Вакцинация при бруцеллезе скота

Бруцеллезная вакцина лечебная основана на растительных компонентах и используется для борьбы с бруцеллезом. Бруцеллезом называют инфекционное заражение, которое более свойственно животным, но передается и человеку.

Мальтийская лихорадка или бруцеллез, когда начинает развиваться у человека, то поражает его жизненно важные системы: половую, нервную, опорно-двигательную и сердечно-сосудистую. Главный возбудитель этого недуга — бактерия бруцеллеза.

Основным источником заражения для человека являются животные: свиньи, козы, овцы, коровы. Свое распространение бактерия получает у животных нескольких видов:

1. Паразитирует в органах мелкого рогатого скота.
2. Поражает большой рогатый скот.
3. Заражает инфекцией зайцев, кроликов, оленей, свиней.

Недуг наиболее распространен в районах, где разводят много домашнего скота. В основном болезнь приобретается тремя путями заражения:

1. В быту из-за непосредственного контакта — через раны на коже, ссадины, царапины, соприкосновение слизистых.
2. Орально-фекальным путем — из-за употребления зараженных продуктов, таких как молоко, мясо, сыр.
3. Аэрогенным образом — при вдыхании болезненных бактерий.

Заражение бруцеллезом может проходить довольно медленно и перетекать в хронический процесс. Профилактическими мерами против бруцеллеза являются вакцинация людей, которые постоянно имеют контакт с животными, и хорошая термическая обработка всех продуктов животного и растительного происхождения. Так как бруцеллез может долгое время протекать незаметно, то после выздоровления заболевший находится под постоянным контролем у врачей в течение двух лет.

Вакцина бруцеллезная в странах СНГ основана на применении живого штамма бруцелл. Но культуру маточного штамма бруцеллы содержат и выращивают таким образом, чтобы она смогла пройти контроль на безвредность и определенную жизненную активность. Когда создают вакцину, то контролируют концентрацию жизнеспособных бруцелл, чтобы при введении такого препарата можно было рассчитать допустимую дозировку для организма, тем самым обезопасив его от возможного заражения.

Сухая форма бруцеллы, перед ее разведением и созданием вакцины, хранится в специальных условиях при температуре не выше двух-четырех градусов. Живая форма, уже как вакцина, обычно находится в специальном сухом темном месте с соблюдением температурного режима (не выше восьми градусов тепла).

Перевозка вакцины зимой допустима любым видом транспорта с условиями хранения при температуре не ниже нуля, а летом транспортировка возможна только благодаря авиаперелетам. Если соблюдать все нормы перевозки и температурные режимы хранения, то вакцина, находящаяся в герметичном контейнере, может действовать в течение года.

Естественно, что существуют отдельные методы вакцинации для человека и для животного. Вакцина против бруцеллеза для животных и человека одна и та же, разнятся лишь нормы дозировки и графики вакцинации.

Есть несколько способов введения вакцины бруцеллеза:

Подкожный метод вакцинации не очень эффективен в качестве лечения, но вполне допустим при обычной профилактике. При этом методе прививка является комплексной. В первый раз делают два прокола — на предплечье и бедре. В каждый прокол вводят по половине положенной первой нормы вакцины. Таким образом прививки делают несколько раз. Второй раз вакцинируют через два дня, увеличивая дозировку. Для этого на теле делают шестнадцать новых проколов.

Метод подкожного введения вакцины практически не используют, так как он длительный и довольно неприятный, а его эффективность не очень высока. Наиболее удобным является внутривенный метод вакцинации. Его проводят с помощью специальной капельницы. Такая вакцинация — лечебная и профилактическая одновременно.

Перед применением внутривенной прививки пациента готовят, делают несколько предварительных проб, проверяя тем самым переносимость препарата. Общий курс вакцинации состоит из восьми доз. Первой вводят самую маленькую, после нее пациент может испытывать чувство легкого дискомфорта, недомогания в виде головокружения, тошноты.

При нормально перенесенной вакцинации прививка действует на протяжении года, но иммунитет начинает снижать свои защитные реакции уже спустя пять-шесть месяцев после ее применения. Поэтому ревакцинацию повторяют через год, но за три-четыре недели до истечения срока действия вакцины.

Для животных вакцинация проходит по другой схеме. Им делают прививку только подкожно, два раза в год с промежутком в один месяц. Обычно животное получает такую прививку в полугодовалом возрасте. Ревакцинацию делают ровно через год.

Проводить вакцинацию против бруцеллеза необходимо тем людям, которые довольно много контактируют с животными. В эту категорию попадают работники ферм, сельскохозяйственных предприятий, зоотехники, ветеринары, работающие с крупным и мелким рогатым скотом. К лицам, которые нуждаются в защите от бруцеллеза, относят и специалистов, занимающихся созданием вакцины и разведением бактерии.

Также в зоне риска находятся дети, проживающие на территории фермерских, сельских угодий, где выращивают скот. Довольно целесообразным является вакцинация сельских жителей, которые занимаются частным разведением скота. Если за иммунизацией животных следят, делают все прививки вовремя, то риск заболеть у людей, ухаживающих за ними, довольно мал. Но всегда остается небольшой шанс заразиться от диких животных.

Такая бактерия, как бруцеллез, вакцина которой основана на живых формах инфекции, как и все ей подобные, заражает организм в ослабленном состоянии. Поэтому к применению вакцины есть свои противопоказания. Ее нельзя использовать в таких случаях:

1. При наличии иммунодефицита.
2. При обнаружении опухолей, заболеваний крови и в процессе лечения таких недугов. При этих обстоятельствах вакцинация возможна только тогда, когда прошло полгода с последнего курса лечебной терапии.
3. При повышенной температуре.
4. При беременности и в период кормления грудью.
5. При наличии хронических болезней.
6. При серьезных заболеваниях кожных покровов.
7. При повышенном аллергическом фоне, склонности к бронхиальной астме.
8. При положительной реакции на пробную вакцинацию.
9. При существовании побочных реакций.

У каждого организма своя реакция на прививку. Вакцина бруцеллезная имеет практически такие же побочные эффекты, как и другие прививки. Основными реакциями на вакцину могут быть:

1. Припухлость, воспаление тканей в области прививки, возможны образования красноватых узелков.
2. При внутривенном введении инъекции может появляться гиперемия, сильная припухлость ткани, инфильтрация размером до двадцати пяти миллиметров.
3. Слабость, общая болезненность.
4. Появление головной боли.
5. Проявление высокой температуры.
6. Отек Квинке, шок анафилактического характера.

Бруцеллезная вакцинация необходима при современном ведении животноводства и ветеринарных лечебниц. Поэтому тенденции профилактики и развития новых методов вакцинации довольно высокие.

Сейчас идет активная разработка вакцины на основе антител бруцелл протективного характера, которые помогут заменить методы применения живых форм бактерии.

Сначала ее планируют использовать, как способ ревакцинации, а уже позже включить в полноценный процесс вакцинации. Это сделает вакцину более безопасной для человека и животного. К тому же, ее применение должно быть значительно проще и менее болезненно.

источник

Бруцеллез животных представляет собой серьезную проблему для здравоохранения из-за его высокой патогенности для человека и является одним из самых важных зоонозных заболеваний в мире.

Бруцеллез — это заболевание, которое вызывает значительные экономические потери в секторе животноводства, ока­зывает серьезные последствия для международной торговли животными и продуктами животного происхождения, и согласно Международному эпизоо­тическому бюро подлежит обязательному декларированию.

