Возбудителем бруцеллеза является короткая палочка Бруцелла, которая была названа в честь ученного, открывшего ее в 1886 году.
Возбудителем бруцеллеза выступают мелкие бактерии рода Brucella, относящиеся к различным видам. Род Brucella представляет собой компактную, достаточно обособленную генетическую группу.
Род Brucella по систематике Берги относится к родам с неясным систематическим положением. Род включает шесть видов: Brmelitensis, Br.abortus, Br.suis, Br.ovis, Br.neotomae и Br.canis, которые различаются, в основном, по культуралышм и биохимическим свойствам.
Морфология, тинкториальные и культуральные свойства бруцелл.
По морфологическим признакам различные виды и биотипы бруцелл неотличимы друг от друга. Это очень мелкие микроорганизмы со свойственным им полиморфизмом. В микроскопических препаратах они могут встречаться одновременно в шаровидной, овоидной и палочковидной формах.Н. Н. Островская (1961г.) отмечает, что у бактерий Вr. abortus и Вr. suis преобладают удлиненные, а у Вr. тelitensis — кокковидная формы. Чаще всего в препарате наблюдается беспорядочное расположение одиночных бактерий, но иногда они располагаются в виде цепочки или попарно. Размер клеток колеблется от 0,3 до 0,6 мк для кокковых и от 0,6 до 1,5 мк для удлиненных форм.
Бруцеллы не обладают подвижностью, не образуют спор. При некоторых условиях у них может появляться капсула (Нuddleson, 1943г.; Н.Д. Анина-Радченко, 1954г.; Н.Н. Островская и Э.Н. Князева, 1957г.). Бруцеллы сходны между собой по субмикроскопическому строению клеточной стенки, цитоплазматической мембраны, цитоплазмы и нуклеоида и не имеют принципиальных отличий в этом отношении от других грамотрицательных бактерий (Н.Н. Островская, 1972г.).
Бруцеллы окрашиваются всеми анилиновыми красителями: при окраске по Романовскому приобретают нежно-фиолетовый цвет; по Граму не красятся. Предложены дифференциальные способы окраски бруцелл, которые основаны на свойстве этих бактерий сохранять первичную окраску при переокрашивании препарата другими контрастными красителями. Большое распространение получил простой способ дифференциальной окраски по Е.В. Козловскому (1936г.).
Техника окраски по этому способу сводится к следующему. Высушенные на воздухе препараты фиксируют на пламени и окрашивают 2-процентным водным раствором сафранина с подогреванием до появления пузырьков; затем препарат промывают водой и дополнительно окрашивают 0,75-1-процентным водным раствором малахитовой зелени в течение 0,5-1 мин. Бруцеллы сохраняют красный цвет, а другие бактерии и тканевые клетки окрашиваются в зеленый цвет.
Выращивание культуры бруцелл удается на обычных, применяемых для культивирования бактерий питательных средах, имеющих нейтральную или слабощелочную реакцию (рН 6,8-7,2). Рост получают в аэробных условиях при температуре 37°. Некоторые виды и биотипы бруцелл для своего роста, особенно в первых генерациях при выделении от естественно больных животных, требуют повышенной концентрации (5-10%) СО2 в атмосферном воздухе.
По сравнению с другими гетеротрофными бактериями бруцеллы более требовательны к питательным средам. Поэтому для первичного выделения и дальнейшего культивирования этих бактерий рекомендованы специальные питательные среды. С этой целью успешно используются печеночные и мясо-печеночные среды, особенно с добавлением глицерина (2%) и глюкозы (1%). С несомненным успехом применяется разработанная Н.В. Плоскиревым сухая среда «Д», основу которой составляют рыбный и дрожжевой гидролизаты. По данным автора и других исследователей (Н.Н. Островская и А.А. Голубева, 1958г.), среда «Д» имеет некоторые преимущества перед печеночной средой. Хорошие результаты получали при культивировании бруцелл на картофельной среде (Нuddleson, 1943г.; В.Е. Корнеева, 1949 г.и другие) и на среде Альбими.
Объединенный Комитет экспертов ФАО/ВОЗ по бруцеллезу (1970г.) для первичного выделения и для дальнейших пересевов культур бруцелл рекомендует такие основные среды: сывороточно-декстрозный агар; картофельный агар плюс сыворотка; триптикозно-соевый и триптозный агар; кровяной агар (5% овечьей крови в агаре основной среды).
Для выделения культур бруцелл из загрязненных посторонней микрофлорой материалов рекомендуется пользоваться этими же средами после добавления к ним не мешающих росту бруцелл антибиотиков: полимиксина, бацитрацина, циклогексамида, актидиона.
Изготовленная питательная среда может быть признана пригодной только в том случае, если на ней наблюдается рост большинства штаммов бруцелл при малом (5-10 микробных клеток) инокуляте.
Некоторые исследователи изучали потребность бруцелл в источнике азота и дополнительных факторах роста. О.В. Кондратьева и В.М. Степанов (1968, 1969г.) сделали вывод, что рост бруцелл обеспечивается при наличии в среде только 6 аминокислот: глютаминовой, L-аланина, лизина, метионина, гистидина, цистеина. Важнейшим источником азота, по их мнению, являются глютаминовая кислота и цистеин. Подчеркивается также потребность бруцелл в комплексе витаминов группы В (В1 В2, В6) и в никотиновой кислоте. Витамин А необходим для роста только некоторых штаммов бруцелл.
Для бруцелл характерен замедленный рост, особенно первых генераций культуры. Поэтому посевы материалов, взятых от естественно зараженных животных, следует выдерживать в термостате до 4-5 недель, если не получен рост в более ранние сроки. На хорошо подобранной среде лабораторные штаммы бруцелл дают обильный рост через 24-48 часов.
При посеве бруцелл из густой взвеси бактерий на скошенный агар образуется нежный с маслянистым блеском прозрачный слой, который постепенно грубеет, мутнеет, становится менее прозрачным и приобретает серый с голубоватым оттенком цвет. Почти такие же изменения наблюдаются при посеве бруцелл штрихом.
В посевах на бульон наблюдается постепенное равномерное помутнение среды. При длительном пребывании бульонной культуры в термостате на дне сосуда образуется рыхлый осадок, а на поверхности среды медленно образуется пристеночное кольцо или кольцо и пленка.При разреженном посеве на агаровые пластинки в чашках Петри бруцеллы обычно растут в виде круглых, выпуклых, слегка прозрачных колоний с ровным краем. Поверхность колоний гладкая, с маслянистым блеском. При удлинении периода роста колонии становятся менее прозрачными.
Неnrу (1933г.), Нuddleson (1952г.), Раrnas и Сhodkowski (1959г.), П.Н. Жованик (1972г.) изучали колонии бруцелл под микроскопом при боковом освещении (техника этого исследования приводится в главе «Изменчивость бруцелл»). При этом освещении удалось обнаружить, что культуры бруцелл нередко бывают неоднородными (гетерогенными) по составу клеток. Клетки S-формы образуют круглые выпуклые колонии с ровными краями. При боковом освещении они имеют гладкую или нежно-зернистую поверхность и серо-голубое с зеленым оттенком свечение. На этом фоне выделяется небольшой красновато-желтый центр колонии. Спонтанно возникающие в процессе популяционной изменчивости клетки R-, М — или иной формы образуют колонии, которые резко отличаются от колоний S-формы, особенно по характеру свечения.
Культуры бруцелл хорошо сохраняются на твердых питательных средах при пересеве их через каждые 30-45 дней. Лучше хранить эти культуры в высушенном виде. При высушивании используют среду, содержащую 1,5% желатины и 10% сахарозы, растворенных в дистиллированной воде. Хранят высушенную культуру в хорошо запаянных ампулах без доступа воздуха при температуре 7°.
