Меню Рубрики

Пробирка для взятия крови на бруцеллез

Взятие крови для бактериологического исследования при бруцеллезе.
Выполнение процедуры, как при брюшном тифе:

— забрать кровь во время лихорадки до начала лечении антибиотиками в объёме 5мм шприцем из локтевой вены в стерильную пробирку или флаконы и питательной средой;

— упаковать пробирку в спецконтейнер;

— упаковать кровь в баклабораторию без промедления. Примечания:

на один объём крови должно быть девять объёмов питательной среды:

— питательными оптимальными средствами являются: среда АДБ, эритрат-агар, среда Хоттингера, МПП с 1% глюкозы и 1% глицерина.
Взятие крови для серологического исследования при бруцеллезе.

— целью исследования является определение титра антител в сыворотке к бруцеллезному антигену. Для этого ставят реакцию агглютинации Райта и Хеддельсона;

— кровь забирается в течении всего заболевания шприцем из локтевой вены (можно из пальца, пятки, мочки уха), в объеме 5мл (у детей 0,5 — 1,0мл), в стерильную пробирку;

— выполнение процедуры, как при брюшном тифе;

— упаковка пробирок проводится в специальном контейнере, исключающие повреждения стекла;

— доставка в лабораторию пробирок проводится без промедления.

длядиагностики имеет значение только положительный результат в сочетании с положительной аллергической пробой;

— кровь для исследования забирается в динамике на 5 — 10 дней.
СП 3.1.7.2613 -10 Профилактика бруцеллеза
Профилактические мероприятия

3.2. На территориях субъектов Российской Федерации, где регистрируются случаи бруцеллеза среди животных должны быть разработаны целевые программы или комплексные планы по профилактике бруцеллеза, разрабатываемые при участии органов, осуществляющих государственный санитарно-эпидемиологическийнадзор, противочумными учреждениями, Россельхознадзора в субъекте Российской Федерации, ветеринарными службами субъекта Российской Федерации, органами управления здравоохранением в субъекте. Аналогичные комплексные планы разрабатываются для административных территорий субъекта Российской Федерации.

3.3. Противочумные учреждения оказывают научно-методическую и практическую помощь органам, осуществляюпщм государственный санитарно-эпидемиологический надзор по вопросам профилактики и лабораторной диагностики бруцеллёза.

3.4. Контроль за выполнением мероприятий по профилактике заражения людей бруцеллезом проводят органы, осуществляющие государственный санитарно-эпидемиологический надзор во взаимодействии с ветеринарными службами.

3.5. Контроль за выполнением мероприятий по профилактике бруцеллеза у сельскохозяйственных животных обеспечивают органы Россельхознадзора.

3.6. Владельцы сельскохозяйственных животных вне зависимости от форм собственности обязаны:

3.6.1. выполнять требования по профилактике, своевременному выявлению заражения возбудителем бруцеллеза поголовья сельскохозяйственных животных;

3.6.2. обеспечивать работающий персонал спецодеждой, средствами индивидуальной защиты, бытовыми помещениями;

3.6.3. организовывать проведение периодических медицинских осмотров в установленном порядке.

3.7. На неблагополучных по бруцеллезу административных территориях субъекта Российской Федерации индивидуальные владельцы сельскохозяйственных животных обязаны один раз в год проходить серологическое обследование на бруцеллез с целью раннего выявления заболевания.

4. Профилактические мероприятия по предупреждению заражения людей в эпизоотических очагах бруцеллеза.

4.1. При выявлении случаев заболевания бруцеллезом сельскохозяйственных животных специалисты ветеринарной службы информируют органы, осуществляющие государственный санитарно-эпидемиологический надзор.

4.2. Противоэпизоотические мероприятия по ликвидации очагов бруцеллеза организуют и контролируют органы государственного ветеринарного надзора в установленном порядке.

— уточняют список лиц, занимающихся уходом за животными, а также употреблявших животноводческую продукцию, полученную от больного поголовья;

— дают предписания по проведению медицинского обследования, включая серологические исследования, контактных с больным животным для раннего выявления больных бруцеллезом;

— совместно со специалистами ветеринарной службы проводят инструктаж с индивидуальными владельцами по соблюдению мер профилактики заражения бруцеллезом при уходе за больным и положительно реагирующим на бруцеллез поголовьем животных, об опасности заражения бруцеллезом алиментарным путем: при употреблении молока и молочных продуктов (рассольные сыры), не прошедших достаточную термическую обработку.

Индивидуальным владельцам запрещается самостоятельный убой больных и положительно реагирующих на бруцеллез животных, реализация населению продуктов животноводства (молочные продукты). Для убоя животные, по согласованию с ветеринарными специалистами, должны быть доставлены на мясоперерабатьшающие предприятия, имеющие соответствующее разрешение.
Организация лабораторной диагностики бруцеллеза у людей

7.1. Лечебно-профилактические учреждения, выявив у больного симптомы, не исключающие заболевание бруцеллезом, осуществляют:

— взятие крови (5,0 мл.) для проведения серологических исследований на бруцеллез;

— посев крови (5,0 мл.) или иного клинического материала у больного на стерильность (до начала лечения антибиотиками) и направление материала в соответствующую бактериологическую лабораторию для проведения исследования на выделение возбудителя бруцеллеза (посев крови проводят на специальные среды по методу Кастанеда).

7.2. Лабораторная диагностика бруцеллёза у людей осуществляется в соответствии с действующими нормативно-методическими документами.

7.2.1.Серологические исследования проводятся в бактериологических лабораториях, имеющих лицензию на работу с возбудителями Ш- IV групп патогенности, разрешенными к использованию в установленном порядке тест-системами и диагностикумами.

7.2.2.Исследования по выделению из материала от больных возбудителя инфекции или его генома (бактериологические, ПЦР исследования) проводятся в лабораториях особо опасных инфекций, имеющих лицензию на работу с возбудителями I — II группы патогенности.

7.2.3. Во всех случаях выделения культур бруцелл от людей проводится дифференциация их до вида и биовара.

7.3. Выделенные штаммы возбудителя бруцеллёза передаются в установленном порядке в Референс-центр по мониторингу за возбудителем бруцеллёза (ФГУЗ «Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт» Роспотребнадзора), в Центр Минздрава России по бруцеллезу НИИЭМ им. Н.Ф.Гамалеи РАМН и Национальный

центр верификации результатов диагностической деятельности, выполняющий функции Государственной коллекции патогенных бактерий (ГКПБ «М») (РосНИПЧИ «Микроб») для проведения окончательной идентификации и генетического типирования штаммов возбудителя бруцеллёза и пополнения национального коллекционного фонда штаммов возбудителя бруцеллёза.

8. Профилактическая иммунизация людей против бруцеллеза

8.1. Профилактические прививки против бруцеллеза входят в Национальный календарь прививок по эпидемическим показаниям и проводятся в соответствии с действующими нормативными актами в области иммунопрофилактики.

8.2. Решение о проведении и объеме профилактической иммунизации людей против бруцеллёза принимается органами, осуществляющими государственный санитарно-эпидемиологический надзор при согласовании с органами управления здравоохранением в субъекте с учетом эпизоотологических и эпидемиологических показаний.

8.3. Вакцинация проводится в очагах козье-овечьего типа лицам, достигшим 18 лет и вьшолняющим следующие работы:

— по заготовке, хранению, обработке сырья и продуктов животноводства, полученных из хозяйств, где регистрируются заболевания скота бруцеллезом;

— по убою скота, больного бруцеллезом, заготовке и переработке полученных от него мяса и мясопродуктов;

— животноводам, ветеринарным работникам, зоотехникам в хозяйствах энзоотичных по бруцеллезу;

— работникам бактериологических лабораторий, работающим с живыми культурами.

8.4. Вакцинацию постоянным и временным работникам, занятых в животноводстве проводят по эпидемическим показаниям до отсутствия регистрации в хозяйствах случаев бруцеллёза козье-овечьего вида среди животных — как мелкого, так и крупного рогатого скота, а персоналу предприятий по переработке сырья и продуктов животноводства — до окончания регистрации случаев бруцеллёза в хозяйствах, откуда поступает скот, сырьё и продукты животноводства.

8.5. В районах, свободных от бруцеллёза козье-овечьего вида, иммунизация персонала хозяйств, неблагополучных по бруцеллёзу, вызванному В. abortus, В. suis, В. canis, не проводится.

8.6. Для иммунизации людей против бруцеллеза применяется сухая живая вакцина, приготовленная из вакцинного штамма В. abortus 19-BA.

8.7. Эпидемиологическая эффективность вакцинации зависит от правильного определения показаний к её проведению, полноты отбора подлежащих иммунизации профессиональных групп, в том числе временного персонала, соблюдения сроков вакцинации и ревакцинации.

8.8. Предварительно проводится медицинский осмотр всех лиц, подлежащих вакцинации (ревакцинации), с обязательным серологическим (реакция Хеддльсона (Райта) или ИФА) и аллергическим (проба Бюрне с бруцеллезным аллергеном) обследованием.

8.9. Вакцинации подлежат лица с четкими отрицательными серологическими и аллергическими реакциями на бруцеллез.

8.10. Прививки не проводятся лицам моложе 18 лет, женщинам в период беременности и кормящим матерям, т.к. эти контингенты не должны привлекаться к работам, связанным с риском заражения бруцеллезом, а также лицам, имевшим положительные серологические или аллергические реакции на бруцеллез на протяжении последних 2 лет. При выявлении резко положительной пробы Бюрне (5×6 см и более) повторное аллергическое обследование не следует проводить в течение 5 лет.

8.11. К работе с инфицированными животными или сырьем люди могут допускаться не ранее чем через 1 мес. после вакцинации.

8.12. Иммунитет сохраняет наивысшую напряженность в течение 5-6 месяцев. В связи с этим при определении сроков проведения вакцинации в животноводческих хозяйствах необходимо строго руководствоваться данными о времени окота (ранний окот, плановый, внеплановый).