Эта болезнь свойственна многим регионам мира и отличается высокой степенью заболеваемости, особенно среди незараженного ранее поголовья. Смертность обычно низкая, но распространение происходит очень быстро в тех стадах и регионах, где присутствует это заболевание.

Источниками заражения человека главным образом являются прямой контакт с зараженными животными (заражение оральным или конъюктивальным путем) и употребление молочных продуктов без термической ообработки.

Профилактика и снижение заболеваемости людей бруцеллезом тесно связаны с распространением бруцеллеза среди животных, поэтому очень важно бороться с заболеванием животных для снижения количества инфицированных людей. Наилучшим способом борьбы с проблемой бруцеллеза у животных является профилактика заболевания при использовании живых аттенуированных вакцин.

Род Бруцелла включает в себя несколько видов с различным сродством по отношению к хозяину. Бруцелла — это грамотрицательная коккобактерия и факультативный внутриклеточный патоген, что создает определенные противоречия при создании иммунитета.

ЭПИДЕМИОЛОГИЯ, ПОРАЖЕНИЯ

Оральная и конъюктивальная передача являются основными путями заражения, которое в основном происходит после облизывания абортированного плода и после контакта с выделениями или зараженной средой.

Передача половым и дыхательным способом также является одним из путей попадания патогенов в организм животного.

Основными источниками заражения для человека являются прямой контакт с зараженными животными и употребление продуктов питания, особенно молочных, которые не прошли термическую обработку.

Основным признаком бруцеллеза является аборт, который обычно происходит во второй половине беременности животного. Также может иметь место рождение мертвых и ослабленных животных.

Среди других нарушений можно отметить поражения половых органов (удержание плаценты, эпидидимит, метрит, везикулит и т.д.) и суставов (артрит).

АНТИГЕННАЯ СТРУКТУРА И ИММУ­НИТЕТ

Антигенная структура микроорганизма напрямую связана с распознаванием иммунной системой животного и, таким образом, с установлением иммунитета. Помимо прочих компонентов, внеш­няя мембрана бруцеллы имеет липо-полисахариды, состоящие из 2 частей:

• Гликолипидная часть (липид А)
• Полисахаридная часть: содержит ядро и О-боковую цепь (место соединения антител).

Таблица: Виды бруцелл у домашних и продуктивных животных (Библиографический источник: Бруцеллез у животных и людей. WHO-OIE-FAO, 2006)

Штамм, который содержит гликолипидную часть (липид А) и полисахаридную часть (ядро+О-боковая цепь), называется гладким штаммом. И наоборот, если штамм не имеет боковой цепи, то он классифицируется как шероховатый штамм.
Данный аспект является важным для понимания того, что антитела, образованные после вакцинации животных вакциной с шероховатым штаммом (RB51 CZV) без О-боковой цепи, не смогут присоединиться к антигену и, таким образом, не произойдет агглютинации, которая анализируется путем общепринятых серологических тестов.
Заражение бруцеллой вызывает гуморальную реакцию с образованием антител, которая не обеспечивает достаточной защиты против заболевания, но служит для диагностики бруцеллеза при помощи серологических анализов.
Бруцелла — это внутриклеточный патоген, и поэтому для его устранения очень важно вызвать реакцию клеточного типа.

ДИАГНОСТИКА И ЛЕЧЕНИЕ

Из диагностических испытаний, рекомендованных руководством Международного эпизоотического бюро, наилучшим способом массового скрининга является тест Розы бенгала. Тест связывания комплемента рекомендуется для подтверждения заболевания у животных, положительных на Розу бенгала.

Эти серологические методы не позволяют отличать вакцинированных животных от зараженных, поэтому очень важно использовать вакцины-маркеры, которые позволяют избежать обнаружения при помощи этих методов, или же применять вакцины, которые вызывают минимальную стимуляцию гуморального отклика (антитела).
Специфическое лечение животных не рассматривается как способ борьбы с заболеванием по нескольким причинам, среди прочих из-за их стоимости и не недостаточной эффективности.
Полностью доказано, что наилучшим способом борьбы против заболевания является профилактика с помощью вакцинации.

Вакцинация считается наиболее экономичным методом контроля бруцеллеза, главным образом в странах с высокой распространенностью.
Вакцинация является незаменимым инструментом для контроля бруцеллеза и первым шагом для предотвращения распространения и передачи заболевания.

Доступные вакцины против бруцеллеза:
Живые аттенуированные вакцины яв-ляются единственными, получившими международное признание, рекомен-дованными для контроля и искоренения заболевания. Эти вакцины вызывают интенсивный и продолжительный клеточ¬ный иммуннологический ответ, что позволяет осуществлять профилактику бруцеллеза.
Рекомендуемые и общепризнанные вакцины:

• Brucella abortus: CZV B19 и RB51 CZV.
• Brucella melitensis: CZV Rev-1 и Ocurev.

Такие вакцины, как B. melitensis H38, B. melitensis 5 (M5), B abortus 45/20, штамм 82 B. abortus и штамм 2 (S2) B. suis, не рекомендуются Международным эпизоотическим бюро из-за недостаточной эффективности.

Многие исследователи пытались разработать новые виды вакцин (аттенуированные вакцины, субклеточные, вакцины нового поколения и т.д.), но на сегодняшний день единственными вакцинами, способными обеспечить защиту против бруцеллеза, являются живые аттенуированные вакцины.

Обе вакцины, как CZV B19, так и RB51 CZV, рекомендованы Международным эпизоотическим бюро для профилактики бруцеллеза у крупного рогатого скота.

Иммунитет, достигнутый обеими вакцинами, является достаточным для предотвращения заболевания, но отличительной характеристикой является их серологическая реакция. Вакцинация животных вакциной CZV B19 приводит к интенсивной стимуляции гуморального отклика и поэтому вызывает помехи при выполнении общепринятых серологических тестов (Роза бенгала и тест связывания комплемента).

Как было отмечено ранее, вакцина RB51 CZV — это шероховатая вакцина без О-боковой цепи внешней мембраны. Эта модификация позволяет достичь соответствующего уровня защиты и избежать помех при выполнении серологических анализов.

Благодаря этой характеристике, в странах, особенно страдающих от бремени этого заболевания, рекомендуется вакцинация взрослых животных вакциной RB51 CZV, поскольку она не взаимодействует с серологическими тестами. Это позволит обеспечить высокую защиту животных и ускорить контроль бруцеллеза КРС.

Вакцинация для профилактики Brucella melitensis: CZV Rev-1 (подкожное введение) и Ocurev (конъюктивальное введение).

Подкожное введение вызывает стойкую серологическую реакцию, поэтому этот тип введения желательно не использовать в программах по уничтожению, основанных на серологической диагностике. Но в случае конъюктивального введения (вакцина Ocurev) гуморальная реакция получается слабая, что позволяет ускорить программы контроля.

Эти лиофилизированные вакцины имеют одинаковую концентрацию и обеспечивают сильный и продолжительный иммунитет, предотвращающий заражение.

Не рекомендуется использовать зани-женные дозы вакцины Rev-1 в качестве альтернативы стандартной дозе, в первую очередь из-за недостаточной эффективности.
Программы вакцинации:
Программы, основанные исключительно на диагностике и уничтожении, не позволили установить контроль над заболеванием и поэтому в регионах и странах, в которых распространенность заболевания высо¬кая, вакцинация животных является обязательной.
Вакцинация является важным, но не единственным фактором, который необходимо принимать во внимание.

