Меню Рубрики

Вакцина против аденовирусной инфекции крс

Специфическая профилактика аденовирусной инфекции крупного рогатого скота с использованием комбинированной вакцины

Шемелькова Г.О., Верховская А.Е., Соболева Г.Л.
ООО «Ветбиохим», г. Москва
Шемельков Е.В., Иванов Е.В., Непоклонова И.В.
АНО «Научно-исследовательский институт диагностики и
профилактики болезней человека и животных», г. Москва
Алипер Т.И. «НПО НАРВАК»,
«ФГБУ НИИ вирусологии им. Д.И. Ивановского» МЗ РФ, г. Москва

Аденовирус крупного рогатого скота широко распространен среди поголовья и часто, в сочетании с другими вирусными агентами (вирусы инфекционного ринотрахеита, парагрип-па-3, вирусной диареи, респираторно-синцитиальным, рота- и коро-навирусами), является первопричиной возникновения и развития основных респираторных и кишечных инфекционных заболеваний телят, которые, в дальнейшем, осложняются вторичными инфекциями бактериальной этиологии [2, 5, 7, 10].

Установлено, что аденовирусы являются иммунодепрес-сантами и способствуют развитию других инфекционных патологий. Из-за сходства с другими инфекционными заболеваниями вирусной этиологии клинико-эпизоотологическая диагностика аденовирусной инфекции крупного рогатого скота затруднена [4].

Ввиду частой полиэтиологичности первичных вирусных инфекций и невозможности разграничения ведущей роли того или иного агента в развитии патологии, наиболее эффективным методом специфической профилактики таких заболеваний является применение комбинированных вакцин, содержащих антигены сразу всех или нескольких из указанных возбудителей [3, 7]. Вакцинации подвергают стельных коров для создания у новорожденного потомства пассивного колострального иммунитета, а также телят с 2-3-х недельного возраста для создания активного поствакцинального иммунитета [9].

В настоящее время имеется ряд поливалентных вакцин против двух, трех и более указанных респираторных и/или кишечных вирусных заболеваний телят, но отсутствуют зарегистрированные биопрепараты, предназначенные для специфической профилактики аденовирусной инфекции крупного рогатого скота. Однако, наряду с другими вирусными агентами, аденовирусы играют значительную роль в этиологии указанных заболеваний [1, 2, 8, 11].

В ранее проведенных исследованиях нам удалось выделить и идентифицировать методом секвенирования фрагмента генома аденовирус крупного рогатого скота I-го типа. Выделенный штамм аденовируса был адаптирован к перевиваемой культуре клеток и депонирован в государственной коллекции вирусов ФГБУ НИИ вирусологии им. Д.И. Ивановского МЗ РФ. В ходе проведенных исследований установили, что выделенный аденовирус обладает выраженными антигенными свойствами и пригоден для использования в составе инактивированных вакцин [6].

Целью настоящей работы была разработка комбинированной вакцины против аденовирусной инфекции, инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи, респираторно-синци-тиальной, рота- и коронавирусной болезнях крупного рогатого скота, а также оценка эффективности ее применения в производственных условиях.

Материалы и методы. Для проведения серомониторинга использовали пробы сыворотки крови крупного рогатого скота, полученные из разных субъектов РФ, которые исследовали на наличие ви-руснейтрализующих антител к аденовирусу, вирусам инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи, респираторно-синци-тиальному, рота- и коронавирусам крупного рогатого скота. Наличие специфических антител к возбудителям инфекционного ринотрахеита и респираторно-синцитиальной инфекции, так же определяли методом ИФА, с использованием соответствующих диагностических ИФА-наборов: «ИРТ-СЕРОТЕСТ» и «РСИ-СЕРОТЕСТ», производства ООО «Ветбиохим».

В качестве прототипа использовали инактивированную комбинированную вакцину «КОМБОВАК», производства ООО «Ветбиохим».

Экспериментальные образцы вакцины готовили из одной партии инактивированного аденовируса крупного рогатого скота I-го типа, штамм «Альфа» (выделен от 17-и суточного теленка) [6], а также инактивированных антигенов производственных штаммов вирусов инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи, рес-пираторно-синцитиального, рота- и коронавирусов крупного рогатого скота.

При выборе адъюванта для вакцины провели исследования шести различных коммерческих и экспериментальных препаратов: ISA 50, ISA 71, ISA 206, ISA 773 (SEPPIC, Франция), адъювантный комплекс Акрум-С (комплекс высокомолекулярного синтетического полиэлектролита со смесью поверхностно-активных гликозидов), гель гидроокиси алюминия (ГОА). Соотношения антигенной части и адъюванта брали в пропорциях, рекомендованных производителем адъюванта или подбирали опытным путем.

В качестве лабораторной модели, для оценки безвредности использовали группы морских свинок и белых мышей (n = 5 и n = 10, соответственно, на каждый образец). Морским свинкам вакцину вводили внутримышечно в дозе 2,0 мл, белым мышам — подкожно в дозе 0,5 мл. За животными вели наблюдение в течение 15 суток.

Антигенную активность образцов на лабораторной модели, оценивали путем проведения однократной внутримышечной вакцинации группы морских свинок (n = 10, на каждый образец), сформированной по принципу аналогов в дозе 1,0 мл, с последующим исследованием сыворотки крови, полученной до и через 21 сутки после вакцинации, на наличие специфических антител в реакции нейтрализации (РН).

Безвредность и антигенную активность изготовленных образцов в опыте на естественно восприимчивых животных оценивали путем проведения двукратной внутримышечной иммунизации коров за 1-2 месяца до осеменения (n=30 на каждый образец вакцины), сформированных в соответствующие группы по принципу аналогов, в дозе 3,0 мл. Кровь брали выборочно по 10 голов из каждой группы перед вакцинацией (Д0) и через 21 сутки после первой (Д21) и второй иммунизаций (Д42), с последующим исследованием сыворотки крови по уровню специфических антител в РН.

Для определения оптимальной иммунизирующей дозы вакцины использовали три группы коров за 1-2 месяца до осеменения (n = 15 в каждой группе), которых иммунизировали внутримышечно двукратно с интервалом 21 сутки в дозах 2,0 мл (первую группу), 3,0 мл (вторую группу) и 4,0 мл (третью группу). А также две группы телят в возрасте 2,5-3 месяца (n = 15 в каждой группе), которых иммунизировали двукратно внутримышечно в дозах 1,0 мл (первую группу) и 2,0 мл (вторую группу). Кровь у животных брали перед вакцинацией (Д0) и через 21 сутки после второй иммунизаций (Д42), с последующим исследованием сыворотки крови по уровню специфических антител в РН. В качестве контроля использовали группы невакцинированных животных (по 10 голов коров и телят).

Постановку и учет результатов РН осуществляли по стандартным методикам с использованием соответствующих контрольных штаммов вирусов.

Оценку эффективности применения вакцины в производственных условиях проводили в животноводческом хозяйстве, неблагополучном по респираторным и кишечным инфекционным заболеваниям телят. В хозяйстве вакцинировали стельных коров — дважды: первый раз — за 50-60 суток до отела, второй — через 14-21 сутки в дозе 3,0 мл. Полученных телят первый раз вакцинировали в возрасте 25-30 суток, повторно через 20-25 суток в дозе 2,0 мл. В качестве контроля использовали группы невакцинированных стельных коров и телят, которые содержались в другом помещении. Эффективность применения вакцины определяли по эпизоотологическим показателям: заболеваемость телят респираторными и кишечными инфекциями, смертность телят, а также их вынужденная выбраковка в опытной и контрольной группах.