8.13. Ревакцинация проводится через 12 мес. после вакцинации лицам с отрицательными серологическими и аллергическими реакциями на бруцеллез.

8.14.Прививки против бруцеллеза могут быть достаточно эффективными лишь при одновременном проведении всего комплекса санитарных и ветеринарных мероприятий.

9. Организация периодических медицинских осмотров

9.1.С целью своевременного выявления больных бруцеллезом людей диспансерным профилактическим осмотрам с обязательным серологическим обследованием при поступлении на работу и не реже 1 раза в год подлежат контингенты, подвергающиеся риску заражения бруцеллезом:

9.1.1. постоянные и временные работники животноводческих, звероводческих хозяйств (ферм), как благополучных, так и неблагополучных по бруцеллезу;

9.1.2. лица, занятые обслуживанием, стрижкой, забоем животных, первичной обработкой и транспортированием сырья и продуктов животноводства из этих хозяйств;

9.1.3. постоянные и временные работники предприятий по переработке сырья и продуктов животноводства, поступающих из районов и хозяйств, неблагополучных по бруцеллезу любого вида животных;

9.1.4. медицинский, ветеринарный, зоотехнический и другой персонал, работающий с живыми культурами бруцелл или зараженным материалом, с больными и подозрительными на заражение бруцеллезом животными.

9.2. Ответственность за организацию предварительных и периодических медицинских осмотров работников возлагается на руководителя предприятия, хозяйства.

9.3.Диспансеризацию групп риска проводят лечебно-профилактические учреждения, имеющие лицензию на соответствующую медицинскую деятельность.

9.4. Контроль полноты охвата контингентов, подлежащих периодическим медицинским осмотрам на бруцеллез и диспансерному наблюдению, проводят органы, осуществляющие государственный санитарно-эпидемиологический надзор, которые составляют перечень объектов с числом работающих в них, где отмечены неблагоприятные производственные факторы.

9.5. При проведении медицинского осмотра в обязательном порядке проводится серологическое обследование работников на бруцеллез. На территориях, благополучных по бруцеллезу сельскохозяйственных животных (в течение 5 лет) серологическое обследование людей проводят один раз в два года.

9.6.Проведение медицинских осмотров осуществляет терапевт. Больные с клиническими проявлениями, характерными для бруцеллезной инфекции (поражение опорно-двигательного аппарата, нервной системы, нарушение слуха, зрения, воспалительные заболевания мочеполовой системы и др.), подлежат углубленному медицинскому осмотру с привлечением специалистов по профилю клинических проявлений (инфекционист, невропатолог, гинеколог, уролог, хирург и др.).

9.7. Лица с положительными и сомнительными результатами серологических реакций без клинических проявлений подлежат тщательному обследованию врачом-инфекционистом два раза в год с обязательным лабораторным исследованием сьшоротки крови на бруцеллез и при необходимости — специалистами по профилю выявленной патологии.

9.8. Уточнение или подтверждение диагноза проводится врачом-инфекционистом в инфекционных стационарах (отделении, больнице) или специализированных противобруцеллезных отделениях.

9.9. Профилактические медицинские осмотры животноводов следует проводить через 1-2 мес. после окончания массового окота и отела животных (обычно II квартал), работников предприятий по переработке сырья и продуктов животноводства — через 1-2 мес. после массового забоя скота (не позднее III квартала).

9.10. Лица, временно привлекаемые к уходу за животными и к переработке сырья и продуктов животноводства, обследуются через 1-2 мес. после сезонных работ. Контроль полноты охвата этих контингентов проводят органы, осуществляющие государственный санитарно-эпидемиологический надзор.

9.11. Во время проведения периодических медицинских осмотров и лабораторного обследования проводится информационно-разъяснительная работа среди обследуемых контингентов.

10. Мероприятия в очаге заболевания людей бруцеллезом

10.1. При получении экстренного извещения из лечебно-профилактического учреждения о выявлении случая заболевания бруцеллезом органы, осуществляющие государственный санитарно-эпидемиологический надзор в течение суток организуют проведение

эпидемиологического обследования очага с привлечением специалистов ветеринарной службы для установления источников и факторов передачи инфекции.

10.2. При установлении факта контакта больного с животными, больными бруцеллезом, инфицированной животноводческой продукцией или сырьем при осуществлении профессиональной деятельности специалистами органов, осуществляющих государственный санитарно-эпидемиологический надзор проводятся внеплановые контрольно — надзорные мероприятия по месту работы заболевшего. Обследование объекта проводится с привлечением профильных специалистов органов, осуществляющих государственный санитарно-эпидемиологический надзор и специалистов ветеринарного надзора.

10.3. Больных бруцеллёзом людей госпитализируют по клиническим показаниям в инфекционные стационары или, в случае отсутствия такой возможности, больных помещают в отдельные терапевтические палаты. Выписка больных производится после исчезновения клинических явлений.

После выписки из стационара больные подлежат диспансерному наблюдению врача-инфекциониста 2 раза в год до угасания активности инфекционного процесса (не менее 2-х лет).

10.4. Дополнительные дезинфекционные мероприятия по месту нахождения больного не проводятся.

11. Эпидемиологическое обследование очага бруцеллеза

11.1. Эпидемиологическое обследование очага бруцеллеза начинают в течение первых же суток после получения экстренного извещения (учетная форма № 58/у) из лечебно-профилактического учреждения, а также сведений от ветеринарной службы, или после получения информации от руководителей или специалистов хозяйств, от владельцев сельскохозяйственных животных о случаях выявления в хозяйствах больных бруцеллезом животных.

11.2. Целью эпидемиологического расследования случаев заболевания людей бруцеллезом является:

11.2.1. выявление, совместно со специалистами ветеринарной службы, источника инфекции, факторов и путей заражения;

11.2.2. выявление всех лиц, имевших контакт с источником инфекции шш находившихся в очаге заболевания животных;

11.2.3. организация медицинского наблюдения за лицами, имевшими возможность заразиться в данном очаге, с обязательным лабораторным обследованием;

11.2.4.проведение комплексных мероприятий по предупреждению дальнейшего распространения бруцеллеза среди людей и ликвидации очага.

11.3. Проводя эпидемиологическое обследование очага, эпидемиолог выясняет возможность контактов больного с животными, с сырьем и продуктами животного происхождения:

11.3.1. в результате профессиональной деятельности (работники животноводства; предприятий по переработке продуктов и сырья животного происхождения; ветеринарные работники, зоотехники; персонал бактериологических лабораторий, работающий с культурами бруцелл; сезонные рабочие, привлекаемые к окотной кампании, стрижке, купанию овец, к массовому убою животных общественных хозяйств; работники звероводческих ферм, клубов собаководства, зоопарков и т.д.);

11.3.2. при уходе за животными в индивидуальных хозяйствах, употреблении инфицированной мясомолочной продукции, контакте с приобретенными шерстью, пухом, шкурами инфицированных животных и т.п.

11.4. Дл* выявления путей и факторов заражения людей проводится обследование животноводческих хозяйств сельхозпредприятий (молокотоварных ферм, овцеводческих хозяйств, отгонных пастбищ, пунктов стрижки овец, кошар и др.), индивидуальных животноводческих хозяйств, звероводческих хозяйств, предприятий по переработке сырья и продуктов животноводства (мясокомбинатов, молокозаводов, сыроваренных предприятий, убойных пунктов, частных предприятий по переработке сырья и продуктов животноводства при фермерских хозяйствах), в которых предположительно произошло заражение людей бруцеллезом.

11.5. Обследование животноводческих хозяйств различных форм собственности проводится совместно со специалистами органов, осуществляющих государственный санитарно-эпидемиологический надзор и Россельхознадзора в присутствии администрации (владельца) хозяйства или предприятия.

11.6. При проведении обследования по эпидемическим показаниям необходимо обратить внимание на соблюдение противобруцеллезного режима, условия труда работников, для чего следует:

11.6.1.оценить санитарно-гигиеническое состояние объекта, благоустройство территории, водоснабжение, наличие дезинфицирующих и моющих средств, обустройство бытовых помещений для работников, оборудование скотомогильников, ям Беккари или трупосжигательных печей, наличие уборочного инвентаря, в том числе для уборки абортированных и мертворожденных плодов и последов;

11.6.2. установить наличие средств индивидуальной защиты персонала (одежда, обувь, рукавицы, резиновые или клеенчатые фартуки, перчатки, защитные маски, очки и др.), их количество, пригодность для использования, порядок хранения, смены, обеспечение централизованной стирки, наличие аптечек, умывальников, мыла, дезинфицирующих средств для обработки рук, обуви и пр.;

11.6.3. в целях выявления алиментарного пути заражения проверить соблюдение режима пастеризации молока, условия хранения и обработки молочной посуды, фильтрующего материала, установить порядок реализации молока и молочных продуктов, режима приготовления сыров из козьего и овечьего молока;

11.6.4. выявить порядок первичной обработки шкур, шерсти, козьего пуха, а также условия и порядок транспортировки сырья и продуктов животноводства из обследуемого хозяйства;

11.6.5. при подозрении на внутрилабораторное заражение бруцеллезом провести обследование режима работы лаборатории;

11.6.5. проверить организацию проведения профилактических диспансерных осмотров на бруцеллез персонала хозяйства или предприятия, независимо от их форм собственности.

11.7.Выявив лиц, имевших возможность заразиться в очаге, необходимо организовать и проконтролировать проведение их клинико-лабораторного обследования на бруцеллез.

11.8. Лабораторное обследование контактных лиц включает комплекс иммунологических реакций на бруцеллез (Хеддльсона, Райта, иммунноферментный анализ — ИФА). Лица с положительными реакциями на бруцеллез подлежат повторному серологическому обследованию и углубленному клиническому осмотру.

11.9. Контактные температурящие или подозрительные на заболевание бруцеллезом лица, подлежат обязательному бактериологическому обследованию на бруцеллез.