Для того, чтобы программа вакцинации имела успех, необходимо также принимать во внимание следующие факторы

• Происхождение и качество вакцины
• Охват вакцинацией и период вакцинации
• Идентификация животного и контроль за передвижениями.
• Уничтожение позитивных животных и компенсация.
• Система эпидемиологического наблю¬дения.
• Обучение ветеринаров и животноводов.
• Повышение сознательности официальных служб, ветеринаров, животноводов и потребителей.
• Организация государственных вете-ринарных услуг.
• Лаборатории и диагностические методы.
• Меры биобезопасности: контроль поступления животных, карантин, уничтожение источников заражения, уборка, дезинфекция и т.д.

В течение последних лет были разработаны многочисленные стратегии по вакцинации животных, но государственные ветеринарные службы каждой страны должны выбрать именно ту стратегию, которая больше всего подходит к особенностям своей страны, принимая во внимание эпидемиологические факторы, социально-экономические условия, вид животноводства, распространенность и т.д.

Программы вакцинации мелкого рога-того скота против Brucella melitensis:

Применение вакцины Rev-1 является единственным практическим методом для контроля инфекции у мелкого рогатого скота в зонах с высокой распространенностью и экстенсивным методом ведения хозяйства.

Во многих странах были разработаны стратегии вакцинации только лишь молодых животных, но которые, к сожалению, не помогли контролировать бруцеллез. В то же время, введение массовой вакцинации показало быстрое снижение заболеваемости у животных и, как следствие, снижение распространенности бруцеллеза у людей.

В местах с высокой распространенностью рекомендуется массовая вакцинация молодых и взрослых животных, по крайней мере в течение первого года, и последующая вакцинация ремонтного молодняка. Лучше всего, если программа будет рассчитана на 10 лет и, кроме начальной массовой вакцинации, будет предусматривать новые массовые вакцинации в течение этого периода.

В зонах с более низкой распространен-ностью или после снижения уровней начальной распространенности возможна разработка программы, рассчитанной только на вакцинацию новых животных.

Рекомендуется конъюктивальное введение стандартной дозы в качестве единственного метода, обоснованного с точки зрения безопасности и эффективности, для вакцинации всего стада. Конъюктивальное применение является более безопасным, чем подкожная вакцинация, но все равно не до такой степени, чтобы использовать его для беременных самок.

Вакцина Оcurev для конъюктивального введения применяется во многих странах с высокой распространенностью бруцеллеза, в которых идет постепенное вытеснение вакцины Rev-1 для подкожного введения.

Программы вакцинации КРС против Bru-cella abortus:

Как и в случае с Brucella melitensis, стратегия должна разрабатываться государственными ветеринарными службами согласно их требованиям. Полностью продемонстрировано, что вакцинация препаратом CZV B19 и/ или RB51 CZV является единственным способом борьбы с инфекцией, вызванной Brucella abortus, у коров.

На протяжении многих лет вакцина CZV B19 успешно использовалась в программах контроля для вакцинации молодых животных. Главной проблемой применения штамма В19 являются поствакцинные помехи при серологических анализах и случаи ложных позитивных животных. Ревакцинация взрослых животных данной вакциной для укрепления иммунного ответа не допускается.

Разработка вакцины RB51 CZV позволила использовать программы вакцинации, основанные на выявлении и уничтожении (диагностика и убой). В странах или регионах, особенно страдающих от бремени этого заболевания, рекомендуется вакцинация молодых и взрослых животных вакциной RB51 CZV, поскольку она не вызывает помех при серологических анализах.

Программа, основанная на вакцинации молодых животных с помощью RB51 CZV, и ревакцинация взрослых животных позволяет обеспечить оптимальный рост защиты против заболевания и ускоряет контроль бруцеллеза КРС.

Вакцина RB51 CZV рекомендована в США и Европе, она вытесняет вакцину S19 там, где применяются программы, основанные на вакцинации, диагностике и уничтожении.

Вакцинация является одним из наиболее важных шагов для контроля бруцеллеза у животных. Как уже было сказано, вакцинация — это не единственный фактор, который необходимо принимать во внимание во время разработки программы контроля за заболеванием.

Государственные ветеринарные службы каждой страны имеют в своем распоряжении механизмы (вакцины), которые позволяют им бороться с заболеванием, но любая программа контроля должна выполняться в соответствии с особенностями каждого региона.

Существующие в настоящее время вакцины и диагностикумы в большинстве случаев показывают, что их вполне достаточно для контроля заболевания, включая зоны, где начальная распространенность заболевания очень высокая.

Необходимым условием для успешного осуществления контрольной программы является выбор надежной, стабильной и высококачественной вакцины. Использование вакцин, произведенных с соблюдением европейских стандартов надлежащей производственной практики (GMP), будут служить гарантией успеха.

Компания CZV специализируется на производстве высококачественных вакцин и диагностикумов, которые завоевали прочную репутацию и позволяют контролировать заболевание в различной обстановке. Компания CZV на протяжении последних 40 лет участвует в программах по борьбе с бруцеллезом у животных в различных странах во всем мире.

Aton, G.G. 1987. Control of Brucella melitensis infection in sheep and goats. A review. Trop. Anm. Hlth. Prod., 19:65-74.

Basco, J.M. 1997. A review of the use of B. melitensis Rev 1 vaccine in adult sheep and goats. Prev. Vet. Med., 31: 275-283.

Garin-Bastuji, B., Blasco,J.M., Grayon, M. and Verger, J.M. (1998). Brucella melitensis infection in sheep: present and future. Res. 29:255-274

Neto, F., Vaz, Y.C. 2002.Conjunctival REV 1 vaccination of adult sheep and goats in Tras-os-Montes, Portugal. Epidemiologie et Sante Animab, Volume 42, Pages 99-107

1. Minas, M. Minas, A. Stournara, S. Tsebpidis. 2004. The «effects» of Rev-1 vaccination of sheep and goats on human brucelbsis in Greece Preventive Veterinary Medicine, Volume 64, Issue 1, Pages 41-4.

J.M. Bksco. 2006. Existing and future vaccines against brucellosis in small ruminants

Small Ruminant Research, Volume 62, Issues 1-2, Pages 33-37.

1. Minas. 2006. Control and eradication of brucellosis in small ruminants. Small Ruminant Research, Volume 62, Issues 1-2, Pages 101-107

Oben, S. C., D. Evans, S. G. Hennager, N. F. Cheville, and M. G. Ste-vens.1996. Serologic responses of Brucella abortus strain 19 calfhood-vaccinated cattle following adult vaccination with strain RB51. J Vet Diagn Invest 8:451-4

Schurig, G. G., R. M. Roop, 2nd, T. Bagchi, S. Boyle, D. Buhrman, and N. Sriranganathan. 1991. Biological properties of RB51; a stable rough strain of Brucella abortus. Vet Microbiol 28:171-88.

Brucellosis in humans and animals (WHO/CDS/EPR/2006).

Brucellosis in sheep and goats (Brucelb melitensis). Scientific Committee on Animal Health and Animal Welfare. SANCO, European Commission. 2001.

Bovine Brucellosis and Caprine Brucellosis. OIE Terrestrial Manual. 2010

источник

Бруцеллез относится к числу инфекционных заболеваний, свойственных животным, но способных инфицировать человеческий организм. Это патологическое состояние поражает жизненно важные органные системы, в частности, структурные элементы половой, сердечно-сосудистой, нервной сферы и опорно-двигательного аппарата.

Возбудителем бруцеллеза является одноименная бактерия, которая попадает в человеческий организм алиментарным и контактным путем от большого рогатого скота, свиней, зайцев, оленей и тому подобное. Сегодня защитить себя от недуга можно с помощью плановой вакцинации.