Патогенность и вирулентность бруцелл.
В организме зараженных животных бруцеллы живут и размножаются главным образом внутри клеток ретикуло-эндотелиальной системы. Это дает основание относить их к числу внутриклеточных паразитов, хотя иногда они могут находиться и внеклеточно. Проникнув в организм животного, бруцеллы обычно задерживаются в лимфоидных тканях и обуславливают развитие патоморфологических изменений в виде ретикуло-эндотелиальных пролифератов и некробиотических очагов. Эти патологические изменения зависят от степени вирулентности данной культуры.
Вирулентность каждого штамма культуры бруцелл является его индивидуальным свойством и в известной мере количественным выражением патогенности. Ее измеряют обычно величиной минимальной инфицирующей дозы (ИД), способной вызвать заражение всех или большинства опытных животных.
Как среди лабораторных, так и среди свежевыделенных культур бруцелл могут встречаться штаммы с весьма различной степенью вирулентности. В опытах на морских свинках высоковирулентные штаммы всех трех классических видов бруцелл вызывают развитие генерализованной инфекции уже в дозе 5-10 микробных тел (м. т.). По данным многих авторов и результатам наших собственных исследований, развитие генерализованной инфекции после такого заражения наступает обычно в течение 4-5 недель.
Для многих вирулентных штаммов бруцелл одна ИД составляет 25-50 м. т., а иногда и больше. Существуют слабовирулентные и авирулентные штаммы бруцелл. Культуры таких штаммов плохо приживаются в организме животных.
Исследователи определяли минимальную инфицирующую дозу бруцелл и в опытах на сельскохозяйственных животных. Нuddleson (1943г.) приводит результаты опытов Мак Ивена с соавторами и Хатчинга, в которых исследователи подвергли конъюнктивальному заражению осемененных телок разными дозами культуры Вr. abortus.
Хаддлсон подчеркивает, что для коров средней чувствительности минимальная инфицирующая доза культуры Вr. abortus составляла около 1 миллиона бактерий (м. т.) и что в опытах Хатчинга значительно меньшая доза и в более короткий срок вызывала появление первого доказательства инфекции в виде положительной реакции агглютинации. При подкожном заражении овец высоковирулентной культурой Вr. abortus доза 5-25 тыс. бруцелл вызывала лишь регионарную инфекцию (П.А. Вершилова, 1961г.). Развитие генерализованной инфекции регулярно получали после введения такой культуры в дозе 100 тыс. микробных клеток. При нанесении культуры на конъюнктиву или слизистую влагалища в дозе не менее 1-500 миллионов бруцелл наблюдали регулярное заражение овец.
У бруцелл нередко наблюдается спонтанное понижение вирулентности. Это может быть связано с популяционной изменчивостью культуры. Появляющиеся в культуре штамма измененные клетки вследствие свойственному им селективному преимуществу постепенно увеличиваются в количестве и начинают преобладать в популяции клеток, придавая культуре новые измененные свойства. Ослабленную вирулентность можно вновь повысить. Для этого, используя действие закона естественного отбора, культуры подвергают многократным пассажам через организм высокочувствительных к бруцеллезу морских свинок или каких-либо других чувствительных к бруцеллезной инфекции животных.
В сравнимых условиях опыта на морских свинках сопоставляли Вr. abortus и Вr. melitensis (П.Ф. Здродовский и П.В. Воскресенский, 1930), а также Br. Abortus и Вr. suis (Харди и др., 1931г.) с целью обнаружения различий в патогенности у разных видов бруцелл. Результаты исследований были противоречивы, поэтому выделить тот или иной вид бруцелл, как наиболее патогенный для морских свинок, не представилось возможным.
Делались попытки по оценке вирулентности бруцелл на основе их ферментативной активности и особенностей обмена веществ. Нuddleson (1943), изучив у всех трех классических видов бруцелл активность фермента каталазы, полагал, что высокой степени вирулентности соответствует более высокая каталазная активность штамма. Е.А. Драновская (1968г) отмечает, что слабовирулентные штаммы Br. abortus и Вr. melitensis отличались от вирулентных штаммов более высокой активностью некоторых дегидрогеназных систем, участвующих в энергетическом обмене.
Антигенная структура бруцелл. Естественное заражение бруцеллезом, как и искусственное введение культуры бруцелл, обычно сопровождается образованием в организме животного специфических антител. Это явление давно используется для диагностики болезни и серологической дифференциации различных видов и типов бруцелл.
Еще в 1932 г. Wilson и Miles установили, что клетки всех трех классических видов бруцелл, находящихся в обычной для них гладкой S-форме, содержат два серологически отличимых антигена А и М и что каждый из этих антигенов у различных видов бруцелл содержится в неодинаковом количестве. Несколько позже Мiles (1939г.) уточнил, что у Br. melitensis количественное соотношение между антигенами А и М может быть выражено примерно как отношение 1: 20, а у Вr. abortus и Вr. suis — как 20:
1. Это открытие дало основание для использования адсорбированных сывороток при отнесении исследуемой культуры бруцелл либо к виду Br. melitensis, либо в группу двух других видов. Клетки Br. suis имеют несколько большее количество антигена М, чем клетки Br. abortus. Но эта разница не столь значительна, чтобы ею можно было воспользоваться для серологической дифференциации этих видов бруцелл. Впоследствии накапливалось все больше фактов, которые свидетельствовали, что существенные количественные различия в содержании А и М антигенов наблюдается не только в культурах, принадлежащих к разным видам, но и у разных штаммов одного и того же вида. Все более частые случаи выявления серологических вариантов внутри того или иного вида бруцелл значительно затрудняли использование метода абсорбции агглютининов для целей межвидовой серологической дифференциации этих бактерий. Результат такой дифференциации был очень условным и относительным (П.Ф. Здродовский, 1953г.). В конце концов все это привело к признанию, что дифференциация бруцелл по РА с моноспецифической сывороткой имеет значение в основном только при идентификации биотипов внутри каждого из трех классических видов бруцелл.
Используя разные способы экстрагирования, из культуры бруцелл удается выделить липоидно-полисахаридно-белковый комплекс, который обладает специфическими антигенными и токсическими свойствами. При исследовании этого антигенного комплекса с помощью метода преципитации в геле установлено, что с гомологической сывороткой он дает до 6 линий преципитации. Иными словами, в экстрактах из бруцелл с помощью реакции преципитации в геле удается обнаружить до б различных антигенов. Метод иммуноэлектрофореза дает возможность выявить у бруцелл значительно большее количество антигенных компонентов.
С помощью метода преципитации в геле было показано также, что у бруцелл имеются поверхностные и глубинные антигены.
И.И. Дубровская (1950-1968г.) установила, что антигенные комплексы у бруцелл состоят из двух антигенов. Один из них — это антиген типа Буавена, содержащий полисахариды, липиды и белок, а другой, так называемый четвертый компонент, также содержит специфический полисахарид, но другой природы, белковое вещество и дезоксирибонуклеиновую кислоту. У разных видов бруцелл эти антигены содержатся в неодинаковом количестве. В отличие от всего антигенного комплекса четвертый его компонент, проявляя серо-логическую активность и аллергенные свойства, не обладает токсичностью.
Исследуя культуры бруцелл S — и R-формы, И.И. Дубровская обнаружила, что химический состав их антигенных комплексов был совершенно различным. Антигенные вещества из R-культур содержали мало белка и не имели ДНК содержащего компонента. Анти-генный комплекс из культуры бруцелл К-формы отличался от антигенов из S-культур и по качественному составу полисахаридов.
В реакции преципитации в геле антигены из R-формы, показали значительно меньшую активность, чем антигены S-формы, и давали с гомологичной сывороткой только одну линию преципитации.
