Бруцеллез – зоонозное инфекционно-аллергическое заболевание, характеризующееся длительной лихорадкой, поражением опорно-двигательного аппарата, нервной, сердечно-сосудистой, мочеполовой и других систем организма со склонностью к затяжному, хроническому течению.
Бруцеллез как заболевание известно давно, со времен Гиппократа, но научное его изучение началось в 60-х годах XIX века. В то время оно получило название «средиземноморская или мальтийская лихорадка». В 1886 г. Д. Брюс обнаружил возбудителя заболевания в мазках из селезенки погибшего от бруцеллеза больного, а в 1887 г. выделил чистую культуру возбудителя (впоследствии этот возбудитель был назван В. melitensis). В 1897 г. датские ученые Б. Банг и Б. Стрибольт выделили сходные микроорганизмы из околоплодной жидкости при инфекционных абортах у коров (B. abortus bovis). В 1914 г. Д. Траум обнаружил аналогичных возбудителей у свиней и назвал их B. suis. Позднее были выделены другие виды бруцелл: в 1957 г. – B. neatomae (от кустарниковых крыс), в 1960 г. – B. canis (от гончих собак), а в 1970 г. – B. ovis (от барана).
Виды – наиболее патогенные для человека – В. melitensis, B. abortus, B. suis.
Мелкие кокковидные палочки размерами 0,5-0,7×0,6-1,5 мкм, грамотрицательные, в мазках располагаются беспорядочно, неподвижны, спор не образуют, свежевыделенные штаммы могут образовывать нежную капсулу.
Строгие аэробы. Оптимальные условия культивирования: температура – 37 0 С, рН – 6,8-7,2. Особенностью бруцелл бычьего типа является их потребность в повышенном содержании в атмосфере углекислого газа (5-10% СО 2 ). Характерен медленный рост бруцелл – первые генерации появляются через 1-3 недели и более. При пересеве лабораторных культур рост наблюдается через 1-2 дня. Требовательны к питательным средам: хорошо растут на печеночном, сывороточном или кровяном агаре. В жидкой среде наблюдается рост в виде диффузного помутнения. На плотных питательных средах бруцеллы образуют перламутровые мелкие выпуклые гладкие колонии с нежной зернистостью (S-форы). Возможна диссоциация в R-формы.
Биохимическая активность.
Выражена слабо. Ферментируют глюкозу и арабинозу до кислоты без газа. Восстанавливают нитраты, разлагают белки с образованием Н 2 S, индол не образуют.
Разделение на виды основано на биохимических и культуральных различиях
Рост на средах с красителями
У бруцелл выявлено до 15 антигенных фракций: родовые и видовые поверхностные антигены.
1. Выделяют два соматических антигена – А и М, причем М-антиген доминирует у В. melitensis, А-антиген преобладает у B. abortus и B. suis.
2. Третий – L(Vi)-антиген – поверхностно расположенный капсульный антиген вирулентности, термолабильный, имеет сходство с Vi-антигеном сальмонелл.
Токсины. Бруцеллы обладают эндотоксином (ЛПС КС), имеющим высокую инвазивную способность.
Ферменты – гиалуронидаза и нейроминидаза.
Структурные и химические компоненты клетки: пили I порядка и белки клеточной стенки (адгезивные свойства), капсула.
Считают, что бруцеллы обладают высокой инвазивностью: могут проникать в организм человека через неповрежденные кожные и слизистые покровы.
Также являются факультативными внутриклеточными паразитами.
Бруцеллы довольно устойчивы во внешней среде:
— В воде и влажной почве – они могут сохраняться до 5 месяцев;
— Они устойчивы к низким температурам и в замороженном мясе выживают до 5 месяцев.
Чувствительны к повышенной температуре (до 60 0 С – погибают за 30 минут, кипячение – мгновенно), действию дезинфиктантов (3% раствор хлорной извести, 1% хлорамин, 2% формалин убивают их за 5 минут), антибиотикам (стрептомицину, тетрациклину, рифампицину).
Основной резервуар и источник инфекции – больные домашние животные: овцы, козы, свиньи, КРС.
— Фекально-оральный (путь – алиментарный – большую опасность представляет сырое молоко и молочные продукты, не подвергающиеся в процессе приготовления тепловой обработке, например, сыр, брынза);
— Контактный (путь – прямой контактный – при попадании возбудителя на поврежденные кожные или слизистые покровы при уходе за больными животными);
— Аэрогенный (путь – воздушно-пылевой – описан при вдыхании воздушно-пылевой смеси, содержащей инфицированные частицы шерсти, навоза, земли во время уборки помещения).
Для бруцеллеза свойственен выраженный профессиональный характер заболевания!
Инкубационный период – 1-4 недели (может длиться до 2-3месяцев).
Патогенез и клинические особенности.
Бруцеллы проникают в организм человека через слизистые оболочки или кожные покровы, не оставляя никаких изменений в области входных ворот. Лимфогенным путем возбудители заносятся в региональные лимфоузлы и подвергаются незавершенному фагоцитозу. С макрофагами возбудители проникают в кровоток и диссеминируют в печень, селезенку, почки, костный мозг, суставы, эндокард. В пораженных органах образуются очаги некроза, окруженные инфильтратами. Появляются признаки очаговых поражений со стороны опорно-двигательного аппарата, нервной, сердечно-сосудистой, мочеполовой и других систем. Внутри фагоцитов бруцеллы способны формировать L-формы и длительно персистировать в организме. Переход в исходные формы обуславливает рецидив болезни.
Постинфекционный иммунитет – гуморальный (образуются неполные антитела) и клеточный, нестойкий, нестерильный. Формируется ГЗТ.
Бруцеллы могут быть выявлены непосредственно в патологическом материале и объектах внешней среды с помощью прямой или непрямой реакции иммунофлюоресценции.Ее используют также для идентификации выделенной культуры.
Бруцеллы в острую фазу болезни выделяют из крови при посеве на питательный бульон. Кроме того, делают посевы пунктатов костного мозга и лимфатического узла, а также стерильно взятой мочи. Выделенную культуру идентифицируют по типичной морфологии бактерий и колоний, положительной реакции агглютинации на стекле с поливалентной бруцеллезной сывороткой. Для видовой идентификации используют признаки видов и биоваров бруцелл. Серодиагностику проводят в развернутой реакции агглютинации (р. Райта) и пластинчатой реакции агглютинации (р. Хедльсона), реже ставят РНГА, а также р. Кумбса для выявления
Кожно-аллергическую пробу (по Бюрне) применяют для выявления ГЗТ к бруцеллам. Положительная реакция наблюдается как у больных, так и у привитых живой бруцеллезной вакциной
Проводят вакцинацию по эпидпоказаниям живой вакциной из аттенуированного штамма B. abortus.
Специфическое лечение – противобруцеллезный иммуноглобулин, для лечения хронических форм заболевания применяется убитая бруцеллезная вакцина.
источник
Род объединяет мелкие неподвижные палочки или коккобациллы, обладающие значительным полиморфизмом. Аэробы, оптимум температуры около +37 о С, рН — 6,6 — 7,4. Факультативные внутриклеточные паразиты, хорошо окрашиваемые анилиновыми красителями.
Патогенами человека считают четыре вида — B.melitensis (эта бруцелла распространена преимущественно среди мелкого рогатого скота, вызывает наиболее тяжелые поражения у человека), B.abortus (связана с крупным рогатым скотом; преимущественно регистрируют хронический бруцеллез, острые случаи часто не выявляют), B.suis, B.canis. Основным хозяином B.suis 4 биовара являются северные олени, этот возбудитель часто называют B.rangiferis. От грызунов выделены бруцеллы вида B.neotomae, от овец — B.ovis. B.melitensis разделена на 3 биовара, B.abortus — на 9, B.suis — на 5 биоваров. Бруцеллы — возбудители зоонозной инфекции человека и животных — бруцеллеза. Возбудитель легко диссоциирует, переходя из S- в R- форму.