Статистическую обработку данных выполняли общепринятыми методами (компьютерные программы Microsoft Excel 2010, Stat Plus 2005).

Результаты исследований. На первом этапе работы (20102012 г.) мы провели исследование 869 проб сыворотки крови коров и телят, полученных от невакцинированных животных, из 12 неблагополучных по основным респираторным и кишечным инфекционным заболеваниям хозяйств Вологодской, Воронежской, Калужской, Московской, Тамбовской областей, Алтайского и Краснодарского краев, Республики Башкирия. В ходе проведенного серомониторинга было выявлено наличие специфических антител к возбудителям: аденовирусной инфекции (АВ) в 24% исследуемых проб, инфекционного ринотрахеита (ИРТ) — в 47%, парагриппа-3 (ПГ-3) — в 85%, вирусной диареи (ВД) — в 86%, респираторно-синцитиальной болезни (РС) — в 62%, ротавирусной болезни (РВ) — в 89%, коронавирусной болезни (КВ) — в 87% исследуемых проб (рисунок 1).

Рис. 1. Количество положительных проб сыворотки крови крупного рогатого скота
к соответствующему вирусу (в процентах от общего числа исследованных)

Результаты проведенных исследований свидетельствуют о широком распространении аденовирусной инфекции крупного рогатого скота в животноводческих хозяйствах, при этом, в подавляющем большинстве случаев, она встречается в сочетании с другими вирусными заболеваниями. Таким образом, аденовирус крупного рогатого скота играет существенную роль в этиологии основных вирусных заболеваний телят. Полученные результаты согласуются с данными других ученых, показывающими широкое распространение вирусных инфекций, в том числе и аденовирусной, среди поголовья крупного рогатого скота [1, 2, 5].

Кроме того, при проведении серологических исследований, установлена корреляция результатов по выявлению антител к вирусам ИРТ и РС, полученных в РН и ИФА.

На основании проведенных исследований, с учетом имеющихся литературных данных, мы пришли к заключению о целесообразности создания комбинированной вакцины против основных респираторных и кишечных вирусных заболеваний телят, включающей в себя аденовирус крупного рогатого скота.

Поскольку, по сравнению с прототипной вакциной «КОМБОВАК», в новой вакцине увеличивается количество вирусных антигенов и, следовательно, снижается объемная доля каждого отдельного антигена, то для нее требуется более иммунологически эффективный адъювант, способный обеспечить выраженный иммунный ответ на каждый антиген.

В ходе данной работы исследовали шесть адъювантов, с которыми изготовили экспериментальные образцы вакцины. Оценку изготовленных образцов проводили по показателям безвредности и антигенной активности в опытах на лабораторных и естественно восприимчивых животных.

Изучение безвредности показало, что экспериментальные образцы вакцины не вызывали заболевания или гибели подопытных животных, при этом у отдельных особей наблюдали образование плотных ограниченных припухлостей на месте введения образцов с масляными адъювантами.

В опытах на лабораторных и естественно восприимчивых животных установлено, что введение экспериментальных образцов вакцины вызывало развитие выраженного иммунного ответа (Р Таблица 1. Сравнительная оценка антигенной активности вакцины с разными адъювантами в опыте на лабораторных животных

источник

  • Вирусная диарея
  • Инфекционный ринотрахеит /
    инфекционный пустулезный вульвовагинит
  • Парагрипп-3
  • Респираторно-синцитиальная инфекция
  • Ротавирусная инфекция
  • Аденовирусная инфекция
  • Коронавирусная инфекция
  • Пастереллёз
  • Эшерихиоз

Вирусная диарея крупного рогатого скота (болезнь слизистых оболочек, мукозальная болезнь, инфекционная диарея крупного рогатого скота, инфекционный энтерит крупного рогатого скота, диарея новорожденных телят) — контагиозная болезнь преимущественно молодых животных, характеризующаяся эрозивно-язвенным воспалением слизистых оболочек пищеварительного тракта.

Острое контагиозное вирусное заболевание, характеризующаяся лихорадкой, катарально-некротическим воспалением слизистых оболочек верхних дыхательных путей, поражением глаз, половых органов (с признаками пустулёзного вульвовагинита), ЦНС, абортами.

Парагрипп-3 (лат. — Paragrippus bovum; англ. — Parainfluenza-3-virus; транспортная лихорадка крупного рогатого скота, параинфлюэнца-3) — остро протекающая контагиозная болезнь, главным образом телят, характеризующаяся лихорадкой, катаральным воспалением верхних дыхательных путей, а в тяжелых случаях поражением легких.

Контагиозная, остро протекающая болезнь, характеризующаяся лихорадкой, преимущественным поражением органов дыхания, потерей аппетита.

Остро протекающая, высококонтагиозная болезнь новорожденных телят, характеризующаяся профузным поносом, дегидратацией организма, развитием катарального или катарально-геморрагического гастроэнтерита и высокой летальностью.

Остро протекающее заболевание молодняка сельскохозяйственных животных, характеризующееся поражением органов дыхания, пищеварения, лимфоидной ткани, конъюнктивитами. Крупный рогатый скот часто является носителем латентных аденовирусов, вызывающих бессимптомные инфекции.

Остропротекающая болезнь новорожденных телят, характеризующаяся профузным поносом, иногда со слизью и кровью в каловых массах, дегидратацией организма, депрессией и истощением.
Болезнь регистрируется у телят 7-18-дневного возраста, но чаще всего коронавирусный энтерит возникает у животных 8-14-дневного возраста. К заболеванию более предрасположены телочки (37,9%), чем бычки (23,8%). Порода скота и способ ведения животноводства не оказывают значительного влияния на частоту случаев болезни.

контагиозная инфекционная болезнь животных многих видов, характеризующаяся при остром течении септическими явлениями, крупозным воспалением легких, плевритом, отеками в различных областях тела, а при подостром и хроническом течениях гнойно-некротизирующей пневмонией, поражением глаз, суставов, молочной железы и геморрагическим энтеритом.

Острое инфекционное заболевание с фекально-оральным механизмом передачи; характерно преимущественное поражение ЖКТ с развитием энтерита или энтероколита, в редких случаях — генерализованных форм с внекишечными проявлениями.