Современная вакцина против бруцеллеза – надежный иммунный препарат, способный защитить человека от патогенных микроорганизмов и предупредить развитие у него симптомов заболевания, а также его осложнений.

Живая сухая вакцина против бруцеллеза является лиофилизатом для приготовления суспензии. Полученный в процессе приготовления раствор показан для подкожного введения или скарификационного нанесения на эпидермальные покровы.

Сухая вакцина имеет вид пористой массы белого с желтоватым оттенком цвета. Она представляет собой лиофилизированную смесь живых микроорганизмов, находящихся в ослабленном состоянии. Для производства препарата используют вакцинный штамм Brucella abortus 19 BA.

Каждая доза вакцины для подкожного применения содержит в 0,5 мл раствора от 3,4 до 4,6 х 108 живых возбудителей. Суспензия для скарификационного нанесения является более концентрированной. В каждой десятой части ее миллилитра содержится от 4,0 х 109 до 1,6 х 1010 патогенных микроорганизмов.

Как правило, в одной ампуле препарата заключено от четырех до десяти доз вакцины для взрослых пациентов. После введения вакцины в организме до месяца развивается надежная иммунная защита, достаточная для предупреждения патологического процесса.

Такой противобруцеллезный иммунитет способный сохраняться в крови человека до 12 месяцев, после чего пациенту рекомендована ревакцинация. Максимальное количество антител к бруцеллезу определяется в сыворотке до 5-6 месяцев после процедуры.

Вакцинацию против бруцеллеза рекомендуется проводить тем лицам, которые довольно часто контактируют с животными, то есть с этим связан род их трудовой деятельности.

В первую очередь иммунизироваться от бактерий бруцеллеза следует таким категориям населения:

• работники ферм и сельскохозяйственных предприятий по выращиванию крупного и мелкого рогатого скота, свиней, тому подобное;
• люди, работающие на предприятиях по заготовке, обработке и хранению продуктов животноводства, полученных из хозяйств, где регистрировались эпизодические вспышки бруцеллеза у животных;
• убойщики скота, больного бруцеллезной инфекцией;
• ветеринарные врачи;
• охотники и лесники;
• дети, проживающие на территориях сельских угодий и ферм, где всегда существует риск контакта с зараженным животным;
• зоотехники.

Вакцинации подлежат также работники лабораторий, которые занимаются производством вакцины против бруцеллеза, так как они всегда находятся в повышенной зоне риска инфицирования недугом.

Если термические показатели при обследовании являются повышенными, тогда прививку следует отложить до их нормализации.

Перед вакцинацией пациентам рекомендуется сдать общий анализ крови на определение признаков скрытого воспаления в организме.

Это поможет убедиться в удовлетворительности состояния прививаемого человека и предупредить появление постпрививочных осложнений. Нередко врачи принимают решение о необходимости проведения серологических реакций, позволяющих определить наличие специфического иммунитета против бруцеллеза. Прививку ставят только пациентам с отрицательной реакцией.

У людей и животных в ходе иммунизации применяется одна и та же сухая вакцина против бруцеллеза. Единственное отличие состоит в дозировках применяемого препарата у разных групп пациентов.

Существует два основных способа введения вакцинного препарата в организм:

• подкожная инъекция;
• накожное скарификационное введение.

При подкожном способе введения вакцины препарат нужно сначала развести 0,9% раствором хлорида натрия, который вносится в ампулу с помощью стерильного шприца. После этому ампулу следует хорошо встряхнуть до получения однородной суспензии. Полученную жидкость переносят в стерильный флакон для инъектора с необходимым объемом растворителя. Прививку делают с помощью инъектора, соблюдая все пункты инструкции по применению препарата.

Идеальное место для введения раствора – латеральная поверхность верхней трети плеча. Перед процедурой место укола обрабатывают дезинфицирующим средством. Для надкожного введения суспензию готовят тем же способом, что и при подкожном варианте вакцинации. Прививку делают на наружной поверхности средней трети плеча.

Место нанесения вакцины обрабатывают раствором спирта. После испарения спиртового средства на кожные покровы плеча наносят две капли препарата на расстоянии 3-4 см друг от друга. Кожу после этого следует натянуть и протянуть стерильный скарификатор через каждую каплю шесть раз, сделав насечки в виде сетки, то есть, три продольные и три поперечные линии.

Сделанные насечки не должны кровоточить. Кровь должна выступать только капельками. Плоской стороной скарификатора необходимо втирать раствор в насечки в течение 30 секунд. Затем нужно дать жидкости подсохнуть.

Вакцину против бруцеллеза нельзя использовать в ряде случаев, среди которых:

• индивидуальная непереносимость у человека компонентов вакцины;
• наличие у пациента симптомов острого воспалительного заболевания или обострения хронической формы недуга;
• повышение температуры тела и признаки катаральных явлений у человека;
• иммунодефицитные состояния;
• опухолевые патологические образования и болезни крови, которые нуждаются в лучевой или химиотерапии;
• заболевания кожных покровов с поражением эпидермиса в предполагаемом месте воздействия;
• наличие у пациента данных в анамнезе об аллергических реакциях на предыдущее введение вакцинного препарата;
• период беременности и грудного вскармливания;
• склонность к бронхоспазму и тяжелые варианты течения бронхиальной астмы.

Согласно статистическим исследованиям, прививка от бруцеллеза способна провоцировать развитие таких побочных реакций:

• отечность и воспаление в месте прививки, которое иногда сопровождается образованием твердых узелков красного цвета;
• инфильтрация тканей вокруг места введения вакцинного раствора с появлением неприятных ощущений и дискомфорта;
• развитие головных болей, порой незначительное головокружение;
• общая слабость несколько дней после прививки;
• повышение температуры тела после процедуры;
• аллергические реакции в виде кожной сыпи и покраснения с зудом;
• отечность Квинке и анафилактическая реакция.

О методах борьбы с бруцеллезом в видео:

Вакцина против бруцеллеза относится к числу иммунных препаратов, введение которых редко сопровождается патологическими реакциями и осложнениями. Сегодня ее предлагают делать ежегодно пациентам из групп повышенного риска по заболеваемости инфекцией.

Несмотря на положительные качества вакцинного средства, ученые продолжают работать в направлении создания инактивированного препарата от бруцеллезного возбудителя, который сначала предлагают использовать для ревакцинации.

источник

Автор: Шубина Е. А., технолог, кандидат биологических наук, ФГУП «Щелковский биокомбинат»

Опубликовано: 14 февраля 2011

Бруцеллез (Brucellosis) — инфекционная, хронически протекающая болезнь домашних, некоторые виды диких животных и человека, характеризующаяся поражением многих систем жизнеобеспечения, нарушением функций сосудистой, пищеварительной, мочеполовой систем и системы воспроизводства.

Сообщение об этом заболевании, по данным Хаджеса (1897), встречается уже у древнегреческого врача Гиппократа. Первое научное описание бруцеллеза было сделано в 1861 году английским военным врачом Мэрстоном. Широкое распространение среди людей отмечалось в 18 и 19 веках в странах, расположенных в бассейне Средиземного моря.

Изучая причины мальтийской лихорадки, английский врач Д. Брюс в 1886 – 1887 гг. установил, что виновником ее является специфический микрококк, названный им Micrococcus melitensis. Дальнейшие исследования показали, что источником возбудителя мальтийской лихорадки являются козы, пораженные инфекцией, а причиной заражения людей — потребление молока от таких коз. Несколько позже Micrococcus melitensis был выделен у овец.