Шероховатые формы всех видов бруцелл имеют общий для них К-антиген и не содержат специфических антигенов А и М. Серологическим методом их нельзя дифференцировать (Лембке и Кернлайн, 1950).
Выживаемость бруцелл во внешней среде и в продуктах животноводства.
Литературные данные о выживаемости бруцелл в различных объектах внешней среды неоднородны. В опытах 3.А. Кучеренко (1934г.) в поверхностных слоях почвы бруцеллы сохраняли жизнеспособность до 40 дней, на глубине 5-8 см — до 60, а в унавоженной почве — до 100 дней. По данным М.Е. Авакумова (1934г.), в почве и навозе при низкой температуре бруцеллы выживали до 4,5 месяца. П.А. Вершилова и А.А. Голубева (1972г.) указывают, что летом в почве бруцеллы сохраняют жизнеспособность в течение 3 месяцев, а зимой — до 4,5 месяца, в буртах навоза при температуре 50 — 67° — в течение 25 дней и более длительное время при температуре в буртах 37-42°.
В воде при интенсивном заражении бруцеллы могут сохраняться жизнеспособными от 45-90 до 150 дней (П.Ф. Здродовскии, 1953г.). В наших опытах при интенсивном заражении (10е м. т. в 1 мл воды) проб стерильной водопроводной воды (которую перед стерилизацией смешивали с садовой почвой) бруцеллы выживали значительно более продолжительное время. В опытах было использовано два штамма Вr. abortus, пробы хранили при комнатной температуре в шкафу. При периодических отсевах (через каждые 2 — 3 недели) на МППБ и МППА один штамм (2738) перестал давать рост через 7 месяцев, а другой (1410) — более чем через 15 месяцев.
О выживаемости бруцелл в продуктах животноводства П.А. Вершилова и А.А. Голубева (1972г.) приводят такие данные: в молоке бруцеллы выживали в течение 10-273 дней, в масле-‘ 10-142 дней, в сыре — от 25 дней до года, в брынзе — до 45 дней, в кислом молоке-2-30 дней, в кефире-до 11 дней, в замороженном мясе — более 320 дней, в соленом масле — 30-113 дней, в шерсти — 14-90 дней, в шкурках ягнят — до 2 месяцев.
В виде культуры на твердой питательной среде в хорошо закрытых или еще лучше в залитых парафином пробирках бруцеллы сохраняются жизнеспособными в течение многих недель, а в виде лиофильно высушенной культуры — годами.
Сравнительно высокую чувствительность бруцеллы проявляют к действию нагревания, солнечных лучей и различных средств химической дезинфекции, В жидкой культуре при температуре 60° бруцеллы погибают через 30 мин, при температуре 70° — через 10 мин, а при кипячении — почти мгновенно.
рямой солнечный свет в зависимости от интенсивности инсоляции убивает бруцелл в течение от нескольких минут до 3-4 часов (Е.С. Орлов, 1974г.), рассеянный свет убивает их через 7-8 дней. Действие употребляемых средств химической дезинфекции характеризуется такими данными: 2-процентный раствор фенола, 1-процентный креолин, 0,5-процентный лизол, 1-процентная хлорная известь, 1-2-процентный формалин, 0,01-процентный хлорамин, 1-процентный раствор НС1 в 8-процентном растворе NaС1 убивают бруцелл в течение нескольких минут (П.Ф. Здродовский).
Для дезинфекции животноводческих помещений наиболее часто применяются: осветленный раствор хлорной извести, содержащей 2% активного хлора, 2-процентный раствор едкого натра, 20-про-центная взвесь свежегашеной извести, 2-процентный раствор формальдегида, 4-процентная горячая эмульсия дезинфекционного креолина, 5-процентная эмульсия нафтализола, 5-процентный горячий раствор кальцинированной соды. Пастеризацию молока производят при температуре 70° в течение 30 мин или при температуре 85-90° в течение 20 секунд.
источник
Возбудитель бруцеллеза открыт Брюсом в 1886 г. Род бруцелл включает шесть видов: Bruceila melitensis с тремя биотипами, Br. abortus с девятью биотипами, Br. suis с четырьмя биотипами и без установленных биотипов, Br. neotome, Br. ovis и Br. canis.
Бруцеллез сельскохозяйственных животных в начальном периоде энзоотии проявляется массовыми абортами и осложнениями, возникающими после аборта, — задержанием последа, эндометритом, бесплодием. Серьезное эпизоотологическое и эпидемиологическое значение имеет миграция бруцелл с одного вида животных на другой. При миграции Br. melitensis на крупный рогатый скот и свиней эти животные становятся источником заболевания людей бруцеллезом. Установлена также миграция Br. suis на коров и мелкий рогатый скот, a Br. abortus на коз, овец и свиней.
Морфология. Бруцеллы представляют собой небольшие полиморфные клетки: коккобактерии или палочки величиной 0,5 х 0,7-0,6 х х 1,5 мкм. Спор они не образуют; неподвижны. Расположение в препарате при микроскопии одиночное или парное; при электронной микроскопии, кроме монодиплобактериальных форм, наблюдаются короткие стрептобактерии. Некоторые исследователи наблюдали капсульные формы у вирулентных штаммов бруцелл.
Бруцеллы размножаются перешнуровыванием, почкованием и дроблением с образованием измельченных клеток — почек и фильтрующихся форм, лежащих за пределами разрешающей силы светового микроскопа.
Тинкториалъные свойства. Бруцеллы окрашиваются всеми анилиновыми красителями; грамотрицательны. Е.В. Козловский (1936) предложил дифференциальный метод окраски бруцелл. Согласно этому способу препараты, высушенные на воздухе, фиксируют на пламени и окрашивают 2%-м водным раствором сафранина с подогреванием до появления пузырьков; затем препарат промывают водой и дополнительно окрашивают 0,75—1%-м водным раствором малахитовой зелени в течение 30 с. Бруцеллы сохраняют красный цвет, а другие бактерии и тканевые клетки окрашиваются в зеленый цвет.
Кроме того, для окрашивания бруцелл применяют модифицированный метод Циля — Нильсена, модифицированный метод Кюстера идр.
Культивирование. Бруцеллы культивируют на обычных питательных средах нейтральной или слабощелочной реакции (pH 6,8-7,2). Оптимальными средами для них являются печеночный агар и бульон с добавлением глюкозы и глицерина, картофельный агар, глюкозоглицериновый агар, мясо-пептонный агар с лошадиной сывороткой, сухая среда D из рыбного и дрожжевого гидролизата Н.В. Плоскире- ва и др.
Выделение культур бруцелл на питательных средах в первых генерациях из содержимого желудка абортированного плода, паренхиматозных органов, лимфоузлов и других патологических материалов удается в среднем спустя 1 мес, а иногда и позже. Первые генерации Br. abortus выращивают с добавлением 5—10% С02, Br. melitensis и Br. suis — при обычных условиях. Лабораторные культуры бруцелл, в том числе Br. abortus, развиваются уже через 1 —2 сут в аэробных условиях. Объединенный комитет экспертов ФАО/ВОЗ по бруцеллезу (1970) для выделения первичных культур и их дальнейших пересевов рекомендует сывороточно-декстрозный агар, картофельный агар + + сыворотка; триптозно-соевый и триптозный агар; кровяной агар (5% овечьей крови в агаре основной среды). Для выделения культуры бруцелл из загрязненных посторонней микрофлорой патологических материалов пользуются этими же средами после добавления к ним антибиотиков (полимиксина, бацитрацина, циклогексамида, анти- диона), угнетающих постороннюю микрофлору и не препятствующих росту бруцелл. Засеянная на скошенный агар взвесь бруцелл образует нежный, блестящий, прозрачный слой; со временем этот слой мутнеет и становится менее прозрачным, приобретает голубоватый оттенок. Вирулентные эпизоотические штаммы на агаровых пластинках образуют S-колонии (бесцветные, круглые, выпуклые с гладкой поверхностью, прозрачные с голубоватым оттенком, со временем более мутные и отщепляющие переходные к R-форме колоний). В бульонных культурах вирулентные S-штаммы бруцелл дают равномерное помутнение среды. Со старением бульонных культур на дне пробирок появляется осадок, поднимающийся при встряхивании в виде вязкой косички. R-штаммы дают неравномерное помутнение бульона с просветлением и с крошковатым осадком.
