровьем.
Ретикулоциты или RTC — незрелые эритроциты. Их количество указывает, насколько быстро происходит обновление состава крови в детском организме.
Тромбоциты или PLT — отвечают за способность крови к свертыванию и принимают участие в формировании тромбов.
Тромбокрит или PST — определяет долю тромбоцитов среди всего объема циркулирующей крови.

Наличие у детей проблем с тромбокритом говорит о наследственных болезнях.

СОЭ или ESR — скорость оседания эритроцитов.

Общий анализ крови — расшифровка у детей

Такой вид лабораторного исследования, как общий анализ крови (ОАК), занимает одно из центральных мест в диагностике огромного количества заболеваний. Ведь любое нарушение влечет за собой реакцию организма, в частности – изменение состава и характеристик отдельных компонентов крови.

Данный вид исследования проводится практически с момента рождения. Так, на протяжении первого года жизни, малышу предстоит его сдать, как минимум 3 раза, а если вдруг возникнет какое-либо заболевание, — тогда и чаще.

Расшифровку полученных результатов общего анализа крови у детей и сравнение их с нормой должен проводить исключительно врач. Ведь само по себе изменение тех или иных показателей, может являться лишь признаком заболевания. Поэтому, чтобы сделать правильный вывод и назначить необходимое лечение, надо учитывать и многие другие факторы (наличие хронических заболеваний, нарушения процесса кроветворения и т.д.).

Как изменяются нормы общего анализа по возрастам и о чем свидетельствуют отклонения?

Так, при расшифровке общего анализа крови у детей, врачи опираются на лейкоцитарную формулу, которая соответствует возрасту ребенка. Именно в ней отражается соотношение всех форм лейкоцитов (нейтрофилы, лимфоциты, моноциты, эозинофилы, базофилы). Кроме лейкоцитов, в ОАК указывают содержание эритроцитов, гемоглобина и тромбоцитов и СОЭ (скорость оседания эритроцитов).

При проведении общего анализа крови у детей и его расшифровке, отдельно обращают внимание именно на СОЭ, которое в норме имеет следующие значения:

новорожденные младенцы: 2-4 мм/ч;
дети до года и старше: 4-10.

Все дело в том, что при развитии патологического процесса в организме, в частности вирусной или инфекционной природы, первое, изменяется в анализе это именно СОЭ. В таких случаях, как правило, данный параметр принимает большие значения, чем в норме.

Также обращают внимание и на содержание гемоглобина в крови у ребенка. Его недостаток может свидетельствовать о таком нарушении, как анемия или малокровие. В подобной ситуации у ребенка может снижаться активность, пропадать аппетит, дети старшего возраста могут жаловаться на головные боли и головокружения. При данной симптоматике первое, что назначают врачи, — это общий анализ крови.

Таким образом, такой метод лабораторной диагностики, как общий анализ крови, просто нельзя недооценивать. Именно с помощью его еще на ранней стадии можно предположить нарушение и назначить дополнительное обследование по этому поводу.

источник

Диагностический серологический анализ по выявлению в сыворотке крови антител к Vi-антигенам возбудителя брюшного тифа предназначен для подтверждения либо отрицания факта носительства.

Сроки выполнения	7-8 дней
Синонимы (rus)	Серологический анализ на Vi-антитела возбудителя брюшного тифа в сыворотке крови
Cинонимы (eng)	Indirect hemagglutination assay for Salmonella typhi Vi antibodies
Метод анализа	Реакция непрямой гемагглютинации (РНГА)
Подготовка к исследованию	Анализ проводится утром, натощак. С последнего приема пищи должно пройти не менее 8 часов.
	Исключить прием алкоголя не менее чем за 24 часа до взятия биоматериала.
	Не рекомендуется сдавать кровь на серологию после флюорографии, рентгена, физиотерапевтических процедур.
Биоматериал и способы его взятия	Венозная кровь

Брюшной тиф относится к острым инфекционным кишечным заболеваниям. Для него характерны циклическое течение с системным поражением органов кишечника, ЦНС, печени, лимфатической системы; общая интоксикация организма, устойчивая бактериемия, при которой в крови обнаруживается присутствие бактерий. Источником инфекции являются больные, переболевшие бактерионосители.

Возбудитель брюшного тифа — сальмонелла Salmonella typhi, относится к кишечным бактериям.

Антигенная система возбудителя представлена антигенами O, H, Vi.

Антиген Vi является антигеном вирулентности, формирующим устойчивость возбудителя брюшнотифозной сальмонеллы к защитным реакциям организма. Наличие антител к Vi-антигенам Salmonella typhi при проведении серологического исследования образцов крови служит маркером бактерионосительства.

Выявление антител к эритроцитарным Vi-антигенам осуществляют с помощью серологической реакции непрямой гемагглютинации, РНГА , с применением специальных диагностикумов.

Метод РНГА:

основан на способности взаимодействия антител сыворотки крови и антигенов, которые фиксированы на эритроцитах (эритроцитарный диагностикум); результатом реакции является агрегация эритроцитов с последующим осаждением, агглютинация;
по характеру осадка эритроцитов судят о наличии антител (характерный «зонтик»), либо об их отсутствии (осадок в виде «точки»);
является полуколичественным; для проведения реакции используют разведения сыворотки крови для выявления диагностического титра;
минимальным диагностическим титром при проведении реакции является показатель 1:40;
повышение диагностической ценности реакции наблюдается при использовании повторного анализа (метод парных сывороток);
реакция высокочувствительна и специфична, может быть использована на пятый-седьмой дни заболевания.

