Меню Рубрики

Вакцина против бруцеллеза крс инструкция

Вакцина предназначена для профилактики бруцеллеза крупного рогатого скота. Вакцина содержит в качестве антигена инактивированную с гидратом окиси алюминия бактериальную массу штамма B.abortus ВГНКИ N КВ 17/100. Вакцина содержит также неполный адьювант Фрейнда и физиологический раствор. Использование новой вакцины в ветеринарной практике позволяет в 1,5 — 2 раза повысить эффективность противобруцеллезных мероприятий за счет повышения иммуногености и снижения агглютиногенности вакцины. 2 табл.

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к вакцине для профилактики бруцеллеза крупного рогатого скота.

Бруцеллез крупного рогатого скота — хроническое зооантропонозное заболевание, распространенное во многих странах мира, наносящее большой экономический ущерб скотоводству и представляющее серьезную опасность здоровью людей.

Основным средством борьбы с бруцеллезом крупного рогатого скота, особенно в зонах его широкого распространения, является вакцинация всего поголовья и своевременное удаление из стада больных животных.

Известна вакцина против бруцеллеза крупного рогатого скота, содержащая антиген из штамма Brucella abortus 19 и сахарозо-желатиновый стабилизатор [1].

Недостатками данной вакцины являются высокая агглютиногенность, так как в крови животных, иммунизированных данной вакциной в течение нескольких месяцев, а иногда и нескольких лет обнаруживают антитела в принятых для диагностики бруцеллеза серологических реакциях, что препятствует выявлению больных животных в вакцинированном стаде. Вакцину нельзя применять для иммунизации стельных коров, так как она вызывает аборты у отдельных животных.

Известна также вакцина против бруцеллеза сельскохозяйственных животных, преимущественно крупного рогатого скота, содержащая инактивированный антиген из штамма Brucella melitensis N «Невский-13», неполный адъювант Фрейнда и физиологический раствор [2].

Недостатком данной вакцины является то, что в крови иммунизированных животных до 90-120 дней сохраняются агглютинирующие и комплеменсвязывающие антитела, улавливаемые в принятых для диагностики бруцеллеза серологических реакциях, которые препятствуют своевременному выявлению и удалению из стада больных бруцеллезом коров.

Целью изобретения является разработка высокоиммуногенной вакцины против бруцеллеза крупного рогатого скота с низкой антигенной активностью.

Цель достигается тем, что вакцина в качестве антигена содержит инактивированную с гидратом окиси алюминия бактериальную массу штамма B.abortus ВГНКИ N КВ 17/100 с концентрацией 300-400х10 9 бактерий в 1 см 3 , при следующем соотношении компонентов вакцины, об.%: инактивированная с гидратом окиси алюминия бактериальная масса штамма B.abortus N КВ 17/100 с концентрацией 300х10 9 -400х10 9 микробных клеток в 1 см 3 40-45,0; неполный адъювант Фрейда 50,0-55,0; физиологический раствор остальное.

Для изготовления вакцины используют штамм Brucella abortus ВГНКИ N КВ 17/100.

Штамм B. abortus N КВ 17/100 получен путем целенаправленной селекции по антигенности и иммуногенной активности.

Штамм B. abortus депонирован в коллекции микроорганизмов Всероссийского государственного научно-исследовательского института контроля, стандартизации и сертификации ветеринарных препаратов, регистрационный номер КВ 17/100 ДЕП.

Штамм B. abortus N КВ 17/100 характеризуется следующими признаками и свойствами.

Бруцеллы штамма — короткие грамотрицательные палочки с закругленными концами, расположенные изолированно, попарно и реже в виде коротких цепочек. Без капсулы, спор не образуют. Размер 1,3-1,5 х 0,6-0,8 мкм.

Культура штамма хорошо растет в аэробных условиях на плотных и жидких питательных средах, предназначенных для культивирования бруцелл. На плотных питательных средах (4-5 сут инкубирования при 37-38 o С) растет в виде круглых, плоских, с нечетко контурированным краем, матовых колоний с диаметром 2,5-3,0 мм. При окрашивании раствором кристаллического фиолетового 1/2000 (по Уайт-Вилсону) 100% колоний окрашиваются как R-форма: фиолетовый центр и светлофиолетовый широкий ободок.

На жидких питательных средах на 2-4 сут инкубирования: легкая опалесценция и узкое пристеночное голубоватое кольцо на границе среды.

Культура штамма растет на средах содержащих фуксин, тионин в концентрации 1: 50000, бис-трифенилангидрокарбинола оксалат в концентрации 1:100000 (маркер), пенициллин 5ЕД/см 3 и не растет на среде, содержащей стрептомицина сульфат 5 мкг/см 3 . Продуцирует Н2S (6-8 мм). Лизируется фагом Тб.

Культура штамма агглютинируется R-антибруцеллезной сывороткой и не агглютинируется S-антибруцеллезной сывороткой. Штамм не обладает типоспецифической агглютинабельностью и не агглютинируется А и М монорецепторными сыворотками.

Штамм безвреден для человека и сельскохозяйственных животных.

Остаточная вирулентность: ИД для мышей линии С57 — Блек/6 — 5500 микробных клеток, что соответствует уровню аттенуированных вакцинных штаммов.

Культура штамма защищает от заражения не менее 50% иммунизированных животных.

Пример 1. Штамм Brucella abortus ВГНКИ N КВ 17/100 культивируют на плотной питательной среде или в ферментере на жидкой питательной среде при 37-38 o С в течение 72 ч.

Выращенную культуру с плотной питательной среды смывают физиологическим раствором, добавляют 0,3-0,5% формалина и 0,3-0,5% гидрата окиси алюминия, формалин и гидрат окиси алюминия вносят в ферментер сразу после окончания культивирования.

После инактивации бактериальную массу отстаивают, декантируют надосадочную жидкость и устанавливают концентрацию бактериальной массы, равную 300-400х10 9 микробных клеток в 1 см 3 . Инактивированную с гидратом окиси алюминия бактериальную массу штамма B.abortus ВГНКИ N КВ 17/100 в количестве 40-45% от объема смешивают с неполным адъювантом Фрейнда в количестве 45-55% от объема с доведением до 100% физиологическим раствором.

Вакцину расфасовывают во флаконы при включенной мешалке. Флаконы закрывают резиновыми пробками, обкатывают металлическими колпачками и этикетируют.

Расфасованную вакцину проверяют на стерильность, безвредность и иммуногенность.

Готовая вакцина представляет собой однородную водно-масляную эмульсию белого цвета с коричневым или серым оттенком. При длительном хранении возможно незначительное отслоение адъюванта над эмульсией, что не влияет на качество вакцины.

Получают 3 серии вакцины, приведенные в табл. 1.

Пример 2. Определяют антигенную активность адъювант-вакцины.

Морских свинок (10-14 голов в группе) иммунизируют адъювант-вакциной из штамма B.abortus ВГНКИ N КВ 17/100 (серии N 1, 2, 3), полученной по примеру 1; адъювант-вакциной из штамма B.melitensis N Н-13, экспериментальной адъювант-вакциной из штамма B.abortus N 16/4 (штамм в R-форме) и живой противобруцеллезной вакциной из штамма B.abortus N 19.

Адъювант-вакцины вводят в дозе 0,2 см 3 , живую — 1 млрд. микробных клеток в объеме 1 см 3 под кожу в область паха. Через 15, 30 и 60 дней после иммунизации у животных берут кровь и исследуют в РА с единым бруцеллезным антигеном (S-антиген). Результаты исследований приведены в табл. 2.

Из табл. 2 следует, что все серии предложенной адъювантвакцины из штамма B. abortus ВГНКИ N КВ 17/100 не индуцируют образования агглютининов в сыворотке крови животных и в отличие от адъювант-вакцин из штаммов B.melitensis N «Невский-13», В. abortus N 16/4 и живой вакцины из штамма В.abortus N 19 являются неагглютиногенными, что дает возможность быстро и своевременно выявлять больных вакцинированных животных в случае их заражения. В то же время среднее количество агглютининов в сыворотке крови морских свинок через 15 дней после иммунизации адъювант-вакцинами из штаммов B.melitensis N «Невский-13» — 83,0, B. abortus N 16/4 — 38,3 МЕ/см 3 , а живой вакциной из штамма B. abortus N 19 — 160,0 ME/cм 3 , и в случае заражения больные бруцеллезом животные не могут быть дифференцированы по крайней мере в течение 60 дней от иммунных — незаразившихся, создавая угрозу перезаражения.