Для дифференциации основных S- и R-форм колоний бруцелл Уайт и Вильсон (1951) предложили специальный метод их окраски. Исследуемую культуру засевают на агар-альбими, разлитый в чашки Петри и подсушенный в течение 24 ч. После выращивания при температуре 37 °С в течение 96 ч на поверхность агара с выросшей культурой на 15 с наливают водный раствор кристаллвиолета (1 : 2000). Краску сливают в дезинфицирующий раствор, а колонии рассматривают подлупой или микроскопом. S-колонии светлые, а R-колонии фиолетовые.
Патогенность. Бруцеллы — факультативные внутриклеточные паразиты. Живут и размножаются они преимущественно внутри клеток ретику-лоэндотелиальной системы зараженного организма животных. Вирулентность бруцелл — изменяющееся свойство, измеряемое минимальной инфицирующей дозой (ИД).
Устойчивость. Культуры бруцелл па плотных питательных средах в запарафинированных пробирках сохраняют жизнеспособность в течение нескольких недель, лиофильно высушенные — годами. В поверхностных слоях почвы бруцеллы живут до 40 сут, на глубине 5—8 см — до 60 сут, а в унавоженной почве — до 100 сут; в воде при интенсивном заражении бруцеллы сохраняются от 45—90 до 150 сут.
Выживаемость бруцелл в молоке достигает 10—273 сут, в масле — 10—142 сут, в сыре — от 25 сут до года, в брынзе — до 45 сут, в кислом молоке — 2—30 сут, в замороженном мясе — более 320 сут, в соленом масле — 30—113 сут, в шерсти — 14—19 сут, в шкурах ягнят — до 2 мес.
Антигенная структура. У бруцелл в S-форме всех трех основных видов установлен общий термостабильный антиген и два серологически дифференцированных антигена — А и М. По Майлсу, отношения антигена А и М у Br. melitensis 1 : 20, у В. abortus — 20 : 1; клетки Br. suis содержат несколько большее количество антигена М, чем клетки Br. abortus. Майлс и Пири (1949) выделили из бруцелл специфическое растворимое вещество SSS (substanse soluble sp?cifique), состоящее из фракций BI, AP, S/P АР. Фракция АР содержала, по мнению автора, А- и М-антигены, не была токсична и антигенна.
Из бруцелл всех трех основных видов экстрагированием трихлор- уксусной кислотой извлекается соматический комплекс—антиген Буавена (эндотоксин), весьма токсичный для животных. При иммунизации буавеновским антигеном образуются агглютинины, преци- питины, комплементсвязывающие вещества и опсонины. При внут- рикожном введении он вызывает у бруцеллезных животных специфическую местную реакцию.
При исследовании антигенного комплекса методом преципитации в агаровом геле с гомологичными сыворотками установлено шесть различных антигенов.
Иммунитет животные приобретают после переболевания. Продолжительность переболевания и самовыздоровления от бруцеллеза у различных животных определяется различной видовой и половозрастной чувствительностью к этой инфекции. Так, морские свинки являются высокочувствительными, а белые мыши менее чувствительны. При энзоотиях с массовым поражением крупного рогатого скота или овец среди лошадей, находящихся на неблагополучной ферме, массового заболевания бруцеллезом не бывает. Неполовозрелые животные (молодняк) устойчивее к бруцеллезу по сравнению с взрослым поголовьем.
Установление самовыздоровления советскими исследователями явилось основанием для признания двух фаз противобруцеллезного иммунитета: инфекционной — нестерильной и постинфекционной — стерильной.
Продолжительность инфекционного процесса, нестерильной и стерильной фаз иммунитета определяются степенью приживаемости и продолжительностью сохранения бруцелл в макроорганизме. В период развития естественной бруцеллезной инфекции организм животных реагирует выработкой специфических антител — агглютининов, преципитинов и комплементсвязывающих веществ, которые постепенно утрачиваются с переходом инфекционного процесса в нестерильную, а затем в стерильную фазу иммунитета. Следовательно, наличие специфических антител свидетельствует скорее об инфекции, чем об иммунитете.
Патогенез. Бруцеллы размножаются в месте внедрения в организм животного, затем заносятся в лимфатические узлы и кровь; развивается кратковременная бактериемия. В различных органах и тканях, богатых ретикулоэндотелиальными элементами, бруцеллы вызывают воспалительные процессы, сопровождающиеся дегенеративно-некротическими и пролиферативными изменениями. У беременных животных бруцеллы находят благоприятные условия для своего развития в матке, вымени, суставах и бурсах. Размножаясь в матке, микроб вызывает воспалительно-некротические изменения эпителия, вследствие чего нарушается питание плода. С током крови и при заглатывании амниотической жидкости бруцеллы проникают в плод, где размножаются и вызывают воспалительные процессы в паренхиматозных органах и кишечнике. Вследствие нарушения питания и повреждения внутренних органов плод нередко погибает, и происходит аборте последующим задержанием последа, метритом. Одновременно могут возникать поражения вымени, суставов, бурс, а у самцов — семенников и придатков.
Патологический процесс сопровождается иммунобиологической перестройкой организма, которая проявляется аллергическими и серологическими реакциями.
источник
План изложения
Флегмона новорожденных
Клиника: Наиболее часто поражаются грудная клетка, пояснично-крестцовая и ягодичная области. В первые часы заболевания на коже появляется ограниченный участок гиперемии, он увеличивается в размерах, появляется отёк и уплотнение. На 2-3е сутки в центре инфильтрата возникает участок размягчения, кожа над ним становится синюшной. На месте размягчения образуются свищи, через которые выделяется гной. Быстро развивается обширный некроз клетчатки. С 5-6ого дня некротизированные участки отторгаются и образуется обширная рана с подрытыми краями. В тяжёлых случаях в процесс вовлекаются мышцы.
Гнойный мастит возникает обычно на фоне физиологического нагрубания молочных желез.
Возникает чаще на фоне физиологического нагрубания молочных желез.
Клиника: В большинстве случаев происходит одностороннее увеличение железы, кожа над железой гиперемирована, отёчна, нередко имеется размягчением в центре. Из выводных протоков грудной железы выделяется гной.
Возможное осложнение: флегмона.
Гнойный конъюнктивит
Клиника: гиперемия и отёчность век. Сосуды инъецированы. Отмечается гнойное отделяемое из глаз.
Лечение: глаза ребенка несколько раз в день промывают слабым раствором калия перманганата или стерильным физиологическим раствором, затем закапывают 20% раствором сульфацила натрия или раствором антибиотика. Глазные мази (по назначению врача).
ПРОТИВОЭПИДЕМИЧЕСКИЕ МЕРОПРИЯТИЯ ПРИ ИНФЕКЦИОННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЯХ НОВОРОЖДЕННЫХ:
1. Немедленный перевод ребенка в специализированное отделение;
2. Прием новорожденных в палату, откуда был удален больной, прекращают.
3. Проводят заключительную дезинфекцию в помещении;
4. За контактными устанавливается наблюдение.
1. Таксономия, морфология, культуральные и биохимические свойства бруцелл.