11.10.Данные эпидемиологического обследования контактных лиц заносят в Карту эпидемиологического обследования зоонозного заболевания (№ 371-у). Сведения о больном человеке, заразившимся в данном очаге, а также лицах из числа подвергшихся инфицированию, диагноз у которых был установлен позже, заносятся во Вкладыш к Карте.

11.11. Вкладыш (сведения о больном в данном очаге) хранится в Карте на данный очаг и нумеруется в соответствии с числом заболевших лиц в данном очаге.

11.12. Если эпидемиологическое обследование проводится в связи с выявлением больных бруцеллезом животных, результаты проверки оформляются актом (совместно со специалистами ветеринарной службы), в котором следует отразить результаты вьшолнения противобруцеллезного режима, состояние профилактики инфицирования бруцеллезом работающих, организацию медицинского обследования лиц, контактных с источником инфекции, а также проверку противоэпидемических мероприятий.

11.13.Составляется план-задание противоэпидемических и противоэпизоотических мероприятий по данному хозяйству (предприятию) с последующей обязательной проверкой выполнения предписаний.

11.14. В случаях выявления грубых нарушений противобруцеллезного режима в животноводческих хозяйствах и на перерабатьшающих предприятиях, повлекших за собой заболевания людей бруцеллезом (включая детей и подростков), на виновных оформляются материалы для привлечения их к административной или уголовной ответственности.

Читайте также:  Бруцеллез заражение от человека к человеку

11.15. Установление связи бруцеллеза с профессиональной деятельностью проводится в установленном порядке с обязательным участием врача эпидемиолога, проводившего эпидемиологическое обследование данного очага.

ПЛб.Основным документом, подтверждающим профессиональный характер заражения бруцеллезом, служит Карта эпидобследования с заполненным вкладным листом и заверенная руководителем органа, осуществляющего государственный санитарно-эпидемиологический надзор.

4.3. При выявлении эпизоотических очагов бруцеллеза в животноводческих хозяйствах вне зависмости от форм собственности главным государственным ветеринарным инспектором административной территории совместно с главным государственным санитарным врачом территории вносятся предложения в органы муниципальной власти о наложении ограничений по оздоровлению хозяйства от бруцеллеза, в том числе по защите от заражения бруцеллезом людей.

4.4. Руководители животноводческих хозяйств вне зависимости от форм собственности при наложении ограничений по бруцеллезу на хозяйство обязаны:

4.4.1. организовать проведение внеочередного профилактического медицинского осмотра работников -для раннего выявления заболевших бруцеллезом, включая серологическое обследование;

4.4.2. приказом по хозяйству закрепить работников, занятых уходом за больным и положительно реагирующим на бруцеллез поголовьем сельскохозяйственных животных. При этом не допускать к работе лиц, не достигших 18 — летнего возраста, беременных и кормящих женщин, сезонных рабочих, больных острыми и хроническими (в стадии обострения) заболеваниями различной этиологии, работников с положительными серологическими реакциями на бруцеллез, больных бруцеллезом, работников не прошедших инструктаж по соблюдению требований безопасности;

4.4.3. провести инструктаж с работниками, занятыми уходом за поголовьем животных о соблюдении требований безопасности, использовании средств индивидуальной защиты для предупреждения профессионального заражения бруцеллезом;

4.4.4. обеспечить всех работников, в т.ч. лиц, временно привлекаемых к работам, связанным с риском заражения бруцеллезом, в достаточном количестве средствами личной гигиены и индивидуальной защиты (халаты, резиновые перчатки, нарукавники, клеенчатые фартуки, специальная обувь и др.), своевременную их замену и централизованную стирку; —

4.4.5.принять меры по обеспечению работников надлежащими условиями для соблюдения личной гигиены (туалетные комнаты, душевые, мыло, индивидуальные полотенца и др.), бытовыми помещениями для приема пищи и отдыха, отдельными шкафчиками для хранения личной, рабочей и санитарной одежды;

4.4.6. обеспечить рабочие места достаточным набором уборочного инвентаря, дезинфицирующими средствами эффективными в отношении возбудителя бруцеллеза;

4.4.7. обеспечить неукоснительное вьшолнение требований по подготовке к вьшозу за пределы неблагополучного хозяйства животноводческого сырья (молоко, мясо и т.д.) и согласование с органами Россельхознадзора и Роспотребнадзора его использования и переработки;

4.4.8 согласовать с органами ветеринарного и государственного санитарно-эпидемиологического надзора условия вывоза положительно реагирующего на бруцеллез поголовья для убоя и переработки;

4.5. Основные требования по использованию молока и молочных продуктов из неблагополучных по бруцеллезу хозяйств.

4.5.1. Запрещается вывоз необеззараженного молока, полученного от коров неблагополучной фермы, хозяйства, стада в населенном пункте на молокоперерабатывающее предприятие, для продажи на рынках, использования в сети общественного питания и т.д. Такое молоко подлежит первичной обработке непосредственно на неблагополучной ферме (в хозяйстве) в течение всего времени до полной ликвидации болезни и снятия ограничений.

4.5.2. Молоко от коров, положительно реагирующих на бруцеллез, обеззараживают кипячением или переработкой на масло топленое — сырец. Выработку масла производят с соблюдением условий, отвечающих санитарным требованиям на производство пищевых продуктов.

4.5.3. Аналогично поступают с молоком коров, положительно реагирующих на бруцеллез, в благополучных хозяйствах (населенных пунктах) до установления (исключения) диагноза на эту болезнь.

4.5.4. Кипяченое молоко разрешается использовать на пищевые цели, при этом поставка его в лечебно-профилактические, детские и школьные учреждения не допускается.

4.5.5. Молоко (сливки) от отрицательно реагирующих на бруцеллез коров неблагополучного стада обеззараживают при температуре 70 °С в

течение 30 минут или при температуре 85 — 90 °С в течение 20 секунд или кипячением. В таком же порядке обеззараживают молоко для внутрихозяйственных нужд (в том числе, для заменителя цельного молока).

4.5.6. Молоко (сливки) от коров неблагополучного стада (фермы) одновременно по бруцеллезу и туберкулезу обеззараживают при температурном режиме, установленном правилами для обеззараживания молока при туберкулезе.

4.5.7. Молоко и обрат (в том числе поступающие из молочного завода), предназначенные для использования на корм животным, также подлежат обеззараживанию при температуре 85 — 90 °С в течение 20 секунд или кипячением.

4.5.8. Запрещается использование необеззараженного молока (кроме молозива), полученного от коров неблагополучного стада (фермы), и обрата для кормления молодняка животных.

4.5.9. Молочным заводам (маслозаводам) разрешается отпускать хозяйствам обрат только после его обеззараживания путем пастеризации или термической обработки острым паром при указанных выше режимах.

4.5.10. Пахту и обрат, полученные при изготовлении топленого масла, используют в корм животным только на данной ферме, скармливание их животным благополучных ферм, хозяйств и вывоз в другие хозяйства запрещается.

4.5.11. Запрещается доение овец и коз, изготовление брынзы и сыров из овечьего (козьего) молока на фермах, неблагополучных по бруцеллезу.

источник

Определить это заболевание – непростая задача. Очень часто при вяло протекающих симптомах врачи могут спутать бруцеллез с раком, лейкозом, различными инфекциями. Большое значение имеют эпидемиологический анамнез и клиническая картина.

Анализ на обнаружение бруцеллеза.

Когда человек сталкивается с домашним рогатым скотом, то возникает большая вероятность заболевания бруцеллезом.

Основываясь на симптомах, нельзя с точностью подтвердить правдивость диагноза. Для того чтобы наверняка удостовериться в диагнозе, используются аллергологический, бактериологический и серологический анализы. Также актуальны стандартные анализы на бруцеллез, с использованием крови, мочи, пункции лимфатических узлов, суставной жидкости.

Бактериальное исследование имеет значительную отрицательную сторону – очень медленный рост бруцелл на питательных средах. Колонии вызревают лишь через 20–30 дней, что осложняет и замедляет диагностирование бруцеллеза. Такой анализ делать очень долго, поэтому сейчас актуально использовать серологические методы.

Для того чтобы убедиться, что у вас бруцеллез, необходимо провести следующие анализы. Важную информацию дает анализ крови на бруцеллез. Ее можно сдать практически в любом медицинском учреждении.

Биохимический анализ крови.

Сначала делают стандартный набор исследований:

  1. Общий анализ крови. В ней нужно определить содержание лейкоцитов. Если показатель повышен, это означает, что в организме присутствует воспалительный процесс. Скорость оседания эритроцитов (СОЭ) ускоряется, но не намного. Запущенная стадия заболевания приводит к понижению показателей всех элементов крови.
  2. Общий анализ мочи. Здесь необходимо определить, присутствует ли белок в моче, и в каких количествах. Для этого следует повторять такой анализ мочи несколько раз.
  3. Биохимический анализ крови. Здесь анализируют уровни печеночного цитолиза (АлАТ, АсАТ), если эти показатели становятся выше нормы, то это говорит о гипербилирубинемии, снижается уровень альбуминов (гипоальбуминемия), при этом общий белок остается на нормальном уровне.

Чтобы определить возбудителя заболевания, применяют следующие методы.

Он дает практически 100% достоверный результат.

Однако этот метод отличается сложностью и длительностью. В качестве биологического материала используются кровь, моча, спинномозговая, внутрисуставная жидкость, желчь, а также проба из лимфатических узлов. Эти жидкости засевают на питательные среды и ждут роста микроорганизмов. Длительность этого метода составляет чуть меньше месяца, а порой и целый месяц, все зависит от роста колониальных бруцелл.

Это самый популярный анализ для определения бруцеллеза. Результаты можно узнать уже через неделю. Принцип заключается в нахождении иммуноглобулинов (антител) в сыворотке к бруцеллезным антигенам. По их классу можно определить продолжительность и скорость процесса. Для определения используют реакции Райта и Хеддельсона.

