Меню Рубрики

Вакцина против бруцеллеза шт 82 инструкция по применению в ветеринарии

Наставление по применению сухой живой вакцины из слабоагглютиногенного штамма №82 бруцелла абортус против бруцеллеза крупного рогатого скота

НАСТАВЛЕНИЕ ПО ПРИМЕНЕНИЮ СУХОЙ ЖИВОЙ ВАКЦИНЫ ИЗ СЛАБОАГГЛЮТИНОГЕННОГО ШТАММА № 82 БРУЦЕЛЛА АБОРТУС ПРОТИВ БРУЦЕЛЛЕЗА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА
(Утверждено Главным управлением ветеринарии Министерства сельского хозяйства СССР 18 февраля 1977 г.

взамен временного наставления от. 25 января 1974 г.

и указаний от 8 мая 1974 г.)
1. Общие положения
1.1. Сухая живая вакцина против бруцеллеза крупного рогатого скота готовится из слабоагглютиногенного штамма № 82 бруцелла абортус. Выпускается в ампулах или флаконах и представляет собой аморфную массу коричневато-желтого цвета,

При разведении вакцины физиологическим раствором поваренной соли, дистиллированной или кипяченой водой образуется равномерная взвесь бруцелл беловато-желтоватого цвета

1.2. На этикетках коробок с сухой вакциной должны быть указаны название вакцины, товарный знак и наименование биопредприятия, ее изготовившего, номер серии и номер госконтроля, дата изготовления, срок годности, количество доз в ампуле (флаконе) и в коробке, условия хранения вакцины.

На каждой ампуле (флаконе) с вакциной должна быть надпись с указанием названия вакцины, номера серии и срока годности препарата.

Ампулы или флаконы, не имеющие указанной надписи, а также разбитые, с трещинами, содержащие посторонние примеси или плесень, с истекшим сроком годности препарата, упакованные в коробки без этикеток бракуют и обеззараживают кипячением.

1.3. Сухая живая вакцина подлежит хранению в холодильных камерах или в темном сухом помещении при температуре не выше 8°С. При хранении вакцины при температуре выше оказанной активность препарата теряется в силу отмирания микробных клеток. В жаркое время года вакцину доставляют к месту применения в термочемоданах или термосах со льдом.

Срок годности сухой живой вакцины 12 месяцев со дня ее изготовления

1.4. Перед применением сухую живую вакцину разводят физиологическим раствором, дистиллированной или остуженной кипяченой водой из расчета, чтобы одна доза для прививки крупному рогатому скоту составляла 5 мл разведенной вакцины. Для этого шейку ампулы в верхней части протирают смоченной спиртом ватой и обламывают. В ампулу (флакон) стерильным шприцем и иглой вливают стерильный физиологический раствор (3–5 мл), дистиллированную или кипяченую воду. Ампулы (флаконы) осторожно встряхивают до превращения массы в равномерную взвесь

Разведенную в ампуле (флаконе) вакцину шприцем с длинной иглой отсасывают и переносят в стерильный флакон (емкостью 50–200 мл) с предварительно налитым в него физиологическим раствором (дистиллированной или кипяченой водой). С учетом жидкости, использованной для растворения вакцины в ампулах, во флаконе должно быть столько физиологического раствора (дистиллированной или кипяченой воды), сколько необходимо для приготовления количества доз вакцины в разведенном виде для прививки животным.

Разведенная вакцина пригодна для применения в течение четырех часов, позднее она теряет активность и подлежит уничтожению путем кипячения в течение 30 минут. Обезвреживанию кипячением подлежат также ампулы и флаконы из-под вакцины, шприцы и иглы.

1.5. Вакцину животным вводят подкожно в область средней трети шеи в дозе 5 мл.

Для прививки каждого животного используют отдельную иглу.

Шприцы и иглы стерилизуют кипячением. Во время прививок допускается стерилизация игл путем протирания их спиртом Место введения вакцины предварительно протирают 70%-ным спиртом или 0,5%-ным раствором кристаллической карболовой кислоты.

1.6. Прививки животных сухой живой вакциной разрешается проводить только ветеринарным врачам или ветеринарным фельдшерам со средним специальным образованием под контролем ветврача.

1.7. Привитых животных метят путем одного выщипа треугольной формы у основания верхней части левого уха, а ревакцинированных – двумя такими выщипами.

1.8. На проведение вакцинации животных в каждом хозяйстве составляют акт, в котором записывают данные об эпизоотическом состоянии хозяйства (фермы, стада) по бруцеллезу за последние два года, результаты исследования на бруцеллез животных перед вакцинацией, количество и возраст вакцинированных животных, номер серии вакцины и другие сведения о препарате. Один экземпляр акта направляют главному ветврачу района.

1.9. В случае, если после вакцинации имели место какие либо осложнения, об этом необходимо сообщить Всесоюзному государственному научно-контрольному институту ветпрепаратов (123022, Москва, Звенигородское шоссе, 5), Казанскому ветеринарному институту имени Н. Э. Баумана (Казань, 74, Ветгородок) и биопредприятию, изготовившему вакцину, и одновременно выслать в их адрес по 3–5 невскрытых ампул (флаконов) с вакциной из серии, вызвавшей осложнения.

1.10. В хозяйствах (на фермах) и населенных пунктах, где применяется живая вакцина из штамма № 82 против бруцеллеза крупного рогатого скота, строго проводят весь комплекс ветеринарных, санитарных, дезинфекционных, организационно-хозяйственных и других мероприятий, предусмотренных действующей инструкцией по борьбе с бруцеллезом животных и планом основных мероприятий по оздоровлению животноводства от этой инфекции, утвержденным Министерством сельского хозяйства СССР.
2. Иммунизация (вакцинация) животных
2.1. Сухую живую вакцину из штамма № 82 применяют для прививки крупному рогатому скоту в неблагополучных и угрожаемых по бруцеллезу хозяйствах (фермах, стадах), в том числе племенных. Допускается прививать вакцину животным, принадлежащим населению.

Вакцину вводят животным начиная с 4-месячного возраста.

У вакцинированных животных после прививки может повышаться температура тела, а на месте введения препарата появляется горячая болезненная припухлость, которая постепенно рассасывается без осложнений.

животные плохой упитанности или больные какой-либо болезнью, а также в период вспышки в хозяйстве острого инфекционного заболевания скота (ящур, сибирская язва и др.);

стельные животные, а также животные, находящиеся на откорме;

коровы, привитые в возрасте старше 2 лет противобруцеллезной вакциной из штамма № 19;

молодняк, полученный от реагирующих при исследовании на бруцеллез коров, ц молодняк, привитый вакциной из штамма № 19 против бруцеллеза;

быки-производители в благополучных по бруцеллезу племенных хозяйствах, а также бычки, отобранные к продаже другим хозяйствам.

2.2. В неблагополучных по бруцеллезу хозяйствах, в том числе в благополучных фермах таких хозяйств, телок прививают двукратно- первый раз в 4–5-месячном возрасте, второй раз – за 2–3 месяца до осеменения.

В благополучных (угрожаемых) по бруцеллезу хозяйствах (фермах) телок вакцинируют однократно начиная с 4-месячного возраста, но не позднее чем за 2 месяца до осеменения.

2.3. В неблагополучных по бруцеллезу хозяйствах телок в 4–5-месячном возрасте (при подсосном методе выращивания – после отъема от матерей) исследуют (РА и РСК, РДСК) на бруцеллез, реагирующих (РА в титре 50 ME и выше или положительная РСК, РДСК) удаляют, а остальных иммунизируют вакциной и содержат их на отдельной ферме (участке).

За 2–3 месяца до осеменения привитых вакциной телок исследуют (РА и РСК) на бруцеллез, реагирующих (РА в титре 100 ME и выше или положительная РСК) удаляют из стада, а остальных повторно прививают вакциной из штамма № 82,осеменяют и оставляют под наблюдением до отелов. Исследование на бруцеллез ревакцинированных перед осеменением животных проводят через 1–2 месяца после родов.

Если отелы прошли нормально и при исследовании на бруцеллез не было выявлено положительно реагирующих животных, в дальнейшем это поголовье исследуют на бруцеллез не реже 2 раз в год. При выявлении положительно реагирующих (РА в титре 100 ME и выше или положительно РСК) животных (их удаляют из стада) все поголовье исследуют па бруцеллез ежемесячно до получения двукратного подряд отрицательного результата по стаду.

При наличии в хозяйстве телок в возрасте старше 8 месяцев их исследуют на бруцеллез, реагирующих (РА в титре 50 ME и выше или положительная РСК, РДСК) удаляют, а остальных не позднее, чем за 2 месяца до осеменения вакцинируют, осеменяют и формируют в отдельное стадо. Исследование на бруцеллез привитых животных затем проводят после отелов и далее с ними поступают, как указано выше в настоящем пункте.

2.4. В благополучных (у рожаемых) по бруцеллезу хозяйствах вакцину из штамма № 82 допускается применять для иммунизации животных с профилактической целью только в случае наличия прямой угрозы заноса возбудителя болезни и заражения скота (отгонно-пастбищное содержание животных, расположение благополучных ферм вблизи от неблагополучных хозяйств и т. п.).

У телок с 4-месячного возраста берут кровь и исследуют на бруцеллез (РА и РСК, РДСК, согласно наставлениям по постановке и учету этих реакций), затем животных вакцинируют. После прививки телок исследуют на бруцеллез перед осеменением и затем через 1–2 месяца после отела. Если у вакцинированных животных были аборты, для выяснения их причины все плоды и кровь абортировавших животных направляют в ветеринарную лабораторию для исследования, а животных изолируют. При установлении поствакцинального характера абортов (выделение культуры вакцинного штамма) абортировавших животных оставляют в стаде.

2.5. В неблагополучных по бруцеллезу хозяйствах (фермах), оздоровление которых не достигается длительное время, коров, выращенных из телок, привитых вакциной из штамма № 82 однократно в возрасте 4–8 месяцев или перед осеменением, а также коров, привитых однократно этой вакциной после отела (по мере растела), допускается ревакцинировать вакциной из штамма № 82 однократно, но не ранее чем через 2 года после первой вакцинации. При этом перед прививкой животных исследуют на бруцеллез (РА и РСК), реагирующих (РА в титре 100 ME и выше или положительная РСК) удаляют из стада, остальных ревакцинируют. Коров после ревакцинации исследуют на бруцеллез (РА и РСК) через 6 месяцев и затем через 30 дней, при необходимости исследования продолжают ежемесячно до получения двукратного подряд отрицательного результата по стаду. В дальнейшем поголовье скота проверяют на бруцеллез не реже 1 раза в год. Животных, при исследовании которых получены положительные результаты (РА в титре 100 ME и выше или положительная РСК), во всех случаях удаляют из стада.