Результаты анализа могут быть положительными или отрицательными.

Положительный ответ:

выявление в крови антител к Vi-антигенам брюшнотифозного возбудителя (минимальное значение диагностического титра 1:40) рассматривается как указание на факт бактерионосительства и на необходимость повторного тестирования;
в ответе фиксируется значение титра;
может свидетельствовать о протекании острой инфекции, о перенесенном в прошлом заболевании, о проведенной вакцинации;
в редких случаях может быть ложноположительным вследствие перекрестной реакции.

Отрицательный ответ выдается в случае, если антитела не выявлены. Подобная ситуация возможна как при отсутствии инфицирования брюшнотифозным возбудителем, так и на ранних сроках заболевания.

Проведение данного исследования имеет особую важность для предотвращения случаев распространения брюшного тифа бактерионосителями.

анализы Вопрос: Доктор назначила ребенку: 1. Анализ крови на органические и аминокислоты методом тандемной масспектрометрии 2. Анализ мочи на органические и аминокислоты методом газовой спектрометрии (разовая порция). Мы можем сделать такие анализы в вашей лаборатории в Адлере? стоимость и сроки, а так же как подготовиться к анализу написшите, пожалуйста.

Ответ: Здравствуйте! Да, Вы можете сдать кровь и мочу на исследование в Адлере. Комплексное определение концентрации ненасыщенных жирных кислот семейства Омега-6 в крови методом тандемной масс-спектрометрии — 8250 руб. Срок выполнения до 10 рабочих дней. Комплексное определение концентрации на аминокислоты в крови (32 показателя) — 8140 руб., 10 р.дней., Комплексное определение содержания органических кислот в моче — 5000 руб., 10 р. дней. Сдавать утром после 8 часового ночного голодания.

Какой анализ крови нужно сдать Вопрос: Добрый день,хотел бы у вас уточнить один вопрос.Был на приеме у невролога, т.к. в последнее время немеет лобная часть головы,он установил диагноз,прописал лекарства и сказал,что надо бы сделать общий анализ крови для проверки.Какой-то отдельный анализ крови надо еще делать или хватит только общего?

Ответ: Здравствуйте! Если доктор Вам назначил общий анализ крови, значит его следует выполнить. Общий клинический анализ крови является комплексным исследованием, который поможет врачу провести скрининг. Данный анализ отражает текущее состояние человека и дает такие показатели крови, как эритроциты, гемоглобин, лейкоциты, лейкоцитарная формула и еще до 18 показателей.

источник

Реакция vi гемагглютинации. Анализ крови на брюшной тиф с Vi-антигеном. Использование в вирусологии реакции гемадсорбции

Главная → Анализы → Иммунологический метод → Реакции гемагглютинации (иммунологический метод)

Реакции агглютинации основаны на взаимодействии реагента (антител) с антигенами, находящимися на поверхности клеток или инородных частиц. В результате образуются агрегаты крупного размера, которые выпадают в осадок и их можно увидеть даже невооруженным глазом. Таким образом определяют группу крови по системе АВО, наличие в ней резус-фактора и др. Это более чувствительный по сравнению с реакциями преципитации способ диагностики, так как объем осадка (агглютината) превосходит объем преципитата.

Реакция прямой гемагглютинации (РПГА) используется для выявления поверхностных антигенов микроорганизмов и эритроцитов, а также антител к ним.
К стандартным сывороткам, содержащим антитела, добавляют исследуемый материал (кровь). Скорость прямой реакции агглютинации связана с количеством исследуемого материала, количеством и концентрацией сыворотки, температурой окружающей среды.

Реакцию непрямой гемагглютинации проводят для выявления антител в крови пациента с помощью эритроцитарного диагностикума. Реагент представляет собой эритроциты, на поверхности которых расположен антиген (белки микроорганизмов, токсинов, аллергенов и др.).
Сыворотку крови пациента разводят 0,9 %-ным раствором натрия хлорида, затем добавляют эритроцитарный диагностикум и отслеживают результат. Этот высокочувствительный способ диагностики выявляет антигены даже в небольших концентрациях.

В лаборатории пользуются двумя различными по механизму действия реакциями гемагглютинации.

Первая РГА относится к серологическим. В этой реакции эритроциты агглютинируются при взаимодействии с соответствующими антителами (гемагглютининами). Реакцию широко используют для определения групп крови.

Вторая РГА не является серологической. В ней склеивание эритроцитов вызывают не

антитела, а особые вещества, образуемые вирусами. Например, вирус гриппа агглютинирует эритроциты кур и морских свинок, вирус полиомиелита — эритроциты барана. Эта реакция позволяет судить о наличии того или иного вируса в исследуемом материале.

Реакцию проводят в пробирках или на специальных пластинках с лунками. Исследуемый на наличие вируса материал разводят изотоническим раствором от 1:10 до 1:1280; 0,5 мл каждого разведения смешивают с равным объёмом 1-2% взвеси эритроцитов. В контроле 0,5 мл эритроцитов смешивают с 0,5 мл изотонического раствора. Пробирки ставят на 30 минут в термостат, а пластины оставляют при комнатной температуре на 45 минут.