Культуральные свойства. Лучше растут на обогащенных средах сложного состава с добавлением крови или сыворотки крови, глюкозы, глицерина. Используют печеночный агар Хеддльсона, кровяной агар, мясопептонный бульон. Колонии возбудителя в S- форме мелкие, выпуклые, гладкие, с перламутровым оттенком, при диссоциации образуют шероховатые R- формы колоний. Характерен медленный рост бруцелл в первых генерациях — колонии образуются через 2 — 4 недели. Рост бруцелл на жидких средах сопровождается равномерным помутнением сред.
Антигенная структура. Бруцеллы имеют общий соматический родоспецифический антиген, поэтому бруцеллы разных видов дают перекрестную агглютинацию. Два главных поверхностных антигена — А (преобладает у B.abortus) и М (преобладает у B.melitensis) встречаются в различных количественных соотношениях у различных видов бруцелл. Для их идентификации используют соответствующие антисыворотки.
Бруцеллы имеют поверхностный L — антиген (сходен с Vi — антигенами сальмонелл). Шероховатые формы содержат специфический R- антиген, для его идентификации используют специфические антисыворотки, применяемые при серотипировании. Колонии B.canis, B.ovis и B.suis 5 биотипа всегда имеют R- форму. Многие антигенные фракции бруцелл обладают выраженным аллергизирующим действием. У бруцелл имеются перекрестнореагирующие антигены с возбудителем туляремии, Bordetella bronchiseptica и Y.enterocolitica серотипа 09.
Биохимические свойства. Бруцеллы ферментируют углеводы, однако при дифференциации на виды и биотипы используют ряд дополнительных признаков, в т.ч. способность расти на средах, в присутствии обладающих бактериостатическим действием на отдельные виды бруцелл красителей (основной фуксин, тионин, сафранин), выделять сероводород, образовывать ферменты (уреазу, фосфатазу, каталазу), окислять различные аминокислоты.
Эпидемиологические особенности. Бруцеллез — зооноз преимущественно сельскохозяйственных и домашних животных. Человек инфицируется от животных или при контакте с инфицированным сырьем животного происхождения. Бруцеллез может носить профессиональный характер (уход за инфицированными животными) или быть связан с употреблением недостаточно термически обработанных молочных или мясных продуктов. Возбудитель может внедряться в организм человека через поврежденную кожу, слизистые дыхательных путей (аэрогенно) и желудочно-кишечного тракта (алиментарным путем), при заносе возбудителя на конъюнктиву глаза. Пути заражения — контактный, алиментарный и аспирационный. Бруцеллы обладают относительно высокой устойчивостью во внешней среде.
Патогенез и факторы патогенности. Патогенность бруцелл связана с наличием эндотоксина, гиалуронидазы и других ферментов, наличием низкомолекулярных продуктов, способствующих подавлению фагоцитоза и окислительного взрыва в макрофагах, наличием аллергизирующих субстанций.
По лимфатическим путям бруцеллы попадают в регионарные лимфоузлы, где размножаются в макрофагах, частично подвергаются внутриклеточному уничтожению. Продукты жизнедеятельности бруцелл ингибируют фагосомо — лизосомальное слияние. Морфологически в лимфоузлах формируется “первичный бруцеллезный комплекс” с формированием гранулем Новицкого с преобладанием крупных эпителиоидных клеток. Из разрушенных макрофагов в лимфоузлах бруцеллы попадают в кровь, распространяются по организму и поражают лимфатическую систему, печень, селезенку, нарушаются функции опорно-двигательного аппарата, нервной и половой систем.
Болезнь может иметь длительное хроническое течение (по сути — хрониосепсис). В патогенезе бруцеллеза имеет значение цикличность процессов, связанных с повторными проникновениями бруцелл в кровь из очагов с развитием местной воспалительной и общей реакций, на формирование которых существенное влияние оказывает специфическая сенсибилизация (реакция ГЗТ). Существенное значение в патогенезе, кроме аллергической перестройки и интоксикации, имеет преимущественное вовлечение в инфекционный процесс тех или иных органов и тканей.
Лабораторная диагностика осуществляется с использованием бактериологических методов, биопробы, серологических реакций, аллергической пробы Бюрне, генетических методов.
Материалом для бактериологических исследований служат кровь, костный мозг, грудное молоко (у кормящих), моча, околосуставная жидкость. Чаще выделяют гемо — и миелокультуры. Чистые культуры изучают по биохимическим свойствам, определяют их способность расти на средах с добавлением бактериостатических красителей, типируют в РА.
На практике чаще используют различные серологические методы диагностики:
— развернутую реакцию агглютинации Райта — основной метод и ускоренные микрометоды на стекле — агглютинации (Хеддельсона), роз — бенгал, латекс — агглютинации;
— реакцию Кумбса — для выявления неполных антител с применением антиглобулиновой сыворотки;
— РНИФ, РПГА с антигенным эритроцитарным диагностикумом, ИФА.
При отрицательных результатах бактериологических и серологических исследований применяют аллергическую кожную пробу с бруцеллином (пробу Бюрне).
Для выделения бруцелл из объектов внешней среды и от животных широко используют биопробу, для серодиагностики у животных — РСК, для исследования молока — кольцевую пробу.
Специфическая профилактика. В очагах козье — овечьего бруцеллеза применяют живую бруцеллезную вакцину ЖБВ. Разработана химическая бруцеллезная вакцина, которая отличается от живой вакцины более низкой реактогенностью.
Представители этого рода входят в семейство Brucellacea.Основной вид — F.tularensis — возбудитель туляремии — природноочаговой инфекции, резервуаром которой являются многие виды преимущественно мелких диких позвоночных животных (представителей четырех основных семейств — мышевидных, заячьих, беличьих и тушканчиковых). На территории России основными носителями являются мышевидные грызуны — водяные крысы, ондатры, различные виды полевок. Помимо F. tularensis к этому роду относится F. novicida, патогенность которой для человека не доказана.
Франциселлы — мелкие кокковидные или элипсоидные полиморфные палочки, неподвижные, грамотрицательные, не образующие спор.
Строгие аэробы, оптимум температуры около +37 градусов Цельсия, pH — близкая к нейтральной. Культивируют на агаровых и желточных средах сложного состава с добавлением цистеина, глюкозы, крови. Рост медленный. Образуют мелкие колонии, напоминающие капельки росы, круглые с ровным краем, выпуклые, блестящие, с голубоватым отливом.
Слабо ферментируют до кислоты без газа некоторые углеводы (глюкозу, мальтозу, левулезу, маннозу), образуют сероводород. Туляремийный микроб по вирулентности для кроликов и биохимическим особенностям, а также географическому распространению разделен на подвиды (эколого-географические расы):
— голарктическую (не ферментирует глицерин, цитруллин, маловирулентен для кроликов и человека, распространен в Евразии и Америке); туляремийный микроб этого подвида более приспособлен к водным экосистемам, способен распространяться водным путем, передаваться через комаров;
— неарктическую (ферментирует глицерин, не ферментирует цитруллин, более вирулентен для кроликов и человека, распространен в Северной Америке);
— среднеазиатскую (ферментирует глицерин и цитруллин, мало вирулентен). Среднеазиатский подвид по свойствам занимает промежуточное положение между первыми двумя, приближаясь к исходной предковой форме возбудителя.
Голарктический подвид включает три биовара — 1 (Erys — эритромицинчувствительный), 2 (Eryr — резистентный) и японский (var.japonica). Биовар 2 известен только в Евразии, где совпадает с распространением водяной крысы.