Вирус Таксономия Тип НК ГА
св-ва
Основные пути передачи Восприимчивые животные
(резервуар)
Основные клинические
формы и признаки
Внутриутробная инфекция
ИРТ/ИПВ Сем. Herpesviridae,
подсем. Alphaherpesvirinae,
род Varicellovirus
ДНК — Воздушно-капельно
— Перорально
— Со спермой
— Трансплацентарно
КРС, козы, овцы, буйволы, верблюды, ламы, свиньи — Ринит, бронхопневмония — Пустулезный вульвовагинит/ баланопостит, эндометрит — Конъюнктивит — Латентная/персистентная инфекция (вследствие инфицирования вирулентным штаммом или вакцинации живым вирусом) Аборт плода в любой период стельности, чаще в последний триместр. Телята, инфицированные в поздние сроки стельности, рождаются мертвыми или погибают в первые дни жизни с признаками септицемии.
ВД Сем. Flaviviridae,
род Pestivirus
РНК — Воздушно-капельно
— Перорально
— Со спермой
— Трансплацентарно
— Контактно
через предметы ухода)
КРС, буйволы, олени, косули — Диарея
— Ринит, бронхопневмония
— Болезнь слизистых (вследствие суперинфицирования персистентно инфицированных животных): изъязвление и некроз слизистых, диарея, гибель
— Персистентная инфекция
На 1-80 сут. стельности: аборты, мумификация, рассасывание плода На 80-125 сут. стельности: при инфицировании нецитопатогенным штаммом — рождение персистентно-инфицированных животных, цитопатогенным – патология развития или гибель плода После 125 сут. стельности: рождение клинически здоровых телят, наличие антител в сыворотке крови.
ПГ-3 Сем. Paramyxoviridae,
подсем. Paramyxovirinae,
род Respirovirus
РНК — Воздушно-капельно
— Перорально
— Со спермой
— Трансплацентарно
КРС, буйволы, лошади, овцы, козы, верблюды, собаки, крысы — Ринит, бронхопневмония
— Конъюнктивит
Аборты
Рождение нежизнеспособных телят
РС Сем. Paramyxoviridae,
подсем. Pneumovirinae,
род Pneumovirus
РНК — Воздушно-капельно
— Со спермой
— Трансплацентарно
КРС, овцы, козы — Ринит, бронхопневмония Аборты
РВ Сем. Reoviridae, род Rotavirus РНК — Перорально
— Контактно
КРС, свиньи, овцы, лошади, кошки, собаки, дикие жвачные — Диарея разной степени тяжести
КВ Сем. Coronaviridae,
род Betacoronavirus
РНК — Перорально
— Воздушно-капельно
— Контактно
КРС, буйволы — Острая диарея
АВ Сем. Adenoviridae
род Mastadenovirus
ДНК — Перорально
— Воздушно-капельно
— Через конъюнктиву
КРС, чаще телята от 2 мес. до 4 мес. — Пневмония, энтерит, конъюктивит
Читайте также:  Что принимать при аденовирусной инфекции

КОМБОВАК-A
Вакцина инактивированная комбинированная против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи, респираторно-синцитиальной, рота-, коронавирусной болезней и аденовирусной инфекции крупного рогатого скота

КОМБОВАК
Вакцина инактивированная комбинированная против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи, респираторно- синцитиальной, рота- и коронавирусной болезней телят

КОМБОВАК-Р
Вакцина инактивированная комбинированная против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, респираторно- синцитиальной болезни, вирусной диареи и пастереллеза телят

КОМБОВАК-К
Вакцина инактивированная комбинированная против вирусной диареи, рота-, коронавирусной болезней и эшерихиоза телят

Антиген Комбовак Комбовак-Р Комбовак-К Комбовак-А
ИРТ / ИПВ
ВД
ПГ-3
РС
РВ
КВ
АВ
Pasteurella multocida
(серовары A, B, D)
Mannheimia haemolytica
E. coli
(протективные антигены эшерихий, термостабильные и термолабильные энтеротоксины)
  • Высоко эффективны
  • Полностью безопасны
  • Можно применять племенным животным
  • Безопасны для стельных
    животных
  • Стабильны при хранении
  • Колостральные антитела у телят
    не снижают эффективность вакцинации
  • Изготовлены с использованием
    современных адьювантов
  • Исключена реактивация латентных
    вирусов и отсутствует иммуносупрессия

Вакцины КОМБОВАК и КОМБОВАК-А применяют по эпизоотическим показаниям для иммунизации взрослых животных и телят в хозяйствах, неблагополучных по респираторным и желудочно-кишечным,
а вакцину КОМБОВАК-Р преимущественно по респираторным болезням крупного рогатого скота.
Вакцинируют клинически здоровых животных.

В зависимости от принятой в хозяйстве технологии можно использовать наиболее удобную для предприятия схему вакцинации взрослого поголовья.

Коров и телок случного возраста прививают дважды: за 4 и 1 неделю до осеменения, а затем ревакцинируют перед отелом дважды:
— первый раз – за 50-60 суток до отела,
— второй раз – через 14-21 суток (не позднее 30 суток до отела.

Все поголовье животных старше года прививают каждые 6 месяцев двукратно с интервалом 14-21 суток.
Не рекомендуется вакцинировать животных за 3 недели до и после отела.

Независимо от применяемой схемы вакцинации взрослого поголовья телят вакцинируют в возрасте 7-10 суток и старше дважды с интервалом 20-25 суток.
Ревакцинацию проводят однократно в той же дозе в возрасте 6 месяцев.
Вакцину вводят в область шеи.

Вакцину КОМБОВАК-К применяют для иммунизации стельных коров и нетелей в хозяйствах, неблагополучных по желудочно-кишечным болезням новорожденных телят, с целью создания колострального иммунитета. Вакцинируют клинически здоровых животных.
Вакцину вводят в область шеи внутримышечно в дозе 3 см 3 .
Животных вакцинируют дважды: первый раз — за 40-50 суток до отела,
второй раз — через три недели после первой иммунизации.

Производственные испытания по оценке эффективности применения вакцины КОМБОВАК-А проводили в условиях хозяйства неблагополучного по основным вирусным заболеваниям телят, где было вакцинировано 376 стельных коров и 370 телят, полученных от вакцинированных животных, в качестве контроля использовали невакцинированных стельных коров (n=243) и телят (n=238), которых содержали в другом помещении.

Таким образом, применение вакцины КОМБОВАК-А в условиях неблагополучного хозяйства позволило снизить заболеваемость телят в 3 раза, а сохранность поголовья повысить в 3,1 раза, по сравнению с контрольной группой невакцинированных животных.

источник

Вирусоскопия.ЭМ и ИЭМ в практических условиях не применяются. Из экспресс-методов диагностики наибольшего внимания заслуживает применение гибридизационного зонда. С помощью его (точечной гибридизации) удается дифференцировать два родствен­ных морбилливируса — ВЧ КРС и ВЧ МЖЖ. Дифференциальная диагностика с помо­щью ДНК-зондов помогла идентифицировать вспышку чумы КРС среди популяции баранов в Индии.

Индикация и идентификация вируса

Обнаружение специфических телец-включений.В зараженных культурах клеток в цитоплазме одиночных клеток и симпластов появляются сначала мелкие эозинофильные включения округлой формы со светлым ободком вокруг. С увеличением размеров симпла­стов растут объем и число цитоплазматических включений. Последние принимают много­угольную, продолговатую формы или форму кольца, охватывающего ядра симпластов; в ци­топлазме располагается до 10 включений. Вслед за появлением цитоплазматических включений в инфицированных клетках, в том числе и в симпластах, образуются внутриядерные оксифильные включения в количестве 2-4. Хроматиновая сеть ядра нарушается лишь вокруг включений. В некоторых случаях они занимают почти все ядро.

Биопроба.Идентифицировать ВЧ можно биопробой на иммунном и неиммунном скоте. Двух животных вакцинируют сухой вирусвакциной из шт. ЛТ (согласно утвержденному на­ставлению по применению препарата). Через 12 дн вакцинированных и двух невакцинированных животных заражают испытуемым материалом (суспензия селезенки, лимфоузлов и крови). При наличии у невакцинированных животных специфической температурной реак­ции, клинических признаков и отсутствии таковых у иммунных животных биопроба счита­ется положительной. У заболевших или павших животных обнаруживают специфический АГ в РСК и РДП.

РН. Применяют качественную и количественную РН. Для установления специфичности вызываемых вирусом поражений клеток проводят качественную РН, а для определения ко­личества АТ в сыворотке иммунных животных — количественную.