Ревакцинацию коров вакциной из штаума № 82 проводят только с разрешения ветеринарного отдела министерства сельского хозяйства автономной республики, областного (краевого) управления сельского хозяйства или главного управления (управления) ветеринарии министерства сельского хозяйства союзной республики, не имеющей областного деления.

Примечание. Если в неблагополучном хозяйстве имеются телки случного возраста или коровы, ранее (до выхода в свет настоящего наставления) привитые однократно против бруцеллеза в возрасте 5–8 месяцев вакциной из штамма № 19, телок допускается ревакцинировать вакциной из штамма № 82 за 2–3 месяца до осеменения, а коров – после их отела (через 15–25 дней).

После ревакцинации животных исследуют на бруцеллез и в дальнейшем с ними поступают в порядке, как указано выше в настоящем пункте и в пункте 2.3 (абзацы второй, третий).

2.6. В отдельных случаях в неблагополучных по бруцеллезу хозяйствах вакциной из штамма № 82 прививают быков-производителей (пробников). Перед прививкой животных исследуют на бруцеллез (РА и РСК, РДСК), реагирующих удаляют и остальных прививают вакциной. После вакцинации их исследуют (РА и РСК) через 4–5 месяцев и затем каждые 30 дней до получения двукратных подряд отрицательных результатов исследований по группе животных.

источник

УПРАВЛЕНИЕ ВЕТЕРИНАРИИ СТАВРОПОЛЬСКОГО КРАЯ

от 2 ноября 2015 года N 207

О ПРИМЕНЕНИИ ПРОТИВОБРУЦЕЛЛЕЗНЫХ ВАКЦИН НА ТЕРРИТОРИИ СТАВРОПОЛЬСКОГО КРАЯ

В целях выполнения требований раздела 3.2 «Профилактика и борьба с бруцеллезом сельскохозяйственных животных» Ветеринарных правил 13.3.1302-96 «Бруцеллез», инструкций по применению вакцин против бруцеллеза животных из штамма Brucella abortus 19 и инструкций по применению вакцин против бруцеллеза животных из штамма Brucella abortus 82 (далее соответственно — инструкции, вакцины) и актуализации списка хозяйствующих субъектов, расположенных на территории Ставропольского края, применяющих вакцины, приказываю:

1.1. Перечень хозяйствующих субъектов, расположенных на территории Ставропольского края, применяющих вакцины против бруцеллеза животных из штамма Brucella abortus 19 и вакцины против бруцеллеза животных из штамма Brucella abortus 82.

1.2. Схемы применения вакцин против бруцеллеза животных из штамма Brucella abortus 19 и вакцины против бруцеллеза животных из штамма Brucella abortus 82 (далее — схемы).

2. Разрешить применение хозяйствующим субъектам, расположенными на территории Ставропольского края, вакцин в профилактических целях по схемам согласно инструкций.

3. Определить, что созданным хозяйствующим субъектам, расположенным на территории Ставропольского края, применять вакцины разрешено только по решению управления ветеринарии Ставропольского края.

4. Запретить применение вакцин на поголовье сельскохозяйственных животных племенных предприятий и индивидуального сектора.

5. Определить, что при ликвидации очагов бруцеллеза решение о применении вакцин принимается управлением ветеринарии Ставропольского края в индивидуальном порядке.

6. Признать утратившими силу приказы управления ветеринарии Ставропольского края:

от 20 января 2012 года N 48 «О применении противобруцеллезных вакцин на территории Ставропольского края»;

от 13 июня 2013 года N 177 «О применении противобруцеллезных вакцин на территории Ставропольского края»;

от 09 сентября 2013 года N 268 «О применении противобруцеллезных вакцин на территории Ставропольского края».

7. Контроль за выполнением настоящего приказа возложить на первого заместителя начальника управления ветеринарии Ставропольского края Руденко А.В.

8. Настоящий приказ вступает в силу на следующий день после дня его официального опубликования.

Начальник управления ветеринарии
Ставропольского края
А.Н.ТРЕГУБОВ

СХЕМЫ ПРИМЕНЕНИЯ ВАКЦИНЫ ПРОТИВ БРУЦЕЛЛЕЗА ЖИВОТНЫХ ИЗ ШТАММА BRUCELLA ABORTUS 19 И ВАКЦИНЫ ПРОТИВ БРУЦЕЛЛЕЗА ЖИВОТНЫХ ИЗ ШТАММА BRUCELLA ABORTUS 82

Утверждены
приказом
управления ветеринарии
Ставропольского края
от 02 ноября 2015 года N 207

Применение у крупного рогатого скота противобруцелезных вакцин из штамма 19 живой сухой и вакцины из слабо агглютиногенного штамма 82 живой сухой.

Вакциной из штамма 19 иммунизируют только телок один раз в возрасте 4 — 6 месяцев. Перец вакцинацией приводят серологическое исследование на бруцеллез.

Через 10 месяцев после первичной иммунизации телок исследуют на бруцеллез и реиммунизируют вакциной из штамма 82.

Коров-первотелок исследуют через 1 — 2 месяца после отела всего стада и реиммунизируют штаммом 82.

Ревакцинируют коров с интервалом не менее одного года, после серологического исследования на бруцеллез.

Применение у крупного рогатого скота противобруцеллезной вакцины из слабо агглютиногенного штамма 32 живой сухой.

Телок вакцинируют в 4 — 6 месячном возрасте после серологических исследований на бруцеллез.

Через 10 месяцев после иммунизации телок исследуют на бруцеллез серологически и иммунизируют вакциной из штамма 82.

Телок не иммунизированных против бруцеллеза в 4 — 6 мес. возрасте, за 2 — 4 месяца до осеменения исследуют на бруцеллез серологически, не реагирующих, вакцинируют вакциной из штамма 82.

Коров-первотелок исследуют через 1 — 2 месяца после отела всего стала и реиммунизируют штаммом 82.

Ревакцинируют коров с интервалом не менее одного года, после серологического исследования на бруцеллез.

Применение у мелкого рогатого скота противобруцеллезной вакцины из штамма 19 живой сухой.

Ярочек и козочек вакцинируют в возрасте 4 — 6 месяцев.

Овец и коз вакцинируют не позже чем за 2 месяца до осеменения. Ревакцинируют животных через 12 месяцев и далее ежегодно.

О проведении вакцинаций по каждой группе, стаду (отаре) составляется акт, я котором указывают: название и адрес владельца животных, состояние поголовья по бруцеллезу, опись животных с указанием инвентарных номеров, количество и возраст вакцинированых, все данные о вакцине.

Утвержден
приказом
управления ветеринарии
Ставропольского края
от 02 ноября 2015 года N 207

источник

Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.03) на тему: Получение и испытание живой вакцины против бруцеллеза из штамма 82-ПЧ

Автореферат диссертации по ветеринарии на тему Получение и испытание живой вакцины против бруцеллеза из штамма 82-ПЧ

ЗАНСКИЛ ОРДЕНА ЛЕНИНА ЗЙТЕРИНАРНШ! ИНСТИТУТ имени 11.с. БАУМАНА 11 (!5П1Г ЮО’З

БЕДОЗВРОг1А ГАЛИНА АЛчаСАНдРОЗНА

ПОЛУЧЕНИЕ И ИСПЫТАНИЕ 2ИЗОЗ ВАКчИаН ПРОТЧЗ БРУЦЕЛЛЕЗд ИЗ- ШТАМПА 82-ПЧ

16.00.03. — ветеринарная микробиология, вирусология, эпизоотология, микология и иммунология

Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора ветеринарных наук

Работа вшолнена в лаборатории бактерийных инфекций Всероссийского научно-исследовательского ветеринарного института

Научные консультанты: Заслуженный ветеринарный врач РСФСР, доктор ветеринарных наук, профессор К.М.САЛМАКОВ

Заслуженный деятг науки ТССР, доктор ветеринарных наук, профессор, -чадемик АНТ Г.З.ВДН1СОЗ

Доктор ветеринарных наук, профессор Р.Г.ГОСМАНОВ

Доктор, ветеринарных наук, профессор, член-корреспондент Россельхозакадемии, заслуженный ветврач РСЗСР В.В.ООЧНЕВ

Доктор, ветеринарных наук, профессор, член-корреспондент Казахской АСХН Н.П.ИВАНОВ

Ведущее учреяздение — Всероссийский научно-исслед’овг^’ельский институт бруцеллеза и туберкулеза животных ( ВНИИБТ2 )

Защита состоится » » МЮК ^ ^ 1993 г j.eimi0HUx: средств специфической профилактики в комплексе с организациокно-хозяйственнши и ветершгарио-санитарнши мероприч ятиями ( Орлов Е.С. и др.,1971; Уласевт П.С.,1971; Сашаксл K.M., 1975; Студенцов К,П., 1975; Нгяицкнй A.A., 1Э’/8; Юсупов О.Ю. ц др., IS84; Забродин В.Л. и. др., ISS0; Джупина С,If., 1985; Кос адов Я.А., 1985; Сочнев В.В., 1988; Алиев Э.А.,1987; Иванов Н.П. ,1988; (им В.И,, 1989 и др.>.

В настоящее время для этих целей широко используются дивна ваздшш аз пгеашов 82 и 19. Однако они шею* сущест -¡шные недостатки. После илиуяизацяя вакциной из юташа 13 животные телгое врегя остаются серопозитивнш:; ( Гринько В.К. и др. ,1289; СЗъад-ков Г.А,, 1909), 470 затрудняет проведение взтеринаг’^-санятарных мероприятий, дифференциацию вакцинированных животных от большее и определен;:- эпизоотического статусу поголовья скота ас лезу.