F.tularensis в S (вирулентной) форме имеет два основных антигенных комплекса — О антиген (обнаруживает сходство с О — антигенами бруцелл) и Vi (капсульный) антиген. Диссоциация Sà R приводит к утрате капсулы, вирулентности и иммуногенности.
На территории России выделено 7 основных ландшафтных типов природных очагов туляремии: пойменно-болотный, луго — полевой, степной, лесной, предгорно-ручьевой, тундровый и тугайный (пойменно-пустынный) со своими основными хозяевами возбудителя и эколого-эпидемиологическими особенностями. Человек очень чувствителен к туляремийному микробу, минимальная инфицирующая доза — одна микробная клетка. Животные по чувствительности к этому микроорганизму разделены на четыре группы. Особое значение в условиях Западной Сибири имеют водяные крысы и ондатры. Заражение человека может происходить путем контакта с грызунами или инфицированными ими предметами, алиментарным путем (инфицированные грызунами вода и пищевые продукты), воздушно — пылевым путем, трансмиссивно (иксодовые клещи и другие кровососы). Н.Г.Олсуфьев выделяет две экологические формы возбудителя — “сухопутную”, характеризующуюся передачей через иксодовых клещей (все три подвида), и “водную”, связанную с околоводными видами грызунов и другими организмами — гидробионтами, с преимущественной передачей через воду и укусы комаров (голарктический подвид).
Возбудитель туляремии является внутриклеточным паразитом. Его вирулентность обусловлена:
— капсулой, угнетающей фагоцитоз;
— нейраминидазой, способствующей адгезии;
— аллергенными свойствами клеточной стенки;
— способностью размножаться в фагоцитах и подавлять их киллерный эффект;
— наличием рецепторов к Fc- фрагменту IgG, подавлять активность систем комплемента и макрофагов.
Франциселлы проникают в организм через кожу и слизистые глаз, рта, дыхательных путей, желудочно-кишечного тракта. Г.П.Руднев (1970) предложил в патогенезе туляремии выделить следующие стадии:
1. Внедрения и первичной адаптации возбудителя.
3. Первичных регионарно — очаговых (туляремийный бубон) и общих реакций.
4. Гематогенных матастазов и генерализации.
5. Вторичной полиочаговости.
6. Реактивно — аллергических изменений.
7. Обратного метаморфоза и выздоровления.
В ряде случаев процесс может ограничиваться первыми тремя фазами.
Основными клиническими формами туляремии являются язвенно-бубонная (ульцерогландулярная), глазо-бубонная (окулогландулярная), легочная, абдоминальная, генерализованная, другие формы (в т.ч. ангинозно-гландулярная), неуточненная (международная статистическая классификация болезней, 10 пересмотр. ВОЗ, 1995).
Бактериологические методы диагностики туляремии для человека имеют дополнительное значение и не всегда эффективны, что определяется биологическими особенностями возбудителя и особенностями инфекции у человека (малая концентрация возбудителя в органах и тканях).
Биопроба является намного более эффективным методом диагностики. Материал от больного (пунктат бубона, выделения с конъюнктивы, пленка с миндалин, мокрота и др.) используют для заражения лабораторных животных (чаще белых мышей), из органов павших животных делают высевы на питательные среды, культуру идентифицируют по совокупности следующих признаков:
а) морфология клеток и грамотрицательная окраска;
б) рост на желточной среде и специальных средах и отсутствие роста — на простых мясо — пептонных средах;
в) специфическое свечение в реакции иммунофлюоресценции (МФА);
г) агглютинация культуры туляремийной сывороткой;
д) способность вызывать гибель белых мышей и морских свинок с характерными патологоанатомическими изменениями в органах и выделением чистой культуры.
Бактериологические методы и биопробы могут выполняться только специализированными лабораториями, имеющими разрешение на работу с возбудителем туляремии (2 группа патогенности). В качестве метода выявления туляремийного микроба может использоваться МФА, реакция нейтрализация антител — РНАТ, в качестве дополнительного — ПЦР.
Наибольшее значение в лабораторной диагностике туляремии имеют серологические методы — РА, РПГА. Обязательно исследование парных сывороток крови. Дополнительными серологическими методами являются ИФА, РНИФ.
Аллергодиагностика (проба с тулярином — туляремийным аллергеном) чаще используется для оценки естественного и вакцинального иммунитета. ГЗТ развивается на первой неделе болезни, а также после вакцинации и сохраняется несколько лет. У больных накожные и внутрикожные туляриновые пробы не рекомендуются в связи с возможностью ухудшения состояния больного. Могут применяться методы аллергодиагностики in vitro — реакция лейкоцитолиза, РТМЛ и др.
На неблагополучных по туляремии территориях применяют живую туляремийную вакцину. Иммунитет длительный, проверяется с помощью пробы с тулярином. С помощью этой пробы отбирают контингенты на вакцинацию и ревакцинацию.
Лекция N11. Спирохеты (трепонемы, боррелии, лептоспиры).
Спирохеты — тонкие, спирально завитые бактерии длиной от нескольких до нескольких сотен микрометров, подвижные, грамотрицательные, хемоорганотрофы. Выделяют три основных типа движений — быстрое вращение вокруг продольной оси, сгибательные, штопорообразные (винтообразные). Медицинское значение имеют представители родов Treponema, Borrelia, Leptospira и Spirillum.
Не нашли то, что искали? Воспользуйтесь поиском:
источник
Бруцеллы являются возбудителями бруцеллеза — острого или хронического антропозоонозного инфекционного заболевания, которое характеризуется интоксикацией, преимущественным поражением опорно-двигательного аппарата, нервной, сердечно- сосудистой, мочеполовой систем и других органов, аллергизацией организма, затяжным течением, приводящим, как правило, к инвалидизации.
Возбудители бруцеллеза относятся к роду Brucella с неясным систематическим положением, который включает в себя следующие виды: B. melitensis, B. abortus, B. suis, B. ovis, B. canis, B. neotomae, относящиеся ко II группе патогенности. Название рода связано с именем Д. Брюса, открывшего в 1886 г. возбудителя бруцеллеза.
Морфология. Бруцеллы — мелкие грамотрицательные микробы (0,4-0,6×0,5-3 мкм) шаровидной, овоидной или палочковидной формы. Спор не образуют, неподвижны. При действии специфического бактериофага или при культивировании на среде с 10% иммунной сывороткой образуют нежную капсулу. Способны образовывать стабильные и нестабильные L-формы.
Культуральные свойства. Аэробы, капнофилы. Требовательны к питательным средам, на простых питательных средах не растут, растут на сложных питательных средах (сывороточно-декстрозный и кровяной агар). Характеризуются медленным ростом на питательных средах, посевы инкубируют не менее 3 нед. В жидких средах вызывают равномерное помутнение с небольшим осадком, но без пленки на поверхности. На плотных средах формируют очень мелкие круглые выпуклые гладкие прозрачные голубовато-серые колонии. Гемолиза не дают, пигмента не образуют. Температурный оптимум роста 37 ?С, оптимум рН 6,6-7,4. Под действием антибиотиков превращаются в L-формы. Хорошо культивируются в желточном мешке куриного эмбриона.
Биохимическая активность очень низкая: бруцеллы содержат каталазу и оксидазу, нитраты редуцируют в нитриты, цитраты не утилизируют, реакция Фогеса-Проскауэра отрицательная, продуцируют сероводород, разлагают мочевину.
Антигенная структура сложная и близкая у разных видов бруцелл. Имеют соматический О- и капсульный Vi-антигены. Различные виды бруцелл различаются количественным соотношением А- (абортус) и М- (мелитензис) антигенов; имеются G- и R-антигены.