РСК.Применяют для прижизненной и посмертной диагностики чумы с целью выявле­ния АГ в гомогенатах лимфоузлов, селезенки, а также в инфицированной культуре клеток. При использовании РСК с целью идентификации вируса в культуре клеток в качестве спе­цифического и контрольного АГ используют культуральную жидкость с зараженной и неза-раженной культурами клеток.

Предложена упрощенная модификация РСК для определения растворимых АГ ВЧ КРС. АГ готовят из лимфоузлов или селезенки КРС, коз и кроликов. Отмечено, что АГ, подверг­нутые замораживанию — оттаиванию или ультразвуковой обработке, или осаждению сульфа­том аммония или сульфатом натрия, более активны.

Гипериммунные сыворотки для идентификации вируса готовят по методу Скотта. Кровь берут от кроликов, иммунизированных лапинизированиым, авинизированным или ЛТ-вирусами. Такие сыворотки нужны для обнаружения испытуемого АГ в РСК. Положитель­ные сыворотки и соответствующие им контроли (нормальные сыворотки) получают на КРС в возрасте 12-18 мес. От них берут сыворотку до иммунизации (контрольная) и через 21 день после подкожной прививки 100 иммунизирующих доз (позитивная сыворотка). Такая сыворотка обычно в РН реагирует положительно в разведении 1:40 — 1:80. Полученную сы­воротку сохраняют при -20°С и используют в РСК и РН с испытуемым АГ в течение 4-
6 мес. Диагностическую сыворотку для РСК получают также от кроликов, инфицированных, а затем гипериммунизированных ВЧ КРС.

РДП.Реакцию ставят по методу Оухтерлони. Выявление преципитирующего АГ ВЧ в органах больного КРС является ценным диагностическим тестом, поскольку этот АГ регу­лярно появляется в лимфоузлах больных животных, начиная с 1-го дня повышения темпе­ратуры. На 3-й день болезни он выявляется лишь у 50% больных. РДП, как и РСК, дает бы­стрый ответ (через 12-18 ч). Оптимальный срок для взятия проб — период от 4-6 дн после начала лихорадки до появления поражений во рту и диареи. Если нет животного в этой ста­дии болезни, рекомендуют брать образцы от погибшего животного. Для исследования при­годен материал даже от разлагающихся в течение 52 ч трупов, в качестве антител исполь­зуют гипериммунные сыворотки кроликов и КРС.

Заведомо положительные и отрицательные АГ, приготовленные соответственно от больных и здоровых животных, используют в РДП одновременно. Положительную преципитирующую сыворотку получают от кроликов, иммунизированных инфицированными кро­личьими тканями. РСК, РДП, РН и РИГА являются специфичными и эффективными лабо­раторными методами выявления АГ и идентификации ВЧ КРС. Однако данные ученых показали, что аттенуированные штаммы ВЧ КРС в естественных условиях не сти­мулируют продуцирование преципитирующего антигена в тканях животных. Это может быть характерным признаком отличия вакцинного штамма от эпизоотического. В Иране в 1982 г. в зонах, где скот был вакцинирован, у привитых животных не обнаруживали образо­вание преципитирующего антигена. Поэтому в зонах систематической вакцинации скота против данной инфекции диагноз поставить сложно.

ВИЭОФ.Предложен вместо РДП для быстрой диагностики чумы КРС. В качестве ис­пытуемого АГ служит суспензия селезенки и лимфоузлов толстого кишечника КРС и овец, полученных во время вспышки болезни. ВИЭОФ проводят в 0,8%-ной агарозе на вероналовом буферном растворе с рН 8,6. Гипериммунную сыворотку помещают в лунки вблизи анода, исследуемый материал — вблизи катода. Пластины помещают в горизонтальную ван­ночку с охлажденным вероналовым буфером. Линии преципитации образуются через 45 мин при силе тока 6 мА. ВИЭОФ при обнаружении АГ в тканях павших животных он ока­зался в 4-16 раз чувствительнее РДП и позволяет получить результат в течение 40 мин.

РТГА.Разработана для экспресс-диагностики чумы КРС. Если исследуемый материал содержит вирус, анти-ГА связываются, а их отсутствие или нехватку можно потом выявить, исследуя сыворотку в РТГА с использованием гемагглютинина ВК. При отсутствии вируса в исследуемом материале количество АТ остается неизменным. В этой реакции используют родство АГ ВЧ КРС и ВК. Особую ценность она имеет для диагностики случаев заболева­ния, вызванных штаммами с ослабленной вирулентностью.

ИФ.В качестве исследуемого материала используют мазки-отпечатки и гистологиче­ские срезы (селезенка, лимфоузлы, печень, слизистые оболочки ротовой полости и кишеч­ника) из органов и тканей больных животных или инфицированные этими материалами культуры клеток. Возможно применение непрямого ИФ для обнаружения специфического АГ. Четкие результаты получают в случаях, если ФИТЦ-конъюгат изготовлен на основе гамма-глобулина, выделенного ионообменной хроматографией из специфической сыворот­ки. Прямая ИФ позволяет обнаруживать АГ в более ранние сроки: в мазках-отпечатках из органов больных животных через 2 ч, в зараженной культуре клеток — на 1 пассаж ранее по­явления ЦПД — т.е. раньше на 8-10 дн. С помощью прямой ИФ возможно оценивать результаты РН в культуре клеток через 24-48 ч после постановки опыта, тогда как для оцен­ки реакции по ЦПД вируса требуется 6-8 сут. Поэтому прямой метод ИФ признан высоко­специфичным, чувствительным и пригодным для экспресс-диагностики чумы КРС.

РНГАи РЗГА.Обе реакции позволяют дифференцировать сыворотки и АГ при исполь­зовании обработанных дубильной кислотой эритроцитов крови коз. Реакции основаны на адсорбции перекрестных АТ из сыворотки, которая используется в РТГА.

ИФА.ИФА позволяет быстро выявлять АГ ВЧ КРС в патматериале. Наиболее часто АГ выявляли в мазках из поражений слизистой ротовой полости и лимфоузлов. АГ ВЧ наибо­лее часто выявляли у КРС моложе
3 лет, а у буйволов — в более старшем возрасте. В РДП и ИФА результаты совпадали, но последний позволял получить результат через 2-3 ч. Успеш­но вирус определяли в назальных и глазных секретах через 4 дн несмотря на то, что он там содержался в количестве не более 1,75lg
ТЦД50/МЛ. ИФА оказался более чувствительным по сравнению с выделением ВЧ КРС. Получены компоненты набора для диагностики чу­мы КРС методом твердофазного ИФА, которые обеспечивают обнаружение вирусспецифического АГ (нуклеопротеина) ВЧ КРС в лизатах зараженных клеточных культур и пробах органов больных животных, а также обеспечивали обнаружение АТ в сыворотках больных и переболевших животных. Чувствительность ТФ ИФА при выявлении специфических анти­тел в сыворотках крови больных и иммунных животных (метод ингибирования) сравнима с чувствительностью РТНГА с использованием эритроцитарного диагностикума на основе монАТ к ВЧ КРС.

Серодиагностика и ретроспективная диагностика. Для обнаружения АТ используют РН, ВИЭОФ, РРГ и ЕLIЗА. Для серологического исследования берут кровь как можно раньше после установления клинических проявлений и повторно через 10-14 дн. Исследуют парные сыворотки крови не менее чем от 10 животных. ВНА и КСА у животных-реконвалесцентов обнаруживаются через 3-5 дн, поэтому чаще всего применяют РСК и РН. Ретроспективную диагностику чумы КРС проводят в очагах инфекции или при атипичном её течении на вакцинированном поголовье животных, имевших слабый поствакцинальный иммунитет. 4-кратное увеличение титра КСА и ВНА свидетельствует о наличии прошедшей инфекции.