Учёт результатов. При положительном результате реакции на дне пробирки или лунки выпадает осадок эритроцитов с фестончатыми краями («зонтик»), покрывающий всё дно лунки. При отрицательном результате эритроциты образуют плотный осадок с ровными краями («пуговку»). Такой же осадок должен быть в контроле. Интенсивность реакции выражают знаками «+».

Титром вируса является максимальное разведение материала, в котором происходит агглютинация.

Реакция торможения гемагглютинации

Это серологическая реакция, в которой специфические противовирусные антитела, взаимодействуя с вирусом (антигеном), нейтрализуют его и лишают способности агглютинировать эритроциты, т. е. тормозят реакцию гемагглютинации. Эта реакция позволяет определить вид и тип вирусов.

Постановка реакции. 0,25 мл противовирусной сыворотки смешивают с равным объёмом материала, содержащего вирус. Смесь встряхивают и помещают в термостат на 30 минут, после чего добавляют по 0,5 мл’1-2% взвеси эритроцитов.

Учёт результатов. При правильной постановке опыта в контроле сыворотки и эритроцитов должна образоваться «пуговка» — нет агглютинирующего эритроциты фактора; в контроле антигена образуется «зонтик» — вирус вызвал агглютинацию эритроцитов. Если сыворотка гомологична изучаемому вирусу, образуется «пуговка» — сыворотка нейтрализовала вирус.

Реакция непрямой гемагглютинации

Реакция непрямой (пассивной) гемагглютинации (РИГА) основана на том, что эритроциты, если на их поверхности адсорбировать растворимый антиген, приобретают способность агглютинироваться при взаимодействии с антителами к адсорбированному антигену.

Постановка реакции. Сыворотку прогревают 30 минут при 56 °С, разводят последовательно в соотношении 1:10 — 1:1280 и разливают по 0,25 мл в пробирки или лунки, куда затем добавляют по 2 капли эритроцитов с адсорбированными на них антигенами.

Контроли: взвесь эритроцитов с адсорбированными на них антигенами с заведомо иммунной сывороткой, взвесь эритроцитов с адсорбированными на них антигенами с нормальной сывороткой; взвесь нормальных эритроцитов с испытуемой сывороткой. В первом контроле должна произойти агглютинация, во втором и третьем её не должно быть.

1. О чем свидетельствует положительный результат РГА между эритроцитами и исследуемым на наличие вируса материалом?

2. Произойдет ли реакция агглютинации эритроцитов, если к ним добавить вирус и соответствующую ему сыворотку? Как называется реакция, выявляющая этот феномен?

Реакция связывания комплемента.

Реакция связывания комплимента (РСК) основана на том, что’ специфический комплекс антиген — антитело всегда адсорбирует на себе (связывает) комплемент.

Эту реакцию широко применяют при идентификации антигенов ив серодиагностике инфекций, особенно заболеваний, вызванных спирохетами (реакция Вассермана), риккетсиями и вирусами.

РКС-сложная серологическая реакция. В ней участвуют комплемент и две системы антиген-антитело. По существу, это две серологические реакции.

Правая система-основная состоит из антигена и антитела (один известный, др. нет). К ней добавляют определенное количество комплемента. При соответствии антигена и антитела этой системы они соединятся и свяжут комплимент. Образовавшийся комплекс мелкодисперсный и не виден.

Об образовании этого комплекса узнают с помощью второй системы гемолитической или индикаторной. В нее входят эритроциты барана (антиген) и соответствующая им гемолитическая сыворотка (антитело), т.е. готовый имунный комплекс. В этой системе лизис эритроцитов может произойти только в присутствии комплемента. Если комплемент связан первой системой, то во второй системе гемолиза не будет- т.к. нет свободного комплемента. Отсутствие гемолиза (содержимое пробирки мутное или на дне ее осадок эритроцитов) регистрируют как положительный результат РСК.

Если в первой системе антиген не соответствует антителу, то имунный комплекс не образуется и комплимент останется свободным. Оставшийся свободным, комплимент участвует во второй системе, вызывая гемолиз, результат РСК отрицательный(содержимое пробирок прозрачно-«лаковая кровь»).

Компоненты, реакции связывания комплемента:

1. Антиген — обычно лизат, экстракт, гаптен,

реже взвесь микроорганизмов.

2. Антитело — сыворотка больного.

3. Комплемент — сыворотка морских свинок.

4. Антиген — эритроциты барана.

5. Антитело — гемолизин к эритроцитам барана.

Ввиду того, что в РСК участвует большое количество сложных компонентов,

они должны быть предварительно оттитрованы и взяты в реакцию в точных количествах и в равных объемах: по 0,5 или 0,25 , реже по 0,2,1,25 или 1,0 мл (большие объемы дают более точный результат). Титрование компонентов реакции проводят в том же объеме, в каком ставят опыт, заменяя недостающие ингредиенты изотоническим раствором.

Реакция непрямой или пассивной гемагглютинации (РНГА или РПГА) более чувствительна и специфична, чем реакция агглютинации. Эту реакцию также используют в двух направлениях.