Факторы патогенности. Бруцеллы являются факультативными внутриклеточными паразитами млекопитающих, включая человека. Обладают высокой инвазивной способностью, образуют фермент агрессии гиалуронидазу. Основными факторами вирулентности являются эндотоксин и капсула.
Устойчивость в окружающей среде и к антимикробным препаратам. Бруцеллы длительно сохраняются в окружающей среде: в молоке — до 45 дней, в масле, сливках, простокваше и свежих сырах — в течение всего периода их пищевой ценности, в брынзе — до 60 дней, в замороженном мясе — свыше 5 мес, в засоленных шкурах — 2 мес, в шерсти — до 3-4 мес, в воде — до 5 мес, в почве — до 3 мес. Малоустойчивы к высокой температуре, при кипячении погибают моментально, при 60 ?С — в течение 30 мин.
Чувствительны к большинству антибиотиков, действию обычно применяемых антисептиков и дезинфектантов в обычных концентрациях.
Эпидемиология. Резервуаром возбудителя в природе являются сельскохозяйственные и домашние животные — крупный и мелкий рогатый скот, свиньи, реже олени, лошади, собаки, кошки.
Бруцеллез распространен на всех континентах, особенно в странах с развитым животноводством. Источник инфекции — больные сельскохозяйственные и домашние животные. Возбудителями бруцеллеза крупного рогатого скота являются B. abortus, мелкого рогатого скота — B. melitensis, свиней — B. suis, оленей — B. neotomae, собак — B. canis, баранов — B. ovis.Наибольшее эпидемическое значение для человека имеют B. melitensis, B. abortus и B. suis. Больной человек не заразен, является биологическим тупиком. Больные животные выделяют бруцеллы с молоком, мочой, калом, околоплодными водами и др. Человек заражается главным образом алиментарным путем (сырое молоко, молочные продукты, мясо и др.) и контактно при уходе за больными животными и т.п. Восприимчивость человека к бруцеллам высокая. Заболевание носит спорадический характер или возникает в виде отдельных вспышек, что зависит от видовой принадлежности возбудителей. От человека к человеку заболевание не передается.
Патогенез. Бруцеллы проникают в организм через кожу или сли- зистые оболочки и распространяются по лимфатическим путям. В отличие от туляремии, сибирской язвы, при бруцеллезе на месте внедрения не развивается первичный аффект. Иногда наблюдается увеличение регионарных лимфатических узлов. Дальнейшая судьба возбудителя зависит от вирулентности, величины инфицирующей дозы, иммунореактивности организма. При попадании в организм больших доз вирулентных бруцелл очень быстро может наступить диссеминация возбудителя. При малых инфицирующих дозах и пониженной вирулентности бруцеллы могут длительно задерживаться в регионарных лимфатических узлах, фаза генерализации запаздывает или вообще отсутствует. В основе развивающихся в ранний период бруцеллеза диффузных изменений сосудов и паренхиматозных органов лежит токсическое действие бруцелл. Из кровотока бруцеллы оседают в воспалительных очагах, лимфатических узлах, селезенке и костном мозгу, где длительно могут сохраняться, располагаясь внутриклеточно. При обострениях процесса бруцеллы вновь усиленно размножаются, попадают в кровоток, вызывая повторные волны генерализации. Длительное пребывание возбудителя в организме приводит к его аллергизации. Со 2-3 нед, а иногда и с самого начала заболевания на первый план в патогенезе выдвигаются аллергические поражения. Аллергия при бруцеллезе играет двоякую роль. С одной стороны, аллергическое воспаление лежит в основе большинства клинических проявлений болезни, особенно в хронической стадии. С другой стороны, аллергическая реакция препятствует распространению бруцелл в организме, что имеет большое значение для предупреждения повторной генерализации процесса.
Клиническая картина. Инкубационный период колеблется в пределах 1-3 нед, но может затягиваться и до нескольких месяцев. Болезнь начинается постепенно, иногда остро. Болезнь протекает с длительной лихорадкой, ознобом, потливостью, болями в суставах, мышцах, с симптомами поражения сердечно-сосудистой, нервной, мочеполовой систем, опорно-двигательного аппарата и др. Клиническая картина бруцеллеза характеризуется большим полиморфизмом и зависит от характера пораженного органа.
Иммунитет при бруцеллезе клеточно-гуморальный, в основном нестерильный и относительный. После выздоровления иммунитет угасает, возможна реинфекция. Ввиду относительности иммунитета большие инфицирующие дозы бруцелл могут вызвать его прорыв у больных хроническим или латентным бруцеллезом, что ведет к тяжелому течению болезни.
Лабораторная диагностика. Для диагностики используют методы: бактериологический, серологический, биологический, аллергологический. Серодиагностику и аллергические пробы проводят в
базовых лабораториях, чистую культуру бруцелл выделяют и идентифицируют в специальных лабораториях с соблюдением правил техники безопасности.
Материалом для исследования служат кровь, пунктат красного костного мозга, моча, молоко и молочные продукты, кусочки органов.
Посев крови для выделения гемокультуры проводят в первые дни болезни при наличии лихорадки, при отрицательных результатах исследование многократно повторяют (бактериемия может наблюдаться в течение года и более). Учитывая медленный рост бруцелл, посевы выдерживают в термостате до 1 мес. Пунктат костного мозга засевают на те же среды; миелокультуру при бруцеллезе удается получить в 1,5-2 раза чаще, чем гемокультуру. Миелокультуры могут быть получены в остром, подостром и даже хроническом периоде заболевания. Мочу для выделения уринокультуры предварительно центрифугируют и из осадка делают посевы. Уринокультуры выделяют как при остром бруцеллезе, так и в период реконвалесценции.
Биологический метод исследования используется для выделения бруцелл из материалов, контаминированных посторонней микрофлорой или содержащих небольшое количество возбудителей.
Для биопробы используют белых мышей и морских свинок. Животных заражают кровью внутрибрюшинно, осадком мочи и молока — подкожно. Через 20-30 дней у зараженного животного берут кровь и ставят с ней реакцию агглютинации. Затем животных забивают, вскрывают и делают посевы крови из сердца, взвеси внутренних органов и лимфатических узлов.
Выделенные чистые культуры бруцелл дифференцируют по способности роста при отсутствии повышенной концентрации углекислого газа, по выделению сероводорода, чувствительности к бруцеллезному фагу и бактериостатическому действию анилиновых красителей (фуксина и тионина).
В сыворотке больных бруцеллезом накапливаются агглютинирующие (вначале IgM, затем IgG); неполные блокирующие (IgA, IgG) антитела. Для их выявления с диагностической целью используют реакцию Райта (развернутая агглютинация) и Хеддельсона (пластинчатая агглютинация), РПГА, ИФА, реакцию Кумбса. Реакция агглютинации — один из основных диагностических методов при бруцеллезе у людей и сельскохозяйственных животных.
Агглютинины, как правило, появляются в крови в ранние сроки после заражения, поэтому наибольшую диагностическую ценность реакция агглютинации представляет при остром бруцеллезе. При остром бруцеллезе высокий титр антител определяется также в РПГА и ИФА. Реакция Кумбса рекомендуется в качестве диагностического метода при хронических и латентных формах бруцеллеза. В условиях массового обследования на бруцеллез применяют пластинчатую реакцию агглютинации Хеддельсона в сочетании с кожно-аллергической пробой Бюрне.
Аллергологический метод применяют для выявления ГЗТ к бруцеллам, наблюдающееся у больных бруцеллезом, инфицированных бруцеллами лиц и привитых живой бруцеллезной вакциной. Ее ставят с 15-20-го дня болезни. Аллергическая реакция бывает положительной в течение многих лет после перенесенного заболевания и у привитых. Серологические реакции и кожноаллергическая проба по своему диагностическому значению неравноценны, вследствие чего не могут заменить друг друга. Это обусловливает необходимость применения комплексного сероаллергического метода, являющегося наиболее надежным способом диагностики бруцеллеза.