Читайте также:  Помутнение роговицы при аденовирусной инфекции

РСК.Применяют чаще всего. На 3-4-й день после снижения температуры у животных обнаруживают КСА в титре от 1:10 до 1:40. На 21-30-й дн достигают максимума и удержи­ваются в течение 3 мес на уровне 1:80-1:160. Через 8 мес титр их составляет 1:20-1:40.

РН. Можно ставить на кроликах, имея лапинизированный штамм. Учитывая дорого­визну этого метода, его используют крайне редко. Реакция в культурах клеток с использова­нием адаптированных к ним штаммов — метод более простой и дешевый. Для выявления и титрования ВНА метод микротитрования не уступает пробирочному, но выгодно отличается от него меньшей чувствительностью к колебаниям дозы. Чтобы избежать цитотоксического и ингибирующего проявления, рекомендуется делать первоначальное разведение сыворотки 1:5. Количественную РН можно проводить в двух вариантах: 1) с постоянной дозой вируса (200-500 ТЦД50) и двукратно возрастающими разведениями сыворотки;
2) с постоянной до­зой сыворотки (разведение 1:5-1:10) и 10-кратными разведениями вируса 10 -1 -10 -6 .

РТГА.В качестве АГ в этой реакции используют вирус кори.

ЕLISА.Непрямой твердофазный микрометод позволяет обнаруживать АТ к ВЧ КРС. Данные его коррелируют с результатами РН. Считают, что указанный метод можно успешно применять для оценки эпизоотической ситуации и при проведении кампаний по вакцинации животных.

Проведена сравнительная оценка эффективности использования ИФ, ИФА и ВИЭОФ для выявления АТ против чумы КРС у телят, вакцинированных культуральной вирус-вакциной против чумы КРС. Исследования проведены с использованием первичных куль­тур бычьей почки, выращенных на покровных стеклах и инфицированных шт. К90 ВЧ КРС, или с использованием мазков-отпечатков ткани лимфоузлов КРС, зараженного шт. Гиссар. При применении ИФА мазки-отпечатки предварительно обрабатывали антипероксидазной сывороткой для удаления эндогенной пероксидазной активности клеток лимфоузлов. Уста­новлено, что в первые 7 нед после вакцинации у телят удавалось выявить АТ в 100% случа­ев всеми испытуемыми методами. В последующий период (с 8 до 12 нед после вакцинации) наиболее эффективным был метод ИФ (АТ выявлены у 84,6-100% телят). Менее чувстви­тельными в этот период были методы ИФА и ВИЭОФ (соответственно АТ обнаружены у 23-77,7 и 7,7-77,7% телят). Для определения АТ к ВЧ КРС в Индии успешно применяют ме­тод micrоЕLISА. Показаны преимущества конкурентного ЕЫЗА со специфическими монАТ над непрямым ЕLISА.

Реакция радиального гемолиза (РРГ).Рекомендована для обнаружения АТ к ВЧ КРС. В качестве АГ используют суспензию лимфоузлов от зараженных телят. Реакцию ста­вят на пластинках, куда вносят 2-4 мл 1%-ной агарозы с 0,3 мл конъюгированных с АГ ба­раньих эритроцитов, обработанных хлоридом хрома и 0,3 мл неразведенного комплемента.

Дифференциальная диагностика.Проводится по данным исследования вируссодержащего материала (гибридизационным тестом, биопробой, серологическими реакциями с видоспецифической сывороткой). В связи с тем, что в некоторых странах, в том числе и в европейских, чума КРС давно ликвидирована, при случайном заносе она может быть оши­бочно диагностирована как вирусная диарея или злокачественная катаральная горячка, что необходимо иметь в виду при дифференциальной диагностике чумы.

Не нашли то, что искали? Воспользуйтесь поиском:

источник

Доставка вакцин и сывороток осуществляется ТОЛЬКО в пределах Москвы в связи с особыми температурными условиями хранения и транспортировки.

Страницы: 3 (всего товаров — 61)

Форма выпуска: Упаковка 10 флаконов (10 доз) по 1 мл в каждом
Показания к применению: Для профилактики и лечения микроспории и трихофитии кошек
Единица измерения: Флакон

Форма выпуска: Упаковка 10 флаконов (10 доз) по 1 мл в каждом
Показания к применению: Профилактика и лечение дерматофитозов (трихофитии и микроспории) кошек, собак, пушных зверей и кроликов
Единица измерения: Флакон

Форма выпуска: Упаковка — 10 ампул по 10 доз в ампуле
Показания к применению: Профилактика миксоматоза и ВГБК кроликов
Единица измерения: 1 ампула (10 доз)

Наличие: ТОВАР ПОД ЗАКАЗ
звоните по тел. (495) 510-86-04; (495) 972-74-06

Форма выпуска: Флакон 100 мл (20 доз)
Показания к применению: Назначают телятам, ягнятам и поросятам в целях специфической профилактики энтерококковой инфекции в неблагополучных или угрожаемых по данному заболеванию хозяйствах и индивидуальном секторе
Единица измерения: Флакон

Наличие: ТОВАР ПОД ЗАКАЗ
звоните по тел. (495) 510-86-04; (495) 972-74-06

Форма выпуска: 1 ампула 50 доз
Показания к применению: Профилактическая иммунизация свиней против классической чумы
Единица измерения: Флакон

Наличие: ТОВАР ПОД ЗАКАЗ
звоните по тел. (495) 510-86-04; (495) 972-74-06

Форма выпуска: 1 флакон 100 доз
Показания к применению: Профилактическая иммунизация свиней против классической чумы
Единица измерения: Флакон

Наличие: ТОВАР ПОД ЗАКАЗ
звоните по тел. (495) 510-86-04; (495) 972-74-06

Форма выпуска: Однородная сухая пористая масса бежевого цвета для приготовления суспензии для инъекций. 10 доз — 1 флакон
Единица измерения: 10 доз

Наличие: ТОВАР ПОД ЗАКАЗ
звоните по тел. (495) 510-86-04; (495) 972-74-06

Форма выпуска: Упаковка 10 флаконов по 10 доз в каждом флаконе
Для кого предназначено: Крупного рогатого скота
Единица измерения: Упаковка

Наличие: ТОВАР ПОД ЗАКАЗ
звоните по тел. (495) 510-86-04; (495) 972-74-06

Форма выпуска: Флакон 100 мл
Для кого предназначено: для молодняка сельскохозяйственных животных и пушных зверей
Единица измерения: Флакон

Вакцина ПЛАР (инактивированная концентрированная против парвовирусной болезни, лептоспироза, болезни Ауески и РРС свиней), фл. 100 мл (50 доз)

Наличие: ТОВАР ПОД ЗАКАЗ
звоните по тел. (495) 510-86-04; (495) 972-74-06

Форма выпуска: Суспензия белого цвета. Флакон 100 мл содержит 50 доз вакцины
Показания к применению: Для активной иммунизации свиней против парвовирусной болезни, лептоспироза, болезни Ауески и репродуктивно-респираторного синдрома
Единица измерения: Флакон