Таким образом установлено, что адъювант-вакцина из штамма В.abortus ВГНКИ N КВ 17/100 не индуцирует синтез S-антител в количестве, улавливаемом реакцией агглютинации с единым бруцеллезным антигеном.

Пример 3. Иммуногенную активность новой адъювант-вакцины, полученной по примеру 1 из штамма B.abortus ВГНКИ N 17/100, сравнивают с вакцинами из штаммов B.melitensis N «Невский-13», B.abortus N 16/4 и живой вакциной из штамма B. abortus N 19. Опыт проводят на морских свинках, привитых аналогично примеру 2.

Через 3 мес после прививки морских свинок заражают стандартной культурой контрольного вирулентного штамма В.abortus N 54М/ВГНКИ в дозе 80 микробных клеток (15 ИД50). Спустя 32-35 дней животных убивают и проводят бактериологическое исследование селезенки, печени, костного мозга и лимфатических узлов (всего 10 объектов). Определяют наличие бруцелл вирулентного штамма в лимфатических узлах и внутренних органах животных. Рассчитывают процент защиты (количество незаразившихся животных в процентах от общего их количества в группе) и индекс инфицированности (процентное отношение количества объектов, из которых выделена культура вирулентного штамма, к общему количеству исследованных объектов по группе животных). Результаты исследований приведены в табл. 3.

Таким образом установлено, что адъювант-вакцина из штамма B.abortus ВГНКИ N RD 17/100 всех серий превосходит по иммуногенной активности адъювант-вакцины из штаммов B. melitensis N «Невский-13», B.abortus N 16/4 и не уступает живой вакцине из штамма B.abortus N 19.

Пример 4. Определяют реактогенность адъювант-вакцины из штамма B.abortus ВГНКИ N КВ 17/100 (серия N 1) в опыте на телках трех-четырех месячного возраста в сравнении с адъювант-вакциной из штамма B.meliitensis N «Невский-13». Каждую вакцину вводят 10 телкам под кожу в область подгрудка в дозе 3 см 3 . У вакцинированных животных ежедневно в течение 10 дней измеряют температуру тела и площадь припухлости в месте введения вакцины.

У животных, иммунизированных адъювант-вакциной из штамма B.abortus ВГНКИ N КВ 17/100, температура тела повышается на 0,8-1,0 o С и нормализуется к 5-6 дню после вакцинации, отек в месте введения вакцины не превышает 80 см 2 и начинает уменьшаться с 8-10 дня. В группе животных, иммунизированных адъювант-вакциной из штамма B.melitensis N «Невский-13», температура тела повышалась в среднем на 1,2-1,5 o С и приходила в норму к 7-9 дню. Отек тканей в месте введения вакцины в среднем 100-120 см 3 . Заметное уменьшение величины отека отмечают через 15-20 дней после иммунизации.

Таким образом, испытанную вакцину из штамма B.abortus ВГНКИ N КВ 17/100 можно отнести к слабореактогенным масляным адъювантвакцинам.

Пример 5. Определяют антигенные свойства адъювант-вакцины из штамма B. abortus ВГНКИ N КВ 17/100 (серия 2) в опыте на телках трех-четырех месячного возраста. Вакцину вводят под кожу в область подгрудка в дозе 3 см 3 42 телкам. Через 15 и 30 дней после иммунизации у животных берут кровь и исследуют в РА и РСК с единым бруцеллезным антигеном (S-антиген).

Все животные иммунизированные адъювант-вакциной не реагируют на бруцеллез. Пример 6. Определяют антигенные свойства адъювант-вакцины из штамма B. abortus ВГНКИ N КВ 17/100 (серия 3) в опыте на телках 14-17-месячного возраста, ранее иммунизированных живой слабоагглютиногенной вакциной из штамма B.abortus N 82. Адъювант-вакцину в дозе 3 см 3 вводят под кожу в область подгрудка 70 телкам. Через 15 и 30 дней после иммунизации у животных берут кровь и исследуют на бруцеллез в РА и РСК с единым бруцеллезным антигеном.

Все животные ревакцинированные адъювант-вакциной не реагируют на бруцеллез.

Пример 7. Определяют эффективность адъювант-вакцины из штамма B.abortus ВГНКИ N КВ 17/100 для профилактики бруцеллеза крупного рогатого скота в условиях контролируемого эпизоотологического опыта.

Телок трех-четырех месячного возраста (пример 5) и 14-17-месячного возраста (пример 6), иммунизированных адъювант-вакциной из штамма B.abortus ВГНКИ N КВ 17/100, содержат в условиях хозяйства неблагополучного по бруцеллезу рогатого скота, обеспечивающих контакт с 21 коровой больной бруцеллезом.

Иммунизированные адъювант-вакциной животные не заболевают бруцеллезом в течение шести месяцев, что указывает на высокую эффективность препарата.

Пример 8. Определяют возможность использования адъювант-вакцины из штамма B.abortus ВГНКИ N КВ 17/100 для провокации синтеза специфических антител у больных бруцеллезом коров, не реагирующих в серологических реакциях, принятых для диагностики бруцеллеза. Коров, ранее реагировавших на бруцеллез (в РА и РСК) и утративших титры в серологических реакциях, принятых для диагностики бруцеллеза, иммунизируют адъювант-вакциной из штамма B.abortus КВ 17/100 в дозе 3 см 3 . Вакцину вводят под кожу в область подгрудка. Через 15 и 3 дней после иммунизации у животных берут кровь и исследую сыворотку в РА и РСК.

После иммунизации животные с хронической формой бруцеллеза положительно реагируют в серологических реакциях в диагностических титрах и идентифицируются как больные.

Таким образом, адъювант-вакцина из штамма B.abortus КВ 17/100 провоцирует появление положительных серологических реакций у нереагирующих на бруцеллез больных животных, что способствует скорейшему выздоровлению больных бруцеллезом животных.

Использование адъювант-вакцины на основе нового штамма B.abortus ВГНКИ N КВ 17/00 в ветеринарной практике позволит повысить эффективность мероприятий по борьбе с бруцеллезом крупного рогатого скота.

Вакцина против бруцеллеза крупного рогатого скота, содержащая инактивированный антиген бруцелл, неполный адъювант Фрейнда и физиологический раствор, отличающаяся тем, что она в качестве инактивированного антигена бруцелл содержит инактивированную с гидратом окиси алюминия бактериальную массу штамма Brucella abortus ВГНКИ N КВ 17/100 с концентрацией 300 — 400 10 9 микробных клеток в 1 см 3 при следующем соотношении компонентов, об.%: Инактивированная с гидратом окиси алюминия бактериальная масса штамма Вrucella abortus ВГНКИ N КВ 17/100 с концентрацией 300 — 400 10 9 микробных клеток в 1 см 3 — 40 — 50 Неполный адъювант Фрейнда — 45 — 55 Физиологический раствор — Остальноел

источник

Бруцеллёз не только крупного, но и мелкого рогато­го скота на протяжении многих лет остается одним из самых распространённых заболеваний в Казахстане. Как предотвратить болезнь с помощью вакцинации – читайте в интервью с доктором ветеринарных наук, про­фессором, академиком НАН РК Николаем Петровичем Ивановым (на снимке).

— Почему одной из самых распространённых болез­ней среди КРС в Казахстане на протяжении многих лет остается бруцеллёз?

– Согласно данным ветери­нарной статистики, около 20% имеющегося поголовья сель­скохозяйственных животных является неблагополучным. Проблема повсеместной лик­видации бруцеллеза среди животных представляет зна­чительные трудности из-за: его широкого распростране­ния, способности возбудите­ля к обитанию в организме са­мых разнообразных видов жи­вых существ, а также, в ряде случаев, латентного (не прояв­ляя себя) течения инфекции и связанные с ним сложности диагностики и специфической профилактики заболевания.

— Первое, что нужно пред­принять с целью недопу­щения заражения скота бруцеллёзом?