2. Этиопатогенез бруцеллеза
3. Особенности клиники бруцеллеза
4. Профилактика и лечение бруцеллеза
5. Таксономия возбудителя сибирской язвы
6. Морфология и культуральные свойства B. anthracis
7. Ферментативные свойства, токсинообразование и факторы агрессии сибиреязвенных бацилл
8. Антигенная структура и устойчивость возбудителя во внешней среде
9. Эпидемиология и клинические формы сибирской язвы
10. Диагностика, лечение и профилактика заболевания
Первый возбудитель бруцеллеза открыл и описал Брюс. В конце 1920 года были описаны другие виды возбудителейбруцеллеза с такими же антигенными свойствами. Данную группу микроорганизмов назвали бруцеллы. Сам Брюс выделил возбудителябруцеллеза во время эпидемии на острове Мальта, и назвал его мальтийским микрококком (мальтийская лихорадка — бруцеллез).
Бруцеллезинфекционно-аллергичекое заболевание, зоонозной природы, сопровождающиеся поражением лимфатический системы. Возбудители бруцеллеза относятся к семейству Brucellaceae, роду Brucella. Виды бруцелл: Brucella melitensis вызывает бруцеллез козье-овечьего типа, высоко патогенна, вызывает эпидемии, имеет три биовара; Brucella bovis спорадически вызывает тяжелую, острую форму бруцеллеза, имеет 9 биоваров (источник инфекции — крупный рогатый скот); Brucella suis спорадически вызывает легкую форму заболевания и часто дает развитие хронических форм, имеет 5 биоваров. Данные виды бруцелл патогенны для человека. Мало патогенны для человека Brucella canis от собак, Brucella ovis — от овец, Brucella neotomae — от пустынных крыс в США, Brucella rangiferi от северных оленей и др.
Морфология: Бруцеллы – мельчайшие коккобактерии размерами 0,3-0,6 мкм. Многие бактериологи называют их мальтийскими микрококками или пылинками. Реже бруцеллы имеют палочковидную форму до 1,5 мкм в длину. Спор не образуют, неподвижны, грамотрицательны, в организме человека и животных образуют нежную микрокапсулу. В мазках, окрашенных по Граму и по Козловскому, располагаются беспорядочно. В мазках-отпечатках, окрашенных по Романовскому-Гимзе, имеют интенсивно фиолетовый цвет.
Культивирование: Бруцеллы – аэробы, растут медленно при t 37С o , рН среды 6,8-7,2. Высоко требовательны к питательным средам.
При подозрении на бруцеллез исследуемый материал засевают на мясо-пептонный печеночный агар, глюкозо-глицериновый, сывороточно-декстрозный агар и эритрит-агар, среду «Д» с дрожжевым экстрактом. К питательным средам можно добавить генцианвиолет (из расчета 1:200000) или антибиотики, к которым бруцеллы не чувствительны или малочувствительны (бацитрацин, полимиксина В сульфат, циклогексамидин). Возбудители бруцеллеза медленно растут на питательных средах, особенно в первой генерации. При посевах крови, костного мозга, мочи культуры бруцелл обнаруживаются через 5-10, а иногда через 20-30 суток после посева материала. Первые генерации культур вида B. bovis и B. ovis способны расти только при избыточном (5-10%) содержании углекислоты в атмосфере. Для транспортировки исследуемого материала и в качестве среды накопления используют бульон Альбими. Колонии бруцелл в S-форме на агаре бесцветные, выпуклые с гладкой поверхностью, в проходящем свете прозрачны, в отраженном свете имеют янтарный оттенок. С возрастом колонии постепенно мутнеют. Величина колоний различна: от относительно крупных (3-4мм в диаметре) до точечных (0,05-0,1). Внешний вид колоний может быть изменён (R,RSM и Z-формы). На скошенном агаре бруцеллы дают серовато-белый полупрозрачный налет. Бруцеллы культивируют в желточных мешках куриных эмбрионов.
Биохимическая активность: Бруцеллы обладают слабой сахаролитической активностью, сбраживая иногда глюкозу и арабинозу с выделением кислоты, Brucella bovis-кислоты и газа. Не разжижают желатин, не свертывают молоко, Brucella bovis и Brucella suis образуют сероводород и аммиак при ферментации белковых субстратов. Brucellа melitensis не образует сероводород. Некоторые штаммы бруцелл обладают уреазной, каталазной (кроме Brucella melitensis) дегидрогеназной, цитохромоксидазной активностью. Культуры бруцелл видов B.abortus и B.melitensis не обладают адениндезаминазной активностью, B.suis обладает. Патогенные виды бруцелл отличаются по способности воспринимать анилиновые красители (фуксин(-) B.suis,а тионин (-) Brucella bovis_-тест Хедельсона)
Факторы патогенности: Продуцируют эндотоксин и факторы инвазивности: каталазу, гиалуронидазу, гемотоксин, вследствие чего способны проникать через неповрежденные кожные покровы и слизистые оболочки. Эндотоксин обладает аллергическими свойствами.
Антигенная структура: Из S-форм вирулентных штаммов бруцелл выделено 15 антигенных фракций. В частности М-АГ Brucellа melitensis, А-АГ Brucella bovis и может быть у Brucella suis, R-АГ-антиген общий для всех бруцелл, сходный с Vi-антигеном сальмонелл. Это три фракции О-антигенного комплекса. Кроме того у бруцелл имеется специфический Vi-антиген.
Устойчивость в окружающей среде: Бруцеллы устойчивы к низким температурам и влажной среде. В воде они сохраняются до 90 дней, в молоке при температуре холодильника — 10—16 дней, брынзе — 45—60, моче коров — до 4, в навозе до 120, сухой почве — до 60, во влажной почве — до 72 дней, в шерсти и кожах — 3—4 месяцев. При температуре 60С° бруцеллы погибают в течение 30 минут, при 80С° через 5 минут, при кипячении — мгновенно. Такие дезинфицирующие средства, как хлорная известь (25% активного хлора), лизол, креолин, хлорамин, 2—3% раствор карболовой кислоты убивают бруцелл в течение 5 минут.
Резервуарами и источниками инфекции являются сельскохозяйственные животные, прежде всего мелкий и крупный рогатый скот. Животные выделяют бруцеллы с молоком, мочой, калом. Большое количество возбудителя содержится в абортированном плоде, его оболочках, околоплодной жидкости, плаценте. Установлена способность бруцелл одного вида переходить с основного хозяина на другие виды животных. Характерный признак бруцеллеза у животных- выкидыши (инфекционные аборты).
Естественная восприимчивость людей к возбудителям бруцеллеза высока, не определяется полом и возрастом, но зависит от видовой принадлежности возбудителя. В очагах бруцеллеза коровьего вида из 20 заразившихся заболевает 1, тогда как в очагах козье-овечьего бруцеллеза заболевает каждый заразившийся. Больной человек незаразен.
Пути передачи. Контактно-бытовой (уход за животными, убой, разделка, снятие шкур, захоронение трупов, контакт с инфицированной продукцией животноводства), алиментарный.
Патогенез: Возбудители, проникая в организм человека через пищеварительный тракт, трещины, царапины, другие повреждения на коже или слизистых оболочках, а также через неповрежденные кожу и слизистые; распространяются по лимфатическим путям. Попадают в регионарные лимфаузлы, где вызывают воспаление. Узлы увеличиваются и приобретают вид пакетов не спаянных с кожей (первая фаза – первичный бруцеллезный комплекс). Затем бруцеллы поступают в кровь (фаза бактериемии) и разносятся по всему организму, оседая преимущественно в селезенке, печени, костном мозге, лимфатических узлах, матке, яичниках, где происходит образование гранулем (полиочаговая фаза). Микроорганизмы и продукты их жизнедеятельности вызывают сенсибилизацию организма человека (фаза активно-аллергических изменений). Последняя фаза заболевания – фаза исхода.