Вакцина ПЛАХ (инактивированная концентрированная против парвовирусной болезни, лептоспироза, болезни Ауески и хламидиоза свиней), фл. 100 мл (50 доз)

Форма выпуска: Суспензия белого цвета. Флакон 100 мл содержит 50 доз вакцины
Показания к применению: Для специфической профилактики парвовирусной болезни свиней, лептоспироза, болезни Ауески и хламидиоза свиней
Единица измерения: Флакон

Наличие: ТОВАР ПОД ЗАКАЗ
звоните по тел. (495) 510-86-04; (495) 972-74-06

Форма выпуска: Флакон 25 доз
Показания к применению: Предназначена для профилактической иммунизации свиней, крупного рогатого скота и овец против болезни Ауески.
Единица измерения: Флакон

Наличие: ТОВАР ПОД ЗАКАЗ
звоните по тел. (495) 510-86-04; (495) 972-74-06

Форма выпуска: Флакон 10 доз
Показания к применению: Для профилактической иммунизации лошадей
Единица измерения: Флакон

Форма выпуска: Флакон 100 мл
Показания к применению: Для профилактической иммунизации сельскохозяйственных животных и пушных зверей против лептоспироза
Единица измерения: Флакон

Форма выпуска: Прозрачная бесцветная или слегка опалесцирующая жидкость от бесцветного до слегка желтоватого цвета, с серо-белым осадком на дне флакона. Упаковка 10 флаконов по 2 мл (10 доз)
Показания к применению: Назначают лошадям в неблагополучных по лептоспирозу хозяйствах, при выпасе животных в зоне природного очага лептоспироза, при выявлении в хозяйствах животных, сыворотка крови которых реагирует на лептоспироз в реакции микроагглютинации (РМА)
Единица измерения: 1 доза

Форма выпуска: Флакон 100 мл
Показания к применению: Для профилактической иммунизации свиней против лептоспироза
Единица измерения: Флакон

Форма выпуска: Сухая пористая масса бледно-желтого или слегка розоватого цвета. Выпускают во флаконах по 4 дозы
Показания к применению: Назначают лошадям в целях специфической профилактики ринопневмонии
Единица измерения: Флакон 4 дозы

Наличие: ТОВАР ПОД ЗАКАЗ
звоните по тел. (495) 510-86-04; (495) 972-74-06

Форма выпуска: В упаковке 10 флаконов (100 доз). В одном флаконе 10 доз
Показания к применению: Профилактическая и вынужденная вакцинация против рожи свиней
Единица измерения: Упаковка

Наличие: ТОВАР ПОД ЗАКАЗ
звоните по тел. (495) 510-86-04; (495) 972-74-06

Форма выпуска: Флакон 10 доз
Показания к применению: Профилактическая и вынужденная вакцинация против рожи свиней
Единица измерения: Флакон

Наличие: ТОВАР ПОД ЗАКАЗ
звоните по тел. (495) 510-86-04; (495) 972-74-06

Форма выпуска: Флакон 15 доз
Показания к применению: Профилактическая и вынужденная вакцинация против рожи свиней
Единица измерения: Флакон

Наличие: ТОВАР ПОД ЗАКАЗ
звоните по тел. (495) 510-86-04; (495) 972-74-06

Форма выпуска: Флакон 20 доз
Показания к применению: Профилактическая и вынужденная вакцинация против рожи свиней
Единица измерения: Флакон

Форма выпуска: Вакцина состоит из двух компонентных систем: первая Вангард DA2Pi — представляет собой лиофильно высушенную пористую массу бежевого цвета; вторая Вангард CPV-L — представляет собой прозрачную жидкость светло-розового цвета. Каждую компонентную систему вакцины расфасовывают по 1 дозе в стеклянных флаконах
Показания к применению: Назначают щенкам и взрослым собакам в целях специфической профилактики чумы плотоядных и инфекционного гепатита, аденовироза, парагриппа, парвовирусного энтерита и лептоспироза
Единица измерения: 1 доза

Форма выпуска: Вакцина состоит из двух компонентов: сухой компонент представляет собой однородную лиофильно высушенную пористую массу желто-белого цвета, жидкий – гомогенную взвесь светло-розового цвета. Компоненты вакцины расфасованы по 1 дозе в стерильные стеклянные или пластиковые флаконы
Показания к применению: Назначают щенкам и взрослым собакам для профилактики чумы, инфекционного гепатита, аденовирусной и коронавирусной инфекции, парагриппа плотоядных, парвовирусного энтерита и лептоспироза
Единица измерения: 1 доза

Форма выпуска: Вакцина состоит из жидкого компонента расфасованной в ампулы по одной дозе (2, 2 мл), представляющей собой гомогенную суспензию розового цвета и сухого компонента расфасованного в ампулы по одной дозе, представляющей собой сухую пористую массу светло-желтого цвета с розовым оттенком.
Показания к применению: Профилактика болезней собак: чумы плотоядных, инфекционного гепатита, аденовироза, парвовирусного энтерита и лептоспироза
Единица измерения: Упаковка

Форма выпуска: Флакон 1 мл (1 доза)
Показания к применению: Назначают для профилактики бешенства у собак и кошек
Единица измерения: 1 доза

Форма выпуска: Вакцина состоит из 2 компонентов. Жидкой инактивированной вакцины Пентавак, используемой в качестве растворителя, фасуют в ампулы по 2, 2 мл (1 доза). Сухой Дивак, фасуют в ампулы, заполненные инертным газом.
Показания к применению: Профилактика болезней собак: бешенства, чумы плотоядных, парвовирусного энтерита, инфекционного гепатита, аденовироза и лептоспироза
Единица измерения: Упаковка

Форма выпуска: Вакцина состоит из двух компонентов, которые смешиваются в момент применения: лиофилизат для приготовления суспензии для инъекций (живая вакцина) – сухая однородная пористая масса кремового цвета;
жидкий компонент (инактивированная вакцина) – суспензия от кремового до светло-желтого цвета.
1 доза — 2 флакона по 1 мл.

Показания к применению: Профилактика чумы, инфекционного гепатита, аденовирусной инфекции, парагриппа, парвовирусного энтерита и лептоспироза собак
Единица измерения: доза

КОМБОВАК Вакцина против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи, респираторно-синцитиальной, рота- и коронавирусной болезни телят, фл. 100 мл

Наличие: ТОВАР ПОД ЗАКАЗ
звоните по тел. (495) 510-86-04; (495) 972-74-06

Форма выпуска: Флакон 100 мл (50 доз)
Показания к применению: Применяют для иммунизации коров и телят в хозяйствах, неблагополучных по желудочно-кишечным и респираторным болезням новорожденных телят
Единица измерения: Флакон

Форма выпуска: Упаковка — 4 ампулы по 1 дозе в каждой
Для кого предназначено: Для собак, кошек, пушных зверей, кроликов и нутрий
Показания к применению: Вакцина для лечения и профилактики трихофитии и микроспории
Единица измерения: Упаковка

МУЛЬТИКАН 4 Вакцина против чумы, аденовирусных инфекций, парвовирусного и коронавирусного энтеритов собак, 2 фл. (1 доза)

Форма выпуска: 1 доза — 2 флакона
Показания к применению: Против чумы, парвовирусного энтерита, аденовирусных и коронавирусных энтеритов собак
Единица измерения: 1 доза

Товары для животных:

Разделы каталога:

Подпишись на новости
ветаптеки VETLEK!