Лечение. При остром и хроническом бруцеллезе с выраженными признаками активности необходимо назначение антибиотиков широкого спектра (эритромицин, рифампицин). Антибиотики не действуют на бруцеллы, расположенные внутриклеточно, поэтому их можно назначать только при наличии бактериемии, а при хроническом бруцеллезе они неэффективны. Кроме того, антибиотики не предупреждают рецидивов бруцеллеза, поэтому широко применяется специфическая иммунотерапия убитой лечебной бруцеллезной вакциной (5-7 внутривенных вливаний в нарастающих дозах 1-2 раза в неделю) или бруцеллина (внутримышечно 2 раза в неделю). При острых и рецидивирующих формах назначают бруцеллезный иммуноглобулин
Профилактика. Для специфической профилактики применяют живую бруцеллезную вакцину, предложенную П.А. Вершиловой из штамма ВА-19А, полученную из B. abortus и создающую перекрестный иммунитет по отношению к другим видам бруцелл. Вакцинацию проводят по эпидемиологическим показаниям. Неспе- цифическая профилактика такая же, как и при других зоонозах, и сводится в основном к санитарно-ветеринарным мероприятиям.
источник
61. Патогенные бруцеллы (возбудитель бруцеллеза) и франциселлы (возбудитель туляремии): систематика, морфология, культуральные и тинкториальные свойства, биохимические особенности, антигенная структура и токсинообразование, патогенез и клиника. Микробиологическая диагностика. Профилактика и лечение.
Род объединяет мелкие неподвижные палочки или коккобациллы, обладающие значительным полиморфизмом. Аэробы, оптимум температуры около +37 о С, рН — 6,6- 7,4. Факультативные внутриклеточные паразиты, хорошо окрашиваемые анилиновыми красителями.
Патогенные для человека четыре вида — B . melitensis (распространена преимущественно среди мелкого рогатого скота, вызывает наиболее тяжелые поражения у человека), B . abortus (связана с крупным рогатым скотом), B . suis , B . canis . Основным хозяином B . suis 4 биовара являются северные олени, этот возбудитель часто называют B . rangiferis . От грызунов выделены бруцеллы вида B . neotomae , от овец — B . ovis . B . melitensis разделена на 3 биовара, B . abortus — на 9, B . suis — на 5 биоваров. Бруцеллы — возбудители зоонозной инфекции человека и животных — бруцеллеза. Возбудитель легко диссоциирует, переходя из S — в R — форму.
Культуральные свойства. Лучше растут на обогащенных средах сложного состава с добавлением крови или сыворотки крови, глюкозы, глицерина. Используют печеночный агар Хеддльсона, кровяной агар, мясо — пептонный бульон. Колонии возбудителя в S — форме мелкие, выпуклые, гладкие, с перламутровым оттенком, при диссоциации образуют широховатые R — формы колоний. Характерен медленный рост бруцелл в первых генерациях — колонии образуются через 2-4 недели. Рост бруцелл на жидких средах сопровождается равномерным помутнением сред.
Антигенная структура. Бруцеллы имеют общий соматический родоспецифический антиген, поэтому бруцеллы разных видов дают перекрестную агглютинацию. Два главных поверхностных антигена — А (преобладает у B . abortus ) и М (преобладает у B . melitensis ) встречаются в различных количественных соотношениях у различных видов бруцелл. Для их идентификации используют соответствующие антисыворотки.
Бруцеллы имеют поверхностный L — антиген (сходен с Vi — антигенами сальмонелл). Шероховатые формы содержат специфический R — антиген, для его идентификации используют специфические антисыворотки, применяемые при серотипировании. Колонии B . canis , B . ovis и B . suis 5 биотипа всегда имеют R — форму. Многие антигенные фракции бруцелл обладают выраженным аллергизирующим действием. У бруцелл имеются перекрестнореагирующие антигены с возбудителем туляремии, Bordetella bronchiseptica и Y . enterocolitica серотипа 09.
Биохимические свойства. Бруцеллы ферментируют углеводы, однако при дифференциации на виды и биотипы используют ряд дополнительных признаков, в т.ч. способность расти на средах в присутствии обладающих бактериостатическим действием на отдельные виды бруцелл красителей (основной фуксин, тионин, сафранин), выделять сероводород, образовывать ферменты (уреазу, фосфатазу, каталазу), окислять различные аминокислоты.
Эпидемиологические особенности. Бруцеллез — зооноз преимущественно сельскохозяйственных и домашних животных. Человек инфицируется от животных или при контакте с инфицированным сырьем животного происхождения. Бруцеллез может носить профессиональный характер (уход за инфицированными животными) или быть связан с употреблением недостаточно термически обработанных молочных или мясных продуктов. Возбудитель может внедряться в организм человека через поврежденную кожу, слизистые дыхательных путей (аэрогенно) и желудочно — кишечного тракта (алиментарным путем), при заносе возбудителя на конъюнктиву глаза. Пути заражения — контактный, алиментарный и аспирационный. Бруцеллы обладают относительно высокой устойчивостью во внешней среде.
Патогенез и факторы патогенности. Патогенность бруцелл связана с наличием эндотоксина, гиалуронидазы и других ферментов, наличием низкомолекулярных продуктов, способствующих подавлению фагоцитоза и окислительного взрыва в макрофагах, наличием аллергизирующих субстанций.
По лимфатическим путям бруцеллы попадают в регионарные лимфоузлы, где размножаются в макрофагах, частично подвергаются внутриклеточному уничтожению. Продукты жизнедеятельности бруцелл ингибируют фагосомо — лизосомальное слияние. Морфологически в лимфоузлах формируется “первичный бруцеллезный комплекс” с формированием гранулем Новицкого с преобладанием крупных эпителиоидных клеток. Из разрушенных макрофагов в лимфоузлах бруцеллы попадают в кровь, распространяются по организму и поражают лимфатическую систему, печень, селезенку, нарушаются функции опорно — двигательного аппарата, нервной и половой систем.
Болезнь может иметь длительное хроническое течение (по сути — хрониосепсис). В патогенезе бруцеллеза имеет значение цикличность процессов, связанных с повторными проникновениями бруцелл в кровь из очагов с развитием местной воспалительной и общей реакций, на формирование которых существенное влияние оказывает специфическая сенсибилизация (реакция ГЗТ). Существенное значение в патогенезе, кроме аллергической перестройки и интоксикации, имеет преимущественное вовлечение в инфекционный процесс тех или иных органов и тканей.
Лабораторная диагностика осуществляется с использованием бактериологических методов, биопробы, серологических реакций, аллергической пробы Бюрне, генетических методов.
Материалом для бактериологических исследований служат кровь, костный мозг, грудное молоко (у кормящих), моча, околосуставная жидкость. Чаще выделяют гемо- и миелокультуры. Чистые культуры изучают по биохимическим свойствам, определяют их способность расти на средах с добавлением бактериостатических красителей, типируют в РА.
На практике чаще используют различные серологические методы диагностики:
— развернутую реакцию агглютинации Райта — основной метод и ускоренные микрометоды на стекле — агглютинации (Хеддельсона), роз- бенгал, латекс — агглютинации;
— реакцию Кумбса — для выявления неполных антител с применением антиглобулиновой сыворотки;
— РНИФ, РПГА с антигенным эритроцитарным диагностикумом, ИФА.
При отрицательных результатах бактериологических и серологических исследований применяют аллергическую кожную пробу с бруцеллином (пробу Бюрне).
Для выделения бруцелл из объектов внешней среды и от животных широко используют биопробу, для серодиагностики у животных — РСК, для исследования молока — кольцевую пробу.