-Выполнять полный ком­плекс организационно-хозяй­ственных, ветеринарно-сани­тарных и специальных ветери­нарных мероприятий. Все эти меры должны быть отражены в плане противобруцеллезных мероприятий, который дол­жен быть комплексным (воз­действовать на все три звена эпизоотической цепи), своев­ременным и реально выпол­нимым (согласно имеющим­ся финансовым и материаль­но-техническим средствам). В нем должны быть указаны мероприятия, сроки их испол­нения и ответственные лица.

— А, что нужно предпри­нять уже в случае появле­ния болезни среди крупного рогатого скота?

-При появлении инфекции нужно:

  1. заменить все неблагопо­лучное поголовье здоровыми, то есть не инфицированными животными;
  2. проводить регулярные (че­рез каждые 15-20 дней) диа­гностические исследования с последующим выделением и убоем выявленных больных животных;
  3. применять вакцинные пре­параты с последующими, по­ствакцинальными исследова­ниями, согласно инструкции по применению вакцины.
Читайте также:  Лечение бруцеллеза для беременных

— Какие, в данном случае, существуют виды и назна­чения вакцин?

– Существующие противо­бруцеллёзные вакцины услов­но подразделяются на следу­ющие группы, которые разли­чаются по антигенности, реак­тогенности, иммуногенности и другим признакам.

1.Агглютиногенные. Эти препараты являются иммуно­генами. Но их применение не рекомендуется для взросло­го поголовья, так как они ин­дуцируют антитела, которые в последующем не позволя­ют проводить диагностические исследования.

2.Слабоагглютиногенные. Они выгодно отличаются от первой группы, так как созда­ют возможность проводить ди­агностические исследования в относительно короткие сро­ки поствакцинального пери­ода. Одной из наиболее рас­пространённых в нашей стра­не вакцин для иммунизации против бруцеллёза крупного рогатого скота является вак­цина из штамма В.abortus 82. Отрицательная сторона этого препарата – чрезмерная реак­тогенность. В организме бере­менных животных эта вакцина вызывает аборты, что сдержи­вает её применение на стель­ном поголовье крупного рога­того скота.

3.Неагглютиногенные. Наз- ванные вакцины обладают вы­раженными провоцирующими свойствами. В организме ла­тентно больных животных они обостряют течение инфекции, то есть позволяют выявить максимальное количество ин­фицированных особей.

4.Инактивированные вак­цины. К н им о тносятся п ре­параты из агглютиногенных и неагглютиногенных штам­мов. Эти вакцины, в том чис­ле Казахского НИВИ находят­ся на стадии производствен­ных испытаний и пока не име­ют широкого практического применения.

— В каких областях Казахстана наиболее рас­пространена болезнь?

– Наибольшее число небла­гополучных пунктов и количе­ство больных животных среди КРС отмечается в северных и центральных регионах страны, а мелкий рогатый скот чаще по­ражён на юге и юго-востоке ре­спублики. В некоторых обла­стях возрастает число случаев заболевания людей.

— Что включают в себя про­тивобруцеллёзные мероприятия?

– Специальные противо­бруцеллёзные мероприятия включают своевременную и качественную диагностику, в особых случаях применение средств специфической про­филактики и антибактериаль­ных препаратов. Для выявле­ния источника инфекции, с це­лью последующей его ликви­дации, используют различные диагностические приёмы. К примеру, серологические ме­тоды и аллергическая проба базируются на иммунологиче­ских реакциях. Следует особо отметить, что иммунологиче­ская реактивность животных тесно связана с видовыми, ин­дивидуальными и возрастными особенностями организма.

Помимо этого,содержать не­вакцинированное поголовье к настоящему времени возмож­но только при отсутствии угро­зы заражения животных. В дру­гих хозяйствующих субъектах должна быть предусмотрена иммунизация молодняка (по­сле предварительного сероал­лергического исследования) и возможна повторная вакцина­ция половозрелых животных за 2-3 месяца до осеменения.

А главное, во всех случа­ях нужно использовать вакци­ны и методы их применения, разрешённые для иммуниза­ции животных на территории Республики Казахстан.

— Кто наиболее чувстви­те лен к бруцеллёзной инфекции?

– Наиболее чувствительными и восприимчивыми к бруцеллез­ной инфекции являются парно­палые, половозрелые, но от­носительно молодые особи на пике их гормональной активно­сти (половозрелые тёлки, ярки, козочки, нетели или первотель­ные и беременные животные). Ведь с возрастом реактивность организма животных снижается. Нередко, когда среди «старого» поголовья много больных, име­ющих отрицательные показа­ния диагностических реакций. Особого внимания в диагности­ческой работе, благодаря высо­кой разрешающей способности, заслуживают тест ELISA (ИФА) и полимеразо-цепная реакция (ПЦР).

— Есть ли какие-то но­вые современные мето­ды вакцинации КРС против бруцеллёза?

Уместно отметить, что в со­временных условиях особо­го внимания заслуживает так называемый «конъюнктиваль­ный» метод иммунизации. Известно, что через слизистую оболочку конъюнктивы глаза в организм могут поступать раз­личные вещества, в том чис­ле и антигены. При конъюн­ктивальном методе иммуни­зации, как показали результа­ты исследований, благодаря проникновению антигена по слёзно-носовому каналу в но­совую полость, площадь его всасывания резко увеличива­ется, что обеспечивает индук­цию иммунитета, не уступа­ющего таковому при подкож­ном методе вакцинации. При этом резко снижается период циркуляции в крови антител, улавливаемых стандартны­ми антигенами, что позволяет своевременно проводить диа­гностические исследования и, безусловно, выгодно отличает этот метод от других.

источник

Наставление по применению сухой живой вакцины из слабоагглютиногенного штамма №82 бруцелла абортус против бруцеллеза крупного рогатого скота

НАСТАВЛЕНИЕ ПО ПРИМЕНЕНИЮ СУХОЙ ЖИВОЙ ВАКЦИНЫ ИЗ СЛАБОАГГЛЮТИНОГЕННОГО ШТАММА № 82 БРУЦЕЛЛА АБОРТУС ПРОТИВ БРУЦЕЛЛЕЗА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА
(Утверждено Главным управлением ветеринарии Министерства сельского хозяйства СССР 18 февраля 1977 г.

взамен временного наставления от. 25 января 1974 г.

и указаний от 8 мая 1974 г.)
1. Общие положения
1.1. Сухая живая вакцина против бруцеллеза крупного рогатого скота готовится из слабоагглютиногенного штамма № 82 бруцелла абортус. Выпускается в ампулах или флаконах и представляет собой аморфную массу коричневато-желтого цвета,

При разведении вакцины физиологическим раствором поваренной соли, дистиллированной или кипяченой водой образуется равномерная взвесь бруцелл беловато-желтоватого цвета

1.2. На этикетках коробок с сухой вакциной должны быть указаны название вакцины, товарный знак и наименование биопредприятия, ее изготовившего, номер серии и номер госконтроля, дата изготовления, срок годности, количество доз в ампуле (флаконе) и в коробке, условия хранения вакцины.

На каждой ампуле (флаконе) с вакциной должна быть надпись с указанием названия вакцины, номера серии и срока годности препарата.

Ампулы или флаконы, не имеющие указанной надписи, а также разбитые, с трещинами, содержащие посторонние примеси или плесень, с истекшим сроком годности препарата, упакованные в коробки без этикеток бракуют и обеззараживают кипячением.

1.3. Сухая живая вакцина подлежит хранению в холодильных камерах или в темном сухом помещении при температуре не выше 8°С. При хранении вакцины при температуре выше оказанной активность препарата теряется в силу отмирания микробных клеток. В жаркое время года вакцину доставляют к месту применения в термочемоданах или термосах со льдом.

Срок годности сухой живой вакцины 12 месяцев со дня ее изготовления

1.4. Перед применением сухую живую вакцину разводят физиологическим раствором, дистиллированной или остуженной кипяченой водой из расчета, чтобы одна доза для прививки крупному рогатому скоту составляла 5 мл разведенной вакцины. Для этого шейку ампулы в верхней части протирают смоченной спиртом ватой и обламывают. В ампулу (флакон) стерильным шприцем и иглой вливают стерильный физиологический раствор (3–5 мл), дистиллированную или кипяченую воду. Ампулы (флаконы) осторожно встряхивают до превращения массы в равномерную взвесь

Разведенную в ампуле (флаконе) вакцину шприцем с длинной иглой отсасывают и переносят в стерильный флакон (емкостью 50–200 мл) с предварительно налитым в него физиологическим раствором (дистиллированной или кипяченой водой). С учетом жидкости, использованной для растворения вакцины в ампулах, во флаконе должно быть столько физиологического раствора (дистиллированной или кипяченой воды), сколько необходимо для приготовления количества доз вакцины в разведенном виде для прививки животным.