При комиссионной проверке ( I969-I97C, I9?I-Iv? та Казань, 1979), совецанин bgïq-ринарних специалистов страны на ЭДК ( Москва, 1982), ..сесотиой научнойко:Ц;еранциа но проблемам эпизоотологии ( Казань, 1983), республиканской ^учно-пропзводственпой конференций Казань, I986-T992), совеиашш-семичс-ре аракткчсских и научных ветспециэ-листов (Новосибирск, ISS7), семинарах i’-.гср’.шарннх специалистов Оренбургской обллсти (1983), ДгерооПцшна (1088), Арглшин (1389/, .:шой Осетии (1990).

2. ;.’атер;пл а чзтодн нсилодовэшй

Работа выполнена в соответствии о плановой иг, :■■ о л

ти — тлло;; г, ¿¿’,г-19. го«ах п даборэторип бакт-. ¿¡Дюгс лкекф.» «сот л;гп;;ло ааучис-пссхолскдсльского ветеринарного института (г.Казань), а такие непосредственно в хоз, ствах Оренбургской, Саратовской областей Российской Федерации, Азербайджана, Армении и Южной Осетии.

В экспериментах .юпользовтля 115 голов крупного рогатого скота, 280 кроликов и 3000 морских сванок. .Производоздвенныв испытания птеведены на 120 тысячах коров и нетелей.

В исследованиях использовали шташы бруцелл: В. abortus 82 (серия 1232 , 0528 , 0379), 19 (серия 7Э), 54,. 544 , 99, R-82 и Е-1096, в, maliteneis 25 и В. euia е, а также полевые культуры, полученные из абортированных плоцов, органов и лимфоузлов больных животных.

В работа использовали питательные среды: печеночно-пептонный глютзо-глицериновый агар и бульон (ШИТА и ППГТБ), пептонно -■мартеновский агар с переваром Хоттингера ( ШАХУ, Дгар «Д», агар и бульон на основе плацантарно-эмбрионально-маточного гицролизата (1ПЭМ’, картофельный, гриппозный и эритрит- агар и триптозный бульон.

На первом этапе изучали возможность снижения абортогенного воздействия бруцелл птамма 82 и отрабатывали оптимальные схемы вакцинации беременных коров. При этом испытывали малые дозы вакцины из штамма 82 и использовали штамм В-62 для грунтвакцинации с последущей прививкой вакцины из штамма 82.

На втором этапе исследований изучали возможность получения антибиотико-устойчивых и чувствительных, а также ауксо’хуофных мутантов бруцелл. Целенаправленная селекция клонов с пониженной реактогенностью из шташа 82. проведена с использованием методики длительного культивирования на искусственных питательных средах.

В результате направленного.клонирования и селекции новых 1 вакцинных штаммов бруцегл было установлено, что наибольший интерес в этом отношении представляет штамм 82-ПЧ (пешщилино-чувствитель-ный вариант’ птамма 82).

В этой связи , в шс-ед;пде.\ у бруцелл этого штамма более углубленно изучали стаба; ыюезь, .лулх гурадьно-мор^ологические, агглютикабелькые, биохкшг> ас к ¡е, ант; тонные, вирулентные, иммуно-генные, икмувошорфологичеезие и рэак.’огенше свойства, п также исплтывали вакцину из этого шташа в производственных условиях.

Культуралько-морфологические и дифозренциальные с ойстса бруцелл и полученных из них мутантов изучали методами, рекомендованными Подкомитетом по таксономии бруцелл Международного Комитета по номенклатуре бактерий и Объединенного комитета экоцертов , ФА0/В03 по бруцеллезу (1978).

Стабильность штамма 82-ПЧ изучали путем проверки его свойств после длительного:: культивирования на агаровых и бг*ьонных питательных средах, а также после ,5-кпатного пассирования через

организм морских свинок и 6-кратного — крупного рогатого ско.а, в том числе беременных коров. Определяли так:ке стабильность сиойсть культур бруцелл этого штамма, полученных из отдельных колошй и после лиофшшзацда. Стабильность изучали на традиционной печеноч-11о;: среде и среде на основе ГПЭМ совместно с сотрудниками лабо -ратории питател! »х сред ИИ — с.н.с,к.м.н. Машеевол Н.К.^ м.н.п. Торбино?» . 1.

Ос’ггчнц.ш маркерами ¡яташа 82-ПЧ г.вялятся чувствптелыость к пенициллину и эритритолу, агглютинабельность с бруцеллезными ^ — и Й-сыворотками.

Ультрастр;уч;т;/ру бруцелл ыхамм» Ь^.-ПЧ изучат методами гт5— гативнего контрастирования и ультратонких срезов совместно с-с.н.с. лаборатории патоморфологии ВНИВИ, к.б.п. Шошокиним В.А.

Аминокислотных анализ бруцелл штамма 82-ПЧ проводили на автоматическом анализаторе аминокислот Н 1200

В качестве тестов, определяющих иммунологлческуи реактивность животных и агглютиногенность культур бруцелл вакцинного штата, применяли реакцию агглютинации (РА), связывания комплемента (ВСЮ и Роэ-Бенгал пробу (РЕП), которые ставили по общепринятым методи-

Сроки при:Аиваемости и степень обсеменения бруцелл ва.’.циипого атеша в зависимости от дозы у морских свинок устанавливали печез ?, 15, 21, 30, 60, .80 п 120 суток, у крупного рогатого скота через 15, 30, 60, 90 и 180 суток после Ангцппащш.

Морфологические свойства бруцелл изучали на препаратах, окрашенных по методам Козловского и Грамя. Изменчивость бруцелл устанавливали путем постановки трнпафлавиновой пробы, термоагглютинации и окраски колоний по методу Уайта и Вилсона. Хул:,тураль-тше свойства определяли по характеру роста микробот ло Ш

.7 95$ ш уровнем значимосги ч=0,05 на ЭШ «Электроника Ж-56» по разработанным npoipai.*u/-«‘.i ( Тукшаитов Р.К., Нигматуллин II.X., 1984).

2.2. Изыскание способа прививки вакциной из што’ила 82 беременных коров и нетелей против бруцеллеза

В литературе имеются сообщения о различных методах снижения абортогешшстк вакцины из штамма 82: коныожтивальтй метод введения препарата ( Муминов А., 1983), использование антибиотиков после прививки ( Ростов А.П., 1987), двухзтапная вакцинация с

иопользованием вначале [лалта доз этого препарата, инактивированную вакцину или другие шташм, а затем — прививка штаммом 82 ( Киршин Б.А., 1977; Салмаков K.M., 1978; Стопин И.С. и др., 1981; Сочнев В.В. и др., 1983).

Работу проводили ‘в хозяйствах Оренбургской области. При этом нами апробирован двухэтапный опособ вакцинации с использованием малых «оз щташа 82 и вакцины из шташа Д-82.

Первоначально беременных коров иммунизировали малыми дозами (1-2 млрд м.к.), а через 1-2-3 месяца — полной дозы (100 млрд м.к.) ‘ вакцины из штамма 82. После вг декия малой дозы штамма 82 в одном из хозяйств у коров в течение месяца абортов не отмечалось. Животные реагировали в РА с биофабричным антигеном в титрах, нике диагностических, а в РСК — негативно. После введения щташа 82 в полной дозе через 1; 5-2 месяца среди привитых коров отмечались аборты в двух гуртах в пределах 4,1-5,3$, в третьем — 125?. При выборочном исследовании привитых кивотных через 4 месяца выявили положительно реагиругадие в РА й РСК, при исследовании через 7 месяцев псе животные реагировали отрицательно.

В другом хозяйство при использовании этого способа получены негативные результаты. Через 1,5-2 месяца после прививки малыми дозами вакцины из штамма 82 коровы абортировали и поэтому бьшо решено прививатт их после отела.

При использовании в качестве грунтвакцины штамма Р-43^ на беременных коровах были получены также неравнозначные результаты. Установлено, что вакцинация беременных коров этим способом в благополучных по бруцеллезу хозяГствлх аборты не вызывала или они были • единичными. Черва 15-30 суток котле введения-вакцины из штамма ■Р-82 у животных результаты Р*. и РСК с бисфабричнш антигеном были отрицательными. Аналогичные ае результаты были после введения штамма 62, через 6-7 месяцев все поголовье привитых животных реагировало негативно. В стадах, угрожаемых по бруцедяьзу или в которых эта инфекция только начинала развиваться и где животных своевременно прививали по этой схеме, сравнительно быстро удавалось предупредит^ возникновение острой вспышки и распространение бруцеллеза.

Вакцинация условно-благополучного поголовья коров позволяла снизить количество положительно реагирующих на бруцеллез животных н сократить срока оздоровления стада.

Анализ резул .татов пршенеипя этого метода в хозяйствах с ¡-¡злЛчноН эпизоотической обстановкой показал,-что вакцина из

не пизюз&ег абортов у фгрвдемшх коров, а у здот-оит лль-отяил не пызктс».’ оорвзошшт с.пешфйче’пгих анхатед, улаьли-васмых оиофабричным антигеном ь РА и КЖ. Применение двухэтажной вякнкивш*!* «ото.’тле йнкмцииро^етт, чес

«котя ж зр.т>:п»:з от схиль.исги. При атом благополучное по бруцеллезу поголовье ;:швоткых через 6-7 месяцев не реагирует на бруцеллезный антиген, а абортогенность вакцины из шташа 82 в этом случае с чихается в 2-3 раза. В хронически неблагополучных сходах по бруцеллезу после применения зтого метода количество абортов и выделение положительно реагирующих животных в РА и РСК сокращается. В острых бруцеллезтос очагах при развитии инфекции этот метод не дает эшшекта.

Т/п:;г,; оор-чзо. :;ст;тап’;чр наг-ли способ;; р/.-пи^.ч»— »г.»1″»:;’:

получен;. чу гейтов н изучение

В соответствии с поставленной задачей, на птопа.» втяпд

сстпкг;. ^¡хотро^гтых, йнтцо^отшсо^’С^ст^«-тельных л резистентных к ши мутантов бы’целл. йзыекглие новых неабортогенных штаммов бруцелл вызвано необходимостью вакцинации беремешых коров.

Б результате кровсясягас рябог били получены тнчшшугь»‘»- , стрелтоешцпно-, оксагашшо-уотоЯчявыс , нне я некоторые ауксот$о£пие мутанта.