1) Для обнаружения антител в сыворотке крови больного приме-няются эритроцитарные диагностикумы, в которых антиген адсорби-рован на поверхности обработанных танином эритроцитов. В отноше-нии этой реакции чаще употребляют термин РПГА.

Исследуемую сыворотку разводят в лунках пластмассовых план-шетов и добавляют эритроцитарный диагностикум. При положитель-ной реакции появляется тонкая пленка по стенкам лунки в виде «кру-жевного зонтика», при отрицательной реакции — плотный осадок эрит-роцитов в виде «пуговки».

2) Для обнаружения токсинов и бактериальных антигенов в исс-ледуемом материале применяют антительные эритроцитарные диагнос-тикумы, полученные путем адсорбции антител на эритроцитах. В от-ношении этой реакции чаще употребляется термин РНГА. Например, с помощью антительных диагностикумов обнаруживают антиген па-лочки чумы, дифтерийный экзотоксин, ботулинический экзотоксин.

Что такое эритроцитарный диагностикум? Что такое антительный эритроцитарный диагностикум?

Эритроцитарные диагностикумы представляют собой эритроциты (обработанные танином или формалином) с адсорбированными на них антигенами, извлеченными из бактерий, и применяются в РПГА (реакции пассивной гемагглютинации). В том случае, когда РПГА используется для выявления антигена в выделениях больных, в тканях и др., применяют «антительные диагностикумы», т. е. эритроциты, сенсибилизированные антителами.

В РНГА выявляют антитела сыворотки крови с помощью антигенного эритроцитарного диагностикума, который представляет собой эритроциты с адсорбированными на них антигенами.

Методика постановки реакций. Реакция коагглютинации.

— фиксация эритроцитов формальдегидом или глютаровым, или акриловым альдегидами. Такие обработанные эритроциты длительно сохраняются. Чаще для этой цели используют эритроциты барана, человека, кур и др.;
— обработка фиксированных эритроцитов раствором танина. В результате эритроциты приобретают свойство необратимо адсорбировать на своей поверхности белки (вирусы и антитела);
— сенсибилизация танизированных эритроцитов вирусами или антителами.

Реакция коагглютинации (РКА)

Реакцию коагглютинации применяют для определения антигенов с помощью антител, адсорбированных на белке А клеток стафилококка (антительный диагностикум).
Белок А имеет сродство к Fc-фрагменту иммуноглобулинов, поэтому такие бактерии, обработанные иммунной диагностической сывороткой неспецифически адсорбируют антитела сыворотки, которые затем взаимодействуют активными центрами с соответствующими микробами, выделенными от больных. В результате коагглютинации образуются хлопья, состоящие из стафилококков, антител диагностической сыворотки и определяемого микроба.

Агглютинирующие сыворотки: что они содержат; как их получают, для чего применяются; что такое титр агглютинирующей сыворотки?

Агглютинирующую сыворотку получают иммунизацией кроликов (внутривенно, подкожно или внутрибрюшинно) взвесью убитых бактерий, начиная с дозы 200 млн., затем 500 млн., 1 млрд., 2 млрд., микробных тел в 1 мл, с интервалами 5 дней. Через 7-8 дней после последней иммунизации берут кровь и определяют титр антител.

Титром агглютинирующей сыворотки называется то максимальное разведение сыворотки, при котором происходит агглютинация с соответствующим микроорганизмом.

Агглютинирующие сыворотки применяются при идентификации микроба в развернутой реакции агглютинации.

Если изучаемый микроорганизм агглютинируется сывороткой до титра или до половины значения титра, его можно считать принадлежащим к тому виду, название которого указано на этикетке ампулы.

В чём различия между поливалентными и моновалентными (монорецепторными) агглютинирующими сыворотками; почему при иммунизации кролика микробами одного вида получается сыворотка, содержащая антитела к нескольким антигенам?

Монорецепторные сыворотки — сыворотки, содержащие антитела толь-ко к одному антигену, и поливалентные сыворотки, дающие реакции аг-глютинации с двумя-тремя родственными бактериями, имеющими об-щий антиген. Агглютинирующие сыворотки применяют для идентификации микроорганизмов в реакции агглютинации. Недостатком таких сывороток является то, что они спо-собны давать групповые реакции агглютинации, т.к. они содержат ан-титела к бактериям, имеющим общие антигены.

Основана на том, что эритроциты, на которых предварительно адсорбированы антигены, приобретают способность агглютинироваться в присутствии гомологичных сывороток (антител).

Эритроциты при этом выполняют роль носителей со специфическими детерминантами, агглютинация которых происходит в результате реакции антиген + антитело.

Эритроциты, к поверхности которых прочно присоединены антигены, называют эритроцитарным антигенным диагностикумом, или эритроцитами, сенсибилизированными антигеном.

Другой тип РНГА — на поверхности эритроцитов адсорбированы антитела и последующая их агглютинация происходит в присутствии гомологичного антигена. В этом случае такие эритроциты называют эритроцитарным антительным диагностикумом, или эритроцитами, сенсибилизированными антителами.

На основе этих двух принципиальных методических подходов разработаны и используются многие модификации РНГА. Так, в качестве носителей применяют мелкие стандартные частички латекса. В этом случае реакцию называют реакция латекс агглютинации (РЛА) или используют золотистый стафилококк — реакция коагглютинации и т. д. Обычно эритроцитарные диагностикумы готовят на предприятиях биологической промышленности, а в диагностических лабораториях ставят уже главный опыт РНГА.