источник

инактивированная бивалентная вакцина против вирусной диареи и аденовирусной инфекции крупного рогатого скота и способ профилактики вирусной диареи и аденовирусной инфекции крупного рогатого скота

Группа изобретений относится к области ветеринарной вирусологии и биотехнологии. Вакцина включает антиген аденовируса первого серотипа В-10, инактивант, адъювант концентрированный ПЭГ-6000 в конечной концентрации 10%. Дополнительно вакцина содержит антиген вируса вирусной диареи «Оригон», концентрированный 8-9% ПЭГ-6000 в растворе 0,5-0,6 М NaCl. В качестве инактиванта вакцина содержит афицинальный формалин, а в качестве адъюванта афицинальную ГОА, при этом компоненты входят в состав вакцины в следующем соотношении (об.%): антиген аденовируса первого типа В-10 с инфекционным титром 6-7 lg ТЦД 50 /мл, концентрированный 5 раз ПЭГ-6000 в растворе 0,5-0,6 М NaCl — 30-37, антиген вируса вирусной диареи штамма «Оригон» с инфекционным титром 7-8 lg ТЦД 50 /мл, концентрированный 5 раз ПЭГ-6000 в растворе 0,5-0,6 М NaCl — 30-37, формалин 40% — 0,5-0,8, ГОА афицинальная 6,0% остальное. Вакцину вводят телятам внутримышечно двукратно с интервалом 13-16 дней в дозе 1,0 мл. Вакцина имеет высокую профилактическую активность. 4 табл.

Предлагаемое изобретение относится к области ветеринарной вирусологии и биотехнологии, в частности к получению инактивированных вакцин против респираторно-кишечной патологии крупного рогатого скота, вызываемой вирусами адено- и вирусной диареи.

Вирусная диарея и аденовирусная инфекция крупного рогатого скота — остро протекающие, контагиозные вирусные болезни, главным образом, телят, характеризующиеся поражением органов респираторно-кишечного тракта. Болезни регистрируются во всех странах мира, в том числе и в России. Вирусы вызывают заболевания у крупного рогатого скота, поражая от 40-60 % животных и обуславливая в 20-30 % случаев вспышки респираторно-кишечных болезней. Как правило, данные вирусы вызывают заболевания в ассоциации в 80-85 % случаях, при этом смертность телят достигает 27-30 % (1).

Известна вакцина для профилактики аденовирусной инфекции крупного рогатого скота, включающая антигены аденовируса КРС штамм В-10, который инактивировали димером этиленимином (ДЭИ) в конечной концентрации 0,1 % и в качестве адъюванта использовали аэросил (2).

Известны также вакцины для специфической профилактики вирусной диареи, включающие антигены вируса диареи КРС штаммы Оригон, С-24 V, Нью-Йорк, которые инактивировали формалином и в качестве адъюванта была использована гидроокись алюминия (3).

Вакцины обладают высокой эффективностью, однако они имеют ряд недостатков. Так, например, вакцины применяют раздельно, что связано с огромными затратами труда ветеринарных специалистов, многократным беспокойством животных, созданием у них стрессового состояния, что неблагоприятно отражается на иммунологической реактивности животных к прививке.

В задачу наших исследований входит получить вакцину, обеспечивающую создание длительного напряженного иммунитета в организме животного против аденовирусной инфекции и вирусной диареи КРС и не обладающую реактогенными свойствами.

Поставленная задача достигается тем, что инактивированная бивалентная вакцина против вирусной диареи и аденовирусной инфекции крупного рогатого скота включает в себя антигены аденовируса первого серотипа В-10 с инфекционным титром 6-7 lg ТЦД 50 /мл, штамма «Оригон» вируса вирусной диареи с инфекционным титром 17-8 lg ТЦД 50 /мл, инактивированных формалином, концентрированных в 5 раз полиэтиленгликолем 6000 и депонированных на гидроокиси алюминия при следующем соотношении компонентов (об. %):

Классы МПК: A61K39/295 поливалентные вирусные антигены; смеси вирусных и бактериальных антигенов
A61P31/12 противовирусные средства
Автор(ы): Белоусова Раиса Васильевна (RU) , Лобова Татьяна Петровна (RU) , Третьякова Ирина Владимировна (RU) , Вазир Ясер (RU)
Патентообладатель(и): Белоусова Раиса Васильевна (RU)
Приоритеты:
антиген аденовируса КРС первого
типа В-10 с инфекционным титром
6-7 lg ТЦД 50 /мл концентрированный в 5 раз;
10 % ПЭГ- 6000 в растворе 0,5-0,6 М NaCI 30-37
антиген вируса вирусной диареи КРС штамма «Оригон»
с инфекционным титром 7-8 lg. ТЦД 50 /мл;
концентрированный в 5 раз 8-9 % ПЭГ-6000
в растворе 0,5-0,6 М NaCI 30-37
формалин 40% 0,5-0,8
гидроокись алюминия афицинальная 6,0 % остальное.

Для приготовления инактивированной бивалентной вакцины против вирусной диареи и аденовирусной инфекции крупного рогатого скота берут вируссодержащий материал аденовируса первого серотипа В-10 с инфекционным титром 6-7 lg ТЦД 50 /мл (Тканевых Цитопатических Доз), полученную вируссодержащую суспензию инактивируют формалином в конечной концентрации 0,2-0,3 % и концентрируют в 5 раз исходного объема полиэтиленгликолем 6000 в конечной концентрации 10,0 %. Далее берут антиген вируса вирусной диареи КРС штамм «Оригон», полученный из вируссодержащей суспензии с инфекционным титром 7-8 lg ТЦД 50 /мл, инактивируют формалином 0,2-0,3 % конечной концентрации при температуре 37-38°С в течение 72 часов при рН 7,2-7,4. Полученные антигены концентрируют полиэтиленгликолем (ПЭГ 6000) в конечной концентрации 8 % и ресуспендируют в 0,5-0,6 М NaCl, затем антигены смешивают в равных объёмах 1:1 и добавляют официнальный адъювант 6 % ГОА до 2-3 % конечной концентрации в полученной вакцине.

Конкретные примеры приготовления вакцины отражены в табл.1.

Для определения безвредности вакцины использовали два вида лабораторных животных — белых мышей весом 15-18 г и кроликов весом 2,5 кг. Вакцину вводили внутримышечно однократно в дозе 0,2 и 1 мл соответственно. В течение 10-дневного наблюдения вакцинированные животные оставались живыми, на месте введения вакцины не образовывалось некроза тканей. Таким образом, вакцина предложенного состава полностью безвредна для животных, данные представлены в таблице 3.

Испытание эффективности вакцины с различными соотношениями компонентов проводили на лабораторных крысах. Вакцину в указанных в табл. 1. концентрациях вводили животным двукратно с интервалом 14 дней, внутримышечно в дозе 0,2 мл. Формировали пять опытных групп. Вакцину каждой концентрации вводили 5-ти крысам. Первой группе вводили с минимальными значениями компонентов, второй группе — оптимальное, третьей — максимальное, четвертой меньше минимального и пятой — больше максимального.

Кровь для определения уровня специфических антител брали из сердца до иммунизации (фон) и через две недели после последней вакцинации. Титр специфических антител определяли в реакции нейтрализации на культуре клеток (РН). При этом уровни специфических антител при оптимальной и максимальной концентрациях компонентов существенно не отличались, а дальнейшее увеличение концентрации компонентов не приводило к увеличению уровней специфических антител. Использование для иммунизации вакцины в дозах меньше минимальных оказалось неэффективным, так как не вызывало выработку антител в титрах, обеспечивающих защиту против этих инфекций.(табл. 1)

Уровень специфических антител в сыворотке крови иммунизированных животных представлен в табл. 2 ( минимальное, оптимальное и максимальное).