После длительного культивирования штамма 82 на триптозных средах были отобраны стабильные пенициллино-чувствгтельные мутанты бруцелл. Культуры 5-7 — суточного роста рассовали на указанный агар для получения изолированных колоний, которые отсевали на косячки ШИТА. Культуры 2-3,- суточного роста проверяли по культурально-морфологическим свойствам. После четырех-летнсго изучения их, многократных рассевов и пересевов на искусственных •питательных средах и жесткой селекции,-для работы были оставлены 13 культур бруцелл. Все они хорошо росли на печеночных средах, давали выраженную положител. .1ую реакцию о бруцеллезными $ — и Р -сыворотками и отрицательную термоагглютинацию, слабо реагировали с трипафяавином, не росли в присутствии 2,5-5 ед/wi пенициллина и давали слабый рост на среде при 0,5-1,0 ед/мл препарата, были чувствительны к эритритолу и тионину и репродуцировали в присутствии фуксина. При проведении полного комплекса исследований в дальнейшем была оставлена одна культура — вариант 6, которая и явилась основой шташа В. abortus 82-ПЧ и используется ч настоящее время для изготовления вакцины.

После»трех пассажей через организм морских свинок, культура сохранила исходные свойства :t высокую чувствительность к пенициллину и .эритритолу, агглютинабельность в S — и сыворотках, характерную окраску колоний, минимальную остаточную вирулентность на морских свинках. В дальнейших исследованиях эти свойства явились основными маркерами для штамма 82-ПЧ.

В проблеме применения вакцин одним из актуальных является вопрос их стандартизации. Дж обеспе-эния этого фактора при изготовлении вакцинных препарате: яреЗуеазя с ‘одной стороны использование достаточно стабильнь t гк> бп ;ло треской характеристике штаммов, с другой. — необходимо пролод гаь постоянный контроль за состоянием их свойств, так как важно выявить начальные признаки изменения и своевременно предотвратить их последствия.

По данным Салтыкова P.A. (1976), любая популяция бактерийных штаммов венетически неоднородна вследствии возникновения в ней спонтанных мутаций. В связи с этим езтор поднимает вопрос о совершенствовании способов сохранен я лвойств вакцинных штаммов. Основными из них он считает лйофклизащш, пассажи через лабораторных животных и изучение отдельное особзй из популяции этих

Стабильность свойств штамма 82-1ТЧ изучали в течение 14-летнего культивирования на искусственных питательных средах. Культура этого штамма прошла 15-кратное пассирование через организм морских свинок и о-кратное — через организм крупного рогатого скота, в том числе беременных коров.

Для контроля биологических свойств популяция штамма 82-ПЧ проводилось из.ъч’чше свойств исходных культур и отдельных колоний из них, культур после целенаправленных последовательных пересевов на питательных средах

lie ‘ледованш показали, что культурально-морфологлческие свойства разных культур исходного штамма 82-ПЧ идентичны — он сохрг-няет свою генетическую характеристику.

При электронномикроскопичеслом исследовании ультраструктуры бруцелл штамма 82-ПЧ в сравнении со штаммами U2,I9,5^ и 5-1096 отмечено, что он относится к морфологическому типу 4. Овальные клетки’имеют размеры 400-600 нм по короткой оси и 900-1200 — по длинной осц. Трехслойная стенка почти не-имеет складок, 70ла1::на ее составляет 8,е

2 нгл. Цитоплазматичеокая мембрана у.зы-ласта, всделстгле чего периплазматическоо пространство . ;п .» раз-лкчнуа лирису от т4 до 25 нм. Электронная плотность eic относительно высока. Пижркбосояы сконцентрироваян преимущественно ‘¡о перемеряй клетки ;; шоюфакг.о высокую электронную плот иосп,. Нунлеощ располагается ¡;о.\:яаитно в центре клетки л, наоборот, дмбег низкую электронную плотность. 3 пего вкраплены многочисленные гршгули включения. Ыезооош встречаются повсеместно в виде иетлевшных и концентрических мембран.

В отличие от штамма 82-ПЧ, у бруцелл других ггмг.пв rvrerc—нал стенка аяг.иистпя и складчатая. Кроме того, г .-.гакроотк ток штамма С2 цитоплазма -ллг -равномерно мелкогранулярный и дирфузгай нуклеоид, расположенный по всей ‘поверхноетт клетки, чередуясь с полирибосомами, которые тлеют высокую злектроннуп плотность и также располонаяа по р.сей клетке.

Таким образом, результаты исследований ультратонкого строения бруцелл штамма 62-Щ позволяют констатировать, что структурные эламенты его организации хорошо выражены, но по некоторым морфологическим признакам они отличаются от других штаммов бруцелл.

2.4, Изыскание питательных сред для культивирования бруцелл

Известно, чю для выращивания бруцелл в настоящее время широ-ко.использупгся дорогоегоя1ДИ8 среды о использованием пищевых белков (мяса, печени, рабы и др.). Интересы пракиши требуют изыскания дешевых полноценных сред.

. На протяжении ряда лег.в ВЬЛБИ ведутся испеания в направлении поиска эффективных питательных сред для микробиологических целей, ва основе гидролизата из непищевого белка — тканей плаценты, эмбрионов, матки (П1Ш), являющихся отходами производства мясокомбината. Работами Хаертыноаа СЛ., Никитиной В.А,, Мамлеевой Н.К. (1975, 1981, 1986,1987) показана эффективность этих сред для микроорганизмов различных систематических групп.

По данным Корунова В.П. (1973), бруиеллы являются аминогетеро-грофными микроорганизмами, которые, в процессе эволюции, приобрели высокую сяздань паразигировашщ в организме животных и человека, удовлетворяя своп питательные потребности за счет готового субстрата (аминокислот); имеющегося в организме. В связн с этим, ПШЛ представляет интерес в том отношении, чго, будучи продуктом ферментативного (трилтического) расщепления белков, он содержи!; широкий спектр аминокислот, играющих важную роль в метаболизме бруцелл. Кроме того, в плацентарной ткани содержатся гормоны, витамины, стимулирующие репродукцию бактерий. При этом необходимо отметить, что исходное сырьв для изготовления ЛШ в 10-15 раз дешевле по «.равнению со стойкостью пищгшх продамся, используемых а традиционных средах.

Свойства исходной культуры игамча Я2-1Щ и продуцируемой попу-этого штамма при длительном пассировании и культивировании на агаровых и бульонных средах ГПЯД и ШПТа в сравнительном аспекте со штаммами 82 и 19 изучали по следующим показателям! выживаемости бруцелл на агаровых средах, оптической Плотности роста в жидких-срадах, морфодогии колоний, ишкгориалънил свойствам, диссоциации, росту в присутствии пенициллина, тионш а и фуксина, серонодородо-образовашш, уреазной. и каталазной активности» Исследования культур проводил через кагдые 10 пассажей.

Изучение эффективности агаровых оред для вакцинных щга. лов бруцелл при длительном их пассировании показало, что эксперкген-» таяыше среды яа основе ГПсМ яэ ус -упали, а иаогдь и превосходили традиционные печеночные орады, Колонии бруцелл на них были более крупными и рост их начинался в более рашше сроки, чем на печеночной среде. Причем морфология их оставалась типичной. Пассирование бруцзлл на средах ШШ не отражалось на их биологический характеристике.

После длительного пассирования на бульонных средах о последующим высевом на соогвегогвумдий агар установлено, чго яа среда ЛЗЛ колонии появляются на сутки раньше, чем яа ПЩТл. Тенденция к лучше^ росту ш г.82-ПЧ на среде ШШ нос. л а отагиотическ:. достоверный характер. Величина оптической плотности после дозированиаго посева бруцелл также свидетельствовала о высокой э;*фвк$изяооти среда П1Ш. Однако длительное пассирование бруцелл в жидка*, средах может1 привео-ги к фвнотптвокт изменения?» при ояраоке колоний, гогорые снижаются пересевами на агаровых средах.

Исследованиями установлено, что длительное последовательное . пассирование бруцелл штамма 82-ПЧ яа агаровых средах ИЗ.! и ПШТА не изменяло их биологической характеристики, кулыурально-морфологи-ческие свойства были аналогичными исходной культуре; Ш3.1 л^ляется хорошей росгостимулирующзй основой питательных оред для вирыцира-ния бруцедл. По материалам исследований получено пологительнс

решение яа выдачу патента.

Вакцинный штамм 82-ПЧ не отличается от других штаммов бруцелл по к-Гйлазной и уреазной активности.

Проведенный качественный и количественный аминокислотный анализ бактериальной маооы бруцелл 82-ПЧ в сравнении с штаммами 82,I9#i-I09B показал, что существенных различий межу г.имп яе отмечается, Однако по относительно*»^ содержанию ашнонксдо! ‘iui несколько отличались. Наибольший удельный вес в суммарном, содержании амино-киолот у шт.82-ПЧ составляют глугаминов-дя кислота. и серия^

которого было больше яа 4D%, чем у других штаммов, «в.наименьшем количестве содержится фенилаланин, лейцин, изолейция. У бруцелл штамма 82 наибольший удельный вес занимали» алаяин, лейцин, лизия, глугакиновая кислота.

2.5. Изучении биологических свойств штамма 82-ПЧ

Одним из основных требований, предъявляемых к живым бруцеллезным вакцинам, является хорошая приживаемость, интенсивное обсеменение бактериями внутренних органов и лимфатических узлов, быстрое освобождение от них организма животных и выраженная иммунологическая перестройка.

Приживаемость культуры- ата-лма 82-ПЧ изучали в 4 опытах на морских свинках и в 2 — на крупном рогатом скоте. Свинок иммунизировали в дозе 2-3 млрд м.к. и убивали через 3, 7, ТО, 15, 2Т, 30, 45, 60, ЭО и 120 оуток после вакцинации. Инфицированность морских овинок составила через 3 недели через месяц -23Я, 2 месяца — Ю%, 3 месяца — 0%. Процесс очищения привитых морских свинок начинает отмечаться через месяц-после вакцинации и заканчивается к 2-2,5 меся дам. Через 1,5-2 месяца у отдельных свинок могут высеваться единичные культуры вакцинного-штамма. Наибольшая внсеваемость микробов отмечается из регионарных лимфоузлов и селезенки. Максимальная инфицированное гь достигала до, 70%, средний индекс инфицированное та составлял БОЙ.