Разведенная вакцина пригодна для применения в течение четырех часов, позднее она теряет активность и подлежит уничтожению путем кипячения в течение 30 минут. Обезвреживанию кипячением подлежат также ампулы и флаконы из-под вакцины, шприцы и иглы.

1.5. Вакцину животным вводят подкожно в область средней трети шеи в дозе 5 мл.

Для прививки каждого животного используют отдельную иглу.

Шприцы и иглы стерилизуют кипячением. Во время прививок допускается стерилизация игл путем протирания их спиртом Место введения вакцины предварительно протирают 70%-ным спиртом или 0,5%-ным раствором кристаллической карболовой кислоты.

1.6. Прививки животных сухой живой вакциной разрешается проводить только ветеринарным врачам или ветеринарным фельдшерам со средним специальным образованием под контролем ветврача.

1.7. Привитых животных метят путем одного выщипа треугольной формы у основания верхней части левого уха, а ревакцинированных – двумя такими выщипами.

1.8. На проведение вакцинации животных в каждом хозяйстве составляют акт, в котором записывают данные об эпизоотическом состоянии хозяйства (фермы, стада) по бруцеллезу за последние два года, результаты исследования на бруцеллез животных перед вакцинацией, количество и возраст вакцинированных животных, номер серии вакцины и другие сведения о препарате. Один экземпляр акта направляют главному ветврачу района.

1.9. В случае, если после вакцинации имели место какие либо осложнения, об этом необходимо сообщить Всесоюзному государственному научно-контрольному институту ветпрепаратов (123022, Москва, Звенигородское шоссе, 5), Казанскому ветеринарному институту имени Н. Э. Баумана (Казань, 74, Ветгородок) и биопредприятию, изготовившему вакцину, и одновременно выслать в их адрес по 3–5 невскрытых ампул (флаконов) с вакциной из серии, вызвавшей осложнения.

1.10. В хозяйствах (на фермах) и населенных пунктах, где применяется живая вакцина из штамма № 82 против бруцеллеза крупного рогатого скота, строго проводят весь комплекс ветеринарных, санитарных, дезинфекционных, организационно-хозяйственных и других мероприятий, предусмотренных действующей инструкцией по борьбе с бруцеллезом животных и планом основных мероприятий по оздоровлению животноводства от этой инфекции, утвержденным Министерством сельского хозяйства СССР.
2. Иммунизация (вакцинация) животных
2.1. Сухую живую вакцину из штамма № 82 применяют для прививки крупному рогатому скоту в неблагополучных и угрожаемых по бруцеллезу хозяйствах (фермах, стадах), в том числе племенных. Допускается прививать вакцину животным, принадлежащим населению.

Вакцину вводят животным начиная с 4-месячного возраста.

У вакцинированных животных после прививки может повышаться температура тела, а на месте введения препарата появляется горячая болезненная припухлость, которая постепенно рассасывается без осложнений.

животные плохой упитанности или больные какой-либо болезнью, а также в период вспышки в хозяйстве острого инфекционного заболевания скота (ящур, сибирская язва и др.);

стельные животные, а также животные, находящиеся на откорме;

коровы, привитые в возрасте старше 2 лет противобруцеллезной вакциной из штамма № 19;

молодняк, полученный от реагирующих при исследовании на бруцеллез коров, ц молодняк, привитый вакциной из штамма № 19 против бруцеллеза;

быки-производители в благополучных по бруцеллезу племенных хозяйствах, а также бычки, отобранные к продаже другим хозяйствам.

2.2. В неблагополучных по бруцеллезу хозяйствах, в том числе в благополучных фермах таких хозяйств, телок прививают двукратно- первый раз в 4–5-месячном возрасте, второй раз – за 2–3 месяца до осеменения.

В благополучных (угрожаемых) по бруцеллезу хозяйствах (фермах) телок вакцинируют однократно начиная с 4-месячного возраста, но не позднее чем за 2 месяца до осеменения.

2.3. В неблагополучных по бруцеллезу хозяйствах телок в 4–5-месячном возрасте (при подсосном методе выращивания – после отъема от матерей) исследуют (РА и РСК, РДСК) на бруцеллез, реагирующих (РА в титре 50 ME и выше или положительная РСК, РДСК) удаляют, а остальных иммунизируют вакциной и содержат их на отдельной ферме (участке).

За 2–3 месяца до осеменения привитых вакциной телок исследуют (РА и РСК) на бруцеллез, реагирующих (РА в титре 100 ME и выше или положительная РСК) удаляют из стада, а остальных повторно прививают вакциной из штамма № 82,осеменяют и оставляют под наблюдением до отелов. Исследование на бруцеллез ревакцинированных перед осеменением животных проводят через 1–2 месяца после родов.

Если отелы прошли нормально и при исследовании на бруцеллез не было выявлено положительно реагирующих животных, в дальнейшем это поголовье исследуют на бруцеллез не реже 2 раз в год. При выявлении положительно реагирующих (РА в титре 100 ME и выше или положительно РСК) животных (их удаляют из стада) все поголовье исследуют па бруцеллез ежемесячно до получения двукратного подряд отрицательного результата по стаду.

При наличии в хозяйстве телок в возрасте старше 8 месяцев их исследуют на бруцеллез, реагирующих (РА в титре 50 ME и выше или положительная РСК, РДСК) удаляют, а остальных не позднее, чем за 2 месяца до осеменения вакцинируют, осеменяют и формируют в отдельное стадо. Исследование на бруцеллез привитых животных затем проводят после отелов и далее с ними поступают, как указано выше в настоящем пункте.

2.4. В благополучных (у рожаемых) по бруцеллезу хозяйствах вакцину из штамма № 82 допускается применять для иммунизации животных с профилактической целью только в случае наличия прямой угрозы заноса возбудителя болезни и заражения скота (отгонно-пастбищное содержание животных, расположение благополучных ферм вблизи от неблагополучных хозяйств и т. п.).

У телок с 4-месячного возраста берут кровь и исследуют на бруцеллез (РА и РСК, РДСК, согласно наставлениям по постановке и учету этих реакций), затем животных вакцинируют. После прививки телок исследуют на бруцеллез перед осеменением и затем через 1–2 месяца после отела. Если у вакцинированных животных были аборты, для выяснения их причины все плоды и кровь абортировавших животных направляют в ветеринарную лабораторию для исследования, а животных изолируют. При установлении поствакцинального характера абортов (выделение культуры вакцинного штамма) абортировавших животных оставляют в стаде.

2.5. В неблагополучных по бруцеллезу хозяйствах (фермах), оздоровление которых не достигается длительное время, коров, выращенных из телок, привитых вакциной из штамма № 82 однократно в возрасте 4–8 месяцев или перед осеменением, а также коров, привитых однократно этой вакциной после отела (по мере растела), допускается ревакцинировать вакциной из штамма № 82 однократно, но не ранее чем через 2 года после первой вакцинации. При этом перед прививкой животных исследуют на бруцеллез (РА и РСК), реагирующих (РА в титре 100 ME и выше или положительная РСК) удаляют из стада, остальных ревакцинируют. Коров после ревакцинации исследуют на бруцеллез (РА и РСК) через 6 месяцев и затем через 30 дней, при необходимости исследования продолжают ежемесячно до получения двукратного подряд отрицательного результата по стаду. В дальнейшем поголовье скота проверяют на бруцеллез не реже 1 раза в год. Животных, при исследовании которых получены положительные результаты (РА в титре 100 ME и выше или положительная РСК), во всех случаях удаляют из стада.

Ревакцинацию коров вакциной из штаума № 82 проводят только с разрешения ветеринарного отдела министерства сельского хозяйства автономной республики, областного (краевого) управления сельского хозяйства или главного управления (управления) ветеринарии министерства сельского хозяйства союзной республики, не имеющей областного деления.