Способ профилактики аденовирусной инфекции и вирусной диареи КРС с помощью предложенной вакцины заключается в следующем.

Иммунизацию крупного рогатого скота проводили по следующей схеме.

Три группы клинически здоровых телят, не содержащих в сыворотке крови специфических антител (по 5 голов в группе, всего 15 животных). Животным первой группы вводили инактивированную бивалентную вакцину против вирусной диареи и аденовирусной инфекции крупного рогатого скота внутримышечно дважды с интервалом 14 дней по 1 мл. Животным второй и третьей группы вводили в соответствии с утвержденными наставлениями по применению коммерческие моновакцины против аденовируса и вируса вирусной диареи внутримышечно по 10 мл двукратно с интервалом 14 дней. Через 14 дней после второй иммунизации от всех животных брали пробы крови из яремной вены в количестве 5-8 мл. Результаты представлены в табл. 3.

Активность вакцин по уровню антител в сыворотке крови телят к аденовирусу и вирусу ВД КРС представлены в табл. 4.

Таким образом, в крови животных иммунизированных предложенной вакциной, отмечался не только более высокий уровень специфических антител к вирусу вирусной диареи и аденовирусу крупного рогатого скота, но и удалось уменьшить дозу вакцины в десять раза, что, в свою очередь, обеспечивало защиту животных сразу против двух инфекций с меньшими трудозатратами.

Предложенную вакцину вводят животным внутримышечное двукратно с интервалом 13-16 дней в дозе 1 мл.

Высокая профилактическая активность предложенной вакцины по сравнению с известными вакцинами того же назначения была подтверждена испытаниями, проведенными в условиях животноводческих хозяйств, и обеспечивает длительный (не менее б месяцев) напряженный иммунитет, не обладает реактогенными свойствами.

Вакцина апробирована нами с положительным результатом с 2004-2007 гг. на кафедре ветеринарной вирусологии московской государственной академии ветеринарной медицины и биотехнологии им К. И Скрябина и хозяйстве «ООО Аграрное» Орехово-Зуевского района.

Полученная вакцина позволит снизить экономический ущерб, причиняемый данными вирусами животноводству Российской Федерации, и найдет применение в неблагополучных хозяйствах.

1. Автореф. дисс. к.в.н. Курбанбекова З.Д. Эпизоотическая ситуация по респираторно-кишечным болезням молодняка крупного и мелкого рогатого скота в центральных районах Таджикистана. М.: — 2007 гг.- с. 9.

2. Дисс. к.б.н. Литвинов О.Б. Экспериментальные исследования по разработке инактивированной вакцины против аденовирусной инфекции крупного рогатого скота. М.: — 1984 гг.- с.39.

3. Книга. Сюрин В.Н. Вирусные болезни животных. М.-ВНИТИБП.-1998 гг.- с.139.

ТАБЛИЦА 1 Антигенная активность инактивированной бивалентной вакцины против вирусной диареи и аденовирусной инфекции крупного рогатого скота
показатели Изготовление вакцины
С минимальными значениями параметров С оптимальными значениями параметров С максимальными значениями Со значениями параметров
Ниже мини-альных Выше максимальных
штамм «Оригон» вируса вирусной диареи с инфекционным титром 7 lg ТЦД 50 /мл 7,75 lg ТЦД 50 /мл 8 lg ТЦД 50 /мл 6 lg ТЦД 50 /МЛ 8,5 lg ТЦД 50 /мл
инактивацию проводят формалином концентрации 0,2 %при температуре 0,2% 0,25% 0,3% 0,1% 0,35%
37°С 37,5°С 38°С 36°С 38°С
полученный антиген штамма «Оригон» концентрируют полиэтиленгликолем в растворе 0,5-0,6 М NaCl 8% 8,5% 9% 7,5% 9,5%
0,5 М 0,55 М 0,6 М 0,4 М 0,7 М
адъювант ГОА в концентрации до 2% до 2,5% до 3% до 1,5% до 3,5%
Стабильность вакцины при хранении Не менее 12 месяцев Не менее 12 месяцев Не менее 12 месяцев Менее 12 месяцев Не менее 12 месяцев
Антигенная активность вакцины. Титр антител
1:64-1:128
Титр антител
1: 1024-1:4096
Титр антител
1: 1024-1:4096
Титр антител
1:16-1:32
Титр антител
1:32-1:128
Безвредность. безвредная безвредная безвредная безвредная безвредная
Стерильность. стерильная стерильная стерильная стерильная стерильная
Иммуногенность 85-90% 85-90% 85-90% 60% 74%

Таблица 2 Уровень специфических антител в сыворотке крови иммунизированных крыc
Бивалентная вакцина против аденовирусной инфекции и вирусной диареи КРС Титры антител при иммунизации
1 группа, доза 0,1 мл 2 группа, доза 0,2 мл 3 группа, доза 0,4 мл
фон 21сут после последней иммунизации фон 21 сут после последней иммунизации фон 21 сут после последней иммунизации
К аденовирусу 1:64 1:256 1:512
К вирусу диареи КРС 1:32 1:256 1:256

Таблица 3
Исследование предложенной вакцины на безвредность
Наименование вакцины Кол-во животных Дни наблюдения (гибель животных)
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Инактивированная Бивалентная вакцина против вирусной диареи и аденовирусной инфекции крупного рогатого скота Белые мыши и крысы
Минимальная концентрация 5
Оптимальная концентрация 5
Максимальная концентрация 5

Таблица 4 Исследование антителообразования в сыворотке крови телят
Вид антигена Уровень специфических антител при иммунизации
предложенная Протатипы (моновакцины)
Вакцина против аденовирусной инфекции КРС Вакцина против вирусной диареи КРС
фон После иммуниза
ции
фон После иммунизации фон После иммунизации
Аденовирус 1:512 1:128
Вирус вирусной диареи 1:256 1:128

1. Инактивированная бивалентная вакцина против вирусной диареи и аденовирусной инфекции крупного рогатого скота, включающая антиген аденовируса первого серотипа В-10, инактивант, адъювант концентрированный ПЭГ-6000 в конечной концентрации 10%, отличающаяся тем, что вакцина дополнительно содержит антиген вируса вирусной диареи «Оригон», концентрированный 8-9% ПЭГ-6000 в растворе 0,5-0,6 М NaCl, в качестве инактиванта — афицинальный формалин, а в качестве адъюванта — афицинальная ГОА, при этом компоненты входят в состав вакцины в следующем соотношении, об.%:

антиген аденовируса первого типа В-10 с
инфекционным титром 6-7 lg ТЦД 50 /мл,
концентрированный 5 раз ПЭГ-6000
в растворе 0,5-0,6 М NaCl 30-37
антиген вируса вирусной диареи штамма «Оригон»
с инфекционным титром 7-8 lg ТЦД 50 /мл,
концентрированный 5 раз ПЭГ-6000 в растворе
0,5-0,6 M NaCl 30-37
афицинальный формалин 0,5-0,8
ГОА афицинальная остальное

2. Способ профилактики аденовирусной инфекции и вирусной диареи КРС, включающий введение вакцины, охарактеризованной в п.1, которую вводят телятам внутримышечно двукратно с интервалом 13-16 дней в дозе 1,0 мл.

источник