Приготовление эритроцитарных диагностикумов включает следующие этапы:

фиксация эритроцитов формальдегидом или глютаровым, или акриловым альдегидами. Такие обработанные эритроциты длительно сохраняются. Чаще для этой цели используют эритроциты барана, человека, кур и др.;
обработка фиксированных эритроцитов раствором танина. В результате эритроциты приобретают свойство необратимо адсорбировать на своей поверхности белки (вирусы и антитела);
сенсибилизация танизированных эритроцитов вирусами или антителами.

Необходимо отметить, что методы приготовления эритроцитарных диагностикумов для вирусных инфекций различна.

Методика постановки РНГА для обнаружения и определения титра антител заключается в следующем:

к последовательным 2-кратным разведениям сыворотки добавляют равные дозы эритроцитов, сенсибилизированных антигеном;
смесь оставляют на 2-3 ч при комнатной температуре или на 16-18 ч при 4 °С;
учитывают результаты. Если в сыворотке содержатся антитела к вирусу, которым были сенсибилизированы эритроциты, наблюдают гемагглютинацию, которую оценивают в крестах.

За титр антител в сыворотке принимают наивысшее разведение сыворотки, которое еще обеспечивает гемагглютинацию не менее чем на два креста.

РНГА сопровождается всеми соответствующими контролями. Обычно ставят реакцию микрометодом.

РНГА позволяет решать следующие диагностические задачи:

обнаружить антитела и определить их титр в сыворотке крови с помощью известного эритроцитарного антигенного диагностикума;
обнаружить и идентифицировать неизвестный вирус с помощью известного эритроцитарного антительного диагностикума.

Достоинства РНГА: высокая чувствительность, простота техники постановки и быстрота ответа. Однако важно отметить, что возникают большие трудности в приготовлении стабильных эритроцитарных диагностикумов (большая зависимость от чистоты используемых компонентов, необходимость подбора режима фиксации, танизации и сенсибилизации эритроцитов для каждого вида вируса).

Если вы нашли ошибку, пожалуйста, выделите фрагмент текста и нажмите Ctrl+Enter.

реакция торможения гемагглютинации (РТГА)

В основе РГА лежит способность эритроцитов склеиваться при адсорбции на них определенных антигенов. В качестве исследуемого материала при гемагглютинации используют аллантоисную, амниотическую жидкость, суспензию хорионаллантоисных оболочек куринных эмбрионов, взвеси и экстракты из культур или органов животных, зараженных вирусами, нативный инфекционный материал. РГА не является серологической, поскольку происходит без участия иммунной сыворотки и используется для выбора рабочего разведения антигена для постановки РТГА или наличия антигена (вируса) в исследуемом материале (например, при гриппе). В реакции используются эритроциты животных, птиц, человека I (0) группы крови.

Для постановки ориентировочной РГА на предметное стекло наносят каплю 5% взвеси эритроцитов и каплю испытуемого материала, тщательно смешивают. При положительном результате через 1-2 минуты макроскопически наблюдают появление хлопьевидной агглютинации эритроцитов.

Для постановки РГА в развернутом ряду в лунках полистероловых планшетов готовят двукратно возрастающие разведения исследуемого материала на физиологическом растворе в объёме 0,5 мл. Во все пробирки вносят по 0,5 мл 0,25 — 1% взвеси эритроцитов. Результаты учитывают после полного оседания эритроцитов в контроле (эритроциты + физиологический раствор). Реакцию учитывают по характеру осадка эритроцитов. В положительных случаях степень агглютинации отмечают плюсами. Четырьмя плюсами оценивают реакцию, имеющую вид тонкой пленки из склеившихся эритроцитов, покрывающей дно пробирки (зонтик), реакцию с просветами в пленке отмечают тремя плюсами, наличие пленки с фестончатыми кружевными краями из склеившихся эритроцитов обозначают двумя плюсами, хлопьевидный осадок эритроцитов, окруженный зоной комочков агглютинированных эритроцитов соответствует одному плюсу. Резко очерченный осадок эритроцитов, неотличимый от контроля показывает отсутствие агглютинации. За титр принимают предельное разведение исследуемого материала, вызвавшее агглютинацию эритроцитов на два плюса.

При положительном результате РГА исследование продолжают, определяя тип выделенного вируса с помощью реакции торможения гемагглютинации типоспецифическими сыворотками.

РТГА основана на свойстве антисыворотки подавлять вирусную гемагглютинацию, так как нейтрализованный специфичными антителами вирус утрачивает способность агглютинировать эритроциты. При ориентировочном типировании вирусов используют капельный метод на стекле. Для окончательного установления типовой принадлежности выделенного вируса и титрования антител в сыворотках ставят развернутую РТГА в пробирках или в лунках. С этой целью готовят двухкратные разведения сывороток на физиологическом растворе и разливают по 0,25 мл. К разведениям сыворотки прибавляют по одной капле материала, содержащего вирус и по одной капле 1% взвеси эритроцитов.

При использовании РТГА для определения типа вируса, используют типоспецифические сыворотки, которые добавляют к равному объему рабочего разведения антигена. Типовую принадлежность выделенного вируса устанавливают по специфической иммунной сыворотке, показавшей наивысший титр антител к этому вирусу.