Примечание. Если в неблагополучном хозяйстве имеются телки случного возраста или коровы, ранее (до выхода в свет настоящего наставления) привитые однократно против бруцеллеза в возрасте 5–8 месяцев вакциной из штамма № 19, телок допускается ревакцинировать вакциной из штамма № 82 за 2–3 месяца до осеменения, а коров – после их отела (через 15–25 дней).

После ревакцинации животных исследуют на бруцеллез и в дальнейшем с ними поступают в порядке, как указано выше в настоящем пункте и в пункте 2.3 (абзацы второй, третий).

2.6. В отдельных случаях в неблагополучных по бруцеллезу хозяйствах вакциной из штамма № 82 прививают быков-производителей (пробников). Перед прививкой животных исследуют на бруцеллез (РА и РСК, РДСК), реагирующих удаляют и остальных прививают вакциной. После вакцинации их исследуют (РА и РСК) через 4–5 месяцев и затем каждые 30 дней до получения двукратных подряд отрицательных результатов исследований по группе животных.

источник

Автор: Шубина Е. А., технолог, кандидат биологических наук, ФГУП «Щелковский биокомбинат»

Опубликовано: 14 февраля 2011

Бруцеллез (Brucellosis) — инфекционная, хронически протекающая болезнь домашних, некоторые виды диких животных и человека, характеризующаяся поражением многих систем жизнеобеспечения, нарушением функций сосудистой, пищеварительной, мочеполовой систем и системы воспроизводства.

Сообщение об этом заболевании, по данным Хаджеса (1897), встречается уже у древнегреческого врача Гиппократа. Первое научное описание бруцеллеза было сделано в 1861 году английским военным врачом Мэрстоном. Широкое распространение среди людей отмечалось в 18 и 19 веках в странах, расположенных в бассейне Средиземного моря.

Изучая причины мальтийской лихорадки, английский врач Д. Брюс в 1886 – 1887 гг. установил, что виновником ее является специфический микрококк, названный им Micrococcus melitensis. Дальнейшие исследования показали, что источником возбудителя мальтийской лихорадки являются козы, пораженные инфекцией, а причиной заражения людей — потребление молока от таких коз. Несколько позже Micrococcus melitensis был выделен у овец.

В1897 г. датские ученые Банг и Стриболд установили, что массовые аборты у коров вызывает микроорганизм, названные B. abortus bovis. В 1914 г. Траум обнаружил очень сходный микроорганизм, названный Br. abortus suis, при массовых абортах у свиней.

Для диагностики бруцеллеза в 1897 г. Райтом была предложена серологическая реакция агглютинации, а в 1922 г. Берне разработал внутрикожную аллергическую пробу, облегчающую распознавание болезни.

Долгое время мальтийская лихорадка у людей и массовые аборты у домашних животных считались самостоятельными заболеваниями. В 1918 – 1920 гг. Ивенс, Мейер и Фезье, изучая биологические свойства возбудителя мальтийской лихорадки и массовых абортов у крупного рогатого скота, обнаружили их чрезвычайную близость. Эти исследования явились основанием объединить указанных возбудителей, в том числе и возбудителя массовых абортов у свиней, в одну родовую группу под наименованием Brucella (в честь Брюса), а вызываемые ими заболевания именовать бруцеллезом.

В России начало изучения бруцеллеза было положено работами Е. И. Марциновского (1911), но детальному изучению заболевание подверглось в различных местностях СССР лишь с 1935 г. Большой вклад в изучение бруцеллеза сельскохозяйственных животных внесли отечественные ученые: С. Н. Вышелесский, П. Ф. Здродовский, П. А. Вершилова, М. К. Юсковец, Е. С. Орлов, Р. А. Цион, А. П. Бессонов и др. Были всесторонне изучены биологические свойства возбудителя, усовершенствованы методы диагностики, показаны значение в борьбе с бруцеллезом вакцинальной профилактики и пути ее совершенствования.

Клинические признаки бруцеллеза у крупного рогатого скота

Длительность инкубационного периода 2 – 3 недели. Первым показателем развившегося инфекционного процесса служит появление в крови инфицированных животных агглютининов в постепенно нарастающих титрах.

У коров основным клиническим признаком бруцеллеза является аборт и реже рождение нежизнеспособного приплода. Коровы, заразившиеся до покрытия, в большинстве случаев приносят нормальный приплод. Аборт чаще всего происходит на 5 – 8-м месяце. За 1 – 2 дня до наступления аборта у коров отмечается припухание наружных половых органов, выделение из влагалища бесцветной или буроватой жидкости и набухание вымени. После аборта происходит задержка последа и развивается эндометрит, сопровождающийся обильными слизисто-гнойными или гнойно-фибринозными выделениями. При тяжело протекающем эндометрите повышается температура тела, снижаются удои, отмечается потеря веса, убыстряется СОЭ; умеренный лейкоцитоз. Эндометритам нередко сопутствуют серозные или серозно-катаральные маститы. В процессе могут вовлекаться яичники и фаллопиевы трубы, что приводит к нарушению полового цикла и временному или стойкому бесплодию.

У отдельных животных в связи с абортом или независимо от него можно наблюдать развитие серозных бурситов или серофибринозных артритов. Последние в большинстве случаев возникают в суставах передних конечностей — запястном, путовом, коленном, локтевом. У быков бруцеллез, хотя и редко, сопровождается развитием орхитов и эпидидимитов.

Лабораторная диагностика бруцеллеза основана на результатах бактериологического и серологического исследований. Бактериологическое исследование в основном применяют при первичной постановке диагноза на бруцеллез в ранее благополучных хозяйствах.

В лабораторию направляются пробы крови (сыворотки) для серологического исследования, абортивный плод с плодными оболочками, околоплодную жидкость, истечения из родовых путей или желудок плода, кусочки печени, селезенки, пробы молока (последние порции). При убое животных берут паренхиматозные органы, лимфатические узлы, пораженные суставы, у самцов — семенники. Объектом исследования могут быть молочные продукты (брынза, сыр, масло), объекты внешней среды.

При массовых диагностических исследованиях ставят пробирочную РА, роз бенгал пробу (РА на стекле), РСК, РДСК, кольцевую реакцию с молоком (КР). Диагностикумы для этих исследований, а также бруцеллин ВИЭВ для аллергической диагностики готовятся на Щелковском биокомбинате.

Для специфической профилактики бруцеллеза ФГУП «Щелковский биокомбинат» выпускает живые сухие вакцины из штамма B. abortus 19, 82 и 75/79-АВ; инактивированную адъювант — вакцину из штамма B. abortus КВ 17/100.

По данным К. В. Шумилова до 1952 года борьба с бруцеллезом крупного рогатого скота в нашей стране сводилась к проведению диагностических исследований и удалению из стад больных животных, без применения противобруцеллезных вакцин. В связи с осложнением эпизоотической ситуации в 1953 году в систему противобруцеллезных мероприятий была включена иммунизация животных вакциной из штамма B. abortus 19.

Вакцину из штамма B. abortus 19 применяли до 1970 года. За 20 лет применения вакцины многие хозяйства, даже области, были оздоровлены от болезни. Однако в регионах с широким распространением бруцеллеза эффективность оздоровительных мероприятий оказалась низкой. В первую очередь, это было обусловлено высокой агглютиногенностью вакцины. Агглютинины и комплементсвязывающие антитела, вырабатывающиеся в ответ на введение вакцины, сохраняются в организме животных до 5 – 8 лет и затрудняют дифференциацию иммунизированных животных от больных бруцеллезом.

С 1971 по 1974 год вакцину из штамма B. abortus 19 использовали только на телках 5 – 8 месячного возраста. С 1974 года и по настоящее время в России в комплексе противобруцеллезных мероприятий применяются вакцины из штаммов B. abortus 82 и 19. Живая сухая вакцина против бруцеллеза из слабоагглютиногенного штамма № 82 отличается от вакцины из штамма 19 слабым серологическим ответом с быстрым снижением уровня гуморальных антител, что позволяет при помощи серологических реакций дифференцировать вакцинированных животных.

За 30 лет работы с применением вакцины из штамма B. abortus 82 и смены пяти поколений коров к 2004 году (К. В. Шумилов) количество неблагополучных по бруцеллезу пунктов и заболевших животных значительно сократилось.