Клиника: Инкубационный период около 14 дней. По характеру течения бруцеллез может быть острым (длится 2 месяца), подострым (от 2 до 4—5 месяцев) и хроническим, в том числе с рецидивами и генерализацией инфекции (бактериемия) — длится до 2 лет, иногда дольше. Начало заболевания проявляется общим недомоганием, потерей аппетита, плохим сном. Больные жалуются на боли в суставах, пояснице, мышцах. Температура тела постепенно (3—7 дней) повышается до 39С°, принимая в дальнейшем волнообразный характер. После 20—30 дней с начала заболевания самочувствие больных ухудшается, усиливаются боли, преимущественно в крупных суставах — коленных, затем тазобедренных, голеностопных, плечевых, реже локтевых. Размер и форма сустава изменяются, очертания сглаживаются: Мягкие ткани, окружающие сустав, воспаляются и отекают. Кожа вокруг его лоснится, может приобретать разовый оттенок, иногда отмеч ается различного характера розеоло-популезная сыпь.
В дальнейшем, при отсутствии специализированного лечения, возникают многочисленные нарушения опорно-двигательного аппарата (в суставах, костях, мышцах), что вызвано распространением инфекции (бактериемией). Нарастают патологические симптомы со стороны нервной системы, больные становятся раздражительными, капризными, даже плаксивыми. Их мучают невралгические боли, ишиас, радикулит. У некоторых наблюдаются поражения гениталий. У мужчин бруцеллез может осложниться орхитами, эпидидимитами. У женщин возможны аднекситы, эндометриты, маститы, спонтанные выкидыши.
Осложнения: деформация суставов, сочленений, атрофия мышц, эндокардиты, миокардиты, поражения крупных сосудов при бруцеллезе встречаются сравнительно редко, но протекают тяжело.
Иммунитет:Постинфекционный иммунитет недостаточно напряжен, перекрестный, не стерильный. Заболевание, вызываемое одним видом бруцелл, дает перекрестный иммунитет с другими видами. Развитие иммунитета сопровождается инфекционной аллергией – проба Бюрне положительна у больных и переболевших.
Профилактика:Профилактика направлена, прежде всего, на ликвидацию бруцеллеза среди сельскохозяйственных животных. Опасно употребление сырого молока и невыдержанных сыров, использование шерсти животных из неблагополучных по бруцеллезу хозяйств. Специфическая профилактика осуществляется живой аттенуированной накожной вакциной из бычьего штамма 19-ВА, предложенной П.Ф. Здродовским и П.А. Вершиловой. Вакцинации подлежат чабаны, доярки, работники мясокомбинатов и другие лица, по роду работы подвергающиеся опасности заражения бруцеллезом. Поствакцинальный иммунитет создается на 12мес.
Лечение: Наиболее эффективным средством лечения бруцеллеза являются антибиотики. Применяются тетрациклин (доксициклин), аминогликозиды (стрептомицин, канамицин, гентамицин), тиенамицины (тиенам), левомицетин, рифампицин (бенемицин) и рифаметаприм. Антибиотики назначают комбинированным курсом (стрептомицин, канамицин или гентамицин в сочетании с тетрациклином, доксициклином, рифампицином пли рифаметапримом) в течение 10— 20 дней, затем продолжают лечение антибиотиками, применяемыми самостоятельно (левомицетин-сукцинат внутримышечно 10 дней или перорально), а также тиенам внутримышечно в течение 5— 10 дней. По рекомендации ВОЗ длительность антибактериальной терапии должна составлять не менее 4—6 недель, в тяжелых случаях — до 3 месяцев.
Дата добавления: 2014-01-04 ; Просмотров: 2627 ; Нарушение авторских прав? ;
Нам важно ваше мнение! Был ли полезен опубликованный материал? Да | Нет
источник
Таксономия: Возбудители бруцеллеза B.melitensis, B.abortus, B.suis, B.canis, B.ovis относятся к отделу Gracilicutes, роду Brucella. Морфологические и тинкториальные свойства: Мелкие, грамотрицательные палочки овоидной формы. Не имеют спор, жгутиков, иногда образуют микрокапсулу.
Культуральные свойства: облигатные аэробы. B.abortus для своего роста нуждается в присутствии 5—10 % углекислого газа. Оптимальными для роста являются температура 37С. Требовательны к питательным средам и растут на специальных средах (печеночных, кровяной агар). Их особенностью является медленный (в течение 2 нед) рост. В жидких средах – равномерное помутнение с небольшим осадком. На плотных – мелкие, круглые гладкие голубые колонии. Диссоциация от S- к R-формам колоний. Биохимическая активность: очень низкая; содержат каталазу и оксидазу, нитраты редуцируют в нитриты, цитраты не утилизируют, продуцируют Н2S. Антигенная структура. O-антиген – соматический, и капсульный антигены. Две разновидности О-антигена — А(абортус) и М(мелитензис).Иногда обнаруживают К-антиген.
Факторы патогенности: Образуют эндотоксин, обладающий высокой инвазивной активностью. Продуцируют один из ферментов агрессии — гиалу-ронидазу. Их адгезивные свойства связаны с белками наружной мембраны.
Резистентность. Быстро погибают при кипячении, при действии дезинфицирующих веществ, устойчивы к низкой температуре: в замороженном мясе они сохраняются до 5 мес, в молочных продуктах — до 1,5 мес.
Эпидемиология. Зоонозная инфекция. Источник — крупный и мелкий рогатый скот, свиньи, овцы, выделяющие B.melitensis. Люди более восприимчивы к этому виду возбудителя. Реже заражение происходит от коров (B.abortus) и свиней (B.suis). Больные люди не являются источником заболевания.
Патогенез. Проникают в организм через слизистые оболочки или поврежденную кожу, попадают сначала в регионарные лимфатические узлы, затем в кровь, разносятся по всему организму и внедряются в органы ретикулоэндотелиальной системы (печень, селезенку, костный мозг). Там они могут длительное время сохраняться и вновь попадать в кровь. При гибели освобождается эндотоксин, вызывающий интоксикацию. Клиника: Инкубационный период составляет обычно 1—3 нед. Длительная лихорадка, озноб, потливость, боли в суставах, радикулиты. Иммунитет: После перенесенного заболевания формируется непрочный иммунитет. Клеточно-гуморальный, нестерильный, относительный.
Микробиологическая диагностика:
Микробиологическая диагностика обычно проводится путем серологических исследований (реакция Райта и Хеддлсона). Бактериологическое исследование. Для получения гемокультуры кровь засевают в два флакона печеночного бульона. Один из них (для выделения культуры В. melitensis) инкубируют в обычных аэробных условиях, другой (для выделения первичной культуры В. abortus) —с СО2. В первых генерациях бруцеллы растут очень медленно. На агаре бруцеллы образуют бесцветные колонии, в бульоне — помутнение и слизистый осадок. В мазках, окрашенных по Граму, обнаруживаются мелкие грамотрицательные формы. Они неподвижны, спор не образуют, в определенных условиях появляется видимая капсула.Для быстрой идентификации бруцелл ставят реакцию агглютинации со специфическими агглютинирующими сыворотками на стекле и определяют чувствительность к специфическому фагу. Все виды бруцелл не ферментируют углеводы. Их дифференцируют по образованию H2S, чувствительности к СО2, действию анилиновых красителей (основной фуксин). Серодиагностика.Реакция агглютинации Райта с бруцеллезным диагностикумом. Положительные результаты отмечаются спустя 1 нед. после начала заболевания и сохраняются у переболевших многие годы. Диагностический титр реакции 1:200. Для ускоренной серодиагностики применяется реакция агглютинации Хеддлсона, которая ставится с неразведенной сывороткой больного и концентрированным антигеном — диагностикумом, окрашенным метиленовым синим. При положительной реакции появляются хлопья синего цвета. Реакция положительна при наличии агглютинации на «++».