В1897 г. датские ученые Банг и Стриболд установили, что массовые аборты у коров вызывает микроорганизм, названные B. abortus bovis. В 1914 г. Траум обнаружил очень сходный микроорганизм, названный Br. abortus suis, при массовых абортах у свиней.

Для диагностики бруцеллеза в 1897 г. Райтом была предложена серологическая реакция агглютинации, а в 1922 г. Берне разработал внутрикожную аллергическую пробу, облегчающую распознавание болезни.

Долгое время мальтийская лихорадка у людей и массовые аборты у домашних животных считались самостоятельными заболеваниями. В 1918 – 1920 гг. Ивенс, Мейер и Фезье, изучая биологические свойства возбудителя мальтийской лихорадки и массовых абортов у крупного рогатого скота, обнаружили их чрезвычайную близость. Эти исследования явились основанием объединить указанных возбудителей, в том числе и возбудителя массовых абортов у свиней, в одну родовую группу под наименованием Brucella (в честь Брюса), а вызываемые ими заболевания именовать бруцеллезом.

В России начало изучения бруцеллеза было положено работами Е. И. Марциновского (1911), но детальному изучению заболевание подверглось в различных местностях СССР лишь с 1935 г. Большой вклад в изучение бруцеллеза сельскохозяйственных животных внесли отечественные ученые: С. Н. Вышелесский, П. Ф. Здродовский, П. А. Вершилова, М. К. Юсковец, Е. С. Орлов, Р. А. Цион, А. П. Бессонов и др. Были всесторонне изучены биологические свойства возбудителя, усовершенствованы методы диагностики, показаны значение в борьбе с бруцеллезом вакцинальной профилактики и пути ее совершенствования.

Клинические признаки бруцеллеза у крупного рогатого скота

Длительность инкубационного периода 2 – 3 недели. Первым показателем развившегося инфекционного процесса служит появление в крови инфицированных животных агглютининов в постепенно нарастающих титрах.

У коров основным клиническим признаком бруцеллеза является аборт и реже рождение нежизнеспособного приплода. Коровы, заразившиеся до покрытия, в большинстве случаев приносят нормальный приплод. Аборт чаще всего происходит на 5 – 8-м месяце. За 1 – 2 дня до наступления аборта у коров отмечается припухание наружных половых органов, выделение из влагалища бесцветной или буроватой жидкости и набухание вымени. После аборта происходит задержка последа и развивается эндометрит, сопровождающийся обильными слизисто-гнойными или гнойно-фибринозными выделениями. При тяжело протекающем эндометрите повышается температура тела, снижаются удои, отмечается потеря веса, убыстряется СОЭ; умеренный лейкоцитоз. Эндометритам нередко сопутствуют серозные или серозно-катаральные маститы. В процессе могут вовлекаться яичники и фаллопиевы трубы, что приводит к нарушению полового цикла и временному или стойкому бесплодию.

У отдельных животных в связи с абортом или независимо от него можно наблюдать развитие серозных бурситов или серофибринозных артритов. Последние в большинстве случаев возникают в суставах передних конечностей — запястном, путовом, коленном, локтевом. У быков бруцеллез, хотя и редко, сопровождается развитием орхитов и эпидидимитов.

Лабораторная диагностика бруцеллеза основана на результатах бактериологического и серологического исследований. Бактериологическое исследование в основном применяют при первичной постановке диагноза на бруцеллез в ранее благополучных хозяйствах.

В лабораторию направляются пробы крови (сыворотки) для серологического исследования, абортивный плод с плодными оболочками, околоплодную жидкость, истечения из родовых путей или желудок плода, кусочки печени, селезенки, пробы молока (последние порции). При убое животных берут паренхиматозные органы, лимфатические узлы, пораженные суставы, у самцов — семенники. Объектом исследования могут быть молочные продукты (брынза, сыр, масло), объекты внешней среды.

При массовых диагностических исследованиях ставят пробирочную РА, роз бенгал пробу (РА на стекле), РСК, РДСК, кольцевую реакцию с молоком (КР). Диагностикумы для этих исследований, а также бруцеллин ВИЭВ для аллергической диагностики готовятся на Щелковском биокомбинате.

Для специфической профилактики бруцеллеза ФГУП «Щелковский биокомбинат» выпускает живые сухие вакцины из штамма B. abortus 19, 82 и 75/79-АВ; инактивированную адъювант — вакцину из штамма B. abortus КВ 17/100.

По данным К. В. Шумилова до 1952 года борьба с бруцеллезом крупного рогатого скота в нашей стране сводилась к проведению диагностических исследований и удалению из стад больных животных, без применения противобруцеллезных вакцин. В связи с осложнением эпизоотической ситуации в 1953 году в систему противобруцеллезных мероприятий была включена иммунизация животных вакциной из штамма B. abortus 19.

Вакцину из штамма B. abortus 19 применяли до 1970 года. За 20 лет применения вакцины многие хозяйства, даже области, были оздоровлены от болезни. Однако в регионах с широким распространением бруцеллеза эффективность оздоровительных мероприятий оказалась низкой. В первую очередь, это было обусловлено высокой агглютиногенностью вакцины. Агглютинины и комплементсвязывающие антитела, вырабатывающиеся в ответ на введение вакцины, сохраняются в организме животных до 5 – 8 лет и затрудняют дифференциацию иммунизированных животных от больных бруцеллезом.

С 1971 по 1974 год вакцину из штамма B. abortus 19 использовали только на телках 5 – 8 месячного возраста. С 1974 года и по настоящее время в России в комплексе противобруцеллезных мероприятий применяются вакцины из штаммов B. abortus 82 и 19. Живая сухая вакцина против бруцеллеза из слабоагглютиногенного штамма № 82 отличается от вакцины из штамма 19 слабым серологическим ответом с быстрым снижением уровня гуморальных антител, что позволяет при помощи серологических реакций дифференцировать вакцинированных животных.

За 30 лет работы с применением вакцины из штамма B. abortus 82 и смены пяти поколений коров к 2004 году (К. В. Шумилов) количество неблагополучных по бруцеллезу пунктов и заболевших животных значительно сократилось.

Сухая живая вакцина против бруцеллеза крупного рогатого скота из штамма B. abortus 75/79-АВ разработана сотрудниками ВГНКИ и Алтайской НИВС с использованием культуры штамма 75/79, выделенного от коровы, ранее иммунизированной вакциной из штамма B. abortus 82. После многократных пассажей выделенного штамма через организм морских свинок и телок и целенаправленной селекции на питательных средах, был получен новый вакцинный штамм 75/79-АВ. Вакцины не обладает абортогенными свойствами, что дает возможность проводить иммунизацию маточного поголовья независимо от сроков стельности. Вакцина является слабоагглютиногенной; агглютинины и комплементсвязывающие антитела регистрируются у привитых животных в течение трех месяцев после иммунизации, что делает возможным их исследование по истечении указанного срока. У животных, иммунизированных вакциной, выраженный иммунитет сохраняется в течение года, что позволяет за указанный срок оздоравливать неблагополучные хозяйства от бруцеллеза.

Значительный интерес для практики представляет адъювант-вакцина против бруцеллеза крупного рогатого скота, сконструированная во ВГНКИ. Вакцина представляет собой эмульсию типа «вода в масле», состоящую из инактивированной культуры штамма B. abortus КВ 17/100 и масляного адъюванта.