Бруцеллы убивают при помощи нагревания, и эта взвесь реагирует с сывороткой крови пациента. Если в процессе реакции бруцеллы склеиваются в маленькие шарики и оседают – это означает, что в сыворотке содержатся антитела и, значит, человек действительно болеет бруцеллезом. При отрицательной реакции заболевание не диагностируется. Этот метод хорош тем, что уже на ранних стадиях заболевания он может дать положительный результат. При помощи такой реакции находят бруцеллез не только у человека, но и у животных.

Она не дает такого достоверного результата. Здесь агглютинация делается на стекле. Часто эта реакция дает ложный результат.

Его проводят для обнаружения антител, которые атакуют эритроциты.

Для обнаружения бруцеллеза используется прямая реакция. Эта реакция различает антитела, которые напрямую связаны с эритроцитами. Если антиглобулиновый тест показывает отрицательный результат, значит, кровь чистая, и антител нет. Положительный результат означает появление антител, которые активно борются с эритроцитами.

ПЦР-диагностика основывается на обнаружении ДНК-цепей бруцелл из биологического материла пациента. Для этого материал обеззараживают, добавляя метиолят натрия в концентрации 0,01% с дальнейшим прогреванием в течение получаса. Когда завершится инкубирование в лизирующем растворе, который содержит все необходимые реагенты для экстракции ДНК при поддержании температуры 66 °С на протяжении 10–15 минут, биологическая ткань обезвреживается.

ПЦР-диагностика на обнаружении ДНК-цепей бруцелл.

Этот анализ особенно приемлем в том плане, что можно использовать абсолютно любую биологическую ткань пациента.

К одним из популярных методов относится реакция Бюрне. Она основана на введении внутрикожно бруцеллина. Если есть бруцеллез, то на месте укола начинается покраснение и небольшая пастозность. Именно этот участок и оценивается как аллергологическая проба Бюрне. Пятно измеряют и делают заключение: если пятно превышает 6 сантиметров, то реакция считается положительной.

Такая проба действительна, когда бруцеллез в хронической форме. Также необходимо учитывать и тот факт, что положительная реакция может возникнуть у людей, которые проходили вакцинирование по профилактике бруцеллеза.

источник

Разведение крупного рогатого скота (КРС) – выгодный и прибыльный вид деятельности, благодаря которому можно получить свежее молоко и мясо. К сожалению, содержание коров и быков может принести немало проблем. У этих животных могут развиться различные инфекционные заболевания, одно из которых – бруцеллез КРС. Ему подвержены не только коровы и быки, но и другие представители фауны, в том числе и человек.

Первое упоминание заболевания появилось около 2 тысяч лет назад, сделано оно было знаменитым древнегреческим целителем Гиппократом. В 19 веке бруцеллез был научно описан английским врачом, а вскоре ученые нашли микроорганизм, который вызывал недуг. В то время заболевание называлось средиземноморской или мальтийской лихорадкой. На протяжении долгого времени постоянные аборты у скота считались отдельным заболеванием, но в итоге была найдена связь недуга и биологических признаков возбудителей.

Бруцеллез у крупного рогатого скота – серьезное бактериальное заболевание, которое вызывается микроорганизмами рода Бруцелла (Brucella). Характеризуется патологиями в половой структуре у КРС, а также поражениями нервной системы, сердца, сосудов, костей и суставов. Проникая в организм коровы, инфекция перемещается в молочные железы, селезенку, печень и матку, в итоге стимулируя аборт. Выделяют несколько форм недуга, описанных в таблице ниже.

Форма Длительность
Острая Сопровождается симптомами на протяжении 1-2 месяцев
Подострая Недуг развивается в течение 3 месяцев
Хроническая Крупный рогатый скот страдает от недуга больше 3 месяцев

Бактерия Бруцелла, вызывающая бруцеллез

Бактерия очень устойчива к внешней среде. Она отлично выживает в условиях отрицательной температуры. До пяти месяцев Бруцелла живет в водных условиях, в земле – три месяца и больше. В молоке она присутствует до 46 дней, в брынзе – до двух месяцев. Остальные молочные продукты содержат бактерию на протяжении всего срока их пищевой ценности. Бактерия погибает, если прокипятить молоко и произвести его пастеризацию. Препараты же дезинфекции способны избавиться от Бруцеллы за несколько минут.

Заражение может осуществляться разными способами, но чаще всего инфекция проникает в организм животных фекально-оральным методом. Распространяется инфекция очень быстро, передаваясь от зараженных коров к здоровым особям. Также бактерии могут попасть бытовым способом, когда на пораженную слизистую животного попадает возбудитель недуга.

Самые частые случаи заражения – через корм, воду, предметы ухода, подстилку и другие вещи, с которыми чаще всего контактирует скот.

Микробы так же могут попасть в организм через трещины на коже, органы пищеварения и дыхательные пути.

Чаще всего бруцеллез развивается у скота, который проживает на частных фермерских и приусадебных предприятиях. Происходит это преимущественно в пастбищный период, во время контакта с другими животными. Многие фермеры не понимают, насколько опасна болезнь (не только для животных, но и для человека). Вспышки заболевания могут наблюдаться после завоза новых особей на ферму, а также при несоблюдении правил карантина и отсутствии правильных лабораторных мероприятий и вакцинации.

Главный признак бруцеллеза у КРС – это выкидыш или появление на свет нежизнеспособной особи. Развитие тех или иных симптомов зависит от индивидуальных особенностей каждого отдельно взятого животного. Если есть подозрение на заболевание, следует обратить внимание и на другие симптомы болезни.

Пошаговая инструкция по осмотру и выявлению бруцеллеза у КРС.

Шаг 1. Проверьте, появились ли на задних конечностях коровы/быка/теленка абсцессы (нарывы, гнойники, которые появляются из-за воспалительного процесса) или гугромы (кисты, образующиеся в тканях). Часто у животного развивается бурсит – воспаление суставов на передних конечностях;

Шаг 2. Понаблюдайте за тем, как питается животное. Если скот болен, то аппетит у него упадет, он станет малоподвижным и слабо активным. Корова/бык/теленок становятся угнетенными, их походка может быть неуверенной. Вес начнет снижаться. Иногда может наблюдаться повышенная температура тела;

Шаг 3. Проверьте, нет ли у животного слизистых выделений из половых органов. Они бурого или коричневого цвета, совсем не имеют запаха;

Шаг 4. Участвуйте в родах скота. У коров, которые пережили выкидыш, может наблюдаться задержка последа (плаценты). Иногда развивается эндометрит, вызванный воспалительными процессами, он сопровождается обильным выделением гноя;

Шаг 5. Внимательно следите за количеством молока. Удой коровы снижается, если она больна бруцеллезом. Ее вымя может отекать, воспаляются молочные железы.

Симптомы бруцеллеза у КРС: поражение конечностей

У быков также можно диагностировать болезнь. У них наблюдаются признаки воспаления препуции (крайней плоти), а также орхит (воспаление тканей яичек). Помните о том, что некоторые симптомы могут оказаться двоякими: например, выкидыши могут происходить из-за туберкулезного заболевания. Если даже корова получила заражение через открытую ранку, в ее области не наблюдается никаких признаков недуга.Симптоматика бруцеллеза слабовыраженная, и реальный диагноз может определить только специалист.

Установить диагноз самостоятельно очень сложно. Если вы не являетесь опытным фермером и не можете самостоятельно диагностировать заболевание, обратитесь к специалисту (ветеринару). Он осмотрит животное, получит от вас всю необходимую информацию. Если у врача появится подозрение на заражение, он назначает исследование в лаборатории. В зависимости от формы диагностики используется абортированный плод, а также проводится анализ молока или крови коровы. Лабораторные методы диагностики бруцеллеза:

  1. Реакция аллергии. Самке вводится абортин, ответ будет получен примерно через сутки (но не позднее 72 часов). По величине опухоли можно судить о наличии заболевания. Следует насторожиться, если образование достигло величины фасоли. Есть отрицательная сторона у этого метода: перенесшие бруцеллез, но полностью здоровые животные также дают положительную реакцию;
  2. Реакция агглютинации Райта. Иногда невозможно найти причину заражения в крови животного. Чаще всего в диагностике болезни используется анализ на реакцию агглютинации, специалисты оценивают ее и исследуют. Это самый надежный метод определения возбудителя. Для его применения необходимо приготовить антиген, затем оценить и исследовать реакцию. У заболевших животных она положительная.

Диагностика бруцеллеза: реакция агглютинации Райта

Шаг 1. Привяжите корову, зафиксируйте ее голову за рога или недоузок;

Шаг 2. У самого начала шеи наложите жгут из резины или плотный ремешок, затяните его. Если вы все сделали правильно, яремная вена должна налиться кровью. Попробуйте ее прощупать;

Шаг 3. Возьмите острую иглу (предварительно прокипяченную), вколите ее в яремную венку, двигаясь снизу вверх (глубина – около 4 сантиметров). Каждой корове – своя, индивидуальная иголка;

Шаг 4. Кровь должна вытечь из иглы, поэтому предварительно подставьте чистую пробирку. Если жидкость не идет, поверните иглу вокруг оси и подвигайте ее то вперед, то назад;

Шаг 5. Когда пробирка наполнится на 2/3 от объема, ослабьте ремешок, зажмите венку пальцами и резко выньте иглу;

Шаг 6. Закройте пробирку специальной пробкой, кожу в месте укола смажьте настойкой йода.

Правильная фиксация коровы для взятия анализа

Необходимо четко следовать инструкции и учитывать все меры безопасности при заборе крови. Чтобы не заразиться бруцеллезом, рекомендуется проводить забор крови и прочих жидкостей в специально оборудованных лабораториях.

Болезнь может иметь острое, хроническое или бессимптомное течение. Больше всего предрасположены к болезни взрослые особи. Когда возбудитель проникает в организм, он начинает размножаться у ворот инфекции, после чего воспаление доставляется в кровеносные и лимфатические пути и проникает в весь организм. Инфекция заполняет тело животного, местом дислокации выбирая определенные органы и системы.