Для серодиагностики используют РПГА, РИФ, РСК, метод определения неполных антител. В поздние периоды заболевания процент положительных серологических реакций (агглютинации, РПГА и РСК) начинает снижаться и большее диагностическое значение приобретают кожно-аллергическая проба и реакция Кумбса. Биопроба.Применяется для выделения чистой культуры из материала, загрязненного посторонней микрофлорой. Исследуемый материал вводят морским свинкам подкожно в паховую область. Кусочки органов и лимфатических узлов засевают на питательные среды для получения чистой культуры и ее идентификации. Кожно-аллергическая проба (реакция Бюрне).На предплечье внутрикожно вводят 0,1 мл бруцеллина. При наличии аллергии уже через 6 ч. могут появиться гиперемия кожи и болезненная отечность. Учет реакции производят через 24 ч. Реакция обладает высокой чувствительностью.
Лечение: Антибиотики широкого спектра действия. Специфическая иммунотерапия убитой лечебной бруцеллезной вакциной или бруцеллина (фильтрат бульонных культур В. melitensis, B.abortus, В.suis, убитых нагреванием. При острых формах – бруцеллезный иммуноглобулин.
Профилактика: Живая бруцеллезная вакцина получена штамма ВА-19А, полученную из В. abortus, создает перекрестный иммунитет против других видов бруцелл. Бруцеллезный единый диагностикум.Взвесь убитых бруцелл, окрашенных метиленовым синим, применяется при серологической диагностике бруцеллеза постановкой реакции агглютинации Райта и Хеддлсона.
Накожная сухая живая бруцеллезная профилактическая вакцина.Взвесь вакцинного штамма. В. abortus применяется для профилактики бруцеллеза.
• Рост и размножение бактерий. Фазы размножения.
Жизнедеятельность бактерий характеризуется ростом — формированием структурно-функциональных компонентов клетки и увеличением самой бактериальной клетки, а также размножением — самовоспроизведением, приводящим к увеличению количества бактериальных клеток в популяции.
Бактерии размножаются путем бинарного деления пополам, реже путем почкования. Актиномицеты, как и грибы, могут размножаться спорами. Актиномицеты, являясь ветвящимися бактериями, размножаются путем фрагментации нитевидных клеток. Грамположительные бактерии делятся путем врастания синтезирующихся перегородок деления внутрь клетки, а грамотрицательные — путем перетяжки, в результате образования гантелевидных фигур, из которых образуются две одинаковые клетки.
Делению клеток предшествует репликация бактериальной хромосомы по полуконсервативному типу (двуспиральная цепь ДНК раскрывается и каждая нить достраивается комплементарной нитью), приводящая к удвоению молекул ДНК бактериального ядра — нуклеоида.
Репликация ДНК происходит в три этапа: инициация, элонгация, или рост цепи, и терминация.
Размножение бактерий в жидкой питательной среде.Бактерии, засеянные в определенный, не изменяющийся объем питательной среды, размножаясь, потребляют питательные элементы, что приводит в дальнейшем к истощению питательной среды и прекращению роста бактерий. Культивирование бактерий в такой системе называют периодическим культивированием, а культуру — периодической. Если же условия культивирования поддерживаются путем непрерывной подачи свежей питательной среды и оттока такого же объема культуральной жидкости, то такое культивирование называется непрерывным, а культура — непрерывной.
При выращивании бактерий на жидкой питательной среде наблюдается придонный, диффузный или поверхностный (в виде пленки) рост культуры. Рост периодической культуры бактерий, выращиваемых на жидкой питательной среде, подразделяют на несколько фаз, или периодов:
1.лаг-фаза; 2.фаза логарифмического роста; 3.фаза стационарного роста, или максимальной концентрации бактерий; 4.фаза гибели бактерий.
Эти фазы можно изобразить графически в виде отрезков кривой размножения бактерий, отражающей зависимость логарифма числа живых клеток от времени их культивирования. Лаг-фаза — период между посевом бактерий и началом размножения. Продолжительность лаг-фазы в среднем 4—5 ч. Бактерии при этом увеличиваются в размерах и готовятся к делению; нарастает количество нуклеиновых кислот, белка и других компонентов. Фаза логарифмического (экспоненциального) роста является периодом интенсивного деления бактерий. Продолжительность ее около 5— 6 ч. При оптимальных условиях роста бактерии могут делиться каждые 20—40 мин. Во время этой фазы бактерии наиболее ранимы, что объясняется высокой чувствительностью компонентов метаболизма интенсивно растущей клетки к ингибиторам синтеза белка, нуклеиновых кислот и др. Затем наступает фаза стационарного роста, при которой количество жизнеспособных клеток остается без изменений, составляя максимальный уровень (М-концентрация). Ее продолжительность выражается в часах и колеблется в зависимости от вида бактерий, их особенностей и культивирования.
Завершает процесс роста бактерий фаза гибели, характеризующаяся отмиранием бактерий в условиях истощения источников питательной среды и накопления в ней продуктов метаболизма бактерий. Продолжительность ее колеблется от 10 ч до нескольких недель. Интенсивность роста и размножения бактерий зависит от многих факторов, в том числе оптимального состава питательной среды, окислительно-восстановительного потенциала, рН, температуры и др.
Размножение бактерий на плотной питательной среде.Бактерии, растущие на плотных питательных средах, образуют изолированные колонии округлой формы с ровными или неровными краями (S- и R-формы), различной консистенции и цвета, зависящего от пигмента бактерий.
Пигменты, растворимые в воде, диффундируют в питательную среду и окрашивают её. Другая группа пигментов нерастворима в воде, но растворима в органических растворителях. И, наконец, существуют пигменты, не растворимые ни в воде, ни в органических соединениях.
Наиболее распространены среди микроорганизмов такие пигменты, как каротины, ксантофиллы и меланины. Меланины являются нерастворимыми пигментами черного, коричневого или красного цвета, синтезирующимися из фенольных соединений. Меланины наряду с каталазой, супероксидцисмутазой и пероксидазами защищают микроорганизмы от воздействия токсичных перекисных радикалов кислорода. Многие пигменты обладают антимикробным, антибиотикоподобным действием.
• Диагностикумы. Получение, применение.
В диагностических целях при обнаружении антител в сыворотке крови больных, реконвалесцентов и бактерионосителей используются серологические реакции.
Для постановки таких реакций применяются диагностикумы — препараты, содержащие взвесь обезвреженных микроорганизмов или определенные антигены. Необходимость использования диагностикумов для серологических реакций связана не только с явным их преимуществом перед живыми культурами микробов (безопасность в работе), но еще и потому, что для приготовления диагностикумов подбираются штаммы микроорганизмов с высокой чувствительностью к антителам и способностью длительно сохранять антигенные свойства.Для инактивации микроорганизмов при приготовлении диагностикумов чаще всего используются химические вещества, особенно формалин, являющийся лучшим консервантом. Убитые нагреванием микробы хуже сохраняют антигенные свойства и применяются редко.В серологических реакциях (реакции агглютинации, реакции пассивной гемагглютинации, реакции связывания комплемента, реакции торможения гемагглютинации) для выявления специфических антител применяются: бактериальные, эритроцитарные и вирусные диагностикумы. Бактериальные диагностикумы могут содержать инактивированную микробную взвесь или отдельные антигенные
компоненты бактерий: О, Н или Vi-антигены и используются в реакциях агглютинации. Эритроцитарные диагностикумы представляют собой эритроциты (обработанные танином или формалином) с адсорбированными на них антигенами, извлеченными из бактерий, и применяются в РПГА (реакции пассивной гемагглютинации). В том случае, когда РПГА используется для выявления антигена в выделениях больных, в тканях и др., применяют «антительные диагностикумы», т. е. эритроциты, сенсибилизированные антителами. Вирусные диагностикумы — препараты, содержащие инактированные вируссодержащие жидкости (культуральные, из куриных эмбрионов или организма животных, зараженных соответствующим вирусом), применяются в РСК (реакции связывания комплемента), реакции торможения гемагглютинации (РТГА) и реакции нейтрализации.