Штамм B. abortus КВ 17/100, находящийся в R-форме, получен путем целенаправленной селекции по культуральным, морфологическим, биохимическим и антигенным свойствам из вакцинного штамма B. abortus 104М, находящегося в S-форме. Адъювант-вакцина не индуцирует синтез S-бруцеллезных антител в диагностических титрах у животных, не сенсибилизированных бруцеллами. Адъювант-вакцина индуцирует синтез S-бруцеллезных антител у крупного рогатого скота с латентной формой бруцеллеза, что позволяет за счет быстрого удаления из стад таких животных, ускорить оздоровление хозяйств, неблагополучных по бруцеллезу.

Адъювант-вакцина не абортогенна и может быть использована для иммунизации маточного поголовья крупного рогатого скота независимо от сроков стельности.

источник

Бруцеллёз не только крупного, но и мелкого рогато­го скота на протяжении многих лет остается одним из самых распространённых заболеваний в Казахстане. Как предотвратить болезнь с помощью вакцинации – читайте в интервью с доктором ветеринарных наук, про­фессором, академиком НАН РК Николаем Петровичем Ивановым (на снимке).

— Почему одной из самых распространённых болез­ней среди КРС в Казахстане на протяжении многих лет остается бруцеллёз?

– Согласно данным ветери­нарной статистики, около 20% имеющегося поголовья сель­скохозяйственных животных является неблагополучным. Проблема повсеместной лик­видации бруцеллеза среди животных представляет зна­чительные трудности из-за: его широкого распростране­ния, способности возбудите­ля к обитанию в организме са­мых разнообразных видов жи­вых существ, а также, в ряде случаев, латентного (не прояв­ляя себя) течения инфекции и связанные с ним сложности диагностики и специфической профилактики заболевания.

— Первое, что нужно пред­принять с целью недопу­щения заражения скота бруцеллёзом?

-Выполнять полный ком­плекс организационно-хозяй­ственных, ветеринарно-сани­тарных и специальных ветери­нарных мероприятий. Все эти меры должны быть отражены в плане противобруцеллезных мероприятий, который дол­жен быть комплексным (воз­действовать на все три звена эпизоотической цепи), своев­ременным и реально выпол­нимым (согласно имеющим­ся финансовым и материаль­но-техническим средствам). В нем должны быть указаны мероприятия, сроки их испол­нения и ответственные лица.

— А, что нужно предпри­нять уже в случае появле­ния болезни среди крупного рогатого скота?

-При появлении инфекции нужно:

1. заменить все неблагопо­лучное поголовье здоровыми, то есть не инфицированными животными;
2. проводить регулярные (че­рез каждые 15-20 дней) диа­гностические исследования с последующим выделением и убоем выявленных больных животных;
3. применять вакцинные пре­параты с последующими, по­ствакцинальными исследова­ниями, согласно инструкции по применению вакцины.

— Какие, в данном случае, существуют виды и назна­чения вакцин?

– Существующие противо­бруцеллёзные вакцины услов­но подразделяются на следу­ющие группы, которые разли­чаются по антигенности, реак­тогенности, иммуногенности и другим признакам.

1.Агглютиногенные. Эти препараты являются иммуно­генами. Но их применение не рекомендуется для взросло­го поголовья, так как они ин­дуцируют антитела, которые в последующем не позволя­ют проводить диагностические исследования.

2.Слабоагглютиногенные. Они выгодно отличаются от первой группы, так как созда­ют возможность проводить ди­агностические исследования в относительно короткие сро­ки поствакцинального пери­ода. Одной из наиболее рас­пространённых в нашей стра­не вакцин для иммунизации против бруцеллёза крупного рогатого скота является вак­цина из штамма В.abortus 82. Отрицательная сторона этого препарата – чрезмерная реак­тогенность. В организме бере­менных животных эта вакцина вызывает аборты, что сдержи­вает её применение на стель­ном поголовье крупного рога­того скота.

3.Неагглютиногенные. Наз- ванные вакцины обладают вы­раженными провоцирующими свойствами. В организме ла­тентно больных животных они обостряют течение инфекции, то есть позволяют выявить максимальное количество ин­фицированных особей.

4.Инактивированные вак­цины. К н им о тносятся п ре­параты из агглютиногенных и неагглютиногенных штам­мов. Эти вакцины, в том чис­ле Казахского НИВИ находят­ся на стадии производствен­ных испытаний и пока не име­ют широкого практического применения.

— В каких областях Казахстана наиболее рас­пространена болезнь?

– Наибольшее число небла­гополучных пунктов и количе­ство больных животных среди КРС отмечается в северных и центральных регионах страны, а мелкий рогатый скот чаще по­ражён на юге и юго-востоке ре­спублики. В некоторых обла­стях возрастает число случаев заболевания людей.

— Что включают в себя про­тивобруцеллёзные мероприятия?

– Специальные противо­бруцеллёзные мероприятия включают своевременную и качественную диагностику, в особых случаях применение средств специфической про­филактики и антибактериаль­ных препаратов. Для выявле­ния источника инфекции, с це­лью последующей его ликви­дации, используют различные диагностические приёмы. К примеру, серологические ме­тоды и аллергическая проба базируются на иммунологиче­ских реакциях. Следует особо отметить, что иммунологиче­ская реактивность животных тесно связана с видовыми, ин­дивидуальными и возрастными особенностями организма.

Помимо этого,содержать не­вакцинированное поголовье к настоящему времени возмож­но только при отсутствии угро­зы заражения животных. В дру­гих хозяйствующих субъектах должна быть предусмотрена иммунизация молодняка (по­сле предварительного сероал­лергического исследования) и возможна повторная вакцина­ция половозрелых животных за 2-3 месяца до осеменения.

А главное, во всех случа­ях нужно использовать вакци­ны и методы их применения, разрешённые для иммуниза­ции животных на территории Республики Казахстан.

— Кто наиболее чувстви­те лен к бруцеллёзной инфекции?

– Наиболее чувствительными и восприимчивыми к бруцеллез­ной инфекции являются парно­палые, половозрелые, но от­носительно молодые особи на пике их гормональной активно­сти (половозрелые тёлки, ярки, козочки, нетели или первотель­ные и беременные животные). Ведь с возрастом реактивность организма животных снижается. Нередко, когда среди «старого» поголовья много больных, име­ющих отрицательные показа­ния диагностических реакций. Особого внимания в диагности­ческой работе, благодаря высо­кой разрешающей способности, заслуживают тест ELISA (ИФА) и полимеразо-цепная реакция (ПЦР).

— Есть ли какие-то но­вые современные мето­ды вакцинации КРС против бруцеллёза?

Уместно отметить, что в со­временных условиях особо­го внимания заслуживает так называемый «конъюнктиваль­ный» метод иммунизации. Известно, что через слизистую оболочку конъюнктивы глаза в организм могут поступать раз­личные вещества, в том чис­ле и антигены. При конъюн­ктивальном методе иммуни­зации, как показали результа­ты исследований, благодаря проникновению антигена по слёзно-носовому каналу в но­совую полость, площадь его всасывания резко увеличива­ется, что обеспечивает индук­цию иммунитета, не уступа­ющего таковому при подкож­ном методе вакцинации. При этом резко снижается период циркуляции в крови антител, улавливаемых стандартны­ми антигенами, что позволяет своевременно проводить диа­гностические исследования и, безусловно, выгодно отличает этот метод от других.

источник

Вакцина предназначена для профилактики бруцеллеза крупного рогатого скота. Вакцина содержит в качестве антигена инактивированную с гидратом окиси алюминия бактериальную массу штамма B.abortus ВГНКИ N КВ 17/100. Вакцина содержит также неполный адьювант Фрейнда и физиологический раствор. Использование новой вакцины в ветеринарной практике позволяет в 1,5 — 2 раза повысить эффективность противобруцеллезных мероприятий за счет повышения иммуногености и снижения агглютиногенности вакцины. 2 табл.