Основные органы поражения – печень, молочные железы, селезенка и матка.

Локализируясь в плаценте, инфекция вызывает нарушения в развитии эмбриона, оно останавливается, происходит аборт. Это может случиться на четвертом или пятом месяце беременности. Телята, которые родились своевременно, могут оказаться нежизнеспособными. Обычно такие особи умирают в первые несколько дней жизни. Инкубационный период заболевания – от 2 до 4 недель.

Если в стаде нет беременных особей, определить недуг поможет только лабораторное исследование.

То, как проходит бруцеллез в стае, зависит от количества беременных самок. В некоторых стадах выкидыш происходит у половины самок и более. Как правило, аборт случается один раз, гораздо реже – два раза. Если инфекция была занесена в здоровое стадо, выкидыш может произойти у 60% самок. От бруцеллеза взрослые особи не умирают. При вскрытии могут быть найдены поражения в половой структуре, некрозы в суставах, воспаления в печени, почках и селезенке.

Читайте также:  Болезнь бруцеллез у крупно рогатого скота

Метод лечения выбирается исходя из тяжести бруцеллеза. На первой стадии эффективны антибиотики, которые избавляют организм от возбудителя недуга: рифампицин, левомицетин, стрептомицин, тетрациклин. Время лечения и необходимую дозу назначает ветеринар. При хроническом течении болезни антибиотики бесполезны – в этом случае назначается вакцинация, снимающая симптомы и останавливающая дальнейшее развитие бактерий.

В некоторых случаях при лечении болезни используют комплексную терапию. К антибиотикам добавляются иммуностимулирующие медикаменты либо противовоспалительные средства. Если у животного появляются боли, ему назначают болеутоляющие препараты. Назначенные врачом уколы можно производить самостоятельно.

Инструкция по правильному введению лекарства.

Шаг Действие
1. Ограничьте движения коровы, поместив ее в узкий загон. Голова коровы должна придерживаться специальным фиксатором.
2. Выберите область для укола. Обычно ей является шея, часто – место между основанием хвоста и костью бедра. Конкретные указания можно получить у специалиста.
3. Введите медикамент в соответствии с указаниями. Продолжайте до тех пор, пока не будет введено нужное количество лекарства.
4. Выньте иглу из места инъекции, отпустите корову.

Методы лечения бруцеллеза КРС: укол корове

В группу риска заражения бруцеллезом попадают люди, которые работают с животными. Чтобы не допустить развитие у крупного рогатого скота заражения, необходимо придерживаться четких правил ухода, содержания и разведения КРС:

Памятка по профилактике бруцеллеза КРС

Содержание крупного рогатого скота в плохих, некомфортных условиях значительно снижает их иммунитет, увеличивая риск заражения инфекциями, в частности, ею может оказаться бруцеллез КРС.

Соблюдайте все профилактические меры по предотвращению заболевания, ухаживайте за скотом, тщательно обрабатывайте молочную и мясную пищу, при появлении первых признаков болезни животного обратитесь к ветеринару. Эти несложные правила помогут вам сохранить здоровье и благополучие всего поголовья крупного рогатого скота и будущего молодняка.

Человек может заразиться бруцеллезом при потреблении молока, которое было получено от зараженных животных (в том числе продуктов молочного происхождения). Если плохо обрабатывать мясо, также есть шанс получить заболевание. Часто заражение происходит на производстве, связанном с обработкой шерсти и кожи. Заболеть можно любым путем, даже во время контакта с больной коровой. Бывали случаи, когда человек заражался бруцеллезом во время уборки навоза. Скрытый период протекания болезни может продолжаться от недели до нескольких месяцев.

Внимательно следите за своим здоровьем, если ваша работа заключается в уходе за крупным рогатым скотом.

Симптомы бруцеллеза у человека разнообразны:

  • общее недомогание;
  • нервозность, стрессы;
  • боль в голове, неприятные ощущения в мышцах и суставах;
  • медлительность, слабая подвижность;
  • сниженный аппетит;
  • повышение температуры (до 37 градусов и больше);
  • озноб.

Симптомы могут не проявлять себя вообще, и не обязательно, что они будут присутствовать одновременно. Во время болезни поражаются сосуды, нервные клетки и костно-суставный аппарат. Нередко появление расстройств в психике. Заболевание длится примерно 3 месяца, но может затянуться и на 2-3 года. Остаточные явления, которыми сопровождается заболевание, могут стать причиной развития инвалидности. У беременных женщин может случиться выкидыш.

Чтобы избежать появления болезни, не используйте в пищу сырое молоко, невыдержанные сыры и брынзу, а также не ешьте мясо, которое не прошло необходимую обработку.

Употребление молока от больного животного

Многие врачи не сразу могут определить наличие этого заболевания у человека. Из отрывка телепередачи «Жить здорово» с Еленой Малышевой вы узнаете, как диагностировать бруцеллез у человека, какие органы поражает недуг и что с этим делать.

источник

Из за большого объема этот материал размещен на нескольких страницах:
1 2 3 4

ПО ДИАГНОСТИКЕ БРУЦЕЛЛЕЗА ЖИВОТНЫХ

1.1. Бруцеллез — инфекционная, хронически протекающая болезнь

Возбудитель — бактерии из рода бруцелла, в который входят

шесть самостоятельных видов: мелитензис (овец и коз), абортус

(крупного рогатого скота), суис (свиней), канис (собак), овис

(баранов и овец) и неотома (кустарниковых крыс).

Микроорганизмы первых четырех видов вызывают бруцеллез

животных, а пятого вида — инфекционный эпидидимит баранов (ИЭ).

От животных, больных бруцеллезом, могут заражаться люди, для

которых наиболее опасен возбудитель бруцеллеза овец и коз.

1.2. Диагноз на бруцеллез у животных ставят на основании

результатов бактериологического, серологического,

молекулярно-генетического и аллергического исследований с учетом

эпизоотологических данных и клинических признаков болезни,

руководствуясь при этом санитарными и ветеринарными правилами по

профилактике и борьбе с заразными болезнями, общими для человека и

1.2.1. При установлении диагноза на бруцеллез необходимо

— различные виды возбудителя являются патогенными, в основном,

для животных соответствующего вида. Бруцеллы видов мелитензис,

абортус и суис могут мигрировать на животных других видов;

— клинические признаки бруцеллеза у животных не характерны.

Наиболее часто клиническое проявление болезни у маточного

поголовья — аборт, у свиноматок наблюдается мумификация плодов.

При абортах отмечается утолщение плодовых оболочек,

образование на них фибринозных или гнойных хлопьев. Бруцеллез

сопровождается нередко поражением суставов (артриты), синовиальной

системы (тендовагиниты, бурситы), половой системы (у самок —

эндометрит, вагинит, у самцов — орхит, эпидидимит);

— патологоанатомическая картина при бруцеллезе не имеет

характерных особенностей, позволяющих использовать их для

диагностики этой болезни. Только у свиней на слизистой оболочке

матки иногда находят желтовато-гнойные или казеозные узелки

величиной с просяное зерно, так называемый «милиарный бруцеллез

— у баранов, больных бруцеллезом, в семенниках и придатках

обнаруживают некротические или гнойные очаги различной величины;

отмечают заполнение полости мошонки серозно-гнойным транссудатом,

разрастание фиброзной ткани, сращение придатка с семенником и

общей влагалищной оболочкой, иногда атрофию семенников.

1.3. Диагностика бруцеллеза включает лабораторные

(бактериологическое, серологическое и молекулярно-генетическое)

исследования материала и аллергическое исследование свиней в

Плановые серологические исследования являются основным методом

выявления больных и подозрительных по заболеванию животных.

Бактериологическую диагностику проводят в случае аборта или

при появлении у животных других признаков (бурситы, гигромы,

орхиты, эпидидимиты и прочие), вызывающих подозрение на данное

заболевание. Одновременно проводят серологическое исследование

сывороток крови этих животных.

Молекулярно-генетическое исследование (ПЦР) проводят в случае

аборта и при появлении у животных других клинических признаков,

вызывающих подозрение на бруцеллез, а также при получении

положительных и сомнительных результатов серологического

исследования на бруцеллез животных, не иммунизированных

противобруцеллезными вакцинами, из хозяйств, благополучных по

1.4. При взятии проб крови, молока и патологического

материала, а также проведении лабораторных исследований необходимо

соблюдать меры, предупреждающие заражение людей и обсеменение

объектов внешней среды, руководствуясь при этом действующими

2. ВЗЯТИЕ МАТЕРИАЛА ОТ ЖИВОТНЫХ И ПЕРЕСЫЛКА

ЕГО ДЛЯ ЛАБОРАТОРНЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.1. Материал для лабораторных исследований отбирают от

каждого животного в отдельности.

2.2. Для бактериологического исследования на бруцеллез

направляют абортированный плод с плодовыми оболочками (от

свиноматок берут не менее трех плодов) или селезенку, печень,

желудок плода с содержимым, перевязанный со стороны пищевода и

двенадцатиперстной кишки, и околоплодную жидкость.

Для прижизненной диагностики бруцеллеза от животных берут

кровь, молоко, содержимое гигром (бурситов) и абсцессов. При

диагностическом убое — дополнительно селезенку, печень,

подчелюстные, заглоточные, предлопаточные, надколенные,

подколенные, надвыменные, парааортальные, тазовые лимфатические

узлы и половые органы. Жидкий материал берут в стерильную посуду

При взятии содержимого гигром, бурс в области поражения

выстригают шерсть, кожный покров дезинфицируют 70%-ным спиртом и

смазывают настойкой йода. Затем стерильным шприцем с иглой

большого диаметра делают пункцию, отсасывают содержимое гигромы

(бурсы) и переносят его в стерильную пробирку с резиновой пробкой.