Сухая живая вакцина против бруцеллеза крупного рогатого скота из штамма B. abortus 75/79-АВ разработана сотрудниками ВГНКИ и Алтайской НИВС с использованием культуры штамма 75/79, выделенного от коровы, ранее иммунизированной вакциной из штамма B. abortus 82. После многократных пассажей выделенного штамма через организм морских свинок и телок и целенаправленной селекции на питательных средах, был получен новый вакцинный штамм 75/79-АВ. Вакцины не обладает абортогенными свойствами, что дает возможность проводить иммунизацию маточного поголовья независимо от сроков стельности. Вакцина является слабоагглютиногенной; агглютинины и комплементсвязывающие антитела регистрируются у привитых животных в течение трех месяцев после иммунизации, что делает возможным их исследование по истечении указанного срока. У животных, иммунизированных вакциной, выраженный иммунитет сохраняется в течение года, что позволяет за указанный срок оздоравливать неблагополучные хозяйства от бруцеллеза.

Значительный интерес для практики представляет адъювант-вакцина против бруцеллеза крупного рогатого скота, сконструированная во ВГНКИ. Вакцина представляет собой эмульсию типа «вода в масле», состоящую из инактивированной культуры штамма B. abortus КВ 17/100 и масляного адъюванта.

Штамм B. abortus КВ 17/100, находящийся в R-форме, получен путем целенаправленной селекции по культуральным, морфологическим, биохимическим и антигенным свойствам из вакцинного штамма B. abortus 104М, находящегося в S-форме. Адъювант-вакцина не индуцирует синтез S-бруцеллезных антител в диагностических титрах у животных, не сенсибилизированных бруцеллами. Адъювант-вакцина индуцирует синтез S-бруцеллезных антител у крупного рогатого скота с латентной формой бруцеллеза, что позволяет за счет быстрого удаления из стад таких животных, ускорить оздоровление хозяйств, неблагополучных по бруцеллезу.

Адъювант-вакцина не абортогенна и может быть использована для иммунизации маточного поголовья крупного рогатого скота независимо от сроков стельности.

источник

Вакцина предназначена для профилактики бруцеллеза крупного рогатого скота. Вакцина содержит в качестве антигена инактивированную с гидратом окиси алюминия бактериальную массу штамма B.abortus ВГНКИ N КВ 17/100. Вакцина содержит также неполный адьювант Фрейнда и физиологический раствор. Использование новой вакцины в ветеринарной практике позволяет в 1,5 — 2 раза повысить эффективность противобруцеллезных мероприятий за счет повышения иммуногености и снижения агглютиногенности вакцины. 2 табл.

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к вакцине для профилактики бруцеллеза крупного рогатого скота.

Бруцеллез крупного рогатого скота — хроническое зооантропонозное заболевание, распространенное во многих странах мира, наносящее большой экономический ущерб скотоводству и представляющее серьезную опасность здоровью людей.

Основным средством борьбы с бруцеллезом крупного рогатого скота, особенно в зонах его широкого распространения, является вакцинация всего поголовья и своевременное удаление из стада больных животных.

Известна вакцина против бруцеллеза крупного рогатого скота, содержащая антиген из штамма Brucella abortus 19 и сахарозо-желатиновый стабилизатор [1].

Недостатками данной вакцины являются высокая агглютиногенность, так как в крови животных, иммунизированных данной вакциной в течение нескольких месяцев, а иногда и нескольких лет обнаруживают антитела в принятых для диагностики бруцеллеза серологических реакциях, что препятствует выявлению больных животных в вакцинированном стаде. Вакцину нельзя применять для иммунизации стельных коров, так как она вызывает аборты у отдельных животных.

Известна также вакцина против бруцеллеза сельскохозяйственных животных, преимущественно крупного рогатого скота, содержащая инактивированный антиген из штамма Brucella melitensis N «Невский-13», неполный адъювант Фрейнда и физиологический раствор [2].

Недостатком данной вакцины является то, что в крови иммунизированных животных до 90-120 дней сохраняются агглютинирующие и комплеменсвязывающие антитела, улавливаемые в принятых для диагностики бруцеллеза серологических реакциях, которые препятствуют своевременному выявлению и удалению из стада больных бруцеллезом коров.

Целью изобретения является разработка высокоиммуногенной вакцины против бруцеллеза крупного рогатого скота с низкой антигенной активностью.

Цель достигается тем, что вакцина в качестве антигена содержит инактивированную с гидратом окиси алюминия бактериальную массу штамма B.abortus ВГНКИ N КВ 17/100 с концентрацией 300-400х10 9 бактерий в 1 см 3 , при следующем соотношении компонентов вакцины, об.%: инактивированная с гидратом окиси алюминия бактериальная масса штамма B.abortus N КВ 17/100 с концентрацией 300х10 9 -400х10 9 микробных клеток в 1 см 3 40-45,0; неполный адъювант Фрейда 50,0-55,0; физиологический раствор остальное.

Для изготовления вакцины используют штамм Brucella abortus ВГНКИ N КВ 17/100.

Штамм B. abortus N КВ 17/100 получен путем целенаправленной селекции по антигенности и иммуногенной активности.

Штамм B. abortus депонирован в коллекции микроорганизмов Всероссийского государственного научно-исследовательского института контроля, стандартизации и сертификации ветеринарных препаратов, регистрационный номер КВ 17/100 ДЕП.

Штамм B. abortus N КВ 17/100 характеризуется следующими признаками и свойствами.

Бруцеллы штамма — короткие грамотрицательные палочки с закругленными концами, расположенные изолированно, попарно и реже в виде коротких цепочек. Без капсулы, спор не образуют. Размер 1,3-1,5 х 0,6-0,8 мкм.

Культура штамма хорошо растет в аэробных условиях на плотных и жидких питательных средах, предназначенных для культивирования бруцелл. На плотных питательных средах (4-5 сут инкубирования при 37-38 o С) растет в виде круглых, плоских, с нечетко контурированным краем, матовых колоний с диаметром 2,5-3,0 мм. При окрашивании раствором кристаллического фиолетового 1/2000 (по Уайт-Вилсону) 100% колоний окрашиваются как R-форма: фиолетовый центр и светлофиолетовый широкий ободок.

На жидких питательных средах на 2-4 сут инкубирования: легкая опалесценция и узкое пристеночное голубоватое кольцо на границе среды.

Культура штамма растет на средах содержащих фуксин, тионин в концентрации 1: 50000, бис-трифенилангидрокарбинола оксалат в концентрации 1:100000 (маркер), пенициллин 5ЕД/см 3 и не растет на среде, содержащей стрептомицина сульфат 5 мкг/см 3 . Продуцирует Н2S (6-8 мм). Лизируется фагом Тб.

Культура штамма агглютинируется R-антибруцеллезной сывороткой и не агглютинируется S-антибруцеллезной сывороткой. Штамм не обладает типоспецифической агглютинабельностью и не агглютинируется А и М монорецепторными сыворотками.

Штамм безвреден для человека и сельскохозяйственных животных.

Остаточная вирулентность: ИД для мышей линии С57 — Блек/6 — 5500 микробных клеток, что соответствует уровню аттенуированных вакцинных штаммов.

Культура штамма защищает от заражения не менее 50% иммунизированных животных.

Пример 1. Штамм Brucella abortus ВГНКИ N КВ 17/100 культивируют на плотной питательной среде или в ферментере на жидкой питательной среде при 37-38 o С в течение 72 ч.

Выращенную культуру с плотной питательной среды смывают физиологическим раствором, добавляют 0,3-0,5% формалина и 0,3-0,5% гидрата окиси алюминия, формалин и гидрат окиси алюминия вносят в ферментер сразу после окончания культивирования.

После инактивации бактериальную массу отстаивают, декантируют надосадочную жидкость и устанавливают концентрацию бактериальной массы, равную 300-400х10 9 микробных клеток в 1 см 3 . Инактивированную с гидратом окиси алюминия бактериальную массу штамма B.abortus ВГНКИ N КВ 17/100 в количестве 40-45% от объема смешивают с неполным адъювантом Фрейнда в количестве 45-55% от объема с доведением до 100% физиологическим раствором.

Вакцину расфасовывают во флаконы при включенной мешалке. Флаконы закрывают резиновыми пробками, обкатывают металлическими колпачками и этикетируют.