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к вакцине для профилактики бруцеллеза крупного рогатого скота.

Бруцеллез крупного рогатого скота — хроническое зооантропонозное заболевание, распространенное во многих странах мира, наносящее большой экономический ущерб скотоводству и представляющее серьезную опасность здоровью людей.

Основным средством борьбы с бруцеллезом крупного рогатого скота, особенно в зонах его широкого распространения, является вакцинация всего поголовья и своевременное удаление из стада больных животных.

Известна вакцина против бруцеллеза крупного рогатого скота, содержащая антиген из штамма Brucella abortus 19 и сахарозо-желатиновый стабилизатор [1].

Недостатками данной вакцины являются высокая агглютиногенность, так как в крови животных, иммунизированных данной вакциной в течение нескольких месяцев, а иногда и нескольких лет обнаруживают антитела в принятых для диагностики бруцеллеза серологических реакциях, что препятствует выявлению больных животных в вакцинированном стаде. Вакцину нельзя применять для иммунизации стельных коров, так как она вызывает аборты у отдельных животных.

Известна также вакцина против бруцеллеза сельскохозяйственных животных, преимущественно крупного рогатого скота, содержащая инактивированный антиген из штамма Brucella melitensis N «Невский-13», неполный адъювант Фрейнда и физиологический раствор [2].

Недостатком данной вакцины является то, что в крови иммунизированных животных до 90-120 дней сохраняются агглютинирующие и комплеменсвязывающие антитела, улавливаемые в принятых для диагностики бруцеллеза серологических реакциях, которые препятствуют своевременному выявлению и удалению из стада больных бруцеллезом коров.

Целью изобретения является разработка высокоиммуногенной вакцины против бруцеллеза крупного рогатого скота с низкой антигенной активностью.

Цель достигается тем, что вакцина в качестве антигена содержит инактивированную с гидратом окиси алюминия бактериальную массу штамма B.abortus ВГНКИ N КВ 17/100 с концентрацией 300-400х10 9 бактерий в 1 см 3 , при следующем соотношении компонентов вакцины, об.%: инактивированная с гидратом окиси алюминия бактериальная масса штамма B.abortus N КВ 17/100 с концентрацией 300х10 9 -400х10 9 микробных клеток в 1 см 3 40-45,0; неполный адъювант Фрейда 50,0-55,0; физиологический раствор остальное.

Для изготовления вакцины используют штамм Brucella abortus ВГНКИ N КВ 17/100.

Штамм B. abortus N КВ 17/100 получен путем целенаправленной селекции по антигенности и иммуногенной активности.

Штамм B. abortus депонирован в коллекции микроорганизмов Всероссийского государственного научно-исследовательского института контроля, стандартизации и сертификации ветеринарных препаратов, регистрационный номер КВ 17/100 ДЕП.

Штамм B. abortus N КВ 17/100 характеризуется следующими признаками и свойствами.

Бруцеллы штамма — короткие грамотрицательные палочки с закругленными концами, расположенные изолированно, попарно и реже в виде коротких цепочек. Без капсулы, спор не образуют. Размер 1,3-1,5 х 0,6-0,8 мкм.

Культура штамма хорошо растет в аэробных условиях на плотных и жидких питательных средах, предназначенных для культивирования бруцелл. На плотных питательных средах (4-5 сут инкубирования при 37-38 o С) растет в виде круглых, плоских, с нечетко контурированным краем, матовых колоний с диаметром 2,5-3,0 мм. При окрашивании раствором кристаллического фиолетового 1/2000 (по Уайт-Вилсону) 100% колоний окрашиваются как R-форма: фиолетовый центр и светлофиолетовый широкий ободок.

На жидких питательных средах на 2-4 сут инкубирования: легкая опалесценция и узкое пристеночное голубоватое кольцо на границе среды.

Культура штамма растет на средах содержащих фуксин, тионин в концентрации 1: 50000, бис-трифенилангидрокарбинола оксалат в концентрации 1:100000 (маркер), пенициллин 5ЕД/см 3 и не растет на среде, содержащей стрептомицина сульфат 5 мкг/см 3 . Продуцирует Н₂S (6-8 мм). Лизируется фагом Тб.

Культура штамма агглютинируется R-антибруцеллезной сывороткой и не агглютинируется S-антибруцеллезной сывороткой. Штамм не обладает типоспецифической агглютинабельностью и не агглютинируется А и М монорецепторными сыворотками.

Штамм безвреден для человека и сельскохозяйственных животных.

Остаточная вирулентность: ИД для мышей линии С₅₇ — Блек/6 — 5500 микробных клеток, что соответствует уровню аттенуированных вакцинных штаммов.

Культура штамма защищает от заражения не менее 50% иммунизированных животных.

Пример 1. Штамм Brucella abortus ВГНКИ N КВ 17/100 культивируют на плотной питательной среде или в ферментере на жидкой питательной среде при 37-38 o С в течение 72 ч.

Выращенную культуру с плотной питательной среды смывают физиологическим раствором, добавляют 0,3-0,5% формалина и 0,3-0,5% гидрата окиси алюминия, формалин и гидрат окиси алюминия вносят в ферментер сразу после окончания культивирования.

После инактивации бактериальную массу отстаивают, декантируют надосадочную жидкость и устанавливают концентрацию бактериальной массы, равную 300-400х10 9 микробных клеток в 1 см 3 . Инактивированную с гидратом окиси алюминия бактериальную массу штамма B.abortus ВГНКИ N КВ 17/100 в количестве 40-45% от объема смешивают с неполным адъювантом Фрейнда в количестве 45-55% от объема с доведением до 100% физиологическим раствором.

Вакцину расфасовывают во флаконы при включенной мешалке. Флаконы закрывают резиновыми пробками, обкатывают металлическими колпачками и этикетируют.

Расфасованную вакцину проверяют на стерильность, безвредность и иммуногенность.

Готовая вакцина представляет собой однородную водно-масляную эмульсию белого цвета с коричневым или серым оттенком. При длительном хранении возможно незначительное отслоение адъюванта над эмульсией, что не влияет на качество вакцины.

Получают 3 серии вакцины, приведенные в табл. 1.

Пример 2. Определяют антигенную активность адъювант-вакцины.

Морских свинок (10-14 голов в группе) иммунизируют адъювант-вакциной из штамма B.abortus ВГНКИ N КВ 17/100 (серии N 1, 2, 3), полученной по примеру 1; адъювант-вакциной из штамма B.melitensis N Н-13, экспериментальной адъювант-вакциной из штамма B.abortus N 16/4 (штамм в R-форме) и живой противобруцеллезной вакциной из штамма B.abortus N 19.

Адъювант-вакцины вводят в дозе 0,2 см 3 , живую — 1 млрд. микробных клеток в объеме 1 см 3 под кожу в область паха. Через 15, 30 и 60 дней после иммунизации у животных берут кровь и исследуют в РА с единым бруцеллезным антигеном (S-антиген). Результаты исследований приведены в табл. 2.