В опытах на крупном рогатом скоте использовали 18 голов чивог-ных, в том чиоле 12 телок 16-18 месячного возраста и 6 коров, тлеющих 3-С месячную беременность. Животных прививали вакциной из штамма 82-ПЧ в дозах 50, 100, 150, 200 и 400 млрд м.к. и убивали через I, 2, 3 и 6 месяцев после вакцинации. Культуры вакцинного штамма высевались у животных только в течение месяца после вакцинации, об-садекяемость у них ооставила в пределах 5-20%. Культур бруцелл из плодов не было получено.

Шташ 82-ПЧ обладает о патотной ви гулентностьи, обеспечивающей приживаемость бруцелл и вреь гнк; з ci хранение их в организме животных. Исследования вирулентных свойств этого штамме Проведены в 4-х опытах на 300 иорских свинках. Кавотнкх иадниэировали в дозах 10, 100, 1000 10000, I млн, I млрд и 3 млрд м.к. в I мл. С этой целью использовали юмизнне и сухие культуры, пассированные и полученные из отельных серяй нвткеноЯ.вакцины. Зевотных убивали чер*э 20-25 суток после вакцинации*

Саытачи 7С1»но»леяо, ■что вторит з культуры бруцелл высевались от мороквх евино», привитых в дозе Ю000 м.к. и выше. Индекс

инфицированное« у свинок на введение такой дозы составил 23-Й5/’, а введение на 100 тис м.к, -50-70На дозу 1000 м,к, получена I культура вакцинного штампа, на введение таътж дез культур не выявлено.

Таким образом, минимальной инфицирующей дозой штамма 82-114 является 10000 м.к., при введении которого бруцеллн обнаруживается у большинства морских свинок.

Возможность миграции кулмуры итамм-а 82-ОТ от вакцинированных к невакцииированяым проверяли в двух опытах на морских свинках и в опыте на крупном рогатом скота,.

В каждуо из 5 клеток помещали по 5 голов привитых вакциной из штамма 82-ПЧ в дозе 3 млрд м.к» и 5 непривитых морских свинок» Животных убивали через 10,15,21,¿0, морских свинок. Через 3 месяца после вакцияапли число реагирующих животных уменьшилось в 3,5 разы. Через месяц после двухкратной вакцинации процент реагирующих тавотных па бруцеллин составил 10,на аллерген — 42,

При изучении аллергического состояния крупного рогатого скота на введение вакцины установлено, что через 2 месяца после зрвичной вакцинации из 12 нетелей, в т.ч. 5 голов имеющих 2-4 месячную беременность, 80^ животных реагировало на аллерген. Привитые животные на бруцеллин давали отрицательную реакцию.

Нммуногениые свойства штамма 82-ПЧ’изучали в 7 опыта* на 938 морских свинках и в трех опытах на 85 головах крупного уог^ого скота,

В опытах на морских свинках напряженность иммунитета испытывалась в зависимости от взятой в опыт к^лыгры (исходные дативная и су^ая, Пассированные и др.), дозы в .кциш (0,5-«-1,5-2-3-4-5 млрд м.к.), срока (2-2,5-3-4-4,5-5.месяце ‘ ш. ;яе вакиг. нации) и дозы заримаця (25-50^-100 м.к. в зависимости от лщацЕи),

Ис»ледованшши установлено, чю наиболее и^муногенной для морских свинок оказалась культура штамма 82-ПЧ (вариант6), оптимальная доьа вакцины .составила 3 млрд м.к,. Оптимальный срок для заражения привитых морских свинок — через 3-3,5 месяца’после вакцинации, & оптимальная дозь аирулентного штамма (10 минимальных инфицирующих доз) 50 м.к.

Исследования показали, чю у морских свинок, привитых вакциной из Ш1.82-ПЧ в дозе 2-3 млрд м.к. и зараженных вирулентной культурой в дозе 50 м.к. через 3-4,5 месяца иоолч вакцинации« напряженность

имму.штета составила 75-9СЙ при Ю0;£ контрольной заражении штатных ЯИВ01НЫХ..ШИ — 60-Э0Д).- — — ———— ——

В первом опыте п- определению иммуногеиноеги вакцины аз штамма 82-ПЧ на крупном эогатом скоте использовали 1елок 14-Г-> месячного возраста в кол!честве 28 голов» из них 6 голов привили вакциной из шГамма 82-ПЧ в дозе 100 млрд м.к., 1С голов

вакциной из шгв82 и 3 головы были интактныв, Через 3 месяца после ванцннацш: сыворотки крови опытных яивогних реагировали в Рл а биофабрачнш антигеном в пира.’, ниде диагностических, в РСК — они давали отрицаге.зную реакцию, с гомологичным антигеном-в обеих реакциях» Животння заражали через ? месяцев посла-в«ки«н«»ции вируле. гно2 ..ультуроз в дозе I млрд м.к. Напряженность иммунитета в эуом опыте составила 50&,

Во втором опыте использовали нетелей в возраста 16-19 месяцев в количестве 21 головы, из них 6’имели 2-4 месячнув стельность» Необходимо было определить аб^ргогенносуь вакцины аз штамма 62-114 и ее иммуногенность на стельных животных. Для этой цели вакциной иь штамма 82-ПЧ в доза 100 ;лрд м.к. привили 6 голов (всех беременных),. шг.82 — 3 головы и 3 головы были ипГантными, Через 5 месяцев посла Вакцинации опытных и контрольных нивогных з.^олалд вирулентной куль-•гурой в дозе 100 млн м.к.

Рвзуль а ты опытов показали, что в течение 5 месяцев после вакцинации и 33 суток после заражения абортов у привитых животных не отмечено, получен один здоровый теленок. При убое у 5 нетелей, привитых вакциной шт.82-ПЧ, обнаружены хорошо сформированные плоды в возрасте 6-9 месяцев, устойчивость я заражению опытных аивот-;шх были в пределах б?*.

В третьем опига использовали 36 голов нетелей, из них имели беременность от 2 до 5 месяцев. В о. ле предполагалось определит!, реакгогенность вакцины из шгамма 82-ПЧ в дозах 50-400 млрд м.к. для беременных нетелей и установить для ш»х оптимальную иммунизирующую дозу препарата. С этой целью хивотных ионизировали в дозах 50,100, 150,200 и 400 млрд м.к..

Результаты исследований показали, что агглютинины в сывпроткз крови у 90/2 опытных хивотных обнаруживались максимально да 10-^0 сутки, затем шло их сапнла. и угасание реакций через 45-60 оуюк, причем титры были низкие (40-80 МВ). В РСК на 20 сутки реагировало в разных группах 68-100$ животных.

Заражение иштпааровшших и контрольных животных проводили чврвз 4 месяца посла едаунизации вирулентной культурой шт.54 в дозе 100 млн м.к. Результаты исследований показали, что вакцина из штач-•ма 08-4И в дозах 50-400 млрд м.к. не была реакгогенной для беременных нетелей, Ыаксшальнув устойчивость (80£) к заражению вирулентной культурой имели животные, вакцинированные в дозе 150-200 млрд м. (ИИ у них составил 1,4#), 60£ животных защищала доза вакцины в 100 млрд бруцелл (HU-U/I) ирк интенсивном инфицировании

Результаты п^югисгслегических исследований органов и тканей нетелей, иммунизированных вакциной из штамма 82-ПЧ в разных дозах, аоказилн, что более выраженные лим$оидно

гиперпластичбские, макро-фатальные, нлизмоклеточные реакции в лимфоузлах и селезенке и активизацию элементов рап^уло-гиетлоцигарной системы во внутренних органах вызывала вакцина в дозах ICO и 200 млрд u.R. У телок, вакцинированных в дозе 50 млрд М.&., иммуноморфологические изменения проявлялось слабее. У животных, привитых в дозе 400 млрд м,к.у в лимфатических у злых в селезенке отмечались .явления делимфстизации и фибротвзации тканой. Крсмо toro, продолжительность и интенсивность прллаферации антктелоббразувщих клеток в процессы их диффереялиа-Сях гагасв находилась в прямой завысямооти от дозы введенной вакцины.

Заражение вируленгаой лулыуроЗ бруцелл у вакцинированных хйаьхяых вызывало усиление иммуномор^ологических изменанй в лямфо-тщяцт органах* Изучение локализации в клетках цитоплазмагических ¿атиондах белков флюореоцвнтно-оимхимическимп реакциями показало, 4X6 наибольшее количество tu отмечалось в лимфоузлах и селезенке . животных, иммунизированных вакциной из штамма 82-ПЧ и зараженных pispes 4 месяца вирулентное культурой бруцелл. Показатель как колтес ква гранулоцитов о катиоНдыми белками, ras г интенсивность их флуорс цекцни лязосомаых кагнояяы* белков у этих гелок превышал показатель Жн«ак«яых животных в 2-3 раза.

Таким образом, вакцина из щгаыма 82-IN в дозах 100-200 млрд м.1 являегоя иммуногенной, вызывает в органах и тканях иммунизированных Жйво1яых доброкачественные изменения, свойственные вакцинному процессу и может создавать достаточно напряженный иммунит против вирулентной культуры бруцелл. Обнаружение большого числа зрелых ,

□лазмоциюв в ликвидных органах телок, а ТаКЖб ЗпаЧЛОЛЬНОв число гранулоци^ов о содержанием большого количества лизссоиных катаошшх балков также свидетельствует об иклуногеннооти эакцшш.

Основное качественное отличие вакцины иь ытамь.а 82-ПЧ от других противобруцвллезных препаратов является его слабая рвактогенлосгь» Результаты исследования показали, ЧТО ЭТОТ ИГа.^/^ хорошо приживается в организма беременных галок, пе айорюгзнвн, вызывает выравненную им^.уног/ор^ологпческую перестройку орг-.и.зма г. создает при згом достаточно напряженный иммунитет против окопе резательного заражения. У воех вакцинированных в разных дозах не га лей, в ток числе и поо.ча заражения их вирулентной культурой оруцелл, плоды Развивались нормально» В ма!ке и плаценте животных, а также в органах плодов (печени, селезенка,лимфоузлах) патологически изменений не отмечали.