Специфическая профилактика. В очагах козье — овечьего бруцеллеза применяют живую бруцеллезную вакцину ЖБВ. Разработана химическая бруцеллезная вакцина, которая отличается от живой вакцины более низкой реактогенностью.
Представители этого рода входят в семейство Brucellacea .Основной вид — F . tularensis — возбудитель туляремии — природноочаговой инфекции, резервуаром которой являются многие виды преимущественно мелких диких позвоночных животных (представителей четырех основных семейств — мышевидных, заячьих, беличьих и тушканчиковых). На территории России основными носителями являются мышевидные грызуны — водяные крысы, ондатры, различные виды полевок. Помимо F . tularensis к этому роду относится F . novicida , патогенность которой для человека не доказана.
Франциселлы — мелкие кокковидные или элипсоидные полиморфные палочки, неподвижные, грамотрицательные, не образующие спор.
Строгие аэробы, оптимум температуры около +37 градусов Цельсия, pH — близкая к нейтральной. Культивируют на агаровых и желточных средах сложного состава с добавлением цистеина, глюкозы, крови. Рост медленный. Образуют мелкие колонии, напоминающие капельки росы, круглые с ровным краем, выпуклые, блестящие, с голубоватым отливом.
Слабо ферментируют до кислоты без газа некоторые углеводы (глюкозу, мальтозу, левулезу, маннозу), образуют сероводород. Туляремийный микроб по вирулентности для кроликов и биохимическим особенностям, а также географическому распространению разделен на подвиды (эколого — географические расы):
— голарктическую (не ферментирует глицерин, цитруллин, маловирулентен для кроликов и человека, распространен в Евразии и Америке); туляремийный микроб этого подвида более приспособлен к водным экосистемам, способен распространяться водным путем, передаваться через комаров;
— неарктическую (ферментирует глицерин, не ферментирует цитруллин, более вирулентен для кроликов и человека, распространен в Северной Америке);
— среднеазиатскую (ферментирует глицерин и цитруллин, мало вирулентен). Среднеазиатский подвид по свойствам занимает промежуточное положение между первыми двумя, приближаясь к исходной предковой форме возбудителя.
Голарктический подвид включает три биовара — 1 ( Erys — эритромицинчувствительный), 2 ( Eryr — резистентный) и японский ( var . japonica ). Биовар 2 известен только в Евразии, где совпадает с распространением водяной крысы.
F . tularensis в S (вирулентной) форме имеет два основных антигенных комплекса — О антиген (обнаруживает сходство с О — антигенами бруцелл) и Vi (капсульный) антиген. Диссоциация S à R приводит к утрате капсулы, вирулентности и иммуногенности.
Эколого — эпидемиологические особенности.
На территории России выделено 7 основных ландшафтных типов природных очагов туляремии : пойменно — болотный, луго — полевой, степной, лесной, предгорно — ручьевой, тундровый и тугайный (пойменно — пустынный) со своими основными хозяевами возбудителя и эколого — эпидемиологическими особенностями. Человек очень чувствителен к туляремийному микробу, минимальная инфицирующая доза — одна микробная клетка. Животные по чувствительности к этому микроорганизму разделены на четыре группы. Особое значение в условиях Западной Сибири имеют водяные крысы и ондатры. Заражение человека может происходить путем контакта с грызунами или инфицированными ими предметами, алиментарным путем (инфицированные грызунами вода и пищевые продукты), воздушно — пылевым путем, трансмиссивно (иксодовые клещи и другие кровососы). Н.Г.Олсуфьев выделяет две экологические формы возбудителя — “сухопутную”, характеризующуюся передачей через иксодовых клещей (все три подвида), и “водную”, связанную с околоводными видами грызунов и другими организмами — гидробионтами, с преимущественной передачей через воду и укусы комаров (голарктический подвид).
Клинико — патогенетические особенности.
возбудитель туляремии является внутриклеточным паразитом. Его вирулентность обусловлена :
— капсулой, угнетающей фагоцитоз;
— нейраминидазой, способствующей адгезии;
— аллергенными свойствами клеточной стенки;
— способностью размножаться в фагоцитах и подавлять их киллерный эффект;
— наличием рецепторов к Fc — фрагменту IgG , подавлять активность систем комплемента и макрофагов.
Франциселлы проникают в организм через кожу и слизистые глаз, рта, дыхательных путей, желудочно — кишечного тракта. Г.П.Руднев (1970) предложил в патогенезе туляремии выделить следующие стадии:
1. Внедрения и первичной адаптации возбудителя.
3. Первичных регионарно — очаговых (туляремийный бубон) и общих реакций.
4. Гематогенных матастазов и генерализации.
5. Вторичной полиочаговости.
6. Реактивно — аллергических изменений.
7. Обратного метаморфоза и выздоровления.
В ряде случаев процесс может ограничиваться первыми тремя фазами.
Основными клиническими формами туляремии являются язвенно — бубонная (ульцерогландулярная), глазо — бубонная (окулогландулярная), легочная, абдоминальная, генерализованная, другие формы (в т.ч. ангинозно — гландулярная), неуточненная (международная статистическая классификация болезней, 10 пересмотр. ВОЗ, 1995).
Бактериологические методы диагностики туляремии для человека имеют дополнительное значение и не всегда эффективны, что определяется биологическими особенностями возбудителя и особенностями инфекции у человека (малая концентрация возбудителя в органах и тканях).
Биопроба является намного более эффективным методом диагностики. Материал от больного (пунктат бубона, выделения с конъюнктивы, пленка с миндалин, мокрота и др.) используют для заражения лабораторных животных (чаще белых мышей), из органов павших животных делают высевы на питательные среды, культуру идентифицируют по совокупности следующих признаков:
а) морфология клеток и грамотрицательная окраска ;
б) рост на желточной среде и специальных средах и отсутствие роста — на простых мясо — пептонных средах;
в) специфическое свечение в реакции иммунофлюоресценции (МФА);
г) агглютинация культуры туляремийной сывороткой;
д) способность вызывать гибель белых мышей и морских свинок с характерными патологоанатомическими изменениями в органах и выделением чистой культуры.
Бактериологические методы и биопробы могут выполняться только специализированными лабораториями, имеющими разрешение на работу с возбудителем туляремии (2 группа патогенности). В качестве метода выявления туляремийного микроба может использоваться МФА, реакция нейтрализация антител — РНАТ, в качестве дополнительного — ПЦР.
Наибольшее значение в лабораторной диагностике туляремии имеют серологические методы — РА, РПГА. Обязательно исследование парных сывороток крови. Дополнительными серологическими методами являются ИФА, РНИФ.
Аллергодиагностика (проба с тулярином — туляремийным аллергеном) чаще используется для оценки естественного и вакцинального иммунитета. ГЗТ развивается на первой неделе болезни, а также после вакцинации и сохраняется несколько лет. У больных накожные и внутрикожные туляриновые пробы не рекомендуются в связи с возможностью ухудшения состояния больного. Могут применяться методы аллергодиагностики in vitro — реакция лейкоцитолиза, РТМЛ и др.
На неблагополучных по туляремии территориях применяют живую туляремийную вакцину. Иммунитет длительный, проверяется с помощью пробы с тулярином. С помощью этой пробы отбирают контингенты на вакцинацию и ревакцинацию.