РГА и РТГА широко применяется для диагностики вирусных инфекций (клещевой энцефалит, грипп и др.) с целью обнаружения специфических антител и для идентификации многих вирусов по их антигенам.

Реакция иммунофлуоресценции (РИФ)

РИФ основана на соединении антигенов бактерий, риккетсий и вирусов со специфическими антителами, меченными флюоресцирующими красителями (флуоресцеинизотиоцианат, родамин, В-изотицианит, лиссатинродамин В-200, сульфохлорид и др.), имеющими реакционно-способные группы (сульфохлорид, изотиоцианит и др.). Эти группы соединяются со свободными аминогруппами молекул антител, которые не теряют при обработке флуорохромом специфического сродства к соответствующему антигену. Образовавшиеся комплексы АГ–АТ становятся хорошо видимыми, ярко светящимися структурами под люминесцентным микроскопом (рис. 48). С помощью РИФ можно обнаруживать небольшие количества бактериальных и вирусных антигенов. Метод РИФ используют в двух вариантах: прямой и непрямой метод.

Прямой метод основан на непосредственном соединении антигена с меченым антителом. Непрямой метод – на поэтапном выявлении комплекса АГ–АТ с помощью флуоресцентных красителей. Первый этап заключается в образовании иммунных комплексов определенного антигена со специфическими антителами. Второй этап – в выявлении этого комплекса путем обработки его меченым антигаммаглобулином.

Преимущество РИФ – простота, высокая чувствительность, скорость получения результата. РИФ применяется как метод ранней экспресс-диагностики гриппа, дизентерии, малярии, чумы, туляремии, сифилиса и др. Для проведения такого исследования используется люминесцентный микроскоп.

Радиоиммунологический анализ (РИА)

РИА – один из самых чувствительных методов иммунодиагностики. Его применяют для выявления антигена вируса гепатита В, у больных вирусным гепатитом. Для этого к исследуемой сыворотке добавляют референс-сыворотку (сыворотку, содержащую антитела к вирусу гепатита В). Смесь инкубируют 1-2 сут при температуре 40 0 С, затем добавляют референс-антиген (антиген, меченный изотопом 125 J) и продолжают инкубацию еще 24 часа. К образовавшемуся комплексу антиген-антитело добавляют преципитирующие антииммуноглобулины против белков референс-сыворотки, что приводит к образованию преципитата (рис. 49). Результат учитывают по наличию и числу импульсов в преципитате, зарегистрированных счетчиком. При наличии в исследуемой сыворотке антигена, связавшегося со специфическими антителами, последние не вступают в связь с меченным антигеном и, поэтому, он не обнаруживается в преципитате. Таким образом, в основу РИА положен принцип конкурентного взаимодействия определяемого антигена и известного количества меченного антигена с активными центрами антител.

Иммуноферментный метод (ИФА)

Метод используется для выявления антигенов с помощью соответствующих им антител, конъюгированных с ферментом-меткой (пероксидазой хрена, b-галактозой или щелочной фосфатазой). После соединения антигена с меченной ферментом иммунной сывороткой в смесь добавляют субстрат и хромоген. Субстрат расщепляется ферментом, а его продукты деградации вызывают химическую модификацию хромогена. При этом хромоген меняет свой цвет – интенсивность окраски прямо пропорциональна количеству связавшихся молекул антигена и антител (рис. 50).

Наиболее распространен твердофазный ИФА, при котором один из компонентов иммунной реакции (антиген или антитело) сорбирован на твердом носителе. В качестве твердого носителя используются микропанели из полистирола. При определении антител в лунки с сорбированным антигеном последовательно добавляют сыворотку крови больных, антиглобулиновую сыворотку, меченную ферментом и смесь растворов субстрата для фермента и хромогена. Каждый раз после добавления очередного компонента из лунок удаляют не связавшиеся реагенты путем тщательного промывания. При положительном результате изменяется цвет раствора хромогена.

Твердофазный носитель можно сенсибилизировать не только антигеном, но и антителом. Тогда в лунки с сорбированными антителами вносят искомый антиген, добавляют иммунную сыворотку против антигена, меченную ферментом, а за тем – смесь растворов субстрата для фермента и хромогена.

ИФА применяют для диагностики заболеваний, вызванных вирусными и бактериальными возбудителями.

РАЗДЕЛ VII. ОСНОВЫ ВИРУСОЛОГИИ

РГА основана на том, что некоторые виды бактерий и вирусов обладают способностью адсорбироваться на поверхности эритроцитов разных видов животных (и птиц), вызывая их склеивание и образование агглютината (прямая РГА).

Адсорбция антигена (бактерий, вирусов) на поверхности эритроцитов не всегда проявляется образованием видимого осадка; кроме того, РГА неспецифична, потому что эритроциты одного и того же вида животного могут адсорбировать различные антигены.