Таким образом, анализ имууиомор^ологических, ульграотрукгурннх, гистохимических, имхунофлюоресцентных, иммунологических и серологически исследований ПОЗВОЛЯВ Г СЧИТАТЬ НОЬЫЙ вакцинный ШТаММ 82-ИЧ высокоиммуногенным препаратом, вызывающим внражьндыз иммуноморфологи-

ческие изменения в органах прилитых животных. Кроме того, результаты исследований ПОКаЗаЛ!’, Ч1’0 ИММуНКЗаЦЕП животных против бруцеллеза необходимо проводить в дозах 100-200 млрд м.к., а повторную вакцинацию — в период полного затухания аллергических и специфических процессов, обусловленных первичной иммунизацией, через 10-12 месяцев после введения антигена,

2.6, Иммуноморрологнчвская оценка вакцины из шгамш Й2-ПЧ

Об эффективное«! вакцинных препаратов можно судись лишь на’ основании результатов комплексных исследований иммунобиологической перестройки организма привит* животных. Иммунитет, приобретаемый, в результате вакцинации, является результатом сложных реакций организма и создается двумя системами— клепочной и гумерад&ной» (Пвгроз Р.В,, 1976),

Исследования показала, что новый г ишинный штамм бруцалл 82-114 достаточно хорошо пукашвавтоя в организме.щ>гви1цх живо«адх и бызы-ваег в нем выраженные им’/.уноморфояогичеокив изменения. При п чецвд динамики изменений улыраотрукгуры клзгок лимфсидных органов морских

свинок наблюдалаоь нарастающая фуякциоь-аьная активизация лимфоцитов и макрофагов селезенки и лимфоузлов уже в первые сутки после иммунизации. Наличие бруцелл в цитоплазме этих клеток на 3-й оугки указывает на активный фагоцитоз, который в последующие сроки исследований отмечался и в конгррегионалышх лимфоузлах. На 5-7-е сутки в цитоплазме иммуяокомпегентных клеток обнаруживали бруцеллоподобные частиш о деогруктивной клеточной стенкой, что является результатом частичного переваривания бруцелл. Об этом факте говорит наличие в макрофашв. множества лизосом и остаточных телей. На 10-е сутки в макрофагах лимфоузлов выявлялись фагосомы с полупереваренными бактериями, а через 14 Суток — в них отмечались как клеточные фрагменты, ■ гак и оотатки бруцелл. Видимо, в этой случае имел место фагоцитоз клеток нагруженных бруцеллами. На 14-2х сутки в лимфоузлах огмеча-лооь множество делящихся стромальных клеток, которые, вероятно, замещали иммунокомпетентные клетки.

Наивысшая выраженность специфических и аллергических изменений в органах и ткангх наступала на 14-е сугкк после иммунизации и оставлялась на этом уровне до 28 суток. К специфическим изменениям относятся гиперпластическо-макрофагальная и плаьмоклеточная реакции, а также повышенный синтез РНК, глобулинов- в лимфоидных органах и цитоглазмагических катионных белков — в гранулоцитах. Аллергические изменения характеризовались мукоидным набуханием стенок мелких кровеносных оосудов, эозинофилией, гомогенизацией ретикулярной стромы, отеком и разрыхлением периваокудярной ткани грабекул и очаговым скоплением лимфоидяо-гиогаоцитарн»Х клеток в трабекулах и парентима-юзных органах.

Следует отметить, что через 45,60 и 120 суток после вакцинации иммуноморфологические изменения затухали и подвергались обратному развитие.

Следовательно, фагоцитоз бруцелл вакцинного штамма лимфоцитами г макрофагами иммунокомпетентных органов сопровождается перестройкой структурных элементов этих клеток, лизисом микроорганизмов В фаГО-лизосомах и переводом их в иммуногенную форму. Вакцина из штамма бруцелл 82-ПЧ вызывает не толыЛ выраженные, но и обратимые иммуноморфологические изменений в органах и тканях.

•В лимфоузлах и селезенке опытных животных в разгар иммуногенеза отмечались высокая активность кислой фосфа-тозы в Т-зависимых зонах

и щелочной’ фос$атяз!г в В-залиоп-ппсзонахт- что-указывает- на- активи— —

зацию Т- и В- клеточной реакции. Изучение динашки Т- а В- лимфоцитов в периферической «роди подтверждает это уже на 7-е сутки увеличением процентного содержания клеток. На 14-е сутки по .азатель Т- и В- клеток вакцишц.оьашшх животных превышал таковой у интактных ди-Естшк в 2 раза, °пта:.т отмечалось постеганное их снижение.

Гпстслог/ческке л им.гу¡юфлюоресцентные исследования показали, что количество аахителообраэующих клеток ь лиыфоуалах л оелв&Ьпке возрастало с первых суток после иммунизации морских свинок и к 1014 —u i;v Т nui: j lit ¡uiu MriKGIL».icLJibilGi’o л nci ч u .i àiH., itpcBcimcifi УРОВЕНЬ iiit—

тактных животных в лимХоузле в 4,8 раз , а в селезенке — 6,7 раза. Lotît отмечалось постеленное сп.гасние уровга глобулннсодеряащих клеток к I2C- суткам (срок наблюдения).

Одновременно с увеличением количества антителообразупщих клеток происходило изменение и п качественном составе плазматичь . » ‘ ‘ ; ‘ a ï Т Л Л» ЛЛ»‘ [‘ с 7ИС ‘ ‘ ‘ ООТЛ а;арел!’:льп;о-. ‘гчние грануле’.’.г, -гго связано с остаточной вирулентностью вакцинных штаммов ( Куцдрюкова Л.И., 1984).

ничние или очаговые скопления эпителиоидных клеток, что связано, по-видимому, с низкой остаточной вирулег-чюотью этого штамма, а также быстрш фагоцитированием и переработкой его макрофагами.

■’ ‘ 1′!’ «‘j-iL l’a Г Г) я HCC T’J ¿10 li’f НИИ ПО’ЙаШЗаПТ , [ТО ЮКЦПЧШЧ’ Л^ПЛ

i ,гр. етоя слабо pjrunv»вшшм и тянвает обратите аовтгокшишп ные изменения в органах и тканях. не выходящие за рамки вакпииаль-

ЛОГГ, ;:,;r>ÎTSCC(. привитых чивотннх.

Таким образом, вакцинный штамм бруцалл 82-ПЧ является достаточно им!.-уногвнным и способен индуцировать образование в лимЬоидяых органах большого количества ангителообразующих клегок, их созревание и переход в более зрелые формы.

2.7« Производственное испытание Еивой.нативной Вакцины из штамма 82-ПЧ на крупном рогатом скоте

В 1980 году проведено Производственное испытание вакшшы из штамма 82-ПЧ на крупном рогатом скоте в производственных условиях. Согласно распорлжеяйю 1УВ ЫСХ РСФСР, вакцина из штамма 82-ПЧ иммунизировали независимо от стельности 149 коров в совхозе «Волжская коммуна» (огд.5) Оренбургской области. Результаты опыта показали, что в течение года после вакцинации среди привитых животных абортов поствакшшадьного и бруцеллезного характера «а зарегистрировано. При контрольном исследовании сыворотсх крови через 2 месяца после г.-шщ:-нации были выявлегл единичные положительно .реагирующие животные в РА и РСК. При исследовании всего поголовья через 6 месяцев выявлено 5 голов, реагирующих в Рл (1:100) и РСК. При повторных исследованиях все гизогные не реагировали на биофабричный антиган. Аналогичные результаты были получены и при вакцинации коров в колхозе им.Калинина,

После детального анализа применения вакцины с участием представителей Г/В и ветотдела было принято решение о дальнейшем испытании вакцины из шт.82-ПЧ в хозяйствах области. В период о 1932 по 1956 год было привито отой вакциной в 27 хрзяйствох области более 20 тысяч коров и нетелей. Работа проводилась в хозяйствах с различной эпизоотической ситуацией по бруцеллезу. Молодняк прививали вакциной из штамма 82, а все маточное поголовье- одновременно, независимо от стельности- вакциной из штамма 82-ПЧ. Прививка проводилась только по е.рпцательноыу серологическому фону после удаления из гуртов всех подчжигельно реагирующих на бруцеллез животных.

В благополучных по бруцеллезу крупного рогатого скота хозяйствах у привитых животных отмечались .Нормальные отели, аборты не регистрировали.отрицательные результат В .РА и РСК с бнофибричным антигеном

отмечались уже чароз 4-6 сесядав.

-27В уоловно-благополучных и неблагополучных по бруцеллезу хозяйствах, в которых перед вакцинацией, среди коров выявлялись_положигель——- -но реагирующие-на брунеллез, ч в некоторых- имели место аборты, привитый скот реагировал негативно или коли’.зсгво реаг:.руищаго скота резко сникадось.

В этих хозяйствах регистрировались единичные аборты, но при исследовании аборТИрОЪаВШИХ КОрОВ И абОрТИрОВаННЫХ ПЛОДОВ, К8К правило, получали отрицательные результаты. Необходимо отманить, что ни в одном слечае яри этом нв была полупака культура вакцинного штамма 82-ПЧ. При исследовании всего привитого поголовья коров через 6 месяцев количество ргагируищаго скота резко сделалось и после 2-3 доследований получади негативные результаты (совхозы •’Мирный труд», «Уранбаш» Октябрьского района и др„).

Согласно наставлению по применению препарата привитых коров рекомендуется ревакцшшровать через 2 года» После ревакцинации ^оров вакциной из шГамма 82-ПЧ п благополучных хозяйствах (колхозы «Путь к коммунизму», «Заветы Ильича» Саракгашского района) у животных отмечались нормальные отелы, аборт;г отсутствовали. При исследовании через 6 месяцев в Рл и РСК животные на бруцртлезнкй антиген не реагировали.

В эгог же срок в неблагополучных хозяйствах до бруцеллезу ревакцинацию проводили ш*ышок 82* При зсом в отдельных хозяйствах отмечались единичные абортировавшие животные.

Проанализировав полученные результаты производственных испытаний, а Такие ДаНКЬЗ им^уномореологических исследований привитых коров, ми рекомендовали проводить ревакцинацию через год после первичной прививки.

В 1387-1988 родах, согласно разрешению 1УВ МСХ СССР, вакцин;’ из штамма 82-ПЧ применяли в хозяйствах Азербайджана, лркении и йеной Осетии, и тикне в отдельных хозяйствах Саратовской, Курганской, Иркутской£ Шшшской, Челябинской, Волгоградской и др» областей Российской федерации.