Перед взятием проб молока у коров вымя обмывают теплой водой,

соски обрабатывают 70%-ным спиртом. Для исследования из каждой

доли вымени берут последние порции молока в количествемл

в отдельные стерильные пробирки с резиновыми пробками.

У овец и коз пробы молока берут путем пункции цистерны вымени.

Для этого животное фиксируют в боковом положении, вымя у основания

соска протирают 70%-ным спиртом и смазывают настойкой йода.

Стерильным шприцем с иглой делают пункцию у основания соска и

после попадания иглы в цистерну (о чем судят по свободному

движению конца иглы) набирают в шприц молоко и переносят его в

стерильную пробирку с резиновой пробкой.

Молоко должно быть доставлено в лабораторию и исследовано в

день взятия пробы. Если это невозможно, молоко консервируют сухой

борной кислотой (0,1 г на 10 мл) или генцианвиолетом (0,4 мл

1%-ного спиртоводного раствора краски на 10 мл молока).

Консервированное молоко пригодно для исследования в течение 10

2.2.1. Отобранные для бактериологического исследования пробы

упаковывают в целлофан или пергаментную бумагу, помещают в

непроницаемую тару (ящик, банка, полиэтиленовый пакет) и в этот же

день направляют в лабораторию. От абортировавшего животного

одновременно с патологическим материалом направляют кровь

(сыворотку крови) для серологического исследования на бруцеллез.

Если в течениеч взятый материал доставить в лабораторию

не представляется возможным, его консервируют стерильным 30%-ным

водным раствором химически чистого глицерина. Материал заливают

консервирующей жидкостью в количестве, превышающем его объем в 4 —

5 раз. Крупные плоды направляют в неконсервированном виде.

2.3. Для серологического исследования в лабораторию направляют

кровь (сыворотку крови) и молоко.

2.3.1. Кровь у животных берут из яремной вены (у свиней — из

яремной, ушной или хвостовой; у собак — головной предплечья или

латеральной подколенной голени; у лисиц и песцов — из бедренной

вены; у норок — путем отсечения подушечки среднего пальца задней

лапы или кончика хвоста в стерильные пробирки по 5 — 7 мл (от

пушных зверей по 1 — 2 мл). Пробирки нумеруют и составляют опись

Сыворотку крови получают методом отстоя. Для свертывания крови

и отстаивания сыворотки пробирки с кровью выдерживают в термостате

приС в течение 1 ч или при комнатной температуре 8 — 10

ч, сгусток крови от стенок отделяют стальной спицей, а затем

пробирки выдерживают при С. Черезч после взятия

крови отстоявшуюся сыворотку сливают в сухие стерильные пробирки и

направляют для исследования в лабораторию в свежем или

консервированном виде (сыворотку крови собак сливают через 3 — 4 ч

Консервирование сывороток проводят:

— добавлением 0,05 мл (1 капля) 5%-ного раствора фенола на

каждый миллилитр сыворотки при тщательном перемешивании;

— сухой борной кислотой% к объему сыворотки) до

получения насыщенного раствора и образования на дне пробирки

— путем однократного замораживания.

Неконсервированные сыворотки пригодны для исследования в

течение 6 сут. со дня взятия крови при условии хранения их при 4 —

Сыворотки, консервированные фенолом или борной кислотой,

пригодны для исследования в течение 30 сут.; замороженные

сыворотки — в течение 3 сут. после однократного оттаивания.

Мутные, проросшие, гемолизированные сыворотки исследованию на

2.3.2. Для исследования на бруцеллез в кольцевой реакции пробу

цельного свежего молока от коровы (буйволицы) берут сборную из

каждой доли вымени одного удоя в одну стерильную пробирку в

количествемл. При этом, если молоко берут перед дойкой,

то первые порции молока сдаивают. Пробы молока на рынках берут из

каждой отдельной посуды (бидон, фляга и проч.) после тщательного

его перемешивания. Пробирки нумеруют и составляют опись проб.

Молоко исследуют свежее (охлажденное до С или

неохлажденное) или консервированное добавлением в каждую пробу

одной капли 10%-ного раствора формалина на 5 мл молока.

Консервированное молоко пригодно для исследования в течение 2 — 3

сут. Перед исследованием молоко необходимо тщательно перемешать

для равномерного распределения сливок.

При массовом исследовании молока работу по отбору проб и

постановке кольцевой реакции можно проводить непосредственно на

ферме в специально отведенном помещении.

Не разрешается исследовать в кольцевой реакции молоко от коров

(буйволиц), больных маститом или болезнями, сопровождающимися

повышением температуры тела, а также молоко животных в первые две

недели после родов. Молоко, имеющее повышенную кислотность (30- по

Тернеру и выше), исследованию не подлежит, т. к. антиген

2.4. На направляемый в лабораторию материал заполняют

сопроводительный документ установленной формы.

3. БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА БРУЦЕЛЛЕЗА

3.1. Бактериологическую диагностику бруцеллеза проводят в

случае аборта или при появлении у животных других признаков

(бурситы, гигромы, орхиты, эпидидимиты и прочие), вызывающих

подозрение на данное заболевание.

3.2. Бруцеллы обнаруживают бактериоскопией мазков из

патологического материала, выделением культуры бруцелл на

питательных средах и, при необходимости, путем постановки

биологической пробы на морских свинках.

3.3. Бактериоскопическое исследование

Из доставленного на исследование патологического материала

делают по два мазка из каждого объекта. При исследовании

абортированных плодов мазки готовят из содержимого желудка,

жидкости брюшной и грудной полостей, печени, селезенки, а также

котиледонов плодовых оболочек. Из паренхиматозных органов,

котиледонов и другого плотного материала делают мазки-отпечатки,

жидкий материал наносят на предметные стекла пипеткой.

Мазки, фиксированные над пламенем горелки, окрашивают по Граму

и одному из следующих специальных методов: по Стампу

(модифицированный метод Циль-Нильсена), Козловскому или

Шуляку-Шину (см. Прил. N 1, п. 1). При микроскопии мазков

учитывают, что бруцеллы — мелкие, грамотрицательные, расположенные

отдельно, попарно или кучно коккобактерии, окрашивающиеся по

Стампу, Козловскому или Шуляку-Шину в красный цвет.

3.4. Бактериологическое исследование

3.4.1. Для культивирования бруцелл используют мясо-пептонный

печеночный бульон (МППБ), печеночный глюкозо-глицериновый бульон

(ПГГБ), мясо-пептонный печеночно-глюкозо-глицериновый агар

(МППГГА), печеночный глюкозо-глицериновый агар (ПГГА),

картофельный агар, эритрит-агар, сывороточно-декстрозный агар,

печеночно-сывороточный агар и печеночно-аминопептидный агар, (см.

Прил. N 1, п. 2) и другие питательные среды, предназначенные для

3.4.2. Перед посевом материала кожу абортированного плода с

поверхности по белой линии протирают тампонами, смоченными 5%-ным

раствором фенола. Стерильными ножницами вскрывают брюшную стенку и

грудную клетку плода, содержимое грудной и брюшной полостей

набирают пастеровскими пипетками и высевают в 1 пробирку с

бульоном и 2 пробирки с агаром, а содержимое желудка — в 2

пробирки с бульоном и не менее 5 пробирок с агаром.

Из печени и селезенки вырезают кусочки размером не менее 2,0 х

1,5 х 2,5 см, увлажняют их спиртом, обжигают с поверхности и

растирают в стерильной ступке с песком. Затем в ступку добавляют

равное количество стерильного физиологического раствора и вновь

растирают. Полученную взвесь пастеровской пипеткой по 0,1 — 0,2 мл

высевают на поверхность предварительно подсушенных плотных сред (в

пробирках или чашках). Допускается высев материала пастеровской

пипеткой из органов (место прокола органа предварительно прижигают

раскаленным шпателем). Из каждого органа делают посев на 1

пробирку с бульоном и 2 пробирки с агаром.

Если в лабораторию доставлен только желудок плода, высев

проводят не менее чем на 10 пробирок агара.

При поступлении нескольких плодов от одного животного посевы

делают из органов и тканей каждого плода отдельно.

Из плодовых оболочек и плаценты вырезают кусочки тканей с

утолщенными ворсинками и стенками, наличием на поверхности фибрина

или гнойного экссудата (выбирают менее загрязненные участки без

Для уничтожения посторонней микрофлоры кусочки плаценты

помещают в чашку Петри и заливают 3%-ным раствором гидроокиси

калия на 30 мин. Затем их обмывают стерильным физиологическим

раствором, готовят из этого материала суспензию в ступке со

стерильным песком и делают посев пастеровской пипеткой на чашки со

средой, содержащей бактериостатические препараты: генцианвиолет

1:200000 (0,1 мл 0,5%-ного спиртоводного раствора на 100 мл среды)

или кристаллвиолет 1: генцианвиолет и малахитовую зелень в

концентрации каждой краски 1: уксуснокислый натрий из

расчета 12,5 мг на 100 мл среды и др.

Содержимое бурс, гигром высевают на 3 — 4 чашки с плотной

питательной средой, содержащей бактериостатические препараты.

Пробы молока центрифугируют 30 мин. при 3000 об./мин. Верхний

слой (сливки) и осадок набирают в пастеровскую пипетку и по 0,1 —

0,2 мл вносят на 3 — 4 чашки с агаром, содержащим

бактериостатические препараты. Молоко, консервированное

генцианвиолетом или другими консервантами, высевают на среды без

3.4.3. Для выращивания культур посевы помещают в термостат при

При исследовании материала от крупного рогатого скота половину

засеянных пробирок и чашек культивируют в обычных условиях, другую

— в атмосфере с повышенным содержанием углекислого газа %)

в СО — инкубаторе или эксикаторе (микроанаэростате). Аналогичные

условия можно создать в пробирках, закрытых резиновыми пробками

Перед парафинированием пробирки закрывают ватными пробками,

пронося последние над пламенем горелки. Затем верхнюю часть пробки

обрезают, а оставшуюся часть углубляют на 0,5 — 1,0 см внутрь

пробирки и заливают расплавленным парафином.