Специфической является реакция пассивной (непрямой) гемагглютинации (РПГА). Для ее постановки предварительно готовят эритроцитарный диагностикум (эритроциты, на которых адсорбирован антиген). С этой целью стерильно получают кровь барана (или петуха), дефибринируют ее и несколько раз отмывают в фосфатно-буферном растворе (pH 7,2) с помощью 3-5-кратного центрифугирования. Над- осадочную жидкость удаляют, концентрацию эритроцитов доводят до 2,5% (1:40). К 2,5%-й взвеси эритроцитов добавляют в равном объеме (по 1 мл или по 0,5 мл) взвесь бактерий исследуемого вида микроба в концентрации 5-10 млрд клеток в 1 мл. Эритроциты легко адсорбируют антиген полисахаридной природы. Для адсорбции антигена белковой природы эритроциты предварительно обрабатывают танином в разведении 1:20 000. Эритроциты в комплексе с добавленным антигеном оставляют для сенсибилизирования (адсорбции) на 2 ч в термостате (37 °С), затем вновь центрифугируют при 3-4 тыс. об/мин в течение 5 мин с фосфатно-буферным раствором (рис. 9.13).

Полученный эритроцитарный диагностикум помещают в пробирки (или лунки в плексигласовой доске) и добавляют к нему стандартную иммунную сыворотку.

В положительных случаях произойдет РГА — выпадение эритроцитов в виде характерного хлопьевидного или зернистого осадка, распределенного по всей поверхности дна пробирки (гемагглютинат). Значит, исследуемый вид микроба (антиген) специфичен антителам иммунсыворотки. В отрицательных случаях несклеенные эритроциты осядут на дно в виде небольшого ровного кружочка.

Для большей достоверности результатов РПГА проводят реакцию задержки (торможения) феномена гемагглютинации (РЗГА) или ее модификацию — реакцию нейтрализации антител (РИА).

Рис. 9.13. Реакция пассивной гемагглютинации (схема): Эр — эритроциты: АГ — антиген: АТ — антитело

Сущность РЗГА заключается в том, что реакцию агглютинации ставят со специфической диагностической сывороткой и испытуемым антигеном (исследуемый вид микроба используют как антиген). Эту смесь выдерживают 1-2 ч при 37 °С, затем добавляют эритроциты. Если испытуемый антиген гомологичен антителам диагностической сыворотки, они взаимодействуют друг с другом и добавленные эритроциты не агглютинируют — результат реакции положительный. Если испытуемый антиген не гомологичен антителам сыворотки или он не содержится в материале, то добавленные эритроциты адсорбируют антиген и происходит РГА — результат РЗГА отрицательный, вид испытуемого микроба (антигена) не установлен.

Методика постановки PH А заключается в том, что берут в равных объемах и смешивают диагностическую иммунную сыворотку с различными разведениями исследуемого материала (искомого антигена), оставляют для контакта на 1-2 ч, затем добавляют эритроциты, сенсибилизированные определенным (известным) антигеном, специфическим по отношению к антителам сыворотки (эритроцитарный диагностикум). Когда искомый антиген вступает в реакцию с антителами сыворотки, происходит их нейтрализация и добавленные эритроциты не агглютинируют, РГА не происходит — результат РНА положительный. Если в исследуемом материале не содержится антиген, специфический к антителам используемой сыворотки, нейтрализации антител не будет. Поэтому при добавлении эритроцитарного диагнос- тикума проявляется агглютинация эритроцитов (гемагглютинация), а результат РНА — отрицательный. Реакция нейтрализации антител — высокочувствительный метод обнаружения антигена не только во взвеси живых (или убитых) бактерий, но и во взвеси растертой ткани различных органов, нативных и гретых секретах и экскретах больного организма.

Реакция Видаля . Со второй недели заболевания в крови больных накапливаются антитела против возбудителя инфекции. Для их выявления исследуют сыворотку крови больного в реакции агглютинации. В качестве антигена используют убитые культуры сальмонелл — диагностикумы.

Для постановки реакции Видаля используют сыворотку больного, набор диагностикумов, изотонический раствор натрия хлорида.

Кровь (2-3 мл) из мякоти пальца или локтевой вены собирают в стерильную пробирку и доставляют в лабораторию. В лаборатории пробирку ставят в термостат на 20-30 мин для образования сгустка, затем пастеровской пипеткой обводят сгусток, чтобы отделить от стенки пробирки, и ставят на 30-40 мин на холод. Отделившуюся сыворотку отсасывают и используют для постановки реакции агглютинации с диагностикумами из сальмонелл тифа и паратифов. Для получения сыворотки кровь можно отцентрифугировать.

При возникновении инфекционного процесса — брюшного тифа или паратифов — в организме вырабатываются О- и Н-антитела к одноименным антигенам возбудителя.

О-антитела появляются первыми и исчезают довольно быстро. Н-антитела сохраняются долго. То же самое происходит и при вакцинации, поэтому положительная реакция Видаля с О- и Н-антигенами свидетельствует о наличии заболевания, а реакция только с Н-антигенами может быть и у переболевших (анамнестическая реакция), и у привитых (прививочная). Исходя из этого, реакцию Видаля ставят раздельно с О- и Н-антигенами (диагностикумы).

Так как клинически брюшной тиф и паратифы А и В сходны, то для выявления природы заболевания сыворотку больного испытывают одновременно с диагностикумами из сальмонелл тифа и паратифа А и В.

Реакцию Видаля широко используют, так как она проста и не требует специальных условий.