В ходе производственного испытания отрабатывались следующие методы применения вакцины: «

— одномоментная и без учета стельности вакцинация всего мят очного поголовья окота в хозяйствах о различной эпизоойтпоскоЯ обетаиопкоИ по бруцеллезу.

— Одномоментная и баз учета сроков стельности вакцинация беременных коров вакциной из штамма 82-ПЧ, а остальных — вакциной из штау,:/л 82.

— Ревакцинация коров по фону штамма 82-И этой яе вакцино;; или вакциной из штамуа 82.

Параметрами контроля эффективности иммунизации служили: сохранение благополучия хозяйств в течение трех лег, отсутствие абортов у привитых коров, серологические показатели до и после прививки, выход молодняка ;; пр.

Основанием для испытания ВаКЦПНЫ в Азербайджане явилась сложная эпизоотическая ебсгановка по бруцеллезу. !Ь I.0I.87 года в 31 районе республики имелось 77 неблагополучных пунктов по бруцеллезу крупного рогатого скота, а больной оког выявлялся и частично оставался на передержке в 29 районах, т.е. 55,1 районов были неблагополучными по этой инфекции.

В республике вакцина из штимча 82-ПЧ использовалась в 16 хозяйствах Геокчайскогг района, в 25- Исмаилинского, в 21-лгДашского, а 25-Швыахинского, а затем евдз в 26 районах в более чем ¿30 хозмаг г-вах привили 46 тысяч коров и нетелей.

Первоначально вакцина была применена б Геокчайском районе, в котором до вакцинации имелось 3 неблагополучных по бруцеллезу хозяйства. Вакцинировали в 16 хозяйствах 3613 коров и петеле;!. После прививки за животными велось систематическое наблюдение. При псс.т’нс-ващш привитого окота через 6-I2-I8-24 месяца количество реагирующего скота Н-. бруцеллез снизилось с 210 до 2 голов — после вакцинации Вакцинированное поголовьо сохраняло благополучие в течение 4 лег (срок наблюдения) лбортов поствакцинаяьного характера но отмечалось;

Агдашокий район относятся к неблагополучным pa£oaa.v по бруцеллезу. При исследования коров пе^ед вакцинацией из 10 хозяйств района было выявлено 65 коров, положительно реагирующих на бруцеллии. Через 6-месяцев после вакцинаиил число положительно реагирующих сре; привитых животных сократилось до 26 голов, которые выявлены в основном из ранее оздоровленных и неблагополучных хозяйств. При исследовании через 12 месяцев пгсле вакцинации выявлено всего 6 голов. За период наблюдения абортов пос-гвакцкпальаогс характера не отмечалось.

¡киболее слоааоя обстаноька по бпуцаллезу била в Шемаханском ЗаЙОНв. ÍÍ3 34 хозяйств^ района, в когоргх имелся крупный рогатий жот, 4- были официально неблагополучные по бруцеллезу, и aya в !9 — выявлялось большой количество положительно раагируо..даго окота, 1 в некоторых ИЗ НИХ отмечались аборты.

По просьбе руководства шемахинокого РлПО вакциной из шгамма 32-114 привили 8217 коров и нетелей в 25 хозяйствах, п т.ч. в 8 — в с!гавщиЯся крупный рогатый окот был ообран я размещен в 20 районах республики. Кроме того, было завезено из разных регионов ограны Юльиое количество нетелей,

Соглаоно указанию 1УВ МИ СССР через 1,5 месяца после трагедии нашим участием начата планомерная работа по вакцинации всего маточного поголовья вначале в районах, расположенных вокруг гг. Спитак и Леняяак-н, а затем и в дчугих. В период с января по мац’ 1339 года былр привито 36 тионч коров и не гелей в То? хозяйствах 18 районов республик!.

Согласно информации начальника 1УВ Армении Степанлна л.Н., ьакдана из шп’«•:/,а 82-ПЧ показала высокую эффективность при применении в хозяйствах республик*:, отмечаются ее неабортогенные и слабо-■лтлюгиногенные свойства. При ежемесячном исследовании 3245 привитых коров-, через месяц после вакцинации выявлялось максимальное количество реагирующего скота 5,5Я, в т.ч. ь тигре 1:50-67%, 1:100-¿4«, 1:200-7?! коров, на 90 сутки выявлено всего II проб в титре 1:50, В дальнейшем при ежемесячных исследованиях (до года) долуче/ш отрицательные показатели,

Б связи со сложной обстановкой по бруцеллезу, вакцина из штамма 82-ПЧ была применена в 30 хозяйствах на 9000 коровах и нетелях в ЩяоО Осетии. До применения вакцинг в хозяйствах было выявлено больного скота в Цхиявальском районе 150 голов, в Знауроком -64, Цгавсквм -52, Лениногорском- 55 гслов. После применения вакцины количество реагирующим скота снизилось в 6-10 раз, в т.ч. по Цхинвальског/у району в 10 раз (совхоз им.1етагурова и колхоз «Ередви» Абортов поствакпинального характера после вакцинации не выявлено. Через год после вакцщздйл во всех хозяйствах проведена ревакцинация. Но истечении трех месяцев среди ревакцшшроваяяого скота оелгаенэяий не выявлено.

По итогом производственных испытаний наш разработана система мероприятий по борьбе с бруцеллезом крупного рогатого скота о применением вакцины из штамма 82-Ш, на которую составлена и утвер-гцена ГУБ .»ОХ СССР соответствующая научно-техническая документация.

По просьба I7B UCX РФ на Щелковском биокомбинате было изготовлено 32 опытно-промишланяые серии сухой живой вакцины из стажа 82-ПЧ. По своим свойствам выпущенные сьрии вакцшш соответствовали всем параметрам, излоденяым внормативвд-гв*’1Ичас*:°Я документации на этот препарат. С разрешения ГУВ MCI В» сухую живую вакцину применяют в ряда регионов страны для спацифическрй профилактики бруцеллеза крупного рогатого скота (Сараювскад,Челябинская,Волгоградская, Читинская, Иркутска? и др. области).

ТаК, В Иркутской области КУ.!/уНИЭИрОХ.аНО В 1990-ISX ГОДаХ Вакциной из штамма 62-ПЧ в 5-ги районах, 19 хозяйогвах-17538 голов Маточного поголовья. При постоянном охо,.’.еслчкоц контроле аринигих короь и нетелей по кольцэзой реа:шгп с молоком и при плановых серологических исследованиях по Рл и РСК реагирую^ животных на бруцеллея’не выявлялось. Случаев абортов оради привитого поголовья на наблюдалось.

Таким образом, применен: з вакцины из штамма 82-ПЧ дав! возможность стабилизировать осогааовку по бруцеллезу, сохранить благополучие хозяйств от инфекции, в короткие ороки оздоровить неблагополучные пункты по бруцеллезу, уменьшить количество реагирующаго скота, создать единый иммуный фон среди матичного поголовья и возможность одномоментной ревакцинации скота.

1. Предварительная (за 30-60 суток) прививка с;алгным коровам культуры В.abortus i-82 или v./IOO дозы вакцины из штамма 82 позволяет снизить абортогенносгь полной дозы згой вакцины до 20-30%.

2. Методой клонирования из различных штаммов бруцелл получены г.утанты, устойчиьле и чувствительные к пенициллину, стрептомицину и оксациллину.

Селекцией на трипгозных средах г цучая новый вакцинный штамм В, abortus 82-ПЧ — пелицллляяо-чувогвигелышй вар-ант вакцинного штагла 82,

3. Основными маркера?«: штамма JT-ПЧ являются:

— чувствительность к пенициллину (не растет на агаре в присутствии 5 ВД/мл натриевой соли пенициллина) и эритритолу (отсутствует ргот на агаре, содержащем I мг/мл препарата),

— -игглитинабельность в бруцеллезных и 5-сыасчогках,

— низкая вирулентность (минимальная инфицирующая доза для морских овинок составляет IOOOO м.к.);

-слабая агглагиноганнооть (через месяц после прививки морские свинки не реагируют в Рл о бпофабричннм антигеном),

— »реактогенносгь для беременных коров (не вызывает аборты при первичное викц-нашк. беременных коров).

4. Штамм 82-ПЧ сохраняет стабильность кулыуральнон/.орфологичес-ких, агглвтинабеяьных и вирулентных свойств, что подтверждено 14-лэтним культивированием его и* искусогве.пшх ппт^тзльлих срецах, 50-кратными по с л а д is а г ль ными пзреоевами на агаровых и оО-крагнк.-.ж

— на бульонных средах, 15-КраГНЫМ пассг.рованием На морских СВННКал п б-крагныу — на крупном рогатом скота, в т.ч. беременных коровах, а такго при изучении агаровых культур, получен.-шх из отдельных колоний, при Изготовлении 55 серий нагивной вакш:.чы во fl.-IjBil и 32 серий сухо,! вакцшш — на Щелкове..ом блокомбийагв.

-6. Разрабог-.’.ная новая питательная cpcia на основе плаценгар-Ни—эмбрионально—v

Длительное культивирование бруиелл Щ гамма 82-ПЧ К а аГар^ВО.! среда ГП3.1 не изменяло их мор$ологит,?скшс, тинкюопальных, биохи ческшс, серологических- свойств.

6.При алекхрошю-микроскоппч^ском исследовании бруцеллы штау./а. 82-ПЧ однородны, основные структурные элементы их организации хорошо выражены. В отличие от штамма 82 клеточная стенка у них наибольшей юлщины, четко очерченная и,почти не имеет складок, в цитоплазме их • содержится концентрированные элзктроняо-плоЕшэ агрегаты полирибосом

7. Минимальной инфицирующей доз о Л для морских свинок является ЮС 0 м.к. штамма 82-ПЧ. Бруцаллы хорошо рассеется и прибиваются в лимфатических узлах и органах в течение месяца (:;,i-50a), к 1,5-2 месяцам они элиминируют из организма и могут высеваться лишь единичные культуры.

———В арганизме^крушшго рогатого сноп», в т.ч. бер ешшх коров,

бруцеллы штамма 62-ПЧ приживаются в течение 1-1,5 месяцев.

Индекс шьццированности у ш.х через месяц посдз прививки находится в пределах 5-20.