Необходимое содержание углекислого газа в эксикаторе можно

— заполнения части объема углекислым газом из баллона или

— внесения бикарбоната натрия и серной или соляной кислоты

Читайте также:  Профилактика бруцеллеза в хозяйствах

(0,48 г бикарбоната натрия и 5 мл 25%-ного раствора кислоты или

0,4 г бикарбоната натрия и 0,35 мл концентрированной соляной

— сжигания ваты, смоченной спиртом. При этом пробирки и чашки

с посевами должны занимать не более половины объема эксикатора.

Для определения концентрации углекислого газа в эксикаторе можно

использовать химический метод (см. Прил. N 1, п. 3).

3.4.4. Посевы выдерживают в термостате приС в

течение 30 сут. Первичный осмотр посевов проводят черезч.

Пробирки с агаром и бульоном, заросшие посторонней микрофлорой,

обезвреживают путем автоклавирования при 1,5 атм. в течение 1 ч.

В дальнейшем для обнаружения роста бруцелл посевы

просматривают каждые 3 — 4 сут. визуально, при необходимости через

лупу или малом увеличении микроскопа. При отсутствии роста часть

поверхности агара орошают посевным материалом.

При значительном росте посторонней микрофлоры (80% и более

засеянных пробирок) бактериологическое исследование прекращают.

При просмотре посевов обращают внимание на характер роста

микробов. На поверхности агара бруцеллы образуют мелкие,

блестящие, выпуклые, с ровными краями и гладкой поверхностью

просвечивающиеся колонии, имеющие в отраженном свете голубоватый

оттенок, в падающем свете — сероватый. С возрастом колонии мутнеют

и приобретают более темную окраску, что связано с появлением

В бульоне бруцеллы образуют равномерное помутнение и

пристеночное кольцо, возвышающееся над уровнем бульона, а в

дальнейшем небольшой осадок на дне пробирки. В отраженном свете

пристеночное кольцо имеет голубоватый оттенок.

При обнаружении роста на жидких средах и отсутствии

характерного роста на агаре из каждой пробирки готовят мазки,

которые окрашивают одним из специальных методов, и делают пересев

на чашки с плотной средой для выделения чистой культуры. Пересевы

на чашках культивируют так же, как и высевы из патологического

Выделенные культуры идентифицируют по тинкториальным (окраска

мазков по Граму и одним из специальных методов — по Стампу,

Козловскому или Шуляку-Шину), морфологическим, культуральным

свойствам и в реакции агглютинации на стекле с использованием

набора компонентов для серологической дифференциации бруцелл.

Для постановки пластинчатой реакции агглютинации на стекле

необходимы следующие компоненты: испытуемая культура, набор для

серологической дифференциации бруцелл (выпускается

биопредприятием), 0,5%-ный фенолизированный физиологический

Для исследования берут двухсуточные агаровые культуры. R — и

S-сыворотки бруцеллезные агглютинирующие разводят 0,5%-ным

фенолизированным физиологическим раствором до рабочего разведения,

указанного на этикетке коробки. Разведенные сыворотки допускается

использовать в течение месяца. R-антиген бруцеллезный цветной для

РА и антиген бруцеллезный для роз бенгал пробы в пластинчатой РА

применяют неразведенными. Предметные стекла для реакции

подготавливают общепринятым способом. Физиологический раствор,

пробирки и пипетки должны быть стерильными.

Техника постановки реакции. На предметное стекло раздельно

наносят по одной капле R — и S-сывороток бруцеллезных

агглютинирующих и физиологического раствора. Испытуемую культуру

бактериологической петлей отдельно эмульгируют в каплях R — и

S-сывороток и в капле физиологического раствора для определения

самоагглютинации культуры. Параллельно в каждом опыте ставят

контроли: R — и S-сыворотки в разведении, указанном на этикетке, с

цветным R-бруцеллезным антигеном и с роз бенгал антигеном.

Учет и оценка реакции. Реакцию учитывают невооруженным глазом

или с помощью увеличительного стекла в течение 2 минут по

++++ (4 креста) — полное просветление жидкости с образованием

четко выраженного агглютината — положительная реакция;

+++ (3 креста) — неполное просветление жидкости с выраженным

агглютинатом — положительная реакция;

++ (2 креста) — неполное просветление жидкости со слабо

выраженным агглютинатом — положительная реакция;

+ (1 крест) — жидкость без просветления с едва заметным

агглютинатом — сомнительная реакция;

— (минус) — просветление жидкости не наступило, смесь

гомогенная — отрицательная реакция.

Следует иметь ввиду, что реакция с R-бруцеллезной сывороткой

проходит замедленно; агглютинат, как правило, мелкозернистый.

Результаты реакции с испытуемой культурой считают достоверными,

если в контролях R — и S — бруцеллезных сывороток с гомологичными

антигенами агглютинация четко выражена не менее чем 3 креста, а с

Реакцию с испытуемой культурой считают положительной при

наличии агглютинации на 2 креста и более. При отрицательной

реакции ее проводят повторно с этой же культурой, взятой из

Культуры, обладающие типичными для бруцелл морфологическими,

культуральными и тинкториальными свойствами, а также дающие

положительную реакцию агглютинации с R — и S — бруцеллезными

сыворотками в отдельности или с обеими сыворотками одновременно

при отсутствии самоагглютинации в физиологическом растворе,

Культура возбудителя инфекционного эпидидимита баранов и

бруцеллеза собак, вызванного B. canis, постоянно агглютинируется

только R — бруцеллезной сывороткой.

3.5. Биологическое исследование

3.5.1. Биологическое исследование проводят на морских свинках

(не менее двух) массой г, предварительно проверенных на

бруцеллез исследованием в РА сыворотки крови в разведении 1:5 с

3.5.2. Для постановки биологической пробы используют тот же

материал, что и для бактериологического исследования.

Из органов и содержимого желудка абортированного плода готовят

суспензию на стерильном физиологическом растворе в соотношении

1:10 и вводят морской свинке подкожно с внутренней стороны бедра в

Из плаценты и плодовых оболочек, предварительно обработанных

тампонами, смоченными дезинфицирующим раствором, и подсушенных

сухими стерильными тампонами, вырезают кусочки размером 0,5 х 0,5

см, фламбируют на пламени горелки, растирают в ступке со

стерильным песком и заливают физиологическим раствором в

соотношении 1:10. Полученную суспензию вводят морской свинке в

Содержимое гигром, бурс вводят морской свинке подкожно в

объеме 0,2 — 0,3 мл. При этом необходимо учитывать возможность

гибели животного от сопутствующей микрофлоры, особенно

Пробы молока центрифугируют 30 мин. при 3000 об./мин. Морской

свинке вводят подкожно 2 — 3 мл материала из верхнего слоя

(сливки) и осадка молока после центрифугирования.

3.5.3. На 15, 25 и 40-е сут. после заражения у морских свинок

берут кровь в количестве 1 — 2 мл из ушной вены путем надреза или

из сердца — путем пункции. Сыворотку крови исследуют в пробирочной

РА в разведениях от 1:10 до 1:80.

При положительной реакции агглютинации в разведении 1:10 и

выше морских свинок убивают. В случае необходимости получения

культуры возбудителя материал от них исследуют бактериологически.

Высевы делают пастеровскими пипетками в одну пробирку бульона и

две пробирки агара из паховых, парааортальных лимфатических узлов

(правых и левых), селезенки (2 высева), печени и костного мозга.

Посевы культивируют, как описано в подпунктах 3.4.3 и 3.4.4.

При отрицательной РА у морских свинок в указанные выше сроки

биопробу считают отрицательной, подопытных животных убивают,

бакисследование не проводят.

3.5.4. При выделении культуры бруцелл на питательных средах из

исходного материала биологическое исследование по данной

экспертизе прекращают, а ранее зараженных морских свинок убивают

3.6. Результат исследования на бруцеллез считают положительным

при выделении культуры возбудителя или при получении у морской

свинки положительной РА в разведении сыворотки крови 1:10 и выше,

если из исходного материала культура не выделена.

При положительных результатах бактериоскопии и отрицательных

результатах бактериологического исследования и биопробы материал

считают подозрительным на бруцеллез. При сохранении патматериала

или возможности взятия нового (кровь, молоко, моча и др.)

исследование проводят методом полимеразной цепной реакции. По ее

результатам делают заключение о заболевании животных бруцеллезом.

— бактериологического — до 1 мес.;

3.8. В ветеринарных лабораториях все выделенные культуры

бруцелл после их идентификации подлежат уничтожению путем

автоклавирования при 1,5 атм. в течение 1 ч.

3.9. При необходимости определения вида бруцелл выделенные от

животных культуры направляют в республиканские, краевые, областные

ветеринарные лаборатории или ветеринарные научно-исследовательские

учреждения, в которых имеются лаборатории или отделы, занимающиеся

изучением бруцеллеза животных и имеющие разрешение органов

здравоохранения на работу с микроорганизмами второй группы.

4. СЕРОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА БРУЦЕЛЛЕЗА

4.1. Серологическая диагностика бруцеллеза заключается в

обнаружении специфических антител в сыворотке крови животных в

реакции агглютинации (РА) в пробирках, реакции связывания

комплемента (РСК), реакции длительного связывания комплемента на

холоде (РДСК), реакции иммунодиффузии с 0-полисахаридным антигеном

(РИД), пластинчатой реакции агглютинации с роз бенгал антигеном

(роз бенгал проба — РБП) и в молоке коров — кольцевой реакции (КР)

и других реакциях, утвержденных в установленном порядке.

4.2. Постановка и учет результатов реакции агглютинации (РА) в

4.2.1. Реакцию агглютинации в пробирках с бруцеллезным

антигеном применяют при диагностике бруцеллеза у крупного рогатого

скота (буйволов, яков, зебу), овец, коз, лошадей, верблюдов,

оленей (маралов), собак, пушных зверей и морских свинок.