Расфасованную вакцину проверяют на стерильность, безвредность и иммуногенность.

Готовая вакцина представляет собой однородную водно-масляную эмульсию белого цвета с коричневым или серым оттенком. При длительном хранении возможно незначительное отслоение адъюванта над эмульсией, что не влияет на качество вакцины.

Получают 3 серии вакцины, приведенные в табл. 1.

Пример 2. Определяют антигенную активность адъювант-вакцины.

Морских свинок (10-14 голов в группе) иммунизируют адъювант-вакциной из штамма B.abortus ВГНКИ N КВ 17/100 (серии N 1, 2, 3), полученной по примеру 1; адъювант-вакциной из штамма B.melitensis N Н-13, экспериментальной адъювант-вакциной из штамма B.abortus N 16/4 (штамм в R-форме) и живой противобруцеллезной вакциной из штамма B.abortus N 19.

Адъювант-вакцины вводят в дозе 0,2 см 3 , живую — 1 млрд. микробных клеток в объеме 1 см 3 под кожу в область паха. Через 15, 30 и 60 дней после иммунизации у животных берут кровь и исследуют в РА с единым бруцеллезным антигеном (S-антиген). Результаты исследований приведены в табл. 2.

Из табл. 2 следует, что все серии предложенной адъювантвакцины из штамма B. abortus ВГНКИ N КВ 17/100 не индуцируют образования агглютининов в сыворотке крови животных и в отличие от адъювант-вакцин из штаммов B.melitensis N «Невский-13», В. abortus N 16/4 и живой вакцины из штамма В.abortus N 19 являются неагглютиногенными, что дает возможность быстро и своевременно выявлять больных вакцинированных животных в случае их заражения. В то же время среднее количество агглютининов в сыворотке крови морских свинок через 15 дней после иммунизации адъювант-вакцинами из штаммов B.melitensis N «Невский-13» — 83,0, B. abortus N 16/4 — 38,3 МЕ/см 3 , а живой вакциной из штамма B. abortus N 19 — 160,0 ME/cм 3 , и в случае заражения больные бруцеллезом животные не могут быть дифференцированы по крайней мере в течение 60 дней от иммунных — незаразившихся, создавая угрозу перезаражения.

Таким образом установлено, что адъювант-вакцина из штамма В.abortus ВГНКИ N КВ 17/100 не индуцирует синтез S-антител в количестве, улавливаемом реакцией агглютинации с единым бруцеллезным антигеном.

Пример 3. Иммуногенную активность новой адъювант-вакцины, полученной по примеру 1 из штамма B.abortus ВГНКИ N 17/100, сравнивают с вакцинами из штаммов B.melitensis N «Невский-13», B.abortus N 16/4 и живой вакциной из штамма B. abortus N 19. Опыт проводят на морских свинках, привитых аналогично примеру 2.

Через 3 мес после прививки морских свинок заражают стандартной культурой контрольного вирулентного штамма В.abortus N 54М/ВГНКИ в дозе 80 микробных клеток (15 ИД50). Спустя 32-35 дней животных убивают и проводят бактериологическое исследование селезенки, печени, костного мозга и лимфатических узлов (всего 10 объектов). Определяют наличие бруцелл вирулентного штамма в лимфатических узлах и внутренних органах животных. Рассчитывают процент защиты (количество незаразившихся животных в процентах от общего их количества в группе) и индекс инфицированности (процентное отношение количества объектов, из которых выделена культура вирулентного штамма, к общему количеству исследованных объектов по группе животных). Результаты исследований приведены в табл. 3.

Таким образом установлено, что адъювант-вакцина из штамма B.abortus ВГНКИ N RD 17/100 всех серий превосходит по иммуногенной активности адъювант-вакцины из штаммов B. melitensis N «Невский-13», B.abortus N 16/4 и не уступает живой вакцине из штамма B.abortus N 19.

Пример 4. Определяют реактогенность адъювант-вакцины из штамма B.abortus ВГНКИ N КВ 17/100 (серия N 1) в опыте на телках трех-четырех месячного возраста в сравнении с адъювант-вакциной из штамма B.meliitensis N «Невский-13». Каждую вакцину вводят 10 телкам под кожу в область подгрудка в дозе 3 см 3 . У вакцинированных животных ежедневно в течение 10 дней измеряют температуру тела и площадь припухлости в месте введения вакцины.

У животных, иммунизированных адъювант-вакциной из штамма B.abortus ВГНКИ N КВ 17/100, температура тела повышается на 0,8-1,0 o С и нормализуется к 5-6 дню после вакцинации, отек в месте введения вакцины не превышает 80 см 2 и начинает уменьшаться с 8-10 дня. В группе животных, иммунизированных адъювант-вакциной из штамма B.melitensis N «Невский-13», температура тела повышалась в среднем на 1,2-1,5 o С и приходила в норму к 7-9 дню. Отек тканей в месте введения вакцины в среднем 100-120 см 3 . Заметное уменьшение величины отека отмечают через 15-20 дней после иммунизации.

Таким образом, испытанную вакцину из штамма B.abortus ВГНКИ N КВ 17/100 можно отнести к слабореактогенным масляным адъювантвакцинам.

Пример 5. Определяют антигенные свойства адъювант-вакцины из штамма B. abortus ВГНКИ N КВ 17/100 (серия 2) в опыте на телках трех-четырех месячного возраста. Вакцину вводят под кожу в область подгрудка в дозе 3 см 3 42 телкам. Через 15 и 30 дней после иммунизации у животных берут кровь и исследуют в РА и РСК с единым бруцеллезным антигеном (S-антиген).

Все животные иммунизированные адъювант-вакциной не реагируют на бруцеллез. Пример 6. Определяют антигенные свойства адъювант-вакцины из штамма B. abortus ВГНКИ N КВ 17/100 (серия 3) в опыте на телках 14-17-месячного возраста, ранее иммунизированных живой слабоагглютиногенной вакциной из штамма B.abortus N 82. Адъювант-вакцину в дозе 3 см 3 вводят под кожу в область подгрудка 70 телкам. Через 15 и 30 дней после иммунизации у животных берут кровь и исследуют на бруцеллез в РА и РСК с единым бруцеллезным антигеном.

Все животные ревакцинированные адъювант-вакциной не реагируют на бруцеллез.

Пример 7. Определяют эффективность адъювант-вакцины из штамма B.abortus ВГНКИ N КВ 17/100 для профилактики бруцеллеза крупного рогатого скота в условиях контролируемого эпизоотологического опыта.

Телок трех-четырех месячного возраста (пример 5) и 14-17-месячного возраста (пример 6), иммунизированных адъювант-вакциной из штамма B.abortus ВГНКИ N КВ 17/100, содержат в условиях хозяйства неблагополучного по бруцеллезу рогатого скота, обеспечивающих контакт с 21 коровой больной бруцеллезом.

Иммунизированные адъювант-вакциной животные не заболевают бруцеллезом в течение шести месяцев, что указывает на высокую эффективность препарата.

Пример 8. Определяют возможность использования адъювант-вакцины из штамма B.abortus ВГНКИ N КВ 17/100 для провокации синтеза специфических антител у больных бруцеллезом коров, не реагирующих в серологических реакциях, принятых для диагностики бруцеллеза. Коров, ранее реагировавших на бруцеллез (в РА и РСК) и утративших титры в серологических реакциях, принятых для диагностики бруцеллеза, иммунизируют адъювант-вакциной из штамма B.abortus КВ 17/100 в дозе 3 см 3 . Вакцину вводят под кожу в область подгрудка. Через 15 и 3 дней после иммунизации у животных берут кровь и исследую сыворотку в РА и РСК.

После иммунизации животные с хронической формой бруцеллеза положительно реагируют в серологических реакциях в диагностических титрах и идентифицируются как больные.

Таким образом, адъювант-вакцина из штамма B.abortus КВ 17/100 провоцирует появление положительных серологических реакций у нереагирующих на бруцеллез больных животных, что способствует скорейшему выздоровлению больных бруцеллезом животных.

Использование адъювант-вакцины на основе нового штамма B.abortus ВГНКИ N КВ 17/00 в ветеринарной практике позволит повысить эффективность мероприятий по борьбе с бруцеллезом крупного рогатого скота.