В настоящее время в лабораториях используются следующие диагноста кумы.
1. Бактериальный диагностикум сальмонелл тифа. Применяется в реакции агглютинации для обнаружения антител в сыворотке больных.
2. Сальмонеллезные О-диагностикумы содержат О-антигены различных групп сальмонелл (инактивированных 15%-ным раствором глицерина). Применяются для выявления О-аптител при сальмонеллезных инфекциях в реакции агглютинации с сывороткой больных.
3. Сальмонеллезные Н-монодиагностикумы. Используются в реакции агглютинации для определения заболевания в и реже с диагностической целью.
4. Vi — брюшнотифозный диагностикум. Применяется в реакции агглютинации при выявлении брюшнотифозного бактерионосительства.
5. Единый бруцеллезный диагностикум — взвесь бруцелл (инактивированных фенолом), подкрашенная метиленовым синим. Применяется для определения антител в сыворотках крови больных бруцеллезом людей и животных в реакциях агглютинации Райта и Хеддльсона.
6. Эритроцитарный сальмонеллезный О-диагностикум — взвесь эритроцитов с адсорбированными на них О-антигенами различных групп сальмонелл. Используется для постановки РПГА с сывороткой больного при уточнении клинического диагноза сальмонеллеэной инфекции.
7. Эритроцитарный Vi-диагностикум — эритроциты, сенсибилизированные очищенным Vi-антигеиом S. typhi, применяется в РПГА при выявлении брюшнотифозного бактерионосительства.
8. Гриппозный диагностикум представляет собой аллантоисную жидкость инфицированных вирусом гриппа (типов А, В) куриных эмбрионов и инактивированную мертиолатом или формалином. Диагностикумы необходимы при постановке РТГА с парными сыворотками больных для уточнения клинического диагноза и циркулирующего типа вируса гриппа.
9. Диагностикум вируса клещевого
Диагностикум используется в РТГА и РСК с сывороткой больных при диагностике заболевания.
Опора деревянной одностоечной и способы укрепление угловых опор: Опоры ВЛ — конструкции, предназначенные для поддерживания проводов на необходимой высоте над землей, водой.
Папиллярные узоры пальцев рук — маркер спортивных способностей: дерматоглифические признаки формируются на 3-5 месяце беременности, не изменяются в течение жизни.
Организация стока поверхностных вод: Наибольшее количество влаги на земном шаре испаряется с поверхности морей и океанов (88‰).
источник
Бруцеллез – инфекционная болезнь, вызываемая бактериями рода Brucella, характеризующаяся длительной лихорадкой, поражением опорно-двигательного аппарата, нервной, сердечно-сосудистой и мочеполовой систем. Название рода связано с именем Д.Брюса, открывшего в 1886 г. возбудителя бруцеллеза.
Таксономия. Основные возбудители бруцеллеза – Brucella melitensis, В. abortus, В. suis, относятся к отделу Gracilicutes, роду Brucella.
Морфология и тинкториальные свойства. Бруцеллы – мелкие грамотрицательные палочки овоидной формы длиной 0,6. 1,5 мкм, шириной 0,5.0,7 мкм. Не образуют спор, не имеют жгутиков и капсулы.
Культивирование. Бруцеллы – облигатные аэробы; В. abortus для роста нуждается в присутствии 5-10 % углекислого газа. Оптимальная температура для роста 37ºС, оптимальное значение рН среды 6,8.7,2. Бруцеллы требовательны к питательным средам и растут на специальных средах (печеночных и др.). Их особенностью является медленный (в течение 2-3 нед) рост.
Ферментативная активность. Биохимическая активность бруцелл сравнительно невысока.
Антигенная структура. Бруцеллы имеют 2 разновидности О-антигена – А и М. Эти антигены видоспецифичны; у В. melitensis в большем количестве содержится М-антиген, у В. abortus и В. suis преобладает А-антиген. По биохимическим, антигенным свойствам, способности расти на средах с красителями фуксином и тионином внутри видов различают биовары.
Факторы патогенности. Бруцеллы образуют эндотоксин, обладающий высокой инвазивной способностью, а также продуцируют один из ферментов агрессии – гиалуронидазу. Их адгезивные свойства связаны с белками наружной мембраны.
Резистентность. Бруцеллы очень быстро погибают при кипячении, действии дезинфицирующих средств, но довольно устойчивы к низким температурам (в замороженном мясе сохраняются до 5 мес, в молочных продуктах до 1½ мес).
Восприимчивость животных. К бруцеллам очень чувствительны морские свинки, кролики, белые мыши.
Эпидемиология. Бруцеллез – зоонозная инфекция; источником инфекции являются крупный и мелкий рогатый скот, свиньи, реже олени, лошади, собаки, кошки и другие животные. В России основной источник бруцеллеза – овцы, выделяющие В. melitensis, но могут быть и коровы (B.abortus). Больные люди не являются источником инфекции. Заражение бруцеллезом происходит при употреблении молочных продуктов, мяса. Нередко заболевают люди, имеющие контакты с больными животными, например доярки, пастухи. Бруцеллез встречается в разных странах. Наблюдаются как спорадические случаи, так и вспышки заболевания в основном в животноводческих районах.
Патогенез. Бруцеллы проникают в организм через слизистые оболочки и кожу, попадают в регионарные лимфатические узлы, затем в кровь. Током крови бактерии разносятся по всему организму и внедряются в органы ретикулоэндотелиальной системы (печень, селезенку, костный мозг). Там они могут длительное время сохраняться и вновь попадать в кровь. При гибели бруцелл освобождается эндотоксин, вызывающий интоксикацию организма. В патогенезе заболеваний играет также роль сенсибилизация организма бруцеллами.
Клиническая картина. Инкубационный период составляет от 1 до 3 нед. Симптоматика развивающегося заболевания очень разнообразна. Бруцеллез характеризуется длительной лихорадкой, ознобами, потливостью, болями в суставах в результате их поражения. Нередко возникают радикулиты и миозиты. В патологический процесс вовлекаются также сердечно-сосудистая, мочеполовая и другие системы. Болезнь имеет затяжной характер.
Иммунитет. После перенесенного заболевания формируется непрочный и непродолжительный иммунитет, он сохраняется в течение 6-9 мес. Нередко люди, перенесшие бруцеллез, вновь заболевают этой инфекцией.
Микробиологическая диагностика. В качестве материала для исследования используют кровь, мочу, костный мозг. Основной метод диагностики – бактериологический, позволяющий определить не только род возбудителя, что важно для постановки диагноза, но и вид, установление которого производят для выявления источника инфекции. Применяют также серологический метод (реакции агглютинации Райта и Хеддльсона, РНГА, РСК и др.), кожные аллергические пробы (проба Бюрне с бруцеллином).
Лечение. Основное лечение – антибиотикотерапия. Очень редко используют для вакцинотерапии убитую вакцину.
Профилактика. Основная роль в профилактике бруцеллеза принадлежит санитарно-гигиеническим мероприятиям (в том числе пастеризации молока). Кроме того, применяют по эпидемическим показаниям живую бруцеллезную вакцину.
Не нашли то, что искали? Воспользуйтесь поиском:
Лучшие изречения: Сдача сессии и защита диплома — страшная бессонница, которая потом кажется страшным сном. 8578 — 
| 7059 — 
или читать все.
193.124.117.139 © studopedia.ru Не является автором материалов, которые размещены. Но предоставляет возможность бесплатного использования. Есть нарушение авторского права? Напишите нам | Обратная связь.
Отключите adBlock!
и обновите страницу (F5)
очень нужно
источник