источник
Бруцеллёз, Туляремия Бруцеллёз, Туляремия. Классификация возбудителей бруцеллёза 4 группа по Берджи семейство Brucellaceae род Brucella виды: B. melitensis. — презентация
Презентация была опубликована 3 года назад пользователемпарвина джавадова
Презентация на тему: » Бруцеллёз, Туляремия Бруцеллёз, Туляремия. Классификация возбудителей бруцеллёза 4 группа по Берджи семейство Brucellaceae род Brucella виды: B. melitensis.» — Транскрипт:
1 Бруцеллёз, Туляремия Бруцеллёз, Туляремия
2 Классификация возбудителей бруцеллёза 4 группа по Берджи семейство Brucellaceae род Brucella виды: B. melitensis (95 – 97% случаев в РФ) B. abortus B. suis B. neotomae B. ovis B. canis виды делятся на биовары 4 группа по Берджи семейство Brucellaceae род Brucella виды: B. melitensis (95 – 97% случаев в РФ) B. abortus B. suis B. neotomae B. ovis B. canis виды делятся на биовары
3 Морфологические и тинкториальные свойства Мелкие коккобактерии Грамотрицательные Образуют микрокапсулу Неподвижны Спор не образуют
4 Культуральные свойства прихотливы, на простых средах не растут в первых генерациях размножаются медленно (1 – 3 недели) печеночные среды (бульон и агар) кровяные и сывороточные среды в бульоне – равномерное помутнение на агаре – сероватые, мелкие, выпуклые, блестящие колонии (S-формы) B. abortus требует 5 – 10 % СО 2
5 Биохимические свойства ферментируют глюкозу и арабинозу с образованием кислоты без газа не образуют индол для B. abortus образование H 2 S вариабельно B. melitensis не образует H 2 S B. suis образует H 2 S Антигенные свойства О-антиген (ЛПС)
6 Классификация возбудителей бруцеллёза 4 группа по Берджи семейство Brucellaceae род Brucella виды: B. melitensis (95 – 97% случаев в РФ) B. abortus B. suis B. neotomae B. ovis B. canis виды делятся на биовары 4 группа по Берджи семейство Brucellaceae род Brucella виды: B. melitensis (95 – 97% случаев в РФ) B. abortus B. suis B. neotomae B. ovis B. canis виды делятся на биовары
7 Эпидемиология Источник B. abortus – крупный рогатый скот
8 Источник B. melitensis – мелкий рогатый скот (овцы, козы)
10 Эпидемиология Пути передачи: – алиментарный – через мясо, непастеризованное молоко и молочные продукты (например, сыр брынза) – контактный – аэрогенный
11 Эпидемиология Восприимчивый коллектив – любой человек без специфического иммунитета. Группы риска работники животноводства, предприятий, обрабатывающих продукты, полученные от животных, ветеринары. В очагах бруцеллеза сезонный подъем заболеваемости людей связан с периодами отела, окота или опороса у животных.
12 Факторы патогенности бруцелл адгезины: микрокапсула белки наружной мембраны ферменты патогенности: – гиалуронидаза (придаёт высокую инвазивность) – нейраминидаза – каталаза и супероксиддисмутаза (защищают бруцелл от перекисей и других бактерицидных форм кислорода ) токсины: эндотоксин (ЛПС) агрессины : продукты, ингибирующие слияние фагосомы и лизосомы и подавляющие окислительный взрыв (незавершенный фагоцитоз) являются внутриклеточными паразитами клеток РЭС
13 Патогенез бруцеллёза Проникновение бруцелл через кожу и слизистые Попадание в регионарные л/у, размножение в макрофагах Проникновение в кровь, бактериемия и эндотоксинемия Гематогенная диссеминация в органы, богатые элементами РЭС: печень, селезёнка, костный мозг, л/у, почки Гематогенная диссеминация в органы, богатые элементами РЭС: печень, селезёнка, костный мозг, л/у, почки Формирование гранулём (специфические клеточные узелки) Периодически выход в кровь (бактериемия и эндотоксинемия), аллергизация макроорганизма (ГЗТ)
14 Клиника бруцеллёза острый бруцеллез — 1,5 – 2 месяца подострый бруцеллез — до 6 месяцев хронический бруцеллез — более 6 месяцев
15 Клиника острого и подострого бруцеллёза 1. Длительная волнообразная лихорадка (у большей части больных сочетается с ознобами), самочувствие остаётся хорошим 2. Проливные поты 3. Гепатоспленомегалия 4. Полилимфаденопатия 5.Артралгии, миалгии 6. Поражения ЦНС токсического характера: головная боль, утомляемость, нарушения сна и др. 7. Может быть розеолезная сыпь на коже
16 Клиника хронического бруцеллёза 1. Поражения опорно-двигательного аппарата: – артриты крупных суставов – сакроилеит – миозиты – бурситы – тендовагиниты 2. Поражения центральной и периферической нервной системы 3. Поражения половой системы: – орхит, эпидидимит у мужчин – сальпингит, оофорит, эндометрит, НМЦ у женщин 4. Может быть субфебрилитет
17 Лабораторная диагностика Бактериологическое исследование проводится в лабораториях ООИ Исследуемый материал – кровь (особенно во время лихорадки), костный мозг, моча, реже – желчь, испражнения, суставная жидкость. Методы диагностики : 1)Экспресс-метод – ПЦР – РИФ – ИФА
18 2)Бактериологический метод Низкая высеваемость возбудителя Медленный рост (инкубация от 5 до 30 суток) B. abortus требует 5 – 10 % СО 2 Материал засевают на: печёночный бульон (МПБ + настой из говяжьей печени): равномерное помутнение печёночный агар (МПА + настой из говяжьей печени): сероватые, мелкие, выпуклые, блестящие колонии (S- формы) кровяной агар
19 Колонии бруцелл на печеночном агаре
20 Колонии бруцелл на кровяном агаре
21 Мазок из колоний, окраска по Граму
22 Идентификация чистой культуры: – по биохимическим свойствам: ферментируют глюкозу и арабинозу до кислоты без газа не образуют индол для B. abortus образование H 2 S вариабельно B. melitensis не образует H 2 S B. suis образует H 2 S – по антигенным свойствам (РА) – по фаголизабельным свойствам – бактериостатические тесты Хеддельсона: основаны на бактериостатическом действии анилиновых красителей – фуксина и тионина : B. abortus растет на среде с фуксином, не растет с тионином B. suis растет на среде с тионином, не растет с фуксином B. melitensis растет на обеих средах
23 3) Биологический метод Заражают исследуемым материалом морских свинок и белых мышей. Вскрытие мышей – через 20 – 25 суток, морских свинок – через 30 – 35 суток. Изучают патологоанатомические изменения, проводят микроскопию мазков из органов, проводят бактериологическое исследование (20 – 25 дней).
24 4) Серологический метод – 1-ый основной Серодиагностика и аллергическая кожная проба по своему диагностическому значению в различные периоды заболевания не равноценны, вследствие чего не могут заменять друг друга. Поэтому необходимо применять серодиагностику в комплексе с кожно- аллергической пробой. В первые 6 месяцев заболевания диагностическая ценность серологического метода выше, чем аллергического; серологические реакции в этот период оказываются положительными почти в 98% случаев. По мере удлинения срока заболевания процент положительных серологических реакций (реакция агглютинации, РПГА) начинает падать. В поздние периоды заболевания большую диагностическую ценность имеет реакция Кумбса и внутрикожная аллергическая проба.