Поставить реакцию можно двумя способами: капельным и объемным (см. главу 12). В практике чаще используют объемный метод. При постановке линейной реакции агглютинации количество рядов должно соответствовать количеству антигенов (диагностикумы). Возбудителем заболевания считают микроорганизм, диагностикум из которого агглютинировался сывороткой больного. Иногда отмечают групповую агглютинацию, так как возбудители тифа и паратифов обладают общими групповыми антигенами. В этом случае положительным считают результат реакции в ряду, в котором агглютинацию отмечают в большем разведении сыворотки (табл. 36).

Таблица 36. Возможный результат реакции агглютинации

Примечание. В практике реакцию Видаля ставят с четырьмя диагностикумами: брюшного тифа «О» и «Н», а паратифов А и В — с диагностикумами «ОН».

Если агглютинация возникает только в небольших разведениях сыворотки — 1:100, 1:200, то для отличия реакции при заболевании от прививочной или анамнестической прибегают к повторной постановке реакции агглютинации через 5-7 дней. У больного титр антител повышается, а у привитого или переболевшего не изменяется. Таким образом, нарастание титра антител в сыворотке крови служит показателем заболевания.

В ответ на внедрение в организм возбудителей брюшного тифа, обладающих Vi-антигеном, в крови больного появляются Vi-агглютинины. Их определяют со 2-й недели болезни, но титр их обычно не превышает 1:10. Обнаружение Vi-антител связывают с наличием в организме возбудителей брюшного тифа, поэтому определение этих антител имеет большое эпидемиологическое значение, так как позволяет выявить бактерионосителей.

Реакция Vi-гемагглютинации . Это наиболее чувствительная реакция для выявления антител.

Принцип реакции заключается в том, что эритроциты человека (I группы) или барана после специальной обработки могут адсорбировать на своей поверхности Vi-антиген и приобретают при этом способность агглютиниповаться соответствующими Vi-антителами.

Эритроциты с адсорбированными на поверхности антигенами называют эритроцитарными диагностикумами.

Для постановки реакции Vi-гемагглютинации берут:

1) сыворотку крови больного (1-2 мл); 2) эритроцитарный сальмонеллезный Vi-диагностикум; З) Vi-сыворотку; 4) О-сыворотку; 5) изотонический раствор натрия хлорида.

Реакцию ставят в агглютинационных пробирках или в пластмассовых пластинах с лунками.

Кровь у больного берут так же, как для реакции Видаля. Получают сыворотку. Из сыворотки готовят двукратные серийные разведения, начиная с 1:10 до 1:160.

По 0,5 мл каждого разведения вносят в лунку и прибавляют по 0,25 мл эритроцитарного диагностикума. Реакцию ставят в объеме 0,75 мл.

Контролем служат: 1) стандартная агглютинирующая монорецепторная сыворотка + диагностикум — реакция должна быть положительной до титра сыворотки; 2) диагностикум в изотоническом растворе натрия хлорида (контроль) — реакция должна быть отрицательной.

Содержимое лунок тщательно перемешивают, ставят в термостат на 2 ч и оставляют при комнатной температуре до следующего дня (на 18-24 ч).

Учет начинают с контроля. Реакцию оценивают в зависимости от степени агглютинации диагностикума.

Результаты учитывают по четырехкрестной системе:

Эритроциты полностью агглютинированы — осадок на дне лунки в виде «зонтика»;

+++ «зонтик» меньше, не все эритроциты агглютинировались;

++ «зонтик» маленький, на дне лунки имеется осадок из неагглютинированных эритроцитов;

Реакция отрицательная; эритроциты не агглютинировались и осели на дно лунки в виде пуговки.

1. В какой период заболевания ставят реакцию Видаля?

2. Какие ингредиенты необходимы для постановки реакции Видаля?

3. С какими диагностикумами ставят реакцию Видаля?

4. Какая из серологических реакций является самой чувствительной при диагностике тифопаратифозных инфекций?

5. Каким диагностикумом пользуются при постановке реакции Vi-гемагглютинации?

6. Какой сывороткой определяют наличие Vi-антигена у исследуемой культуры?

7. Какое значение имеет определение Vi-фаготипа?

Возьмите у преподавателя О- и Н-диагностикумы из сальмонелл тифа, паратифа А и паратифа В и сыворотку больного. Поставьте реакцию Видаля.

Среды ЭМС, Плоскирева, висмут-сульфитный агар выпускаются медицинской промышленностью в виде сухого порошка. Их готовят согласно указаниям на этикетке: отвешивают определенное количество порошка, наливают соответствующее количество воды, кипятят и разливают в стерильные чашки Петри.

Среда Рассела . В 950 мл дистиллированной воды добавляют 40 г сухой питательной среды и прибавляют 5 г питательного агара. Нагревают до кипения и растворения порошков. В 50 мл дистиллированной воды растворяют 1 г х. ч. глюкозы и добавляют к приготовленной смеси. Среду разливают в стерильные пробирки по 5-7 мл, стерилизуют текучим паром (2 дня по 2 мин) и скашивают так, чтобы оставался столбик. Среду Рассела с маннитом и сахарозой готовят так же.

Среда Олькеницкого из сухого агара . 2,5 г сухого питательного агара расплавляют в 100 мл дистиллированной воды. В остуженный до 50° С агар прибавляют все ингредиенты, указанные в рецептуре (этикетке). Среду, разлитую в пробирки, стерилизуют текучим паром (3 дня по 20 мин) и затем скашивают. Готовая среда должна быть бледно-розового цвета.

источник