Из табл. 2 следует, что все серии предложенной адъювантвакцины из штамма B. abortus ВГНКИ N КВ 17/100 не индуцируют образования агглютининов в сыворотке крови животных и в отличие от адъювант-вакцин из штаммов B.melitensis N «Невский-13», В. abortus N 16/4 и живой вакцины из штамма В.abortus N 19 являются неагглютиногенными, что дает возможность быстро и своевременно выявлять больных вакцинированных животных в случае их заражения. В то же время среднее количество агглютининов в сыворотке крови морских свинок через 15 дней после иммунизации адъювант-вакцинами из штаммов B.melitensis N «Невский-13» — 83,0, B. abortus N 16/4 — 38,3 МЕ/см 3 , а живой вакциной из штамма B. abortus N 19 — 160,0 ME/cм 3 , и в случае заражения больные бруцеллезом животные не могут быть дифференцированы по крайней мере в течение 60 дней от иммунных — незаразившихся, создавая угрозу перезаражения.

Таким образом установлено, что адъювант-вакцина из штамма В.abortus ВГНКИ N КВ 17/100 не индуцирует синтез S-антител в количестве, улавливаемом реакцией агглютинации с единым бруцеллезным антигеном.

Пример 3. Иммуногенную активность новой адъювант-вакцины, полученной по примеру 1 из штамма B.abortus ВГНКИ N 17/100, сравнивают с вакцинами из штаммов B.melitensis N «Невский-13», B.abortus N 16/4 и живой вакциной из штамма B. abortus N 19. Опыт проводят на морских свинках, привитых аналогично примеру 2.

Через 3 мес после прививки морских свинок заражают стандартной культурой контрольного вирулентного штамма В.abortus N 54М/ВГНКИ в дозе 80 микробных клеток (15 ИД₅₀). Спустя 32-35 дней животных убивают и проводят бактериологическое исследование селезенки, печени, костного мозга и лимфатических узлов (всего 10 объектов). Определяют наличие бруцелл вирулентного штамма в лимфатических узлах и внутренних органах животных. Рассчитывают процент защиты (количество незаразившихся животных в процентах от общего их количества в группе) и индекс инфицированности (процентное отношение количества объектов, из которых выделена культура вирулентного штамма, к общему количеству исследованных объектов по группе животных). Результаты исследований приведены в табл. 3.

Таким образом установлено, что адъювант-вакцина из штамма B.abortus ВГНКИ N RD 17/100 всех серий превосходит по иммуногенной активности адъювант-вакцины из штаммов B. melitensis N «Невский-13», B.abortus N 16/4 и не уступает живой вакцине из штамма B.abortus N 19.

Пример 4. Определяют реактогенность адъювант-вакцины из штамма B.abortus ВГНКИ N КВ 17/100 (серия N 1) в опыте на телках трех-четырех месячного возраста в сравнении с адъювант-вакциной из штамма B.meliitensis N «Невский-13». Каждую вакцину вводят 10 телкам под кожу в область подгрудка в дозе 3 см 3 . У вакцинированных животных ежедневно в течение 10 дней измеряют температуру тела и площадь припухлости в месте введения вакцины.

У животных, иммунизированных адъювант-вакциной из штамма B.abortus ВГНКИ N КВ 17/100, температура тела повышается на 0,8-1,0 o С и нормализуется к 5-6 дню после вакцинации, отек в месте введения вакцины не превышает 80 см 2 и начинает уменьшаться с 8-10 дня. В группе животных, иммунизированных адъювант-вакциной из штамма B.melitensis N «Невский-13», температура тела повышалась в среднем на 1,2-1,5 o С и приходила в норму к 7-9 дню. Отек тканей в месте введения вакцины в среднем 100-120 см 3 . Заметное уменьшение величины отека отмечают через 15-20 дней после иммунизации.

Таким образом, испытанную вакцину из штамма B.abortus ВГНКИ N КВ 17/100 можно отнести к слабореактогенным масляным адъювантвакцинам.

Пример 5. Определяют антигенные свойства адъювант-вакцины из штамма B. abortus ВГНКИ N КВ 17/100 (серия 2) в опыте на телках трех-четырех месячного возраста. Вакцину вводят под кожу в область подгрудка в дозе 3 см 3 42 телкам. Через 15 и 30 дней после иммунизации у животных берут кровь и исследуют в РА и РСК с единым бруцеллезным антигеном (S-антиген).

Все животные иммунизированные адъювант-вакциной не реагируют на бруцеллез. Пример 6. Определяют антигенные свойства адъювант-вакцины из штамма B. abortus ВГНКИ N КВ 17/100 (серия 3) в опыте на телках 14-17-месячного возраста, ранее иммунизированных живой слабоагглютиногенной вакциной из штамма B.abortus N 82. Адъювант-вакцину в дозе 3 см 3 вводят под кожу в область подгрудка 70 телкам. Через 15 и 30 дней после иммунизации у животных берут кровь и исследуют на бруцеллез в РА и РСК с единым бруцеллезным антигеном.

Все животные ревакцинированные адъювант-вакциной не реагируют на бруцеллез.

Пример 7. Определяют эффективность адъювант-вакцины из штамма B.abortus ВГНКИ N КВ 17/100 для профилактики бруцеллеза крупного рогатого скота в условиях контролируемого эпизоотологического опыта.

Телок трех-четырех месячного возраста (пример 5) и 14-17-месячного возраста (пример 6), иммунизированных адъювант-вакциной из штамма B.abortus ВГНКИ N КВ 17/100, содержат в условиях хозяйства неблагополучного по бруцеллезу рогатого скота, обеспечивающих контакт с 21 коровой больной бруцеллезом.

Иммунизированные адъювант-вакциной животные не заболевают бруцеллезом в течение шести месяцев, что указывает на высокую эффективность препарата.

Пример 8. Определяют возможность использования адъювант-вакцины из штамма B.abortus ВГНКИ N КВ 17/100 для провокации синтеза специфических антител у больных бруцеллезом коров, не реагирующих в серологических реакциях, принятых для диагностики бруцеллеза. Коров, ранее реагировавших на бруцеллез (в РА и РСК) и утративших титры в серологических реакциях, принятых для диагностики бруцеллеза, иммунизируют адъювант-вакциной из штамма B.abortus КВ 17/100 в дозе 3 см 3 . Вакцину вводят под кожу в область подгрудка. Через 15 и 3 дней после иммунизации у животных берут кровь и исследую сыворотку в РА и РСК.

После иммунизации животные с хронической формой бруцеллеза положительно реагируют в серологических реакциях в диагностических титрах и идентифицируются как больные.

Таким образом, адъювант-вакцина из штамма B.abortus КВ 17/100 провоцирует появление положительных серологических реакций у нереагирующих на бруцеллез больных животных, что способствует скорейшему выздоровлению больных бруцеллезом животных.

Использование адъювант-вакцины на основе нового штамма B.abortus ВГНКИ N КВ 17/00 в ветеринарной практике позволит повысить эффективность мероприятий по борьбе с бруцеллезом крупного рогатого скота.

Вакцина против бруцеллеза крупного рогатого скота, содержащая инактивированный антиген бруцелл, неполный адъювант Фрейнда и физиологический раствор, отличающаяся тем, что она в качестве инактивированного антигена бруцелл содержит инактивированную с гидратом окиси алюминия бактериальную массу штамма Brucella abortus ВГНКИ N КВ 17/100 с концентрацией 300 — 400 10 9 микробных клеток в 1 см 3 при следующем соотношении компонентов, об.%: Инактивированная с гидратом окиси алюминия бактериальная масса штамма Вrucella abortus ВГНКИ N КВ 17/100 с концентрацией 300 — 400 10 9 микробных клеток в 1 см 3 — 40 — 50 Неполный адъювант Фрейнда — 45 — 55 Физиологический раствор — Остальноел

источник