4.2.2. Компоненты реакции агглютинации:

— испытуемые сыворотки крови (см. п. 2.3.1);

— позитивная бруцеллезная сыворотка, изготовленная

— негативная сыворотка (сыворотка крови здоровых животных из

опыта или консервированная), изготовленная биопредприятием или

— антиген бруцеллезный единый для РА, РСК и РДСК (см. Прил. N

— 0,5%-ный фенолизированный раствор хлорида натрия. При

исследовании сывороток крови крупного рогатого скота, лошадей,

верблюдов, собак, пушных зверей и морских свинок для разведения

испытуемых сывороток и антигена используют фенолизированный

физиологический раствор хлорида натрия (0,85%-ный); при

исследовании крови овец и коз — 5%-ный и оленей (маралов) —

фенолизированный 10%-ный раствор хлорида натрия (см. Прил. N 2, п.

4.2.3. Постановка реакции агглютинации

Реакцию агглютинации проводят в серологических пробирках в

объеме 1 мл в четырех разведениях:

— при исследовании сывороток крови овец, коз, оленей (маралов)

и собак — 1:25, 1:50, 1:100 и 1:200;

— крупного рогатого скота, лошадей и верблюдов — 1:50, 1:100,

— пушных зверей и морских свинок — 1:10, 1:20, 1:40 и 1:80.

При массовых исследованиях допускается постановка реакции в

Компоненты реакции вносят индивидуальными мерными пипетками

(дозаторами) или групповыми дозаторами Флоринского.

Для исследования каждой испытуемой сыворотки крови требуется 5

пробирок. В пробирках первого ряда делают исходное разведение. Для

этого сыворотку крови крупного рогатого скота, лошадей и верблюдов

берут в дозе 0,1 мл, вносят в пробирку, добавляют к ней 2,4 мл

соответствующего раствора хлорида натрия, смешивают и получают

разведение сыворотки 1:25. Сыворотку крови овец, коз, оленей

(маралов) и собак берут в дозе 0,2 мл и добавляют 2,3 мл

соответствующего раствора хлорида натрия (разведение 1:12,5), а

сыворотку крови пушных зверей и морских свинок берут в дозе 0,3 мл

и добавляют 1,2 мл соответствующего раствора хлорида натрия

(разведение 1:5). Таким образом делают исходное разведение

испытуемых сывороток в пробирках первого ряда штатива (по 10 проб

После приготовления исходного разведения сывороток в первом

ряду в пробирки третьего, четвертого и пятого рядов вносят по 0,5

мл соответствующего раствора хлорида натрия. Затем из пробирок

первого ряда при помощи группового дозатора Флоринского или

индивидуальных пипеток-дозаторов переносят в пробирки второго и

третьего рядов по 0,5 мл исходного разведения сывороток (1:25;

1:12,5 или 1:5). В пробирках третьего ряда сыворотки смешивают, по

0,5 мл этого разведения переносят в пробирки четвертого ряда и так

же из пробирок четвертого ряда — в пятый. Из пробирок пятого ряда

0,5 мл жидкости удаляют. Таким образом делают последовательные

двукратные разведения сывороток.

После этого в каждую пробирку второго, третьего, четвертого и

пятого рядов с разведенными сыворотками вносят при помощи

группового дозатора Флоринского или другого дозирующего устройства

по 0,5 мл антигена, предварительно разведенного 1:10

соответствующим раствором хлорида натрия. После добавления

антигена разведение сыворотки в каждой пробирке удваивается и, в

зависимости от вида исследуемых животных, будет составлять 1:50,

1:100, 1:200 и 1:400; 1:25, 1:50, 1:100 и 1:200 или 1:10, 1:20,

В пробирки первого ряда бруцеллезный антиген не вносят, они

служат контролем качества сыворотки. При наличии хлопьев, фибрина,

эритроцитов и посторонних примесей результаты реакции агглютинации

При массовых исследованиях сыворотки разливают индивидуальной

микропипеткой (с грушей) или групповыми дозаторами Флоринского в

две пробирки в дозах 0,02 и 0,01 мл (сыворотки крупного рогатого

скота, лошадей и верблюдов) или 0,04 и 0,02 мл при исследовании

сывороток овец, коз, оленей (маралов) и собак. Затем в каждую

пробирку добавляют по 1,0 мл антигена, разведенного

соответствующим раствором хлорида натрия 1:20. При этом разведения

сывороток будут соответственно 1:50 и 1:100 или 1:25 и 1:50.

При постановке реакции агглютинации одновременно с испытуемыми

сыворотками ставят контроли с негативной и позитивной бруцеллезной

сыворотками в таких же разведениях.

После добавления к испытуемым и контрольным сывороткам

антигена штативы с пробирками встряхивают для смешивания

компонентов и помещают в термостат приС нач,

затем выдерживают при комнатной температуре в течение 1 ч и

4.2.4. Учет реакции агглютинации. Результаты реакции учитывают

визуально, определяя степень просветления жидкости, внешний вид

агглютината (при его наличии) или антигена на дне пробирки до и

затем, после легкого встряхивания, оценивают в крестах по

++++ (4 креста) — полное просветление жидкости, микробные

клетки антигена осели на дно пробирки в виде «зонтика», при легком

встряхивании «зонтик» разбивается на хлопья и комочки, а жидкость

остается прозрачной (100% агглютинации);

+++ (3 креста) — неполное просветление жидкости и хорошо

выраженный «зонтик» (75% агглютинации);

++ (2 креста) — неполное просветление жидкости, «зонтик»

умеренно выражен (50% агглютинации);

+ (1 крест) — едва заметное просветление жидкости, «зонтик»

выражен слабо, при встряхивании заметно небольшое количество

хлопьев или комочков (25% агглютинации);

— (минус) — просветления жидкости и образования «зонтика» не

наступило, на дне пробирки по центру образуется небольшой осадок

микробов антигена в виде точки или пятна. При встряхивании осадок

легко разбивается, поднимается вверх в виде косички и равномерно

распределяется в жидкости, которая при этом приобретает

За титр антител принимают наибольшее разведение сыворотки, в

котором произошла агглютинация на 2 креста (++), что соответствует

количеству международных единиц (МЕ) антител в 1 мл сыворотки

(например, сыворотка с титром 1:100 содержит 100 МЕ, 1:

Для более объективной оценки результатов РА в крестах готовят

стандарты мутности, соответствующие 75, 50, 25 и 0% просветления

В четыре пробирки последовательно наливают 1, 2, 3 и 4 мл

антигена, разведенного 1:10. Затем в том же порядке в три первые

пробирки добавляют 3, 2 и 1 мл физиологического раствора. В

четвертую пробирку раствор не добавляют. После встряхивания

пробирок из каждой из них переносят по 0,5 мл в серологические

пробирки и добавляют по 0,5 мл физиологического раствора.

Полученные стандарты соответствуют 75, 50 и 25% просветления

жидкости. В четвертой пробирке просветление отсутствует. Стандарты

мутности готовят каждый раз при постановке РА и выдерживают в

термостате одновременно с основной реакцией.

При массовых исследованиях в двух разведениях все сыворотки,

давшие агглютинацию с оценкой не менее чем на 2 креста (++) в

каком-либо из указанных разведений, исследуют повторно в четырех

4.2.5. Диагностическая оценка реакции агглютинации

Реакцию считают положительной при наличии агглютинации с

сывороткой крови крупного рогатого скота (буйволов, яков, зебу),

верблюдов и лошадей, не иммунизированных или иммунизированных

неагглютиногенными противобруцеллезными вакцинами (см. Прил. N 2,

п. 7), содержащей 200 МЕ антител и выше; овец и коз — 100 МЕ и

выше; оленей (маралов) и собак — 50 МЕ и выше; пушных зверей и

морских свинок — 10 МЕ и выше.

При выявлении среди не иммунизированных противобруцеллезными

вакцинами, а также иммунизированных неагглютиногенными вакцинами

крупного рогатого скота, верблюдов и лошадей, животных,

реагирующих только в РА с содержанием антиМЕ, а среди

овец, коз, оленей (маралов), собак — 25 МЕ, считают сомнительно

реагирующими и исследуют повторно черезсут. При повышении

титров заболевание считают установленным. При сохранении титров на

прежнем уровне проводят дополнительные исследования по

дифференциации, согласно утвержденным методам.

При выявлении в стадах крупного рогатого скота, ранее

иммунизированного против бруцеллеза агглютиногенными вакцинами

(см. Прил. N 2, п. 7), животных, реагирующих только в РА с

содержанием не выше 200 МЕ антител и РСК в разведении сыворотки

крови не выше 1:10, их повторно исследуют черезсут. в РА,

РСК и РИД. При повышении содержания антител в исследуемых

сыворотках в РА и (или) РСК или положительной РИД заболевание

При выявлении в неблагополучных по бруцеллезу стадах крупного

рогатого скота, ранее не иммунизированных или иммунизированных

противобруцеллезными вакцинами, животных, положительно реагирующих

в РА с содержанием 100 МЕ антител и выше, признают больными.

Реакцию считают сомнительной при содержании 50 МЕ антител.

Сыворотки крови от таких животных черезсут. исследуют

повторно. При получении вновь сомнительного результата животных

признают больными бруцеллезом.

При исследовании в РА неиммунизированных

баранов-производителей, козлов, пробников и ярок, содержащихся в

благополучных по бруцеллезу отарах, где овцы (козы) иммунизированы

против бруцеллеза, реакцию считают положительной, а заболевание

установленным при содержании в сыворотке крови животных 100 МЕ

антител и выше. Реакцию считают сомнительной при наличии 50 МЕ

антител. Сыворотки крови от таких животных черезсут.

исследуют повторно. При получении вновь сомнительных результатов

животных признают здоровыми, а отару — благополучной по

В заключении лаборатории о результатах исследования должна

быть сообщена диагностическая оценка каждой пробы (положительная,

источник