25 4) Серологический метод – 1-ый основной пластинчатая (качественная) РА – Хеддельсона развернутая (количественная) РА – Райта развернутая РПГА РСК ИФА нРИФ
26 Схема реакции Хеддельсона I 0,04 мл сыворотки пациента + 0,03 мл единого бруцеллёзного диагностикума IV контроль диагностикума (Кд) 0,03 мл единого бруцеллёзного диагностикума + 0,03 мл физ. раствора II 0,02 мл сыворотки пациента + 0,03 мл единого бруцеллёзного диагностикума V контроль сыворотки (Кс) 0,02 мл сыворотки пациента + 0,03 мл физ. раствора III 0,01 мл сыворотки пациента + 0,03 мл единого бруцеллёзного диагностикума
27 Единый бруцеллезный диагностикум содержит антигены трех патогенных для человека видов бруцелл (бруцеллы инактивированы нагреванием), подкрашен метиленовым синим. Используется для реакции Хеддельсона и Райта
28 Учет реакции Хеддельсона реакцию окончательно учитывают через 8 минут отсутствие агглютинации во всех дозах сыворотки — реакция «отрицательная» агглютинация только в первой дозе или в первой и второй дозах сыворотки — результат «сомнительный» агглютинация во всех дозах сыворотки — результат «положительный» при положительной реакции Хеддельсона ставят развёрнутую реакцию РА — Райта для определения титра АТ (диагностический титр 1:200)
29 При хроническом бруцеллёзе (более 6 месяцев) реакция агглютинации может быть отрицательной, т.к. у больного становится больше неполных АТ Для выявления неполных АТ ставится реакция Кумбса с использованием антиглобулиновой сыворотки против иммуноглобулинов человека
30 5) Метод кожно-аллергических проб – 2 -ой основной Кожно-аллергическая проба Бюрне основана на способности организма, сенсибилизированного бруцеллезным антигеном, специфически отвечать местной реакцией на внутрикожное введение бруцеллезного аллергена (ГЗТ). Реакция выявляется у больных позднее, чем антитела, и сохраняется годами после исчезновения клинических симптомов. Необходимо иметь в виду, что аллергическая реакция может быть положительной в случаях бессимптомной инфекции, а также у привитых живой бруцеллезной вакциной.
31 Для постановки пробы Бюрне используют бруцеллин. Бруцеллин – это нуклео-протеидный экстракт из бруцелл вакцинного штамма, полученный методом кислотного гидролиза. Вводится 0,1 мл внутрикожно в ладонную поверхность предплечья. Учет реакции производится через часа. Результат считается положительным, если образуется инфильтрат и гиперемия размером не менее 2 см в диаметре.
32 Внутрикожное введение аллергена
33 Вакцина бруцеллёзная живая
34 аттенуированного содержит живые клетки B. abortus вакцинного (аттенуированного) штамма 19BA штамм получен американским учёным Беком путём многократных пересевов бруцелл на питательных средах при комнатной температуре. Учёная П.А. Вершилова доказала, что все 3 вида бруцелл создают перекрёстный иммунитет друг против друга используется для профилактики бруцеллёза по эпид. показаниям группам риска, ревакцинация – через 1 год
35 Вакцина бруцеллёзная лечебная
36 Классификация возбудителя туляремии 4 группа по Берджи семейство Brucellaceae род Francisella вид F. tularensis (делится на биовары) 4 группа по Берджи семейство Brucellaceae род Francisella вид F. tularensis (делится на биовары)
37 Морфологические и тинкториальные свойства Мелкие коккобактерии Грамотрицательные Образуют микрокапсулу Неподвижны Спор не образуют
38 Культуральные свойства прихотливы, на простых средах не растут желточные среды (свернутая желточная среда Мак-Коя) кровяной агар с добавлением глюкозы и цистеина (среда Френсиса) на агаре – беловатые, мелкие, выпуклые, блестящие колонии в жидких средах образуют плёнку
39 Биохимические свойства ферментирует глюкозу, мальтозу, маннозу с образованием кислоты без газа образует H 2 S Антигенные свойства О-антиген (ЛПС) Vi-антиген (поверхностно-оболочечный)
40 Классификация возбудителя туляремии 4 группа по Берджи семейство Brucellaceae род Francisella вид F. tularensis (делится на биовары) 4 группа по Берджи семейство Brucellaceae род Francisella вид F. tularensis (делится на биовары)
41 Эпидемиология Источник инфекции Источник инфекции – животные, в основном – грызуны (суслики, ондатры, тарбаганы и др.) (зооноз).
42 Эпидемиология Пути передачи: Пути передачи: – контактный – трансмиссивный (комары, клещи, слепни и др.) – алиментарный и водный – воздушно-капельный Восприимчивый коллектив Восприимчивый коллектив – любой человек без специфического иммунитета. Группы риска: охотники, промысловики и др.
43 Факторы патогенности F. tularensis адгезины: микрокапсула белки наружной мембраны ферменты патогенности: – гиалуронидаза (придаёт высокую инвазивность) – нейраминидаза токсины: эндотоксин (ЛПС) агрессины : капсула вещества, подавляющие лизосомальную функцию фагоцитов (макрофагов) (незавершенный фагоцитоз)
44 Патогенез туляремии Проникновение через кожу и слизистые глаз, дыхательной и пищеварительной систем незавершённый фагоцитоз Размножение во входных воротах (первичный аффект) и регионарных л/у, незавершённый фагоцитоз, воспаление л/у (бубонная, язвенно-бубонная, глазо-бубонная, ангинозно- бубонная, абдоминальная, легочная формы ) незавершённый фагоцитоз Размножение во входных воротах (первичный аффект) и регионарных л/у, незавершённый фагоцитоз, воспаление л/у (бубонная, язвенно-бубонная, глазо-бубонная, ангинозно- бубонная, абдоминальная, легочная формы ) Нарушение барьерной функции л/у, проникновение в кровь, эндотоксикоз Гематогенная диссеминация, образование гранулём во внутренних органах и лимфоузлах (септическая форма) Гематогенная диссеминация, образование гранулём во внутренних органах и лимфоузлах (септическая форма)
45 Клиника туляремии Ангинозно — бубонная форма Язвенно – бубонная форма
46 Клиника туляремии: бубонная форма
47 Лабораторная диагностика Бактериологический и биологический методы проводятся в лабораториях ООИ Исследуемый материал – отделяемое язв, конъюнктивы глаза, пунктат бубона, плёнка из зева, мокрота, кровь. Методы диагностики : 1)Экспресс-метод – ПЦР – РИФ – ИФА
48 2)Бактериологический метод Проводится опосредованно через биологический. Заражают исследуемым материалом белых мышей и морских свинок. Животные погибают на 6 – 14 сутки, затем изучают патологоанатомические изменения, микроскопируют мазки из органов животных и проводят бактериологический метод
49 F. tularensis в мазке-отпечатке из селезёнки (окраска по Романовскому-Гимзе)
50 Посев материала от животных проводят на: желточные среды свернутая желточная среда Мак-Коя кровяной агар с добавлением глюкозы и цистеина (среда Френсиса) на агаре – беловатые, мелкие, выпуклые, блестящие колонии
51 Колонии францизелл на желточном агаре
52 Идентификация чистой культуры: – по биохимическим свойствам: ферментирует глюкозу, мальтозу, маннозу до кислоты без газа образует H 2 S – по антигенным свойствам: реакция агглютинации на стекле
53 3) Серологический метод – 1-ый основной развернутая РА развернутая РПГА РСК ИФА
54 4) Метод кожно-аллергических проб – 2 -ой основной Для постановки пробы используют тулярин Тулярин – это взвесь инактивированных нагреванием францизелл вакцинного штамма Вводится 0,1 мл внутрикожно в ладонную поверхность предплечья (есть тулярин для накожного применения) Учет реакции производится через часа Результат считается положительным, если образуется инфильтрат и гиперемия размером не менее 5 мм в диаметре У вакцинированных или переболевших людей проба остаётся положительной несколько лет. У больных проба становится положительной с 3 – 5 дня болезни
55 Вакцина туляремийная живая
56 аттенуированного содержит живые клетки F. tularensis вакцинного (аттенуированного) штамма штамм получен Н.А. Гайским и Б.Я. Эльбертом путём многократных пересевов францизелл на питательных средах Используется для профилактики туляремии по эпид. показаниям группам риска и лицам, проживающим на территории с природными очагами туляремии, ревакцинация – через 5 лет
источник