Вакцина против бруцеллеза крупного рогатого скота, содержащая инактивированный антиген бруцелл, неполный адъювант Фрейнда и физиологический раствор, отличающаяся тем, что она в качестве инактивированного антигена бруцелл содержит инактивированную с гидратом окиси алюминия бактериальную массу штамма Brucella abortus ВГНКИ N КВ 17/100 с концентрацией 300 — 400 10 9 микробных клеток в 1 см 3 при следующем соотношении компонентов, об.%: Инактивированная с гидратом окиси алюминия бактериальная масса штамма Вrucella abortus ВГНКИ N КВ 17/100 с концентрацией 300 — 400 10 9 микробных клеток в 1 см 3 — 40 — 50 Неполный адъювант Фрейнда — 45 — 55 Физиологический раствор — Остальноел

источник

1ампула/4-10 доз №5 в комплекте с растворителем.

однократно накожно или внутрикожно,
ревакцинация через 12 месяцев.

Вакцина бруцеллезная представляет собой лиофилизированную культуру живых микробов вакцин штамма В.abortus 19 ВА, имеет вид однородной аморфной массы белого или желтоватого цвета.

Вакцина бруцеллезная через 20-30 дней после прививки обеспечивает развитие иммунитета продол жительностью 10 12 месяцев, максимальная напряженность иммунитета сохраняется 5-6 месяцев.

Профилактика бруцеллеза козье-овечьего типа у взрослых. Прививкам подлежат лица, выполняющие следующие работы:

  • по заготовке, хранению, обработке сырья и продуктов животноводства, полученных из хозяйств, где регистрируются заболевания скота бруцеллезом;
  • по убою скота, больного бруцеллезом, заготовке и переработке полученных от него мяса и мясопродуктов

Животноводы, ветеринарные работники, зоотехники в хозяйствах, энзоотичных по бруцеллезу. Лица, работающие с живыми культурами возбудителя бруцеллеза.

Прививки следует проводить не позднее, чем за 3-4 недели до начала работы, связанной с риском за ражения.

Перед каждой прививкой у вакцинируемого в обязательном порядке определяют наличие специфического иммунитета с помощью одной из серологических или кожно-аллергических реакций. Прививкам подлежат лица с отрицательной реакцией.

Вакцинацию проводят однократно накожно или подкожно. Одна доза при накожном введении составляет 2 капли и содержит 1*10 10 микробных клеток, при подкожном ведении 0,5 мл и содержит 4*10 8 микробных клеток. Ревакцинацию проводят через 10-12 мес. накожно, используя половинную дозу (5*10 9 ).

Допускается одновременная накожная вакцинация живыми вакцинами против бруцеллеза с прививками против одной из следующих инфекций: ку-риккетсиоза, туляремии и чумы.

Не подлежит применению вакцина, целостность упаковки которой повреждена, с измененными физическими свойствами (посторонние примеси, не растворяющиеся хлопья), с истекшим сроком годности, при нарушении режима хранения.

Вскрытие ампул и процедуру введения препарата осуществляют при строгом соблюдении правил асептики и антисептики. Разведенная вакцина, сохраняемая с соблюдением правил асептики, может быть использована в течение 2 ч. Неиспользованную вакцину уничтожают кипячением в течение 30 мин.

Проведенную прививку регистрируют в установленных учетных формах с указанием наименования препарата, даты прививки, дозы, название предприятия-изготовителя препарата, номера серии, реакции на прививку.

Препарат растворяют 0, 9%-м раствором натрия хлорида для инъекций, который вносят в ампулу стерильным шприцем с иглой из расчета 0, 1 мл (2 капли) на одну прививочную дозу. Ампулу встряхивают до образования равномерной суспензии. Время растворения вакцины не должно превышать 1 мин. Раствори мый препарат не должен содержать осадков или хлопьев. Место прививки, наружную поверхность средней трети плеча, обрабатывают спиртом или смесью спирта с эфиром; применение дезинфицирующих растворов не допускается. После испарения спирта и эфира, не прикасаясь к коже, наносят две капли вакцины на расстоянии 30-40 мм друг от друга, кожу натягивают и стерильным скарификатором проводят через каждую нанесенную каплю вакцины 6 насечек (3 продольных и 3 поперечных) длиной 10 мм каждая с расстоянием между насечками 3 мм. Насечки не должны кровоточить, кровь должна выступать только росинками.

Плоской стороной скарификатора втирают вакцину в насечки в течение 30 сек. и дают подсохнуть 5 мин. При ревакцинации применяют половинную дозу, т. е. 1 кашпо вакцины, через которую делают 6 насечек.

Прививочная доза препарата при этом способе в 25 раз меньше, чем при накожной вакцинации; раз ведение вакцины производят из расчета 12, 5 мл 0, 9%-го раствора натрия хлорида для инъекций на одну дозу вакцины для накожного применения (подкожная доза 0, 5 мл х 25 = 12, 5 мл). Препарат, содержащийся в ампуле, растворяют так же, как для накожной вакцинации, после чего полученную суспензию переносят в стерильный флакон для инъектора, в который вносят необходимый объем растворителя (например, если в ампуле содержится 7 накожных доз вакцины, то содержимое должно быть суспендированным в 12, 5 мл х 7, т. е. в 87, 5 мл).

Прививки проводят в область наружной поверхности плеча на границе между верхней и средней тре тью. Место введения обрабатывают так же, как и при накожной прививке. Вакцину вводят в объеме 0, 5 мл при режиме работы инъектора, рассчитанном на подкожное введение (согласно Инструкции по применению инъектора БИ-ЗМ и противоинфекционным протектором ППИ-2).

Местная и общая реакция на вакцинацию незначительны. Местная реакция при накожной вакцина ции может появиться через 24-48 ч в виде гиперемии, инфильтрата кожи или в виде розово-красных узелков по ходу насечек, иногда сливающихся в валик или образующих небольшую припухлость. При безыгольном методе введения через 12-24 ч на месте инъекции могут появиться гиперемия, инфильтрат диаметром до 25 мм, слабая болезненность. Общая реакция возникает в первые сутки у 1-2% привитых и выражается недомоганием, головной болью, повышением температуры тела до 37, 5-38 °С.

Учитывая возможность развития анафилактического шока у отдельных высокочувствительных лиц, вакцинированный должен находиться под медицинским наблюдением не менее 30 мин. Места проведе ния прививок должны быть обеспечены средствами противошоковой терапии.

  • Переболевание бруцеллезом. Положительная серологическая или кожно-аллергическая реакция на бруцеллез.
  • Острые инфекционные и неинфекционные заболевания, хронические заболевания в стадии обострения — прививки проводят не ранее, чем через 1 мес. после выздоровления (ремиссии).
  • Первичные и вторичные иммунодефициты. При лечении стероидами, антиметаболитами, химио- и рентгенотерапии — прививки проводят не ранее, чем через 6 мес. после окончания лечения.
  • Системные заболевания соединительной ткани.
  • Злокачественные новообразования и злокачественные болезни крови.
  • Распространенные рецидивирующие заболевания кожи.
  • Аллергические заболевания (бронхиальная астма, анафилактический шок, отек Квинке в анамнезе).
  • Беременность и период лактации.

С целью выявления противопоказаний врач (фельдшер) в день прививки проводит опрос и осмотр прививаемого с обязательной термометрией. При температуре выше 37 °С прививка откладывается. В случае необходимости проводят необходимое лабораторное обследование.

Прививки против бруцеллеза проводят не ранее, чем через 1 мес. после других профилактических прививок или за 1 мес. до них.

Категорически запрещается вводить подкожно вакцину, разведенную для накожного применения.

По 1 мл (4-10 накожных доз) в ампуле. Упаковка содержит 5 ампул. Срок годности — 3 года

Вакцину хранят и транспортируют в соответствии с СП 3. 3. 2. 028. 95 при температуре не выше 8 °С.

Рекламации на физические и другие свойства препарата направляют в ГИСК им. Л. А. Тарасовича (121002, Москва, Сивцев-Вражек, д. 41, тел/факс (095) 241-39-22) и в адрес предприятия-изготовителя.

О случаях повышенной реактогенности или развития поствакцинальных осложнений следует сооб щить по телеграфу или телефону с последующим представлением медицинской документации в ГИСК им. Л. А. Тарасевича.

источник