3. У морских СВИНОК, Ир«ВИ1ЫХ ВаКЦИНО,; ИЗ ЦЦаь^а (¿¿-ПЧ В Д036 2-3 МЛр I, М.К. , агглютинины ВЫЯВЛЯЮТСЯ На ?

е сугки, достигая МаКСИ-МаЛЫЮГО значения Ни 15-е сутки И утрачиваются Б концу месяца. ЛИШЬ единичные реагируют в Рл в титре до ‘¿и „:В.

9. Штамм 02-ПЧ не обладает коягагиозносгыо. В опытах на морских свинках л Круццо:/. рсгагок скоте не уог«но>->1э«»а щц’р-Ааш Сруцлдд

ЭТОГО ШТаММа ОТ ВаКЦ’.ШфОВаННЫХ На КЭПриВЩ’ЫХ ЬИоОГНЫХ.

10. Вакцинный штамм.82-ПЧ обладав/ хорошо выраженной иммунологической активностью. Введенный в дозе 2-3 млрд м.к. визыаал образование хорошо выраженного иммунитета у 75-86% морских свинок. У крупного рогатого скота, прибитого в дозе 100 млрд м.к. — чег ‘ Ь-7 месяцев иммунитет вираб. гцБ—\ч в пределах 30-67;?, а у вакциииро-ванного в ‘.озе 150-200 млрд м.к. — у 80#.

11. Вакцина из дгамма 82—ПЧ сцзивкят и»«муноиор’;ологцческую перестройку организма животных, аушшллоцу.зса лнл^ойдно-гапералас-тачеокой, ЧаКро^аГаЛЬНОЙ И ялазмоклеючао^ ¿..мКШШШ в лимфоузлах и селезенке, а также активацией клеток ре¿щ^ло-гасыощн^лой системы во пнугренних органах. У морских, свинок эти процессы затухают через 4 месяца после иммунизации.

Фагоцитоз бруиелл вакцинного ШГаМ.’.а ЛП|\’40ЦП1а’/,И И Макр0.раГа.МИ им-лунокомпетеигных органов сопровождай гея перзогпо: ;ой структурах ¿даиеихоа этих клеток и лизис,- : микроорганизмов. При этом отмечав год повыше»из уровня 1- и В-лимфоцитов в крови максимально на 14-е сутки, нормализация их происходит через месяц посла инокуляции препарат».

12. Разрабо. ла система протизибруиеллозных мероприятий с использованием вакцины из штамма 82-ПЧ, составлена и утверждена соответствующая нормативно-технически — документация,

13. Вакцина из штамма 82-ПЧ эффективна при п’\шенешщ на крупном рога-том скоте в общем комплексе органмз,-ационно

хозяйпгвен-ннх я ветеринарно-санитарн!’.; прогиво’руцедлезкых мероприятий» Использование вакцины дс.ет возможность одновременно чакцинир^вать все поголовье скота, в том числе норов я нетелей независимо от стельности,

itii а благополучии* (угрозивтх), гак -и неблагопг луч/шх по Оруиел-лвзу хоз -:’сгвах.

14. Ревакцинация крупного рогагого скога вакииной из штампа ¿2-ПЧ повышает его устойчивость к заболеванию бруивл’.езом. Оптимальным сроком ревакцинации является 10-12 месяцев. После ревакцинации серологические исследования животных на бруцеллез допускается начинать в благополучных хозя!.огвах через 6 месяцев, в неблагополучных — через 3-4 месяца.

15. Изго-овле.чнце на мэлковском ококомбинате 32 серии оухой айвой вакцины из шта,\:мй 82-ПЧ По современной гехноло. и, в том числе на £вердых п жидких»питательных средах, при контроле соответствовали требования;,’ ¿ахничесяих условий.

Предложен новый вакцинный шг^та В. abortus 82-ПЧ для профилактики бруцеллеза кругного рогатого скота, в тс ; числа берег-‘.енннх короз л нетелей U.C. й Ï04490 от 10.04.83 г.> положительное решение ВШИГПЭ на’выдачу патента от 26.Л.91 г. по ^лвке 4Я7341/13 (090465)

В связи о этим разработанн:

1. Технические условия на нивую н-..-;:внуч вакцину из ш1а;,:;,;а 82-ПЧ против бруцеллеза крупного рогатого скота (Утверждены Г/В .МСл ССОР 15. октября IB86 года).

2. Технические условия яы «жилую сухую в..кц; НОЭППНОСТЬ «ПЧ»), ЙОПоЛЬлуе»а. . ДЯ.t

л- ou-gifi. « Н1.ог.1ьос..уцбллезаой Л^;. »рунного i.oraturo ..•

2. Нив ал ВаКШГШ ДЛЯ ПрОфНЛаКШКИ ..jynHOiu рОГаТОГО eliûi’U.

(Салу.аков К.’,’. Белозерова //Положительное решение ВНИНГПЗ fia зпдачу патента от 26 ноября X99I года по Заявке Л 437341/13 ЙЬ0465).

3. Питательная сред-» № щагностики ‘бруцзллиза. см^.’леези il.К.. Белозерова Г..»., Торбин« .’.11.// Положительное решение ВШа!ГПЗ н« BHÏÏH4V Патента ОТ 24 января 1Уз2 ГОДа ПО ЗаЯВКВ И 4C.734I/I3 (0384bo).

I. il’.-^.m;»- -. >: :it;uL4; шТаМ\а O^y^cJb’i -¿-Î14 lu-* лх 1 ! M ‘. >• ÎV.’11’J» Т.п.// Te;J.Л 1.11/i;!! r:. de «.•■: .. .

. .. • i ,, ,¡. 1.// ¡кмшыл xic ; о cn.5 jiiJiî v/i:1.’ ■

.. . -чикл? сьеза t’J т: .Xr.-i.V пгября Xiwd г.), Тез.г чл. ,т.Х»ХЭй.

1.Л., -Хплива Г, К.// ДоСз ilictili.’ï l\ajatiOKuil Ijciôjmnaprtùi1 ШПОлЫ — h maнн-пяптнпиплптва: Тй.ч.локя. на v4Hft-nnnH.4H. капа).-Казань-I99T.

7. Аминокислотный состав оруцелл штамма аг-йн сьелозерова Ц.д. Вахигоза Г.Н.// Достижения Казанской . .ïepuHctpHO’i науки — в практику диаотаоводсгЕн; Тез.докл.научно-произа.конф. — .азань, Х99Х, 19).

Разработать я вяедрг ть у ccjî е п аено явовашш s ч новые opfeiotbn, го-ai и оаособи диагностики и олсци^чиокой профилактики бруцеллез« крупного рогатого ci’.oï. (Белозерова Г.«,,ВаХиговг Г.П.,Мамлеева d.K. .Муллокаев О.Т. ,Торбина „»¡.П. .Шошокин В,л.//Заключительный отчет, задание 02.0Х.05 ДМ.-X990-й госрегистрации 0X860093071, Я инвентарнн ■ Л 029I0028I29.

9. Изыскать и испытать в производственном опыте новые проти-вобруцаллезные вакцины, /¿алмаков K.M. »Белозерогза Г.л.,Крашенинникова Л.л.// Заключительный отчет, 8адаяие 01.05.113.-71979,. № инвентарный Б-860166.

10. Разботать новые и усовершенствовать существуйте вакцины против бруцеллеза крупного рогатого окота,.овец и северных оленей; выдан Шшоельхозу ССОР исходные требования на разработку опытно-промышленного производства указанных Чакцин./ллимов A.«i.,Белозерова Г. -.i4,»’ •»•А.чсига О,Т.. №шокш1 В.л.,Бадозерова Г.а.//Псвы-шениа адакт-шносы л« ;2o.

21.Лйвгаостг’чесиая аррзкпщность аллерген» КяИ./Лутфуллиа U.Z,, Взлозеро^з г. // Республиканская научис-1ехяич„кон.р.мсл.уче»шх: Тез.докл.- Казань, 1-84, 14.

22, Ультраструктурные изменения в иммунокимпагзагшх органах г^вогнах, привитых ьикниной >ь бруцелл L2-II4./ МудлОкавв.О.Т., ¿’еиокг. В,й.»Белозеровс. Г.л.// Peonyбл.кау-i »о-произв, кояф.? Тез. докл.-чйктуалыше ^опросы вегерннари а зоохахаии.- К«аань,1992, .

23, Содержание «».зосошшх кагионных белков у телок, привитых вакппной г:з ягамма бруцелл 62-ПЧ./ Иултокаев О,Т.,Белозерова Г.я,// Экологические основы совершенствования ветеринарнгч и гзсогсх.чиччоких мероприятий в кявотноводст^е» Сб, й«учя.1рудов.

24, Пагоморфологическло- я где Юл. :мич е с кие изменения в орг max

и тканях коров, рспммун.:зг.рпвашшх вакциной из шгамка öpj- лл 82-114/ Муллакаев 0.Т.,Белозерова Г.л.// Физиологические основы развития, резистентности и продуктивности животных. Сб.научн.трудов,,Казань, 102-104,

25. Материалы изучения живой ватины против бруцеллеза круп-аого рогатого окота из штамма 82./Салмаков К.;*. .Алехин P.M..Плотникое Э,С,,Абузаров Ю.Щ,, Киршян Б,л.,Белозорова Г.л. и r..j,/ Соотояяие

и перспективы научных исследований по диаг-ке, пробке туберкулеза и меры борьбы.: Тез. докл.каучн.£ояф. — Омок, 1980, 84-84.

26. Результаты проварки свойств отдельных серий сухой живой противобруцеллвзяой вакцины из шташа 82/ Михайлов Н.л.,Салмаков К.М, Белозерова Г.Л. и др.//Шуч№Э груды КГШ» Казань, 1980, т.135, 48-60.

• 27. Выживазмобть бруцелл в отдельных сериях оухой живой вакцины из штамма 82 при различных условиях хранения./ Белозерова Г.д.,Кра-шеЕиня’-‘чова й.л,// Научные труды КГШ1., Казань, ISoO, т.135, 95-S8.

28. Стабильность биологических свойств культур бруцалл вакцинного штамма 82.//Салмаков К.М.,Кнршин Б.л,.Бзлозорова Г.л. и др.// Разработка средств и. методов борьбы о бруцеллезом. Сб.ниучн. трудов -Казань, IÜ84, 3-24,

источник

Читайте также:  Болеют ли кошки бруцеллезом